一種預(yù)防和治療廢用性骨質(zhì)疏松的藥物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種預(yù)防和治療廢用性骨質(zhì)疏松的藥物及其制備方法，所述藥物包括以下原料藥制成：熟地、續(xù)斷、桑寄生、當(dāng)歸、桃仁、紅花、牛膝、骨碎補和甘草，為補腎活血方。還可以包括黃芪和太子參，為益氣補腎活血方。本發(fā)明的藥物可改善廢用性骨質(zhì)疏松大鼠的骨代謝；可以降低ALP、BAP的含量，明顯增加血Ca、BGP、BMP-2、HOP、HOP/Cr和TRAP的含量；可以降低TNF-α、IL-4、IL-6的含量，還可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖，有效增加BALP的活性，可增加骨形成，有助于治療廢用性骨質(zhì)疏松；可明顯促進(jìn)破骨細(xì)胞增殖，可提高骨形成，降低骨吸收，促進(jìn)骨量的增加，對廢用性骨質(zhì)疏松有一定得預(yù)防作用。
【專利說明】一種預(yù)防和治療廢用性骨質(zhì)疏松的藥物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種預(yù)防和治療廢用性骨質(zhì)疏松的藥物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]廢用性骨質(zhì)疏松(Disuse Osteoporosis D0P),是由于機械應(yīng)力對骨的作用減少從而導(dǎo)致機體局部或全身的骨量丟失和骨質(zhì)量降低而出現(xiàn)的一種局部或全身的骨質(zhì)疏松現(xiàn)象。臨床中因各種疾病原因而必須長期臥床、運動能力受限和外科制動的患者以及宇航員都有可發(fā)生D0P。當(dāng)制動導(dǎo)致骨的正常負(fù)荷減弱或者消失時，與外力負(fù)荷相對應(yīng)的骨重建隨之發(fā)生，引起機械強度下降，骨質(zhì)萎縮。有研究表明，當(dāng)病人臥床4周時，髂骨松質(zhì)骨骨量開始下降，至臥床25周時骨量下降約為33%雖然在主動活動后可以慢慢恢復(fù)，但往往時間較長，已經(jīng)成為骨關(guān)節(jié)疾病、外傷、骨關(guān)節(jié)手術(shù)后必須接受長期制動的患者術(shù)后恢復(fù)的重要障礙，甚至發(fā)生廢用性骨質(zhì)疏松骨折，進(jìn)而影響原發(fā)病的治療和康復(fù)。如何在臥床期間預(yù)防和減少骨量丟失，有效降低再次骨折的幾率，緩解骨質(zhì)疏松并發(fā)的疼痛，是醫(yī)學(xué)界一直在探索的問題。
[0003]中醫(yī)藥獨特的整體觀念、辨證論治的思想和確定的臨床效果，被廣泛的運用到治療骨質(zhì)疏松的過程中，古代醫(yī)籍中雖無廢用性骨質(zhì)疏松之病名，但根據(jù)其癥狀表現(xiàn)，可將其歸于中醫(yī)“骨痿”的范疇。在辨證論治的基礎(chǔ)上，根據(jù)“腎主骨生髓”的理論，其臨床治療中多以補腎為主進(jìn)行古方加減或自擬方進(jìn)行治療。如周志昆等用黃芪三仙湯治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，結(jié)果顯示治療組骨堿性磷酸酶(AKP)、4小時尿鈣/肌酐及經(jīng)脯氨酸/肌酐(HyP/cr)均顯著性降低，而骨密度和 血清雌二醇均顯著升高，檢測BMD和血雌二醇水平均顯著性升高，提示黃芪三仙湯可提高雌激素水平，從而改善骨代謝，防止骨丟失，這可能是通過提高患者垂體-性腺軸功能來實現(xiàn)的。鄒小娟等用補腎壯骨通痹湯為基礎(chǔ)方，治療腎虛絡(luò)痹所致的原發(fā)性骨質(zhì)疏松；康毅用淫羊藿、白術(shù)、黃芪等組成補骨膠囊，用補腎健脾法治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥；何小琦等從補腎養(yǎng)血入手，用淫羊藿、巴戟天、金櫻子、當(dāng)歸、白芍、大棗、何首烏等藥治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥，均取得較好的療效。中醫(yī)藥治療骨質(zhì)疏松的不斷發(fā)展有效提聞了臨床效果。
[0004]目前，現(xiàn)有中醫(yī)藥治療骨質(zhì)疏松起到一定的療效，但并不理想。因廢用性骨質(zhì)疏松起病隱匿，未得到足夠的認(rèn)識，因此治療廢用性骨質(zhì)疏松的方劑較少。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一種預(yù)防和治療廢用性骨質(zhì)疏松的藥物，即益氣補腎活血方，并通過建立廢用性骨質(zhì)疏松大鼠模型，模擬臨床上廢用性骨質(zhì)疏松的生理病理過程，從多方面研究了益氣補腎活血方對廢用性骨質(zhì)疏松的預(yù)防治療作用。
[0006]為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提出如下技術(shù)方案:
[0007]—種預(yù)防和治療廢用性骨質(zhì)疏松的藥物，所述藥物包括以下原料藥制成:[0008]熟地、續(xù)斷、桑寄生、當(dāng)歸、桃仁、紅花、牛膝、骨碎補和甘草。
[0009]優(yōu)選的，各原料藥的重量份數(shù)為:熟地20 - 30份，續(xù)斷10 - 20份，桑寄生10 —20份，當(dāng)歸10 - 15份，桃仁8 — 10份，紅花10 — 15份，牛膝20 — 40份，骨碎補10 — 15份，甘草5 — 8份。
[0010]優(yōu)選的，各原料藥的重量份數(shù)為:熟地22 - 25份，續(xù)斷14 一 17份，桑寄生12 —16份，當(dāng)歸11 - 13份，桃仁8 — 10份，紅花10 — 13份，牛膝28 — 33份，骨碎補10 — 13份，甘草5 — 7份。
[0011]優(yōu)選的，各原料藥的重量份數(shù)為:熟地24份，續(xù)斷15份，桑寄生15份，當(dāng)歸12份，桃仁9份，紅花12份，牛膝30份，骨碎補12份，甘草6份。
[0012]優(yōu)選的,還包括以下重量份的原料藥:黃苗50 — 70份，太子參10 — 20份。
[0013]優(yōu)選的，各原料藥的重量份數(shù)為:黃芪55 - 65份，太子參13 — 16份，熟地22 —25份，續(xù)斷14 - 17份，桑寄生12 - 16份，當(dāng)歸11 一 13份，桃仁8 — 10份，紅花10 — 13份，牛膝28 - 33份，骨碎補10 - 13份，甘草5 — 7份。
[0014]優(yōu)選的，各原料藥的重量份數(shù)為:黃芪60份，太子參15份，熟地24份，續(xù)斷15份，桑寄生15份，當(dāng)歸12份，桃仁9份，紅花12份，牛膝30份，骨碎補12份，甘草6份。
[0015]本發(fā)明還提供上述的藥物的制備方法，其特征在于，步驟是:稱取配方量的原料藥加藥材體積5倍水，浸泡2h，第一次煎煮45min，倒出水煎液，加適量水，再次煎煮40min，合并兩次水煎液，濃縮成 一定濃度(劑量為480mg生藥/ml)，即得。
[0016]本發(fā)明的藥物可顯著改善廢用性骨質(zhì)疏松大鼠的骨代謝，明顯增加大鼠骨密度(BMD)和骨礦含量(BMC)，有效增加骨濕重和骨干重，顯著改善大鼠股骨的結(jié)構(gòu)和功能，促進(jìn)生物力學(xué)指標(biāo)的優(yōu)化；益氣補腎活血方可以明顯的降低血清堿性磷酸酶(ALP)、骨特異性堿性磷酸酶(BAP)，明顯增加血Ca、骨鈣素(BGP)、骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 (BMP-2)、尿羥脯氨酸HOP、HOP/Cr和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)的含量；益氣補腎活血方可以比較明顯的降低腫瘤壞死因子-α (TNF-α )、白細(xì)胞介素-4 (IL_4)、白細(xì)胞介素_6 (IL_6)的含量,還可明顯促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖，有效增加骨源性堿性磷酸酶(BALP)的活性，通過顯微鏡下觀察可發(fā)現(xiàn)交過骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為了成骨細(xì)胞，一定程度上說明了益氣補腎活血方可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化，影響骨代謝，增加骨形成，有助于治療廢用性骨質(zhì)疏松；可明顯促進(jìn)破骨細(xì)胞增殖，有效降低骨吸收陷窩的數(shù)量，說明了益氣補腎活血方可在一定程度上提高骨形成，降低骨吸收，促進(jìn)骨量的增加，對廢用性骨質(zhì)疏松有一定得預(yù)防作用。
[0017]本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。
【具體實施方式】
[0018]下面通過實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步說明，但不能理解為對本發(fā)明的限制。
[0019]實施例:益氣補腎活血方和補腎活血方及其制備方法
[0020]稱取黃芪60g，太子參15g，熟地24g，續(xù)斷15g，桑寄生15g，當(dāng)歸12g，桃仁9g，紅花12g,牛膝30g,骨碎補12g,甘草6g ;加藥材體積5倍水,浸泡2h,第一次煎煮45min,倒出水煎液，加適量水，再次煎煮40min，合并兩次水煎液，濃縮成一定濃度(劑量為480mg生藥/ml)，即得，稱為益氣補腎活血方劑。
[0021 ] 按上法稱取熟地24g，續(xù)斷15g，桑寄生15g，當(dāng)歸12g，桃仁9g，紅花12g，牛膝30g，骨碎補12g，甘草6g。加藥材體積5倍水，浸泡2h，第一次煎煮45min，倒出水煎液，加適量水，再次煎煮40min，合并兩次水煎液，濃縮成一定濃度(劑量為480mg生藥/ml )，即得，稱為補腎活血方劑。
[0022]下面通過實驗例I 一 4對本實施例制備的益氣補腎活血方和補腎活血方治療廢用性骨質(zhì)疏松的療效進(jìn)行評價。其中:
[0023]實驗材料:藥品為本實施例制備的益氣補腎活血方和補腎活血方，購自濟(jì)南市建聯(lián)中藥店(批號:20120501 ;生產(chǎn)許可證號:魯20100043);戊巴比妥鈉(PentobarbitalSodium),規(guī)格:25g/瓶,美國 Sigma(貨號:P3761 );|丐爾奇碳酸鈣 D3 片(Calcium Carbonateand Vitamin D3Tablets),規(guī)格:復(fù)方，惠氏制藥有限公司(批號:20100735)。[0024]動物:老年雄性SD大鼠，體重(350±20) g，SPF級，購于濟(jì)寧市任城區(qū)魯原動物飼料經(jīng)營部，動物許可證號=SCXK魯20080002。
[0025]大鼠廢用性骨質(zhì)疏松模型的建立:
[0026]實驗用大鼠分組:見具體實驗例。
[0027]麻醉各實驗組大鼠:將定量戊巴比妥鈉加適量蒸餾水配制成1%質(zhì)量百分濃度，實驗組大鼠按照40mg/kg的濃度腹腔注射進(jìn)行麻醉，待動物失去知覺時方可進(jìn)行實驗；空白對照組不做任何措施。
[0028]建立模型:用75%酒精將大鼠的右后肢和尾部近段進(jìn)行消毒，同時對直徑為1.2mm的醫(yī)用鋼絲進(jìn)行消毒，然后將醫(yī)用鋼絲穿過大鼠的右后肢踝部和肛門開口遠(yuǎn)側(cè)約1.5cm處的尾部，適當(dāng)調(diào)整松緊程度進(jìn)行打節(jié)固定，建模過程中若有出血的話即刻利用脫脂棉進(jìn)行壓迫止血，然后用石膏進(jìn)行固定，使用聚氨酯石膏繃帶纏繞至髖關(guān)節(jié)處2至3層，保持膝關(guān)節(jié)和踝關(guān)節(jié)于伸直位。整個過程完成后放入大鼠專用飼養(yǎng)籠中，每籠5只，在清潔級動物房中進(jìn)行飼養(yǎng)，調(diào)整室溫(20 ± 2 )°C，空氣濕度為40~60%，每日按照自然晝夜12h間隔照明，為了避免石膏松動和肢體壓瘡，每2周更換一次石膏。
[0029]給藥方案:制備大鼠廢用性骨質(zhì)疏松模型I周后，對各實驗組大鼠分別進(jìn)行灌胃給藥，益氣補腎活血方組:將益氣補腎活血方劑按照4800mg/kg的濃度對大鼠進(jìn)行灌胃，I次/天；補腎活血方組:將補腎活血方劑按照4800mg/kg的濃度對大鼠進(jìn)行灌胃，I次/天；模型組和空白對照組:每只大鼠按照10ml/kg給予生理鹽水進(jìn)行灌胃，I次/天；鈣爾奇組:將鈣爾奇碳酸鈣D3片用研缽研成細(xì)微粉末，然后用無菌蒸餾水配制成混懸液(Iml混懸液含有0.36mg鈣爾奇碳酸鈣D3)，然后按照3.6mg/kg的濃度對該組大鼠進(jìn)行灌胃，I次/天；每組均連續(xù)給藥I個月。
[0030]實驗例1:益氣補腎活血方和補腎活血方對廢用性骨質(zhì)疏松大鼠骨密度的影響
[0031]I骨密度(BMD)和骨礦含量(BMC)的測定
[0032]用1%戊巴比妥鈉按照40mg/kg的濃度對各實驗組大鼠腹腔注射進(jìn)行麻醉，然后用注射器在每只大鼠的頸動脈處進(jìn)行穿刺放血處死，鋪一次性中單，將大鼠放置在骨密度儀檢查床上，骨密度儀探頭下，選用動物全身骨密度測定軟件對被測大鼠進(jìn)行全身掃描。
[0033]選擇慢速掃描模式，76Kv電壓，150 μ Α。在雙能X射線骨密度分析儀的測量方式選項中選擇系統(tǒng)默認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)測量對各實驗組大鼠的全身、股骨和脊柱進(jìn)行骨密度分析，并準(zhǔn)確記錄數(shù)據(jù)，測定各實驗組大鼠的骨密度(BMD)和骨礦含量(BMC)，分別精確至0.01g和0.01g/cm2。
[0034]2骨濕重的測定:通過上述實驗將各實驗組大鼠麻醉處死并測定全身、股骨和脊柱的骨密度(BMD)和骨礦含量(BMC)后，切下每只大鼠的右后肢，用鑷子小心剔除干凈軟組織，去除附著的肌肉組織和結(jié)締組織，收取股骨進(jìn)行骨濕重的實驗測定，同時剝離脛骨，放入70%乙醇中固定，以備研究骨組織形態(tài)計量學(xué)的研究。用電子分析天平準(zhǔn)確稱取各實驗組大鼠的新鮮股骨濕重，實驗數(shù)據(jù)精確至0.01mg,并及時作好記錄。
[0035]全部大鼠的股骨骨濕重測量完畢后，用浸透生理鹽水的紗布將每組的右側(cè)股骨包好，置于一20°C低溫保存，以備下面的生物力學(xué)檢測。
[0036]3股骨干重、灰重測量:進(jìn)行完大鼠股骨生物力學(xué)的測定后，將各組大鼠的股骨標(biāo)本收集好，全部置于高溫爐(105±2) °C中烘烤I小時后稱量股骨干重；精確記錄各組大鼠股骨干重后，將各組標(biāo)本置于800°C的馬福爐中5.5小時，待其充分灰化后用1/10萬電子分析天平測各組灰重。
[0037]4數(shù)據(jù)處理:全部數(shù)據(jù)采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)結(jié)果以“均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差”表示，各實驗組結(jié)果之間采用單因素方差方法進(jìn)行統(tǒng)計分析，P < 0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，采用盲法評估。
[0038]5實驗結(jié)果
[0039]5.1骨密度(BMD)和骨礦含量(BMC)結(jié)果
[0040]各實驗組大鼠全身骨密度(BMD)和骨礦含量(BMC)的結(jié)果見表1_1。
[0041]表1-1益氣補腎活血方對廢用性骨質(zhì)疏松大鼠全身BMD和BMC的影響U ±s)
[0042]
【權(quán)利要求】
1.一種預(yù)防和治療廢用性骨質(zhì)疏松的藥物，其特征在于，所述藥物包括以下原料藥制成: 熟地、續(xù)斷、桑寄生、當(dāng)歸、桃仁、紅花、牛膝、骨碎補和甘草。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物，其特征在于，各原料藥的重量份數(shù)為: 熟地20 - 30份，續(xù)斷10 - 20份，桑寄生10 - 20份，當(dāng)歸10 — 15份，桃仁8 — 10份，紅花10 - 15份，牛膝20 - 40份，骨碎補10 - 15份，甘草5 — 8份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物，其特征在于，各原料藥的重量份數(shù)為: 熟地22 - 25份，續(xù)斷14 - 17份，桑寄生12 — 16份，當(dāng)歸11 — 13份，桃仁8 — 10份，紅花10 - 13份，牛膝28 - 33份，骨碎補10 — 13份，甘草5 — 7份。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物，其特征在于，各原料藥的重量份數(shù)為: 熟地24份，續(xù)斷15份，桑寄生15份，當(dāng)歸12份，桃仁9份，紅花12份，牛膝30份，骨碎補12份，甘草6份。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物，其特征在于，還包括以下重量份的原料藥:黃芪50-70份，太子參10 - 20份。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藥物，其特征在于，各原料藥的重量份數(shù)為: 黃芪55 - 65份，太子參13 - 16份，熟地22 — 25份，續(xù)斷14 一 17份，桑寄生12 —16份，當(dāng)歸11 - 13份，桃仁8 — 10份，紅花10 — 13份，牛膝28 — 33份，骨碎補10 — 13份，甘草5 — 7份。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的藥物，其特征在于，各原料藥的重量份數(shù)為: 黃芪60份，太子參15份，熟地24份，續(xù)斷15份，桑寄生15份，當(dāng)歸12份，桃仁9份，紅花12份，牛膝30份，骨碎補12份，甘草6份。
8.權(quán)利要求1一 7任一項所述的藥物的制備方法，其特征在于，步驟是:稱取配方量的原料藥加藥材體積5倍水，浸泡2h，第一次煎煮45min，倒出水煎液，加適量水，再次煎煮40min，合并兩次水煎液，濃縮成一定濃度(劑量為480mg生藥/ml)，即得。
【文檔編號】A61K36/804GK103919908SQ201410153048
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年4月16日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月16日
【發(fā)明者】于學(xué)美, 崔西泉, 孫建翠, 王榮梅, 吳雅迪, 董軍 申請人:泰山醫(yī)學(xué)院