阿片樣物質(zhì)拮抗劑用于減少內(nèi)皮細胞增殖和遷移的用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及阿片樣物質(zhì)拮抗劑用于減少內(nèi)皮細胞增殖和遷移的用途；具體地，本發(fā)明提供使用阿片樣物質(zhì)拮抗劑來減少例如抑制或降低細胞增殖和遷移特別是內(nèi)皮細胞增殖和遷移的方法，所述遷移包括與血管生成相關(guān)的，所述阿片樣物質(zhì)拮抗劑包括，但不限于外周受限制的拮抗劑。
【專利說明】阿片樣物質(zhì)拮抗劑用于減少內(nèi)皮細胞增殖和遷移的用途
[0001] 本申請是申請?zhí)枮?00680015606. 6,申請日為2006年3月7日，發(fā)明名稱為"阿 片樣物質(zhì)拮抗劑用于減少內(nèi)皮細胞增殖和遷移的用途"的中國專利申請的分案申請。
[0002] 關(guān)于聯(lián)邦資助研究或發(fā)展的聲明
[0003] 本發(fā)明部分得到了國立衛(wèi)生研究院的資助：DE12322 ;DE00470 ;和DE015830的支 持。美國政府具有本發(fā)明的某些權(quán)益。
[0004] 相關(guān)申請
[0005] 本申請要求在35U.S.C. 119(e)下的如下申請的利益：在2005年3月7日申請 的 USSN60/659, 193, 2005 年 10 月 12 日申請的 60/725, 703, 2005 年 10 月 28 日申請的 60/731，009, 2006年1月20日申請的60/760, 851，將其全部公開內(nèi)容引入本文作為參考。

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0006] 本發(fā)明涉及使用阿片樣物質(zhì)拮抗劑減少內(nèi)皮細胞遷移和/或增殖的方法，所述內(nèi) 皮細胞特別地與腫瘤相關(guān)。

【背景技術(shù)】
[0007] 細胞增殖是一種所有活體中正常進行的過程，其包括許多因子和信號，所述因子 和信號巧妙地平衡以保持有規(guī)律的細胞周期。哺乳動物細胞是否生長和分裂是由多種反饋 控制機制決定的，其包括細胞可生長間隙的可用度和在直接環(huán)境中特定刺激因子和抑制因 子的分泌。
[0008] 血管生成和血管生成相關(guān)疾病受細胞增殖的影響。血管生成的過程導(dǎo)致形成新的 血管。在正常生理條件下，動物包括人類僅在非常特定有限的情況下進行血管生成。例如， 通常在傷口愈合、胎兒和胚胎發(fā)育及黃體、子宮內(nèi)膜和胎盤的形成中觀察到血管生成。
[0009] 在血管生成過程中，內(nèi)皮細胞，其作為已有血管的一部分通常以靜止狀態(tài)存在，進 入遷移、增殖狀態(tài)。當(dāng)內(nèi)皮細胞作為功能性新血管的一部分恢復(fù)靜止狀態(tài)時，這種所述細 胞的遷移、增殖狀態(tài)最終被消除。新毛細管的生成包括一個復(fù)雜的過程，其需要在空間模 式和時間模式中出現(xiàn)許多細胞和分子事件。這些活性的某些包括初始血管的周圍基膜的 降解、內(nèi)皮細胞穿過結(jié)締組織間質(zhì)的遷移、細胞增殖、管樣結(jié)構(gòu)的形成和這些內(nèi)皮細胞衍 生（endothelial-lined)管發(fā)育成新血管（Cliff, 1963 ;Schoef 1,1963 ;Ausprunck and Folkman，1977)。某些主要的血管生成因子包括成纖維細胞生長因子-基本的，血管內(nèi)皮 生長因子（VEGF)、血管生成素、細胞因子、細胞外基質(zhì)蛋白質(zhì)和基質(zhì)金屬蛋白酶。這些因 子是由基質(zhì)細胞和由活化的白細胞局部生成，所述白細胞為募集到該區(qū)域的（Risau，W. (1997)Nature386 (6626) :671-674 ;Risau and Flamme (1995)Ann. Rev. Cell Dev. Biol. 11:73-91)。與其它血管生成因子不同，在血管生成期間VEGF起內(nèi)皮細胞特定的促細 胞分裂劑作用（Terman等人，1992和Ferrara, 1993)。
[0010] 某些新生物（例如腫瘤）可刺激和固定（harnessed)血管生成以增加營養(yǎng) 吸收。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)血管生成對直徑超過2-3mm的實體瘤的生長和對瘤轉(zhuǎn)移必不可少 (Folkman, 1995 ;reviewed in Bouck 等人，1996)。與導(dǎo)致融合（anastomoses)和毛細血管 成熟的正常血管生成形成對照，與瘤形成相關(guān)的血管生成為一個連續(xù)過程。附近的贅生細 胞活化內(nèi)皮細胞，其不僅分泌刺激血管生成的VEGF，而且分泌降解周圍細胞外基質(zhì)的基質(zhì) 金屬蛋白酶（MMP)。接著，所述內(nèi)皮細胞侵入細胞外基質(zhì)，其中他們遷移、增殖和組織形成新 血管，其支持新生物生長和存活。
[0011] 新血管化的新生物繼續(xù)生長，導(dǎo)致進一步營養(yǎng)喪失和慢性前血管生成信號。新生 物的脈管系統(tǒng)的特征在于出現(xiàn)腔隙和低速率的吻合。該部分功能障礙的脈管系統(tǒng)供應(yīng)血管 生成長期需要的物質(zhì)。另外，該不完善的脈管系統(tǒng)使瘤細胞脫落進入全身循環(huán)。因此，新生 物的血管生成潛在性與轉(zhuǎn)移潛在性相關(guān)（Weidner等人（1991) N. Engl. J. Med. 324 (1) : 1-8 ; Folkman and Shing(1992)J. Biol. Chem. 267(16):10931-10934)〇
[0012] 由于重要比例的新生物取決于持續(xù)的血管生成，血管生成的抑制阻斷新生物 生長，其通常導(dǎo)致新生物完全壞死（Weidner等人，（1991) N. Engl. J. Med. 324 (1) : 1-8 ; Folkman and Shing (1992)J. Biol. Chem. 267(16):10931-10934)。
[0013] 涉及血管生成的任何一個步驟和/或因素的抑制都可抑制新血管形成，因而影響 腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的產(chǎn)生。實際上，已經(jīng)估計到消除單個內(nèi)皮細胞可以抑制100個腫瘤細胞 生長。（Thorpe等人，1995)。也已經(jīng)發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生抗血管生成因子VEGF的抗體已經(jīng)顯示出抑制 體內(nèi)腫瘤發(fā)育（Kim等人，1993)。
[0014] 作為治療和處理患有癌癥和許多醫(yī)學(xué)病癥的部分，阿片樣物質(zhì)激動劑比如嗎啡被 廣泛用于相關(guān)疼痛。例如，在約一半在美國每年死于癌癥的患者的護理末期中使用嗎啡。 阿片樣物質(zhì)激動劑，比如嗎啡，包括一組作用于生物系統(tǒng)中的一系列內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)受 體的化合物，所述阿片樣物質(zhì)受體例如μ-、K-和Λ-受體。通常，這些內(nèi)源性受體結(jié)合 內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)。內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)由哺乳動物細胞天然生成。內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)包括 β-內(nèi)啡肽、腦啡肽和強啡肽。β-內(nèi)啡肽顯示出對μ受體的優(yōu)先選擇，腦啡肽顯示出對Δ 受體的優(yōu)先選擇，強啡肽顯示出對Κ受體的優(yōu)先選擇。根據(jù)它們對內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)受體 的選擇性作用來分類阿片樣物質(zhì)激動劑。通常，μ受體與疼痛緩解和化學(xué)依賴性（例如藥 物成癮性和酒精中毒）相關(guān)。例如，嗎啡為μ阿片樣物質(zhì)激動劑。阿片樣物質(zhì)受體不限于 腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS)，例如中樞受體。在整個身體的其它組織例如胃腸組織中可發(fā)現(xiàn)外 周性阿片樣物質(zhì)受體。
[0015] 盡管嗎啡及其它阿片樣物質(zhì)藥物在疼痛控制中應(yīng)用很廣，其可具有嚴重的副作 用，所述副作用可能由外感受器的激活引起。所述副作用難于處理，且可導(dǎo)致患者拒絕基于 阿片樣物質(zhì)的疼痛控制。阿片樣物質(zhì)治療的副作用包括惡心、便秘、胃腸蠕動的抑制、呼吸 抑制和免疫抑制。另外，嗎啡及其它阿片樣物質(zhì)受體激動劑以典型的嗎啡或嗎啡當(dāng)量的血 液濃度可以在體外或體內(nèi)刺激人微血管內(nèi)皮細胞增殖和血管生成。該阿片樣物質(zhì)激動劑的 預(yù)血管生成（pro-angiogenesis)活性，同時緩解了疼痛，可加速腫瘤發(fā)展。
[0016] 類似地，根據(jù)它們對阿片樣物質(zhì)受體的作用，例如通過它們抗一種受體比抗另一 種受體更有效的能力來分類阿片樣物質(zhì)拮抗劑。例如，阿片樣物質(zhì)拮抗劑納洛酮在所有阿 片樣物質(zhì)受體中起競爭性拮抗劑的作用，但是在μ受體中比在κ受體中的有效性高約十 倍，因此，將其分類為μ阿片樣物質(zhì)拮抗劑。阿片樣物質(zhì)拮抗劑可抗中樞性受體、外周受體 或這兩者。阿片樣物質(zhì)拮抗劑，特別是外周性阿片樣物質(zhì)拮抗劑，已經(jīng)被用于減輕外源性給 藥阿片樣物質(zhì)的副作用，以及減輕過量內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)不需要的效應(yīng)。阿片樣物質(zhì)拮抗 劑也已經(jīng)被檢驗它們作為特定類型癌癥的抗癌劑的潛在用途，如在美國專利No. 6, 384, 044 和 6, 136, 780 和在科學(xué)文獻 Gupta 等人，Cancer Research, 62:4491-98 (2002)中描述 的。阿片樣物質(zhì)拮抗劑的抗癌效果是有所爭議的，并沒有被很好地理解，但是認為阿片 樣物質(zhì)拮抗劑已經(jīng)顯示出達到一定程度的抗癌效果與血管生成無關(guān)（Poonawala T,等 人，Wound Repair Regen.2005Mar-Apr ; 13 (2) :165-74 ;Popov I. Acta Chir Iugosl. 2004; 51(2) :117-21 ;Blebea J,等人，J Vase Surg. 2002Mar ;35 (3) :532-8 ;Balasubramanian S，等人，J Mol Cell Cardiol.2001Dec;33(12):2179-87;Zagon IS,等人，Int J Oncol. 2000Nov ; 17 (5) : 1053-61 ;Blebea J 等人，J Vase Surg. 2000Aug ;32 (2) : 364-73 ; Pasi A,等人，Gen Pharmacol. (991 ;22(6):1077_9)。事實上，已經(jīng)報道了在小鼠的異種 移植物腫瘤模型中，阿片樣物質(zhì)拮抗劑納洛酮沒有對嗎啡誘導(dǎo)的血管生成顯示出明顯的作 用，Gupta等人，Cancer Research, 62:4491-98 (2002)。因此，出人意外地是現(xiàn)在發(fā)現(xiàn)阿片 樣物質(zhì)拮抗劑可以抑制與血管生成相關(guān)的內(nèi)皮增殖和遷移。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0017] 本發(fā)明提供了一種使用阿片樣物質(zhì)拮抗劑來減少例如抑制或降低細胞增殖和 遷移，特別是內(nèi)皮細胞增殖和遷移的方法，所述細胞增殖和遷移包括與血管生成相關(guān)的， 所述阿片樣物質(zhì)拮抗劑包括，但不限于外周受限制的拮抗劑（peripherally restricted antagonists)。根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種治療方法。所述方法包括向受試者給 藥有效量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑，所述受試者患有以不需要的內(nèi)皮細胞遷移或增殖為特征的 疾病。該治療可抑制遷移和增殖之一或兩者。所述不需要的內(nèi)皮細胞遷移或增殖可以為不 需要的血管內(nèi)皮細胞遷移或增殖，其包括，但不限于不需要的新血管形成或血管生成。不需 要的新血管形成的實例包括，但不限于與癌癥相關(guān)的新血管形成和眼部新血管形成。所述 疾病可以是以不需要的內(nèi)皮細胞的遷移或增殖為特征的任意疾病。重要的這樣的疾病為癌 癥、鐮狀細胞貧血、血管損傷、增殖性視網(wǎng)膜病和在腎和肺中不需要的內(nèi)皮細胞增殖。
[0018] 在重要的實施方案中，所述阿片樣物質(zhì)拮抗劑為外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑 (peripheral opioid antagonist)。外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑包括，但不限于（第四或第三 左嗎南衍生物（quaternary or tertiary morphinan derivatives)、哌陡-N-燒基羧酸酯 和第四苯并嗎啡燒（quaternary benzomorphans)。一種重要的這種外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑 為甲基納曲酮。另一種阿片樣物質(zhì)拮抗劑為alvimopan。在重要的實施方案中，所述有效 量為能使所述受試者具有的阿片樣物質(zhì)拮抗劑的有效循環(huán)血漿水平持續(xù)至少1周、至少2 周、至少3周和優(yōu)選至少4周。本發(fā)明還包括共同給藥阿片樣物質(zhì)拮抗劑與非阿片樣物質(zhì) 拮抗劑藥劑，但是所述非阿片樣物質(zhì)拮抗劑仍然在治療以不需要的內(nèi)皮細胞遷移或增殖為 特征的疾病中有用。這種藥劑的實例包括抗癌劑、抗新血管形成劑（例如，抗VEGF單克隆 抗體）、抗糖尿病劑、抗鐮狀紅細胞劑、傷口愈合劑和抗內(nèi)皮細胞增殖劑。
[0019] 應(yīng)當(dāng)理解所述受試者可以同時進行阿片樣物質(zhì)治療，也可以不同時進行，取決于 所述受試者患有的特定疾病、疾病的嚴重性和所述患者對于疼痛控制的需要。在某些實施 方案中，所述受試者同時進行阿片樣物質(zhì)治療。在某些實施方案中，所述受試者沒有同時進 行阿片樣物質(zhì)治療。在某些實施方案中，所述受試者同時進行長期阿片樣物質(zhì)治療。在某 些實施方案中，所述受試者沒有同時進行長期阿片樣物質(zhì)治療。
[0020] 根據(jù)本發(fā)明的另一個方案，提供一種抑制內(nèi)皮細胞中VEGF活性的方法。所述方法 包括使細胞與有效量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑接觸。
[0021] 根據(jù)本發(fā)明的另一個方案，提供一種抑制內(nèi)皮細胞中外源性阿片誘導(dǎo)的細胞遷移 或增殖的方法。所述方法包括使細胞與有效量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑接觸。根據(jù)本發(fā)明的另 一個方案，提供一種抑制內(nèi)皮細胞中Rho A活化的方法。所述方法包括使細胞與有效量的 阿片樣物質(zhì)拮抗劑接觸。
[0022] 根據(jù)任一項上述實施方案，所述阿片樣物質(zhì)拮抗劑優(yōu)選地為外周阿片樣物質(zhì)拮抗 齊U，最優(yōu)選為甲基納曲酮。
[0023] 本發(fā)明提供減少腫瘤或癌癥的內(nèi)皮細胞遷移和/或增殖的方法，其包括使細胞與 抗遷移或抗增殖量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑接觸。在另一個方面，本發(fā)明提供減少與癌癥相關(guān) 的血管生成的方法。因此，本發(fā)明涉及治療人類癌癥患者，例如通過減少患者的癌組織中血 管生成的方法，其包括向患者的癌組織給藥有效量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑。本發(fā)明還提供一 種治療異常新血管形成的方法，其包括向需要該治療的患者給藥一定量的阿片樣物質(zhì)拮抗 劑來抑制血管形成。本發(fā)明還包括減少動物組織中腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)移的的方法，其包括使腫 瘤細胞或組織與生長抑制量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑接觸，和減少受試者中過度增殖性細胞增 殖的方法，其包括向受試者給藥至少一種阿片樣物質(zhì)拮抗劑，給藥量為有效地減少過度增 殖性細胞增殖。
[0024] 在一個實施方案中，所述阿片樣物質(zhì)拮抗劑為在手術(shù)前后使用。"手術(shù)前后" 指在外科手術(shù)或外科過程或內(nèi)鏡程序和尤其是涉及除去腫瘤的外科手術(shù)或手術(shù)操作 之前（例如，做準備）、期間和/或立即之后，所述內(nèi)鏡程序例如結(jié)腸鏡檢查、胃鏡檢查 (gastrolaparoscopy)。阿片樣物質(zhì)拮抗劑起減少腫瘤復(fù)發(fā)和/或轉(zhuǎn)移的作用，尤其是由與 此相關(guān)的血管生成產(chǎn)生的。
[0025] 可以預(yù)料阿片樣物質(zhì)拮抗劑將優(yōu)選地以連續(xù)給藥方案給藥，例如保持最少的和甚 至更優(yōu)選地相對固定的血液水平的方案。進一步涉及的是本發(fā)明的方法可在某些與異常血 管生成相關(guān)的某些疾病中具有預(yù)防意義。因此，本發(fā)明提供一種預(yù)防哺乳動物中疾病出現(xiàn) 或再現(xiàn)的方法，所述疾病的特征在于不需要的內(nèi)皮細胞遷移或增殖，所述遷移或增殖包括 異常血管生成，其包括向需要這種治療的哺乳動物給藥有效量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑，其中 所述疾病為癌癥、鐮狀細胞貧血、眼新血管病、糖尿病、眼視網(wǎng)膜病或其他在腎、眼睛或肺中 不需要的內(nèi)皮增殖。因此，應(yīng)當(dāng)理解，如本文使用的治療患有以不需要的內(nèi)皮細胞增殖或遷 移為特征的疾病的受試者包括治療患有活化的疾病的受試者以抑制或治愈所述疾病和治 療受試者以抑制疾病復(fù)發(fā)。例如，所述患者可能已經(jīng)摘除了實體瘤，并且所述患者可接受治 療以抑制腫瘤復(fù)發(fā)。
[0026] 在減少細胞增殖中，本發(fā)明提供一種治療哺乳動物中表達血管內(nèi)皮生長因子 (VEGF)的細胞的異常細胞增殖的方法，其包括向哺乳動物給藥治療有效量的拮抗劑。本 發(fā)明還包括一種治療受試者中癌組織的方法，其包括向所述受試者給藥足夠抑制癌組織中 VEGF生成量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑，以及一種治療血管生成疾病的方法，所述方法包括在有 效地抑制VEGF誘導(dǎo)的血管生成和治療血管生成疾病的條件下使組織或內(nèi)皮細胞群與包含 一定量的至少一種阿片樣物質(zhì)拮抗劑的組合物接觸。
[0027] 在另一個方面，本發(fā)明提供一種抑制或減少例如腫瘤細胞的血管生成，特別是阿 片樣物質(zhì)誘導(dǎo)的血管生成的方法，其通過向經(jīng)歷血管生成的細胞給藥或提供阿片樣物質(zhì)拮 抗劑特別是外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑來進行。在進一步的方面，本發(fā)明提供治療接受阿片樣 物質(zhì)治療的患者中阿片樣物質(zhì)誘導(dǎo)的血管生成或其中血管生成為由內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)誘 導(dǎo)的患者的方法。前者為典型地基于阿片樣物質(zhì)疼痛控制的癌癥患者。所述方法包括向 患者給藥抗血管生成量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑，所述量例如足夠抑制或減少阿片樣物質(zhì)誘導(dǎo) 的血管生成的量。在接受阿片樣物質(zhì)治療的那些患者中，所述阿片樣物質(zhì)和外周阿片樣物 質(zhì)拮抗劑可以共同給藥。因此，外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑可以用于抑制或減小阿片樣物質(zhì)對 腫瘤細胞的血管生成影響和減少腫瘤生長。適宜的阿片樣物質(zhì)拮抗劑通常包括雜環(huán)胺化 合物，其屬于幾種不同類的化合物。例如，一個種類適宜地為左嗎南的第三衍生物，特別是 noroxymorphone的第三衍生物。在一個實施方案中，所述noroxymorphone的第三衍生物為 例如納洛酮或納屈酮。
[0028] 適宜的外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑也通常為雜環(huán)胺化合物，其屬于幾種不同類的化合 物。例如，一個種類適宜地為左嗎南的第四衍生物，特別是noroxymorphone的第四衍生 物。在一個實施方案中，noroxymorphone的第四衍生物為例如N-甲基納曲酮（或簡單的 甲基納曲酮）。另一種類為N-取代的哌啶類化合物。在一個實施方案中，所述N-哌啶為哌 陡-N-燒基羰基酯，比如例如alvimopan。可能在本發(fā)明的方法中有價值的另一種類的化合 物為苯并嗎啡烷的第四衍生物。在本發(fā)明的某些實施方案中，所述阿片樣物質(zhì)拮抗劑可以 是μ阿片樣物質(zhì)拮抗劑。在其他實施方案中，所述阿片樣物質(zhì)拮抗劑可以是κ阿片樣物 質(zhì)拮抗劑。本發(fā)明也包括給藥多于一種阿片樣物質(zhì)拮抗劑，其包括μ拮抗劑的組合、κ拮 抗劑的組合和μ和Κ拮抗劑的組合，例如甲基納曲酮和alvimopan的組合，或納屈酮和甲 基納曲酮的組合。在進一步的實施方案中，本發(fā)明提供治療接受阿片樣物質(zhì)的患者中阿片 樣物質(zhì)誘導(dǎo)的血管生成的方法，其中向所述患者共同給藥外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑和至少一 種其他非阿片樣物質(zhì)或阿片樣物質(zhì)拮抗劑的治療劑。適宜的治療劑包括抗癌劑（包括化療 劑和抗腫瘤劑）以及其他抗血管生成劑。
[0029] 在另一個方面，本發(fā)明提供一種減少醫(yī)學(xué)介入（這樣的介入包括但不局限于外科 手術(shù)，例如肺手術(shù)、外科過程和內(nèi)鏡程序，例如結(jié)腸鏡檢查、胃鏡檢查、化療等）后癌癥或腫 瘤復(fù)發(fā)危險的方法，其包括向癌癥患者共同給藥阿片樣物質(zhì)拮抗劑。因此，本發(fā)明涉及例如 將患者中例如乳腺癌手術(shù)后復(fù)發(fā)降至最小的方法，其包括向患者給藥有效量的阿片樣物質(zhì) 拮抗劑。根據(jù)本發(fā)明的外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑，例如MNTX也可以抑制內(nèi)皮細胞中的VEGF、 血小板衍生生長因子（PDGF)或鞘氨醇1-磷酸酯（SIP)-刺激的或誘導(dǎo)的細胞增殖。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0030] 參照本文給出的具體實施方案的詳細說明與附圖可以更好地理解和領(lǐng)會本發(fā)明， 在所述附圖中：
[0031] 圖1為人微血管內(nèi)皮細胞（HMVEC)遷移的劑量依賴性抑制的柱狀圖，其描述了實 施例1的結(jié)果。
[0032] 圖2為人微血管內(nèi)皮細胞遷移的劑量依賴性抑制的柱狀圖，其描述了實施例2的 結(jié)果。
[0033] 圖3為使用MNTX和MNTX+DAMG0的HMVEC遷移的劑量依賴性抑制的柱狀圖。
[0034] 圖4為使用納洛酮和納洛酮+DAMG0的HMVEC遷移的劑量依賴性抑制的柱狀圖。
[0035] 圖5為M3G和M6G對HMVEC遷移的劑量依賴性作用的柱狀圖。
[0036] 圖6A至6D為顯示在存在MNTX和不存在MNTX下嗎啡誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞遷移的顯微 照片。6A =對照，6B = MS (硫酸嗎啡）、培養(yǎng)板6C = MNTX，培養(yǎng)板6D = MS+MNTX。在培養(yǎng) 板A中的箭頭著重顯示了成功遷移跨越膜的一些細胞。
[0037] 圖7A至7B為在存在VEGF、嗎啡和DAMG0且有或沒有MNTX下人肺微血管內(nèi)皮細胞 的增殖㈧和遷移⑶百分比的柱狀圖。
[0038] 圖8A至8C為顯示在存在VEGF、嗎啡和DAMG0且有或者沒有MNTX下，在人肺微血 管內(nèi)皮細胞中使用免疫沉淀的VEGF R. 1或2和抗磷酸酪氨酸的酪氨酸磷酸化（活化）抗 VEGF R. 1 (Fit-Ι)和2 (FIk-Ι)免疫印跡（A)，和在存在VEGF、嗎啡和DAMG0且有或者沒有 VEGF R.抑制劑下人肺微血管內(nèi)皮細胞的增殖和遷移百分比的柱狀圖（B)。
[0039] 圖9A至9C為顯示在存在VEGF、嗎啡和DAMG0且有或者沒有MNTX (A)或VEGFR.抑 制劑（B)下，在人肺微血管內(nèi)皮細胞中使用抗RhoA的RhoA活化的免疫印跡。
[0040] 圖10A至10C為在存在加擾siRNA(scramble siRNA)(靶向未知的人類mRNA序 列）或RhoA siRNA的人肺微血管內(nèi)皮細胞的抗Rho A免疫印跡（A)和在存在VEGF、嗎啡 和DAMG0且有或者沒有加擾siRNA(靶向未知的人mRNA序列）或RhoA siRNA下人肺微血 管內(nèi)皮細胞的增殖（B)和遷移（C)百分比的柱狀圖。
[0041] 圖11為概述MNTX對血管生成作用機制的示意圖。
[0042] 圖12為在存在SIP、VEGF、PDGF、嗎啡和DAMG0且有或沒有MNTX下肺微血管內(nèi)皮 細胞的增殖高于對照的百分比的柱狀圖。所有激動劑和抑制劑為l〇〇nM。
[0043] 圖13為在存在SIP、VEGF、PDGF、嗎啡和DAMG0且有或沒有MNTX下肺微血管內(nèi)皮 細胞的遷移高于對照的百分比的柱狀圖。所有激動劑和抑制劑為l〇〇nM。
[0044] 圖14為在存在S1P、VEGF、PDGF、嗎啡和DAMG0與加擾（對照）siRNA或與μ阿片 樣物質(zhì)受體siRNA下肺微血管內(nèi)皮細胞的增殖高于對照的百分比的柱狀圖。所有激動劑和 抑制劑為ΙΟΟηΜ。
[0045] 圖15為在存在S1P、VEGF、PDGF、嗎啡和DAMG0與加擾（對照）siRNA或與μ阿片 樣物質(zhì)受體siRNA下肺微血管內(nèi)皮細胞的遷移高于對照的百分比的柱狀圖。所有激動劑和 抑制劑為ΙΟΟηΜ。圖16為顯示在存在嗎啡、DAMG0、S1P、VEGF、PDGF且有MNTX(C、D)或沒有 MNTX(A，B)下使用人肺微血管內(nèi)皮細胞的免疫沉淀的μ阿片樣物質(zhì)受體和（A，C)抗磷酸 絲氨酸、（B，D)抗磷酸蘇氨酸的μ阿片樣物質(zhì)受體的磷酸化（活化）的免疫印跡，（Ε)是 抗μ阿片樣物質(zhì)受體的免疫印記。Mu阿片樣物質(zhì)受體。
[0046] 圖17為在存在嗎啡、DAMG0、S1P、VEGF、PDGF且有MNTX(B)和沒有MNTX⑷下人肺 微血管內(nèi)皮細胞的（A，B)活化的RhoA和（C)總RhoA的抗RhoA免疫印跡。
[0047] 圖18A至18B為在存在嗎啡、DAMG0、VEGF (頂圖）或TOGF (底圖）且有MNTX(B，在 各個圖中）或沒有MNTX(A，在每個圖中）下人肺微血管內(nèi)皮細胞的頂圖：(A，B)抗磷酸酪氨 酸，（C)抗VEGF R和底圖：(A，B)抗磷酸酪氨酸，（C)抗TOGF R的免疫印跡。
[0048] 圖19為顯示在存在嗎啡、DAMG0和S1P且有MNTX (B)或沒有MNTX⑷下使用人肺 微血管內(nèi)皮細胞的免疫沉淀的S1P3受體和（A，B)抗磷酸酪氨酸，（C)抗S1P 3R的酪氨酸磷 酸化（活化）S1P3受體的免疫印跡。使用ΙΟΟηΜ SIP，活化的SIPi受體、SIP3受體。
[0049] 圖20為在存在SIP、VEGF、PDGF、嗎啡和DAMG0與加擾（對照）siRNA或與RhoA siRNA下肺微血管內(nèi)皮細胞的增殖高于對照的百分比的柱狀圖。所有激動劑和抑制劑為 ΙΟΟηΜ。
[0050] 圖21為在存在SIP、VEGF、PDGF、嗎啡和DAMG0與加擾（對照）siRNA或與RhoA siRNA下肺微血管內(nèi)皮細胞的遷移高于對照的百分比的柱狀圖。所有激動劑和抑制劑為 100nM。圖22為概述MNTX對RhoA活化和血管生成作用機制的示意圖。

【具體實施方式】
[0051] 本發(fā)明提供減少異?；虿幌胍膬?nèi)皮細胞遷移和/或增殖的方法。因而，本發(fā)明 提供通過使用阿片樣物質(zhì)拮抗劑減少受試者的組織或器官中血管生成的方法，和治療哺乳 動物中血管生成相關(guān)的疾病和其它過度增生疾病的新方法。例如，如上所述，實體瘤依靠新 血管的生成使營養(yǎng)到達腫瘤內(nèi)的細胞。血管生成需要的生長因子可以通過腫瘤細胞或可替 換的外源性因子產(chǎn)生，比如阿片樣物質(zhì)可以刺激新血管生長。本發(fā)明提供了一種通過使用 阿片樣物質(zhì)拮抗劑治療這樣的腫瘤的新治療方法，其中腫瘤內(nèi)生成的新血管，而不是腫瘤 細胞自身是靶點。該治療不易于導(dǎo)致耐藥性腫瘤細胞的發(fā)育。
[0052] 本文描述的為阿片樣物質(zhì)拮抗劑，其抑制由內(nèi)源性或外源性阿片樣物質(zhì)和生長因 子誘導(dǎo)的增殖和遷移，所述生長因子比如VEGF、PDGF、S1P等。特別地，外周阿片樣物質(zhì)拮抗 劑顯示出抑制阿片樣物質(zhì)和生長因子誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞增殖和遷移的基本功效。外周阿片樣 物質(zhì)拮抗劑甲基納曲酮（MNTX)以濃度依賴性方式抑制阿片樣物質(zhì)和生長因子誘導(dǎo)的增殖 和遷移兩者。而且，納洛酮還抑制阿片樣物質(zhì)誘導(dǎo)的內(nèi)皮遷移。然而，應(yīng)當(dāng)指出在比較高的 摩爾濃度（微摩爾）的納洛酮下出現(xiàn)納洛酮抑制DAMG0誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞遷移。而且，現(xiàn)在 已經(jīng)發(fā)現(xiàn)阿片樣物質(zhì)拮抗劑和外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑，特別是MNTX，經(jīng)由抑制受體磷酸化 和/或轉(zhuǎn)活化及隨后抑制RhoA活化來抑制激動劑誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞（EC)增殖和遷移。所述 激動劑可以為外源性和/或內(nèi)源性的阿片樣物質(zhì)、血管生成因子（VEGF)及其它增殖和/或 遷移刺激因子（PDGF、S1P、S1P 3受體、RhoA等）。這些結(jié)果表明通過阿片樣物質(zhì)拮抗劑抑制 血管生成可以為一種用于其它疾病與癌癥的有用的治療介入。
[0053] 在詳細說明本發(fā)明的任一實施方案前，應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明不限于其在下述說明書中 闡述的或在圖畫的附圖中圖解的本發(fā)明的結(jié)構(gòu)和功能的詳細應(yīng)用。本發(fā)明能夠有其它實施 方式和以多種方式進行實施或進行。還應(yīng)當(dāng)理解本文使用的術(shù)語和專有名詞是用于說明的 目的，不應(yīng)當(dāng)認為是限制。本文使用的術(shù)語比如"包括（including、comprising) "或"具有" 及其變化指包括其后列出項和其同等物以及附加項。
[0054] 除非另有說明，根據(jù)常規(guī)用法使用術(shù)語。然而，如本文使用的下述定義可用于幫助 有經(jīng)驗的實施者理解本發(fā)明。
[0055] "受試者"指人、狗、貓和馬。
[0056] "長期阿片樣物質(zhì)應(yīng)用"指且特征在于需要基本上較高水平的阿片樣物質(zhì)以產(chǎn)生 作為本領(lǐng)域眾所周知的現(xiàn)有阿片樣物質(zhì)應(yīng)用結(jié)果的治療益處。如本文使用的長期阿片樣物 質(zhì)應(yīng)用包括每日阿片樣物質(zhì)治療一周或更長或間歇性阿片樣物質(zhì)應(yīng)用至少兩周。
[0057] "烷基"指脂肪族烴，其是飽和的，并且其可以是在鏈中具有從1至約10個碳原子 的直鏈、支鏈或環(huán)，及其中鏈的所有組合或亞組合。示例性的烷基包括甲基、乙基、正丙基、 異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基和癸基。
[0058] "低級烷基"指具有1至約6個碳原子的烷基。
[0059] "烯基"指在鏈中包含至少一個碳-碳雙鍵和具有從2至約10個碳原子的脂肪族 烴基，及其中鏈的所有組合和亞組合。示例性的烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、 己稀基、庚稀基、半稀基、壬稀基和癸稀基。
[0060] "炔基"指在鏈中包含至少一個碳-碳三鍵和具有從2至約10個碳原子的脂肪族 烴基，及其中鏈的所有組合和亞組合。示例性的炔基包括乙炔基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、 己稀基、庚稀基、半稀基、壬稀基和癸稀基。
[0061] "亞烷基"指具有從1至約6個碳原子的二價脂肪族烴基，及其中鏈的所有組合和 亞組合。所述亞烷基可以是直鏈的、支鏈的或環(huán)狀的。可以任選地在亞烷基中插入一個或 多個氧、硫或任選地取代的氮原子，其中所述氮取代基為如前述的烷基。
[0062] "亞烯基"指包含至少一個碳-碳雙鍵的亞烷基。示例性的亞烯基包括亞乙烯基 (-CH = CH-)和亞丙烯基（CH = CHCH2_)。
[0063] "環(huán)烷基"指具有約3至約10個碳的任意穩(wěn)定的單環(huán)或雙環(huán)，及其中環(huán)的所有組合 和亞組合。所述環(huán)烷基可以任選地用一個或多個環(huán)烷基取代基取代。示例性的環(huán)烷基包括 環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基和環(huán)辛基。
[0064] "環(huán)烷基取代的烷基"指用環(huán)烷基，優(yōu)選(：3_(：8環(huán)烷基在末端碳原子上取代的直鏈烷 基，優(yōu)選低級烷基。示例性的環(huán)烷基取代的烷基包括環(huán)己基甲基、環(huán)己基乙基、環(huán)戊基乙基、 環(huán)戊基丙基、環(huán)丙基甲基等。"環(huán)烯基"指具有約4至約10個碳的烯烴不飽和環(huán)脂族基團， 及其中環(huán)的所有組合和亞組合。
[0065] "烷氧基"指其中烷基為如前述的烷基-0-基。示例性的烷氧基包括，例如甲氧基、 乙氧基、丙氧基、丁氧基和庚氧基。
[0066] "烷氧基-烷基"指其中烷基為如前所述的烷基-0-烷基。
[0067] "?；?指其中烷基為如前所述的烷基-C0基團。示例性的酰基包括乙酰基、丙酰 基、2-甲基丙?；?、丁酰基和棕櫚?；?。
[0068] "芳基"指包含從約6至約10個碳的芳香碳環(huán)基團，及其中環(huán)的所有組合和亞組 合。所述芳基可以任選地用一個或兩個或多個芳基取代基取代。示例性的芳基包括苯基和 萘基。
[0069] "芳基取代的烷基"指用任選地取代的芳基，優(yōu)選任選地取代的苯基環(huán)在末端碳原 子上取代的直鏈烷基，優(yōu)選低級烷基。示例性的芳基取代的烷基包括，例如苯甲基、苯乙基 和3-(4-甲苯基）丙基。
[0070] "雜環(huán)"指包含從約4至約10個成員的單環(huán)或多環(huán)環(huán)狀系統(tǒng)碳環(huán)基，及其中環(huán)的所 有組合和亞組合，其中一個或多個所述環(huán)成員為不同于碳的成員，例如氮、氧或硫。所述雜 環(huán)基可以為芳香的或非芳香的。示例性的雜環(huán)基包括例如吡咯和哌啶。
[0071] "鹵素"指氟、氯、溴或碘。
[0072] 與阿片樣物質(zhì)拮抗劑有關(guān)的"外周"指主要對中樞神經(jīng)系統(tǒng)之外的生理學(xué)系統(tǒng)和 組分起作用的阿片樣物質(zhì)拮抗劑，例如，他們不易于以有效量穿過血腦屏障而抑制阿片樣 物質(zhì)中樞效果。換句話說，當(dāng)外周給藥時，外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑不會有效地抑制阿片樣物 質(zhì)的止痛效果，例如它們不會降低阿片樣物質(zhì)的止痛效果。例如，在本發(fā)明中使用的外周阿 片樣物質(zhì)拮抗劑化合物顯示出與胃腸組織相關(guān)的高水平的活性，而顯示出降低的或基本上 沒有的中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS)活性。在本發(fā)明方法中使用的外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑化合物在 適當(dāng)?shù)仫@示出在CNS中少約5-15%的其藥理學(xué)活性，約0% (例如沒有CNS活性）為最適 宜的。外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑的非中樞作用特征通常與分子的電性、極性和/或大小相關(guān)。 例如，當(dāng)作用于中樞的叔胺阿片樣物質(zhì)拮抗劑為中性分子時，作用于外周的季胺阿片樣物 質(zhì)拮抗劑為帶正電荷的。在本發(fā)明中有用的外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑典型地為μ和/或κ 阿片樣物質(zhì)拮抗劑。
[0073] -般而言，如本文使用的"血管生成抑制"或"抗血管生成"指分子/化合物減少， 例如抑制、降低或調(diào)節(jié)新血管增殖的能力，及例如，在存在某些生長因子下在培養(yǎng)基中降低 或或抑制人微血管內(nèi)皮細胞的遷移和增殖的能力。如上所述，內(nèi)皮細胞形成新血管包括細 胞的遷移、增殖和分化。
[0074] 在下述本發(fā)明的方法的說明中，除非另有說明，制備步驟為在室溫和大氣壓力下 進行。還特別地理解本文敘述的任意數(shù)值范圍包括從下限值至上限值的所有值，例如，在窮 舉的最低值和最高值之間的所有可能的數(shù)值組合將被認為是在本申請中明確標明的。例 如，如果標明濃度范圍或有益效果范圍為如1 %至50%，其是指比如2%至40%、10%至 30%、或1%至3%等的值為在本說明書中明確列舉的。這些僅僅為特別指出的實例。
[0075] 在一個方面，本發(fā)明涉及減少受試者的組織或器官中異?；虿幌胍募毎貏e是 內(nèi)皮細胞遷移和/或增殖和血管生成的方法。所述方法包括向患者的組織或器官的內(nèi)皮細 胞提供或給藥一種或多種有效量的阿片樣物質(zhì)拮抗劑以抑制內(nèi)皮細胞遷移和增殖及血管 生成。所述血管生成可部分為特別地用于癌癥患者中疼痛控制而接受阿片樣物質(zhì)治療或 具有高水平內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)的結(jié)果?？梢钥闯鰡岱群挺碳觿┠X啡肽DAMG0([D-Ala 2、 N-McPhe4、Gly5-醇]腦啡肽）每個都引起內(nèi)皮細胞遷移的劑量-依賴性增加，其類似于血 管內(nèi)皮生長因子（VEGF)的劑量-依賴性增加，如通過趨藥性測定（如在下述實施例中詳細 描述的）或其他類似的用于測定腫瘤血管生成中因子和作用于其的藥物的測定。按臨床適 當(dāng)濃度的嗎啡，效果的大小為通過VEGF獲得的約70%。該基于嗎啡的內(nèi)皮細胞遷移為通過 μ阿片樣物質(zhì)拮抗劑甲基納曲酮（MNTX)以劑量依賴性方式減少。例如，用1(Γ7Μ的低濃度 的嗎啡誘導(dǎo)的內(nèi)皮細胞遷移顯著地被1〇_ 7Μ ΜΝΤΧ阻斷（圖2)。該減弱作用強烈地表明內(nèi) 皮細胞遷移為通過嗎啡對μ阿片樣物質(zhì)受體（M0R)作用介導(dǎo)的。如在下述實施例中描述 的，通過顯示出高選擇性合成腦啡肽μ激動劑DAMG0也誘導(dǎo)遷移的實驗證實了經(jīng)由M0R而 不是其他阿片樣物質(zhì)受體的效果。DAMG0誘導(dǎo)的遷移作用也被ΜΝΤΧ阻斷（圖3)。
[0076] 在一個全面考查中（Neumann等人，Painl982 ;13:247_52)，癌癥患者中的痛覺缺 失與大量穩(wěn)態(tài)濃度的嗎啡和從6至364ng/mL的血漿濃度相關(guān)。觀察到嗎啡以臨床上劑量 范圍內(nèi)的l〇〇ng/ml每孔引起內(nèi)皮細胞遷移的效果。因此，本申請的發(fā)明人相信將保持ΜΝΤΧ 的血漿水平在血漿ΜΝΤΧ為約25至150ng/mL的最低水平的ΜΝΤΧ劑量為適宜的。這樣的劑 量是可達到的和良好耐受的（Yuan等人，J Clin Pharmacol2005;45:538-46)。
[0077] Alvimopan，另一種口服的選擇性外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑，為后期研發(fā)的用于預(yù) 防手術(shù)后腸梗阻和治療阿片樣物質(zhì)誘導(dǎo)的便秘的藥物（Moss等人，Pain relief without side effects : peripheral opioid antagonists. In Schwartz,A. J., editor.33rd ASA Refresher Course in Anesthesiology. Philadelphia:Lippincott Williams & Wilkins (in press))。存在某些 alvimopan 跨膜轉(zhuǎn)運（J.Foss,等人，Clin.Pha;rm.& Ther. 2005, PII-90, p. 74)。因此，其可具有逆轉(zhuǎn)某些阿片樣物質(zhì)的全身效應(yīng)而沒有影響痛 覺缺失的能力，即使當(dāng)口服給藥時。
[0078] 不受任何特定理論的束縛，μ阿片樣物質(zhì)對內(nèi)皮細胞遷移的作用機制存在于膜水 平，因為與納洛酮不同，ΜΝΤΧ在生理學(xué)pH下為帶電分子。嗎啡經(jīng)由G-蛋白質(zhì)偶合受體起 作用，而VEGF通過受體酪氨酸激酶起作用。雖然μ激動劑和VEGF的作用可能是獨立的， 存在增加的受體轉(zhuǎn)活化作為機制的證據(jù)?，F(xiàn)有的研究證實百日咳毒素依賴性GPCRs轉(zhuǎn)活化 VEGF 受體-2/F1 K1 (Zeng, H.等人，J. Biol. Chem. 2003 ;278:20738-45)。按該方式，嗎啡可 以轉(zhuǎn)活化Fllc-Ι，且促進其中可出現(xiàn)內(nèi)皮細胞增殖和腫瘤生長的環(huán)境。用T241纖維肉瘤細 胞感染的M0R敲除（knockout)的小鼠的最新研究證實在嗎啡處理的小鼠和對照組中腫瘤 生長的發(fā)病率有顯著的不同，與對照組相比，在嗎啡處理的小鼠中FI 1C-1表達增加10倍， 相比在嗎啡處理的K0小鼠中沒有增加（K. Gupta, personal communication)。這進一步提 供了嗎啡刺激內(nèi)皮細胞增殖和促進腫瘤生長可能是由轉(zhuǎn)活化FLK1磷酸化的證據(jù)。因而，本 發(fā)明提供了使用MNTX以及其它外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑與目前靶向VEGF的治療劑組合的潛 在臨床策略。盡管受體轉(zhuǎn)活化的直接作用是可能的，涉及腫瘤增殖的潛在附加的因子可能 起作為疼痛和炎癥的累積器（integrators)的趨化因子的作用。在這個問題上的最近綜述 (White 等人，Nature Rev.Drug Discovery2005;4:834_44)也提出了白細胞在活化阿片樣 物質(zhì)受體中可能的作用。
[0079] 而且，可以看出嗎啡、DAMG0和VEGF刺激RhoA活化，所述活化被阿片樣物質(zhì)拮抗劑 比如MNTX抑制。RhoA為一種參與血管生成的重要的信號分子（Aepfelbacher等人，1997 ; Cascone 等人，2003 ;Hoang 等人，2004 ;Liu 和 Sanger, 2004)。VEGF 受體轉(zhuǎn)活化對于麻醉 劑誘導(dǎo)的RhoA活化很重要。沉默（Silencing) RhoA表達阻斷阿片樣物質(zhì)和VEGF誘導(dǎo)的EC 增殖和遷移，其證實了 RhoA活化在激動劑誘導(dǎo)的EC血管生成活性中的作用。RhoA活化的 MNTX介導(dǎo)的減弱可能對于MNTX對阿片樣物質(zhì)和VEGF誘導(dǎo)的血管生成的抑制作用很重要。
[0080] 因為嗎啡及其它阿片樣物質(zhì)以臨床劑量增加內(nèi)皮細胞遷移，本發(fā)明在阿片樣物質(zhì) 拮抗劑治療服用重要劑量和緩釋劑量的阿片樣物質(zhì)的患者中可能有治療價值，所述患者患 有依賴于血管生成過程的腫瘤。進一步地，雖然本發(fā)明人臨床觀察集中在嗎啡上，其為外 源給藥的內(nèi)源性阿片樣物質(zhì)，其由應(yīng)激或疼痛釋放，也可在內(nèi)皮細胞遷移中起作用?；?在下述實施例中詳細描述的內(nèi)皮細胞遷移實驗，MNTX和阿片樣物質(zhì)拮抗劑通常具有如抗 血管生成治療劑的治療價值，即使不存在給藥外源性阿片樣物質(zhì)（如本文詳細描述的）。 預(yù)想到本發(fā)明的方法將抑制或減少腫瘤內(nèi)或周圍的血管生長。抑制腫瘤內(nèi)血管生長防止 了營養(yǎng)和氧被提供給腫瘤以支持載體生長超過某一大小。最小化血管或其他腫瘤的數(shù)量 也減少了腫瘤將轉(zhuǎn)移的概率。本發(fā)明可能在阿片樣物質(zhì)拮抗劑治療患者中有治療價值，所 述患者患有依靠血管生成過程的腫瘤。依靠血管生成過程的腫瘤為實體瘤、白血病和骨髓 瘤。實體瘤包括，但不限于腎上腺皮質(zhì)細胞癌、膀胱瘤：鱗狀細胞癌、膀胱上皮癌；骨瘤：釉 質(zhì)瘤、動脈瘤樣骨囊腫、成軟骨細胞瘤、軟骨瘤、軟骨粘液樣纖維瘤、軟骨粘液樣纖維瘤、軟 骨肉瘤、骨纖維性結(jié)構(gòu)不良、巨細胞瘤、骨軟骨瘤、骨肉瘤；乳腺腫瘤：分泌性導(dǎo)管癌、脊索 瘤；結(jié)腸腫瘤：結(jié)腸直腸腺癌；眼瘤；葡萄膜黑色素瘤（posterior uveal melanoma)、不完 全性骨纖維生成、頭頸鱗狀細胞癌、腎腫瘤：不染色的腎細胞癌、透明細胞腎細胞癌、腎胚細 胞瘤（腎母細胞瘤）、腎：乳頭腎細胞癌、原發(fā)性腎ASPSCR1-TFE3腫瘤、腎細胞癌；肝腫瘤： 肝胚細胞瘤、肝細胞癌；肺腫瘤：非小細胞癌、小細胞癌；軟器官的惡性黑色素瘤；神經(jīng)系統(tǒng) 腫瘤：髓母細胞瘤、腦膜瘤、成神經(jīng)細胞瘤、星形細胞瘤、室管膜瘤、周圍神經(jīng)鞘瘤、嗜鉻細胞 瘤；卵巢腫瘤：上皮細胞瘤、生殖細胞瘤、性索間質(zhì)細胞瘤、周皮細胞瘤；垂體腺瘤；棒狀腫 瘤（rhabdoid tumor);皮膚瘤：表皮良性纖維組織細胞瘤；平滑肌腫瘤：靜脈平滑肌瘤；軟 組織腫瘤：脂肪肉瘤、粘液樣脂肉瘤、低度纖維粘液樣肉瘤、平滑肌肉瘤、軟組織腺泡狀肉 瘤、血管瘤樣纖維組織細胞瘤（AFH)、明細胞肉瘤、結(jié)締組織增生性小圓細胞腫瘤、彈力纖維 瘤、尤因氏瘤、骨胳外粘液樣軟骨肉瘤、炎性成肌纖維胞瘤腫瘤、成脂細胞瘤、脂肪瘤/良性 脂肪瘤、脂肪肉瘤/惡性脂肪瘤、惡性肌上皮瘤、橫紋肌肉瘤、滑膜肉瘤、扁平細胞癌；睪丸 腫瘤：生殖細胞瘤、精母細胞精原細胞瘤；甲狀腺瘤：退行發(fā)育的（未分化的）癌、嗜酸瘤細 胞瘤、乳頭狀癌；子宮腫瘤：子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、平滑肌瘤等。在本發(fā)明的一個實施方案 中，所述腫瘤為前列腺癌、胃腸腫瘤比如結(jié)腸癌或胰癌，本發(fā)明的化合物與如本文所述的其 他抗癌劑共同給藥。
[0081] 根據(jù)本發(fā)明的阿片樣物質(zhì)拮抗劑包括中樞和外周作用的阿片樣物質(zhì)拮抗劑。預(yù) 期到特別有用的那些拮抗劑適宜地為外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑。特別適宜的為μ阿片樣 物質(zhì)拮抗劑，特別是μ外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑。阿片樣物質(zhì)拮抗劑形成一類可以在結(jié)構(gòu) 方面改變同時保持外周受限性質(zhì)的化合物。這些化合物包括第三和第四左嗎南，特別是 noroxymorphone衍生物、Ν-取代的哌陡，并且特別是哌陡-Ν-羧酸酯和20第三和第四苯并 嗎啡燒（20tertiary and quaternary benzomorphans)。外周受限制的拮抗劑，同時其在結(jié) 構(gòu)方面改變，典型地為帶電的，極化的和/或高分子量，其中的每點都阻止了他們跨過血腦 屏障。
[0082] 阿片樣物質(zhì)拮抗劑的實例，其穿過血腦屏障且具有中樞（和外周）活性，包括例如 納洛酮、納屈酮（其中的每種都為從Baxter Pharmaceutical Products, Inc市售獲得）和 納美芬（例如可從DuPont Pharma獲得）。這些可在減少中樞神經(jīng)系統(tǒng)中或在沒有用于疼 痛控制治療的或其他阿片樣物質(zhì)治療的患者中的血管生成中有價值。
[0083] 本發(fā)明所用的外周阿片樣物質(zhì)可以是第四左嗎南衍生物的化合物，特別是式（I) 的第四 noroxymorphone :
[0084]

【權(quán)利要求】
1. 外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑在制備治療受試者以異?；虿幌胍陌⑵瑯游镔|(zhì)誘導(dǎo)的內(nèi) 皮細胞遷移和/或增殖為特征的疾病的藥物中的用途，其中所述受試者同時進行阿片樣物 質(zhì)治療，且其中所述疾病選自糖尿病或鐮狀細胞貧血。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述的內(nèi)皮細胞為血管內(nèi)皮細胞。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述的藥物以使所述受試者具有的阿片樣物質(zhì)拮 抗劑的有效循環(huán)血漿水平持續(xù)至少1周的有效量給藥。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述疾病為糖尿病。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述疾病為鐮狀細胞貧血。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述受試者同時進行長期阿片樣物質(zhì)治療。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑選自：第四左嗎南衍生物， 哌啶-N-烷基羧酸酯或第四苯并嗎啡烷。
8. 外周阿片樣物質(zhì)拮抗劑在制備通過抑制內(nèi)皮細胞中VEGF活性、內(nèi)皮細胞中外源性 阿片樣物質(zhì)誘導(dǎo)的細胞遷移和/或增殖、或內(nèi)皮細胞中Rho A活化治療受試者中糖尿病或 鐮狀細胞貧血的疾病的藥物中的用途。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述的藥物以使所述受試者具有的阿片樣物質(zhì)拮 抗劑的有效循環(huán)血漿水平持續(xù)至少2周的有效量給藥。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述的藥物以使所述受試者具有的阿片樣物質(zhì) 拮抗劑的有效循環(huán)血漿水平持續(xù)至少3周的有效量給藥。
11. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其中所述的藥物以使所述受試者具有的阿片樣物質(zhì) 拮抗劑的有效循環(huán)血漿水平持續(xù)至少4周的有效量給藥。
【文檔編號】A61P3/10GK104248763SQ201410398475
【公開日】2014年12月31日 申請日期:2006年3月7日 優(yōu)先權(quán)日:2005年3月7日
【發(fā)明者】J·莫斯, M·林根, P·A·辛格爾頓, J·G·N·加西亞 申請人:芝加哥大學(xué)