一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料，它是乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物先接枝聚合殼聚糖，得到接枝聚合殼聚糖，將所得的接枝聚合殼聚糖與生物大分子物質(zhì)通過氫鍵連接得到的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料，本發(fā)明的接枝殼聚糖止血敷料具有良好的生物相容性，并且具有較強(qiáng)的吸水膨脹、持水保濕性能、粘附潤(rùn)滑性能，在殺菌止血的同時(shí)能預(yù)防創(chuàng)面感染，促進(jìn)創(chuàng)面組織的恢復(fù)，減少疤痕的產(chǎn)生。本發(fā)明的接枝殼聚糖止血敷料具有天然的生物可降解性，使用后的止血敷料易于處理，減輕了對(duì)環(huán)境的污染。
【專利說明】一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料及其制 備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)用材料，具體涉及一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷 料及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 殼聚糖是由自然界廣泛存在的加殼質(zhì)經(jīng)過脫乙酰作用所得，是自然界中可再生的 陽(yáng)離子多糖，可通過吸附和聚集帶負(fù)電荷的紅細(xì)胞達(dá)到止血目的，并且由于其具有低過敏 原性和天然殺菌性能，可用作止血敷料。殼聚糖本身除止血以外，其他的效果如抗炎抑菌、 促進(jìn)組織修復(fù)很不明顯，目前殼聚糖止血材料的制備主要采用殼聚糖與與其他成分如消炎 鎮(zhèn)痛藥的簡(jiǎn)單混合，不能充分發(fā)揮殼聚糖的止血功能，并且使用后如果與傷口粘合，不易除 去，容易給傷者帶來痛苦。
[0003] 專利200810198164. 4公開了一種聚乙烯醇/載藥殼聚糖消炎防粘連止血海綿的 制備方法，但是制備采用常規(guī)溶液聚合反應(yīng)，加入了交聯(lián)劑和表面活性劑，并且制備工藝復(fù) 雜，工序繁瑣。專利201310662052.0公開了一種醫(yī)用殼聚糖止血敷料，將殼聚糖、交聯(lián)透明 質(zhì)酸、抗菌劑、鎮(zhèn)痛消炎劑等混合，但是使用后容易與傷口粘合，不易去除。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的是提供一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料及其制 備方法，用以解決上述問題。
[0005] 本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的，通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)： 一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料，其特征在于：它是乙烯化合物及 其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物先接枝聚合殼聚糖，得到接枝聚合殼聚 糖，將所得的接枝聚合殼聚糖與生物大分子物質(zhì)通過氫鍵連接得到的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié) 構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料；所述乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化 合物為丙烯酸、丙烯酰胺、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、2-甲基丙烯酸甲酯、2-甲基丙烯酸乙 酯、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚氨酯、聚氧乙烯或聚氧丙烯中的任一種或任兩種；所述生物大分 子物質(zhì)為海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸鹽、水溶性生物纖維素或膠原蛋白中的任一種。
[0006] 本發(fā)明還涉及一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備方法，步 驟如下： (1) 將殼聚糖溶解于醋酸溶液中攪拌溶解，靜置去泡，得到殼聚糖溶液，將其流延真空 干燥得到殼聚糖膜，所述醋酸溶液的體積百分比為1~3%，殼聚糖與稀醋酸的質(zhì)量體積比為 Ig :4~6ml ; (2) 步驟（1)所得殼聚糖膜采用等離子體技術(shù)處理，處理時(shí)為惰性氣體氛圍，殼聚糖膜 與電極之間的距離為5?10mm，處理功率為5(T70W，放電頻率為10kHz，處理時(shí)間為8?12min， 處理完畢將殼聚糖膜與空氣接觸ΚΓ20分鐘，將其放入乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧 乙烯化合物及其嵌段化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1~5%水溶液中進(jìn)行接枝反應(yīng)，反應(yīng)溫度為(T5°C， 反應(yīng)在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行，得到接枝聚合殼聚糖膜，所述殼聚糖膜與乙烯化合物及其嵌段化 合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物的質(zhì)量比為1 :1~2,所述惰性氣體為He、Ar或N2中 的任一種，所述乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物為丙烯酸、 丙烯酰胺、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、2-甲基丙烯酸甲酯、2-甲基丙烯酸乙酯、聚乙二醇、聚 乙烯醇、聚氨酯、聚氧乙烯或聚氧丙烯中的任一種或任兩種； (3) 將步驟（2)所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗20~24h，將其溶于去離子水中得 到接枝聚合殼聚糖溶液，所述接枝聚合殼聚糖膜與去離子水的質(zhì)量體積比為Ig :4~6ml ; (4) 將生物大分子物質(zhì)溶于去離子水中得到生物大分子物質(zhì)溶液，所述生物大分子物 質(zhì)與去離子水的質(zhì)量體積比為Ig :4~6ml，所述生物大分子物質(zhì)為海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、透 明質(zhì)酸鹽、水溶性生物纖維素或膠原蛋白中的任一種； (5) 將步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液和步驟（4)所得生物大分子物質(zhì)溶液加 入反應(yīng)裝置中，加入氯仿，將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂?，?5~40°C的空氣振蕩浴中振蕩 20?25h，振蕩速度為9(Tll0rpm，將反應(yīng)裝置在溫度為0?5°C下超聲5(T70min，當(dāng)反應(yīng)裝置 內(nèi)溶液澄清時(shí)，停止超聲，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液的pH為3. 8~5. 5,向反應(yīng)裝置內(nèi)加入甲 醇回流2~3h得到反應(yīng)液，所述步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液、生物大分子物質(zhì)溶液、氯 仿與甲醇的體積比為1 :1 :5 :5,所述超聲采用間歇脈沖工作方式，脈沖時(shí)間為3s，間歇時(shí)間 為5s ; (6) 對(duì)步驟（5)的反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶 齊U、干燥，得到具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末，經(jīng)輻照滅菌得到具有三維多重網(wǎng) 絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0007] 為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，還可以采用以下技術(shù)方案： 優(yōu)選的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備方法，其特征在于： 步驟（6 )所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入丙三醇和去離子水，其中步 驟（6)所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末、丙三醇和去離子水的質(zhì)量比為1 : 2?3 :15?25。
[0008] 優(yōu)選的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備方法，其特征在 于：步驟（6)所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入丙三醇和去離子水后， 再加入膠原蛋白或透明質(zhì)酸中的任一種或任兩種。
[0009] 進(jìn)一步優(yōu)選的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備方法，其 特征在于： (1) 將3g殼聚糖加入盛有15ml體積百分比為2%的醋酸溶液中，攪拌溶解后靜置去泡， 得到殼聚糖溶液，將殼聚糖溶液流延真空干燥得到殼聚糖膜； (2) 步驟（1)所得殼聚糖膜采用等離子體技術(shù)處理，處理時(shí)為Ar氣氛圍，殼聚糖與電極 之間的距離為8mm，處理功率為60W，放電功率為10kHz，處理時(shí)間為lOmin，處理完畢將殼聚 糖膜與空氣接觸15min，將其放入225ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物的 水溶液中，在4°C下，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行接枝反應(yīng)，得到接枝聚合殼聚糖膜； (3) 將步驟（2)所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗24h，將3g用蒸餾水沖洗后的聚 氧嵌段殼聚糖膜溶于15ml去離子水中，得到接枝聚合殼聚糖溶液； (4) 將3g海藻酸鈉溶于15ml去離子水中，得到海藻酸鈉溶液； (5) 將IOml步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液和IOml步驟（4)所得海藻酸鈉溶液加 入反應(yīng)裝置中，加入50ml氯仿，將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂?，?7°C的空氣振蕩浴中振蕩 24h，振蕩速度為lOOrpm，將反應(yīng)裝置在溫度為4°C下超聲60min，超聲采用間歇脈沖工作方 式，脈沖時(shí)間為3s,間歇時(shí)間為5s,超聲結(jié)束后反應(yīng)裝置內(nèi)的溶液為澄清溶液,用氫氧化鈉 溶液調(diào)節(jié)澄清溶液的pH為5. 0,向澄清溶液中加入50ml甲醇回流2h得到反應(yīng)液； (6) 對(duì)步驟（5)的反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶 齊U、干燥，得到3. 5g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末，經(jīng)輻照滅菌得到具有三維 多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0010] 本發(fā)明的提供的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料，采用低溫等 離子體技術(shù)得到接枝聚合殼聚糖，將接枝聚合殼聚糖通過氫鍵與生物大分子連接，從而使 材料具有三維多重網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。采用低溫等離子體技術(shù)既保持了殼聚糖本身的止血抗菌性 能，又能有效改善殼聚糖本身材料的表面活性，提高止血材料的粘合力和粘附性，使敷料在 止血時(shí)不易脫落；材料本身為三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，內(nèi)部結(jié)構(gòu)疏松，在止血后形成凝膠膜狀物 質(zhì)，傷口有舒適感，且止血后容易脫落，便于傷口處理。
[0011] 本發(fā)明的接枝殼聚糖止血敷料具有良好的生物相容性，并且具有較強(qiáng)的吸水膨 脹、持水保濕性能、粘附潤(rùn)滑性能，在殺菌止血的同時(shí)能預(yù)防創(chuàng)面感染，促進(jìn)創(chuàng)面組織的恢 復(fù)，減少疤痕的產(chǎn)生。本發(fā)明的接枝殼聚糖止血敷料具有天然的生物可降解性，使用后的止 血敷料易于處理，減輕了對(duì)環(huán)境的污染。

【具體實(shí)施方式】
[0012] 本發(fā)明的目的是提供一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料及其制 備方法，用以解決上述問題。
[0013] 本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)上述目的，通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)： 一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料，其特征在于：它是乙烯化合物及 其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物先接枝聚合殼聚糖，得到接枝聚合殼聚 糖，將所得的接枝聚合殼聚糖與生物大分子物質(zhì)通過氫鍵連接得到的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié) 構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料；所述乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化 合物為丙烯酸、丙烯酰胺、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、2-甲基丙烯酸甲酯、2-甲基丙烯酸乙 酯、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚氨酯、聚氧乙烯或聚氧丙烯中的任一種或任兩種；所述生物大分 子物質(zhì)為海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸鹽、水溶性生物纖維素或膠原蛋白中的任一種。
[0014] 本發(fā)明還涉及一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備方法，步 驟如下： (1) 將殼聚糖溶解于醋酸溶液中攪拌溶解，靜置去泡，得到殼聚糖溶液，將其流延真空 干燥得到殼聚糖膜，所述醋酸溶液的體積百分比為1~3%，殼聚糖與稀醋酸的質(zhì)量體積比為 Ig :4~6ml ; (2) 步驟（1)所得殼聚糖膜采用等離子體技術(shù)處理，處理時(shí)為惰性氣體氛圍，殼聚糖膜 與電極之間的距離為5?10mm，處理功率為5(T70W，放電頻率為10kHz，處理時(shí)間為8?12min， 處理完畢將殼聚糖膜與空氣接觸ΚΓ20分鐘，將其放入乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧 乙烯化合物及其嵌段化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1~5%水溶液中進(jìn)行接枝反應(yīng)，反應(yīng)溫度為(T5°C， 反應(yīng)在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行，得到接枝聚合殼聚糖膜，所述殼聚糖膜與乙烯化合物及其嵌段化 合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物的質(zhì)量比為1 :1~2,所述惰性氣體為He、Ar或N2中 的任一種，所述乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物為丙烯酸、 丙烯酰胺、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、2-甲基丙烯酸甲酯、2-甲基丙烯酸乙酯、聚乙二醇、聚 乙烯醇、聚氨酯、聚氧乙烯或聚氧丙烯中的任一種或任兩種； (3) 將步驟（2)所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗20~24h，將其溶于去離子水中得 到接枝聚合殼聚糖溶液，所述接枝聚合殼聚糖膜與去離子水的質(zhì)量體積比為Ig :4~6ml ; (4) 將生物大分子物質(zhì)溶于去離子水中得到生物大分子物質(zhì)溶液，所述生物大分子物 質(zhì)與去離子水的質(zhì)量體積比為Ig :4~6ml，所述生物大分子物質(zhì)為海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、透 明質(zhì)酸鹽、水溶性生物纖維素或膠原蛋白中的任一種； (5) 將步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液和步驟（4)所得生物大分子物質(zhì)溶液加 入反應(yīng)裝置中，加入氯仿，將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂?，?5~40°C的空氣振蕩浴中振蕩 20?25h，振蕩速度為9(Tll0rpm，將反應(yīng)裝置在溫度為0?5°C下超聲5(T70min，當(dāng)反應(yīng)裝置 內(nèi)溶液澄清時(shí)，停止超聲，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液的pH為3. 8~5. 5,向反應(yīng)裝置內(nèi)加入甲 醇回流2~3h得到反應(yīng)液，所述步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液、生物大分子物質(zhì)溶液、氯 仿與甲醇的體積比為1 :1 :5 :5,所述超聲采用間歇脈沖工作方式，脈沖時(shí)間為3s，間歇時(shí)間 為5s ; (6) 對(duì)步驟（5)的反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶 齊U、干燥，得到具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末，經(jīng)輻照滅菌得到具有三維多重網(wǎng) 絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0015] 為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，還可以采用以下技術(shù)方案： 優(yōu)選的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備方法，其特征在于： 步驟（6 )所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入丙三醇和去離子水，其中步 驟（6)所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末、丙三醇和去離子水的質(zhì)量比為1 : 2?3 :15?25。
[0016] 優(yōu)選的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備方法，其特征在 于：步驟（6)所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入丙三醇和去離子水后， 再加入膠原蛋白或透明質(zhì)酸中的任一種或任兩種。
[0017] 進(jìn)一步優(yōu)選的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備方法，其 特征在于： (1) 將3g殼聚糖加入盛有15ml體積百分比為2%的醋酸溶液中，攪拌溶解后靜置去泡， 得到殼聚糖溶液，將殼聚糖溶液流延真空干燥得到殼聚糖膜； (2) 步驟（1)所得殼聚糖膜采用等離子體技術(shù)處理，處理時(shí)為Ar氣氛圍，殼聚糖與電極 之間的距離為8mm，處理功率為60W，放電功率為10kHz，處理時(shí)間為lOmin，處理完畢將殼聚 糖膜與空氣接觸15min，將其放入225ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物的 水溶液中，在4°C下，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行接枝反應(yīng)，得到接枝聚合殼聚糖膜； (3) 將步驟（2)所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗24h，將3g用蒸餾水沖洗后的聚 氧嵌段殼聚糖膜溶于15ml去離子水中，得到接枝聚合殼聚糖溶液； (4) 將3g海藻酸鈉溶于15ml去離子水中，得到海藻酸鈉溶液； (5) 將IOml步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液和IOml步驟（4)所得海藻酸鈉溶液加 入反應(yīng)裝置中，加入50ml氯仿，將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂螅?7°C的空氣振蕩浴中振蕩 24h，振蕩速度為lOOrpm，將反應(yīng)裝置在溫度為4°C下超聲60min，超聲采用間歇脈沖工作方 式，脈沖時(shí)間為3s,間歇時(shí)間為5s,超聲結(jié)束后反應(yīng)裝置內(nèi)的溶液為澄清溶液,用氫氧化鈉 溶液調(diào)節(jié)澄清溶液的pH為5. 0,向澄清溶液中加入50ml甲醇回流2h得到反應(yīng)液； (6) 對(duì)步驟（5)的反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶 齊U、干燥，得到3. 5g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末，經(jīng)輻照滅菌得到具有三維 多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0018] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但不限制本發(fā)明。
[0019] 本實(shí)施例采用的殼聚糖脫乙酰度> 85%。
[0020] 實(shí)施例1 將3g殼聚糖加入盛有15ml體積百分比為2%的醋酸溶液中，攪拌溶解后靜置去泡，得 到殼聚糖溶液，將殼聚糖溶液流延真空干燥得到殼聚糖膜，所得殼聚糖膜采用等離子體技 術(shù)處理，處理時(shí)為Ar氣氛圍，殼聚糖與電極之間的距離為8mm，處理功率為60W，放電功率為 10kHz，處理時(shí)間為lOmin，處理完畢將殼聚糖膜與空氣接觸15min，將其放入225ml質(zhì)量分 數(shù)2%的聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物的水溶液中，在4°C下，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行接枝反 應(yīng)，得到接枝聚合殼聚糖膜，所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗24h，以除去未反應(yīng)的聚 氧乙烯及生成的共聚物，后稱取3g接枝聚合殼聚糖膜溶于15ml去離子水中，得到接枝聚合 殼聚糖溶液； 另取3g海藻酸鈉溶于15ml去離子水中，得到海藻酸鈉溶液； 將IOml接枝聚合殼聚糖溶液和IOml海藻酸鈉溶液加入反應(yīng)裝置中，加入50ml氯仿， 將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂?，?7°C的空氣振蕩浴中振蕩24h，振蕩速度為lOOrpm，將反應(yīng) 裝置在溫度為4°C下超聲60min，超聲采用間歇脈沖工作方式，脈沖時(shí)間為3s，間歇時(shí)間為 5s，超聲結(jié)束后反應(yīng)裝置內(nèi)的溶液為澄清溶液，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)澄清溶液的pH為5. 0， 向澄清溶液中加入50ml甲醇回流2h得到反應(yīng)液； 對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶劑、干燥，得到 3. 5g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末，經(jīng)輻照滅菌得到粉末狀具有三維多重網(wǎng)絡(luò) 結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0021] 實(shí)施例2 將3g殼聚糖加入盛有18ml體積百分比為1%的醋酸溶液中，攪拌溶解后靜置去泡，得 到殼聚糖溶液，將殼聚糖溶液流延真空干燥得到殼聚糖膜，所得殼聚糖膜采用等離子體技 術(shù)處理，處理時(shí)為He氛圍，殼聚糖與電極之間的距離為5mm，處理功率為50W，放電功率為 10kHz，處理時(shí)間為8min，處理完畢將殼聚糖膜與空氣接觸lOmin，將其放入300ml質(zhì)量分 數(shù)1%的聚氧乙烯的水溶液中，在〇°C下，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行接枝反應(yīng)，得到接枝聚合殼聚糖 膜，所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗20h，后稱取3g溶于12ml去離子水中，得到接枝聚 合殼聚糖溶液； 另取3g海藻酸鈉溶于12ml去離子水中，得到海藻酸鈉溶液； 將IOml接枝聚合殼聚糖溶液和IOml海藻酸鈉溶液加入反應(yīng)裝置中，加入50ml氯仿， 將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂螅?5°C的空氣振蕩浴中振蕩20h，振蕩速度為90rpm，將反應(yīng) 裝置在溫度為〇°C下超聲50min，超聲采用間歇脈沖工作方式，脈沖時(shí)間為3s，間歇時(shí)間為 5s，超聲結(jié)束后反應(yīng)裝置內(nèi)的溶液為澄清溶液，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)澄清溶液的pH為3. 8， 向澄清溶液中加入50ml甲醇回流3h得到反應(yīng)液； 對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶劑、干燥，得到 3. 7g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末。
[0022] 取2g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入6g丙三醇、50g去離子水，攪 拌1小時(shí)，-18°C冷凍1小時(shí)再在-50°C冷凍干燥5小時(shí)，得到互穿網(wǎng)絡(luò)孔隙材料，經(jīng)輻照滅 菌后得到互穿網(wǎng)絡(luò)孔隙狀具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0023] 實(shí)施例3 將3g殼聚糖加入盛有12ml體積百分比為3%的醋酸溶液中，攪拌溶解后靜置去泡，得 到殼聚糖溶液，將殼聚糖溶液流延真空干燥得到殼聚糖膜，所得殼聚糖膜采用等離子體技 術(shù)處理，處理時(shí)為N2氛圍，殼聚糖與電極之間的距離為10mm，處理功率為70W，放電功率為 10kHz，處理時(shí)間為12min，處理完畢將殼聚糖膜與空氣接觸20min，將其放入120ml質(zhì)量分 數(shù)5%的丙烯酰胺水溶液中，在5°C下，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行接枝反應(yīng)，得到接枝聚合殼聚糖 膜，所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗22h，后稱取3g溶于18ml去離子水中，得到接枝聚 合殼聚糖溶液； 另取3g海藻酸鈉溶于18ml去離子水中，得到海藻酸鈉溶液； 將IOml接枝聚合殼聚糖溶液和IOml海藻酸鈉溶液加入反應(yīng)裝置中，加入50ml氯仿， 將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂?，?0°C的空氣振蕩浴中振蕩25h，振蕩速度為IlOrpm，將反應(yīng) 裝置在溫度為5°C下超聲70min，超聲采用間歇脈沖工作方式，脈沖時(shí)間為3s，間歇時(shí)間為 5s，超聲結(jié)束后反應(yīng)裝置內(nèi)的溶液為澄清溶液，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)澄清溶液的pH為5. 5， 向澄清溶液中加入50ml甲醇回流2. 5h得到反應(yīng)液； 對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶劑、干燥，得到 3. 4g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末。
[0024] 取3g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入3g膠原蛋白、Ig透明質(zhì)酸鈉、 12g丙三醇、IOOg去離子水，攪拌1小時(shí)，得到具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖凝膠，灌 裝后經(jīng)輻照滅菌后得到凝膠狀具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0025] 實(shí)施例4 將3g殼聚糖加入盛有12ml體積百分比為1%的醋酸溶液中，攪拌溶解后靜置去泡，得 到殼聚糖溶液，將殼聚糖溶液流延真空干燥得到殼聚糖膜，所得殼聚糖膜采用等離子體技 術(shù)處理，處理時(shí)為N2氛圍，殼聚糖與電極之間的距離為7mm，處理功率為60W，放電功率為 10kHz，處理時(shí)間為lOmin，處理完畢將殼聚糖膜與空氣接觸lOmin，將其放入150ml質(zhì)量分 數(shù)3%的丙烯酸乙酯水溶液中，在:TC下，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行接枝反應(yīng)，得到接枝聚合殼聚糖 膜，所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗21h，后稱取3g溶于15ml去離子水中，得到接枝聚 合殼聚糖溶液； 另取3g海藻酸鈉溶于15ml去離子水中，得到海藻酸鈉溶液； 將IOml接枝聚合殼聚糖溶液和IOml海藻酸鈉溶液加入反應(yīng)裝置中，加入50ml氯仿， 將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂?，?8°C的空氣振蕩浴中振蕩21h，振蕩速度為90rpm，將反應(yīng) 裝置在溫度為2°C下超聲60min，超聲采用間歇脈沖工作方式，脈沖時(shí)間為3s，間歇時(shí)間為 5s，超聲結(jié)束后反應(yīng)裝置內(nèi)的溶液為澄清溶液，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)澄清溶液的pH為4. 0， 向澄清溶液中加入50ml甲醇回流2h得到反應(yīng)液； 對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶劑、干燥，得到 3. 6g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末。
[0026] 取3g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入2g膠原蛋白、7g丙三醇、50g 去離子水，攪拌1小時(shí)，在玻璃板上流延成膜，_18°C冷凍1小時(shí)再在_50°C冷凍干燥5小時(shí)， 得到膜狀具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖，經(jīng)輻照滅菌后得到膜狀具有三維多重網(wǎng)絡(luò) 結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0027] 實(shí)施例5 將3g殼聚糖加入盛有12ml體積百分比為2%的醋酸溶液中，攪拌溶解后靜置去泡，得 到殼聚糖溶液，將殼聚糖溶液流延真空干燥得到殼聚糖膜，所得殼聚糖膜采用等離子體技 術(shù)處理，處理時(shí)為N2氛圍，殼聚糖與電極之間的距離為6mm，處理功率為70W，放電功率為 10kHz，處理時(shí)間為lOmin，處理完畢將殼聚糖膜與空氣接觸8min，將其放入200ml質(zhì)量分?jǐn)?shù) 3%的聚乙烯醇水溶液中，在2°C下，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行接枝反應(yīng)，得到接枝聚合殼聚糖膜， 所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗21h，后稱取3g溶于15ml去離子水中，得到接枝聚合 殼聚糖溶液； 另取3g海藻酸鈉溶于15ml去離子水中，得到海藻酸鈉溶液； 將IOml接枝聚合殼聚糖溶液和IOml海藻酸鈉溶液加入反應(yīng)裝置中，加入50ml氯仿， 將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂?，?8°C的空氣振蕩浴中振蕩21h，振蕩速度為90rpm，將反應(yīng) 裝置在溫度為2°C下超聲60min，超聲采用間歇脈沖工作方式，脈沖時(shí)間為3s，間歇時(shí)間為 5s，超聲結(jié)束后反應(yīng)裝置內(nèi)的溶液為澄清溶液，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)澄清溶液的pH為4. 0， 向澄清溶液中加入50ml甲醇回流2h得到反應(yīng)液； 對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶劑、干燥，得到 3. 3g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末，經(jīng)輻照滅菌后得到粉末狀具有三維多重網(wǎng) 絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
[0028] 1.大鼠股動(dòng)脈止血實(shí)驗(yàn) 選取18只28(T320g健康Wistar大鼠，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，每組6只大鼠，分組 依次是空白對(duì)照組、加壓紗布包扎組和實(shí)施例1接枝殼聚糖止血敷料組；將大鼠麻醉后固 定于手術(shù)臺(tái)上，去毛后露出一側(cè)股動(dòng)脈，橫向切開一半，令其自由噴血8s，然后根據(jù)分組進(jìn) 行相應(yīng)處理，記錄止血時(shí)間、失血量和90分鐘死亡率。結(jié)果如表1所示。
[0029] 表1大鼠股動(dòng)脈止血實(shí)驗(yàn)結(jié)果

【權(quán)利要求】
1. 一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料，其特征在于：它是乙烯化合物 及其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物先接枝聚合殼聚糖，得到接枝聚合殼聚 糖，將所得的接枝聚合殼聚糖與生物大分子物質(zhì)通過氫鍵連接得到的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié) 構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料； 所述乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物為丙烯酸、丙烯 酰胺、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、2-甲基丙烯酸甲酯、2-甲基丙烯酸乙酯、聚乙二醇、聚乙烯 醇、聚氨酯、聚氧乙烯或聚氧丙烯中的任一種或任兩種； 所述生物大分子物質(zhì)為海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸鹽、水溶性生物纖維素或膠原蛋 白中的任一種。
2. 權(quán)利要求1所述的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的方法，其特 征在于，步驟如下： 將殼聚糖溶解于醋酸溶液中攪拌溶解，靜置去泡，得到殼聚糖溶液，將其流延真空干燥 得到殼聚糖膜，所述醋酸溶液的體積百分比為1~3%，殼聚糖與稀醋酸的質(zhì)量體積比為lg : 4~6ml ; 步驟（1)所得殼聚糖膜采用等離子體技術(shù)處理，處理時(shí)為惰性氣體氛圍，殼聚糖膜與電 極之間的距離為5?10mm，處理功率為5(T70W，放電頻率為10kHz，處理時(shí)間為8?12min，處理 完畢將殼聚糖膜與空氣接觸ΚΓ20分鐘，將其放入乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧乙烯 化合物及其嵌段化合物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1~5%水溶液中進(jìn)行接枝反應(yīng)，反應(yīng)溫度為(T5°C，反應(yīng) 在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行，得到接枝聚合殼聚糖膜，所述殼聚糖膜與乙烯化合物及其嵌段化合物 或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物的質(zhì)量比為1 :1~2,所述惰性氣體為He、Ar或隊(duì)中的任 一種，所述乙烯化合物及其嵌段化合物或聚氧乙烯化合物及其嵌段化合物為丙烯酸、丙烯 酰胺、丙烯酸甲酯、丙烯酸乙酯、2-甲基丙烯酸甲酯、2-甲基丙烯酸乙酯、聚乙二醇、聚乙烯 醇、聚氨酯、聚氧乙烯或聚氧丙烯中的任一種或任兩種； 將步驟（2)所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗20~24h，將其溶于去離子水中得到接 枝聚合殼聚糖溶液，所述接枝聚合殼聚糖膜與去離子水的質(zhì)量體積比為lg :4~6ml ; 將生物大分子物質(zhì)溶于去離子水中得到生物大分子物質(zhì)溶液，所述生物大分子物質(zhì)與 去離子水的質(zhì)量體積比為lg:4~6ml，所述生物大分子物質(zhì)為海藻酸鈉、透明質(zhì)酸、透明質(zhì) 酸鹽、水溶性生物纖維素或膠原蛋白中的任一種； 將步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液和步驟（4)所得生物大分子物質(zhì)溶液加入反應(yīng)裝 置中，加入氯仿，將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂螅?5~40°C的空氣振蕩浴中振蕩20~25h，振 蕩速度為9(Tll0rpm，將反應(yīng)裝置在溫度為(T5°C下超聲5(T70min，當(dāng)反應(yīng)裝置內(nèi)溶液澄清 時(shí)，停止超聲，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液的pH為3. 8~5. 5,加入甲醇回流2~3h得到反應(yīng)液， 所述步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液、生物大分子物質(zhì)溶液、氯仿與甲醇的體積比為1 : 1 :5 :5,所述超聲采用間歇脈沖工作方式，脈沖時(shí)間為3s，間歇時(shí)間為5s ; 對(duì)步驟（5)的反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶劑、 干燥，得到具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末，經(jīng)輻照滅菌得到具有三維多重網(wǎng)絡(luò) 結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備 方法，其特征在于：步驟（6)所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入丙三醇 和去離子水，其中步驟（6 )所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末、丙三醇和去離 子水的質(zhì)量比為1 :2?3 :15?25。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備 方法，其特征在于：步驟（6)所得的具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末加入丙三醇 和去離子水后，再加入膠原蛋白或透明質(zhì)酸中的任一種或任兩種。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料的制備 方法，其特征在于： 將3g殼聚糖加入盛有15ml體積百分比為2%的醋酸溶液中，攪拌溶解后靜置去泡，得 到殼聚糖溶液，將殼聚糖溶液流延真空干燥得到殼聚糖膜； 步驟（1)所得殼聚糖膜采用等離子體技術(shù)處理，處理時(shí)為Ar氣氛圍，殼聚糖與電極之 間的距離為8mm，處理功率為60W，放電功率為10kHz，處理時(shí)間為lOmin，處理完畢將殼聚糖 膜與空氣接觸15min，將其放入225ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%的聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物的水 溶液中，在4°C下，在氮?dú)夥諊逻M(jìn)行接枝反應(yīng)，得到接枝聚合殼聚糖膜； 將步驟（2)所得接枝聚合殼聚糖膜用蒸餾水沖洗24h，將3g用蒸餾水沖洗后的聚氧嵌 段殼聚糖膜溶于15ml去離子水中，得到接枝聚合殼聚糖溶液； 將3g海藻酸鈉溶于15ml去離子水中，得到海藻酸鈉溶液； 將10ml步驟（3)所得接枝聚合殼聚糖溶液和10ml步驟（4)所得海藻酸鈉溶液加入反 應(yīng)裝置中，加入50ml氯仿，將反應(yīng)裝置抽真空通氮?dú)夂?，?7°C的空氣振蕩浴中振蕩24h， 振蕩速度為l〇〇rpm，將反應(yīng)裝置在溫度為4°C下超聲60min，超聲采用間歇脈沖工作方式， 脈沖時(shí)間為3s,間歇時(shí)間為5s,超聲結(jié)束后反應(yīng)裝置內(nèi)的溶液為澄清溶液,用氫氧化鈉溶 液調(diào)節(jié)澄清溶液的pH為5. 0,向澄清溶液中加入50ml甲醇回流2h得到反應(yīng)液； 對(duì)步驟（5)的反應(yīng)液進(jìn)行過濾，然后用甲醇、水、丙酮洗滌濾餅，收集濾液并除去溶劑、 干燥，得到3. 5g具有三維多重網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖粉末，經(jīng)輻照滅菌得到具有三維多重 網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的接枝殼聚糖止血敷料。
【文檔編號(hào)】A61L15/32GK104258451SQ201410437332
【公開日】2015年1月7日 申請(qǐng)日期:2014年9月1日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月19日
【發(fā)明者】郈秀菊, 王曉晨 申請(qǐng)人:山東省醫(yī)療器械研究所