一種新型的完全水溶的光敏劑單體及其制備方法及應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種新型的完全水溶的光敏劑單體，其以葉綠素-a為原料通過脫鎂葉綠酸-a直接合成3-去乙烯基-3-（1’-己羥）乙基-脫鎂葉綠酸-a甲酯，并經堿金屬氫氧化物處理獲得結構式所示的水溶性鹽，其中，R1、R2、R3為：H或M，且R1、R2、R3不同時為H，M選自Na、K或NH4+。上述水溶性鹽并不改變具備光敏性的大環(huán)結構，水溶性好，因而在應用上帶來諸多方便，適宜制備用于光動力療法的藥物，用于治療或診斷：惡性腫瘤（特別是所有管腔內淺表性惡性腫瘤）、癌前病變、良性病變。
【專利說明】
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及光動力療法的藥物一光敏劑，具體涉及一種新型的完全水溶的光敏劑 單體及其制備方法及應用。 一種新型的完全水溶的光敏劑單體及其制備方法及應用
【背景技術】
[0002] 作為光動力療法的新的藥物，第二代光敏劑受到普遍關注。以葉綠素為原料制備 第二代光敏劑的方法及所得的產品也已經有了很多。ZL01823093. 8涉及提取螺旋藻生物質 制造二氫卟酚e6、紫紅素5和紫紅素18的混合物光敏劑。
[0003] 美國專利第5198460號及其引用的參考文獻，通過低溫破碎螺旋藻細胞，再進行 萃取，層析純化和再結晶分離得到脫鎂葉綠酸_a甲酯，然后在回流溫度下在三甲基吡啶中 進行熱脫羧分離。由此得到的焦脫鎂葉綠酸_a甲酯用正己醇和酸處理形成二己基醚基團 (部分）。最后皂化去除甲酯，得到3-去乙烯基-3(1'-己羥）乙基-焦脫鎂葉綠酸-α， 或稱為ΗΡΡΗ。ΗΡΡΗ是比二氫卟酚e6更好的光敏劑。但是其過程復雜。
[0004] 美國7053210B2首先用一種堿性物三甲基酯來處理二氫卟酚e6,加熱得到焦脫鎂 葉綠酸a，在酸性環(huán)境中用正己醇處理將其轉化為HPPH。其步驟減少，控制條件容易滿足， 產率高。然而獲得二氫卟酚e6也還是要經過一些過程的（如ZL01823093. 8)。
【發(fā)明內容】
[0005] 為了通過簡單高效的方法獲得新的光敏劑，本發(fā)明目的在于以葉綠素_a為原料 通過脫鎂葉綠酸_a直接合成獲得可滿足光動力療法的新物質，以克服已有技術過程復雜 的弊端。
[0006] 本發(fā)明首先要實現的目的是提供一種新型的完全水溶的光敏劑。
[0007] 本發(fā)明提供的新型的完全水溶的光敏劑是式III、式IV所示的水溶性鹽，
[0008]
【權利要求】
1.式I、式II所示的化合物，以及由它們制備的式III、式IV所示的水溶性鹽，
其中，R1、R2、R3為：Η或M，且R1、R2、R3不同時為H，M選自Na、K或NH4。
2. 權利要求1中式I、式II所示的化合物的制備方法，其特征在于：包括下述步驟： A) 以葉綠素-a為原料制備脫鎂葉綠酸-a甲酯； B) 由脫鎂葉綠酸_a甲酯制得3-去乙烯基-3- ( Γ -己羥）乙基-脫鎂葉綠酸-a甲 酯，即為式I和式II所示的化合物； C) 純化，得式I和式II所示的化合物單體。
3. 根據權利要求2所述的方法，其特征在于：在步驟A)，將葉綠素-a浸膏溶解于預 先配制好的H2S0 4/甲醇混合溶液中，在室溫下攪拌:T5h后，將其倒入水中，用有機溶劑萃 取，用水洗滌萃取液，去除有機溶劑后的殘余物用乙酸乙酯/植物油抽提溶劑結晶；在步 驟B)，將脫鎂葉綠酸-a甲酯溶解于CH 2C12中，加入2(Γ40%溴化氫/乙酸溶液，反應混合物 在18~25°C攪拌反應:T5h，然后在低于50°C下去除CH 2C12，所得物用植物油抽提溶劑處理， 然后將其溶解于無水CH2C1 2中，加入正己醇、碳酸鉀，在室溫下攪拌2~5h，將其倒入水中， 用有機溶劑萃取，用水洗滌萃取液，去除有機溶劑，殘留物經硅膠柱層析分離純化得黑色固 體粉末；在步驟C)，將步驟B)所得物用正已烷溶解，壓入手性層析柱中，用正已烷/乙醇 =70/3(Γ95/5進行洗脫，將洗脫液分段接收，定性檢測后，相應部分分別合并濃縮至干，得式 I和式II所示的化合物。
4. 根據權利要求3所述的方法，其特征在于：在步驟A)，所述H2S04的體積比濃度為 39Γ8% ;所述用于萃取有機溶劑為CH2C12或CHC13 ;所述結晶包括先用乙酸乙酯溶解，然后再 加入植物油抽提溶劑，乙酸乙酯/植物油抽提溶劑的體積比為3/7~7/3 ;在步驟B)，所述用 植物油抽提溶劑處理包括析晶，洗晶過程，重復2~3次；所述用于萃取有機溶劑為CH2C1 2或 CHC13 ;所述硅膠柱層析包括：用20(Γ300目硅膠作固定相，用二氯甲烷/乙酸乙酯體積比為 8/1~20/1的混合溶劑作流動相。
5. 權利要求1中式III、式IV所示的水溶性鹽的制備方法，其特征在于：包括下述步驟： D) 由式I或式II所示的化合物單體制得3-去乙烯基-3- (Γ -己羥）乙基-脫鎂葉綠 酸-a甲酯水溶性鹽，即分別為式III或式IV所示的化合物； E) 精制純化，得式III或式IV所示的化合物單體。
6. 根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于：在步驟D)將式I或式II所示的化 合物單體溶解于乙腈或丙酮、或四氫呋喃中，加入氫氧化鈉、氫氧化鉀或氫氧化銨水溶液， 混合物在熱水浴下超聲反應2~3h，將反應液過濾，固體物以水/乙腈或丙酮、或四氫呋喃結 晶；在步驟E)將步驟D)所得晶體用甲醇或乙腈溶解，壓入反相柱，用堿調PH > 7的甲醇或 乙腈/水混合液進行洗脫，將洗脫液分段接收，定性檢測后，相應部分分別合并濃縮至干， 再將濃縮物真空干燥24~36h，得黑色單體產物。
7. 根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于：在步驟D)所述氫氧化鈉或氫氧化 鉀水溶液濃度為〇. 5~4mol · ΙΛ氫氧化銨濃度為4. (Γ8. Omol · I71 ;所述熱水浴溫度為 45~55°C;所述以水/乙腈或丙酮、或四氫呋喃結晶包括將前述過濾的固體物溶解在水中，之 后加入乙腈或丙酮、或四氫呋喃，攪拌后靜置，加入乙腈或丙酮、或四氫呋喃的量為溶解用 水量的 20?100/lml/ml ; 在步驟E)所述反相柱使用的填料為C18;所述甲醇或乙腈/水混合液的體積比為 3/7?7/3。
8. 用于光動力療法的藥物組合物，其特征在于：其包含至少一種可藥用的輔料和權利 要求1中式III或式IV所示的水溶性鹽。
9. 權利要求1中式III或式IV所示的水溶性鹽和權利要求8所述的藥物組合物在制備藥 物中的用途，所述藥物用于光動力療法治療或診斷：惡性腫瘤、癌前病變、良性病變。
10. 權利要求1中的化合物及水溶性鹽的檢測方法，其特征在于： 1) 、對式I、式II所示的化合物，用稀釋劑超聲溶解，用高效液相色譜法，使用手性柱， 檢測波長407nm，洗脫液為正己烷：無水乙醇（94:6)，稀釋劑為正己烷/無水乙醇（94:6); 2) 、對式III或式IV所示的水溶性鹽，用高效液相色譜法，使用反相色譜柱，檢測波長為 395nm，梯度洗脫，流動相A :K2HP04水溶液，流動相B :甲醇，稀釋劑：水。
【文檔編號】A61K41/00GK104086554SQ201410238812
【公開日】2014年10月8日 申請日期:2014年5月30日 優(yōu)先權日:2014年5月30日
【發(fā)明者】丁志堅, 韓臻, 周春秋, 陳雙文, 蘇文祖, 梁玉杰, 劉海明 申請人:桂林暉昂生化藥業(yè)有限責任公司