一種胰腺癌介入治療基因納米系統(tǒng)及其制備方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種胰腺癌給藥系統(tǒng)，由多功能納米載體和包含有目的基因的堿基片段組成，所述的納米載體由樹(shù)枝狀高分子材料、親水性聚合物和含釓的螯合物組成，所述的納米載體是細(xì)胞穿膜肽修飾的。本發(fā)明還涉及該胰腺癌給藥系統(tǒng)的應(yīng)用及制備方法。本發(fā)明利用細(xì)胞穿膜肽高性能穿透胰腺癌腫瘤基質(zhì)及癌細(xì)胞膜這一機(jī)制來(lái)實(shí)現(xiàn)給藥系統(tǒng)的局部高效遞送，并利用介入治療的可視性、低創(chuàng)傷、局部遞藥效率高及對(duì)正常器官創(chuàng)傷小的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)胰腺癌細(xì)胞內(nèi)基因高效傳染。實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的胰腺癌給藥系統(tǒng)具有優(yōu)異的治療效果。本發(fā)明的胰腺癌給藥系統(tǒng)制備簡(jiǎn)單，穩(wěn)定高，無(wú)免疫原性，臨床應(yīng)用前景好。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種胰腺癌介入治療基因納米系統(tǒng)及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體地說(shuō)，是一種胰腺癌介入治療基因納米系統(tǒng)及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002]胰腺導(dǎo)管內(nèi)腺癌(以下簡(jiǎn)稱胰腺癌)發(fā)病率在世界范圍內(nèi)呈逐年上升趨勢(shì)，2013年美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)資料顯示，其最新發(fā)病率居惡性腫瘤第十位，病死率居惡性腫瘤第4位。在我國(guó)，胰腺癌發(fā)病率近20年增長(zhǎng)了 6倍，據(jù)2011年中國(guó)腫瘤登記年報(bào)，胰腺癌發(fā)病率為8.55/10萬(wàn)，在所有腫瘤中居第7位；死亡率為7.56/10萬(wàn)，居第6位。胰腺癌起病隱匿，早期診斷困難，且惡性高，進(jìn)展快，轉(zhuǎn)移早，已成為臨床治療難度最大的腫瘤之一，被稱為“21世紀(jì)醫(yī)學(xué)的頑固堡壘”。
[0003]基礎(chǔ)及臨床研究證實(shí)，胰腺癌腫瘤微環(huán)境是其藥物治療的主要障礙。I)由瘤體內(nèi)活化的胰腺星狀細(xì)胞合成并分泌的大量膠原蛋白、透明質(zhì)酸等構(gòu)成了癌細(xì)胞周?chē)幕|(zhì)，而后者成為藥物進(jìn)入癌細(xì)胞的主要屏障。2)胰腺癌不同于其它多數(shù)惡性腫瘤，其腫瘤新生血管匱乏；由于血流灌注不足,藥物到達(dá)瘤體機(jī)率小,瘤體內(nèi)藥物濃度低。
[0004]細(xì)胞穿膜肽是由不超過(guò)30個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成的短肽，可以與細(xì)胞膜表面及細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白多糖相互作用，使其易于細(xì)胞吞飲及在結(jié)締組織內(nèi)穿透。樹(shù)枝狀高分子是一類(lèi)人工合成的納米級(jí)載體材料，具有單一分散性，高密度末端活性基團(tuán)，生理?xiàng)l件下帶正電性的特點(diǎn)。本發(fā)明通過(guò)修飾細(xì)胞穿膜肽提高基因載體在腫瘤基質(zhì)及細(xì)胞膜的穿透性，并通過(guò)納米技術(shù)修飾載體使之具有磁共振可視性，構(gòu)建影像引導(dǎo)下局部基因納米載體介入治療胰腺癌的新策略。本發(fā)明提供一種目前尚未見(jiàn)報(bào)道的胰腺癌介入基因治療的相關(guān)遞載系統(tǒng)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種胰腺癌給藥系統(tǒng)。
[0006]本發(fā)明的再一的目的是，提供一種胰腺癌給藥系統(tǒng)的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明的另一的目的是，提供一種胰腺癌給藥系統(tǒng)的制備方法。
[0008]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:一種胰腺癌給藥系統(tǒng)，所述的給藥系統(tǒng)由納米載體和包含有目的基因的堿基片段組成，所述的納米載體由樹(shù)枝狀高分子材料、親水性聚合物和含釓的螯合物組成，所述的納米載體是細(xì)胞穿膜肽修飾的。
[0009]所述親水性聚合物與樹(shù)枝狀高分子材料的分子比是f 10:1，所述的細(xì)胞穿膜肽與樹(shù)枝狀高分子材料的分子比為f 10:1，所述的納米載體與包含有目的基因的堿基片段復(fù)合質(zhì)量比為0.1?6:1。
[0010]所述的含釓的螯合物與樹(shù)枝狀高分子材料的分子比是f 10:1。
[0011]所述的樹(shù)枝狀聞分子材料為樹(shù)枝狀聚賴氨酸。
[0012]所述的親水性聚合物為聚乙二醇。
[0013]所述的包含有目的基因的堿基片段包括質(zhì)粒DNA或小干擾RNA。
[0014]所述的細(xì)胞穿膜肽的氨基酸序列如SEQ ID N0.1所示。
[0015]為實(shí)現(xiàn)上述第二個(gè)目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)在制備治療胰腺癌的藥物中的應(yīng)用。
[0016]為實(shí)現(xiàn)上述第三個(gè)目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案是:一種胰腺癌給藥系統(tǒng)的制備方法，所述的制備方法包括以下步驟:樹(shù)枝狀高分子材料和親水性聚合物以1:廣10的分子比溶于pH值7.4?8.0的磷酸鹽緩沖液中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，生成樹(shù)枝狀高分子材料-親水性聚合物，超濾法除去未反應(yīng)的親水性聚合物，再將細(xì)胞穿膜肽以廣10:1的分子比與樹(shù)狀高分子材料-親水性聚合物室溫?cái)嚢柘路磻?yīng)24小時(shí)，生成樹(shù)枝狀高分子材料-親水性聚合物-細(xì)胞穿膜肽，超濾法除去未反應(yīng)的細(xì)胞穿膜肽后，將樹(shù)枝狀高分子材料-親水性聚合物-細(xì)胞穿膜肽與含釓螯合物前體以分子比1:廣10反應(yīng)，過(guò)濾未反應(yīng)的含釓螯合物前體，再與過(guò)量的釓離子反應(yīng)，過(guò)濾得到納米載體；將制得的納米載體與含有目的基因的堿基片段以質(zhì)量比為0.Γ6:1的比例渦旋復(fù)合30秒，即得到胰腺癌給藥系統(tǒng)。
[0017]本發(fā)明優(yōu)點(diǎn)在于:
1、本發(fā)明利用細(xì)胞穿膜肽的擴(kuò)散穿透機(jī)制，構(gòu)建胰腺癌腫瘤基質(zhì)高效穿透的納米基團(tuán)載體；并經(jīng)介入靶向給藥，突破胰腺癌血供匱乏對(duì)藥物灌注的限制，提高瘤體藥物濃度，并最終提高癌細(xì)胞內(nèi)藥物濃度。
[0018]2、本發(fā)明利用細(xì)胞穿膜肽高性能穿透胰腺癌腫瘤基質(zhì)及癌細(xì)胞膜這一機(jī)制來(lái)實(shí)現(xiàn)給藥系統(tǒng)的局部高效遞送，并利用介入治療的可視性、低創(chuàng)傷、局部遞藥效率高及對(duì)正常器官創(chuàng)傷小的特點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)胰腺癌細(xì)胞內(nèi)基因高效傳染。
[0019]3、實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明的胰腺癌給藥系統(tǒng)具有優(yōu)異的治療效果。本發(fā)明的胰腺癌給藥系統(tǒng)制備簡(jiǎn)單，穩(wěn)定高，無(wú)免疫原性，臨床應(yīng)用前景好。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0020]附圖1是胰腺癌納米基因給藥系統(tǒng)的表征其中，a:DTPA-DGL-PEG-CPPs 的氫譜，
b:載體與質(zhì)粒DNA以質(zhì)量比6:1復(fù)合所形成納米粒的水化半徑分析， c:載體與質(zhì)粒DNA以質(zhì)量比6:1復(fù)合所形成納米粒的透射電鏡。
[0021]附圖2是納米粒在體內(nèi)外傳染效率及體內(nèi)分布規(guī)律
其中，a:不同納米載體復(fù)載紅色熒光蛋白在胰腺癌腫瘤細(xì)胞株(Miapac-2)傳染效率對(duì)比(Gd-D: Gd-DTPA-DGL, Gd-DP: Gd-DTPA-DGL-PEG, Gd-DPT: Gd-DTPA-DGL-PEG-CPPs),b:納米載體與傳統(tǒng)基因傳染試劑對(duì)比，
c:裸質(zhì)粒與納米載體復(fù)載生物素質(zhì)料經(jīng)局部瘤內(nèi)注射后目標(biāo)基因在體內(nèi)表達(dá)及分布(左:裸質(zhì)粒，中:Gd-DP，右:Gd-DPT )。
[0022]附圖3是納米基因載體在體內(nèi)MRI不蹤
其中，Gd-DTPA 為馬根維顯(Magnevist, Schering,德國(guó))，Gd_DP: Gd-DTPA-DGL-PEG,Gd-DPT: Gd-DTPA-DGL-PEG-CPPs，分別于注射前(before)及注射后10分鐘，30分鐘，2小時(shí)及6小時(shí)掃描，掃描參數(shù)為:MRI成像儀(3.0T，GE醫(yī)療)Tl加權(quán)成像(!^petit1n time TR=300 ms; echo time TE = 7.6 ms; echo train ET = 3; matrix size = 192 X 160， FOV = 7 X 5 cm2)。

【具體實(shí)施方式】
[0023]下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明提供的【具體實(shí)施方式】作詳細(xì)說(shuō)明。
[0024]本發(fā)明的胰腺癌給藥系統(tǒng)由納米載體和包含有目的基因的堿基片段組成，所述的納米載體由樹(shù)枝狀高分子材料、親水性聚合物和含釓的螯合物組成，所述的納米載體是細(xì)胞穿膜肽修飾的。
[0025]本發(fā)明利用細(xì)胞穿透膜肽的高效穿透性能，通過(guò)親水性聚合物修飾到樹(shù)枝狀高分子載體材料上，構(gòu)建胰腺癌載體。以釓(Gd)修飾納米載體，使之具有MRI的可視性，實(shí)現(xiàn)MRI導(dǎo)引下的介入治療及載體在體內(nèi)的實(shí)時(shí)不蹤。構(gòu)建的納米載體，與包含有目的基因的喊基片段復(fù)合，可以實(shí)現(xiàn)目的基因腫瘤細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)。
[0026]以下實(shí)施例所優(yōu)選的細(xì)胞穿膜肽(cell-penetrating peptides,簡(jiǎn)稱CPPs)序列為PGRKKRRQRRPPQC (SEQ ID N0.1)；樹(shù)枝狀高分子載體材料選自樹(shù)枝狀聚賴氨酸(dendrigraft poly-L-lysines DGL,簡(jiǎn)稱DGL);親水性聚合物為聚乙二醇(polyethyleneglycol,簡(jiǎn)稱PEG);包含有目的基因的堿基片段包括各種質(zhì)粒，小干擾RNA (siRNA)等。釓的螯合物前體為p-SCN-Bn-DTPA，釓離子為六水三氯化釓水溶液(GdCl3.6H20)。
[0027]實(shí)施例1
DGL和PEG按照分子比1:4溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱PBS)中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h，生成DGL-PEG，超濾除去未反應(yīng)的PEG，加入細(xì)胞穿膜肽CPPs，與DGL-PEG按照DGL: CPPs=1: 2分子比混合，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24小時(shí)，超濾除去未反應(yīng)的多肽即得DgL-PEg4-CPPs2，后者與p-SCN-Bn-DTPA以分子比1:10反應(yīng)48 h，過(guò)濾未反應(yīng)的DTPA，其氫譜見(jiàn)附圖la。上述產(chǎn)物溶于草酸緩沖液(PH=6.0)并于過(guò)量三氯化釓4°C下反應(yīng)24 h，過(guò)濾得終產(chǎn)物(Gd-DTPA)ltl -DgL-PEg4-CPPs2O
[0028]實(shí)施例2
DGL和PEG按照分子比1:2溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱PBS)中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h，生成DGL-PEG，超濾除去未反應(yīng)的PEG，加入細(xì)胞穿膜肽CPPs，與DGL-PEG按照DGL:CPPs=l:1分子比混合，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24小時(shí)，超濾除去未反應(yīng)的多肽即得DgL-PEg2-CPPs1，后者與p-SCN-Bn-DTPA以分子比1:10反應(yīng)48 h，過(guò)濾未反應(yīng)的DTPA。上述產(chǎn)物溶于草酸緩沖液(PH=6.0)并于過(guò)量三氯化釓4°C下反應(yīng)24 h，過(guò)濾得終產(chǎn)物(Gd-DTPA) 10-DGL-PEG2-CPPSl ο
[0029]實(shí)施例3
DGL和PEG按照分子比1:2溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱PBS)中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h，生成DGL-PEG，超濾除去未反應(yīng)的PEG，加入細(xì)胞穿膜肽CPPs，與DGL-PEG按照DGL:CPPs=l:1分子比混合，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24小時(shí)，超濾除去未反應(yīng)的多肽即得DgL-PEg2-CPPs1，后者與p-SCN-Bn-DTPA以分子比1:5反應(yīng)48 h，過(guò)濾未反應(yīng)的DTPA。上述產(chǎn)物溶于草酸緩沖液(PH=6.0)并于過(guò)量三氯化釓4°C下反應(yīng)24 h，過(guò)濾得終產(chǎn)物(Gd-DTPA)5-DGL-PEG2-CPPs10
[0030]實(shí)施例4 DGL和PEG按照分子比1:4溶于pH 7.4的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱PBS)中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h，生成DGL-PEG，超濾除去未反應(yīng)的PEG，加入細(xì)胞穿膜肽CPPs，與DGL-PEG按照DGL: CPPs=1: 2分子比混合，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24小時(shí)，超濾除去未反應(yīng)的多肽即得DgL-PEg4-CPPs2，后者與p-SCN-Bn-DTPA以分子比1:5反應(yīng)48 h，過(guò)濾未反應(yīng)的DTPA。上述產(chǎn)物溶于草酸緩沖液(PH=6.0)并于過(guò)量三氯化釓4°C下反應(yīng)24 h，過(guò)濾得終產(chǎn)物(Gd-DTPA)5-DGL-PEG4-CPPs2。
[0031]實(shí)施例5
DGL和PEG按照分子比1:1溶于pH 7.7的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱PBS)中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h，生成DGL-PEG，超濾除去未反應(yīng)的PEG，加入細(xì)胞穿膜肽CPPs，與DGL-PEG按照DGL:CPPs=l:1分子比混合，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24小時(shí)，超濾除去未反應(yīng)的多肽即得DGL-PEG-CPPs，后者與p-SCN-Bn-DTPA以分子比1:1反應(yīng)48 h，過(guò)濾未反應(yīng)的DTPA。上述產(chǎn)物溶于草酸緩沖液(PH=6.0)并于過(guò)量三氯化釓4°C下反應(yīng)24 h，過(guò)濾得終產(chǎn)物(Gd-DTPA)-DGL-PEG-CPPs。
[0032]實(shí)施例6
DGL和PEG按照分子比1:10溶于pH 8.0的磷酸鹽緩沖液(簡(jiǎn)稱PBS)中，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)2 h，生成DGL-PEG，超濾除去未反應(yīng)的PEG，加入細(xì)胞穿膜肽CPPs，與DGL-PEG按照DGL: CPPs=1: 10分子比混合，室溫?cái)嚢璺磻?yīng)24小時(shí)，超濾除去未反應(yīng)的多肽即得DGL-PEG1q-CPPs1q，后者與p-SCN-Bn-DTPA以分子比1:5反應(yīng)48 h，過(guò)濾未反應(yīng)的DTPA。上述產(chǎn)物溶于草酸緩沖液(PH=6.0)并于過(guò)量三氯化釓4°C下反應(yīng)24 h，過(guò)濾得終產(chǎn)物(Gd-DTPA) 5-DGL-PEG10-CPPs10O
[0033]實(shí)施例7
將實(shí)施例1 制備的載體(Gd-DTPA)ic1-DGL-PEG4-CPPs2 與溶于 50 mmol Na2SO4 質(zhì)粒 DNA以質(zhì)量比為6:1渦旋復(fù)合30秒，得到納米粒，其粒徑分布及見(jiàn)附圖lb。
[0034]實(shí)施例8
將實(shí)施例1 制備的載體(Gd-DTPA)ic1-DGL-PEG4-CPPs2 與溶于 50 mmol Na2SO4 質(zhì)粒 DNA以質(zhì)量比為6:1渦旋復(fù)合30秒，得到納米粒，采用透射電鏡觀察其形態(tài)見(jiàn)附圖lc。
[0035]實(shí)施例9
將實(shí)施例1制備的載體(Gd-DTPA)ltl-DGL-PEG4-CPPs2與siRNA以質(zhì)量比為0.1:1渦旋復(fù)合30秒，得到納米粒。
[0036]實(shí)施例10
將實(shí)施例1 制備的載體(Gd-DTPA)ic1-DGL-PEG4-CPPs2 與溶于 50 mmol Na2SO4 質(zhì)粒 DNA以質(zhì)量比為2:1渦旋復(fù)合30秒,得到納米粒。
[0037]實(shí)施例11
采用紅色熒光蛋白質(zhì)粒DNA，然后將實(shí)施例1制備的載體(Gd-DTPA)ltl -DGL-PEG4-CPPS2與溶于50 mmol Na2SO4質(zhì)粒DNA以質(zhì)量比為6:1渦旋復(fù)合30秒，得到納米粒。以5 μ gpDNA/孔的劑量，在4°C條件下與胰腺癌細(xì)胞株Miapac-2孵育2h，采用熒光顯微鏡拍攝細(xì)胞攝取，結(jié)果顯示納米粒攝取在4°C是被顯著增強(qiáng)的(與未修飾穿膜肽的載體相比)，見(jiàn)附圖
2β ο
[0038]實(shí)施例12 采用生物熒光素酶蛋白質(zhì)粒DNA，然后將實(shí)施例1制備的載體(Gd-DTPA) 10-DGL-PEG4-CPPs2 與溶于 50 mmol Na2SO4 質(zhì)粒 DNA 以質(zhì)量比為 6:1 渦旋復(fù)合 30秒，得到納米粒。以5 μ g pDNA/孔的劑量，在4°C條件下與胰腺癌細(xì)胞株Miapac-2孵育2h后以PBS洗去納米粒，再常規(guī)孵育46 h后，采用試劑盒定量測(cè)定熒光素酶表達(dá)量。結(jié)果顯示納米粒組在熒光素酶表達(dá)量與PEI組相似，弱于Lipo組，強(qiáng)于裸質(zhì)粒，見(jiàn)附圖2b。
[0039]實(shí)施例13
采用生物熒光素酶蛋白質(zhì)粒DNA，然后將實(shí)施例1制備的載體(Gd-DTPA) 10-DGL-PEG4-CPPs2 與溶于 50 mmol Na2SO4 質(zhì)粒 DNA 以質(zhì)量比為 6:1 渦旋復(fù)合 30秒，得到納米粒。瘤內(nèi)注射(劑量為10 μ g/只)裸鼠原位移植胰腺癌Miapac-2細(xì)胞株動(dòng)物模型，48 h后采用小動(dòng)物活體成像觀察納米粒腦內(nèi)分布。結(jié)果顯示，目標(biāo)基因僅局限于瘤體內(nèi)，且細(xì)胞穿膜肽修飾組熒光素酶表達(dá)量明顯增加，見(jiàn)附圖2c。
[0040]實(shí)施例14
采用紅色熒光蛋白質(zhì)粒DNA，然后將實(shí)施例1制備的載體(Gd-DTPA)ltl -DGL-PEG4-CPPS2與溶于50 mmol Na2SO4質(zhì)粒DNA以質(zhì)量比為6:1渦旋復(fù)合30秒，得到納米粒。瘤內(nèi)注射(劑量為10 μ g/只)裸鼠原位移植胰腺癌Miapac-2細(xì)胞株動(dòng)物模型，在醫(yī)用磁共振成像儀下實(shí)時(shí)觀察載體在瘤體內(nèi)擴(kuò)散，細(xì)胞穿膜肽修飾組粒子在瘤內(nèi)擴(kuò)散能力顯著強(qiáng)于裸質(zhì)粒級(jí)及非修飾組，見(jiàn)附圖3。
[0041]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明方法的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和補(bǔ)充，這些改進(jìn)和補(bǔ)充也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種胰腺癌給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的給藥系統(tǒng)由多功能納米載體和包含有目的基因的堿基片段組成，所述的納米載體由樹(shù)枝狀高分子材料、親水性聚合物和含釓的螯合物組成，所述的納米載體是細(xì)胞穿膜肽修飾的。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的親水性聚合物與樹(shù)枝狀聞分子材料的分子比是1?10:1,所述的細(xì)胞穿膜肽與樹(shù)枝狀聞分子材料的分子比為Γιο:1，所述的納米載體與包含有目的基因的堿基片段復(fù)合質(zhì)量比為0.Γ6:10
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的含釓的螯合物與樹(shù)枝狀聞分子材料的分子比是1?10:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的樹(shù)枝狀高分子材料為樹(shù)枝狀聚賴氨酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的親水性聚合物為聚乙二醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的包含有目的基因的堿基片段包括質(zhì)粒DNA或小干擾RNA。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)，其特征在于，所述的細(xì)胞穿膜肽的氨基酸序列如SEQ ID N0.1所示。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)在制備治療胰腺癌的藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的胰腺癌給藥系統(tǒng)的制備方法，其特征在于，所述的制備方法包括以下步驟:樹(shù)枝狀高分子材料和親水性聚合物以1:廣10的分子比溶于PH值7.4?.8.0的磷酸鹽緩沖液中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，生成樹(shù)枝狀高分子材料-親水性聚合物，超濾法除去未反應(yīng)的親水性聚合物，再將細(xì)胞穿膜肽以f 10:1的分子比與樹(shù)狀高分子材料-親水性聚合物室溫?cái)嚢柘路磻?yīng)24小時(shí)，生成樹(shù)枝狀高分子材料-親水性聚合物-細(xì)胞穿膜肽，超濾法除去未反應(yīng)的細(xì)胞穿膜肽后，將樹(shù)枝狀高分子材料-親水性聚合物-細(xì)胞穿膜肽與含釓螯合物前體以分子比1:廣10反應(yīng)，過(guò)濾未反應(yīng)的含釓螯合物前體，再與過(guò)量的釓離子反應(yīng)，過(guò)濾得到納米載體；將制得的納米載體與含有目的基因的堿基片段以質(zhì)量比為.0.Γ6:1的比例渦旋復(fù)合30秒，即得到胰腺癌給藥系統(tǒng)。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK104324385SQ201410500242
【公開(kāi)日】2015年2月4日 申請(qǐng)日期:2014年9月26日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月26日
【發(fā)明者】王小林, 王慶兵, 蔣晨, 陳頤 申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院