關(guān)節(jié)腔注射用溫敏型原位凝膠及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明主要提供了一種關(guān)節(jié)腔注射用溫敏型原位凝膠及其制備方法。該凝膠是由包載藥物的生物可降解性的高分子聚合物通過物理交聯(lián)的方式形成的。高分子聚合物由透明質(zhì)酸與溫敏材料通過化學(xué)鍵連接而成，當(dāng)溫度低于體溫時(shí)，藥物可以包裹或分散于聚合物中形成納米凝膠混懸液，在關(guān)節(jié)腔注射部位溫度升高至體溫，制劑由納米混懸液轉(zhuǎn)變成原位凝膠。本發(fā)明的凝膠劑無需化學(xué)交聯(lián)，安全性高，可以使非留體抗炎藥物和透明質(zhì)酸發(fā)揮協(xié)同治療效果，降低毒副作用，提高患者順應(yīng)性。
【專利說明】關(guān)節(jié)腔注射用溫敏型原位凝膠及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，提供了一種關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射用溫敏型原位凝膠劑及制備 方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 非留體抗炎藥（NSAIDs)已廣泛應(yīng)用關(guān)節(jié)炎的治療，它主要是通過抑制環(huán)氧化酶 (C0X)，從而抑制前列腺素的合成達(dá)到消炎止痛的療效。但是目前臨床上使用的NSAIDs以 口服制劑為主，患者長(zhǎng)期服用容易產(chǎn)生胃腸道不良反應(yīng)，并對(duì)肝臟、腎臟和心血管等存在一 定的損害。
[0003] 關(guān)節(jié)腔注射給藥可以將藥物直接作用于靶部位，提高局部濃度，避免體內(nèi)生理轉(zhuǎn) 運(yùn)屏障，改變藥物的分布模式，以小劑量發(fā)揮藥效，降低全身給藥的毒副作用，因此在關(guān)節(jié) 炎的治療中具有廣泛地應(yīng)用。這種制劑具有多種優(yōu)勢(shì)：緩釋長(zhǎng)效；可降低藥物在關(guān)節(jié)腔的 清除率；可減少大劑量藥物的刺激性；可避免反復(fù)給藥的感染；藥物僅需在注射部位有活 性，降低毒副作用等。該類制劑數(shù)日甚至數(shù)月注射一次，顯著增強(qiáng)藥物有效性與安全性，提 高患者順應(yīng)性。專利CN100594029、CN101112378和CN101940587B等均公開了關(guān)節(jié)腔內(nèi)注 射給藥治療關(guān)節(jié)炎的方法。
[0004] 溫度敏感型原位凝膠是一種依賴溫度而發(fā)生相轉(zhuǎn)變的凝膠。它在儲(chǔ)藏條件下是自 由流動(dòng)的液體，注射進(jìn)入人體后可填充于組織間隙，迅速發(fā)生相轉(zhuǎn)變，在注射部位形成半固 體狀態(tài)凝膠，達(dá)到局部給藥或延緩藥物釋放的目的。它具有可注射、創(chuàng)傷小、給藥方便、控制 藥物釋放等優(yōu)點(diǎn)，適用于體內(nèi)局部注射給藥。普洛沙姆（Poloxamer)是研究最深入的制備 溫度敏感原位凝膠的高分子材料。目前專利和文獻(xiàn)資料報(bào)道的溫敏凝膠的主要基質(zhì)材料多 為普洛沙姆 407(商品名為 Pluronic? F127)，如 CN1230108A、CN101185650A、CN1593386A、 CN1377706A、CN100422268C、CN02109503. 5 等。其中，濃度為 20% -30%的 F127 水溶液具有 受熱反向膠凝的性質(zhì)，即冷藏溫度下是自由流動(dòng)的液體，而室溫或體溫時(shí)形成澄明的凝膠。
[0005] 透明質(zhì)酸關(guān)節(jié)腔注射給藥是治療關(guān)節(jié)炎的常用方法。目前臨床常用的透明質(zhì)酸關(guān) 節(jié)腔注射劑有辦3]^3]1、41^2、殿0-101、辦13116-?20等。其中，辦13116-?20為美國66112：71116 公司生產(chǎn)的透明質(zhì)酸凝膠注射液。專利CN02822420. 5、US2006003964和CN101112381A均 公開了透明質(zhì)酸用于關(guān)節(jié)腔內(nèi)給藥治療關(guān)節(jié)炎的方法。但是僅注射單一的透明質(zhì)酸普通凝 膠注射劑還存在一定的缺陷，如體內(nèi)滯留時(shí)間短，易被HA酶降解；體外形成凝膠后注射，使 用具有一定難度；沒有包載治療藥物、起效較慢等。因此，對(duì)透明質(zhì)酸進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，制備包 載藥物的緩釋制劑顯得尤為重要。文獻(xiàn)等也研究報(bào)道了透明質(zhì)酸和NSAIDs組合治療能迅 速改善關(guān)節(jié)炎患者的臨床癥狀，并且在維持良好療效的同時(shí)，能顯著降低NSAIDs的用量。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射用溫敏型原位凝膠制劑，以達(dá)到降低藥物 不良反應(yīng)，減少給藥次數(shù)，使用方便，改善患者的順應(yīng)性，并發(fā)揮更好地協(xié)同治療關(guān)節(jié)炎的 效果。本發(fā)明凝膠由包載藥物的生物相容性和生物可降解性的高分子聚合物通過物理交聯(lián) 的方式形成的。
[0007] 本發(fā)明的另一目的是提供包載藥物的溫敏型原位凝膠的制備方法。
[0008] 上述的高分子聚合物由透明質(zhì)酸與溫敏材料通過化學(xué)鍵連接而成。溫敏材料為殼 聚糖、聚乳酸-羥基乙酸、普洛沙姆或異丙基丙烯酰胺，其中，優(yōu)選普洛沙姆407與普洛沙姆 188。
[0009] 上述的高分子聚合物中，透明質(zhì)酸的分子量為50萬-500萬道爾頓，優(yōu)選70 萬-200萬道爾頓。
[0010] 上述的高分子聚合物中，普洛沙姆與透明質(zhì)酸反應(yīng)摩爾比在10:1 -1 :1〇之間，優(yōu) 選2:1 - 1:5之間。
[0011] 上述的藥物為非留體抗炎類藥物，其中，包括雙氯芬酸、美洛昔康、依托度酸、酮洛 芬、吲哚美辛、塞來昔布、萘丁美酮、羅非昔布的一種或幾種組合。
[0012] 上述溫敏凝膠中，藥物可以包裹或分散于聚合物中。聚合物的濃度和載藥量不受 限制，除非影響到聚合物的膠凝行為，使其不能形成凝膠或限制其臨床使用。
[0013] 上述的凝膠具有溫度敏感反向膠凝性質(zhì)，當(dāng)溫度低于體溫時(shí)，以納米混懸液形式 存在，在注射部位溫度升高至體溫，制劑由納米混懸液轉(zhuǎn)變成凝膠，延長(zhǎng)藥物的釋放時(shí)間。
[0014] 本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案加以實(shí)現(xiàn)的，將普洛沙姆鏈接到透明質(zhì)酸主鏈上，形 成兩親性共聚物，溫度低于30°C的條件下，聚合物溶液通過自組裝包載藥物，制備納米凝膠 混懸液。然后，將納米凝膠注射到關(guān)節(jié)腔內(nèi)，在體溫度下形成原位凝膠。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0015] 圖1為溫度對(duì)納米凝膠混懸液的（a)粒徑和（b)平衡溶脹率的影響。
[0016] 圖2為溫敏型納米凝膠混懸液的在（a)4°C和（b)37°C透射電鏡照片。
[0017] 圖3為溫敏型納米凝膠在不同溫度下的藥物釋放行為。

【具體實(shí)施方式】
[0018] 以下通過具體實(shí)施例來對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的說明，但是本發(fā)明的范圍并不限于 以下實(shí)施例。
[0019] 實(shí)施例1
[0020] 將活化后的普洛沙姆F127與透明質(zhì)酸按摩爾比1 :5溶于去離子水中，加入硫酸銅 及抗壞血酸鈉，于40°C、氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下反應(yīng)48h。反應(yīng)結(jié)束后，用截留分子量25kDa的透 析袋于去離子水中透析3d，冷凍干燥得聚合物。將聚合物懸浮于PBS緩沖液（pH 7. 4)中， 探頭超聲6min (工作功率90W，工作脈沖為工作Is暫停5s)，可得空白納米凝膠混懸液。測(cè) 定不同濃度及溫度下納米凝膠懸浮液的狀態(tài)（圖1)。將羅非昔布溶于DMF溶液中，共聚物 溶于甲酰胺溶液中，攪拌過夜后混合后，用PBS緩沖液（pH 7. 4)透析12h，離心取上清液，過 濾后凍干，制得載藥溫敏納米凝膠混懸液。
[0021] 實(shí)施例2
[0022] 將活化后的普洛沙姆F68與透明質(zhì)酸按摩爾比1 :2溶于去離子水中，加入硫酸銅 及抗壞血酸鈉，于40°C、氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下反應(yīng)48h。反應(yīng)結(jié)束后，用截留分子量25kDa的透 析袋于去離子水中透析3d，冷凍干燥得聚合物。將聚合物懸浮于PBS緩沖液（pH 7. 4)中， 探頭超聲6min (工作功率90W，工作脈沖為工作Is暫停5s)，可得空白納米凝膠混懸液，并 于透射電鏡下觀察形態(tài)（圖2)。將吲哚美辛溶于DMF溶液中，共聚物溶于甲酰胺溶液中，攪 拌過夜后混合后，用PBS緩沖液（pH 7. 4)透析12h，離心取上清液，過濾后凍干，制得載藥溫 敏納米凝膠混懸液。
[0023] 實(shí)施例3
[0024] 將活化后的普洛沙姆F127與透明質(zhì)酸按摩爾比1 :4溶于去離子水中，加入硫酸銅 及抗壞血酸鈉，于40°C、氮?dú)獗Ｗo(hù)條件下反應(yīng)48h。反應(yīng)結(jié)束后，用截留分子量25kDa的透 析袋于去離子水中透析3d，冷凍干燥得聚合物。將塞來昔布溶于DMF溶液中，共聚物溶于甲 酰胺溶液中，攪拌過夜后混合后，用PBS緩沖液（pH 7. 4)透析12h，離心取上清液，過濾后凍 干，制得載藥溫敏納米凝膠混懸液。不同溫度下的藥物釋放行為如圖3。
【權(quán)利要求】
1. 一種關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射用溫敏型原位凝膠劑，其特征在于，該凝膠是由包載藥物的生物 相容性和生物可降解性的高分子聚合物通過物理交聯(lián)的方式形成的。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠，其特征在于，高分子聚合物由透明質(zhì)酸與溫敏材 料通過化學(xué)鍵連接而成，其中，溫敏材料為殼聚糖、聚乳酸-羥基乙酸、普洛沙姆或異丙基 丙烯酰胺。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的溫敏凝膠，其特征在于，溫敏材料優(yōu)選普洛沙姆407與普洛沙 姆 188。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠，其特征在于，透明質(zhì)酸的分子量為50萬-500萬道 爾頓，優(yōu)選70萬- 200萬道爾頓。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠，其特征在于，普洛沙姆與透明質(zhì)酸反應(yīng)摩爾比在 10:1 - 1 :10之間，優(yōu)選2:1 - 1:5之間。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠，其特征在于，藥物為非留體抗炎類藥物，其中，包 括雙氯芬酸、美洛昔康、依托度酸、酮洛芬、吲哚美辛、塞來昔布、萘丁美酮、羅非昔布的一種 或幾種組合。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠，其特征在于，藥物可以包裹或分散于聚合物中。聚 合物的濃度和載藥量不受限制，除非影響到聚合物的膠凝行為，使其不能形成凝膠或限制 其臨床使用。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的溫敏凝膠，其特征在于，該凝膠具有溫度敏感反向膠凝性質(zhì)， 當(dāng)溫度低于體溫時(shí)，以納米混懸液形式存在，在注射部位溫度升高至體溫，制劑由納米混懸 液轉(zhuǎn)變成凝膠，延長(zhǎng)藥物的釋放時(shí)間。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射用溫敏型原位凝膠的制備方法，其特征在于， 將普洛沙姆鏈接到透明質(zhì)酸主鏈上，形成兩親性共聚物，溫度低于30°C的條件下，聚合物溶 液通過自組裝包載藥物，制備納米凝膠混懸液。然后，將納米凝膠注射到關(guān)節(jié)腔內(nèi)，在體溫 度下形成原位凝膠。
【文檔編號(hào)】A61K45/00GK104208014SQ201410476934
【公開日】2014年12月17日 申請(qǐng)日期:2014年9月17日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月17日
【發(fā)明者】劉松巖, 劉婷婷, 孟玥, 莊小鶯, 朱佳鳳, 陳敬華 申請(qǐng)人:江南大學(xué)