一種抗癌美洲大蠊的凍干方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種抗癌美洲大蠊的凍干方法，方法是捕捉后用乙醇浸泡殺死或沸水燙死，凍干，制備的美洲大蠊抗癌作用強(qiáng)，臨床效果好。
【專利說(shuō)明】發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及藥品制法，特別涉及一種抗癌美洲大蠊的凍干方法，屬醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】。

【背景技術(shù)】
[0002] 美洲大鐮（Periplanetaamerican)屬昆蟲(chóng)綱，蜚鐮科，俗稱幢螂。美洲大鐮作為 藥用最初見(jiàn)于《神農(nóng)本草經(jīng)》，用于治血痰癥、寒熱、破積聚、喉咽痹、內(nèi)寒無(wú)子。目前以美洲 大鐮為藥用原料，有康復(fù)新、心脈龍、肝龍等中成藥在市場(chǎng)銷售。
[0003] 中藥干燥在我國(guó)有很長(zhǎng)的歷史，經(jīng)干燥的中草藥可保持一定的藥用成分以及不易 腐敗變質(zhì)，干燥作為保證中草藥品質(zhì)的重要措施，是中草藥加工中一個(gè)必不可少的工藝過(guò) 程，干燥與中藥生產(chǎn)的關(guān)系密切，干燥的方法將直接影響產(chǎn)品的療效。現(xiàn)有文獻(xiàn)美洲大鐮的 干燥方法，捕捉后用乙醇浸泡殺死或沸水燙死，曬干或60°C烘干。
[0004] 真空冷凍干燥又稱凍干，可最大限度地保存藥用有效成分的活性，較好地保持藥 材的外觀品質(zhì)、顏色、氣味，脫水徹底，保存性好。真空冷凍干燥的目的是最大限度地保存鮮 藥的有效成分，使其與鮮藥活性相當(dāng)。本發(fā)明人曾對(duì)不同方法凍干美洲大鐮對(duì)乙醇致大鼠 胃黏膜損傷的保護(hù)作用進(jìn)行過(guò)研宄，結(jié)果乙醇?xì)⑺纼龈擅乐薮篌棺饔妹黠@強(qiáng)于沸水燙死凍 干美洲大蠊。
[0005] 本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員公知，沸水和乙醇都可使蛋白質(zhì)變性，用沸水和乙醇?xì)⑺烂?洲大蠊，是否影響其藥理活性，本發(fā)明人曾對(duì)不同方法凍干美洲大鐮對(duì)乙醇致大鼠胃黏膜 損傷的保護(hù)作用進(jìn)行過(guò)研宄，結(jié)果乙醇?xì)⑺纼龈擅乐薮篌棺饔妹黠@強(qiáng)于沸水燙死凍干美洲 大蠊(另案申請(qǐng)專利)。用沸水和乙醇?xì)⑺烂乐薮篌梗挥绊懫淇拱┗钚?，且凍干后活性更?未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種抗癌美洲大蠊的凍干方法，該方法凍干的美洲大蠊，抗 癌作用強(qiáng)，臨床效果好。
[0007] 本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的： 一種抗癌美洲大蠊的凍干方法，其特征在于：捕捉后用乙醇浸泡殺死或沸水燙死，凍 干。
[0008] 本發(fā)明的一種抗癌美洲大蠊的凍干方法，其特征在于：捕捉后用乙醇浸泡殺死或 沸水燙死，置凍干機(jī)內(nèi)，冷凍至-l〇°C以下，抽真空至干燥室壓力30Pa以下，加熱升華；升 華的溫度應(yīng)控制在40°C以下，解析階段的溫度控制在45°C以下，至干。
[0009] 本發(fā)明制備的美洲大蠊，抗癌作用強(qiáng)，臨床效果好。
[0010] 下面通過(guò)藥效學(xué)研宄進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的有益之處，試驗(yàn)例旨在進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā) 明的有益之處，而非對(duì)本發(fā)明的限制。
[0011] 一、將捕捉的同一批美洲大蠊，按以下方法進(jìn)行加工。
[0012] 1)乙醇?xì)⑺篮娓桑河靡掖冀輾⑺溃?0°C烘干以下烘干； 2) 乙醇?xì)⑺纼龈桑河靡掖冀輾⑺?，置凍干機(jī)內(nèi)，冷凍至-20°C以下，抽真空至干燥室 壓力45Pa以下，加熱升華，升華的溫度應(yīng)控制在40°C以下，解析階段的溫度控制在45°C以 下，至干，取出，密封包裝； 3) 沸水燙死凍干：沸水燙死，置凍干機(jī)內(nèi)，冷凍至_20°C以下，抽真空至干燥室壓力 45Pa以下，加熱升華，升華的溫度應(yīng)控制在40°C以下，解析階段的溫度控制在45°C以下，至 干，取出，密封包裝； 4) 沸水燙死：沸水燙死，不干燥。
[0013] 二、不同方法干燥的美洲大蠊抗人肺源腺癌細(xì)胞SPCA-I、人肝癌細(xì)胞系H印G2和 人慢性髓系白血病細(xì)胞K562試驗(yàn)。
[0014] 1、制備美洲大蠊提取物分別取不同上述方法制備的美洲大蠊粉碎，各加水煎煮 兩次，第一次加水8倍量(沸水燙死美洲大蠊以干品計(jì)，下同)，煎煮2小時(shí)，第二次加水8倍 量，煎煮1小時(shí)，合并藥液，藥液濾過(guò)，取濾液，濃縮至相對(duì)密度為1. 10 (60°C)時(shí)，加入乙醇 使含醇量達(dá)到75%，沉淀，靜置36小時(shí)，吸取上清液，回收乙醇，濃縮，干燥，粉碎，得不同方 法干燥的美洲大蠊提取物。
[0015] 2、腫瘤細(xì)胞株人肺源腺癌細(xì)胞SPCA-1、人肝癌細(xì)胞系HepG2和人慢性髓系白血 病細(xì)胞K562,用RPMI-1649培養(yǎng)液，37°C，5%C02,相對(duì)濕度100%培養(yǎng)，貼壁細(xì)胞0. 25%胰 蛋白酶消化傳代。
[0016] 3、方法MTT比色法測(cè)定提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞， 用新鮮的RPMI-1640培養(yǎng)液配制成細(xì)胞懸液，懸浮細(xì)胞IX105個(gè)/ml貼壁細(xì)胞0. 8X105個(gè) /ml。懸浮細(xì)胞分別加入不同濃度實(shí)驗(yàn)藥物后接種于96孔培養(yǎng)板中；貼壁細(xì)胞先接種于96 孔培養(yǎng)板中，每孔90y124h后分別加入不同濃度實(shí)驗(yàn)藥物。終體積為每孔100y1且每組 設(shè)3個(gè)平行孔，分組：受試藥組（培養(yǎng)液+細(xì)胞懸液+不同濃度受試藥）、陰性對(duì)照組（培 養(yǎng)液+細(xì)胞懸液）、藥物顏色對(duì)照組（培養(yǎng)液+不同濃度受試藥）、空白對(duì)照組（培養(yǎng)液+ 生理鹽水）。受試藥濃度依次為10yg/ml、30yg/ml、50yg/ml。置37°C，5%C02培養(yǎng)箱中 培養(yǎng)72h后，向每孔加入MTT溶液10y1震蕩混勻后，繼續(xù)培養(yǎng)4h，加入SDS90y1終止培 養(yǎng)，37°C過(guò)夜，然后室溫下在微量振蕩器上震蕩lOmin，酶標(biāo)儀測(cè)定570nm波長(zhǎng)處的吸光度 (OD值），實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。
[0017] 按以下公式計(jì)算生長(zhǎng)抑制率： 生長(zhǎng)抑制率（%) = (N組OD均值-B組OD均值）一（T組OD均值-TC組OD均值）/N組OD均值-B組OD均值X100%。
[0018] 4、抑制率結(jié)果見(jiàn)表1、表2、表3。

【權(quán)利要求】
1. 一種抗癌美洲大蠊的凍干方法，其特征在于：捕捉后用乙醇浸泡殺死或沸水燙死， 凍干。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的一種抗癌美洲大蠊的凍干方法，其特征在于：捕捉后用乙醇浸泡 殺死或沸水燙死，置凍干機(jī)內(nèi)，冷凍至-l〇°C以下，抽真空至干燥室壓力30Pa以下，加熱升 華；升華的溫度應(yīng)控制在40°C以下，解析階段的溫度控制在45°C以下，至干。
【文檔編號(hào)】A61K35/64GK104473884SQ201410694803
【公開(kāi)日】2015年4月1日 申請(qǐng)日期:2014年11月27日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月27日
【發(fā)明者】周冉, 李詩(shī)標(biāo), 石紅艷, 劉金磊, 劉圣梅 申請(qǐng)人:濟(jì)南康眾醫(yī)藥科技開(kāi)發(fā)有限公司