關(guān)白附總生物堿及關(guān)附壬素的新用途
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種關(guān)白附總生物堿的制備方法，以及其在制備慢鈉離子通道阻斷劑和制備抗心率失常藥物中的應(yīng)用。研究表明，關(guān)白附總生物堿和鹽酸關(guān)附甲素均對豚鼠心室肌慢鈉電流具有抑制作用。特別是關(guān)附壬素在制備藥物代謝酶抑制劑中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了關(guān)附甲素在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應(yīng)用。
【專利說明】關(guān)白附總生物堿及關(guān)附壬素的新用途
[0001]本發(fā)明申請為分案申請，原案申請?zhí)枮?01210203325.0，原案申請日為2012年6月19日，原案發(fā)明名稱為:關(guān)白附總生物堿及關(guān)附壬素的新用途。
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0002]本發(fā)明涉及關(guān)白附總生物堿及關(guān)附壬素的新用途。具體涉及關(guān)白附總生物堿在制備慢鈉離子通道阻斷劑及抗心律失常藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0003]關(guān)白附為中藥毛莨科黃花烏頭Aconitum coreanum(Levi,)Rapaics的塊根,為常見中藥之一，主治心痛血痹，具有祛風(fēng)，燥濕，化痰，止痛作用，民間用藥療效好。其化學(xué)成份主要有關(guān)附庚素(Guanfu base G, GFG),關(guān)附甲素(Guanfu base A, GFA),關(guān)附壬素(Guanfubase I, GFI)等，三者均為二萜類生物堿?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明關(guān)附甲素、關(guān)附庚素、關(guān)附壬素等具有抗心律失常、抗炎和鎮(zhèn)痛作用。但由于關(guān)附甲素提取得率為0.1%左右，提取工藝周期較長，原料藥損耗大，未能充分利用關(guān)白附資源。
[0004]近年來研究長QT綜合癥(L-QT，易誘發(fā)室性心律失常，暈厥和猝死的一系列綜合癥)及其他心律失常發(fā)生機(jī)制的新靶點(diǎn)，有實(shí)驗(yàn)表明，心臟鈉離子通道基因SCN5A的突變，造成慢鈉電流反復(fù)開發(fā)，延緩電流衰減，使動作電位平臺期延長，引起L-QT。這種變化在慢頻率下尤其明顯，是LQT3發(fā)生的重要原因，也是誘發(fā)其他心律失常的重要原因。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明目的之一在于提供關(guān)白附總生物堿的制備方法。
[0006]本發(fā)明目的之二在于提供關(guān)白附總生物堿在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明目的之三在于提供關(guān)附甲素在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應(yīng)用。
[0008]本發(fā)明目的之四在于提供關(guān)附壬素在抑制藥物代謝酶活性新用途。
[0009]本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0010]一種關(guān)白附總生物堿的制備方法，該方法包括如下步驟:
[0011]步驟1:取關(guān)白附藥材，有機(jī)溶劑提取，回收溶劑，得提取物浸膏；
[0012]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以酸溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏，取酸水層；
[0013]步驟3:取步驟2得到的酸水液，以有機(jī)溶劑萃取，酸水母液加堿液調(diào)節(jié)pH至堿性；
[0014]步驟4:將步驟3中堿化的溶液用有機(jī)溶劑萃取，取有機(jī)溶劑層，回收溶劑，得關(guān)白附總生物堿。
[0015]優(yōu)選的，所述步驟I中有機(jī)溶劑為正丁醇、異丙醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、石油醚、乙醚中的任意一種；
[0016]所述提取方法為冷浸提??；
[0017] 所述步驟2中的酸溶液為鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸、甲酸、醋酸、丁酸中的一種或幾種；
[0018]所述步驟3和4中的有機(jī)溶劑為正丁醇、乙酸乙酯、甲酸乙酯、甲酸乙酯、氯仿、丙酮、石油醚、乙醚中的任意一種；
[0019]所述步驟3中的堿液為氨水、碳酸鈉、碳酸氫鈉中的一種或幾種。
[0020]優(yōu)選的，關(guān)白附總生物堿的制備方法包括如下步驟:
[0021]步驟1:取關(guān)白附藥材，在10_30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶劑，得浸膏；
[0022]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏，除去上層的脂溶性雜質(zhì)，取酸水液；
[0023]步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH =8-11 ；
[0024]步驟4:將步驟3中經(jīng)氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關(guān)白附總生物堿。
[0025]更有選的參數(shù)為:步驟2中鹽酸水溶液為0.5-1.5mol/l ;和/或步驟3中:酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH = 9。
[0026]更優(yōu)選的，關(guān)白附總生物堿的制備方法包括如下步驟:
[0027]步驟1:取關(guān)白附藥材，粉碎，在10_30°C下用2-8倍量50-95%乙醇冷浸提取2_4次，每次12-36小時(shí)，合并提取液，回收溶劑，得浸膏；
[0028]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以1-3倍量0.5-1.5mol/l的鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏12-24小時(shí)，除去上層的脂溶性雜質(zhì)，取酸水液；
[0029]步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取2-4次，酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH=8-11 ；
[0030]步驟4:將步驟3中經(jīng)氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取2-4次，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關(guān)白附總生物堿。
[0031]進(jìn)一步優(yōu)選的，關(guān)白附總生物堿的制備方法包括如下步驟:
[0032]步驟1:取關(guān)白附藥材，粉碎成10-20目粗粉，在25°C下用5倍量85%乙醇冷浸提取4次，每次24小時(shí)，合并提取液，回收溶劑，得浸膏；
[0033]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以I倍量lmol/1的鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液于2°C低溫冷藏12-24小時(shí)，除去上層的脂溶性雜質(zhì)，取酸水液；
[0034]步驟3:取步驟2得到的酸水液,用乙酸乙酯萃取2次，酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH =9 ；
[0035]步驟4:將步驟3中經(jīng)氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取4次，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關(guān)白附總生物堿。
[0036]或，步驟1:取關(guān)白附藥材，粉碎成10-20目粗粉，在10°C下用3倍量95%乙醇冷浸提取2次，每次36小時(shí)，合并提取液，回收溶劑，得浸膏；
[0037]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以3倍量0.5mol/l的鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液于2°C低溫冷藏12-24小時(shí)，除去上層的脂溶性雜質(zhì)，取酸水液；
[0038] 步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取4次，酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH =
8；[0039]步驟4:將步驟3中經(jīng)氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取2次，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關(guān)白附總生物堿。
[0040]或，步驟1:取關(guān)白附藥材，粉碎成10-20目粗粉，在30°C下用8倍量75%乙醇冷浸提取3次，每次12小時(shí)，合并提取液，回收溶劑，得浸膏；
[0041]步驟2:取步驟I得到的浸膏，以2倍量1.5mol/l的鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液于2°C低溫冷藏12-24小時(shí)，除去上層的脂溶性雜質(zhì)，取酸水液；
[0042]步驟3:取步驟2得到的酸水液,用乙酸乙酯萃取2次，酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH =11 ;
[0043]步驟4:將步驟3中經(jīng)氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取4次，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關(guān)白附總生物堿。
[0044]上述關(guān)白附總生物堿還可以按常規(guī)工藝制成關(guān)白附總堿鹽。
[0045]本發(fā)明關(guān)白附總生物堿和總堿鹽可以按常規(guī)的制劑工藝制成藥劑學(xué)可接受的任意常規(guī)劑型，例如肌肉注射劑，靜脈注射劑、粉針劑、膠囊劑、顆粒劑或片劑。
[0046]本發(fā)明關(guān)白附總生物堿在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應(yīng)用；所述關(guān)白附總生物堿可以是游離堿或無機(jī)酸鹽的形式。
[0047]一種關(guān)附甲素在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應(yīng)用；所述關(guān)附甲素可以是游離堿或無機(jī)酸鹽的形式。
[0048]一種關(guān)附壬素在制備抑制藥物代謝酶藥物中的應(yīng)用。
[0049]所述藥物代謝酶優(yōu)選為細(xì)胞色素P450酶系中的一種或幾種；進(jìn)一步優(yōu)選為CYP2D6。
[0050]本發(fā)明所述藥物代謝酶CYP2D6所代謝的藥物化合物及其鹽的分子結(jié)構(gòu)特征為:在化合物分子結(jié)構(gòu)中距離氧化位點(diǎn)5~7A處有一個(gè)氮原子。包括抗抑郁藥如阿米替林、丙咪嗪、氯米帕明、地昔帕明、去甲替林、氟西汀、帕羅西汀、頑發(fā)克星等；β受體阻滯劑如卡維地洛、普萘洛爾、美托洛爾、阿普洛爾、丁呋洛爾、噻嗎洛爾、布尼洛爾等；抗精神病藥如氯丙嗪、奮乃靜、瑞斯哌東、托哌酮等；抗高血壓藥如胍喹啶、吲哚拉明、烏拉地爾等；抗心絞痛藥如派克昔林、特羅地林等；鎮(zhèn)痛藥如曲馬多；止咳平喘藥如可待因、右美沙芬等；抗心律失常藥如恩卡尼、司巴丁、氟卡尼、普羅帕酮、美西律、茚丙胺。所述關(guān)附壬素可以是游離堿或無機(jī)酸鹽的形式；優(yōu)選為鹽酸鹽或硫酸鹽。
[0051] 本發(fā)明所述關(guān)附甲素和關(guān)附壬素可以從市場購買，也可以從關(guān)白附中提取分離或通過化學(xué)合成的方法得到，其結(jié)構(gòu)式如下:
[0052]
【權(quán)利要求】
1.關(guān)附壬素或其鹽在制備藥物代謝酶抑制劑中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物代謝酶為細(xì)胞色素P450酶系中的一種或幾種。
3.如權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于所述藥物代謝酶為CYP2D6。
4.一種關(guān)白附總生物堿，其特征在于所述總生物堿由如下方法制備: 步驟1:取關(guān)白附藥材，在10-30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶劑，得浸膏；步驟2:取步驟I得到的浸膏，以鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏，除去上層的脂溶性雜質(zhì)，取酸水液； 步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH = 8-11 ；步驟4:將步驟3中經(jīng)氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關(guān)白附總生物堿。
5.如權(quán)利要求4所述的關(guān)白附總生物堿，其特征在于: 步驟2中鹽酸水溶液為0.5-1.5mol/l ;和/或 步驟3中:酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH = 9。
6.如權(quán)利要求4或5所述的關(guān)白附總生物堿，其特征在于所述關(guān)白附總生物堿還可以按常規(guī)工藝制成關(guān)白附總堿鹽。
7.如權(quán)利要求4-6任一所述的關(guān)白附總生物堿在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應(yīng)用。
8.一種關(guān)白附總生物堿的制備方法，其特征在于該方法包括如下步驟: 步驟1:取關(guān)白附藥材，在10-30°C下用50-95%乙醇冷浸提取，回收溶劑，得浸膏；步驟2:取步驟I得到的浸膏，以鹽酸水溶液捏溶，將酸溶液低溫冷藏，除去上層的脂溶性雜質(zhì)，取酸水液； 步驟3:取步驟2得到的酸水液，用乙酸乙酯萃取，酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH = 8-11 ；步驟4:將步驟3中經(jīng)氨水堿化的溶液迅速用乙酸乙酯萃取，取乙酸乙酯層，回收溶劑，真空干燥，得關(guān)白附總生物堿。
9.如權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于: 步驟2中鹽酸水溶液為0.5-1.5mol/l ;和/或 步驟3中:酸水母液加氨水調(diào)節(jié)pH = 9。
10.一種關(guān)附甲素在制備慢鈉離子通道阻斷劑中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61P9/06GK103989672SQ201410240329
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2012年6月19日 優(yōu)先權(quán)日:2012年6月19日
【發(fā)明者】王廣基, 柳祥, 湯依群, 董秀華, 孫建國, 劉靜涵, 于鵬, 曾艷, 劉建平, 楊春華, 孫申國, 朱天全, 程志國, 汪旻暉 申請人:中國藥科大學(xué), 吉林敖東洮南藥業(yè)股份有限公司