一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物及制備方法
【專利摘要】一種應(yīng)用于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】中的防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物及制備方法，它的產(chǎn)品配方是，大黃，桂枝，丹參，川芎，地龍，金銀花；其制備方法是，將大黃、大黃、桂枝、丹參、川芎、地龍、金銀花用15倍的水量浸泡40分鐘后，第一次用武火煎煮70分鐘，第二次加10倍量得水用文火煎煮50分鐘，第三次加6倍量得水用文火煎煮30分鐘，將3次所煎藥液合并，紗布過濾后100℃水浴濃縮至150mL，4℃冰箱保存。該發(fā)明藥物組成簡單，配伍關(guān)系明確，藥味少，價格低廉，療效確切顯著，通過動物實驗證明具有抑制抑制血小板聚集，抑制PDGF-B表達的作用，有顯著的防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的作用，防止PCI術(shù)后再狹窄事件發(fā)生，易于被患者接受。
【專利說明】一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物及制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】中的一種中草藥，尤其是涉及一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物及制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]PTCA機械性擴張血管，拓開管壁，是外源性創(chuàng)傷，傷及絡(luò)脈，造成血行不暢，導(dǎo)致瘀血形成，屬“血瘀證”范疇。《圣濟總錄.傷折總論》謂:“論曰:脈者，血之府，血行脈中……，若因傷折，內(nèi)動經(jīng)絡(luò)，血行之道，不得宣統(tǒng)，瘀積不散，則為腫為痛?！啊稖?zé)峤?jīng)緯.方論》亦云:“絡(luò)傷則血不能循行……其傷處即瘀阻，阻久而蓄積，無陽氣以化之，乃為死血矣”陳無擇《三因方》所述“金刃所傷”。我國第一代的著名中西醫(yī)結(jié)合心血管病專家廖家禎教授認為PTCA術(shù)后RS從其病理過程與創(chuàng)傷修復(fù)相似，辨治當(dāng)類同于中醫(yī)修復(fù)創(chuàng)傷的治法。其發(fā)病理論涉及瘀，痰，虛等多個方面，病機為臟氣虧虛為本，痰瘀阻滯為標(biāo)。因PTCA系為外源性創(chuàng)傷,導(dǎo)致血脈受損,瘀血內(nèi)停,毒邪壅于局部,與外傷的創(chuàng)傷過程類似,并根據(jù)病變局部的感染因素和炎癥反應(yīng)，PTCA術(shù)后RS的中醫(yī)發(fā)病機制不單純是痰瘀和虛，局部特點應(yīng)為瘀毒互結(jié)，兼以正氣虧虛。中藥治療理論則主要是活血化瘀，豁痰去濁，兼以扶正等方面，同時針對病變局部瘀毒互結(jié)的病機特點治以通下瘀毒，故治療以“活血化瘀，通下瘀毒兼扶正氣”達到防止PCI術(shù)后RS的目的。本中藥復(fù)方是由大黃、桂枝、丹參、川芎、地龍、金銀花組成。大黃破瘀瀉熱，為君藥，丹參、川芎為活血祛瘀之藥，與大黃配伍，瘀熱并治，地龍為破血逐瘀之藥，金銀花芳香疏散，清熱解毒共為臣藥，桂枝辛散溫通，通行氣血經(jīng)脈為佐藥。該方具有活血化瘀，通下瘀毒兼扶正氣之功效，使蓄血去，瘀毒清，諸證平。 [0003]現(xiàn)代藥理研究證明:大黃配伍促進了大黃酸的吸收利用，家兔灌服湯后，達峰濃度較灌服單味大黃顯著提高，達峰時間也有所提前，有利于迅速產(chǎn)生抗血栓的作用，灌胃給藥后可抑制動物血栓形成和血小板聚集。丹參的提取物在抗血栓作用方面表現(xiàn)較顯著。地龍含有蚓激酶物質(zhì)，能夠阻止體外血栓形成，抑制PTCA術(shù)后VSMC增生，減輕內(nèi)膜增生，降低再狹窄率的作用。金銀花有抑菌，抗炎抗病毒的作用，能顯著降低多種模型小鼠血清膽固醇(Tc)及動脈粥樣硬化指數(shù)，提高高密度脂蛋白、膽固醇(HDL-c)含量，保護胰腺B細胞及弱降糖作用。
[0004]中藥復(fù)方的作用機制探討:經(jīng)皮冠狀動脈介入治療(percutaneous coronaryintervention, PCI)治療冠狀動脈狹窄，最佳的心肌再灌注對接受PTCA的AMI對病人的生存是重要的，術(shù)后再狹窄發(fā)生率高達10 %~20 %。Danenberg證實在新生內(nèi)膜內(nèi)，巨噬細胞顯著增多并且表達多種生長因子，細胞因子和酶參與新生膜的形成。當(dāng)球囊損傷血管壁的早期，由于內(nèi)皮細胞受損，基底膜暴露，膠原纖維粘連等和促凝血物質(zhì)釋放入血液，同時多種細胞因子生長因子和趨化因子分泌增加，從而促進了炎細胞侵入和有害物質(zhì)的透入，誘發(fā)局部病毒感染，進而啟動和引起一系列血管損傷和修復(fù)反應(yīng)，引起大量的血小板聚集、黏附、釋放。其中大量的TOGF-B促使單核巨噬細胞、平滑肌細胞向內(nèi)膜下遷移、增生，同時產(chǎn)生多種細胞因子和生長因子，再通過自分泌和旁分泌的作用，形成復(fù)雜的作用網(wǎng)絡(luò)，導(dǎo)致局部細胞脂質(zhì)代謝異常，泡沫細胞形成和細胞基質(zhì)過量產(chǎn)生，形成動脈粥樣硬化特征性斑塊，導(dǎo)致再狹窄的發(fā)生。TOGF-B或其受體的特異性阻滯劑能夠抑制內(nèi)膜的增生。任宏生等實驗研究表明西藥氯吡格雷可以減輕兔髂腹動脈球囊損傷后血管內(nèi)膜增生，抑制TOGF-B表達。本實驗表明，模型組球囊損傷內(nèi)膜后，損傷動脈可見有明顯的新生內(nèi)膜形成，中藥組內(nèi)膜厚度與面積、內(nèi)膜/中膜厚度比、內(nèi)膜/中膜面積比較模型組顯著減少，中藥復(fù)方的通下瘀毒，扶助正氣之功效使炎細胞和有害物質(zhì)不易透入，抑制血小板聚集，黏附及血管平滑肌細胞增殖，使I3DGF-B的分泌減少，內(nèi)膜增生減低，明顯抑制管腔狹窄，為中醫(yī)藥防治PCI術(shù)后的再狹窄提供了有利有理的實驗依據(jù)。
[0005]目前，對于防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物，在西藥方面應(yīng)用他汀類藥物和抗血小板藥物，毒副作用很大，容易肝損傷和出血等，中藥未見防治主動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物。因此，研制開發(fā)一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物及制備方法一直是亟待解決的新課題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明目的在于針對上述問題，提供一種療效確切、實際針對性強、毒副作用小、質(zhì)量穩(wěn)定可靠、成本低、方便服用的一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物及制備方法。
[0007]本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的:一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物，它的產(chǎn)品配方的重量比是，大黃10-20g，桂枝10-15g，丹參15-20g，川芎10-15g，地龍10-15g，金銀花10-15g ;—種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物的制備方法，其制備方法是，將大黃、桂枝、丹參、川芎、地龍、金銀花用15倍的水量浸泡40分鐘后，第一次用武火煎煮70分鐘，第二次加10倍量得水用 文火煎煮50分鐘，第三次加6倍量得水用文火煎煮30分鐘，將3次所煎藥液合并，紗布過濾后10(TC水浴濃縮至150mL，4°C冰箱保存，即得成品。
[0008]本發(fā)明的要點在于它的產(chǎn)品配方及制備方法。冠心病是危害人類生命的最主要疾病之一。目前心血管領(lǐng)域積極開展了介入治療，以經(jīng)皮冠狀動脈腔內(nèi)成形術(shù)(percutaneoustransluminal coronary angioplasty, PTCA)為基礎(chǔ)的PCI迅速發(fā)展，成為冠心病血管重建治療的較成熟的手段，成功搶救許多患者生命。介入治療后RS率已經(jīng)從PTCA時代的20 % -30 %降至目前藥物支架時代的5 % -8 %，但是RS仍是影響介入治療中、遠期療效的重要因素。目前常規(guī)西藥防治過程中出現(xiàn)對肝功、腎功損害及大出血等的嚴重問題仍未能解決，因此PCI術(shù)后RS的中醫(yī)藥防治的研究成了人們關(guān)注的新熱點。本文旨在研究中藥復(fù)方對血管內(nèi)皮損傷后I3DGF-B的影響來預(yù)防PCI術(shù)后RS。
[0009]再狹窄是經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動脈成形術(shù)(Percutaneous Transluminal CoronaryAngioplasty, PTCA)后最常見的并發(fā)癥,術(shù)中對血管內(nèi)膜、甚至對中膜造成一定損傷,本研究旨在通過動物實驗探討中藥復(fù)方的作用機制，為中藥防治PTCA術(shù)后再狹窄提供可靠的理論依據(jù)。
[0010]大黃:性味及歸經(jīng):苦，寒。脾、胃、大腸、肝、心包經(jīng)。功效:攻積滯；清濕熱；灣火；涼血；祛瘀；解毒。主治:實熱便秘；熱結(jié)胸痞；濕熱瀉?。稽S疸；淋病；水腫腹?jié)M；小便不利；目赤；咽喉腫痛；口舌生瘡；胃熱嘔吐；吐血；咯血；衄血；便血；尿血；蓄血；經(jīng)閉；產(chǎn)后瘀滯腹痛；癥瘕積聚；跌打損傷；熱毒癰瘍；丹毒；燙傷?，F(xiàn)代藥理研究表明，大黃對消化系統(tǒng)的影響:(1)瀉下作用，(2)利膽、保肝，(3)促進胰液分泌、抑制胰酶活性，(4)抗胃及十二指腸潰瘍；對血液系統(tǒng)的影響:⑴止血作用，⑵降血脂；抗感染作用:(I)抗病原微生物作用:抗炎、解熱作用，⑵免疫調(diào)節(jié):蒽醌衍生物可抑制非特異性免疫功能，⑶抗衰老抗氧化作用，國內(nèi)外越來越多學(xué)者證明，大黃所含鞣質(zhì)有很好的抗氧化作用。
[0011]桂枝:最早記載于《名醫(yī)別錄》。性味歸經(jīng):辛、甘，溫。歸心、肺、膀胱經(jīng)。功效:發(fā)汗解肌，溫經(jīng)通脈，助陽化氣，散寒止痛?，F(xiàn)代藥理作用:擴張血管、促進發(fā)汗，(I)擴張血管，調(diào)節(jié)血液循環(huán)，使血液流向體表；(2)抑制IgE所致肥大細胞顆粒反應(yīng)，降低補體活性，抗過敏作用，抗菌、抗病毒。
[0012]丹參:又名赤參，紫丹參，紅根等。性味歸經(jīng):苦微寒，歸心、心包、肝經(jīng)。功效:活血祛瘀，涼血消癰，養(yǎng)血安神?，F(xiàn)代藥理作用:(1)強心:加強心肌收縮力、改善心臟功能，不增加心肌耗氧量；(2)對血管作用:擴張冠脈，增加心肌血流量，擴張外周血管，血流增加，腦血流量下降；(3)抗血栓形成:提高纖溶酶活性，延長出、凝血時間，抑制血小板聚集(提高血小板內(nèi)cAMP水平抑制TXA2合成)，改善血液流變學(xué)特性(血粘度降低、紅細胞電泳時間縮短)；(4)改善微循環(huán)，促進組織的修復(fù)與再生作用，保肝:改善肝微循環(huán)；抗菌:丹參制劑中含有隱丹參酮、二氫丹參酮，對體外的葡萄球菌、大腸桿菌、變性桿菌有抑制作用；降血脂作用:丹參能使主動脈粥樣斑塊形成面積明顯減少，血清總膽固醇、甘油三酯、均有一定程度的降低，丹 參可抑制高脂膳食家兔的血脂上升，通過研究發(fā)現(xiàn)丹參素還能抑制細胞內(nèi)源性膽固醇的合成。
[0013]川芎:性味與歸經(jīng)，辛，溫。歸肝、膽、心包經(jīng)。功能與主治:活血行氣，祛風(fēng)止痛。用于月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕腹痛，胸脅刺痛，跌撲腫痛，頭痛，風(fēng)濕痹痛?，F(xiàn)代藥理作用:
(I)對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用:川芎有明顯的鎮(zhèn)靜作用；(2)對心血管系統(tǒng)的作用:對心臟的作用，川芎煎劑對離體蟾蜍和蛙心臟，在濃度在10-5-10-4時使收縮振幅增大、心率稍慢；
(3)對平滑肌的作用；(4)抗菌作用；(5)抗放射作用；(6)其它作用:川芎嗪能增加麻醉兔的腎血流量，并能利尿。
[0014]地龍:又名蚯蚓，最早記載大約是《詩經(jīng)》。《神農(nóng)本草經(jīng)》將其列為下品藥。藥性:咸、寒，歸肝、脾、膀胱經(jīng)；具有清熱息風(fēng)，平喘，通絡(luò)，利尿之功效；“主傷寒瘧疾，大熱狂煩，及大人小兒小便不通，急慢驚風(fēng)，歷節(jié)風(fēng)痛。”現(xiàn)代藥理研究表明，地龍具有(I)降血脂；(2)抗菌；(3)抗氧化；(4)降壓和抗心律失常；(5)抗凝血溶血栓的雙重作用；(6)解熱、抗炎、鎮(zhèn)痛；(7)免疫調(diào)節(jié)。
[0015]金銀花:性能，甘、寒。歸肺、心、胃經(jīng)。功效，清熱解毒，疏散風(fēng)熱。應(yīng)用，(I)癰腫疔瘡，(2)外感風(fēng)熱，溫病初起，(3)熱毒血痢。藥理作用:本品具有廣譜抗菌作用，對金黃色葡萄球菌、痢疾桿菌等致病菌有較強的抑制作用，對鉤端螺旋體、流感病毒及致病霉菌等多種病原微生物亦有抑制作用；金銀花煎劑能促進白細胞的吞噬作用；有明顯的抗炎及解熱作用。本品有一定降低膽固醇作用。
[0016]一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物及制備方法與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有藥物組成簡單，配伍關(guān)系明確，藥味少，價格低廉，療效確切顯著，通過動物實驗證明具有抑制抑制血小板聚集，抑制TOGF-B表達的作用，有顯著的防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的作用，防止PCI術(shù)后再狹窄事件發(fā)生，易于被患者接受等優(yōu)點，將廣泛的應(yīng)用于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】中。
【專利附圖】

【附圖說明】[0017]下面結(jié)合附圖及實施例對本發(fā)明進行詳細說明。
[0018]圖1是TOGF-B免疫組化染色圖象分析結(jié)果圖。
【具體實施方式】
[0019]實施例一
[0020]將大黃10g，桂枝15g，丹參20g，川芎14g，地龍10g，金銀花15g用15倍的水量浸泡40分鐘后，第一次用武火煎煮70分鐘，第二次加10倍量得水用文火煎煮50分鐘，第三次加6倍量得水用文火煎煮30分鐘，將3次所煎藥液合并，紗布過濾后10(TC水浴濃縮至150mL，4°C冰箱保存；舒降之40mg/片，批號:國藥準字J20060032，由杭州默沙東制藥有限公司提供；阿司匹林IOOmg/片，批號:BTA6015，由拜爾藥業(yè)集團有限公司提供；研磨后，雙蒸水溶解，13.5ml相當(dāng)含舒降之1.5mg、阿司匹林3.7mg，4度冰箱保存，即得成品。
[0021]實施例二[0022]將大黃20g，桂枝10g，丹參18g，川芎10g，地龍15g，金銀花IOg用15倍的水量浸泡40分鐘后，第一次用武火煎煮70分鐘，第二次加10倍量得水用文火煎煮50分鐘，第三次加6倍量得水用文火煎煮30分鐘，將3次所煎藥液合并，紗布過濾后10(TC水浴濃縮至150mL，4°C冰箱保存；舒降之40mg/片，批號:國藥準字J20060032，由杭州默沙東制藥有限公司提供；阿司匹林IOOmg/片，批號:BTA6015，由拜爾藥業(yè)集團有限公司提供；研磨后，雙蒸水溶解，13.5ml相當(dāng)含舒降之1.5mg、阿司匹林3.7mg，4度冰箱保存，即得成品。
[0023]實施例三
[0024]大黃16g，桂枝12g，丹參16g，川芎13g，地龍llg，金銀花14g用15倍的水量浸泡40分鐘后，第一次用武火煎煮70分鐘，第二次加10倍量得水用文火煎煮50分鐘，第三次加6倍量得水用文火煎煮30分鐘，將3次所煎藥液合并，紗布過濾后100°C水浴濃縮至150mL，4°C冰箱保存；舒降之40mg/片，批號:國藥準字J20060032，由杭州默沙東制藥有限公司提供；阿司匹林IOOmg/片，批號:BTA6015，由拜爾藥業(yè)集團有限公司提供；研磨后，雙蒸水溶解，13.5ml相當(dāng)含舒降之1.5mg、阿司匹林3.7mg,4度冰箱保存，即得成品。
[0025]以上述實施例制備的防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物為例作出的實驗報告。
[0026]探討中藥復(fù)方對家兔血管內(nèi)皮損傷后內(nèi)膜增生和血小板源生長因子B蛋白(PDGF-B-B)表達的影響。方法:將健康新西蘭大耳白兔40只，隨機分模型組(η = 10)、中藥組(η = 10)、西藥組(η = 10)、空白組(η = 10),模型組、中藥組、西藥組高酯飼料喂養(yǎng)4周后行腹主動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)造模。術(shù)后各組予正常飼料喂養(yǎng)，中藥組予中藥復(fù)方灌胃4周，西藥組予舒降之、阿司匹林灌胃4周，模型組、空白組予生理鹽水灌胃4周。造模術(shù)4周后處死家兔取腹主動脈觀察動脈病理形態(tài)學(xué)改變，測量內(nèi)膜、中膜厚度和面積，用免疫組化法觀察各組對血小板源性生長因子B蛋白(TOGF-B)表達的影響。結(jié)果:與模型組比較，中藥組內(nèi)膜/中膜厚度比、內(nèi)膜/中膜面積比顯著減少(Ρ〈0.05);中藥組使血管壁TOGF-B表達下降。結(jié)論:核承氣桃改良方使兔腹主動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生減低，對血管內(nèi)膜增殖早期血小板源生長因子B蛋白(TOGF-B)有拮抗作用。提示其對血管內(nèi)皮損傷有一定的保護作用，為抗PTCA術(shù)后再狹窄提供較充足的實驗依據(jù)。
[0027]再狹窄是經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動脈成形術(shù)(Percutaneous Transluminal CoronaryAngioplasty,PTCA)后最常見的并發(fā)癥,術(shù)中對血管內(nèi)膜、甚至對中膜造成一定損傷，本研究旨在通過動物實驗探討中藥復(fù)方的作用機制，為中藥防治PTCA術(shù)后再狹窄提供可靠的理論依據(jù)。
[0028]1材料與方法
[0029]1.1實驗材料
[0030]動物及飼料:由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心引進的封閉群健康新西蘭大耳白兔，微生物控制級別為β級，體重為2-2.5kg，數(shù)量40只，雌雄不限，在普通環(huán)境中飼養(yǎng)。其中10只為正常對照組，喂普通飼料，不施行手術(shù)；30只喂特制的模型飼料，并施行手術(shù)。模型飼料(基礎(chǔ)飼料79 %、15 %蛋黃粉、豬油5 %、膽固醇I % )均由遼寧中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心加工。
[0031]主要試劑:roGF_B抗體，SA1020免疫組化染色試劑盒，均由武漢博士德生物公司提供。
[0032]主要儀器:SN — 695型智能放免r測量儀，上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠生產(chǎn)。SANY0MDF — 382E超低溫冰箱，日本三洋公司生產(chǎn)。恒溫水浴箱、S m a r t V i e w 2001生物電泳圖像分析軟件等。
[0033]中藥和西藥:大黃10_20g，桂枝10_15g，丹參15_20g，川芎10_15g，地龍10_15g，金銀花10-15g ;其制備方法是，將大黃、大黃、桂枝、丹參、川芎、地龍、金銀花用15倍的水量浸泡40分鐘后，第一次用武火煎煮70分鐘，第二次加10倍量得水用文火煎煮50分鐘，第三次加6倍量得水用文火煎煮30分鐘，將3次所煎藥液合并，紗布過濾后100°C水浴濃縮至150mL，4°C冰箱保存；舒降之40mg/片，批號:國藥準字J20060032，由杭州默沙東制藥有限公司提供；阿司匹林IOOmg/片，批號:BTA6015，由拜爾藥業(yè)集團有限公司提供；研磨后，雙蒸水溶解，13.5ml相當(dāng)含舒降之1.5mg、阿司匹林3.7mg, 4度冰箱保存，即得成品。
[0034]1.2實驗方法
[0035]實驗分組:健康新西蘭大耳白兔40只將動物分模型組(η = 10)、中藥組(η = 10)、西藥組(η = 10)、空白組(η = 10)。
[0036]動物造模:30只兔高酯飼料喂養(yǎng)4周造成動脈粥樣硬化模型[1]，然后用25%烏拉坦每0.4ml/100g腹腔注射麻醉，于右側(cè)腹股溝區(qū)備皮、消毒、鋪巾，利多卡因少量局麻，切皮撥肉分離股動脈，兩動脈夾分別夾住股動脈近心遠心兩端暴露2厘米左右，剪開動脈周長三分之一口，用6F穿刺針刺破動脈壁，經(jīng)導(dǎo)絲導(dǎo)入直徑1.5—2.0mm球囊導(dǎo)管(依血管直徑大小而定)，至腎動脈下方，鹽水充盈球囊(壓力為4一6Kpa)，緩慢回拉導(dǎo)管至切口處抽空球囊內(nèi)液體降至零，重復(fù)上述過程三次，間隔5min重復(fù)一次，達到剝落腹主動脈內(nèi)皮的目的。撤出導(dǎo)管，結(jié)扎股動脈，縫合皮膚，術(shù)后3天連續(xù)肌注青霉素80萬u/只/天，預(yù)防感染。
[0037]術(shù)后喂飼:從內(nèi)膜剝脫術(shù)后第2天開始每日每只兔喂普通飼料50g，中藥組予中藥復(fù)方13.5ml/kg灌胃4周，西藥組予舒降之、阿司匹林混合液13.5ml/kg灌胃4周，模型組、空白組予生理鹽水13.5ml/kg灌胃4周(給藥量按人和動物間體表面積折算的等效劑量比率表計算)。
[0038]1.3病理標(biāo)本采集與觀察:腹主動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)后4周處死家兔，切開腹壁暴露腹腔，將腸管翻至一側(cè)，見到腹主動脈與下腔靜脈并行于脊柱旁，分離腹主動脈，截取2cm長腹主動脈用生理鹽水沖洗后放于10%的中性甲醛溶液中-20°C。[0039]2術(shù)后指標(biāo)測定
[0040]2.1中藥對動脈壁I3DGF-B含量影響:取腹主總動脈，制成石蠟切片，3% H202滅活內(nèi)源性酶lOmin，加復(fù)合酶消化液置8min，滴加正常山羊血清封閉液置20min，加TOGF-B鏈單克隆抗體，4°C過夜，次日加生物素化山羊抗鼠/兔IgG，37 V反應(yīng)40min，滴加試劑SABC，37V反應(yīng)30min，顯色，脫水，中性樹膠封固。新生內(nèi)膜部位棕黃色顆粒為I3DGF-B染色陽性信號。
[0041]2.2藥物對血管內(nèi)膜增生的影響:標(biāo)本脫水、石蠟包埋，切片5μπιΗΕ染色，在SEM2IPS圖像分析系統(tǒng)(日本SONY公司)，測量動脈內(nèi)膜厚度、中膜厚度(μπι)，計算內(nèi)膜/中膜厚度比，測定管腔面積、內(nèi)彈力板圍繞面積和外彈力板圍繞面積，以內(nèi)彈力板圍繞面積減管腔面積得到新生內(nèi)膜面積，外彈力板圍繞面積減內(nèi)彈力板圍繞面積得到中膜面積(mm2)，計算內(nèi)膜/中膜面積比。每只動物隨機選取3張切面分析，取平均值。
[0042]2.3數(shù)據(jù)處理(統(tǒng)計學(xué)方法):采用SPSS10.0軟件統(tǒng)計學(xué)處理，數(shù)據(jù)以平均值土標(biāo)準差(又土S)表示〃計量資料組AN0VA，兩組間比較用q檢驗，計數(shù)資料率用x2檢驗，P〈0.05為差異有顯著性意義。圖像分析和統(tǒng)計學(xué)處理圖像經(jīng)S m a r t V i e w 2001生物電泳圖像分析軟件(上海復(fù)日科技有限公司)進行處理、分析。
[0043]3 結(jié)果
[0044]3.1各組血管內(nèi)膜和中膜厚度及面積比的比較
[0045]表一:各組血管內(nèi)膜和中膜厚度及面積比的比較(X土s)
[0046]
【權(quán)利要求】
1.一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物，其特征在于:它的產(chǎn)品配方的重量比是，大黃 10-20g，桂枝 10-15g，丹參 15-20g，川芎 10_15g，地龍 10_15g，金銀花 10_15g。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治動脈內(nèi)膜損傷后內(nèi)膜增生的藥物的制備方法，其特征在于:其制備方法是，將大黃、桂枝、丹參、川芎、地龍、金銀花用15倍的水量浸泡40分鐘后，第一次用武火煎煮70分鐘，第二次加10倍量得水用文火煎煮50分鐘，第三次加6倍量得水用文火煎煮30分鐘，將3次所煎藥液合并，紗布過濾后100°C水浴濃縮至150mL，4°C冰箱保存，即得成品。
【文檔編號】A61P9/00GK103948687SQ201410209917
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年5月19日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月19日
【發(fā)明者】宮麗鴻 申請人:遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院