一種熱敏脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明提供了一種熱敏脂質(zhì)體，所述熱敏脂質(zhì)體包括化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂，所述光敏劑為吲哚菁綠或二氫卟吩e6，所述熱敏脂質(zhì)體的粒徑為40～60nm。所述熱敏脂質(zhì)體通過(guò)活體熒光成像可以實(shí)時(shí)觀察熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布過(guò)程，在近紅外光照射條件下，能夠快速有效地釋放化療藥物，使化療藥物很好地在靶部位富集，得到的熱敏脂質(zhì)體顆粒粒徑為100nm以下，粒徑較小，熱敏脂質(zhì)體的生物相容性良好；本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體的制備方法簡(jiǎn)單易操作。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種熱敏脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及一種熱敏脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]熱敏脂質(zhì)體是一種給藥系統(tǒng)的新劑型。在正常體溫下，藥物很難透過(guò)脂質(zhì)體膜而擴(kuò)散出來(lái)，而當(dāng)熱敏脂質(zhì)體隨血液循環(huán)經(jīng)過(guò)被加熱的靶部位時(shí)，局部的高溫可促使藥物在靶部位釋放并形成較高的藥物濃度；目前，熱敏脂質(zhì)體中的光敏劑一般為單壁或多壁碳納米管、石墨烯、納米金等材料，但這些熱敏脂質(zhì)體存在以下問(wèn)題:
[0003](I)熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布狀況以及在靶部位的富集狀況不清楚，難以控制靶部位的加熱時(shí)間，導(dǎo)致熱敏脂質(zhì)體的治療效果不好；(2)由于碳納米管等不溶于水和有機(jī)溶劑，且在溶液中易聚集成束，制備出的熱敏脂質(zhì)體的粒徑一般為100~200nm，粒徑較大，且粒徑均一性不好，不利于藥物通過(guò)增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)(EPR效應(yīng))進(jìn)行高效治療；(3)碳納米管、石墨烯以及納米金等材料的生物相容性不好，對(duì)生物體有一定毒害作用。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種熱敏脂質(zhì)體及其制備方法和應(yīng)用。所述熱敏脂質(zhì)體可以通過(guò)活體熒光成像實(shí)時(shí)觀察熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布過(guò)程，在近紅外光照射條件下，能夠快速有效地釋放化療藥物，使化療藥物很好地在靶部位富集，得到的熱敏脂質(zhì)體顆粒粒徑為IOOnm以下，粒徑較小，同時(shí)，熱敏脂質(zhì)體的生物相容性良好；本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體的制備方法簡(jiǎn)單易操作。
[0005]第一方面，本發(fā)明提供了一種熱敏脂質(zhì)體，所述熱敏脂質(zhì)體包括化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂，所述光敏劑為吲哚菁綠(ICG)或二氫卟吩e6，所述熱敏脂質(zhì)體的粒徑為40~60nm。
[0006]所述磷脂酰膽堿形成磷脂雙分子層，所述光敏劑和化療藥物被所述磷脂雙分子層包裹，所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂穿插于所述磷脂雙分子層中。
[0007]優(yōu)選地，所述化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂的質(zhì)量比為1:(I ~4):(25 ~35):(1 ~5)。
[0008]優(yōu)選地，所述化療藥物為鹽酸阿霉素(D0X)、表阿霉素、紫杉醇、去甲長(zhǎng)春花堿或順鉬。
[0009]更優(yōu)選地，所述化療藥物為鹽酸阿霉素且所述光敏劑為吲哚菁綠。
[0010]生物體對(duì)650~900nm范圍的近紅外光具有高度透過(guò)性，而吲哚菁綠和二氫卟吩e6在此范圍內(nèi)具有高吸收的特性，然后進(jìn)行光熱轉(zhuǎn)換，使熱敏脂質(zhì)體溫度升高，在達(dá)到磷脂酰膽堿的相變溫度時(shí)，導(dǎo)致脂質(zhì)體的流動(dòng)性和通透性大大增加，釋放化療藥物，大大提高了化療藥物在靶部位上的富集和對(duì)靶細(xì)胞的殺傷力。同時(shí)哚菁綠和二氫卟吩e6可實(shí)現(xiàn)活體熒光成像，能夠?qū)崦糁|(zhì)體在生物體內(nèi)的分布進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，有助于了解熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)靶部位的富集量和在其他器官的生物分布，提高熱敏脂質(zhì)體的治療效果；所述光敏劑可以被磷脂酰膽堿形成的磷脂雙分子層包裹，形成粒徑較小且粒徑均一的熱敏脂質(zhì)體；同時(shí)，吲哚菁綠(ICG)和二氫卟吩e6生物相容性較好。
[0011]優(yōu)選地，所述磷脂酰膽堿為1，2- 二硬脂酰-Sn-甘油磷酸(DSPC)、1，2_ 二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿(DMPC)、1，2- 二月桂?；?sn-甘油基_3_磷酸膽堿(DLPC)和1，2-二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿(DPPC)中的至少一種。所述磷脂酰膽堿為熱敏材料，當(dāng)環(huán)境溫度低于熱敏材料的相變溫度時(shí)，磷脂酰膽堿形成的磷脂雙分子層呈凝膠態(tài)，流動(dòng)性和通透性均較小，當(dāng)熱敏材料受熱達(dá)到相變溫度時(shí)，磷脂分子運(yùn)動(dòng)加強(qiáng)，如:翻轉(zhuǎn)、移動(dòng)、擺動(dòng)等，此時(shí)，相鄰的磷脂分子之間距離增加，磷脂雙分子層的厚度減小，這種結(jié)構(gòu)的變化導(dǎo)致脂質(zhì)體的流動(dòng)性和通透性大大增加，短時(shí)間內(nèi)釋放被磷脂雙分子層包裹的化療藥物，所述熱敏脂質(zhì)體對(duì)化療藥物的控制釋放能力好。同時(shí)所述磷脂酰膽堿具有良好的生物相容性。
[0012]優(yōu)選地，所述聚乙二醇衍生化磷脂為聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG)和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來(lái)酰亞胺(DSPE-PEG-MAL)中的至少一種。聚乙二醇作為一種親水性極性分子，避免了免疫系統(tǒng)對(duì)其識(shí)別，減少單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)攝取，本發(fā)明所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂穿插于所述磷脂雙分子層，所述聚乙二醇衍生化磷脂中的聚乙二醇形成親水性外層，顯著延長(zhǎng)了脂質(zhì)體在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，進(jìn)而借助增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)(EPR效應(yīng))富集到腫瘤組織中，有助于實(shí)現(xiàn)腫瘤的被動(dòng)靶向，從而增強(qiáng)藥物的生物利用率。同時(shí)，本發(fā)明具有聚乙二醇的親水保護(hù)層，能夠避免熱敏脂質(zhì)體的聚集，可以提高熱敏脂質(zhì)體在儲(chǔ)存期內(nèi)的穩(wěn)定性；制備出的熱敏脂質(zhì)體顆粒均一、尺寸穩(wěn)定性好。
[0013]現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)熱敏脂質(zhì)體進(jìn)入體內(nèi)后的分布狀態(tài)很難得知，導(dǎo)致對(duì)靶部位的加熱時(shí)間難以確定，如果加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，容易對(duì)正常組織造成損傷，如果加熱時(shí)間過(guò)短，導(dǎo)致治療效果不好。
[0014]吲哚菁綠或二氫卟吩e6具有光學(xué)成像性質(zhì)和強(qiáng)光熱轉(zhuǎn)換特性，當(dāng)所述熱敏脂質(zhì)體應(yīng)用于治療時(shí)，可以在給予熱敏脂質(zhì)體之前和/或期間和/或之后，對(duì)靶部位進(jìn)行紅外光照射，根據(jù)熱敏脂質(zhì)體的熒光成像圖像，可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熱敏脂質(zhì)體在生物體內(nèi)的分布狀態(tài)，有利于了解熱敏脂質(zhì)體在靶部位中的富集狀態(tài)和作用機(jī)制，同時(shí)根據(jù)光學(xué)成像的信息，可以更加容易地選擇最佳加熱時(shí)間，使熱敏脂質(zhì)體達(dá)到更好的治療效果；同時(shí)吲哚菁綠或二氫卟吩e6在近紅外光照射下產(chǎn)熱，導(dǎo)致熱敏材料發(fā)生相變，使熱敏脂質(zhì)體在靶部位定位釋放藥物，從而達(dá)到靶向治療的作用；本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體物理化學(xué)穩(wěn)定性良好，熱敏脂質(zhì)體的粒徑較小且粒徑均一，使熱敏脂質(zhì)體更易滯留在靶部位中，有利于藥物有效地到達(dá)靶部位中釋放藥物并進(jìn)行高效治療；同時(shí)熱敏脂質(zhì)體的生物相容性良好，副作用小。
[0015]所述化療藥物為鹽酸阿霉素且所述光敏劑為吲哚菁綠。所述吲哚菁綠在近紅外光照射下，具有強(qiáng)的光熱轉(zhuǎn)換性質(zhì)，同時(shí)具有良好的熒光成像作用，吲哚菁綠是唯一一種被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)的用于人類(lèi)醫(yī)學(xué)成像和診斷的試劑，生物相容性較好，將所述吲哚菁綠作為光敏劑應(yīng)用在熱敏脂質(zhì)體中一方面可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布狀況以及在靶部位的富集狀況，另一方面可以起到定位釋放化療藥物，起到治療的作用，同時(shí)，吲哚菁綠熒光成像的作用有助于更好的確定近紅外光照射時(shí)間等因素，進(jìn)一步提高治療效果；Π引哚菁綠和鹽酸阿霉素為水溶性，可以被磷脂雙分子層親水腔包裹，不易團(tuán)聚，形成的熱敏脂質(zhì)體粒徑較小且粒徑均一，得到的熱敏脂質(zhì)體生物相容性良好。
[0016]第二方面，本發(fā)明提供了一種熱敏脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟:
[0017](I)將磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂按質(zhì)量比為25~35:1~5的比例溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后，得到磷脂薄膜，再將所述磷脂薄膜溶解得到磷脂溶液；
[0018](2)將光敏劑和化療藥物按質(zhì)量比為I~4:1的比例溶解后滴加至所述磷脂溶液中并超聲5~lOmin，然后超濾3~5次，得到所述熱敏脂質(zhì)體，所述熱敏脂質(zhì)體包括化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂，所述光敏劑為吲哚菁綠或二氫卟吩e6，所述熱敏脂質(zhì)體的粒徑為40~60nm。
[0019]優(yōu)選地，所述步驟(1)的磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂溶解于乙醇和水的混合溶液中。
[0020]優(yōu)選地，所述步驟(2)的光敏劑和化療藥物溶解于超純水、磷酸鹽緩沖溶液、乙腈、氯仿或乙醇和水的混合溶液中。
[0021]磷脂酰膽堿分子包括親水性頭部和兩個(gè)疏水性尾部，當(dāng)磷脂處于水性環(huán)境時(shí)，親水性頭部聚集成線性構(gòu)型，而它們的疏水性尾部平行地排列。由于疏水性尾部試圖避開(kāi)水性環(huán)境，第二列磷脂分子與第一列磷脂分子尾部對(duì)尾部進(jìn)行排列，為了最大程度地避免與水性環(huán)境接觸，同時(shí)使表面積與體積之比最小從而達(dá)到最小能量構(gòu)型，兩列磷脂聚集成球(形成磷脂雙分子層)，磷脂雙分子層包裹光敏劑和化療藥物；所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂通過(guò)物理作用和所述磷脂層中的磷脂分子結(jié)合從而穿插于所述磷脂層，進(jìn)行超聲分散后，使熱敏脂質(zhì)體的粒徑更小，最后通過(guò)超濾，得到熱敏脂質(zhì)體。
[0022]本發(fā)明根據(jù)化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂的性質(zhì)，將這些物質(zhì)溶解后，化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂通過(guò)自組裝過(guò)程形成所述熱敏脂質(zhì)體，不需要進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，制備過(guò)程環(huán)保無(wú)毒，制備方法簡(jiǎn)單易操作，制備出的熱敏脂質(zhì)體(表示為D1-NPs)的粒徑較小且粒徑均一。
[0023]第三方面，以上所述的熱敏脂質(zhì)體在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0024]當(dāng)所述熱敏脂質(zhì)體應(yīng)用于腫瘤藥物時(shí)，可以給予熱敏脂質(zhì)體之前和/或期間和/或之后，進(jìn)行紅外光照射，可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布以及在腫瘤部位的富集數(shù)量，確定最佳紅外光照射時(shí)間，使熱敏脂質(zhì)體溫度升高，選擇在腫瘤部位釋放化療藥物，從而使化療藥物很好地在腫瘤部位富集，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的有效抑制和治療；提高化療藥物的利用率，降低化療藥物毒副作用。本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體物理化學(xué)穩(wěn)定性良好，熱敏脂質(zhì)體的粒徑較小且粒徑均一，可以借助增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)(EPR效應(yīng))富集到腫瘤組織中，有助于實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的被動(dòng)靶向。
[0025]綜上，本發(fā)明有益效果包括以下幾個(gè)方面:
[0026]1、本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體具有優(yōu)良的溫度敏感效果，能夠高效的控制藥物釋放；
[0027]2、所述熱敏脂質(zhì)體可實(shí)現(xiàn)活體成像，能夠?qū)崦糁|(zhì)體的生物分布進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)；
[0028]3、所述熱敏脂質(zhì)體生物相容性好，減小化療藥物的毒副作用；
[0029]4、本發(fā)明制備方法簡(jiǎn)單，成本低，易實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】[0030]圖1為實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體的TEM圖像；
[0031]圖2為實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體在43°C條件下發(fā)生結(jié)構(gòu)崩解的TEM圖像；
[0032]圖3為實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體的粒徑分布圖；
[0033]圖4為對(duì)比實(shí)施例1制備的空白脂質(zhì)體的粒徑分布圖；
[0034]圖5為實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體在不同溫度下化療藥物的釋放曲線；
[0035]圖6為實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體在加/不加近紅外光照射條件下的化療藥物釋放曲線。
[0036]圖7為對(duì)比實(shí)施例1制備的空白脂質(zhì)體在不同ICG濃度下對(duì)MCF-7/ADR細(xì)胞存活率的影響；
[0037]圖8為實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體與單獨(dú)DOX藥物在不同DOX濃度下對(duì)MCF-7/ADR細(xì)胞存活率的影響。
【具體實(shí)施方式】[0038]以下所述是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤(rùn)飾，這些改進(jìn)和潤(rùn)飾也視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0039]第一方面，本發(fā)明提供了一種熱敏脂質(zhì)體，所述熱敏脂質(zhì)體包括化療藥物、光敏齊?、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂，所述光敏劑為吲哚菁綠或二氫卟吩e6，所述熱敏脂質(zhì)體的粒徑為40~60nm。
[0040]所述磷脂酰膽堿形成磷脂雙分子層，所述光敏劑和化療藥物被所述磷脂雙分子層包裹，所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂穿插于所述磷脂雙分子層中。
[0041]所述化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂的質(zhì)量比為1:(1~
4):(25 ~35):(1 ~5)。
[0042]所述化療藥物為鹽酸阿霉素(D0X)、表阿霉素、紫杉醇、去甲長(zhǎng)春花堿或順鉬。
[0043]生物體對(duì)650~900nm范圍的近紅外光具有高度透過(guò)性，而吲哚菁綠和二氫卟吩e6在此范圍內(nèi)具有高吸收的特性，然后進(jìn)行光熱轉(zhuǎn)換，使熱敏脂質(zhì)體溫度升高，在達(dá)到磷脂酰膽堿的相變溫度時(shí)，導(dǎo)致脂質(zhì)體的流動(dòng)性和通透性大大增加，釋放化療藥物，大大提高了化療藥物在靶部位上的富集和對(duì)靶細(xì)胞的殺傷力。同時(shí)哚菁綠和二氫卟吩e6可實(shí)現(xiàn)活體熒光成像，能夠?qū)崦糁|(zhì)體在生物體內(nèi)的分布進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，有助于了解熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)靶部位的富集量和在其他器官的生物分布，提高熱敏脂質(zhì)體的治療效果；所述光敏劑可以被磷脂酰膽堿形成的磷脂雙分子層包裹，形成粒徑較小且粒徑均一的熱敏脂質(zhì)體。同時(shí)，吲哚菁綠或二氫卟吩e6生物相容性較好。
[0044]所述磷脂酰膽堿為1，2-二硬脂酰-sn-甘油磷酸(DSPC)、1，2_二肉豆蘧酰-sn_甘油基-3-磷酸膽堿(DMPC)、1，2- 二月桂?；?sn-甘油基_3_磷酸膽堿(DLPC)和1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿(DPPC)中的至少一種。所述磷脂酰膽堿為熱敏材料，當(dāng)環(huán)境溫度低于熱敏材料的相變溫度時(shí)，磷脂酰膽堿形成的磷脂雙分子層呈凝膠態(tài)，流動(dòng)性和通透性均較小，當(dāng)熱敏材料受熱達(dá)到相變溫度時(shí)，磷脂分子運(yùn)動(dòng)加強(qiáng)，如:翻轉(zhuǎn)、移動(dòng)、擺動(dòng)等，此時(shí)，相鄰的磷脂分子之間距離增加，磷脂雙分子層的厚度減小，這種結(jié)構(gòu)的變化導(dǎo)致脂質(zhì)體的流動(dòng)性和通透性大大增加，短時(shí)間內(nèi)釋放被磷脂雙分子層包裹的化療藥物，所述熱敏脂質(zhì)體對(duì)化療藥物的控制釋放能力好。同時(shí)所述磷脂酰膽堿具有良好的生物相容性。
[0045]所述磷脂酰膽堿為1，2-二硬脂酰-sn-甘油磷酸(DSPC)和1，2_ 二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿(DMPC)。所述磷脂酰膽堿為1，2-二硬脂酰-sn-甘油磷酸(DSPC)和1，2- 二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿(DMPC)兩種熱敏材料時(shí)，當(dāng)熱敏材料受熱達(dá)到兩種材料的相變溫度時(shí)，該熱敏材料更容易液化，更加有利于脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)的崩解，有助于化療藥物的釋放。在實(shí)施例中，用近紅外光照射使熱敏材料溫度達(dá)到42~43°C進(jìn)行相變。
[0046]所述DSPC和DMPC的質(zhì)量比為(I~4):1。
[0047]所述聚乙二醇衍生化磷脂為聚乙二醇-二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺(DSPE-PEG)和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來(lái)酰亞胺(DSPE-PEG-MAL)中的至少一種。聚乙二醇作為一種親水性極性分子，避免了免疫系統(tǒng)對(duì)其識(shí)別，減少單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)攝取，本發(fā)明所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂穿插于所述磷脂雙分子層，所述聚乙二醇衍生化磷脂中的聚乙二醇形成親水性外層，顯著延長(zhǎng)了脂質(zhì)體在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，進(jìn)而借助增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)(EPR效應(yīng))富集到腫瘤組織中，有助于實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的被動(dòng)靶向，從而增強(qiáng)藥物的生物利用率。
[0048]同時(shí)，本發(fā)明具有聚乙二醇的親水保護(hù)層，能夠避免熱敏脂質(zhì)體的聚集，可以提高熱敏脂質(zhì)體在儲(chǔ)存期內(nèi)的穩(wěn)定性；制備出的熱敏脂質(zhì)體顆粒均一、尺寸穩(wěn)定性好。
[0049]所述聚乙二醇衍生化磷脂為二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來(lái)酰亞胺(DSPE-PEG-MAL)。
[0050]所述熱敏脂質(zhì)體中還包括膽固醇，所述膽固醇分子鑲嵌于磷脂酰膽堿分子之間，可以提高磷脂雙分子層的剛性，提高了磷脂分子層的穩(wěn)定性。
[0051]所述化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿、聚乙二醇衍生化磷脂和膽固醇的質(zhì)量比為1:(I ~4):(25 ~35): (I ~5): (I ~5)。
[0052]吲哚菁綠或二氫卟吩e6具有光學(xué)成像性質(zhì)和強(qiáng)光熱轉(zhuǎn)換特性，當(dāng)所述熱敏脂質(zhì)體應(yīng)用于治療時(shí)，可以在給予熱敏脂質(zhì)體之前和/或期間和/或之后，對(duì)靶部位進(jìn)行紅外光照射，根據(jù)熱敏脂質(zhì)體的熒光成像圖像，可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熱敏脂質(zhì)體在生物體內(nèi)的分布狀態(tài)，有利于了解熱敏脂質(zhì)體在靶部位中的富集數(shù)量和作用機(jī)制，同時(shí)根據(jù)光學(xué)成像的信息，可以更加容易地選擇最佳加熱時(shí)間等因素，使熱敏脂質(zhì)體達(dá)到更好的治療效果；同時(shí)吲哚菁綠或二氫卟吩e6在近紅外光照射下產(chǎn)熱，導(dǎo)致熱敏材料發(fā)生相變，使熱敏脂質(zhì)體在靶部位定位釋放藥物，從而達(dá)到靶向治療的作用；本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體物理化學(xué)穩(wěn)定性良好，熱敏脂質(zhì)體的粒徑較小且粒徑均一，有利于藥物有效地到達(dá)靶部位中釋放藥物并進(jìn)行高效治療；同時(shí)熱敏脂質(zhì)體的生物相容性良好，副作用小。
[0053]所述化療藥物為鹽酸阿霉素且所述光敏劑為吲哚菁綠。所述吲哚菁綠在近紅外光照射下，具有強(qiáng)的光熱轉(zhuǎn)換性質(zhì)，同時(shí)具有良好的熒光成像作用，吲哚菁綠是唯一一種被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)的用于人類(lèi)醫(yī)學(xué)成像和診斷的試劑，生物相容性較好，將所述吲哚菁綠作為光敏劑應(yīng)用在熱敏脂質(zhì)體中一方面可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布狀況以及在靶部位的富集狀況，另一方面可以起到定位釋放化療藥物，起到治療的作用，同時(shí)，吲哚菁綠熒光成像的作用有助于更好的確定近紅外光照射時(shí)間等因素，進(jìn)一步提高治療效果；Π引哚菁綠和鹽酸阿霉素為水溶性，可以被磷脂雙分子層親水腔包裹，不易團(tuán)聚，形成的熱敏脂質(zhì)體粒徑較小且粒徑均一，得到的熱敏脂質(zhì)體生物相容性良好。
[0054]本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體不僅具有溫度敏感性，在一定的溫度下可以定位釋放化療藥物，同時(shí)所述熱敏脂質(zhì)體具有熒光成像的性質(zhì)，根據(jù)該性質(zhì)可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布狀態(tài)，為更好地定位定時(shí)釋放化療藥物、提高治療效果提供了重要的支持；所述熱敏脂質(zhì)體粒徑小，粒徑均一，且生物相容性良好。
[0055]第二方面，本發(fā)明提供了一種熱敏脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟:
[0056](I)將磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂按質(zhì)量比為25~35:1~5的比例溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后，得到磷脂薄膜，再將所述磷脂薄膜溶解得到磷脂溶液；
[0057](2)將光敏劑和化療藥物按質(zhì)量比為I~4:1的比例溶解后滴加至所述磷脂溶液中并超聲5~lOmin，然后超濾3~5次，得到所述熱敏脂質(zhì)體，所述熱敏脂質(zhì)體包括化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂，所述光敏劑為吲哚菁綠或二氫卟吩e6，所述熱敏脂質(zhì)體的粒徑為40~60nm。
[0058]所述步驟(1)的磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂溶解于乙醇和水的混合溶液中。
[0059]所述步驟(1)的所述磷脂薄膜溶解于超純水或磷酸鹽緩沖溶液中。
[0060]所述步驟(2)的光敏劑和化療藥物溶解于超純水、磷酸鹽緩沖溶液、乙腈、氯仿或乙醇和水的混合溶液中。
[0061]當(dāng)所述步驟(2)的光敏劑和化療藥物為水溶性物質(zhì)時(shí)，將所述光敏劑和化療藥物溶解于超純水或磷酸鹽緩沖溶液中。當(dāng)所述步驟(3)的光敏劑和化療藥物為脂溶性物質(zhì)時(shí)，將所述光敏劑和化療藥物溶解于乙腈、氯仿或乙醇和水的混合溶液中。
[0062]所述步驟(2)超聲時(shí)，使用細(xì)胞超聲波破碎儀以20kHz的頻率及130W的功率超聲5 ~IOmin0
[0063]所述步驟(2)超濾時(shí)，使用IOkDa的超濾管離心超濾3~5次。
[0064]步驟(2)超濾后得到熱敏脂質(zhì)體水溶液。
[0065]超濾后制得的所述熱敏脂質(zhì)體中DOX在水中的濃度為60~100 μ g/ml，所述熱敏脂質(zhì)體中吲哚菁綠或二氫卟吩e6在水中的濃度為150~300 μ g/ml。
[0066]所述化療藥物為鹽酸阿霉素、表阿霉素、紫杉醇、去甲長(zhǎng)春花堿或順鉬。
[0067]生物體對(duì)650~900nm范圍的近紅外光具有高度透過(guò)性，而吲哚菁綠和二氫卟吩e6在此范圍內(nèi)具有高吸收的特性，然后進(jìn)行光熱轉(zhuǎn)換，使熱敏脂質(zhì)體溫度升高，在達(dá)到磷脂酰膽堿的相變溫度時(shí)，導(dǎo)致脂質(zhì)體的流動(dòng)性和通透性大大增加，釋放化療藥物，大大提高了化療藥物在靶部位上的富集和對(duì)靶細(xì)胞的殺傷力。同時(shí)哚菁綠和二氫卟吩e6可實(shí)現(xiàn)活體熒光成像，能夠?qū)崦糁|(zhì)體在生物體內(nèi)的分布進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，有助于了解熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)靶部位的富集量和在其他器官的生物分布，更好地確定近紅外光的照射時(shí)間等因素，提高熱敏脂質(zhì)體的治療效果；所述光敏劑可以被磷脂酰膽堿形成的磷脂雙分子層包裹，形成粒徑較小且粒徑均一的熱敏脂質(zhì)體。同時(shí)，吲哚菁綠(ICG)或二氫卟吩e6生物相容性較好。
[0068]所述化療藥物為鹽酸阿霉素且所述光敏劑為吲哚菁綠。
[0069]所述吲哚菁綠在近紅外光照射下，具有強(qiáng)的光熱轉(zhuǎn)換性質(zhì)，同時(shí)具有良好的熒光成像作用，吲哚菁綠是唯一一種被美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)的用于人類(lèi)醫(yī)學(xué)成像和診斷的試劑，生物相容性較好，將所述吲哚菁綠作為光敏劑應(yīng)用在熱敏脂質(zhì)體中一方面可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布狀況以及在靶部位的富集狀況，另一方面可以起到定位釋放化療藥物，起到治療的作用，同時(shí)，吲哚菁綠熒光成像的作用有助于更好的確定近紅外光照射時(shí)間等因素，進(jìn)一步提高治療效果；吲哚菁綠和鹽酸阿霉素為水溶性，可以被磷脂雙分子層親水腔包裹，不易團(tuán)聚，形成的熱敏脂質(zhì)體粒徑較小且粒徑均一，得到的熱敏脂質(zhì)體生物相容性良好。
[0070]所述磷脂酰膽堿為1，2-二硬脂酰-sn-甘油磷酸(DSPC)、1，2_二肉豆蘧酰-sn_甘油基-3-磷酸膽堿(DMPC)、1，2- 二月桂?；?sn-甘油基_3_磷酸膽堿(DLPC)和1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿(DPPC)中的至少一種。所述磷脂酰膽堿為熱敏材料，當(dāng)環(huán)境溫度低于熱敏材料的相變溫度時(shí)，磷脂酰膽堿形成的磷脂雙分子層呈凝膠態(tài)，流動(dòng)性和通透性均較小，當(dāng)熱敏材料受熱達(dá)到相變溫度時(shí)，磷脂分子運(yùn)動(dòng)加強(qiáng)，如:翻轉(zhuǎn)、移動(dòng)、擺動(dòng)等，此時(shí)，相鄰的磷脂分子之間距離增加，磷脂雙分子層的厚度減小，這種結(jié)構(gòu)的變化導(dǎo)致脂質(zhì)體的流動(dòng)性和通透性大大增加，短時(shí)間內(nèi)釋放被磷脂雙分子層包裹的化療藥物，所述熱敏脂質(zhì)體對(duì)化療藥物的控制釋放能力好。同時(shí)所述磷脂酰膽堿具有良好的生物相容性。
[0071]所述磷脂酰膽堿為1，2-二硬脂酰-sn-甘油磷酸(DSPC)和1，2_ 二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿(DMPC)。所述磷脂酰膽堿為1，2-二硬脂酰-sn-甘油磷酸(DSPC)和1，2- 二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿(DMPC)兩種熱敏材料時(shí)，當(dāng)熱敏材料受熱達(dá)到兩種材料的共同相變溫度時(shí)，該熱敏材料更容易液化，更加有利于脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)的崩解，有助于化療藥物的釋放。在實(shí)施例中，用近紅外光照射使熱敏材料溫度達(dá)到42~43 °C進(jìn)行相變。
[0072]所述DSPC和DMPC的質(zhì)量比為(I~4):1。
[0073]所述聚乙二醇衍生化磷脂為聚乙二醇-二硬脂?；字Ｒ掖及?DSPE-PEG)和二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來(lái)酰亞胺(DSPE-PEG-MAL)中的至少一種。聚乙二醇作為一種親水性極性分子，避免了免疫系統(tǒng)對(duì)其識(shí)別，減少單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)攝取，本發(fā)明所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂穿插于所述磷脂雙分子層，所述聚乙二醇衍生化磷脂中的聚乙二醇形成親水性外層，顯著延長(zhǎng)了脂質(zhì)體在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間，進(jìn)而借助增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)(EPR效應(yīng))富集到腫瘤組織中，有助于實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的被動(dòng)靶向，從而增強(qiáng)藥物的生物利用率。
[0074]同時(shí)，本發(fā)明具有聚乙二醇的親水保護(hù)層，能夠避免熱敏脂質(zhì)體的聚集，可以提高熱敏脂質(zhì)體在儲(chǔ)存期內(nèi)的穩(wěn)定性；制備出的熱敏脂質(zhì)體顆粒均一、尺寸穩(wěn)定性好。
[0075]所述聚乙二醇衍生化磷脂為二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-馬來(lái)酰亞胺(DSPE-PEG-MAL)。
[0076]所述熱敏脂質(zhì)體中還包括膽固醇，所述膽固醇分子鑲嵌于磷脂酰膽堿分子之間。所述膽固醇分子鑲嵌于磷脂酰膽堿分子之間，可以提高磷脂雙分子層的剛性，提高了磷脂分子層的穩(wěn)定性。
[0077]所述化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿、聚乙二醇衍生化磷脂和膽固醇的質(zhì)量比為1:(I ~4):(25 ~35): (I ~5): (I ~5)。[0078]磷脂酰膽堿分子包括親水性頭部和兩個(gè)疏水性尾部，當(dāng)磷脂處于水性環(huán)境時(shí)，親水性頭部聚集成線性構(gòu)型，而它們的疏水性尾部平行地排列。由于疏水性尾部試圖避開(kāi)水性環(huán)境，第二列磷脂分子與第一列磷脂分子尾部對(duì)尾部進(jìn)行排列，為了最大程度地避免與水性環(huán)境接觸，同時(shí)使表面積與體積之比最小從而達(dá)到最小能量構(gòu)型，兩列磷脂聚集成球(形成磷脂雙分子層)，磷脂雙分子層包裹光敏劑和化療藥物；所述聚乙二醇衍生化磷脂中的磷脂通過(guò)物理作用和所述磷脂層中的磷脂分子結(jié)合從而穿插于所述磷脂層，進(jìn)行超聲分散后，使熱敏脂質(zhì)體的粒徑更小，最后通過(guò)超濾，得到熱敏脂質(zhì)體。
[0079]本發(fā)明根據(jù)化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂的性質(zhì)，將這些物質(zhì)溶解后，化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂通過(guò)自組裝過(guò)程形成所述熱敏脂質(zhì)體，不需要進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，制備過(guò)程環(huán)保無(wú)毒，制備方法簡(jiǎn)單易操作，制備出的熱敏脂質(zhì)體的粒徑較小且粒徑均一。
[0080]第三方面，以上所述的熱敏脂質(zhì)體在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
[0081]當(dāng)所述熱敏脂質(zhì)體應(yīng)用于腫瘤藥物時(shí)，可以給予熱敏脂質(zhì)體之前和/或期間和/或之后，進(jìn)行紅外光照射，可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熱敏脂質(zhì)體在體內(nèi)的分布以及在腫瘤部位的富集數(shù)量，確定最佳紅外光照射時(shí)間，使熱敏脂質(zhì)體溫度升高，選擇在腫瘤部位釋放化療藥物，從而使化療藥物很好地在腫瘤部位富集，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的有效抑制和治療；提高化療藥物的利用率，降低化療藥物毒副作用。本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體物理化學(xué)穩(wěn)定性良好，熱敏脂質(zhì)體的粒徑較小且粒徑均一，可以借助增強(qiáng)滲透滯留效應(yīng)(EPR效應(yīng))富集到腫瘤組織中，有助于實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的被動(dòng)靶向。
[0082]實(shí)施例1
[0083]一種熱敏脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟:
[0084](I)將 2.7mg 的 DSPC (購(gòu)自 Sigma-AIdrich 公司)、1.5mg 的 DMPC (購(gòu)自Sigma-Aldrich 公司)、0.15mg 的膽固醇(購(gòu)自 Avanti 公司)和 0.15mg DSPE-PEG-MAL (購(gòu)自Avanti公司)溶于4mL體積分?jǐn)?shù)為4%的乙醇水溶液中；然后使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將乙醇溶液蒸干，在50mL圓底燒瓶中形成均勻的磷脂薄膜；再加入3ml超純水溶解磷脂薄膜，形成磷脂溶液；
[0085](2)將 0.15mg 的 DOX 與 0.6mg 的 ICG (均購(gòu)自 Sigma-Aldrich 公司)溶于 0.15mL超純水中并混合均勻后滴加至圓底燒瓶中的磷脂溶液中，其間使用細(xì)胞超聲波破碎儀以20kHz的頻率及130W的功率超聲5min ;最后使用IOkDa的超濾管離心超濾3次，即得熱敏脂質(zhì)體(表示為D1-NPs)。
[0086]對(duì)比實(shí)施例1
[0087]一種空白脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟:[0088]步驟(1)的操作同實(shí)施例1的步驟(1);
[0089](2)僅將0.6mg的ICG溶于超純水中，并使用同樣方法制備出僅包載ICG的空白脂質(zhì)體(表示為1-NPs)。
[0090]圖1為實(shí)施例1制得的熱敏脂質(zhì)體的透射電鏡圖，從圖1中可以看出，本實(shí)施例制得的熱敏脂質(zhì)體的粒徑為50nm左右，粒徑較小。圖2為熱敏脂質(zhì)體在43°C加熱以后熱敏脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)崩解的TEM圖像，熱敏脂質(zhì)體由正常的圓形或橢圓形結(jié)構(gòu)變成紡錘形；粒度分析儀測(cè)得該D1-NPs粒徑(Number平均值)大小為48.94±3.35nm (如圖3所示)，測(cè)得表面電位為-17.07± 1.08mV ；1-NPs粒徑(Number平均值)大小為53.6±7.3nm (如圖4所示)，測(cè)得表面電位為-36.53±0.3mV。結(jié)果表明，說(shuō)明本發(fā)明熱敏脂質(zhì)體顆粒顯示出良好的顆粒形態(tài)和分散度。
[0091]實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體在不同溫度下化療藥物的釋放曲線如圖5所示，將兩組等量的熱敏脂質(zhì)體分別放置在37°C和43°C的恒溫環(huán)境下振蕩，并分別在第1、2、3、4、5、6小時(shí)取樣，通過(guò)Lambda750紫外/可見(jiàn)光光度計(jì)檢測(cè)DOX藥物釋放速率(D0X釋放百分比=釋放的DOX量/初始DOX量X 100%),結(jié)果表明，在43°C條件下熱敏脂質(zhì)體表現(xiàn)出更快的藥物釋放效果，說(shuō)明本發(fā)明的熱敏脂質(zhì)體中在43°C達(dá)到磷脂酰膽堿的相變溫度，導(dǎo)致熱敏脂質(zhì)體的流動(dòng)性和通透性大大增加，短時(shí)間內(nèi)釋放了化療藥物。
[0092]實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體在加/不加近紅外光照射條件下的化療藥物釋放曲線如圖6所示，將兩組等量的熱敏脂質(zhì)體放置在37°C恒溫環(huán)境下振蕩，第一組樣品不作任何處理，第二組樣品在第1、3、5小時(shí)分別用1.6ff/cm2的波長(zhǎng)為808nm的近紅外光照射5min，兩組分別在1、2、3、4、5、6小時(shí)點(diǎn)取樣，同樣通過(guò)Lambda750檢測(cè)DOX藥物釋放速率，結(jié)果表明，經(jīng)過(guò)近紅外光照射的熱敏脂質(zhì)體藥物釋放速率會(huì)得到明顯的提升。說(shuō)明本發(fā)明的熱敏脂質(zhì)體在近紅外光照射下，吲哚菁綠進(jìn)行光熱轉(zhuǎn)換，使熱敏脂質(zhì)體溫度升高，導(dǎo)致熱敏脂質(zhì)體的流動(dòng)性和通透性大大增加，有效地釋放了化療藥物。[0093]本發(fā)明同時(shí)對(duì)D1-NPs在細(xì)胞水平的生物安全性和治療效果進(jìn)行了評(píng)價(jià)。以多藥耐藥乳腺癌細(xì)胞MCF-7/ADR為例，使用含有不同ICG濃度的1-NPs的細(xì)胞培養(yǎng)液孵育細(xì)胞，在細(xì)胞對(duì)1-NPs攝取4小時(shí)后更換成不含有1-NPs的普通培養(yǎng)液，1.6ff/cm2的波長(zhǎng)為808nm的近紅外光治療5分鐘，用以檢測(cè)該脂質(zhì)體顆粒及近紅外光強(qiáng)度的生物安全性；實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖7所示，圖7為對(duì)比實(shí)施例1制備的空白脂質(zhì)體在不同ICG濃度下對(duì)MCF-7/ADR細(xì)胞存活率的影響；結(jié)果表明，在ICG濃度達(dá)到160 μ g/mL時(shí)，細(xì)胞依然具有很高的存活率，證明本發(fā)明的熱敏脂質(zhì)體具有很高的生物安全性，單一的ICG光熱響應(yīng)對(duì)細(xì)胞的損傷很小。
[0094]使用含有不同DOX濃度的單獨(dú)鹽酸阿霉素和D1-NPs的細(xì)胞培養(yǎng)液孵育細(xì)胞4小時(shí)，1.6ff/cm2的波長(zhǎng)為808nm的近紅外光治療5分鐘，用以檢測(cè)D1-NPs細(xì)胞的治療效果；結(jié)果如圖8所示，圖8為實(shí)施例1制備的熱敏脂質(zhì)體與單獨(dú)DOX藥物在不同DOX濃度下對(duì)MCF-7/ADR細(xì)胞存活率的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在DOX濃度為相同的情況下，D1-NPs的對(duì)腫瘤細(xì)胞的治療效果要好于單獨(dú)鹽酸阿霉素的治療效果，D1-NPs通過(guò)光敏劑ICG響應(yīng)將熱敏脂質(zhì)體中的DOX釋放出來(lái)，進(jìn)而對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生良好的治療效果，實(shí)現(xiàn)了化療藥物的可控釋放。
[0095]實(shí)施例2
[0096]一種熱敏脂質(zhì)體的制備方法，包括以下步驟:
[0097](I)將 2.7mg 的 DSPC (購(gòu)自 Sigma-AIdrich 公司)、1.5mg 的 DMPC (購(gòu)自Sigma-Aldrich 公司)、0.45mg 的膽固醇和 0.75mg DSPE-PEG-MAL (購(gòu)自 Sigma-Aldrich 公司)溶于4mL體積分?jǐn)?shù)為4%的乙醇溶液中；然后使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將乙醇溶液蒸干，在50mL圓底燒瓶中形成均勻的磷脂薄膜；再加入3ml超純水溶解磷脂薄膜，形成磷脂溶液；
[0098](3)將0.15mg的DOX與0.15mg的ICG溶于0.15mL超純水中并混合均勻后逐滴加至圓底燒瓶中的磷脂溶液中，其間使用細(xì)胞超聲波破碎儀以20kHz的頻率及130W的功率超聲5min ;最后使用IOkDa的超濾管離心超濾3次，即得熱敏脂質(zhì)體(表示為DI_NPs)。[0099] 以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專(zhuān)利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專(zhuān)利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。
【權(quán)利要求】
1.一種熱敏脂質(zhì)體，其特征在于，所述熱敏脂質(zhì)體包括化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂，所述光敏劑為吲哚菁綠或二氫卟吩e6，所述熱敏脂質(zhì)體的粒徑為40 ~60nm。
2.如權(quán)利要求1所述的熱敏脂質(zhì)體，其特征在于，所述化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂的質(zhì)量比為1: (1~4):(25~35): (1~5)。
3.如權(quán)利要求1所述的熱敏脂質(zhì)體，其特征在于，所述化療藥物為鹽酸阿霉素、表阿霉素、紫杉醇、去甲長(zhǎng)春花堿或順鉬。
4.如權(quán)利要求3所述的熱敏脂質(zhì)體，其特征在于，所述化療藥物為鹽酸阿霉素且所述光敏劑為吲哚菁綠。
5.如權(quán)利要求1所述的熱敏脂質(zhì)體，其特征在于，所述磷脂酰膽堿為1，2_二硬脂酰-sn-甘油磷酸、1, 2- 二肉豆蘧酰-sn-甘油基-3-磷酸膽堿、1, 2- 二月桂酰基-sn_甘油基-3-磷酸膽堿和1，2- 二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿中的至少一種。
6.如權(quán)利要求1所述的熱敏脂質(zhì)體，其特征在于，所述聚乙二醇衍生化磷脂為聚乙二醇-二硬脂?；字Ｒ掖及泛投仓Ａ字Ｒ掖及?聚乙二醇-馬來(lái)酰亞胺中的至少一種。
7.一種熱敏脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)將磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂按質(zhì)量比為25~35:1~5的比例溶解，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)后，得到磷脂薄膜，再將所述磷脂薄膜溶解得到磷脂溶液； (2)將光敏劑和化療藥物按質(zhì)量比為1~4:1的比例溶解后滴加至所述磷脂溶液中并超聲5~10m1n,然后超濾3~5次,得到所述熱敏脂質(zhì)體,所述熱敏脂質(zhì)體包括化療藥物、光敏劑、磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂，所述光敏劑為吲哚菁綠或二氫卟吩e6，所述熱敏脂質(zhì)體的粒徑為40~60nm。
8.如權(quán)利要求7所述的熱敏脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述步驟(1)的磷脂酰膽堿和聚乙二醇衍生化磷脂溶解于乙醇和水的混合溶液中。
9.如權(quán)利要求7所述的熱敏脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于，所述步驟(2)的光敏劑和化療藥物溶解于超純水、磷酸鹽緩沖溶液、乙腈、氯仿或乙醇和水的混合溶液中。
10.如權(quán)利要求1所述的熱敏脂質(zhì)體在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61K9/127GK103908429SQ201410119236
【公開(kāi)日】2014年7月9日 申請(qǐng)日期:2014年3月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月27日
【發(fā)明者】蔡林濤, 趙鵬飛, 鄭明彬, 羅震宇, 龔萍, 鄭翠芳, 岳彩霞 申請(qǐng)人:深圳先進(jìn)技術(shù)研究院