冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體及其制備方法。具體地，所述脂質(zhì)體以PEG修飾的脂質(zhì)體作為藥物載體，以冬凌草甲素為活性成分，另外還包含抗氧劑、局部止痛劑、pH值調(diào)節(jié)劑、賦形劑。本發(fā)明制備的脂質(zhì)體粒徑在50-150nm之間，制備過程簡單快捷，制備周期短，載藥量高，一方面可以使藥物富集于肝、脾、肺和骨髓等組織器官的，起到靶向殺滅癌細(xì)胞的作用，另一方面可以延長藥物在靶向器官的作用時(shí)間，減少給藥劑量，從而提高生物利用度和降低毒性。
【專利說明】冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，涉及一種冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體及其制備方法。

【背景技術(shù)】：
[0002] 冬凌草為唇形科香茶菜屬植物碎米亞的干燥全草，具有清熱解毒、消炎止痛、抗腫 瘤之功效，用于治療咽喉腫痛、扁桃體炎，對食管癌、肝癌、肺癌等多種癌癥患者有緩解癥狀 并延長生存時(shí)間的作用。冬凌草甲素是從冬凌草中提取出來的一種二萜類化合物，占冬凌 草有效成分的90%以上，是其抗腫瘤的主要活性成分，對多種癌細(xì)胞具有很強(qiáng)的抑制殺滅 作用。
[0003] 冬凌草甲素水溶性差，目前市場上主要采用有機(jī)溶劑加表面活性物質(zhì)增加冬凌草 甲素的溶解度，靜脈滴注易引起血管炎、疼痛等不良反應(yīng)，而口服制劑僅有冬凌草甲素粗提 取物片劑，藥物含量少，生物利用度低。因此，研發(fā)新的給藥劑型是提高冬凌草甲素利用度 的有效途徑。
[0004] 脂質(zhì)體生物學(xué)定義：當(dāng)兩性分子如磷脂和鞘脂分散于水相時(shí)，分子的疏水尾部傾 向于聚集在一起，避開水相，而親水頭部暴露在水相，形成具有雙分子層結(jié)構(gòu)的封閉囊泡， 稱為脂質(zhì)體。脂質(zhì)體是一種人工膜，直徑25?lOOOOnm不等，具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)入體內(nèi)主 要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，使藥 物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中蓄積，從而提高藥物的治療指數(shù)，減少藥物的治療 劑量和降低藥物的毒性，而通過親水聚乙二醇化學(xué)修飾脂質(zhì)體表面可以延長脂質(zhì)體在體內(nèi) 的滯留時(shí)間，從而進(jìn)一步延長藥物的作用時(shí)間，提高生物利用度。


【發(fā)明內(nèi)容】
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[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體及其制備方法，克服冬凌草甲 素現(xiàn)有應(yīng)用的缺點(diǎn)。具體地，是以PEG修飾的脂質(zhì)體作為藥物載體，以冬凌草甲素為活性成 分，另外加入抗氧劑、局部止痛劑、pH值調(diào)節(jié)劑、賦形劑，制備而成。本發(fā)明制備的脂質(zhì)體粒 徑在50-150nm之間，制備過程簡單快捷，制備周期短，載藥量高。通過此法制備的冬凌草甲 素脂質(zhì)體，通過鼻腔、肌肉或靜脈注射給到人體，一方面可以是藥物富集于肝、脾、肺和骨髓 等組織器官的，起到靶向殺滅癌細(xì)胞的作用，另一方面可以延長藥物在靶向器官的作用時(shí) 間，減少給藥劑量，從而提高生物利用度和降低毒性。
[0006] 本發(fā)明制備冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體，以PEG修飾的脂質(zhì)體由PEG-磷脂類和膽固醇 組成，其比例為1:1-5:1，PEG-磷脂類選自PEG-二棕櫚酰磷脂酰膽堿（PEG-DPPC)、PEG-二 棕櫚酰磷脂酰乙醇胺（PEG-DPPE)、PEG-二硬脂酰磷脂酰膽堿（PEG-DSPC)其中的一種或多 種的混合物。抗氧劑選自亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉。局部止痛劑選自苯甲醇、鹽酸普魯卡因、 利多卡因、三氯叔丁醇其中的一種或其混合物。賦形劑選自甘露醇、山梨醇、葡萄糖、乳糖其 中的一種或其混合物。pH值調(diào)節(jié)劑選自鹽酸緩沖液、磷酸緩沖液、醋酸緩沖液、枸櫞酸緩沖 液等，調(diào)節(jié)pH為5. 0至6. 5之間。
[0007] 本發(fā)明制備冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體，其制備方法采用反相蒸發(fā)法：第一步，首先將 主藥溶于水，得內(nèi)水相，pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH值5. 0-6. 5 ;另將磷脂類、膽固醇溶于有機(jī)溶劑中， 得油相；將油相在110-200W功率范圍下進(jìn)行超聲，加入水相，超聲形成水油均勻的分散體 系；
[0008] 第二步，將上述乳液在32-40°C下于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上以45-55r/min的旋轉(zhuǎn)速度 進(jìn)行旋蒸，同時(shí)向旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中通入氮?dú)饬骷右员Ｗo(hù)，當(dāng)有機(jī)溶劑完全揮發(fā)后，繼續(xù)旋蒸 30-50min，再加入抗氧劑、局部止痛劑、賦形劑和pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)pH值5. 0-6. 5,冷凍干燥， 即得產(chǎn)品，粒徑在50-150nm之間，粒徑均勻。
[0009] 其有機(jī)溶劑選自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、丙酮、二氧六環(huán)或四氫呋喃，優(yōu) 選二氯甲烷。

【專利附圖】

【附圖說明】：
[0010] 圖1為各實(shí)施例的脂質(zhì)體中冬凌草甲素的釋放量-時(shí)間曲線圖。
[0011] 下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將會 理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。

【具體實(shí)施方式】：
[0012] 實(shí)施例1
[0013] 稱取l〇g冬凌草甲素溶于蒸餾水，得內(nèi)水相；稱取lOOgPEG-二棕櫚酰磷脂酰膽 堿、70g膽固醇溶于二氯甲烷中，得油相；將油相在100w功率范圍下進(jìn)行超聲，加入水相，超 聲形成水油均勻的分散體系；將上述乳液在38°C下于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上以46r/min的旋轉(zhuǎn)速 度進(jìn)行旋蒸，同時(shí)向旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中通入氮?dú)饬骷右员Ｗo(hù)，當(dāng)有機(jī)溶劑完全揮發(fā)后，繼續(xù)旋蒸 35min，得含藥脂質(zhì)體，粒徑為75-110nm，包封率為95. 6%，依次加入焦亞硫酸鈉0. 2g、苯甲 醇2g、葡萄糖10g和適量鹽酸緩沖液，調(diào)節(jié)pH值為5. 0,冷凍干燥，即得冬凌草甲素緩釋脂 質(zhì)體。
[0014] 通過測定所制備的脂質(zhì)體進(jìn)行釋放度，對其緩釋效果及臨床用藥安全性進(jìn)行了考 察。
[0015] 體外釋放度的測定按中國藥典2010年版釋放度測定方法進(jìn)行。取上述冬凌草甲 素脂質(zhì)體，加水溶解，制成30ml溶液。取6ml冬凌草甲素溶液置于事先在蒸餾水中浸泡24h 的透析袋中，放入250mL的溶出杯中，以0. 5%的吐溫-80水溶液作為釋放介質(zhì)，溫度控制在 (37±1)1：，轉(zhuǎn)速為10〇1'/1^11，設(shè)計(jì)取樣時(shí)間為2、4、8、12、2411，之后每天取樣一次。每次取 樣5ml，同時(shí)補(bǔ)充同體積的釋放介質(zhì)。釋放液經(jīng)0. 22 μ m微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液20 μ L進(jìn) 液相色譜儀，測定峰面積，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度，得出每階段釋藥量。其色譜條件為：色譜 柱：LichrosPherC18 柱（4. 6mmi. dX250mm, 5um);柱溫 40°C ;檢測波長 238nm ;流動相為甲 醇-水（60/40, V/V)。結(jié)果見表1-1。
[0016] 表1-1冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體重冬凌草甲素的累積釋放度
[0017]

【權(quán)利要求】
1. 一種冬凌草甲素緩釋脂質(zhì)體，其特征在于以PEG修飾的脂質(zhì)體作為藥物載體，冬 凌草甲素為活性成分，以及抗氧劑、局部止痛劑、賦形劑，pH值調(diào)節(jié)劑組成，其中活性成 分占總量的〇. 1% -20%，PEG修飾的脂質(zhì)體占總量的70% -90%，抗氧劑占總重量的 0.005% -0. 2%，局部止痛劑占總量的0. 1% -1 %，賦形劑占總量的0. 1% -10%，pH調(diào)節(jié)劑 調(diào)節(jié) pH 值 5. 0-6. 5。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述制劑，其特征在于以PEG修飾的脂質(zhì)體由PEG-磷脂類和膽固醇 組成，其比例為1:1-5:1，PEG-磷脂類選自PEG-二棕櫚酰磷脂酰膽堿（PEG-DPPC)、PEG-二 蹤櫚酰磷脂酰乙醇胺（PEG-DPPE)、PEG-二硬脂酰磷脂酰昍堿(PEG-DSPC)其中的一種或多 種的混合物。
3. 權(quán)利要求1所述制劑，其抗氧劑選自亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉、焦亞硫酸鈉、抗壞血酸、 硫代硫酸鈉其中的一種或其混合物，優(yōu)選亞硫酸氫鈉和焦亞硫酸鈉。
4. 權(quán)利要求1所述制劑，其局部止痛劑選自苯甲醇、鹽酸普魯卡因、利多卡因、三氯叔 丁醇其中的一種或其混合物。
5. 權(quán)利要求1所述制劑，其賦形劑選自甘露醇、乳糖、山梨醇、葡萄糖其中的一種或其 混合物。
6. 權(quán)利要求1所述制劑，其pH值調(diào)節(jié)劑選自鹽酸緩沖液、磷酸緩沖液、醋酸緩沖液、枸 櫞酸緩沖液等，調(diào)節(jié)pH為5. 0至6. 5之間。
7. 權(quán)利要求1所述制劑，其制備方法采用反相蒸發(fā)法：第一步，首先將多肽藥物活性成 分溶于水，得內(nèi)水相；另將磷脂類、膽固醇溶于有機(jī)溶劑中，得油相；將油相在110-200W功 率范圍下進(jìn)行超聲，加入水相，超聲形成水油均勻的分散體系； 第二步，將上述乳液在32-40°C下于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上以45-55r/min的旋轉(zhuǎn)速度進(jìn) 行旋蒸，同時(shí)向旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中通入氮?dú)饬骷右员Ｗo(hù)，當(dāng)有機(jī)溶劑完全揮發(fā)后，繼續(xù)旋蒸 30-50min，再加入抗氧劑、局部止痛劑、賦形劑和pH調(diào)節(jié)劑，調(diào)節(jié)pH值5. 0-6. 5 ;冷凍干燥， 即得冬凌草甲素脂質(zhì)體。
8. 根據(jù)權(quán)利要求7所述制劑，其特征在于有機(jī)溶劑選自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙 醚、丙酮、二氧六環(huán)或四氫呋喃，優(yōu)選二氯甲烷。
【文檔編號】A61P35/00GK104146959SQ201410443510
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2014年9月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月2日
【發(fā)明者】姚志勇, 李新宇, 張建松, 黃盛治, 曹演威, 楊帆 申請人:深圳市健元醫(yī)藥科技有限公司