竹茹提取物的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術領域】，特別涉及竹茹提取物的提取方法。該提取方法獲得的竹茹提取物可以用于制備抗焦慮藥物。本發(fā)明提供的竹茹提取物能夠有效治療焦慮癥。
【專利說明】竹茹提取物的提取方法

【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術領域】，具體涉及一種竹茹提取物的提取方法。

【背景技術】
[0002]焦慮癥(Anxiety)是一種以焦慮情緒為主的神經癥，主要表現(xiàn)為發(fā)作性或持續(xù)性焦慮、緊張、驚恐不安等，伴有一系列軀體癥狀和病理變化，發(fā)病機制復雜，主要涉及神經遞質-受體、神經調質-受體、神經內分泌網絡的精細調節(jié)。
[0003]竹苑為禾本科植物青桿竹Bambusa tuldoides Munro、大頭典竹Sinocalamusbeecheyanus (Munro) McClure var.pubescens P.F.LiPhyllostachys nigra(Lodd.) Munro var.henonis (Mitf.) Stapf ex Rendle 的莖桿的干燥中間層。竹苑臨床運用歷史悠久，始載于《金匱要略》，名為“竹皮”，其味甘，性微寒，歸肺、胃經，具有清熱化痰，除煩止嘔的功能，主要含有木栓酮、羽扇豆烯酮及其同系物為主的五環(huán)三萜類化合物等，具有抗自由基、抗氧化、抗疲勞、抗腫瘤、降血壓等生理和藥理活性，主要用于治療煩熱嘔吐、呃逆、痰熱咳喘、惡阻、胎動、驚癇等。但用竹茹或竹茹提取物制備抗焦慮藥物尚未見報道。


【發(fā)明內容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種竹茹提取物的提取方法。該提取方法獲得的竹茹提取物可以用于制備抗焦慮藥物。
[0005]為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術方案:
本發(fā)明提供了一種竹茹提取物的提取方法，包括如下步驟:
步驟1:取竹茹加水提取，過濾后收集濾液，經第一濃縮至相對密度為1.12?1.15，獲得第一浸膏；
步驟2:取所述第一浸膏與氯仿和正丁醇的混合溶液經Sevage法脫蛋白，收集水層，經第二濃縮至相對密度為1.20?1.23，獲得第二浸膏；
步驟3:取所述第二浸膏加入濃度為80?95%的乙醇醇沉20?24h，離心后收集沉渣，加入水攪拌溶解，經第三濃縮至相對密度為1.12?1.18，獲得第三浸膏，過濾后收集濾液，即得；以g/mL計，所述第二浸膏與乙醇的質量體積比為1:1?4，所述沉渣與水的質量體積比為1: 3?7。
[0006]Sevage法:利用蛋白質在三氯乙燒等有機溶劑中變性的特點,將提取液與Sevage試劑[氯仿:正丁醇=5: 1(V/V)]按照體積比為1:1混合，振蕩，離心，變性后的蛋白質介于提取液與Sevage試劑交界處。此法的優(yōu)點是條件溫和，不會引起多糖的變性。
[0007]本發(fā)明中，所述竹苑為禾本科植物青桿竹tuldoi des Munro、大頭典竹 Sinocalamus beecheyanus (Munro) McClure var.pubescens P.F.Li 或淡竹Phyllostachys nigra (Lodd.) Munro var.henonis (Mitf.) Stapf ex Rendle 的莖桿的干燥中間層。
[0008]本發(fā)明步驟I中，以g/mL計,所述竹苑與水的質量體積比為1: 10?20。
[0009]所述第一濃縮、第二濃縮或第三濃縮為在70?80°C，真空度為0.04?0.06MPa的條件下濃縮。
[0010]所述混合溶液中氯仿和正丁醇的體積比為5: I。
[0011]本發(fā)明步驟2中所述第一浸膏與所述混合溶液的體積比為1:1。
[0012]步驟2中所述收集水層后、所述第二濃縮前還包括經300目濾布過濾的步驟。
[0013]本發(fā)明步驟3中所述離心為在3000rpm的條件下離心30min。
[0014]本發(fā)明還提供了上述提取方法獲得的竹茹提取物。
[0015]本發(fā)明還提供了上述提取方法獲得的竹茹提取物在制備抗焦慮藥物中的應用。
[0016]本發(fā)明提供了一種竹茹提取物的提取方法。該提取方法獲得的竹茹提取物可以用于制備抗焦慮藥物。本發(fā)明提供的竹茹提取物能夠有效治療焦慮癥。

【具體實施方式】
[0017]為了使本領域的技術人員更好地理解本發(fā)明的技術方案，下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明。
[0018]本發(fā)明提供的竹茹提取物的提取方法中，所用原料及試劑均可由市場購得。
[0019]實施例1:
取竹茹藥材100g，粉碎后加10倍量水，煎煮60分鐘，提取液過濾，在溫度為80°C，真空度為0.06MPa的條件下濃縮至相對密度1.15 (80°C )，加入同體積的氯仿和正丁醇的混合溶液(氯仿和正丁醇的體積比為5: 1)，除去中間白色絮狀沉淀，取水層在溫度為80°C，真空度為0.06MPa的條件下濃縮至相對密度為1.23 (800C )，獲得浸膏18g，加入4倍量80%乙醇醇沉，靜置24小時，收集沉渣離心，回收乙醇，再加入7倍量水攪拌溶解，在溫度為80°C，真空度為0.06MPa的條件下濃縮至相對密度1.18 (80°C )，過濾，噴霧干燥，即得竹茹提取物 4.5g。
[0020]對獲得的竹茹提取物進行檢測，結果如下:
竹茹多糖的鑒別:鑒別方法為苯酚-硫酸試劑反應(陽性)，本發(fā)明提供的竹茹提取物中含有竹茹多糖。
[0021]竹茹多糖含量:47.1% (用苯酚-硫酸法測定)(參考《中國藥典》2010年版二部)
實施例2:
取竹茹藥材100g，粉碎后加20倍量水，煎煮40分鐘，提取液過濾，在溫度為70°C，真空度為0.04MPa的條件下濃縮至相對密度1.12 (80°C )，加入同體積的氯仿和正丁醇的混合溶液(氯仿和正丁醇的體積比為5: 1)，除去中間白色絮狀沉淀，取水層在溫度為80°C，真空度為0.05MPa的條件下濃縮至相對密度為1.20(80°C )，獲得浸膏19g，加入3倍量95%乙醇醇沉，靜置24小時，收集沉渣離心，回收乙醇，再加入5倍量水攪拌溶解，在溫度為80°C，真空度為0.04MPa的條件下濃縮至相對密度1.12 (80°C )，過濾，噴霧干燥，即得竹茹提取物5.lg。
[0022]對獲得的竹茹提取物進行檢測，結果如下:
竹茹多糖的鑒別:鑒別方法為苯酚-硫酸試劑反應(陽性)，本發(fā)明提供的竹茹提取物中含有竹茹多糖。
[0023]竹茹多糖含量:49.3% (用苯酚-硫酸法測定)(參考《中國藥典》2010年版二部)
實施例3:
取竹茹藥材100g，粉碎后加15倍量水，煎煮30分鐘，提取液過濾，在溫度為75°C，真空度為0.05MPa的條件下濃縮至相對密度1.13 (80°C )，加入同體積的氯仿和正丁醇的混合溶液(氯仿和正丁醇的體積比為5: 1)，除去中間白色絮狀沉淀，收集水層，經300目濾布過濾，濾液在溫度為80°C，真空度為0.04MPa的條件下濃縮至相對密度為1.22 (80°C )，獲得浸膏17g，加入I倍量80%乙醇醇沉，靜置24小時，收集沉渣離心，回收乙醇，再加入3倍量水攪拌溶解，在溫度為80°C，真空度為0.06MPa的條件下濃縮至相對密度1.15 (80°C )，過濾，噴霧干燥，即得竹茹提取物4.Sg。
[0024]對獲得的竹茹提取物進行檢測，結果如下:
竹茹多糖的鑒別:鑒別方法為苯酚-硫酸試劑反應(陽性)，本發(fā)明提供的竹茹提取物中含有竹茹多糖。
[0025]竹茹多糖含量:50.9% (用苯酚-硫酸法測定)(參考《中國藥典》2010年版二部)
臨床試驗:
一、一般資料
60例焦慮癥患者，符合《中國精神障礙分類和診斷標準》第3版焦慮癥的診斷標準，HAMA >14分。無系統(tǒng)疾病、無藥物濫用史及過敏史，無腦部器質性病變。排除妊娠及哺乳期婦女，排除合并有嚴重的器官疾病，排除伴有嚴重的軀體疾病的抑郁癥患者。其中男性27例，女性33例，年齡18?60歲，病程2?11個月，平均病程5.4± 1.5個月。
[0026]二、治療方法
本組病例均采用口服實施例1制備的竹茹提取物，每日三次，每次3?5g，連續(xù)服用8周。允許患者同時使用常規(guī)劑量的唑吡坦、佐匹克隆、咪達唑侖、阿普唑侖、氯硝西泮等改善睡眠，均睡前服用，連續(xù)使用不超過2周。但禁用其他精神藥物、系統(tǒng)心理治療和電痙攣治療等。
[0027]三、療效評價
抗焦慮療效評價采用《中國精神障礙分類和診斷標準》第3版的焦慮量表(HAMA)，同時對血常規(guī)、肝腎功能、心電圖等檢查項目進行監(jiān)測。在治療前與治療后第4周及第8周分別進行療效評價。
[0028]四、臨床效果
本組病例在治療前后，HAMA總分分值差異顯著(P〈 0.05)，治療后HAMA總分分值呈下降趨勢，第4周差異顯著(P〈 0.05)，第8周差異非常顯著(P〈 0.01)。其中第4周有效34例，有效率56.7% ;第8周累計有效55例，累計有效率91.7%。
[0029]提示本發(fā)明中的竹茹提取物對焦慮癥具有顯著的治療效果。
【權利要求】
1.一種竹茹提取物的提取方法，其特征在于，包括如下步驟: 步驟1:取竹茹加水提取，過濾后收集濾液，經第一濃縮至相對密度為1.12?1.15，獲得第一浸膏； 步驟2:取所述第一浸膏與氯仿和正丁醇的混合溶液經Sevage法脫蛋白，收集水層，經第二濃縮至相對密度為1.20?1.23，獲得第二浸膏； 步驟3:取所述第二浸膏加入濃度為80?95%的乙醇醇沉20?24h，離心后收集沉渣，加入水攪拌溶解，經第三濃縮至相對密度為1.12?1.18，獲得第三浸膏，過濾后收集濾液，即得；以g/mL計，所述第二浸膏與乙醇的質量體積比為1:1?4，所述沉渣與水的質量體積比為1: 3?7。
2.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于:步驟I中，以g/mL計，所述竹茹與水的質量體積比為1: 10?20。
3.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于:所述第一濃縮、第二濃縮或第三濃縮為在70?80°C，真空度為0.04?0.06MPa的條件下濃縮。
4.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于:所述混合溶液中氯仿和正丁醇的體積比為5: I。
5.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于:步驟2中所述第一浸膏與所述混合溶液的體積比為1:1。
6.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于，步驟2中所述收集水層后、所述第二濃縮前還包括經300目濾布過濾的步驟。
7.根據權利要求1所述的提取方法，其特征在于:步驟3中所述離心為在3000rpm的條件下離心30min。
8.根據權利要求1至7任一項提供的提取方法獲得的竹茹提取物。
9.根據權利要求1所述的竹茹提取物在制備抗焦慮藥物中的應用。
【文檔編號】A61K36/899GK104352850SQ201410585553
【公開日】2015年2月18日 申請日期:2014年10月28日 優(yōu)先權日:2014年10月28日
【發(fā)明者】銀勝高, 辛寧, 郭敏, 辛華, 周江煜, 龔名師, 王柳萍 申請人:廣西中醫(yī)藥大學