一種殼聚糖光敏微球的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種殼聚糖光敏微球的制備方法，其以5-對(6-溴己氨基苯基)-10,15,20-三苯基卟啉（BHP）為原料，在相轉(zhuǎn)移催化劑的催化下與殼聚糖反應(yīng)生成卟啉側(cè)基殼聚糖光敏新材料，選擇具有抗腫瘤活性的中藥成分與上述合成的卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物經(jīng)乳化交聯(lián)法制備得到殼聚糖光敏微球。本發(fā)明將原本作用機(jī)制單一的抗腫瘤中藥藥效物質(zhì)與光動力細(xì)胞殺傷力相結(jié)合，發(fā)揮兩者的協(xié)同作用，既可提高藥物穩(wěn)定性及生物利用度，又可在光照下定向富集給藥，可以緩釋、控釋、靶向釋放藥物，達(dá)到高效低毒的目的；本發(fā)明可為研制新型的抗腫瘤靶向藥物新劑型提供一種新方法。
【專利說明】一種殼聚糖光敏微球的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種緩釋給藥制劑的制備方法，尤其是涉及一種殼聚糖光敏微球的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]緩釋給藥制劑是近年來發(fā)展的新劑型，是將藥物包載于天然或合成的高分子材料中制備而成，可提高藥物穩(wěn)定性及生物利用度，同時可以緩釋、控釋、靶向釋放藥物等。這一類藥物的種類很多，有脂質(zhì)體、固體脂質(zhì)納米粒、聚合物膠束、磁性納米粒等。具有抗腫瘤活性的中藥成分制備成緩釋給藥系統(tǒng)后，在提高溶解度和生物利用度，增強(qiáng)抗腫瘤活性等方面都有明顯的作用，是成功的劑型改進(jìn)。
[0003]殼聚糖是一類從蝦、蟹等甲殼類動物中的甲殼素經(jīng)化學(xué)方法脫乙酰基后提取的氨基高分子多糖，它 的來源豐富、成本低廉，是僅次于纖維素的第二大類天然大分子材料，具有良好的生物相容性、生物降解性和無毒性等特點(diǎn)，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于食品保健品、化妝品配方、工業(yè)水處理等領(lǐng)域。殼聚糖能增強(qiáng)親水性藥物如肽類和蛋白質(zhì)通過鼻腔和腸道上皮的吸收，是一種有潛力的新型緩控釋藥用輔料。
[0004]光動力療法(photodynamic therapy,F1DT)是近20年新發(fā)展起來的一種治療惡性腫瘤的方法，它利用特定的光敏劑在腫瘤組織中的選擇性富集，在特定波長光的照射下，通過O2的參與，造成腫瘤組織的定向損傷。該療法具有組織選擇性好，對正常組織損傷小，毒副作用小，抗癌譜廣等優(yōu)點(diǎn)。
[0005]卟啉是一類由四個吡咯環(huán)通過次甲基相連形成共軛骨架的大環(huán)化合物，它對迅速增殖的細(xì)胞有優(yōu)先積聚作用，即對癌細(xì)胞有定位作用。同時由于其大共軛骨架的存在，當(dāng)適當(dāng)波長的光照射時能產(chǎn)生可見熒光，并能釋放出單重態(tài)氧而對癌細(xì)胞起光氧化作用。卟啉的這兩個特殊性質(zhì)使它在在醫(yī)學(xué)研究中可做為檢測癌癥的光敏劑和抗癌藥物。事實(shí)上，人們設(shè)計(jì)并合成卟啉化合物作為光敏藥物用于臨床診斷和治療惡性腫瘤已有20多年的歷史。
[0006]目前，未見報(bào)道采用卟啉修飾殼聚糖制備成光敏新材料；將具有抗腫瘤活性的中藥成分制備成殼聚糖微球的研究報(bào)道也甚少；特別是注重提高靶向緩釋作用的中藥藥效物質(zhì)光敏微球未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]為了克服現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，本發(fā)明提供了一種殼聚糖光敏微球的制備方法，制備了卟啉側(cè)基殼聚糖光敏新材料，并制備了具有抗腫瘤活性的中藥成分的光敏微球。
一種殼聚糖光敏微球的制備方法，包括下述步驟:
(1)在一定的溶劑中，堿性條件下，以5-對(6-溴己氨基苯基)-10，15,20-三苯基卟啉為原料，在相轉(zhuǎn)移催化劑的催化下與殼聚糖反應(yīng)制備得到卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物；
(2)選擇具有抗腫瘤活性的中藥成分與卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物經(jīng)乳化交聯(lián)法制備成光敏微球。
[0008]本發(fā)明以5-對(6-溴己氨基苯基)-10，15，20-三苯基卟啉(BHP)為原料，在相轉(zhuǎn)移催化劑的催化下與殼聚糖反應(yīng)生成卟啉側(cè)基殼聚糖光敏新材料，選擇具有抗腫瘤活性的中藥成分與上述合成的卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物經(jīng)乳化交聯(lián)法制備得到殼聚糖光敏微球，其中，葉啉側(cè)基殼聚糖光敏新材料制備線路如下:
【權(quán)利要求】
1.一種殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于包括下述步驟: (1)在一定的溶劑中，堿性條件下，以5-對(6-溴己氨基苯基)-10，15,20-三苯基卟啉為原料，在相轉(zhuǎn)移催化劑的催化下與殼聚糖反應(yīng)制備得到卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物； (2)選擇具有抗腫瘤活性的中藥成分與卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物經(jīng)乳化交聯(lián)法制備成光敏微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于包括下述步驟: (1)將殼聚糖、堿加入燒瓶中，滴入一定的溶劑，20~80°C密封攪拌0.2~2h后，加入相轉(zhuǎn)移催化劑；再將5-對(6- 溴己氨基苯基)-10，15，20-三苯基卟啉溶解于一定量的氯仿后，逐滴加入燒瓶中，20~80°C回流2~20h后，冷卻至室溫；經(jīng)抽濾、洗滌、干燥得到卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物； (2)將卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物溶解在水相中，取濾液，去氣泡后得卟啉-殼聚糖溶液；取具有抗腫瘤活性的中藥成分溶于卟啉-殼聚糖溶液中，將上述溶液加至含有一定量乳化劑的油相中，攪拌乳化10~60min后,緩慢加入一定量交聯(lián)劑,攪拌30~360min后，經(jīng)離心、洗滌制得殼聚糖光敏微球。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，所述的溶劑為氯仿或水/氯仿混和溶液；所述的堿為為下列之一:碳酸鉀、碳酸鈉、氫氧化鈉或氫氧化鉀。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，所述的相轉(zhuǎn)移催化劑為下列之一:四丁基溴化胺、四丁基氯化銨、芐基三乙基氯化銨、三辛基甲基氯化銨、十二烷基三甲基氯化銨或十四烷基三甲基氯化銨。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，所述殼聚糖、堿、相轉(zhuǎn)移催化劑的重量比為1:0.5~10.0:0.5~10.0。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，所述的具有抗腫瘤活性的中藥成分為下列之一:苦參堿、冬凌草甲素、喜樹堿、紫杉醇。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，所述的油相為下列之一:液體石蠟、蓖麻油、正己烷、二甲硅油、液體石蠟石油醚混和液，所述的水相為I~10%的乙酸溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，所述的乳化劑為下列之一 =Span 80、十二烷基磺酸鈉、聚乙烯醇；所述的交聯(lián)劑為下列之一或二種以上的任意組合:乙二醛、戊二醛飽和的甲苯溶液、戊二醛、環(huán)氧化合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于:步驟(2)中，所述卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物與具有抗腫瘤活性的中藥成分的重量比為1:1.5~3.0。
10.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的殼聚糖光敏微球的制備方法，其特征在于包括下述步驟: (1)在三頸燒瓶中依次加入50mg殼聚糖、150mg碳酸鉀后,滴入2ml氯仿，40°C密封攪拌0.5h,加入20mg四丁基溴化銨；再將50mg 5-對(6-溴己氨基苯基)-10, 15, 20-三苯基卟啉溶解在15ml氯仿中，逐滴加入燒瓶中，60°C回流6h后，冷卻至室溫；抽濾，用氯仿洗至濾液無色，再用水洗3次，產(chǎn)物真空干燥得到卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物； (2)取33mg卟啉側(cè)基殼聚糖衍生物溶于5%的乙酸溶液中，取濾液，去氣泡后得卟啉-殼聚糖溶液 ； 取72.6mg冬凌草甲素溶于卟啉-殼聚糖溶液中，將上述溶液通過0.5mm注射器加至含Span 80的正己烷中，攪拌乳化30min后，緩慢注射入0.3ml戊二醛和Iml。1，4- 二氧六環(huán)的混合溶液，攪拌90min后停止；用石油醚配平，離心2~3次，轉(zhuǎn)速2500r/min, 5min ;再用3%的亞硫酸鈉溶液配平,在同樣條件下離心I次；將離心好的粗產(chǎn)物用兩層濾紙和一層精密濾膜抽濾，依次經(jīng)3%的亞硫酸鈉、水、異丙醇洗滌后，制得冬凌草甲素卟啉殼聚糖光敏微球。
【文檔編號】A61K9/16GK103920149SQ201410170175
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年4月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月25日
【發(fā)明者】何潔, 王琴, 洪秀松, 胡丹萍, 劉星雨 申請人:浙江中醫(yī)藥大學(xué)