還原型輔酶Ⅱ的用途
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及還原型輔酶Ⅱ的用途。試驗(yàn)結(jié)果表明，NADPH能明顯延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、提高疲勞小鼠肝糖原儲備、降低疲勞小鼠乳酸和尿素氮含量，提示本發(fā)明具有明顯的抗疲勞作用。
【專利說明】還原型輔酶II的用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及還原型輔酶II的用途。

【背景技術(shù)】
[0002]疲勞是一種主觀的不適感，主要表現(xiàn)為疲勞感、倦怠感，在進(jìn)行長時(shí)間勞動、劇烈運(yùn)動或長時(shí)間精神壓力下會察覺到，這是一種正常的生理性保護(hù)反應(yīng)，提示機(jī)體應(yīng)該通過休息使機(jī)能恢復(fù)，從而避免對身體的進(jìn)一步傷害。然而隨著社會競爭的加劇，生活節(jié)奏的加快，使人們常常不顧疲勞，仍然選擇長時(shí)間工作。長期處于疲勞狀態(tài)，會損害人體的體力、體能，身體失衡，使人難以從事或完成某些消耗體力較大或動作細(xì)膩、精巧的工作，從而使工作效率下降；另一方面，長期疲勞還會使人皮膚松弛，面色無華，呈現(xiàn)出未老先衰的征兆；長期疲勞得不到恢復(fù)，使人體免疫系統(tǒng)功能失調(diào)，甚至造成免疫低下，機(jī)體抵抗疾病的屏障被打破，使患者患病的幾率增加。另外，長期心理壓力、激素紊亂、免疫異常等，均是造成慢性疲勞綜合征的主要誘因。超負(fù)荷的工作、過度的壓力與不規(guī)律的生活作息使人們常常感覺到疲勞感、倦怠感長時(shí)間難以恢復(fù)，使人們長期處于亞健康狀態(tài)，人群中約有70%的人處于這一狀態(tài)，其中又以中老年人高發(fā)。
[0003]基于此，需要找到抗疲勞物質(zhì)來延緩長時(shí)間勞動、劇烈運(yùn)動或過度精神壓力下造成的疲勞發(fā)生，或使疲勞狀態(tài)盡快恢復(fù)到正常狀態(tài)，以期使人們亞健康狀態(tài)恢復(fù)正?；?qū)ζ诰C合征產(chǎn)生療效?，F(xiàn)有的抗疲勞藥物主要以中藥為主，特點(diǎn)是注重養(yǎng)生，消費(fèi)者需長期服用，起效慢。
[0004]因此，提供一種新的抗疲勞藥物具有現(xiàn)實(shí)意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]有鑒于此，本發(fā)明提供還原型輔酶II的用途。試驗(yàn)結(jié)果表明，NADPH具有延長中年與老年小鼠負(fù)重游泳時(shí)間，增加肝糖原儲備，減少乳酸、尿素氮含量，具有用量小、安全、可注射、可口服等優(yōu)點(diǎn)，具有較大的臨床應(yīng)用價(jià)值。
[0006]為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案:
[0007]本發(fā)明提供了還原型輔酶II (NADPH)在制備抗疲勞藥物、保健品或食品中的應(yīng)用。
[0008]本發(fā)明研究顯示，運(yùn)動疲勞運(yùn)動損傷的自由基學(xué)說指出，運(yùn)動引起的自由基的產(chǎn)生是引起機(jī)體疲勞的重要因素。還原型輔酶II (NADPH)在體內(nèi)許多化學(xué)反應(yīng)中起遞氫體的作用，研究結(jié)果顯示NADPH可通過抗氧化作用來治療缺血性腦中風(fēng)，其抗氧化作用主要體現(xiàn)在對含氧自由基的清除作用。另外還發(fā)現(xiàn)NADPH可參與線粒體供能、參與體內(nèi)激素合成的功能，表明NADPH可能具有抗疲勞作用。
[0009]負(fù)重游泳是評價(jià)機(jī)體運(yùn)動性疲勞的重要指標(biāo)，游泳時(shí)間的長短可以反映動物運(yùn)動疲勞的程度。體內(nèi)儲備的糖原是小鼠運(yùn)動的主要能量來源，機(jī)體劇烈運(yùn)動需要消耗大量糖原，因此糖原儲備也是評價(jià)機(jī)體抗疲勞的一個(gè)重要指標(biāo)。乳酸在機(jī)體供能體系中占有重要的地位，它是糖酵解供能的最終產(chǎn)物，又是有氧代謝供能系統(tǒng)中的重要氧代謝基質(zhì)，并且乳酸可在肝臟內(nèi)通過糖的異生作用轉(zhuǎn)變?yōu)槠咸烟枪┠?。但是如果機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生過量的乳酸.會使肌肉中H+濃度上升.pH下降，進(jìn)而引起一系列生化變化，就會引起疲勞。研究顯示，尿素氮(BUN)的增加與機(jī)體對負(fù)荷適應(yīng)能力呈負(fù)相關(guān)，機(jī)體BUN含量隨運(yùn)動負(fù)荷的增加而增加，所以BUN是較為理想、靈敏的疲勞指標(biāo)。
[0010]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述抗疲勞為糾正亞健康狀態(tài)或治療慢性疲勞綜合癥。
[0011]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述糾正亞健康狀態(tài)為增加肝糖原含量、增加全血乳酸含量或降低血漿尿素氮含量。
[0012]作為優(yōu)選，本發(fā)明提供的還原型輔酶II制備抗疲勞藥物的用途中，所述藥物還包括藥學(xué)上可接受的輔料。
[0013]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述藥物的制備方法:將一定量NADPH溶于生理鹽水或去離子水中，可以單獨(dú)應(yīng)用或與其它活性物質(zhì)組成復(fù)合制劑。
[0014]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述藥物的劑型為口腔速溶藥膜、口服液、飲料、片劑、膠囊、噴霧劑、注射劑或透皮吸收劑。經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，還原型輔酶II (NADPH)抗疲勞的特點(diǎn)不受劑型的影響，任何藥物可接受的劑型均可達(dá)到相近的效果，均在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)，本發(fā)明在此不作限定。
[0015]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述藥物的給藥方式為每日I?3次，每次I?10mg還原型輔酶II /kg動物體重。
[0016]在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述藥物的給藥方式為注射或口服。任何藥物可接受的給藥方式均可達(dá)到相近的效果，均在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)，本發(fā)明在此不作限定。
[0017]本發(fā)明提供了還原型輔酶II (NADPH)在制備抗疲勞藥物、保健品或食品中的應(yīng)用。試驗(yàn)表明，腹腔注射給予NADPH具有延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的趨勢，且此趨勢呈劑量依賴性；與control組相比，口服給予NADPH后小鼠負(fù)重游泳時(shí)間呈現(xiàn)劑量依賴性延長，經(jīng)方差分析，中、大劑量組與control對照組相比有顯著性差異(ρ〈0.05)。與control組相比，模型組的小鼠負(fù)重游泳時(shí)間明顯下降，而口服給予NADPH后小鼠負(fù)重游泳時(shí)間與模型組相比有明顯延長。
[0018]與control組相比，不論是注射或是口服給予NADPH，小鼠肝糖原含量均顯著增力口，其中，注射給藥中劑量組與對照組差異達(dá)顯著性水平(圖2A)，口服給藥大劑量組與對照組差異達(dá)顯著水平(圖2B)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p〈0.05)，在抗慢性疲勞綜合癥模型實(shí)驗(yàn)中，口服給藥小劑量組與模型組差異達(dá)顯著水平(圖2C)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p〈0.05)。
[0019]注射給予NADPH后，與control組比較，全血乳酸含量明顯下降，以中劑量和大劑量最為顯著(P〈0.05);與control組相比，口服給予NADPH后全血乳酸含量均有所下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與model組相比，口服給予NADPH后小鼠全血乳酸含量有明顯延長，有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義(p〈0.01)。
[0020]NADPH各劑量組血漿尿素氮含量較control組相比均有所下降。經(jīng)方差分析注射給藥(圖4A)中劑量組與對照組有高度顯著性，口服給藥(圖4B)大劑量組與對照組有高度顯著性(P〈0.05)，口服給藥抗慢性疲勞綜合癥(圖4C)大劑量組與模型組相比有下降趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0021]綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，NADPH能明顯延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、提高疲勞小鼠肝糖原儲備、降低疲勞小鼠乳酸和尿素氮含量，提示本發(fā)明具有明顯的抗疲勞作用。
[0022]NADPH抗疲勞綜合癥的治療獲得類似效果。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0023]圖1示NADPH對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響；其中圖1A為第一批腹腔注射實(shí)驗(yàn)結(jié)果；圖1B為第二批口服實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05與control組比較；圖1C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實(shí)驗(yàn)結(jié)果；
[0024]圖2表示NADPH對小鼠肝糖原儲備的影響；其中圖2A為第一批腹腔注射實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05，與control組比較；圖2B為第二批口服實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05，與control組比較；圖2C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05，與model組比較；
[0025]圖3表示NADPH對小鼠全血乳酸水平的影響；其中圖3A為第一批腹腔注射實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05,與control組比較；圖3B為第二批口服實(shí)驗(yàn)結(jié)果，圖3C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實(shí)驗(yàn)結(jié)果，**表示P〈0.01,與model組比較；
[0026]圖4表示NADPH對小鼠血漿尿素氮水平的影響；其中A為第一批腹腔注射實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示ρ〈0.05,與control組比較；B為第二批口服實(shí)驗(yàn)結(jié)果,*表示ρ〈0.05,與control組比較；C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

【具體實(shí)施方式】
[0027]本發(fā)明公開了還原型輔酶II的用途，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實(shí)施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本
【發(fā)明內(nèi)容】
、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動或適當(dāng)變更與組合，來實(shí)現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。
[0028]本發(fā)明提供的還原型輔酶II的用途中所用原藥及輔料、制劑均可由市場購得。
[0029]下面結(jié)合實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明:
[0030]實(shí)施例1
[0031]I材料與方法
[0032]1.1 樣品:
[0033]1.2實(shí)驗(yàn)動物:五月齡中年雄性ICR小鼠；八月齡老年雄性C57小鼠。
[0034]1.3儀器與試劑:游泳箱、鉛絲、全波長酶標(biāo)儀、恒溫水浴箱、離心機(jī)、肝糖原檢測試劑盒(南京建成，貨號A043)、乳酸檢測試劑盒(南京建成，貨號A019-1)、尿素氮試劑盒(南京建成，貨號C013-1)、S0D檢測試劑盒(南京建成，貨號A001-1)、MDA檢測試劑盒(南京建成，貨號A003-1)。
[0035]1.4實(shí)驗(yàn)方法:
[0036]A.第一批:將60只雄性五月齡中年ICR小鼠隨機(jī)分為4組，每組15只。小劑量組腹腔注射給藥2.5mg/kg的藥品，中劑量腹腔注射給藥5mg/kg的藥品，大劑量腹腔注射給藥10mg/kg的藥品。Control組給予同體積的生理鹽水。于每天上午10:00至11:00給藥一次，連續(xù)給藥7天。
[0037]B.第二批:將100只雄性八月齡老年C57小鼠隨機(jī)分為4組，每組20只。小劑量組灌胃2.5mg/kg的藥品，中劑量灌胃5mg/kg的藥品，大劑量灌胃10mg/kg的藥品。Control組給予同體積的水。于每天上午10:00至11:00給藥一次,連續(xù)給藥7天。
[0038]C.第三批:將80只雄性五月齡中年ICR小鼠隨機(jī)分為4組，每組20只。Control組正常環(huán)境下飼養(yǎng)14天，其余三組進(jìn)行慢性疲勞綜合癥造模:每天上午9:00至11:00進(jìn)行束縛，每次一小時(shí)，每天下午將小鼠放入水深為35cm，水溫為21±1°C的游泳箱內(nèi)強(qiáng)制游泳I小時(shí)，連續(xù)造模14天。從第15天開始給藥，小劑量灌胃5mg/kg的藥品，大劑量灌胃1mg/kg的藥品。Control組給予同體積的水。于每天上午10:00至11:00給藥一次,連續(xù)給藥7天。
[0039]1.4.1負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)
[0040]末次給予藥物30min后，給小鼠尾部負(fù)其體重的4%質(zhì)量的鉛絲。將小鼠放入水深為35cm，水溫為21±1°C的游泳箱內(nèi)游泳，直到力竭。力竭的判定標(biāo)準(zhǔn)為小鼠頭部沉入水中1s內(nèi)不浮出水面,記錄力竭時(shí)間。
[0041]1.4.2肝糖原測定
[0042]小鼠負(fù)重游泳后，休息10分鐘，在摘眼球采血后將小鼠處死。取出肝臟，用生理鹽水漂洗后再用濾紙吸干，精確稱取50mg肝臟。按照試劑盒說明書進(jìn)行肝臟肝糖原的測定。
[0043]1.4.3全血乳酸測定
[0044]小鼠負(fù)重游泳后，休息10分鐘，摘除眼球取血，按照試劑盒說明進(jìn)行全血乳酸的測定。
[0045]1.4.4血漿指標(biāo)測定
[0046]小鼠負(fù)重游泳后，休息10分鐘，眼球采血，用EDTA鈉鹽抗凝后3500轉(zhuǎn)離心10分鐘后分離出血漿，按照試劑盒說明書進(jìn)行血漿尿素氮的測定。
[0047]2 結(jié)果
[0048]2.1小鼠負(fù)重游泳時(shí)間測定
[0049]圖1表示NADPH對小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響。其中A為第一批腹腔注射實(shí)驗(yàn)結(jié)果；B為第二批口服實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05與control組比較；C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由圖1A可以看出，腹腔注射給予NADPH具有延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的趨勢，且此趨勢呈劑量依賴性；由圖1B可以看出，與control組相比，口服給予NADPH后小鼠負(fù)重游泳時(shí)間呈現(xiàn)劑量依賴性延長，經(jīng)方差分析，中、大劑量組與control對照組相比有顯著性差異(P〈0.05)。由圖1C可以看出，與control組相比，模型組的小鼠負(fù)重游泳時(shí)間明顯下降，而口服給予NADPH后小鼠負(fù)重游泳時(shí)間與模型組相比有明顯延長。
[0050]2.2小鼠肝糖原測定
[0051]圖2表示NADPH對小鼠肝糖原儲備的影響，其中A為第一批腹腔注射實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示ρ〈0.05,與control組比較；B為第二批口服實(shí)驗(yàn)結(jié)果,*表示ρ〈0.05,與control組比較；C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05，與model組比較。由圖2可以看出，與control組相比，不論是注射或是口服給予NADPH，小鼠肝糖原含量均顯著增加，其中，注射給藥中劑量組與對照組差異達(dá)顯著性水平(圖2A)，口服給藥大劑量組與對照組差異達(dá)顯著水平(圖2B)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p〈0.05)，在抗慢性疲勞綜合癥模型實(shí)驗(yàn)中，口服給藥小劑量組與模型組差異達(dá)顯著水平(圖2C)，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p〈0.05)。
[0052]2.3小鼠全血乳酸測定
[0053]圖3表示NADPH對小鼠全血乳酸水平的影響。其中A為第一批腹腔注射實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05，與control組比較；B為第二批口服實(shí)驗(yàn)結(jié)果，C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實(shí)驗(yàn)結(jié)果，**表示ρ〈0.01，與model組比較。由圖3A可以看出，注射給予NADPH后，與control組比較，全血乳酸含量明顯下降，以中劑量和大劑量最為顯著(p〈0.05);由圖3B可以看出，與control組相比，口服給予NADPH后全血乳酸含量均有所下降，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。由圖3C可以看出，與model組相比，口服給予NADPH后小鼠全血乳酸含量有明顯延長，有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著意義(p〈0.01)。
[0054]2.4小鼠血漿尿素氮含量測定
[0055]圖4表示NADPH對小鼠血漿尿素氮水平的影響。其中A為第一批腹腔注射實(shí)驗(yàn)結(jié)果，*表示p〈0.05,與control組比較；B為第二批口服實(shí)驗(yàn)結(jié)果表示p〈0.05,與control組比較；C為第三批口服抗慢性疲勞綜合癥實(shí)驗(yàn)結(jié)果。由圖4可以看出，NADPH各劑量組血漿尿素氮含量較control組相比均有所下降。經(jīng)方差分析注射給藥(圖4A)中劑量組與對照組有高度顯著性，口服給藥(圖4B)大劑量組與對照組有高度顯著性(p〈0.05)，口服給藥抗慢性疲勞綜合癥(圖4C)大劑量組與模型組相比有下降趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0056]綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，NADPH能明顯延長小鼠負(fù)重游泳時(shí)間、提高疲勞小鼠肝糖原儲備、降低疲勞小鼠乳酸和尿素氮含量，提示本發(fā)明具有明顯的抗疲勞作用。
[0057]NADPH抗疲勞綜合癥的治療獲得類似效果。
[0058]以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.還原型輔酶II在制備抗疲勞藥物、保健品或食品中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抗疲勞為糾正亞健康狀態(tài)或治療慢性疲勞綜合癥。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述糾正亞健康狀態(tài)為增加肝糖原含量、增加全血乳酸含量或降低血漿尿素氮含量。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物還包括藥學(xué)上可接受的輔料。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的劑型為口腔速溶藥膜、口服液、飲料、片劑、膠囊、噴霧劑、注射劑或透皮吸收劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的給藥方式為每日I?3次，每次I?10mg還原型輔酶II /kg動物體重。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物的給藥方式為注射或口服。
【文檔編號】A61K31/7076GK104306390SQ201410570643
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年10月23日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月23日
【發(fā)明者】秦正紅, 孫瑋, 陳曹鑫, 寇建群 申請人:蘇州人本藥業(yè)有限公司