版納繩蚋防御肽SibaDef及其基因和應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種吸血昆蟲版納繩蚋防御肽及其基因和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。該多肽分子量4795.23道爾頓，等電點(diǎn)8.94，全序列一級(jí)結(jié)構(gòu)為：ATCDLLSISTPWGSVNHAACAAHCLALNRGFRGGYCSSKAVCTCRK，其第三位半胱氨酸和第三十六位半胱氨酸組成分子內(nèi)二硫鍵，第二十位半胱氨酸和第四十二位半胱氨酸組成分子內(nèi)二硫鍵，其第二十四位半胱氨酸和第四十四位半胱氨酸組成分子內(nèi)二硫鍵。編碼版納繩蚋防御肽的基因由447個(gè)核苷酸組成，其中編碼成熟版納繩蚋防御肽為第178-315位核苷酸。該版納繩蚋防御肽具有顯著的抑制細(xì)菌生長的作用，能夠作為制備病原微生物感染疾病的治療藥物的應(yīng)用。
【專利說明】版納繩蚋防御肽SibaDef及其基因和應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】：
[0001] 本發(fā)明涉及一種吸血昆蟲版納繩蚋（Simulium bannaense)防御肽SibaDef及其 基因和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。

【背景技術(shù)】：
[0002] 在當(dāng)前抗生素的耐藥性日益嚴(yán)峻的情況下，多肽類抗微生物（抗菌肽）藥物的潛 在應(yīng)用價(jià)值吸引了各國研究人員的密切關(guān)注。研究表明，抗菌肽能夠在低濃度下快速殺滅 各種革蘭氏陽性和陰性細(xì)菌、真菌、寄生蟲等病原微生物，而且也能殺死多種腫瘤細(xì)胞，抑 制病毒的繁殖與擴(kuò)散。此外，它們還無致畸變作用，無蓄積毒性，不容易產(chǎn)生抗藥性。一些 臨床前期的數(shù)據(jù)表明，抗菌肽對(duì)于局部感染和全身感染都有效，有希望成為新一代抗微生 物藥物。
[0003] 昆蟲是世界上最大的生物種群，除海洋外，其余所有的生態(tài)環(huán)境都有昆蟲的分布。 昆蟲并不具有高等動(dòng)物那樣高度專一的免疫系統(tǒng)，即在昆蟲體內(nèi)缺乏T和B淋巴細(xì)胞系統(tǒng)， 也無免疫球蛋白及補(bǔ)體系統(tǒng)。然而昆蟲能在幾億年的自然進(jìn)化當(dāng)中仍然占據(jù)優(yōu)勢，表明其 先天免疫系統(tǒng)是非常強(qiáng)大的。研究表明，昆蟲的先天免疫系統(tǒng)能夠快速大量合成多種防御 肽直接殺滅入侵的病菌，并阻止病菌的繼續(xù)侵襲。此外，它們還通過參與、調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫 系統(tǒng)間接發(fā)揮各種防御功能。因此，從昆蟲來源的抗菌肽中篩選潛在的抗生素替代物是當(dāng) 前學(xué)界的研究熱點(diǎn)。吸血昆蟲版納繩蚋Simulium bannaense主要分布于云南省西雙版納， 其體內(nèi)的抗菌活性物質(zhì)成分尚未見公開報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】
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[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種新的具有廣譜抗微生物（革蘭氏陽性細(xì)菌）的版納繩 蚋防御肽及其基因和應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的版納繩蚋防御肽SibaDef是中國吸血昆蟲版納繩蚋防御肽基因編碼的 一種環(huán)狀多肽，分子量4795. 23道爾頓，等電點(diǎn)8. 94,多肽全序列一級(jí)結(jié)構(gòu)（氨基酸序列SEQ ID NO: 1)為：
[0006] Ala Thr Cys Asp Leu Leu Ser lie Ser Thr Pro Trp Gly Ser Val Asn His Ala Ala
[0007] Cys Ala Ala His Cys Leu Ala Leu Asn Arg Gly Phe Arg Gly Gly Tyr Cys Ser Ser Lys
[0008] Ala Val Cys Thr Cys Arg Lys
[0009] (ATCDLLSISTPWGSVNHMCAAHCLALNRGFRGG YCSSKAVCTCRK)，其第三位半胱氨酸和 第三十六位半胱氨酸組成分子內(nèi)二硫鍵，第二十位半胱氨酸和第四十二位半胱氨酸組成分 子內(nèi)二硫鍵，其第二十四位半胱氨酸和第四十四位半胱氨酸組成分子內(nèi)二硫鍵。
[0010] 編碼版納繩蚋防御肽的基因由447個(gè)核苷酸（SEQ ID N0:2)組成，其自5'端至3' 端序列為：
[0011]

【權(quán)利要求】
1. 版納繩蚋防御肽，其特征在于該防御肽是中國吸血昆蟲版納繩蚋防御肽基因編碼的 一種環(huán)狀多肽，分子量4795. 23道爾頓，等電點(diǎn)8. 94,其氨基酸序列為SEQ ID NO: 1所示。
2. 編碼版納繩蚋防御肽的基因，其特征在于由SEQ ID N0:2所示的核苷酸序列組成。
3. 編碼版納繩蚋防御肽的基因，其成熟防御肽為SEQ ID N0:2的第178-315位核苷酸， 其氨基酸序列為SEQ ID NO:3。
4. 權(quán)利要求1所述的版納繩蚋防御肽在制備病原微生物感染疾病的治療藥物中的應(yīng) 用。
【文檔編號(hào)】A61K38/17GK104356216SQ201410525733
【公開日】2015年2月18日 申請(qǐng)日期:2014年10月9日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月9日
【發(fā)明者】楊海龍, 武靜, 木麗仙, 韓毅, 劉彤, 呂樂春, 呂靖 申請(qǐng)人:昆明醫(yī)科大學(xué)