一種治療痔瘡出血的中藥組合物的制備及檢測(cè)方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于藥物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種治療痔瘡出血的中藥組合物的制備及檢測(cè)方法。治療痔瘡出血的中藥組合物由如下重量份數(shù)的原料組成：地榆20-30份、槐角15-25份、仙鶴草25-35份、補(bǔ)骨脂15-25份、三七5-15份。治療痔瘡出血的中藥組合物的檢測(cè)方法，包括薄層色譜法鑒別地榆、仙鶴草成分，高效液相色譜法測(cè)定補(bǔ)骨脂的含量。制備方法簡單易行，方便實(shí)施；檢測(cè)方法簡便、快捷、靈敏度好、穩(wěn)定性高，提高了對(duì)藥品質(zhì)量的有效控制，保證了質(zhì)量。
【專利說明】一種治療痔瘡出血的中藥組合物的制備及檢測(cè)方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種治療痔瘡出血的中藥組合物的制備及檢測(cè)方法，屬藥物技術(shù)領(lǐng) 域。

【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)實(shí)生活中，痔是一種常見、多發(fā)的肛腸疾病，俗話說十人九痔，此病不分年齡，男 女皆有，且容易反復(fù)發(fā)作；據(jù)流行病學(xué)的調(diào)查，痔瘡的生發(fā)率高達(dá)87. 25%。工作時(shí)間過長、 強(qiáng)度太高、壓力大而飲食不節(jié)，經(jīng)常久坐，缺少運(yùn)動(dòng)等不良的生活習(xí)慣，更是造成這一現(xiàn)象 的主要原因，從而甚至引發(fā)痔瘡出血，嚴(yán)重危害人民身體健康。
[0003]目前治療痔瘡及特別是內(nèi)痔出血的主要手段是PPH微創(chuàng)手術(shù)和油膏及栓藥等外 用藥，PPH手術(shù)容易產(chǎn)生術(shù)后并發(fā)癥及術(shù)后出血等各癥狀，并且費(fèi)用較高。而油膏及栓藥使 用起來并不方便，又易復(fù)發(fā)，長期用藥容易產(chǎn)生耐藥性，藥效不明顯。中藥作用緩和，對(duì)年老 體弱、陰虛火旺造成的內(nèi)痔出血、肛裂等癥狀開發(fā)口服藥品很有必要。相對(duì)西藥有效果好、 痛苦少、毒副作用低、藥源廣泛、費(fèi)用低廉的好處。
[0004] 現(xiàn)有技術(shù)中，很多中藥組合物沒有質(zhì)量檢測(cè)方法的要求，不能有效控制該中藥組 合物的質(zhì)量，截止目前，未見有對(duì)該產(chǎn)品組合物進(jìn)行全面質(zhì)量檢測(cè)的研究文獻(xiàn)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種治療痔瘡出血的中藥組合物的制備及檢測(cè)方法，特別是 治療內(nèi)痔出血的組合物；制備方法簡單易行，方便實(shí)施；檢測(cè)方法加強(qiáng)了對(duì)藥品質(zhì)量的有 效控制，提供質(zhì)量保證。
[0006] 本發(fā)明所述的治療痔瘡出血的中藥組合物的制備方法由如下重量份數(shù)的原料制 成：地榆20-30份、槐角15-25份、仙鶴草25-35份、補(bǔ)骨脂15-25份、三七5-15份。
[0007] -種治療痔瘡出血的中藥組合物，其特征在于如下重量份數(shù)的組合物最佳：地榆 22-28份、槐角17-23份、仙鶴草27-33份、補(bǔ)骨脂17-23份、三七7-13份。
[0008] 所述的膠囊、片劑或顆粒是將三七粉碎成細(xì)粉，過篩；地榆、槐角、補(bǔ)骨脂、仙鶴草 四味加水8倍量，煎煮2次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 04? L 06 (60°C)，離心，上清液繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為L 20?L 25 (60°C)的清膏，加入三七 細(xì)粉，混勻，干燥，粉碎，加輔料適量，過篩，混勻，制成顆粒、片劑或裝膠囊。
[0009] 本發(fā)明所述的治療痔瘡出血的中藥組合物的檢測(cè)方法，包括內(nèi)容物的鑒別和含有 成分的含量測(cè)定，內(nèi)容物的鑒別是薄層色譜法鑒別地榆、仙鶴草成分，含有成分的含量測(cè)定 是高效液相色譜法測(cè)定補(bǔ)骨脂的含量。
[0010] 所述的地榆的鑒別方法具體如下： 取本品內(nèi)容物2g，加10%鹽酸的50%甲醇溶液(鹽酸：50%甲醇=1 :9)25ml，加熱回流2 小時(shí)，放冷，濾過，濾液用鹽酸飽和的乙醚振搖提取2次，每次25ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)?加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液。另取地榆對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。
[0011] 參照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液 5~10iU，對(duì)照品溶液5 yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上.以甲苯(用水飽和）-乙酸乙 酯-甲酸（6 :3 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中， 在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0012] 所述的仙鶴草的鑒別方法具體如下： 取本品內(nèi)容物2g，用丙酮：醋酸乙酯（4 :1) 25ml為提取溶劑，超聲處理30分鐘，濾過， 低溫?fù)]干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解；另取仙鶴草對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液。
[0013] 參照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)實(shí)驗(yàn)，分別吸取供試品與對(duì) 照品溶液各10 y 1分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-氨水（8 :2 : 3 :0. 5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)清晰，日光下檢視， 供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置顯相同顏色的斑點(diǎn)。
[0014] 所述的補(bǔ)骨脂的含量測(cè)定方法具體步驟如下： 參照高效液相色譜法測(cè)定（中國藥典2010年版一部附錄VI D): (1)色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（50 :50 ) 為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為246nm。理論板數(shù)按補(bǔ)骨脂素峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000。
[0015] (2)對(duì)照品溶液的制備精密稱取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量，精密 稱定，加甲醇制成每Iml分別各含50 y g的混合溶液，即得。
[0016] (3)供試品溶液的制備取裝量差異下的內(nèi)容物適量，研細(xì)，精密稱取0.8g，置具 塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率100W，頻率50kHz) 30分 鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0017] (4)測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得。
[0018] 本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下有益效果： 本發(fā)明組合物具有益氣養(yǎng)陰，涼血止血，消腫止痛的作用。臨床運(yùn)用于內(nèi)痔出血癥狀的 肛腸疾病中，具有療效顯著、價(jià)格低廉、服用方便、安全可靠等特點(diǎn)。
[0019] 通過96例臨床觀察，治愈32例，好轉(zhuǎn)29例，有效24例，無效11例。治愈率33. 3%， 好轉(zhuǎn)率30. 2%，有效率25%，無效率11. 5%，總有效率88. 5% ;證明治療內(nèi)痔出血療效好，安全 性高。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0020] 圖1是地榆的薄層鑒別圖譜，圖中，1、2、3為樣品，4為沒食子酸對(duì)照品，5為地榆對(duì) 照藥材，6為陰性對(duì)照樣品； 圖2是仙鶴草的薄層鑒別圖譜，圖中1、2、3為樣品，4為仙鶴草對(duì)照藥材，5為陰性對(duì)照 樣品； 圖3是陰性對(duì)照試驗(yàn)的補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品的高效液相色譜圖。
[0021] 圖4是陰性對(duì)照試驗(yàn)的補(bǔ)骨脂陰性樣品的高效液相色譜圖。
[0022] 圖5是陰性對(duì)照試驗(yàn)的樣品的高效液相色譜圖。
[0023] 圖6是陰性對(duì)照試驗(yàn)的補(bǔ)骨脂藥材的高效液相色譜圖。
[0024] 圖7是補(bǔ)骨脂素標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0025] 圖8是異補(bǔ)骨脂素標(biāo)準(zhǔn)曲線。

【具體實(shí)施方式】
[0026] 以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述。
[0027] 實(shí)施例1 (1)膠囊的制備 由如下重量份數(shù)的原料制成：地榆27g、槐角18g、仙鶴草32g、補(bǔ)骨脂18g、三七12g。
[0028]以上五味，三七粉碎成細(xì)粉，過篩；地榆、槐角、補(bǔ)骨脂、仙鶴草四味加水8倍量， 煎煮2次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 04?I. 06(60°C)，離心， 上清液繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1. 20?1. 25 (60°C)的清膏，加入三七細(xì)粉，混勻，干燥，粉 碎，裝膠囊即可。
[0029] (2)內(nèi)容物的鑒別和含有成分的含量測(cè)定 地榆的薄層鑒別法具體步驟如下： 取膠囊內(nèi)容物2g，加10%鹽酸的50%甲醇溶液(鹽酸：50%甲醇=1 :9)25ml，加熱回流2 小時(shí)，放冷，濾過，濾液用鹽酸飽和的乙醚振搖提取2次，每次25ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)?加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液。另取地榆對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液。
[0030] 照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液 5~10 iU，對(duì)照品溶液5 iU，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上.以甲苯(用水飽和）-乙酸乙 酯-甲酸（6 :3 :1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液。供試品色譜中， 在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。地榆的薄層鑒別圖譜見圖1，。
[0031] 仙鶴草的薄層鑒別方法具體步驟如下： 取本品內(nèi)容物2g，用丙酮：醋酸乙酯（4 :1) 25ml為提取溶劑，超聲處理30分鐘，濾過， 低溫?fù)]干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解；另取仙鶴草對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液， 參照薄層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)實(shí)驗(yàn)，分別吸取供試品與對(duì)照品 溶液各IOu 1分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-氨水（8 :2 :3 :0. 5) 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)清晰，日光下檢視，供試品 色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置顯相同顏色的斑點(diǎn)。仙鶴草的薄層鑒別圖譜見圖2。
[0032] 補(bǔ)骨脂含量測(cè)定的高效液相色譜法具體步驟如下： 參照高效液相色譜法測(cè)定（中國藥典2010年版一部附錄VI D): 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（50 :50)為流 動(dòng)相；檢測(cè)波長為246nm。理論板數(shù)按補(bǔ)骨脂素峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000。
[0033] 對(duì)照品溶液的制備精密稱取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量，精密稱 定，加甲醇制成每Iml分別各含50 y g的混合溶液，即得。
[0034] 供試品溶液的制備取裝量差異下的內(nèi)容物適量，研細(xì)，精密稱取0.8g，置具塞錐 形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率100W，頻率50kHz) 30分鐘，放 冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0035] 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè)定， 即得。
[0036] 膠囊中每粒含補(bǔ)骨脂以補(bǔ)骨脂素（C11 H6 O3 )和異補(bǔ)骨脂素（C11 H6 O3 )的總量計(jì)， 含量在0? 5-1. Omg范圍效果最佳。
[0037] 含量檢測(cè)方法的研究： 1、儀器與試藥 儀器：美國戴安（DIONEX)高效液相色譜儀（Kromasil C18-5ii色譜柱、P680泵、UVD170U 紫外檢測(cè)器、CHR0MELE0N數(shù)據(jù)處理軟件)，HS3120超聲清洗器，Sartorius BS124S (d = 0? Img)電子分析天平，Sartorius BP211D (d = 0? Olmg)電子分析天平。
[0038] 試劑：甲醇、乙腈為色譜純，水為重蒸水，其余試劑均為分析純。
[0039] 對(duì)照品：補(bǔ)骨脂素對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所，110739-200309, 20mg);異補(bǔ) 骨脂素對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所，110738-200401，20mg) 樣品：由榮昌制藥(溜博）有限公司制備。
[0040] 2、色譜條件的選擇： (1) 檢測(cè)波長的確定：根據(jù)《中國藥典》2010版一部補(bǔ)骨脂藥材含量測(cè)定項(xiàng)下的方法， 確定檢測(cè)波長為：246nm. (2) 流動(dòng)相的確定：進(jìn)行系統(tǒng)的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，由結(jié)果得知：用甲醇：水（50 :50)系統(tǒng)時(shí)峰形 好，兩峰分離效果好，故選擇流動(dòng)相為：甲醇：水（50 :50)。
[0041] 3、提取條件的選擇： (1)提取溶劑的選擇經(jīng)過實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：以甲醇和85%乙醇為提取溶劑時(shí)樣品含 量最高，而85%乙醇提取的供試品溶液中雜質(zhì)峰較多，故選擇提取劑為甲醇。
[0042] (2)提取方法的選擇 經(jīng)過實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：超聲處理法與回流提取法樣品含量 相當(dāng)，但超聲處理法易操作，故選擇提取方法為超聲法。
[0043] (3)提取時(shí)間的選擇 經(jīng)過實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：樣品超聲提取30min和45min結(jié)果 相差不大，補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素已提取完全，故確定提取時(shí)間為30min。
[0044] 4、陰性對(duì)照試驗(yàn)： 取不含補(bǔ)骨脂的陰性試制樣品細(xì)粉〇. 8g，膠囊內(nèi)容物細(xì)粉0. 8g，補(bǔ)骨脂藥材細(xì)粉 〇. lg，精密稱定，同"供試品溶液制備"項(xiàng)下，同法處理后，制得陰性樣品溶液、膠囊供試品溶 液、補(bǔ)骨脂藥材溶液，分別取對(duì)照品溶液及上述供試液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果 見圖3、圖4、圖5、圖6。
[0045] 結(jié)果表明：在陰性對(duì)照?qǐng)D譜中補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素峰無干擾。
[0046] 5、精密度試驗(yàn)：吸取對(duì)照品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，每次各20 yl，分別計(jì)算補(bǔ)骨脂素、 異補(bǔ)骨脂素峰面積的RSD，結(jié)果見表1。
[0047] 表1精密度試驗(yàn)結(jié)果

【權(quán)利要求】
1. 一種治療痔瘡出血的中藥組合物的制備方法，其特征在于由如下重量份數(shù)的原料制 成中藥組合物： 地榆20-30份、槐角15-25份、仙鶴草25-35份、補(bǔ)骨脂15-25份、三七5-15份。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療痔瘡出血的中藥組合物的制備方法，其特征在于由如下 重量份數(shù)的原料組成： 地榆22-28份、槐角17-23份、仙鶴草27-33份、補(bǔ)骨脂17-23份、三七7-13份。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療痔瘡出血的中藥組合物的制備方法，其特征在于：所述 的六味藥材，將三七粉碎成細(xì)粉，過篩；地榆、槐角、補(bǔ)骨脂、仙鶴草四味加水8倍量，煎煮2 次，每次1小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度為1. 04?1. 06 (60°C )，離心，上清 液繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度為1. 20?1. 25 (60°C)的清膏，加入三七細(xì)粉，混勻，干燥，粉碎，過 篩，常規(guī)后處理制得。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療痔瘡出血的中藥組合物的制備方法，其特征在于：所述 的組合物的劑型是膠囊劑、片劑或顆粒劑。
5. 如權(quán)利要求4所述的膠囊劑、片劑或顆粒劑的檢測(cè)方法，包括內(nèi)容物的鑒別和含有 成分的含量測(cè)定，其特征在于：內(nèi)容物的鑒別是薄層色譜法鑒別地榆、仙鶴草成分，含有成 分的含量測(cè)定是高效液相色譜法測(cè)定補(bǔ)骨脂的含量。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種治療痔瘡出血的中藥組合物的檢測(cè)方法，其特征在于： (1) 地榆的鑒別方法具體如下： 取本品內(nèi)容物2g，加10%鹽酸的50%甲醇溶液(鹽酸：50%甲醇=1 :9)25ml，加熱回流2 小時(shí)，放冷，濾過，濾液用鹽酸飽和的乙醚振搖提取2次，每次25ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)?加甲醇Iml使溶解，作為供試品溶液；取地榆對(duì)照藥材lg，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層 色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，吸取供試品溶液5~10 yl，對(duì)照品溶液 5 Ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上.以甲苯(用水飽和）-乙酸乙酯-甲酸（6 :3 :1)為展 開劑，展開，取出，晾干，噴以1%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； (2) 仙鶴草的鑒別方法具體如下： 取本品內(nèi)容物2g，用丙酮：醋酸乙酯（4 :1) 25ml為提取溶劑，超聲處理30分鐘，濾過， 低溫?fù)]干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解；另取仙鶴草對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液，照薄 層色譜法（中國藥典2010年版一部附錄VIB)實(shí)驗(yàn)，分別吸取供試品與對(duì)照品溶液各10 iU 分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-氨水（8 :2 :3 :0. 5)為展開劑，展 開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)清晰，日光下檢視，供試品色譜中，在與 對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置顯相同顏色的斑點(diǎn)。
7. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種治療痔瘡出血的中藥組合物的檢測(cè)方法，其特征在于所 述的補(bǔ)骨脂的含量測(cè)定方法具體步驟如下： 參照高效液相色譜法測(cè)定（中國藥典2010年版一部附錄VI D): (1) 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-水（50 : 50)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為246nm ;理論板數(shù)按補(bǔ)骨脂素峰計(jì)算，應(yīng)不低于3000; (2) 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取補(bǔ)骨脂素對(duì)照品、異補(bǔ)骨脂素對(duì)照品適量，精密稱 定，加甲醇制成每Iml分別各含50 y g的混合溶液，即得； (3) 供試品溶液的制備取裝量差異下的內(nèi)容物適量，研細(xì)，精密稱取0. 8g，置具塞錐 形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率100W，頻率50kHz) 30分鐘，放 冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得； (4) 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即 得。
【文檔編號(hào)】A61P7/04GK104306490SQ201410636440
【公開日】2015年1月28日 申請(qǐng)日期:2014年11月13日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月13日
【發(fā)明者】時(shí)延利, 翟勇, 郭桂秋, 王荔強(qiáng) 申請(qǐng)人:榮昌制藥(淄博)有限公司