一種解煙酒毒的中藥提取物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種解煙酒毒的中藥提取物，所述的中藥提取物由原料藥雞骨草和荷葉制備得到，所述的中藥提取物是由雞骨草與荷葉按比例為27：9.5提取的，其主要成分為總黃酮。本發(fā)明還涉及所述中藥提取物在制備治療和預(yù)防煙酒毒藥物或食物中的應(yīng)用，藥理實驗證明本發(fā)明的中藥提取物能有效保護解煙毒對肝臟細胞的損傷，而且將其制備成片劑與口香糖等口服制劑能方便隨身攜帶方便服用。
【專利說明】一種解煙酒毒的中藥提取物及其制備方法和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種中藥提取物，具體地說，一種解煙酒毒的中藥提取物及其制備方法和應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002]包括婦女、兒童在內(nèi)每天都遭受被動吸煙的危害，香煙中含有害化學(xué)物質(zhì)3 000余種，致癌物質(zhì)30多種，每年都有近百萬人死于與吸煙相關(guān)疾病，癌癥尤其是肺癌與香煙毒性密切相關(guān)。人在吸煙過程中，無論是被動吸煙還是主動吸煙，香煙煙霧的水溶性部分更容易被肺泡表面的粘液溶解和吸收，對身體各器官系統(tǒng)造成損害。因此除禁煙，少吸煙外，積極尋找解煙毒的藥物或食物具有重要意義。
[0003]我國具有悠久的酒文化，但隨著人們生活水平的提高，脂肪肝、酒精性肝病患者越來越多，尤其是酒精肝患病人數(shù)逐年上升，且呈年輕化趨勢，因為長期大量飲酒等不良的生活習(xí)慣，導(dǎo)致酒精肝的患病人數(shù)逐年上升并呈年輕化趨勢。30至45歲應(yīng)酬多的商務(wù)人士、銷售人員、生意人等是高危人群。酒精已成為導(dǎo)致肝硬化患者發(fā)病明顯、呈低齡趨勢的禍首。過量飲酒尤其是白酒對肝臟造成傷害。酒精性肝病，包括酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝纖維化和肝硬化等一系列程度不同的肝臟損害，絕大多數(shù)為長期大量飲酒所致。輕度酒精肝多無癥狀，中、重度酒精肝可呈現(xiàn)類似慢性肝炎的表現(xiàn)，如輕度全身不適、倦怠、易疲勞、惡心嘔吐、食欲不振、腹脹等。由于現(xiàn)實生活中，不可避免地要飲酒，在積極主動降低攝入酒精之前，采用藥物保護飲酒者的健康，具有重要的社會意義。
[0004]發(fā)明人通過前期研究，雞骨草與荷葉除有解毒或解暑功效外，兩者按適當?shù)谋壤旌现苽涮崛∥锬軌蝻@著減少解煙毒對肝臟細胞的損傷，緩解香煙煙霧及過理飲酒帶來的不適癥狀。
[0005]雞骨草為嶺南特色中藥，來源于豆科相思子屬植物廣州相思子(Abruscantoniensis Hance)的干燥全草,又名紅母雞草、石門坎、黃食草、細葉龍鱗草、大黃草,為廣東、廣西等南部省區(qū)的道地藥材，也是我國出口的中草藥之一?！稁X南采藥錄》、《嶺南草藥志》等均有記載，雞骨草清熱，舒肝，和脾，用治急慢性肝炎。2010版《中國藥典》收載，雞骨草具有利濕退黃，清熱解毒，疏肝止痛的功效，用于濕熱黃疸，脅肋不舒，胃脘脹痛，乳癰腫痛。民間廣泛用于治療急、慢性肝炎和肝硬化腹水，效果理想，同時具有抗氧化、抗炎、免疫等藥理作用(陳曉白，莫志賢.中藥雞骨草化學(xué)成分及藥理學(xué)研究進展.時珍國醫(yī)國藥.2008，19(7): 1781-1782。)。雞骨草在廣東地區(qū)常用它來煲湯滋補。目前除配方藥用外，大部分外銷出口。雞骨草主要含生物堿、黃酮類、皂苷類、蒽醌類等成分(Fu X.，Wu S.W.，Meng H.C.，Li C.1solat1n and ant1xidant activity of polysaccharides purifiedfrom Abrus cantoniensis Hance.Modern Food Science and Technology.2013,29(7):1559-1564;史海明，溫晶，屠鵬飛.雞骨草的化學(xué)成分研究.中草藥.2006，37 (11):1610-1613)，截止目前并無雞骨草用于解煙酒毒的報道。
[0006]荷葉為睡蓮科植物蓮Nelumbo nucifera Gaertn.的干燥葉?？?平,歸肝、脾、胃經(jīng)，具有清熱解暑，升發(fā)清陽，涼血止血的功效。用于暑熱煩渴，暑濕泄瀉，脾虛泄瀉，血熱吐衄，便血崩漏。荷葉被列入衛(wèi)生部“既是食品又是藥品”的名單，其在食用及藥用兩方面均有較廣泛的應(yīng)用，其主要含有生物堿、黃酮、揮發(fā)油等成分。藥理研究表明，荷葉具有調(diào)脂、減肥、抗氧化、抗衰老、抑菌作用(王福R，曹娟，劉斌，等.荷葉的化學(xué)成分及其藥理作用研究進展.時珍國醫(yī)國藥，2010，21 (9):2339-2340)。
[0007]因此開發(fā)一種能有效保護解煙毒對肝臟細胞的損傷，而且能方便攜帶服用的藥物是十分必要的。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，一種解煙酒毒的中藥提取物。
[0009]本發(fā)明的再一的目的是，提供上述中藥提取物的制備方法。
[0010]本發(fā)明的另一的目的是，提供上述中藥提取物的應(yīng)用。
[0011]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
一種解煙酒毒的中藥提取物，所述中藥提取物的藥物活性成分是由下列重量份的原料藥提取的:雞骨草27份、荷葉9.5份。
[0012]為實現(xiàn)上述第二個目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
所述的中藥提取物的制備方法，包括以下步驟:
(O按權(quán)利要求1所述的重量份稱取各原料藥，將所述原料藥進行煎煮、濃縮，加入乙醇或甲醇進行醇沉，醇沉后收集上清液濃縮；
(2)過大孔樹脂柱，水洗脫除雜質(zhì)，用濃度為5(Γ85%的乙醇洗脫，收集30-70%部位的洗脫液，減壓濃縮干燥得提取物。
[0013]所述的中藥提取物的制備方法，包括以下步驟:
(1)按權(quán)利要求1所述的重量份稱取各原料藥，將所述原料藥洗凈、粉碎，過60目篩，用濃度為30-95%乙醇滲漉，至總黃酮類檢定反應(yīng)呈陰性為止；
(2)收集提取液，濃縮，用蒸餾水調(diào)節(jié)比重至1.02?1.05g/ml，PH5飛，濾液通過大孔樹脂柱，并棄去流出液，用水洗脫大孔樹脂柱，棄去洗脫液，繼續(xù)用30-70%乙醇洗脫大孔樹脂柱，收集30-70%部位洗脫液，洗脫液減壓濃縮干燥得到提取物。
[0014]所述的中藥提取物的制備方法，包括以下步驟:
按權(quán)利要求1所述的重量份稱取各原料藥，將所述原料藥洗凈、粉碎，過60目篩，以提取溶劑30-95%乙醇回流，濾液濃縮，過大孔樹脂柱，收集30-70%部位，減壓濃縮干燥得提取物。
[0015]所述的大孔樹脂是指AB-8或D-101。
[0016]所述的提取物中總黃酮的含量為35?85%。
[0017]為實現(xiàn)上述第三個目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:
所述的中藥提取物在制備治療和預(yù)防煙酒毒藥物或食物中的應(yīng)用。
[0018]所述的藥物的劑型是片劑、膠囊、顆粒劑、口服液、滴丸劑、丸劑、口嚼片、含片、口香糖、膏劑、合劑、貼劑、或凝膠劑。
[0019]本發(fā)明優(yōu)點在于:
本發(fā)明以雞骨草、荷葉為主要原料制備的提取物，實驗證明本發(fā)明的中藥提取物能有效保護解煙毒對肝臟細胞的損傷，而且將其制備成片劑與口香糖等口服制劑能方便隨身攜帶服用。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0020]附圖1是不同雞骨草與荷葉比例制備的提取物對V79細胞存活率的影響。(B:空白組，M:模型組J1-J7:雞骨草、荷葉不同比例提取物)。
[0021]附圖2是同雞骨草與荷葉比例制備的提取物對酒精性肝損傷小鼠ALT、AST的影響。(B:空白組；M:模型組J1-J7:雞骨草、荷葉不同比例提取物)。
[0022]附圖3是提取物用量對V79細胞存活率的影響。(P:煙霧水提物處理組;M:模型組；A0-L:雞骨草低濃度組；Α0-Μ:雞骨草中濃度組；Α0-Η:雞骨草低高濃度組；A1_L:雞骨草荷葉(27:9.5)低濃度組；Al-M:雞骨草荷葉(27:9.5)中濃度組;Al-H:雞骨草荷葉(27:9.5)低高濃度組)。
[0023]附圖4是提取物用量對酒精性肝損傷小鼠ALT、AST的影響。(B:空白組；M:模型組J6-L:低濃度組J6-M:中濃度組J6-H:高濃度組；X±S，n=10, ks模型組，# P〈0.01，* Ρ〈0.05)。

【具體實施方式】
[0024]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明提供的【具體實施方式】作詳細說明。
[0025]實施例1
1.中藥提取物的制備
取雞骨草、荷葉27:9.5洗凈，浸泡6小時后置入提取容器內(nèi)煎煮3次，每次煎煮的時間為0.5小時。將數(shù)次提取的藥液合并，濃縮成浸膏，加入提取溶劑甲醇進行醇沉，醇沉后的上清液濃縮，過AB-8大孔樹脂柱。樹脂柱徑高比1:8，吸附速度3.2BV/h,解析流速1.6BV/h，調(diào)節(jié)上樣液比重1.02^1.05，收集30-70%部位，減壓濃縮干燥得提取物。
[0026]2.總黃酮含量的測定
按照《中國藥典》2010版一部附錄V A分光光度法測定總黃酮的含量。稱取槲皮素為對照品(含量98%,實驗室自制)35mg,用無水乙醇溶解，定容至100ml,配置成濃度為0.35mg/ml的對照品溶液。稱取I中制備好的提取物25mg于25ml量瓶中加無水乙醇溶解，無水乙醇定容至刻度，搖勻取Iml至1ml量瓶中，乙醇定容至刻度，搖勻得供試品液。分別移取乙醇(空白)、對照液、和供試品液各2ml，至錐形瓶中，各加5%亞硝酸鈉溶液0.5ml放置5min，加10硝酸鋁溶液0.5ml，放置5min，再加I氫氧化鈉溶液5ml搖勻，放置15min，在431nm波長測定吸收波。測得提取物中總黃酮含量為51.2%。
[0027]實施例2
1.中藥提取物的制備
取雞骨草、荷葉27:9.5洗凈，浸泡24小時后置入提取容器內(nèi)煎煮5次，每次煎煮的時間為3小時。將數(shù)次提取的藥液合并，濃縮成浸膏，加入提取溶劑乙醇進行醇沉，醇沉后的上清液濃縮，過D-101大孔樹脂柱，收集30-70%部位，減壓濃縮干燥得提取物。
[0028]2.總黃酮含量的測定
采用分光光度法測定總黃酮的含量。以槲皮素為對照品，具體實驗方法同實施例1，測得總黃酮含量為35.0%。
[0029]實施例3
1.中藥提取物的制備
取雞骨草、荷葉27:9.5洗凈，浸泡6-24小時后置入提取容器內(nèi)加水煎煮4次，每次煎煮的時間為2小時。將數(shù)次提取的藥液合并，濃縮成浸膏。將浸膏靜置后，加入乙醇進行醇沉，取醇沉后的上清液，濃縮，過AB-8大孔樹脂柱，收集30-70%部位，減壓濃縮干燥得提取物。
[0030]2.總黃酮含量的測定
采用分光光度法測定總黃酮的含量。以槲皮素為對照品，具體實驗方法同實施例1，測得總黃酮含量為47.1%。
[0031]實施例4
1.中藥提取物的制備
按27:9.5比例取原料藥雞骨草、荷葉粉碎，以8倍量的95%乙醇回流3次，每次2小時，濾液濃縮，過AB-8大孔樹脂柱，樹脂柱徑高比1:8，吸附速度3.2BV/h,解析流速1.6BV/h，調(diào)上樣液比重1.02^1.05,收集30-70%部位，減壓濃縮干燥得提取物。
[0032]2.總黃酮含量的測定
采用分光光度法測定總黃酮的含量。以槲皮素為對照品，具體實驗方法同實施例1，測得總黃酮含量為56.3%。
[0033]實施例5
1.中藥提取物的制備
按27:9.5比例取原料藥雞骨草、荷葉粉碎，以8倍量的95%乙醇回流3次，每次2小時，濾液濃縮，過D-101大孔樹脂柱，收集30-70%部位，減壓濃縮干燥得提取物。
[0034]2.總黃酮含量的測定
采用分光光度法測定總黃酮的含量。以槲皮素為對照品，具體實驗方法同實施例1，測得總黃酮含量為37.2%。
[0035]實施例6
1.中藥提取物的制備
按比例取雞骨草、荷葉27:9.5粉碎，加入提取溶劑95%乙醇，滲漉至總黃酮類檢定反應(yīng)呈陰性為止，收集滲漉液，得提取液；將上述提取液濃縮，蒸餾水調(diào)節(jié)比重至1.05g/ml, PH為5，濾液通過D-101大孔樹脂柱，并棄去流出液；用水洗脫大孔樹脂柱，棄去洗脫液；繼續(xù)用70%乙醇洗脫大孔樹脂柱，收集30-70%部位洗脫液，洗脫液減壓濃縮干燥得到提取物。
[0036]2.總黃酮含量的測定
采用分光光度法測定總黃酮的含量。以槲皮素為對照品，具體實驗方法同實施例1，測得總黃酮含量為43.2%。
[0037]實施例7
1.中藥提取物的制備
按27:9.5比例取雞骨草、荷葉粉碎，加入提取溶劑30%乙醇，滲漉至總黃酮類檢定反應(yīng)呈陰性為止，收集滲漉液，得提取液；將上述提取液濃縮，蒸餾水調(diào)節(jié)比重至1.05g/ml, PH為6，濾液通過AB-8大孔樹脂柱，并棄去流出液；用水洗脫大孔樹脂柱，棄去洗脫液；繼續(xù)用30%乙醇洗脫大孔樹脂柱，收集30-70%部位洗脫液，洗脫液減壓濃縮干燥得到提取物。
[0038]2.總黃酮含量的測定
采用分光光度法測定總黃酮的含量。以槲皮素為對照品，具體實驗方法同實施例1，測得總黃酮含量為48.4%。
[0039]實施例8
1.中藥提取物的制備
按27:9.5比例取雞骨草、荷葉粉碎，加入提取溶劑55%乙醇，滲漉至總黃酮類檢定反應(yīng)呈陰性為止，收集滲漉液，得提取液；將上述提取液濃縮，蒸餾水調(diào)節(jié)比重至1.05g/ml, PH為5，濾液通過AB-8大孔樹脂柱，并棄去流出液；用水洗脫大孔樹脂柱，棄去洗脫液；繼續(xù)用30%乙醇洗脫大孔樹脂柱，收集30-70%部位洗脫液，洗脫液減壓濃縮干燥得到提取物。
[0040]2.總黃酮含量的測定
采用分光光度法測定總黃酮的含量。以槲皮素為對照品，具體實驗方法同實施例1，測得總黃酮含量為85.0%。
[0041]實施例9藥物制劑的制備
本發(fā)明的提取物還可以按照制藥工業(yè)的已知方法和輔助成分制備成片劑、膠囊、顆粒齊U、口服液等口服制劑，其中優(yōu)選的適合攜帶服用的片劑和口香糖，所述的輔助成分可以是乳糖、淀粉、糊精、硬脂酸鹽等作為載體或賦形劑。
[0042]一、顆粒劑的制備
取實施例1-8任一所述的提取物加入2倍量的酒精，攪拌沉淀過夜。取上清液，濃縮至稠浸膏；加適當制藥輔料，制粒，干燥，過300目篩、整粒，得20g顆粒，分裝1g/袋。
[0043]二、片劑/膠囊的制備
取實施例1-8任一所述的提取物50g，淀粉40g，乳糖30g，微晶纖維素30g，7%淀粉漿適量，硬脂酸鎂1%，按上述配比將提取物粉末、淀粉、乳糖、微晶纖維素分別過80目篩，混勻，再過40目篩3次，將上述混合粉用7%淀粉漿制軟材，過24目篩粒，50°C干燥2小時，干燥顆粒過30目篩整粒，加入硬脂酸鎂，混勻，壓片，得片劑1000片。
[0044]三、袋泡茶的制備
取實施例1-8任一所述的提取物100g，加入1%白砂糖，以袋泡茶包裝材料分裝成1000包即可。
[0045]四、口服液/合劑的制備
取實施例1-8任一所述的提取物，加2倍量酒精，攪拌沉淀過夜。取上清液，濃縮至稠浸膏；加適當制藥輔料，制成口服液、合劑。
[0046]五、口香糖劑的制備
取實施例1-8任一所述的提取物溶解在水中，加入18%的醋酸淀粉、80%玉米糖漿、0.3%的甘油、0.5%的留蘭香油在55°C混合均勻，趁熱將其分割成3g重的球粒，裝袋。
[0047]實施例10.細胞毒法測定提取物的抗煙毒作用 1.抗煙毒作用
1.1材料與試劑市售香煙煙霧水溶物CSE，噻唑藍(MTT，Sigma)，倉鼠肺細胞(V79細胞)。
[0048]1.2方法:取指數(shù)生長期的V79細胞用0.25%胰蛋白酶消化后，用含10%胎牛血清的RPM1640培養(yǎng)液配制成16個/ ml的細胞懸液，將細胞懸液加入96孔板，5% CO2,37°C培養(yǎng)24 h后，除空白對照組B夕卜，所有的培養(yǎng)板中加入CSE (20mg/ml), Jl (提取物:雞骨草:荷葉=15:7.5)組、J2 (提取物:雞骨草:荷葉=18:13.5)組、J3 (提取物:雞骨草:荷葉=21:5.5)組、J4 (提取物:雞骨草:荷葉=23:11.5)組、J5 (提取物:雞骨草:荷葉=25:3.5)組、J6 (提取物:雞骨草:荷葉=27:9.5)組、J7 (提取物:雞骨草:荷葉=30:15.5)組給藥量均為100mg/ml，模型組M、對照組B給等量的0.5% CMC-Na水溶液。24h后加入5 g / mlMTT溶液20 μ I繼續(xù)培養(yǎng)。4 h后棄去培養(yǎng)液，每孔加200 μ I DMS0，振蕩5min，使細胞內(nèi)紫色結(jié)晶物充分溶解，于波長564nm的酶標儀上測定各孔吸光度值(A)。每個劑量做4個孔平行樣，采用吸光度平均值(A)進行細胞存活率的計算:細胞存活率=Ajms/ X 100%。
[0049]1.3 結(jié)果
如圖1所示，從圖中可以看出，當提取物添加量相同時，J6組，即雞骨草:荷葉=27:9.5所制備的提取物對V79細胞的保護效果明顯優(yōu)于其他給藥組。
[0050]實施例11.不同比例雞骨草與荷葉所制備的提取物的抗酒精損傷作用的動物實驗
I實驗動物與試劑
ICR小鼠，體重18-22g，雌雄各半，上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供，許可證號SCXK (滬)2012-0002。56%紅星二鍋頭白酒為北京紅星股份有限公司產(chǎn)品；ALT、AST檢測試劑盒(南京建成生物)。
[0051]2實驗方法
小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)I周后，按性別體重隨機分成9組，每組10只，雌雄各半，分別為空白對照組B、模型組M、Jl (提取物:雞骨草:荷葉=15:7.5)組、J2 (提取物:雞骨草:荷葉=18:13.5)組、J3(提取物:雞骨草:荷葉=21:5.5)組、J4(提取物:雞骨草:荷葉=23:11.5)組、J5 (提取物:雞骨草:荷葉=25:3.5)組、J6 (提取物:雞骨草:荷葉=27:9.5)組、J7 (提取物:雞骨草:荷葉=30:15.5)組。Jf J7給藥組的ig給藥劑量均為10g/kg，空白組給予等體積的0.5% CMC-Na水溶液。每組小鼠每天灌胃I次，連續(xù)10天。末次給藥后3 h，除空白組灌胃給予水，其余各組灌胃給予0.15 mL/10g體重的紅星二鍋頭，禁食12 h，眼眶取血，分離血清。檢測試劑盒測定血清ALT、AST活性。
[0052]3.實驗結(jié)果
結(jié)果如圖2所示，從圖中可以看出雞骨草提取物抗酒精性肝損傷的作用以J6組效果較好，即雞骨草:荷葉=27:9.5所制備的提取物對酒精性肝損傷效果最好。
[0053]實施例12雞骨草提取物的抗煙毒作用一細胞毒法
1.材料與試劑市售香煙煙霧水溶物CSE，噻唑藍(MTT，Sigma)，倉鼠肺細胞(V79細胞)。
[0054]2.方法:取指數(shù)生長期的V79細胞用0.25%胰蛋白酶消化后，用含10%胎牛血清的RPM1640培養(yǎng)液配制成16個/ ml的細胞懸液，將細胞懸液加入96孔板，5% CO2,37°C培養(yǎng)24 h后，除空白對照組B外，所有培養(yǎng)板中加入CSE (20mg/ml)，AO-L(雞骨草提取物50mg/ml)組、AO-M (雞骨草提取物100 mg/ml)組、AO-H (雞骨草提取物200 mg/ml)組、Al-L(雞骨草:荷葉=27:9.5，50mg/ml)組、Al-M (雞骨草:荷葉=27:9.5，100 mg/ml)組、Al-H (雞骨草:荷葉=27:9.5，200 mg/ml)組，煙霧水提物處理組P、對照組B給200mg/ml的0.5% CMC-Na水溶液。24h后加入5 g / ml MTT溶液20 μ I繼續(xù)培養(yǎng)。4 h后棄去培養(yǎng)液，每孔加200 μ I DMS0，振蕩5min，使細胞內(nèi)紫色結(jié)晶物充分溶解，于波長564nm的酶標儀上測定各孔吸光度值(A)。每個劑量做4個孔平行樣，采用吸光度平均值(A)進行細胞存活率的計算:細胞存活率=A劑量組/ A溶劑組X 100 %。
[0055]3.實驗結(jié)果
如圖3所示，從圖中可以看出，AO-L、AO-M、AO-H組細胞存活率小于50%，A1_L、A1-L、Al-L組細胞存活率大于60%，雞骨草與荷葉制備的提取物抗煙毒作用優(yōu)于單用雞骨草制備的提取物。
[0056]實施例13 雞骨草提取物的抗酒精損害作用 1.實驗動物與試劑
ICR小鼠，體重18-22g，雌雄各半，上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供，許可證號SCXK (滬)2012-0002。56%紅星二鍋頭白酒為北京紅星股份有限公司產(chǎn)品；ALT、AST檢測試劑盒(南京建成生物)。
[0057]2.實驗方法
小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)I周后，隨機分5組，每組10只，實驗組以雞骨草與荷葉提取物J6(雞骨草:荷葉=27:9.5)分低、中、高3個劑量組(50mg, 10mg, 200mg/10g體重/天,按生藥量計)，空白對照組給予200mg/10g的0.5% CMC-Na水溶液。每組小鼠每天灌胃I次，連續(xù)10天。末次給藥后3 h，除空白組灌胃給予水，其余各組灌胃給予0.15 mL/10g體重的紅星二鍋頭，禁食12 h,眼眶取血，分離血清。檢測試劑盒測定血清ALT、AST活性。
[0058]3.實驗結(jié)果
如圖4所示，從圖中可以看出，雞骨草:荷葉提=27:9.5時所制備的提取物具能非常顯著地降低Alt與AST水平(P〈0.01)，對小鼠酒精性肝損傷具有較好的保護作用。
[0059]綜上所述，實驗結(jié)果表明，當雞骨草:荷葉=27:9.5時，所制備的提取物具有顯著的抗酒精損害作用與抗煙毒作用。
[0060]實施例12急性毒性試驗
1.實驗方法
取實施例8所制備的提取物，加入0.5% CMC-Na配制成為0.lg/ml的懸液。ICR小鼠，體重18-22g，雌雄各半，上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供，許可證號SCXK (滬)2012-0002。禁食12h，0.4ml/10g體重灌胃給藥，4h后按以上劑量重復(fù)給藥一次，給藥后觀察動物連續(xù)7天。
[0061]2.實驗結(jié)果
結(jié)果表明，實驗組小鼠各方面均未見異常，無死亡，體重增長良好，由給前20.2±0.38g增加為25.1 ±2.1go該中藥提取物給予8g/kg/日，相當于生藥量320g/kg/日，動物未出現(xiàn)嚴重毒性反應(yīng)。該劑量是臨床人用量2000倍以上。證明提取物是安全的。
[0062]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當指出，對于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明方法的前提下，還可以做出若干改進和補充，這些改進和補充也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種解煙酒毒的中藥提取物，其特征在于，所述中藥提取物的藥物活性成分是由下列重量份的原料藥提取的:雞骨草27份、荷葉9.5份。
2.權(quán)利要求1所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟: (O按權(quán)利要求1所述的重量份稱取各原料藥，將所述原料藥進行煎煮、濃縮，加入乙醇或甲醇進行醇沉，醇沉后收集上清液濃縮； (2)過大孔樹脂柱，水洗脫除雜質(zhì)，用濃度為5(Γ85%的乙醇洗脫，收集30-70%部位的洗脫液，減壓濃縮干燥得提取物。
3.權(quán)利要求1所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟: (1)按權(quán)利要求1所述的重量份稱取各原料藥，將所述原料藥洗凈、粉碎，過60目篩，用濃度為30-95%乙醇滲漉，至總黃酮類檢定反應(yīng)呈陰性為止； (2)收集提取液，濃縮，用蒸餾水調(diào)節(jié)比重至1.02^1.05g/ml, PH5飛，濾液通過大孔樹脂柱，并棄去流出液，用水洗脫大孔樹脂柱，棄去洗脫液，繼續(xù)用30-70%乙醇洗脫大孔樹脂柱，收集30-70%部位洗脫液，洗脫液減壓濃縮干燥得到提取物。
4.權(quán)利要求1所述的中藥提取物的制備方法，其特征在于，所述的方法包括以下步驟: 按權(quán)利要求1所述的重量份稱取各原料藥，將所述原料藥洗凈、粉碎，過60目篩，以提取溶劑30-95%乙醇回流，濾液濃縮，過大孔樹脂柱，收集30-70%部位，減壓濃縮干燥得提取物。
5.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的中藥提取物制備的制備方法，其特征在于，所述的大孔樹脂是指AB-8或D-101。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的中藥提取物，其特征在于，所述的中藥提取物中總黃酮的含量為35?85%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的中藥提取物在制備治療和預(yù)防煙酒毒藥物或食物中的應(yīng)用。
8.根據(jù)權(quán)利要求3任一所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物的劑型是片劑、膠囊、顆粒劑、□服液、滴丸劑、丸劑、□嚼片、含片、口香糖、膏劑、合劑、貼劑、或凝膠劑。
【文檔編號】A61P39/02GK104224926SQ201410467795
【公開日】2014年12月24日 申請日期:2014年9月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月15日
【發(fā)明者】黃寶康, 鄭承劍, 張乃丹, 秦路平, 張巧艷, 韓婷, 陳璐, 張小剛 申請人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)