葉酸修飾的普朗尼克p85共聚物的制備及其在5-氟尿嘧啶納米藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，首先提供了一類葉酸修飾的普朗尼克P85共聚物，還涉及5-氟尿喃啶的抗癌納米藥物的制備。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用葉酸修飾的普朗尼克P85共聚物制備的5-氟尿嘧啶納米藥物，可以顯著抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)；而且在小鼠結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移模型中，能顯著減少結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移瘤形成，并能顯著延長(zhǎng)小鼠生存期，表明其具有良好的抗結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移的作用。因此有望成為有臨床應(yīng)用前景的抗腫瘤藥。
【專利說(shuō)明】葉酸修飾的普朗尼克P85共聚物的制備及其在5-氟尿嘧啶 納米藥物中的應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及藥物應(yīng)用【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說(shuō)，是關(guān)于葉酸修飾的普朗尼克P85共聚 物（P85-FA)的制備，本發(fā)明還涉及5-氟尿嘧啶抗癌納米藥物的制備，特別是在抗結(jié)直腸癌 肝轉(zhuǎn)移中的用途。

【背景技術(shù)】
[0002] 結(jié)直腸癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，可發(fā)生在結(jié)直腸的任何部位，其發(fā)病率在全球 范圍內(nèi)呈逐年上升趨勢(shì)，已成為導(dǎo)致患者死亡的三大癌癥之一。結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移多發(fā)生在肝 臟，據(jù)報(bào)道30-40%的患者在疾病的早期就伴有肝轉(zhuǎn)移；而在疾病晚期，95%的患者都出現(xiàn)肝 轉(zhuǎn)移，并且結(jié)直腸癌患者的死亡原因多為肝部轉(zhuǎn)移灶的發(fā)展。目前雖有以手術(shù)治療為主的 多種治療方案，可提高結(jié)直腸癌的治愈率，但對(duì)結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的患者并沒(méi)有更有效的治 療方法。
[0003] 普朗尼克（Pluronic)是由聚氧乙烯一聚氧丙稀一聚氧乙烯（ΡΕ0-ΡΡ0-ΡΕ0)形成 的兩性分子納米共聚物。具有合適組成比和相對(duì)分子質(zhì)量的普朗尼克在水溶液中能自發(fā)形 成膠束，其直徑通常為10-100納米。普朗尼克可以與抗腫瘤藥物形成共聚物膠束，其膠束 中心由疏水的ΡΡ0組成，可結(jié)合藥物、DNA或蛋白等分子；親水的ΡΕ0鏈組成膠束外殼， 從而提高藥物的靶向性和穩(wěn)定性。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，藥物-普朗尼克共聚物膠束本身具有 很強(qiáng)的穩(wěn)定性，可以顯著增加腫瘤對(duì)藥物的敏感性，減小藥物的毒副反應(yīng)，如普朗尼克P85 PE026-PP040-PE026)可以與化療藥物阿霉素形成共聚物膠束P85-D0X，與單獨(dú)使用阿霉素 藥物組相比，可以顯著抑制人白血病細(xì)胞株P(guān)388細(xì)胞中耐藥蛋白Pgp的表達(dá)，誘導(dǎo)ATP 衰竭，增加腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。單獨(dú)使用有效劑量的普朗尼克P85對(duì)細(xì)胞沒(méi)有 毒副作用，具有較高的生物安全性。普朗尼克L61、F127、P123及F88對(duì)增強(qiáng)化療藥物敏 感性方面的作用顯著低于P85。
[0004] 5-氟尿啼陡（5-;1^111〇1'〇11四(^1，5-?11)是結(jié)直腸癌首選的化療藥物，然而5-?11嚴(yán)重 的骨髓抑制及胃腸道毒副反應(yīng)，很大程度上限制了其在臨床的廣泛應(yīng)用。近年，學(xué)者們開展 了許多對(duì)5-Fu新劑型的研究工作，但均未解決增強(qiáng)靶向性及減輕毒副作用的問(wèn)題。目前與 5-FU聯(lián)合用藥的化療方案仍然是結(jié)腸癌的一線治療方案。臨床使用時(shí)，需要提前給予葉酸 (folic acid，F(xiàn)A)類制劑，以增強(qiáng)5-FU的作用，降低5-FU的毒副反應(yīng)，臨床使用較為不便。 葉酸是人體必需的小分子維生素，其對(duì)于細(xì)胞所必須的核苷酸的生物合成以及維持一碳單 位的正常代謝通路起重要作用。葉酸對(duì)葉酸受體（folate receptor,FR)表現(xiàn)出極高的親 和力。FR表達(dá)水平與上皮源性腫瘤組織的惡性程度及轉(zhuǎn)移侵襲力存在正相關(guān)關(guān)系。葉酸修 飾的聚合膠束對(duì)葉酸受體過(guò)表達(dá)的結(jié)腸癌細(xì)胞具有強(qiáng)親和力，能有效地將所載藥物導(dǎo)入腫 瘤細(xì)胞。
[0005] 因此，本發(fā)明人將葉酸與納米載體通過(guò)化學(xué)連接方式連接，方法簡(jiǎn)單，不易引起免 疫反應(yīng)，能顯著增加5-FU的抗腫瘤作用，降低其毒副反應(yīng)，臨床操作更為簡(jiǎn)便，具有非常好 的抗腫瘤藥物開發(fā)前景。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有治療措施中的不足，提供一種葉酸修飾的普朗尼克P85 的共聚物及其在5-氟尿嘧啶抗腫瘤納米藥物的制備方法，特別是結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中的應(yīng) 用。
[0007] 本發(fā)明首先提供了一類葉酸修飾的普朗尼克P85的共聚物，結(jié)構(gòu)為

【權(quán)利要求】
1. 一種葉酸修飾的普朗尼克P85共聚物，其結(jié)構(gòu)如下式：
式中，n=l-8。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的共聚物，其特征在于，n=2-4。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的共聚物，其特征在于，n=2。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的共聚物的制備方法，包括以下步驟：
(1) 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，普朗尼克P85在乙腈中與⑶I室溫?cái)嚢?，反?yīng)得到P85-⑶I ; (2) P85-CDI溶于乙腈中，慢慢滴加到H2N(CH2)nNH2中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)得到P85-NH 2 ; (3) P85-NH2與葉酸、縮合劑溶解于DMSO中，溶液中加入三乙胺，在氮?dú)獗Ｗo(hù)下室溫?cái)?拌反應(yīng)，合成含有末端葉酸修飾的普朗尼克P85共聚物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的共聚物的制備方法，其特征在于，所述的縮合劑為N-羥基丁 二酰亞胺（NHS)和Ν，Ν' -二環(huán)己基碳二亞胺。
6. -種抗腫瘤組合物，包含權(quán)利要求1所述的葉酸修飾的普朗尼克Ρ85共聚物、安全有 效量的臨床上常用的抗腫瘤化合物和藥學(xué)上接受的載體。
7. 如權(quán)利要求6所述的一種抗腫瘤組合物，其特征在于，所述的臨床上常用的抗腫瘤 化合物為5-氟尿嘧啶。
8. 如權(quán)利要求6所述的抗腫瘤組合物在用于制備抗結(jié)直腸癌藥物中的應(yīng)用。
9. 如權(quán)利要求6所述的抗腫瘤組合物在用于制備抗結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移藥物中的應(yīng)用。
10. -種荷載5-氟尿嘧啶的納米藥物的制備方法，其特征在于，取葉酸修飾的普朗 尼克Ρ85共聚物和5-氟尿嘧啶于圓底燒瓶中，用適量乙腈溶解后，除去有機(jī)溶劑，得干燥 藥膜，水浴加熱，溶解固體骨架，加入等溫度純化水?dāng)嚢?，?.22 μ m濾膜過(guò)濾，得到荷載 5_氟尿嘧啶的納米藥物的膠束溶液。
【文檔編號(hào)】A61P35/04GK104208707SQ201410441009
【公開日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2014年9月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月2日
【發(fā)明者】張黎, 侯靜, 范婷婷, 朱鵬熹, 盛丹丹, 馬建麗, 趙娜萍, 宋云龍, 張姍姍, 韓志鵬, 衛(wèi)立辛, 芮耀誠(chéng), 辛海量, 劉厚佳 申請(qǐng)人:中國(guó)人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)