和厚樸酚抑制金黃色葡萄球菌生物被膜的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了和厚樸酚在制備抑制葡萄球菌生物被膜的藥物中的應(yīng)用，利用藥物敏感性實(shí)驗(yàn)分別測定和厚樸酚對金黃色葡萄球菌浮游菌和生物被膜的抑制效果，再通過繪制殺菌曲線、結(jié)晶紫半定量法進(jìn)一步驗(yàn)證和厚樸酚的抑制效果。另外，通過對細(xì)胞間多糖黏附素（PIA）合成和胞外DNA（eDNA）釋放的影響及其對編碼纖連蛋白結(jié)合蛋白基—fnbA和fnbB轉(zhuǎn)錄水平的考察，說明和厚樸酚對抑制金黃色葡萄球菌生物被膜生長具有良好的作用。
【專利說明】和厚樸酚抑制金黃色葡萄球菌生物被膜的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及和厚樸酚抑制金黃色葡萄球菌生物被膜的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]細(xì)菌引發(fā)的感染已成為感染性疾病的主要原因之一，具有耐藥性和難治性的特點(diǎn)，而且還可以對抗機(jī)體的免疫清除作用，對人類和動物的健康造成很大的危害，也給人們生活的其他方面帶來了越來越嚴(yán)重的影響，引起了基礎(chǔ)和臨床研究的極大關(guān)注。細(xì)菌生物被膜是指由附著于惰性或者活性實(shí)體表面的細(xì)菌細(xì)胞和包裹著細(xì)菌的水合性基質(zhì)所組成的結(jié)構(gòu)性細(xì)菌群落。細(xì)菌生物被膜廣泛存在于含水和潮濕的各種表面上，包括自來水管道，工業(yè)管道、通風(fēng)設(shè)備、醫(yī)療器械甚至病理狀態(tài)下的人體組織器官，據(jù)專家估計幾乎所有的細(xì)菌在一定的條件下都可以形成生物被膜。特別是生物醫(yī)學(xué)材料如靜脈插管、人工心臟瓣膜、人工關(guān)節(jié)表面均易形成生物被膜。據(jù)報道，生物被膜可提高細(xì)菌對殺菌劑的抵抗能力50-5000倍。葡萄球菌屬細(xì)菌生物被膜已成為引起很多嚴(yán)重感染久治不愈和反復(fù)發(fā)作的重要原因之一。更重要的是約65%的人類細(xì)菌性感染是由生物被膜引起的。因此尋找一種可以有效抑制金黃色葡萄球菌生物被膜生長，并且可以安全使用的物質(zhì)具有重大作用和意義。
[0003]厚樸酚及其異構(gòu)體和厚樸酚是由一苯丙素的側(cè)鏈和另一苯丙素的苯核聚合而成的二聚體，稱之謂新木脂素，在樟科植物中發(fā)現(xiàn)較多，為中藥厚樸抗菌消炎的有效成分。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是為解決葡萄球菌屬細(xì)菌生物被膜引起很多嚴(yán)重感染久治不愈和反復(fù)發(fā)作的問題，而提供一種抑制葡萄球菌生物被膜的藥物，和厚樸酚。
[0005]和厚樸酚在制備抑制葡萄球菌生物被膜的藥物中的應(yīng)用；
所述的葡萄球菌為金黃色葡萄球菌。
[0006]和厚樸酚在制備治療感染葡萄球菌久治不愈和反復(fù)發(fā)作疾病的藥物中的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明提供了和厚樸酚在制備抑制葡萄球菌生物被膜的藥物中的應(yīng)用，利用藥物敏感性實(shí)驗(yàn)分別測定和厚樸酚對金黃色葡萄球菌浮游菌和生物被膜的抑制效果，再通過繪制殺菌曲線、結(jié)晶紫半定量法進(jìn)一步驗(yàn)證和厚樸酚的抑制效果。另外，通過對細(xì)胞間多糖黏附素(PIA)合成和胞外DNA (eDNA)釋放的影響及其對編碼纖連蛋白結(jié)合蛋白基一//?況和AM轉(zhuǎn)錄水平的考察，說明和厚樸酚對抑制金黃色葡萄球菌生物被膜生長具有良好的作用。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0008]圖1時間一殺菌曲線實(shí)驗(yàn)結(jié)果；(?)空白；(■) 4 Pg/ml ; (▲) 8μδ/πι1;(X) 16 M-g/ml (氺)32M-g/ml ；圖2紙片擴(kuò)散法實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
圖3結(jié)晶紫半定量實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
圖4 PIA實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
圖5 eDNA實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
圖6 fnbA和fnbB轉(zhuǎn)錄水平檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

【具體實(shí)施方式】
[0009]本發(fā)明中受試菌包括:9株臨床株，以及I株對照用質(zhì)控菌株:金黃色葡萄球菌ATCC 29213。
[0010]天然化合物和厚樸酚，分子式為C18H18O2，分子量為266.33，其化學(xué)結(jié)構(gòu)為:

【權(quán)利要求】
1.和厚樸酚在制備抑制葡萄球菌生物被膜的藥物中的應(yīng)用。
2.權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于:所述的葡萄球菌為金黃色葡萄球菌。
3.和厚樸酚在制備治療感染葡萄球菌久治不愈和反復(fù)發(fā)作疾病的藥物中的應(yīng)用。
【文檔編號】A61K31/05GK104173324SQ201410349497
【公開日】2014年12月3日 申請日期:2014年7月22日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月22日
【發(fā)明者】郭娜, 李文莉, 孟日增, 于錄, 劉宗慧, 趙星辰, 史冊 申請人:吉林大學(xué)