一種管狀組織工程支架及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種管狀組織工程支架及其制備方法。所述管狀組織工程支架內(nèi)部中空，其管壁由多層薄膜通過生物粘合劑粘合而成。所述制備方法包括：在薄膜的單面或雙面涂覆生物粘合劑；繞軸卷曲所述薄膜使得薄膜層間通過所述生物粘合劑粘合而成多層薄膜的管壁；抽出軸使得形成內(nèi)部中空的管狀組織工程支架。本發(fā)明的方法利用生物粘合劑使薄膜形成管狀結(jié)構(gòu)，所述方法直接在平面薄膜上操作，材料選擇非常靈活，結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，管徑調(diào)節(jié)靈活，層數(shù)及機械強度可調(diào)，方便進行各種修飾。此外，所述方法還可制備含有細(xì)胞的支架，操作非常簡便，便于控制各層細(xì)胞的分布。
【專利說明】一種管狀組織工程支架及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物組織工程【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其涉及一種管狀組織工程支架及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]管狀組織在人體中大量存在。在組織工程中，管狀組織的替換占了很大的比例。目前管狀組織工程從是否包含細(xì)胞的角度而言，分為無細(xì)胞支架和含細(xì)胞支架。目前臨床上大量應(yīng)用的無細(xì)胞支架主要是不可降解的材料，比如滌綸和聚四氟乙烯，雖然這些材料在機械強度和短期效果上令人滿意，但是隨著材料在體內(nèi)保留時間的延長，就會出現(xiàn)一些慢性的炎癥等與機體不兼容的病理反應(yīng)。因此現(xiàn)在人們傾向于應(yīng)用可降解材料進行植入。
[0003]可降解材料可以在植入的初期起到支持的作用，隨著時間的推移，體內(nèi)組織逐漸沿著支架生長，從而形成新的有功能的組織。在管狀組織成型方法方面，有人直接把可降解薄膜在電紡的時候紡成閉合環(huán)形；有人把不同層的薄膜堆疊起來，卷曲后用O型環(huán)固定兩端；也有人直接把片狀薄膜卷曲后，用手術(shù)縫合線縫合成管狀結(jié)構(gòu)。
[0004]現(xiàn)有技術(shù)(YuanB 等人，A strategy for depositing different types ofcells in three dimensions to mimic tubular structures in tissues[J].AdvancedMaterials, 2012, 24(7):890-896)公開了一種含細(xì)胞的層狀結(jié)構(gòu)管狀工程組織的制備方法，該方法將細(xì)胞種植在張力誘導(dǎo)的自卷曲薄膜上，然后在自卷曲力的作用下，形成層狀結(jié)構(gòu)。這種方法需要能產(chǎn)生張力的彈性材料，在材料選擇方面具有較大的局限性。
[0005]現(xiàn)有技術(shù)(de Valence S 等人，Long term performance of polycaprolactonevascular grafts in a rat abdominal aorta replacement mode I[J].Biomaterials, 2012, 33(1):38-47)描述的方法，直接將聚己內(nèi)酯(Poly(e -caprolactone)，PCL)通過靜電紡絲紡在柱狀物的表面從而直接形成管狀結(jié)構(gòu)。該方法由于直接形成管狀結(jié)構(gòu)，在各種細(xì)胞和蛋白等的修飾方面不夠方便。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種管狀組織工程支架及其制備方法。所述方法利用生物粘合劑使薄膜形成管狀結(jié)構(gòu)，所述方法直接在平面薄膜上操作，材料選擇非常靈活，結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，管徑調(diào)節(jié)靈活，層數(shù)及機械強度可調(diào)，方便進行各種修飾。此外，所述方法還可制備含有細(xì)胞的支架，操作非常簡便，便于控制各層細(xì)胞的分布。
[0007]為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，采用以下技術(shù)方案:
[0008]在第一方面，本發(fā)明提供一種管狀組織工程支架，所述管狀組織工程支架內(nèi)部中空，其管壁由多層薄膜通過生物粘合劑粘合而成。
[0009]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述薄膜的材料為生物可降解材料。所述生物可降解材料作為管狀組織工程支架的制備材料，其生物相容性好，不會存在慢性的炎癥等與機體不兼容的病理反應(yīng)，而且體內(nèi)組織逐漸沿著支架生長，從而形成新的有功能的組織，從而使得管狀組織工程支架與體內(nèi)組織完全融為一體。
[0010]優(yōu)選地,所述薄膜的材料選自聚己內(nèi)酯(Poly( ε - caprolactone), PCL)、聚乳酸(Polylactic acid,PLA)、聚乙醇酸(Polyglycolic acido,PGA)、聚乳酸-羥基乙酸共聚物(Poly (lactic-co-glycolic acid), PLGA)、聚癸二酸甘油酯(Poly (Glycerol Sebacate),PGS)、聚羥基脂肪酸酯(Polyhydroxyalkanoates, PHA)、海藻酸鹽水凝膠、明膠、透明質(zhì)酸、白蛋白、膠原蛋白、彈性蛋白、纖維粘連蛋白、殼聚糖或它們的復(fù)合材料。上述材料是管狀組織工程中常用的材料，已經(jīng)在許多管狀組織工程支架中獲得廣泛應(yīng)用，這些材料可以通過商購獲得。
[0011]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述薄膜是通過靜電紡絲法、旋涂法、烘干法或水凝膠法制成的薄膜。上述制備薄膜的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法，尤其是靜電紡絲法在本領(lǐng)域已經(jīng)獲得廣泛應(yīng)用，是最有發(fā)展前景的薄膜制備方法。
[0012]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述生物粘合劑為雙組分生物粘合劑或單組分生物粘合劑。所述雙組分生物粘合劑的兩種組分需要配合使用，單獨使用時沒有粘合作用。
[0013]優(yōu)選地，所述雙組分生物粘合劑為雙組分纖維蛋白粘合劑。
[0014]優(yōu)選地，所述雙組分纖維蛋白粘合劑的一個組分包括纖維蛋白原和凝血八因子，另一個組分包括凝血酶和氯化鈣。
[0015]優(yōu)選地，所述單組分生物粘合劑為遇水或潮濕變粘的生物粘合劑。
[0016]優(yōu)選地，所述單組分生物粘合劑為α-氰基丙烯酸正丁酯或貽貝粘蛋白。 [0017]需要說明的是，本發(fā)明雖然具體列舉了上述生物粘合劑，但是本發(fā)明的實施并不是只能依賴于上述生物粘合劑，其它生物粘合劑也可選用，只是上述生物粘合劑能夠起到更好的粘合作用。
[0018]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述薄膜間還包括細(xì)胞。這種含有細(xì)胞的管狀組織工程支架具有更好的生物相容性，其中的細(xì)胞能夠發(fā)揮相應(yīng)的生理和生物學(xué)功能，是目前管狀組織工程支架的一個發(fā)展趨勢。所述細(xì)胞典型但非限定性的例子如人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、人主動脈平滑肌細(xì)胞或人主動脈成纖維細(xì)胞等。
[0019]在第二方面，本發(fā)明提供一種制作第一方面所述的管狀組織工程支架的方法，所述方法包括:在薄膜的單面或雙面涂覆生物粘合劑；繞軸卷曲所述薄膜使得薄膜層間通過所述生物粘合劑粘合而成多層薄膜的管壁；抽出軸使得形成內(nèi)部中空的管狀組織工程支架。
[0020]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述方法包括:在薄膜的雙面分別涂覆雙組分生物粘合劑的一種組分；繞軸卷曲所述薄膜使得薄膜層間的雙組分生物粘合劑發(fā)生作用而粘合成多層薄膜的管壁；抽出軸使得形成內(nèi)部中空的管狀組織工程支架。
[0021]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述方法包括:在薄膜的單面涂覆遇水或潮濕變粘的單組份生物粘合劑；繞軸卷曲所述薄膜使得形成卷筒狀管壁；抽出軸并將所述卷筒狀管壁置于水性溶液使得薄膜層間通過所述單組份生物粘合劑粘合形成內(nèi)部中空的管狀組織工程支架。
[0022]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，所述在薄膜的單面或雙面涂覆生物粘合劑之前，還包括在所述薄膜的一面形成細(xì)胞層。
[0023]作為本發(fā)明的優(yōu)選方案，通過將微流控芯片的孔道與所述薄膜的一面粘合形成微流通道，然后向所述微流通道注入細(xì)胞的方式形成細(xì)胞層。
[0024]所述微流控芯片可以采用聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane, PDMS)制成° 具體還可參考 Yuan B 等人，A strategy for depositing different types ofcells in three dimensions to mimic tubular structures in tissues[J].AdvancedMaterials, 2012, 24(7):890-896。
[0025]本發(fā)明的有益效果為:本發(fā)明的管狀組織工程支架利用生物粘合劑使薄膜形成管狀結(jié)構(gòu)，所述方法直接在平面薄膜上操作，材料選擇非常靈活，幾乎任何薄膜材料(無論帶微結(jié)構(gòu)還是不帶微結(jié)構(gòu))都可以選擇；結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不需要外部物體支撐；管徑調(diào)節(jié)靈活；層數(shù)及機械強度可調(diào)；方便進行各種修飾(細(xì)胞或蛋白等)。此外，所述方法還可制備含有細(xì)胞的支架，操作非常簡便，便于控制各層細(xì)胞的分布。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0026]圖1為本發(fā)明一種實施方式的不含細(xì)胞管狀組織工程支架的制備過程示意圖。
[0027]圖2為本發(fā)明一種實施方式的含細(xì)胞管狀組織工程支架的制備過程示意圖。
[0028]圖3為本發(fā)明實施例1的不含細(xì)胞的PLGA管狀組織工程支架的制作過程各階段的照片，其中A為平鋪的PLGA薄膜的照片；B為PLGA薄膜兩面分別涂覆雙組分纖維蛋白粘合劑并放置卷軸的照片；C為PLGA薄膜繞卷軸卷曲后的照片；D為抽出卷軸后的照片。 [0029]圖4為本發(fā)明實施例2的含細(xì)胞的PLGA管狀組織工程支架的制作過程各階段的照片，其中A為PDMS芯片放置于PLGA薄膜上的照片；B為細(xì)胞分區(qū)植入PLGA薄膜上后的照片，從左至右的細(xì)胞分區(qū)分別是紅色DiD染色的人主動脈成纖維細(xì)胞、橙色DiI染色的人主動脈平滑肌細(xì)胞和綠色DiO染色的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞；C為PLGA薄膜卷曲后的管狀組織工程支架的照片。
[0030]圖5為本發(fā)明實施例3的利用康派特粘合劑制備的細(xì)菌纖維素管狀支架的照片。
[0031]圖6為本發(fā)明實施例4的利用貽貝粘蛋白粘合劑制備的聚己內(nèi)酯管狀支架的照片。
[0032]附圖標(biāo)記說明:圖1和圖2中，I表不薄膜,2表不軸,3表不分層的管狀結(jié)構(gòu),4表示微流控芯片，5表示細(xì)胞層。
【具體實施方式】
[0033]下面結(jié)合附圖和【具體實施方式】詳細(xì)描述本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員將會理解，這些描述僅僅是為了更清楚地說明本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。
[0034]圖1示出了本發(fā)明一種實施方式的不含細(xì)胞管狀組織工程支架的制備過程示意圖。具體地，將薄膜I (可為完全平的薄膜或帶有微結(jié)構(gòu))的雙面分別涂上纖維蛋白粘合劑(也可以是其它雙組分生物粘合劑)的一種成分，然后繞著光滑的聚氨酯軸2(也可以是其它材質(zhì)的軸，直徑自由控制)卷曲，卷曲的同時由于纖維蛋白粘合劑的兩種成分發(fā)生接觸而產(chǎn)生成膠反應(yīng)，從而使得薄膜各層相互粘結(jié)，最后將軸2抽出，即形成分層的管狀結(jié)構(gòu)3。需要特別指出的是，這里的生物粘合劑除采用雙組份纖維蛋白粘合劑及其他雙組分生物粘合劑外，還可采用單組份生物粘合劑，比如康派特粘合劑或貽貝粘蛋白粘合劑等。
[0035]圖2示出了本發(fā)明一種實施方式的含細(xì)胞管狀組織工程支架的制備過程示意圖。具體地，首先在薄膜上利用roMS芯片技術(shù)圖案化不同的細(xì)胞，即通過將微流控芯片4的孔道與所述薄膜I的一面粘合形成微流通道，然后向所述微流通道注入細(xì)胞形成細(xì)胞層5，其中細(xì)胞的位置和軸2向可以被靈活的控制，然后再采用上述卷曲方法，制備含細(xì)胞管狀組織工程支架，形成分層的管狀結(jié)構(gòu)3。
[0036]下面將結(jié)合實施例對本發(fā)明的實施方案進行詳細(xì)描述。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所用的實驗材料，如無特殊說明，均為自常規(guī)生化試劑廠商購買得到的。
[0037]實施例1:利用纖維蛋白粘合劑制備不含細(xì)胞的PLGA管狀結(jié)構(gòu)
[0038]請參考圖3，本實施例制備不含細(xì)胞的PLGA管狀結(jié)構(gòu)包括以下步驟:
[0039](I)配制電紡溶液(PLGA固體顆粒加入到丙酮和二甲基甲酰胺(二者質(zhì)量比2:1)的混合溶液中，使得PLGA所占的質(zhì)量比達到溶液總質(zhì)量的20% )，然后在30kV電壓下，電紡10分鐘，得到平均厚度約為30微米的靜電紡絲薄膜。
[0040](2)把紡絲薄膜 剪成適合大小的長方形，長度可以使得3mm外徑的軸繞三圈半，寬度根據(jù)管長度的需要確定。
[0041](3)利用鈷源射線對薄膜進行滅菌(強度IOk Bq)。
[0042](4)在生物安全柜中給紡絲薄膜的正面涂覆纖維蛋白粘合劑(杭州普濟醫(yī)藥有限公司)的主體膠(主要成分是纖維蛋白原、凝血八因子和PBS溶液)，給紡絲薄膜的背面涂覆纖維蛋白粘合劑的催化劑(主要成分是凝血酶和氯化鈣的水溶液)。
[0043](5)在紡絲薄膜的一端放置一根外徑為3mm的膨體聚四氟乙烯(ePTFE)光滑軸，然后利用鑷子小心地將紡絲薄膜繞軸卷曲，當(dāng)紡絲薄膜兩面相互接觸時，纖維蛋白粘合劑發(fā)生作用，從而固定管狀結(jié)構(gòu)，靜待3min左右。
[0044](6)卷曲完成后，小心地將ePTFE軸從內(nèi)層抽出，即得到穩(wěn)定的不含細(xì)胞的管狀結(jié)構(gòu)。整個過程中關(guān)鍵步驟的照片如圖3所示。
[0045]實施例2:利用纖維蛋白粘合劑制備含細(xì)胞的PLGA管狀結(jié)構(gòu)
[0046]請參考圖4，本實施例制備含細(xì)胞的PLGA管狀結(jié)構(gòu)包括以下步驟:
[0047]步驟(1)至(3)與實施例1相同。
[0048](4)在生物安全柜內(nèi)，將制備好的PDMS微流控芯片(已經(jīng)過乙醇浸泡滅菌30min，并吹干)利用生物粘合劑粘在PLGA紡絲薄膜的表面(孔道形狀為三個相互隔開的長方形，形似圖2中的PDMS微流控芯片)，然后利用移液器向各個孔道中分別注入DiD染料染的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞、DiI染料染的人主動脈平滑肌細(xì)胞和DiO染料染的人主動脈成纖維細(xì)胞。
[0049](5)大概2個小時候后，細(xì)胞貼壁，此時揭去PDMS微流控芯片，在共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞按照芯片的局限分布在三個長方形內(nèi)，分別顯示紅色、橙色和綠色熒光(圖 4B)。
[0050](6)在生物安全柜中給紡絲薄膜的正面涂覆纖維蛋白粘合劑(杭州普濟醫(yī)藥有限公司)的主體膠(主要成分是纖維蛋白原、凝血八因子和PBS溶液)，給紡絲薄膜的背面涂覆纖維蛋白粘合劑的催化劑(主要成分是凝血酶和氯化鈣的水溶液)。
[0051](7)在紡絲薄膜的一端放置一根外徑為3mm的聚氨基甲酸酯(PU)光滑軸，然后利用鑷子小心地將紡絲薄膜繞軸卷曲，當(dāng)紡絲薄膜兩面相互接觸時，纖維蛋白粘合劑發(fā)生作用，從而固定管狀結(jié)構(gòu)，靜待3min左右。[0052](8)卷曲完成后，小心地將軸從內(nèi)層抽出，即得到含有細(xì)胞的管狀穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。整個過程中關(guān)鍵步驟的照片如圖3所示。
[0053]實施例3:利用康派特粘合劑制備細(xì)菌纖維素管狀支架
[0054]請參考圖5，本實施例利用康派特粘合劑制備細(xì)菌纖維素管狀支架，包括以下步驟:
[0055](I)制備合適厚度的細(xì)菌纖維素薄膜:具體地,將葡糖桿菌(Gluconacetobacterxylinum, ATCC53582)培養(yǎng)在HS培養(yǎng)基(其成分為2%葡萄糖、0.5%酵母提取物、0.5%蛋白胨、0.27%磷酸氫二鈉、0.15%檸檬酸)中。HS培養(yǎng)基在121°C滅菌20分鐘后，將細(xì)菌接種在培養(yǎng)基中，26°C靜置培養(yǎng)6天，在氣液界面逐漸形成細(xì)菌纖維素膜。將細(xì)菌纖維素膜浸入去離子水中2-3天，然后在^^%的氫氧化鈉溶液中煮沸30分鐘以消除細(xì)菌和蛋白。隨后，將細(xì)菌纖維素膜用去離子水和高純水清洗若干次直到PH為7.0,隨后將細(xì)菌纖維素膜在121°C滅菌20分鐘，然后將細(xì)菌纖維素膜在超凈臺中風(fēng)干一至兩天待用。
[0056](2)將風(fēng)干的細(xì)菌纖維素薄膜剪成適合大小的長方形，長度可以使得IOmm外徑的軸繞一圈半，寬度根據(jù)管長度的需要確定。
[0057](3)利用鈷源射線對薄膜進行滅菌(強度IOk Bq)。
[0058](4)在細(xì)菌纖維素薄膜干燥的時候，于生物安全柜中給細(xì)菌纖維素薄膜的正面涂覆康派特醫(yī)用粘合劑(北京瞬康醫(yī)用膠有限公司，主要成份為α-氰基丙烯酸正丁酯)。
[0059](5)在細(xì)菌 纖維素薄膜的一端放置一根外徑為IOmm的ePTFE光滑軸，然后利用鑷子小心地將細(xì)菌纖維素薄膜繞軸卷曲，卷好之后兩端稍微用絲線固定(因為康派特醫(yī)用膠在遇水情況下才會有粘性，所以需要用絲線暫時固定)。
[0060](6)卷曲完成后，小心地將ePTFE光滑軸從內(nèi)層抽出，立刻把細(xì)菌纖維素薄膜管投入到無菌的PBS溶液中幾秒鐘，康派特粘合劑遇水成膠，撤去絲線，即得到不含細(xì)胞的管狀穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。結(jié)果如圖5所示的照片。
[0061]實施例4:利用貽貝蛋白粘合劑制備聚己內(nèi)酯(PCL)管狀支架
[0062]請參考圖6，本實施例利用貽貝蛋白粘合劑制備聚己內(nèi)酯(PCL)管狀支架，包括以下步驟:
[0063](I)配制IOwt %的PCL電紡溶液(將PCL固體顆粒加入到二氯甲烷和二甲基甲酰胺(二者質(zhì)量比3:1)的混合溶液中，使得PCL所占的質(zhì)量比達到溶液總質(zhì)量的10%)，然后在30kV電壓下，電紡10分鐘，得到平均厚度約為30微米的靜電紡絲薄膜。
[0064](2)將紡絲薄膜剪成適合大小的長方形，長度可以使得Imm外徑的軸繞四圈半，寬度根據(jù)管長度的需要確定。
[0065](3)利用鈷源射線對紡絲薄膜進行滅菌(強度IOk Bq)。
[0066](4)在生物安全柜中給紡絲薄膜的正面涂覆Cell-Tak粘合劑(BD公司，主要成份為賭貝粘蛋白)。
[0067](5)在紡絲薄膜的一端放置一根外徑為1mm的PU光滑軸，然后利用鑷子小心地將紡絲薄膜繞軸卷曲，卷好之后兩端稍微用絲線固定(因為Cell-Tek粘合劑在潮濕情況下才會有粘性，所以需要用絲線暫時固定)。
[0068](6)卷曲完成后，小心地將軸從內(nèi)層抽出，立刻把PCL管投入到無菌的磷酸氫鈉溶液(pH8.0)中幾秒鐘，Cell-Tek粘合劑被中和成膠，撤去絲線，即得到不含細(xì)胞的管狀穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。
[0069 ] 申請人:聲明，本發(fā)明通過上述實施例來說明本發(fā)明的詳細(xì)特征以及詳細(xì)方法，但本發(fā)明并不局限于上述詳細(xì)特征以及詳細(xì)方法，即不意味著本發(fā)明必須依賴上述詳細(xì)特征以及詳細(xì)方法才能實施。所屬【技術(shù)領(lǐng)域】的技術(shù)人員應(yīng)該明了，對本發(fā)明的任何改進，對本發(fā)明選用組分的等效替換及輔助成分的添加、具體方式的選擇等，均落在本發(fā)明的保護范圍和公開范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種管狀組織工程支架，其特征在于，所述管狀組織工程支架內(nèi)部中空，其管壁由多層薄膜通過生物粘合劑粘合而成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的管狀組織工程支架，其特征在于，所述薄膜的材料為生物可降解材料； 優(yōu)選地，所述薄膜的材料選自聚己內(nèi)酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸-羥基乙酸共聚物、聚癸二酸甘油酯、聚羥基脂肪酸酯、海藻酸鹽水凝膠、明膠、透明質(zhì)酸、白蛋白、膠原蛋白、彈性蛋白、纖維粘連蛋白、殼聚糖或它們的復(fù)合材料。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的管狀組織工程支架，其特征在于，所述薄膜是通過靜電紡絲法、旋涂法、烘干法或水凝膠法制成的薄膜。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項所述的管狀組織工程支架，其特征在于，所述生物粘合劑為雙組分生物粘合劑或單組分生物粘合劑； 優(yōu)選地，所述雙組分生物粘合劑為雙組分纖維蛋白粘合劑； 優(yōu)選地，所述雙組分纖維蛋白粘合劑的一個組分包括纖維蛋白原和凝血八因子，另一個組分包括凝血酶和氯化鈣； 優(yōu)選地，所述單組分生物粘合劑為遇水或潮濕變粘的生物粘合劑； 優(yōu)選地，所述單組分生物粘合劑為α-氰基丙烯酸正丁酯或貽貝粘蛋白。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的管狀組織工程支架，其特征在于，所述薄膜間還包括細(xì)胞。
6.一種制作權(quán)利要求1-5任一項所述的管狀組織工程支架的方法，其特征在于，所述方法包括:在薄膜的單面或雙面涂覆生物粘合劑；繞軸卷曲所述薄膜使得薄膜層間通過所述生物粘合劑粘合而成多層薄膜的管壁；抽出軸使得形成內(nèi)部中空的管狀組織工程支架。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法包括:在薄膜的雙面分別涂覆雙組分生物粘合劑的一種組分；繞軸卷曲所述薄膜使得薄膜層間的雙組分生物粘合劑發(fā)生作用而粘合成多層薄膜的管壁；抽出軸使得形成內(nèi)部中空的管狀組織工程支架。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法包括:在薄膜的單面涂覆遇水或潮濕變粘的單組份生物粘合劑；繞軸卷曲所述薄膜使得形成卷筒狀管壁；抽出軸并將所述卷筒狀管壁置于水性溶液使得薄膜層間通過所述單組份生物粘合劑粘合形成內(nèi)部中空的管狀組織工程支架。
9.根據(jù)權(quán)利要求6-8任一項所述的方法，其特征在于，所述在薄膜的單面或雙面涂覆生物粘合劑之前，還包括在所述薄膜的一面形成細(xì)胞層。
10.根據(jù)權(quán)利要求6-9任一項所述的方法，其特征在于，通過將微流控芯片的孔道與所述薄膜的一面粘合形成微流通道，然后向所述微流通道注入細(xì)胞的方式形成細(xì)胞層。
【文檔編號】A61L27/20GK103977457SQ201410239494
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2014年5月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月30日
【發(fā)明者】蔣興宇, 王諾鑫, 靳鈺, 張偉, 王卓 申請人:國家納米科學(xué)中心