絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑在清除細(xì)胞和生物體內(nèi)病原體中的應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑在清除細(xì)胞和生物體內(nèi)病原體中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)建立LPS內(nèi)毒素急性肺損傷的模型，予以絡(luò)氨酸磷酸酶PTPN11激動(dòng)劑對(duì)大鼠的病毒和細(xì)菌的清除作用測(cè)試，得到了絡(luò)氨酸磷酸酶PTPN11的激活，通過(guò)Janus激酶2(簡(jiǎn)稱(chēng)JAK2)的激素樣作用介導(dǎo)，可以明顯增強(qiáng)生物體組織細(xì)胞對(duì)于感染性病毒或細(xì)菌類(lèi)病原體進(jìn)行的細(xì)胞膜內(nèi)穴樣內(nèi)吞(caveolar mediated endocysis)，并通過(guò)相應(yīng)機(jī)制作用下，由細(xì)胞胞內(nèi)的泛素化和蛋白酶體機(jī)制，對(duì)于病原體組裝蛋白進(jìn)行水解清除，從而機(jī)體可以在感染早期及時(shí)清除病原體，避免過(guò)分激活免疫系統(tǒng)對(duì)于機(jī)體造成的附帶損傷。
【專(zhuān)利說(shuō)明】絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑在清除細(xì)胞和生物體內(nèi)病原體中的應(yīng) 用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，特別涉及絡(luò)氨酸磷酸酶PTPNll激動(dòng)劑在清除細(xì)胞和 生物體的病原體中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 病毒和細(xì)菌感染是嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的主要急性疾病之一，隨著老齡化社會(huì)的到 來(lái)，目前全球病毒和細(xì)菌感染患者的患病率在不斷增加，其中病毒和細(xì)菌感染性導(dǎo)致的急 性呼吸系統(tǒng)損傷患者占感染性疾病的80% -95%左右。病毒和細(xì)菌感染性急性呼吸系統(tǒng)損 傷患者，如果炎癥狀況情況控制不理想，病原體的清除不及時(shí)，造成細(xì)胞和組織的炎癥反應(yīng) 過(guò)分放大，嚴(yán)重的時(shí)將會(huì)產(chǎn)生感染性休克，機(jī)體代謝紊亂，凝血機(jī)制的異常激活等狀況，甚 至出現(xiàn)多臟器衰竭導(dǎo)致患者的死亡。所以目前病毒和細(xì)菌感染性系統(tǒng)損傷及其并發(fā)癥成為 老年社會(huì)的醫(yī)療問(wèn)題重要方面，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，成為人類(lèi)社會(huì)衛(wèi)生領(lǐng)域的一個(gè)重大挑 戰(zhàn)。
[0003] 病毒和細(xì)菌感染性損傷的目前主要以抗菌抗病毒治療以及維持身體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定 為主，而目前對(duì)于機(jī)體自身除免疫介導(dǎo)之外的病原體入侵及清除體系尚未有明確的研宄， 而自單細(xì)胞生物至今的復(fù)雜生物體為止，細(xì)胞對(duì)于外來(lái)病原體及異物的清除機(jī)制成為生物 體自身防御體系的一部分并在生物體上得以長(zhǎng)期保留。因此對(duì)細(xì)胞自身清除病原體功能的 調(diào)節(jié)機(jī)制研宄及其激動(dòng)因子的尋找不僅對(duì)深入了解細(xì)胞和生物體組織清除病原體的正常 防御機(jī)制有重要意義，而且對(duì)于病原體感染導(dǎo)致的急性損傷的預(yù)防和治療也具有現(xiàn)實(shí)應(yīng)用 價(jià)值。
[0004] PTPNl 1屬于絡(luò)氨酸磷酸酶家族成員，絡(luò)氨酸磷酸酶有112種該家族成員，PTP家族 可分為三大類(lèi)：酪氨酸特異性、雙特異性和低分子量磷酸酶。酪氨酸特異性和低分子量磷酸 酶主要作用于含磷酸化酪氨酸（PTyr)的蛋白質(zhì)，除此之外，雙特異性磷酸酶也作用于含磷 酸化絲氨酸（PSer)或磷酸化蘇氨酸（pThr)的蛋白質(zhì)。某些雙特異性磷酸酶還可水解磷酸 化蛋白以外的底物。酪氨酸特異性磷酸酶可進(jìn)一步分為兩大類(lèi)：以CD45、PTP為代表的受體 樣PTP和以PTPB1，SHP-2為代表的胞內(nèi)PTP。前者含有一個(gè)胞外配體結(jié)合區(qū)、一個(gè)跨膜區(qū) 和一個(gè)或兩個(gè)PTP胞漿區(qū)。后者的結(jié)構(gòu)包括一個(gè)單獨(dú)的催化區(qū)和包括SH2在內(nèi)的多種氨基 端或羧基端延伸區(qū)，該區(qū)可能有靶向或調(diào)控功能。人類(lèi)的PTPNll基因定位于第12號(hào)染色 體（12q24)，基因大小為91kb，PTPNll基因組序列編碼605個(gè)氨基酸，有5種亞型，絡(luò)氨酸 特異性磷酸酶（PTPlB)、雙特異性磷酸酶（DSPs)、cdc25磷酸酶（Cdc25A)，肌管素相關(guān)磷酸 酶（MTMR13)、低分子量蛋白磷酸酶（PTPase A)。PTPNll基因在各個(gè)組織中廣泛表達(dá)，在細(xì) 胞核、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、細(xì)胞骨架及細(xì)胞膜上均有表達(dá)，PTPNll編碼的絡(luò)氨酸特異性磷酸酶（PTPlB) 參與了細(xì)胞的細(xì)胞膜內(nèi)穴樣內(nèi)吞機(jī)制，在清除病原體和免疫介導(dǎo)方面發(fā)揮有重要作用。肺、 心臟、腦及骨骼肌中表達(dá)豐度較高；在細(xì)胞中，PTPNll編碼的PTPNlB主要位于細(xì)胞膜和胞 漿以及細(xì)胞核中。該成員已有文獻(xiàn)報(bào)道PTPNll的激活和JAK2激酶的激素樣功能相關(guān)，參 與調(diào)控細(xì)胞對(duì)于病毒和細(xì)菌等病原體的內(nèi)吞和清除機(jī)制，PTPNl 1與PTPNl在作用上有較多 的同源性。
[0005] 在既往的研宄中，通過(guò)PTPNll的激活增強(qiáng)caveolar mediated endocysis機(jī)制 參與增強(qiáng)病毒和細(xì)菌清除過(guò)程尚未有文獻(xiàn)報(bào)道，既往文獻(xiàn)多以阻斷caveolar mediated endocysis機(jī)制來(lái)減少病原體對(duì)于細(xì)胞的感染類(lèi)研宄居多。本研宄發(fā)現(xiàn)通過(guò)PTPNll對(duì)于 整合素和細(xì)胞骨架蛋白的磷酸化修飾作用，可以增強(qiáng)caveolar mediated endocysis介導(dǎo) 的細(xì)胞內(nèi)吞機(jī)制中，促進(jìn)細(xì)胞對(duì)于胞外病原微生物的內(nèi)吞，內(nèi)吞的病原體經(jīng)由JAK2介導(dǎo)的 蛋白酶體或泛素化途徑進(jìn)行水解，在清除生物體病原體的同時(shí)，阻斷由病原體誘導(dǎo)的免疫 激活機(jī)制，避免過(guò)度的免疫激活造成的損傷。同時(shí)，該內(nèi)吞機(jī)制同時(shí)受到溫度相關(guān)性正相調(diào) 控。
[0006] 根據(jù)2004年Frank SJ的研宄，PTPNll在直接轉(zhuǎn)錄PTPlB增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)吞的同時(shí)， 可以催化JAK2的去磷酸化反應(yīng)，增強(qiáng)JAK2激酶的活性，從而強(qiáng)化JAK2的激素樣作用，增強(qiáng) 細(xì)胞膜內(nèi)穴樣內(nèi)吞機(jī)制，既往研宄證實(shí)PTPN家族基因發(fā)生變異功能喪失將導(dǎo)致嚴(yán)重的免 疫功能紊亂，小鼠出現(xiàn)持續(xù)性炎癥潰瘍表現(xiàn)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明提供一種絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑在清除細(xì)胞和生物體內(nèi)病原體中的應(yīng)用。
[0008] 本發(fā)明提供一種絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑在分離和制備治療生物體病原體感染性疾 病藥物中的應(yīng)用。
[0009] 絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑在清除細(xì)胞和生物體的病原體中的應(yīng)用。

【權(quán)利要求】
1. 絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑在清除細(xì)胞和生物體內(nèi)病原體中的應(yīng)用。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑包括以下化合 物成分：連翹酯苷E、異連翹酯苷A、大黃素、連翹酯苷A、毛蕊花糖苷、戟馬鞭草苷、馬鞭草 苷、連翹苷、3-羥基光甘草酚或牡荊苷。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用，其特征在于，

4. 絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑在制備治療生物體內(nèi)感染性病原體藥物中的應(yīng)用。
5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述絡(luò)氨酸磷酸酶激動(dòng)劑包括以下化合 物成分：連翹酯苷E、異連翹酯苷A、大黃素、連翹酯苷A、毛蕊花糖苷、戟馬鞭草苷、馬鞭草 苷、連翹苷、3-羥基光甘草酚或牡荊苷。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于，

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述病原體包括腺病毒科、流感病毒、甲 肝、乙肝、丙肝、丁肝、戊肝病毒、手足口病毒、皰瘆病毒、黃病毒、多瘤病毒科、逆轉(zhuǎn)錄病毒、 革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌、革蘭氏陰性細(xì)菌或非典型病原體。
【文檔編號(hào)】A61P31/16GK104434945SQ201410829990
【公開(kāi)日】2015年3月25日 申請(qǐng)日期:2014年12月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月29日
【發(fā)明者】陶振剛, 朱月信, 朱強(qiáng), 袁穎, 王春蘭, 薛明明 申請(qǐng)人:安徽濟(jì)人藥業(yè)有限公司