一種改性白芨多糖衍生物納米載體的制備及應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的制法及其作為納米藥物載體在生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用。白芨粗多糖經(jīng)純化、酶解、精制得到低分子量白芨多糖，再經(jīng)催化劑輔助反應(yīng)接枝疏水基團(tuán)，反應(yīng)液經(jīng)透析、冷凍干燥后制得疏水改性低分子量白芨多糖衍生物。所得產(chǎn)物在水溶液中可自組裝形成外殼親水、內(nèi)核疏水的球形納米級(jí)膠束，通過(guò)調(diào)節(jié)白芨多糖分子量、疏水基團(tuán)種類(lèi)及取代度等因素可控制膠束粒徑在60～800nm范圍內(nèi)。該納米膠束可作為疏水性藥物的靶向遞送載體，具有良好的肝靶向性能。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種改性白芨多糖衍生物納米載體的制備及應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于功能性醫(yī)藥材料與納米【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種疏水改性低分子量白芨多糖衍生物及其納米載體的制備方法。
技術(shù)背景
[0002]白芨多糖提取自傳統(tǒng)中藥白芨，是其收斂止血、消腫生肌的主要活性成分。研宄表明，白芨多糖具有止血、促進(jìn)創(chuàng)傷愈合、抑菌、消炎、抗腫瘤、抗氧化、抗?jié)?、促進(jìn)骨髓造血等生物活性，臨床應(yīng)用廣泛。此外，還可以用作食品、化妝品的功能添加劑。進(jìn)年來(lái)國(guó)內(nèi)外學(xué)者致力于把白芨多糖開(kāi)發(fā)成為功能型醫(yī)藥材料，將白芨多糖單獨(dú)或與其他材料協(xié)同應(yīng)用的報(bào)道居多，如作為末梢血管栓塞劑介入治療惡性腫瘤，作為增稠劑用于改善滴眼液生物利用度等。目前，極少數(shù)報(bào)道涉及白芨多糖的化學(xué)改性研宄，僅有學(xué)者制備了膽留醇琥珀酰基白芨多糖，但其合成產(chǎn)物分子量較大，并未做材料安全性及作為生物醫(yī)藥材料方面的相關(guān)研宄。因此，其改性產(chǎn)物難以在新型醫(yī)藥材料方面得到應(yīng)用與推廣。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了充分發(fā)揮和利用白芨多糖的原有優(yōu)勢(shì)，同時(shí)改善和提高其性能、彌補(bǔ)和克服其缺陷，本發(fā)明以低分子量白芨多糖為原料，提供一種疏水改性低分子量白芨多糖衍生物納米膠束作為藥物載體的制備方法及應(yīng)用。
[0004]本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn):
[0005]一種疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束，將改性白芨多糖衍生物于蒸餾水中，經(jīng)磁力攪拌、冰浴超聲、濾膜濾過(guò)，收集續(xù)濾液得圓球形膠束，平均粒徑范圍為60 ?800nm ；
[0006]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法:精密稱(chēng)取疏水改性白芨多糖衍生物于蒸餾水中，經(jīng)磁力攪拌、冰浴超聲、濾膜濾過(guò)，收集續(xù)濾液，濾液自組裝成納米膠束；
[0007]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法:精密稱(chēng)取20.00?25.0Omg所述疏水改性白發(fā)多糖衍生物于5?12mL蒸飽水中，磁力攪拌3?4h，冰浴超聲5?lOmin，分別經(jīng)0.45 μ m、0.22 μ m的濾膜濾過(guò)，收集續(xù)濾液，濾液自組裝成納米膠束，膠束成圓球形，其平均粒徑范圍為60?800nm ；
[0008]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，疏水改性低分子量白芨多糖衍生物以降解后的低分子量白芨多糖為原料，經(jīng)透析、冷凍干燥即得；
[0009]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備包括如下步驟:
[0010]a.稱(chēng)取酶解后的低分子量白芨多糖0.04?0.25g分散在20?50mL溶劑中溶解，備用;
[0011]b.稱(chēng)取一定量疏水材料、催化劑A、催化劑B (0.2?2:1:1?3，mmol/mmol)分散在4?6mL與步驟a相同的溶劑中，冰浴活化1.5?3h，將活化后的反應(yīng)液逐滴加入到步驟a制得的低分子量白芨多糖溶液中，持續(xù)攪拌，先高溫反應(yīng)2?4h，再室溫反應(yīng)24?36h ；
[0012]c.將步驟b的反應(yīng)液置于透析袋(截留分子量為3000?8000D)中并在蒸餾水中透析，每8h換一次水，透析2?3天。將透析液過(guò)濾，取續(xù)濾液冷凍干燥，收集產(chǎn)物即得疏水改性低分子量白芨多糖衍生物；
[0013]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物納米膠束的制備方法，低分子量白芨多糖是白芨粗多糖經(jīng)純化、降解、精制后制得，其黏均分子量為1000D?8000D ；
[0014]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備中，步驟a所述酶解后的低分子量白芨多糖是白芨多糖通過(guò)酶法降解所得，其中酶采用纖維素酶、果膠酶、葡聚糖酶、葡萄糖苷酶中的能夠作用于β -1, 4糖苷鍵的一種或以上多種酶的組合物；
[0015]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備中，步驟a中的溶劑可用二甲基亞砜、N，N-二甲基甲酰胺、甲酰胺、乙醇與水的混合溶劑、水與N，N- 二甲基甲酰胺的混合溶劑中的一種或多種；
[0016]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備中，步驟b中所述疏水材料中疏水基團(tuán)可以是脫氧膽酸、膽酸、膽烷酸、C2?C 19脂肪酸中的任意一種，所述疏水基團(tuán)的取代度為5?60% ;
[0017]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備中，步驟b中催化劑A可以用N，N-二環(huán)已基碳二亞胺、1-乙基-(3- 二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺中的任意一種；催化劑B可選用4- 二甲氨基吡啶、N-羥基丁二酰亞胺中的任意一種；
[0018]上述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物納米膠束作為藥物載體的應(yīng)用；
[0019]上述的疏水改性低分子量白芨多糖衍生物納米膠束作為藥物載體的應(yīng)用，具體是在包載難溶性藥物并將藥物靶向運(yùn)送至肝臟中的應(yīng)用。
[0020]本發(fā)明的有益效果:以低分子量白芨多糖為原料，合成一種疏水改性多糖納米材料，擴(kuò)大白芨多糖及改性白芨多糖的應(yīng)用領(lǐng)域。由發(fā)明所制的疏水改性低分子量白芨多糖通過(guò)自作裝成納米膠束，形成核-殼結(jié)構(gòu)，包裹疏水性藥物，增強(qiáng)疏水藥物在體液中的溶解性，延長(zhǎng)作用時(shí)間，防止藥物被生物體內(nèi)酶降解，進(jìn)而提高生物利用度。用于包載難溶性藥物并將藥物靶向運(yùn)送至肝臟。可用于保肝、護(hù)肝藥物的肝靶向遞釋。既可以實(shí)現(xiàn)藥物的控制釋放和靶向治療等作用，又降低藥物對(duì)正常組織的毒副作用，是一種較好的藥物載體材料。

【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0021]圖1為本發(fā)明合成月桂酸接枝白芨多糖衍生物自組裝成納米膠束的透射電鏡圖
[0022]圖2為本發(fā)明合成膽酸接枝白芨多糖衍生物自組裝成納米膠束的透射電鏡圖
[0023]圖3為本發(fā)明合成硬脂酸接枝白芨多糖衍生物自組裝成納米膠束的透射電鏡圖
[0024]圖4為本發(fā)明超聲分散法制備載甘草次酸膠束透射電鏡圖
[0025]圖5為本發(fā)明超聲分散法制備載水飛薊素膠束透射電鏡圖
[0026]圖6為本發(fā)明游離藥物與載藥膠束小鼠尾靜脈注射4小時(shí)后離體組織熒光圖
[0027]圖7為本發(fā)明改性白芨多糖載香豆素-6膠束與HepG2細(xì)胞孵育Ih后熒光圖圖中(X40，a:空白組，b:游離香豆素組，c:載香豆素膠束組)

【具體實(shí)施方式】
[0028]以下結(jié)合附圖通過(guò)實(shí)例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的說(shuō)明:
[0029]實(shí)例1:
[0030]白芨多糖的降解以及改性:
[0031](I)白芨多糖的纖維素酶降解
[0032]精密稱(chēng)取2.0Og白芨多糖，分散溶解在10ml蒸餾水中，用磷酸二氫鉀調(diào)節(jié)pH為5.0，加入0.45% (w/v)的纖維素酶，50 °C保溫振蕩4?6h，煮沸5?1min滅活酶；用3，5- 二硝基水楊酸法測(cè)得降解產(chǎn)物還原糖含量為14.27±0.59%，黏均分子量為4850.48Da。
[0033](2)白芨多糖接枝脫氧膽酸的合成
[0034]精密稱(chēng)取0.04g上述纖維素酶法降解后的白芨多糖，溶解于20mL 二甲基亞砜中，備用；稱(chēng)取0.39g脫氧膽酸、0.19g N，N-二環(huán)已基碳二亞胺、0.12g 4-二甲氨基吡啶溶解于5mL的二甲基亞砜中，冰浴活化2h，將活化后的反應(yīng)液逐滴滴加到白芨多糖溶液中，高溫反應(yīng)2h，室溫反應(yīng)24h。終止反應(yīng)，將反應(yīng)液置于透析袋中(MWC03000)，于IL蒸餾水中透析，每8h換一次水，透析3天。冷凍干燥得改性白芨多糖。將脫氧膽酸接枝白芨多糖反應(yīng)物復(fù)溶用激光粒度儀測(cè)得粒徑:400.37±1.23nm。
[0035]實(shí)例2:
[0036](I)白芨多糖的纖維素酶降解
[0037]精密稱(chēng)取2.0Og白芨多糖，分散溶解在10ml蒸餾水中，用磷酸二氫鉀調(diào)節(jié)pH為4.0，加入0.25% (w/v)的纖維素酶，40 °C保溫振蕩4?6h，煮沸5?1min滅活酶；用3，5- 二硝基水楊酸法測(cè)得降解產(chǎn)物還原糖含量為10.60±0.38%，黏均分子量為4235.21Da0
[0038](2)白芨多糖接枝月桂酸的合成
[0039]精密稱(chēng)取0.08g纖維素酶法降解后的白芨多糖，溶解于40mLN，N 二甲基甲酰胺水(5:1，v/v)混合溶劑中，備用；稱(chēng)取0.16g月桂酸、0.19g N, N- 二環(huán)已基碳二亞胺、0.31g4- 二甲氨基吡啶溶解于5mL的N，N 二甲基甲酰胺水(5:1，v/v)混合溶劑中，冰浴活化2h，將活化后的反應(yīng)液逐滴滴加到白芨多糖溶液中，高溫反應(yīng)2h，室溫反應(yīng)24h。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液置于透析袋中(MWC07500)，于2.5L蒸餾水中透析，每8h換一次水，透析3天。冷凍干燥得改性白芨多糖衍生物。將月桂酸接枝白芨多糖反應(yīng)物復(fù)溶用激光粒度儀測(cè)得粒徑:400.37 ± 1.23nm。
[0040]實(shí)例3:
[0041](I)白芨多糖的纖維素酶降解
[0042]精密稱(chēng)取2.0Og白芨多糖，分散溶解在10ml蒸餾水中，用磷酸二氫鉀調(diào)節(jié)pH為4.5，加入0.35% (w/v)的纖維素酶，45°C保溫振蕩4?6h，煮沸5?1min滅活酶；用3，5- 二硝基水楊酸法測(cè)得降解產(chǎn)物還原糖含量為12.80±0.41 %，黏均分子量為3164.39Da。
[0043](2)白芨多糖接枝膽酸的合成
[0044]精密稱(chēng)取0.1Og酶法降解后的白芨多糖，溶解于25mL甲醇水(4:1，v/v)混合溶劑中，備用；稱(chēng)取0.32g膽酸、0.19g N, N-二環(huán)已基碳二亞胺、0.14g 4-二甲氨基卩比啶溶解于5mL的甲醇水(4:1，v/v)混合溶劑中，冰浴活化2h，將活化后的反應(yīng)液逐滴滴加到白芨多糖溶液中，高溫反應(yīng)3h，室溫反應(yīng)28h。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液置于透析袋中(MWC05000)，于1.5L蒸餾水中透析，每8h換一次水，透析3天。冷凍干燥得改性白芨多糖。將膽酸接枝白芨多糖反應(yīng)物復(fù)溶用激光粒度儀測(cè)得粒徑:340.30 ±6.09nm。
[0045]實(shí)例4:
[0046](I)白芨多糖的果膠酶降解
[0047]精密稱(chēng)取2.0Og白芨多糖，分散溶解在10ml蒸餾水中，滴加3?5滴磷酸調(diào)節(jié)pH3.0，加入0.25% (w/v)的果膠酶，50°C保溫振蕩4?6h，煮沸5?1min滅活酶；用3，5-二硝基水楊酸法測(cè)得降解產(chǎn)物還原糖含量為4.70±0.11%，黏均分子量為5895.02Da。
[0048](2)白芨多糖接枝膽烷酸的合成
[0049]精密稱(chēng)取0.18g酶法降解后的白芨多糖，溶解于25mL N，N 二甲基甲酰胺中，備用；稱(chēng)取1.71g膽烷酸、0.15g 1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺、0.17g N-羥基丁二酰亞胺溶解于5mL的N，N 二甲基甲酰胺中，冰浴活化2h，將活化后的反應(yīng)液逐滴滴加到白芨多糖溶液中，高溫反應(yīng)3h，室溫反應(yīng)28h。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液置于透析袋中(MWC04500)，于1.5L蒸餾水中透析，每8h換一次水，透析3天。冷凍干燥得改性白芨多糖。將膽烷酸接枝白芨多糖反應(yīng)物復(fù)溶用激光粒度儀測(cè)得粒徑:600.57 ±3.09nm。
[0050]實(shí)例5:
[0051](I)白芨多糖衍生物的葡聚糖酶降解
[0052]精密稱(chēng)取2.0Og白芨多糖衍生物，分散溶解在10ml蒸餾水中，用磷酸二氫鉀調(diào)節(jié)pH 4.8，加入0.45% (w/v)的β -葡聚糖酶，50°C保溫振蕩4?6h，煮沸5?1min滅活酶；用3，5- 二硝基水楊酸法測(cè)得降解產(chǎn)物還原糖含量為7.98±0.2%，黏均分子量為6573.46Da。
[0053](2)白芨多糖衍生物接枝硬脂酸的合成
[0054]精密稱(chēng)取0.25g酶法降解后的白芨多糖衍生物，溶解于35mL 二甲基亞砜中，備用；稱(chēng)取0.34g硬脂酸、0.21g N, N- 二環(huán)已基碳二亞胺、0.17g 4- 二甲氨基卩比啶溶解于5mL的二甲基亞砜中，冰浴活化2h，將活化后的反應(yīng)液逐滴滴加到白芨多糖溶液中，高溫反應(yīng)4h，室溫反應(yīng)30h。停止反應(yīng)，將反應(yīng)液置于透析袋中(MWC03400)，于2L蒸餾水中透析，每8h換一次水，透析3天。冷凍干燥得改性白芨多糖。將硬質(zhì)酸接枝白芨多糖反應(yīng)物復(fù)溶用激光粒度儀測(cè)得粒徑:249.83 ±8.10nm。
[0055]實(shí)例6:
[0056]疏水改性白芨多糖衍生物自組裝納米膠束的制備:
[0057](I)精密稱(chēng)取20.0Omg上述實(shí)例2中接枝月桂酸的改性白芨多糖衍生物于6?8mL蒸餾水中，磁力攪拌持續(xù)3h，取溶解液冰浴超聲5min，溶液先過(guò)0.45 μ m，再過(guò)0.22 μ m濾膜，收集續(xù)濾液得到納米膠束溶液。取樣品滴加于銅網(wǎng)上，樣品干燥后，在透射電鏡下觀(guān)察并拍照(附圖1)。
[0058](2)精密稱(chēng)取22.0Omg上述實(shí)例3中接枝膽酸的改性白芨多糖衍生物于8?1mL蒸餾水中，磁力攪拌持續(xù)3.5h，取溶解液冰浴超聲8min，溶液先過(guò)0.45 μ m，再過(guò)0.22 μ m濾膜，收集續(xù)濾液得到納米膠束溶液。取樣品滴加于銅網(wǎng)上，樣品干燥后，在透射電鏡下觀(guān)察并拍照(附圖2)。
[0059](3)精密稱(chēng)取25.0Omg上述實(shí)例5中接枝硬脂酸的改性白芨多糖衍生物于10?12mL蒸餾水中，磁力攪拌持續(xù)4h，取溶解液冰浴超聲lOmin，溶液先過(guò)0.45 μm,再過(guò)0.22 μπι濾膜，收集續(xù)濾液得到納米膠束溶液。取樣品滴加于銅網(wǎng)上，樣品干燥后，在透射電鏡下觀(guān)察并拍照(附圖3)。
[0060]實(shí)例7:
[0061]疏水改性低分子量白芨多糖衍生物納米膠束作為藥物載體的應(yīng)用:
[0062](I)超聲分散法制備載甘草次酸膠束
[0063]精密稱(chēng)取25.0Omg實(shí)例I中所合成脫氧膽酸接枝白芨多糖聚合物，以2.50mg -πιΓ1濃度分散于蒸餾水，將加藥量為10% (重量)載體量的甘草次酸溶解于0.5ml無(wú)水乙醇中，緩慢滴加至上述聚合物水溶液中，磁力攪拌24h后，冰浴超聲1min (超聲功率800W，工作2s，間歇3s)，溶液于3500rpm離心20min，收集上清液過(guò)0.45 μ m濾膜，收集續(xù)濾液得到載甘草次酸納米膠束溶液。取樣品滴加于銅網(wǎng)上，樣品干燥后，在透射電鏡下觀(guān)察并拍照(附圖4)。
[0064](2)超聲分散法制備載水飛薊素膠束
[0065]精密稱(chēng)取25.0Omg實(shí)例4中所合成膽烷酸接枝白芨多糖聚合物，以2.50mg
度分散于蒸餾水，將加藥量為10% (重量)載體量的水飛薊素溶解于ImL無(wú)水乙醇中，緩慢滴加至上述聚合物水溶液中，磁力攪拌24h后，冰浴超聲15min (超聲功率700W，工作2s，間歇3s)，溶液于3500rpm離心20min，收集上清液過(guò)0.45 μ m濾膜，收集續(xù)濾液得到載水飛薊素納米膠束溶液。取樣品滴加于銅網(wǎng)上，樣品干燥后，在透射電鏡下觀(guān)察并拍照(附圖5)。
[0066](3)超聲分散法制備載香豆素膠束
[0067]精密稱(chēng)取25.0Omg疏水改性白芨多糖聚合物，以2.50mg 濃度分散于蒸餾水，將加藥量為10% (重量)載體量的香豆素溶解于0.5?ImL無(wú)水乙醇中，緩慢滴加至上述聚合物水溶液中，磁力攪拌24h后，冰浴超聲15min (超聲功率700W，工作2s，間歇3s)，溶液于3500rpm離心20min，收集上清液過(guò)0.45 μ m濾膜，收集續(xù)濾液得到載香豆素納米膠束溶液。
[0068]載香豆素納米膠束小動(dòng)物活體成像試驗(yàn)
[0069]將昆明種小鼠分為游離藥物組和載藥膠束組，分別尾靜脈注射(0.10ml/10mg)游離香豆素等滲溶液與實(shí)例7中所制得的香豆素載藥納米膠束，用水合氯醛麻醉，4小時(shí)后處死，解剖取心、肝、脾、肺、腎，用濾紙吸取殘留血液后按次序擺放在小動(dòng)物活體成像儀的暗箱平臺(tái)上，采用軟件控制對(duì)其拍照觀(guān)察(附圖6)。
[0070]載香豆素納米膠束的細(xì)胞攝取試驗(yàn)
[0071]將H印G2細(xì)胞以2X 15ceIls/孔的密度接種到載有蓋玻片的6孔培養(yǎng)板中，孵育24h待細(xì)胞生長(zhǎng)正常后，分別加入經(jīng)無(wú)血清培養(yǎng)液、經(jīng)無(wú)血清培養(yǎng)液稀釋的香豆素乙醇溶液和載香豆素納米膠束200 μ L，孵育lh。孵育結(jié)束后，經(jīng)過(guò)處理，取出蓋玻片，經(jīng)載玻片固定后，在倒置熒光顯微鏡下拍照觀(guān)察(附圖7)。
【權(quán)利要求】
1.一種疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束，其特征在于，將改性白芨多糖衍生物于蒸餾水中，經(jīng)磁力攪拌、冰浴超聲、濾膜濾過(guò)，收集續(xù)濾液得圓球形膠束，平均粒徑范圍為60?800nm。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，其特征在于:精密稱(chēng)取疏水改性白芨多糖衍生物于蒸餾水中，經(jīng)磁力攪拌、冰浴超聲、濾膜濾過(guò)，收集續(xù)濾液，濾液自組裝成納米膠束。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束的制備法，其特征在于:精密稱(chēng)取20.00?25.0Omg所述疏水改性白發(fā)多糖衍生物于5?12mL蒸飽水中，磁力攪拌3?4h，冰浴超聲5?lOmin，分別經(jīng)0.45 μ m、0.22 μ m的濾膜濾過(guò)，收集續(xù)濾液，濾液自組裝成納米膠束，膠束成圓球形，其平均粒徑范圍為60?800nm。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，其特征在于，所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物以降解后的低分子量白芨多糖為原料，經(jīng)透析、冷凍干燥即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，其特征在于，疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備包括如下步驟: a.稱(chēng)取酶解后的低分子量白芨多糖0.04?0.25g分散在20?50mL溶劑中溶解，備用； b.稱(chēng)取一定量疏水材料、催化劑A、催化劑B(0.2?2:1:1?3，mmol/mmol)分散在4?6mL與步驟a相同的溶劑中，冰浴活化1.5?3h，將活化后的反應(yīng)液逐滴加入到步驟a制得的低分子量白芨多糖溶液中，持續(xù)攪拌，先高溫反應(yīng)2?4h，再室溫反應(yīng)24?36h ； c.將步驟b的反應(yīng)液置于透析袋(截留分子量為3000?8000D)中并在蒸餾水中透析，每8h換一次水，透析2?3天。將透析液過(guò)濾，取續(xù)濾液冷凍干燥，收集產(chǎn)物即得疏水改性低分子量白芨多糖衍生物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1?5任意一項(xiàng)所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物納米膠束的制備方法，其特征在于:所述低分子量白芨多糖是白芨粗多糖經(jīng)純化、降解、精制后制得，其黏均分子量為1000D?8000D。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，其特征在于:所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備中，步驟a所述酶解后的低分子量白芨多糖是白芨多糖通過(guò)酶法降解所得，其中酶采用纖維素酶、果膠酶、葡聚糖酶、葡萄糖苷酶中的能夠作用于β -1, 4糖苷鍵的一種或以上多種酶的組合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求5所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，其特征在于:所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備中，步驟a中的溶劑可用二甲基亞砜、N, N- 二甲基甲酰胺、甲酰胺、乙醇與水的混合溶劑、水與N，N- 二甲基甲酰胺的混合溶劑中的一種或多種。
9.根據(jù)權(quán)利要求5所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，其特征在于:所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備中，步驟b中所述疏水材料中疏水基團(tuán)可以是脫氧膽酸、膽酸、膽烷酸、C2?C19脂肪酸中的任意一種，所述疏水基團(tuán)的取代度為5?60%。
10.根據(jù)權(quán)利要求5所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物的納米膠束制備方法，其特征在于:所述疏水改性低分子量白芨多糖衍生物制備中，步驟b中催化劑A可以用N, N-二環(huán)已基碳二亞胺、1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺中的任意一種；催化劑B可選用4- 二甲氨基吡啶、N-羥基丁二酰亞胺中的任意一種。
11.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的疏水改性低分子量白芨多糖衍生物納米膠束作為藥物載體的應(yīng)用。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的疏水改性低分子量白芨多糖衍生物納米膠束作為藥物載體的應(yīng)用，其特征在于，具體是在包載難溶性藥物并將藥物靶向運(yùn)送至肝臟中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61P1/16GK104434791SQ201410572739
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年10月24日 優(yōu)先權(quán)日:2014年10月24日
【發(fā)明者】王文蘋(píng), 賀少龍, 洪彤彤, 劉艷華, 隋宏 申請(qǐng)人:寧夏醫(yī)科大學(xué)