腫瘤靶向多肽-阿霉素衍生物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】腫瘤靶向多肽-阿霉素衍生物及其制備方法和應(yīng)用，該化合物由以下步驟制得：將多肽溶于pH值7.8～8.2的磷酸鹽緩沖液里，再將DOXO-EMCH溶于溶劑中得到溶液，所述多肽為T(mén)10肽或T15肽，所述溶劑為水與N，N’-二甲基甲酰胺的混合物，將DOXO-EMCH溶液滴加入到多肽溶液中，室溫下避光攪拌反應(yīng)，再將溶液離心去除沉淀，即可制得粗產(chǎn)物；采用制備色譜法對(duì)粗產(chǎn)物進(jìn)行分離純化，離心濃縮，制得精制品T10-DOXO-EMCH或T15-DOXO-EMCH。本發(fā)明化合物阿霉素腙衍生物在腫瘤酸性微環(huán)境中，腙鍵選擇性斷開(kāi)，釋放出藥理活性的阿霉素，提高藥物療效，逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥性。
【專(zhuān)利說(shuō)明】腫瘤靶向多肽-阿霉素衍生物及其制備方法和應(yīng)用【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物與醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種具有抗癌活性的多肽一阿霉素衍生物及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]阿霉素(DOX)屬蒽環(huán)類(lèi)化合物，是最有效的抗癌藥物之一，在臨床上被廣泛用于治療急性白血病、乳腺癌、淋巴瘤以及各種實(shí)體瘤。但與其它抗癌藥物一樣，由于其易產(chǎn)生耐藥性，選擇性差，阿霉素的臨床應(yīng)用受到嚴(yán)重的限制。在近20年中，人們針對(duì)阿霉素進(jìn)行了大量的結(jié)構(gòu)改造和修飾，以期增強(qiáng)腫瘤靶向性，提高療效。
[0003]抗癌藥物的耐藥性和低選擇性，可以通過(guò)以各種多肽或蛋白作為攜帶載體，利用載體所具有的受體介導(dǎo)的內(nèi)吞機(jī)制，增加其對(duì)癌細(xì)胞直接的靶向性來(lái)獲得改善。上述結(jié)合物的選擇性既可以通過(guò)癌細(xì)胞膜上存在的可以被特異性片段識(shí)別的受體，也可由癌細(xì)胞膜上具有比正常細(xì)胞更高水平的受體來(lái)獲得。文獻(xiàn)報(bào)道，轉(zhuǎn)鐵蛋白受體在腫瘤細(xì)胞表面的表達(dá)水平遠(yuǎn)高于正常細(xì)胞，因此，我們選擇轉(zhuǎn)鐵蛋白受體為我們特征性的受體。目前，轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的配體，轉(zhuǎn)鐵蛋白作為頭基廣泛用于構(gòu)建腫瘤靶向給藥系統(tǒng)。但是機(jī)體的內(nèi)源性轉(zhuǎn)鐵蛋白濃度高，競(jìng)爭(zhēng)抑制轉(zhuǎn)鐵蛋白修飾的給藥系統(tǒng)的靶向轉(zhuǎn)運(yùn)。近年通過(guò)噬菌體展示技術(shù)篩選出的T7肽(HAIYPRH)和T12肽(THRPPMWSPVWP)，可靶向結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白受體，且對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的親和性和轉(zhuǎn)鐵蛋白相當(dāng)。而二者在轉(zhuǎn)鐵蛋白受體上的結(jié)合位點(diǎn)與轉(zhuǎn)鐵蛋白不同，不會(huì)與內(nèi)源性的轉(zhuǎn)鐵蛋白產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)抑制，且不影響轉(zhuǎn)鐵蛋白本身的生理功能，相反轉(zhuǎn)鐵蛋白與受體的結(jié)合會(huì)促進(jìn)T7肽和T12肽的入胞效率。同時(shí)，它們都是小分子多肽，具有可化學(xué)合成、穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn)，作為靶向頭基空間位阻小，臨床應(yīng)用前景好。
[0004]經(jīng)結(jié)構(gòu)修飾的藥物到達(dá)腫瘤部位后，能否以活性形式有效釋放出來(lái)，關(guān)系到藥物能否進(jìn)入靶向部位發(fā)揮藥效，是藥物設(shè)計(jì)的又一關(guān)鍵問(wèn)題。腫瘤細(xì)胞的旺盛生長(zhǎng)伴隨著大量酸性代謝產(chǎn)物的形成和外排，從而形成腫瘤酸性微環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn)，腙鍵在酸性條件下選擇性斷開(kāi)，而在正常生理環(huán)境中保持穩(wěn)定。近年來(lái)，阿霉素的腙衍生物，例如(6-馬來(lái)酰亞胺基己?；?腙衍生物(D0X0-EMCH)，作為共價(jià)鍵連接體，構(gòu)建靶向給藥系統(tǒng)，引起了廣泛的關(guān)注。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]解決的技術(shù)問(wèn)題:
[0006]本發(fā)明的目的是提供一種腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物及其制備方法和應(yīng)用。
[0007]技術(shù)方案:
[0008]腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物，結(jié)構(gòu)通式如式I所示:
[0009]
【權(quán)利要求】
1.腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物，其特征在于結(jié)構(gòu)通式如式I所示:.0 O OH O
2.權(quán)利要求1所述腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物的制備方法，其特征在于包括以下步驟:步驟1，將多肽溶于pH值7.8~8.2的磷酸鹽緩沖液里，再將D0X0-EMCH溶于溶劑中得到溶液，所述多肽為T(mén)lO肽或T15肽，所述溶劑為水與N，N’ 一二甲基甲酰胺的混合物，將D0X0-EMCH溶液滴加入到多肽溶液中，室溫下避光攪拌反應(yīng)，再將溶液離心去除沉淀，即可制得粗產(chǎn)物；步驟2，采用制備色譜法對(duì)粗產(chǎn)物進(jìn)行分離純化，離心濃縮，制得精制品T10-D0X0-EMCH 或 T15-D0X0-EMCH。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物的制備方法，其特征在于，所述步驟I中，D0X0-EMCH溶于的溶劑為水與N，N’ 一二甲基甲酰胺的1:1體積比混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物的制備方法，其特征在于，所述步驟I中，D0X0-EMCH與多肽摩爾比為2:1。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物的制備方法，其特征在于，所述步驟I中，D0X0-EMCH滴加入到多肽溶液中的速率為25 μ L/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物的制備方法，其特征在于，所述步驟I中，避光室溫?cái)嚢钑r(shí)間為1.5h。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物的制備方法，其特征在于，所述步驟2中，制備色譜法的色譜條件為:制備柱SanFire Prep C180BD柱:18mmX 150mm,10 μ m ;流動(dòng)相A為甲酸水溶液，其中甲酸體積百分比濃度為0.01%,流動(dòng)相B為100%乙腈；梯度洗脫分離目標(biāo)產(chǎn)物。
8.權(quán)利要求1所述腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
9.抗腫瘤藥物，其特征在于有效成分為權(quán)利要求1式I所示的腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物。
10.權(quán)利要求1所述腫瘤靶向多肽一阿霉素衍生物在抗腫瘤中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK103908677SQ201410137337
【公開(kāi)日】2014年7月9日 申請(qǐng)日期:2014年4月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月4日
【發(fā)明者】陳蕓, 徐金慧, 盛媛, 許飛飛, 方丹君, 尤一雯 申請(qǐng)人:南京醫(yī)科大學(xué)