發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明涉及化學(xué)和制藥工業(yè)并且由用于治療腸道/消化道疾病的直腸凝膠物質(zhì)組成，所述腸道/消化道疾病包括非特異性潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病、瘺(fistulas)等以及在所述疾病過程中產(chǎn)生的并發(fā)癥。
本發(fā)明提供抗微生物和抗原生動物作用和良好的滲透能力。
發(fā)明背景
非傳染性腸道/消化道炎性疾病例如潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病已經(jīng)成為現(xiàn)代胃腸病學(xué)中最嚴(yán)重性的問題之一。具有潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病的發(fā)病率每年都在增長，并且主要發(fā)生在成年人群中，這使得它們成為社會上重要的疾病。
這些腸道/消化道侵害的類似性歸因于如下事實：它們是粘膜慢性破壞的基礎(chǔ)；這些疾病的過程具有階段性特征，其為惡化周期和消退階段。迄今為止，兩種炎癥性過程的真實的疾病發(fā)生原因在增多，且其向慢性形式的轉(zhuǎn)變尚未得到闡明。同時，這些疾病主要的差別在于肉眼可見的和組織學(xué)照片以及其在消化道中的位置。
在潰瘍性結(jié)腸炎的情況中，炎癥僅覆蓋大腸粘膜，同時逐步從其遠端擴散至近端部分，并且在嚴(yán)重的病例中涵蓋整個大腸，包括直腸。
在克羅恩病的情況中，炎癥性過程可以侵害從口腔到肛門的任意部分。這種疾病最常見的是，小腸與大腸的下部的聯(lián)合損傷與受侵害的部分具有帶有未改變的粘膜的相鄰部分時的分段局限化損傷。
為了治療非傳染性炎性腸病，應(yīng)用不同的制劑，特別是已知柳氮磺吡啶制劑(encyclopediaofdrugs.registerofmedicinesofrussia,rls,moscow,ooorls-2005,第12版,p.826-827)，其提供了抗菌和抗炎作用。
在腸結(jié)締組織中，它分解為決定柳氮磺吡啶的抗炎特性的5-氨基水楊酸(5-asa)和分解為終止微生物細胞中葉酸類(foliates)合成的對氨基苯甲酸的協(xié)作拮抗劑并且決定抗菌活性的磺胺吡啶。所述制劑在治療潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病中的缺陷在于強烈依賴于腸正常菌群(normoflora)的情況，所述腸正常菌群在作為制劑第二成分磺胺吡啶實際上停止和抑制制劑特異性活性時參與柳氮磺吡啶的生物轉(zhuǎn)化和活性成分5-asa的釋放。它可以強烈地增加過敏性表現(xiàn)、運動障礙并且誘導(dǎo)肝功能紊亂。
另外，已知以包囊片劑為代表的制劑salophalc，其中的膠囊在腸中可溶解，并且包含美沙拉嗪，表示為5-氨基水楊酸(encyclopediaofdrugs.registerofmedicinesofrussia,rls,moscow,ooorls-2005,第12版,p.780-781)。該制劑代表抗炎物質(zhì)，它抑制花生四烯酸代謝物合成、嗜中性粒細胞脂氧合酶活性，它延緩中性白細胞的遷移、脫粒和吞噬作用、淋巴細胞分泌免疫球蛋白，它結(jié)合并且破壞氧自由基。顯示它治療潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病。作為該制劑的缺陷，可以與顯著的過敏性表現(xiàn)一起提及的是腸、神經(jīng)、心血管和泌尿系統(tǒng)的功能紊亂，將它們視為副作用。這導(dǎo)致該制劑僅在醫(yī)學(xué)監(jiān)督下使用并且需要常規(guī)分析血液和尿。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個目的在于提供治療腸道/消化道炎性疾病的制劑，其不含上述舉出的缺陷并且提供抗微生物、局部麻醉和抗炎能力，該制劑不會誘發(fā)自動皮膚過敏反應(yīng)或不會產(chǎn)生任何直腸粘膜上的刺激作用。
通過實施要求保護的本發(fā)明所實現(xiàn)的技術(shù)效果在于增加治療非傳染性腸炎性疾病的有效性并且縮短治療期限，且無副作用或并發(fā)癥，實現(xiàn)該目的歸因于形成一組成分的聯(lián)合方法并且通過檢查已經(jīng)遵循使用所述制劑的治療過程的患者的病案來確證，所述檢查由獨立的專業(yè)人員進行。另一個技術(shù)效果在于提供該制劑在腸粘膜和粘膜下層上的聯(lián)合作用，這提供了穩(wěn)定的療效并且可以預(yù)防病癥復(fù)發(fā)。
實現(xiàn)所述技術(shù)效果歸因于用于治療腸道/消化道疾病的多聚復(fù)合物凝膠，所述凝膠包含作為活性物質(zhì)的甲硝唑和胸腺原且包含輔助物質(zhì)，其組成如下且成分比例以克計，其中凝膠的總質(zhì)量為150g：
甲硝唑：0.1-2.0g；
胸腺原：0.001-0.05g；
卡波姆：0.2-1.0g；
丙二醇：8.0-11.00g；
edta二鈉鹽：0.001-0.08g；
對羥基苯甲酸丙酯：0.015-0.04g；
對羥基苯甲酸甲酯：0.035-0.08g；
氫氧化鈉：足以提供必需ph的用量；
蒸餾水：余量。
活性物質(zhì)的藥理學(xué)作用：
甲硝唑提供抗微生物和抗原生動物作用。其作用機制在于使制劑的硝基基團透入原生動物和厭氧菌的呼吸鏈。作為結(jié)果，微生物中的呼吸過程受到破壞，這促成細胞死亡。此外，在一些厭氧微生物種類中，該制劑妨礙dna合成，這有利于其降解。甲硝唑?qū)θ缦挛⑸锞哂谢钚裕涸鷦游?陰道毛滴蟲(trichomonasvaginalis)、蘭伯鞭毛蟲屬(lamblia)、溶組織內(nèi)阿米巴(entamoebahistolytica)、利什曼原蟲屬(leishmania)、需氧革蘭氏陰性微生物(似桿菌的脆弱擬桿菌(bacteroidsbacteroidesfragilis)、糞擬桿菌(b.caccae)、單形擬桿菌(b.uniformis)、脆弱擬桿菌(b.fragilis)、卵形擬桿菌(b.ovatus)、多形擬桿菌(b.thetaiotaomicron)、吉氏擬桿菌(b.distasonis)、普通擬桿菌(b.vulgatus)、fusobcteriaprevotella、頰普雷沃菌(p.buccae)、二路普雷沃爾菌(p.bivia)、解糖胨普雷沃菌(p.disiens)、厭氧革蘭氏陰性桿菌(梭菌屬(clostridium)、真細菌屬(eubacterium))、厭氧革蘭氏陽性球菌(消化球菌屬的種類(peptococcusspp.)、消化鏈球菌屬的種類(peptostreptococcusspp))。
胸腺原提供免疫調(diào)節(jié)作用并且表示為影響生物體細胞、體液免疫反應(yīng)和非特異性抗性的二肽。它在抑制情況中刺激再生過程，改善細胞代謝過程。它加強淋巴樣細胞分化過程，提供刺激骨髓細胞的集落形成活性，誘導(dǎo)分化受體在淋巴細胞上的表達，使具有不同免疫缺陷病癥的患者中的t-輔助細胞數(shù)量、t-阻抑基因及其比例正?；?/p>
就整體而言，輔助物質(zhì)的選擇根據(jù)所述凝膠的要求調(diào)整，最終產(chǎn)生如下選擇：
1.用作凝膠調(diào)節(jié)劑的卡波姆，其用于提供動態(tài)的稠度點和塑性粘度。
2.向所述凝膠組合物中加入丙二醇以便改善對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯的溶劑化能力。
3.向所述凝膠組合物中edta二鈉鹽(氨羧配合劑b)，這歸因于在使用的成分中發(fā)現(xiàn)痕量的誘導(dǎo)氧化過程的變價金屬的可能性。
4.對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯已經(jīng)用作防腐劑以便防止不需要的微生物菌群形成。
所要求保護的多聚復(fù)合物凝膠的主要優(yōu)點在于其在無副作用或并發(fā)癥背景下的效能，實現(xiàn)它可以歸因于形成一組成分的聯(lián)合方法并且通過檢查已經(jīng)遵循使用所述制劑的治療過程的患者的病案來確證，所述檢查由獨立的專業(yè)人員進行。另外適當(dāng)?shù)氖菃为毜刂赋鏊蟊Ｗo的多聚復(fù)合物凝膠對腸粘膜和皮下層的聯(lián)合作用，這有利于實現(xiàn)穩(wěn)定的療效與預(yù)防病癥復(fù)發(fā)。注意到的重要要素在于非特異性潰瘍性結(jié)腸炎代表自身免疫病，而所述凝膠組合物中存在胸腺原抑制自身免疫性局部反應(yīng)產(chǎn)生。因此，缺陷性的病理循環(huán)被打破，并且生成用于使腸壁正?；臈l件。這種作用因在所述凝膠組合物中存在甲硝唑而得到加強，這能夠恢復(fù)粘膜和皮下層受損的結(jié)構(gòu)，同時提供抗微生物和抗原生動物作用。其作用機制在于使制劑的硝基基團透入原生動物和厭氧菌的呼吸鏈。甲硝唑和胸腺原的相互作用提供了寬泛的聯(lián)合療效，使離子、酸-堿和鹽平衡正常化，同時穩(wěn)定細胞膜并且使細胞因子和炎癥介質(zhì)失活。在上述背景下，所要求保護的多聚復(fù)合物凝膠的主要優(yōu)點在于其對全部大腸止血系統(tǒng)的聯(lián)合作用。由于所述凝膠成分的組合，所以組織代謝和微循環(huán)正常化，且作為結(jié)果，所述疾病得以消除，而甲硝唑/胸腺原組合能夠治療主要的疾病并且預(yù)防并發(fā)癥。令人遺憾地，現(xiàn)存的制劑無法提供這類作用。
用于治療腸道/消化道疾病的多聚復(fù)合物凝膠屬于一類在胞內(nèi)代謝背景下調(diào)節(jié)物質(zhì)間質(zhì)代謝的物質(zhì)，同時穩(wěn)定細胞膜并且減輕炎癥反應(yīng)表現(xiàn)與降低抗炎細胞因子、前列腺素和其它組織中炎癥介質(zhì)的濃度。
所述制劑療效的機制在于穩(wěn)定細胞膜中的微循環(huán)床，改善大腸粘膜的毛細血管網(wǎng)中的流變性并且抑制腸壁中的原發(fā)性自身免疫性炎癥反應(yīng)，最終導(dǎo)致大腸壁中的病理學(xué)過程中斷，使組織中的代謝正?；⑶也±韺W(xué)過程可逆增長。
此外，當(dāng)胸腺原補充甲硝唑的療效時，所述制劑成分彼此互補，且這兩種活性物質(zhì)的組合產(chǎn)生顯著的局部抗炎和修補作用。
由于能夠生產(chǎn)本制劑的創(chuàng)新技術(shù)，因此已經(jīng)實現(xiàn)了如下特性，它們對于現(xiàn)存的現(xiàn)代制劑而言是無法獲得的：
-完全恢復(fù)大腸和肛門的正常狀態(tài)的能力；
-因毒性最低且生理學(xué)反饋技術(shù)而產(chǎn)生高度安全性。
除此之外，還有必要指出，所要求保護的多聚復(fù)合物凝膠的特征在于不存在過敏性特性。考慮到目前新藥研究的強制性階段是評價其過敏原性這一事實，所要求保護的多聚復(fù)合物凝膠已經(jīng)基于arthus-sakharov測試通過了驗證。為此目的，給兩種性別的體重為2.0-2.5kg的6只兔子在無菌條件下在背側(cè)皮下注射在1.0ml氯化鈉等滲溶液中10mg/kg劑量的胸腺原且在另一背側(cè)皮下注射1ml馬(hors)血清。給對照組兔子注射1ml氯化鈉等滲溶液而不是胸腺原。在5-6天間隔重復(fù)注射胸腺原和馬血清6次。在兩個組的兔子中馬血清注射部位上，觀察到等同的局部反應(yīng)，即，充血、出血和腫大。在注射胸腺原和等滲氯化鈉溶液的部位上，未發(fā)現(xiàn)反應(yīng)。在每次5天與間隔7天的3個過程中延長靜脈內(nèi)注射胸腺原未伴隨過敏性聚集性自身抗體的任何滴度增長。
因此，使用標(biāo)準(zhǔn)方法研究所述多聚復(fù)合物凝膠顯示，胸腺原無過敏性。另外，隨后臨床觀察結(jié)果顯示，胸腺原表現(xiàn)出確定的脫敏特性，這使得其適用于特異性病癥的聯(lián)合治療。
所述凝膠組合物中存在直腸用胸腺原及其脫敏特性使得所述多聚復(fù)合物凝膠具有確定的低過敏原性(hypoallergenicity)，其可以根據(jù)凝膠過敏原性研究證實，即根據(jù)fguncesmp(“manualofpreclinicalstudiesofmedicines”,第1部分,moscow,2012)的方法推薦進行。
實驗使用30只兩種性別的體重為250-300g的白肋(white-sided)豚鼠。
自動皮膚過敏反應(yīng).按照與“用于評價藥物的過敏原特性的方法推薦”一致性的方式對兩種性別的體重為250-300g的白肋豚鼠研究自動皮膚過敏反應(yīng)。通過將所述制劑直腸施用21天對動物進行致敏。基于對人的活性物質(zhì)(甲硝唑)治療劑量(100mg或1.43mg/kg)確定多聚復(fù)合物凝膠的劑量，即對于豚鼠為何使用等于4.7的種屬重新計算系數(shù)計算的治療劑量高至6.7mg/kg。對于所述致敏，使用2種劑量：6.7mg/kg的治療劑量和13.7mg/kg的加倍劑量。
本實驗使用30只豚鼠。根據(jù)隨機排序的方法將動物分成各10只動物的3個組(5
第1組：對照組(凝膠安慰劑施用)；
第2組：多聚復(fù)合物凝膠6.7mg/kg；
第3組：多聚復(fù)合物凝膠13.4mg/kg。
為了檢測致敏，使用所研究的多聚復(fù)合物凝膠作為皮下注射，用量為50μl。對完整豚鼠的預(yù)實驗確定，研究中的所述制劑的皮下注射不會誘發(fā)刺激。
末次致敏操作后14天，修剪豚鼠上的一些毛發(fā)，且然后皮下注射50μl所研究的多聚復(fù)合物凝膠。為了檢查皮膚反應(yīng)性，給同一動物在另一個部位皮下注射50μl安慰劑凝膠。
制劑注射后30分鐘，給全部研究和對照組動物通過靜脈注射0.5ml1％伊文思染料溶液。
此后30分鐘，處死全部動物并且在注射多聚復(fù)合物凝膠和安慰劑凝膠的部位上出現(xiàn)一定大小的色斑。實驗結(jié)果如下表中所示。
表25
直腸施用研究中的多聚復(fù)合物凝膠后豚鼠(雄性和雌性)中的自動皮膚過敏反應(yīng)的反應(yīng)*
＊在實驗室動物的組之間未發(fā)現(xiàn)確定的差異。
如表中所示，進行致敏操作的動物中的最終注射部位上皮膚內(nèi)表面上色斑的大小未超過對照組動物的色斑大小。得到的數(shù)據(jù)證明研究中的所述多聚復(fù)合物凝膠不會在豚鼠中誘發(fā)自動皮膚過敏反應(yīng)的任何反應(yīng)。因此，通過對豚鼠的自動皮膚過敏反應(yīng)評價進行的所述多聚復(fù)合物凝膠的致敏活性研究表明，研究中的制劑未顯示出任何致敏能力。
對用于治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎的多聚復(fù)合物凝膠進行局部刺激作用評價，該評價在亞慢性毒性研究中對兔子進行。由于研究中的制劑以藥物劑型“直腸凝膠”呈現(xiàn)，即為直腸施用而設(shè)計，所以對于局部刺激作用的評價基于直腸粘膜狀態(tài)進行。為了該目的，在處死和壞死組織檢查后，使用雙目鏡透鏡對直腸壁進行直腸視覺檢查，以便檢測瘀點(小斑點出血)和粘膜潰瘍損傷。已知在動物對照組(安慰劑)和使用研究中的制劑施用的動物組中，直腸粘膜無水腫、出血或潰瘍。
除此之外，進行組織學(xué)研究。粘膜、肌肉層和漿膜在全部組中的直腸固定物(mounts)上充分可見。觀察到具有白細胞的粘膜浸潤的典型圖像。孤立淋巴濾泡無改變。直腸的肌肉和漿膜具有正常結(jié)構(gòu)。
局部刺激作用研究顯示施用所要求保護的直腸多聚復(fù)合物凝膠30天對直腸粘膜無刺激作用。
研究用于治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎的所述多聚復(fù)合物凝膠的急性和亞慢性毒性、后遺效應(yīng)和局部刺激作用以及致敏能力和特異性活性，并對其進行評價。在使用全部劑量的直腸施用研究的制劑中，記錄無致命性病例。在內(nèi)臟的相關(guān)團塊中未觀察到確定的改變，特別是：肝、腎、腎上腺、脾、胸腺、胃、胰腺、心臟、肺、腦。未記錄到任意種類的中毒的另外的可見體征。接受所有3種劑量的制劑的動物的體容量增量和體溫與接受安慰劑的對照組動物的類似指數(shù)無差別。
經(jīng)證實，直腸施用全部3種劑量的所述制劑30天在例如總蛋白、葡萄糖、脲、肌酸酐含量、酶ala-at、ast和堿性磷酸酶活性、血紅蛋白濃度、血細胞比容、紅細胞、白細胞、網(wǎng)織紅細胞和凝血細胞含量這樣的生化參數(shù)以及白細胞分類計數(shù)參數(shù)方面未產(chǎn)生任何具有統(tǒng)計學(xué)顯著性的差異。
在30天直腸施用期結(jié)束后2周進行的所研究的制劑后遺效應(yīng)研究顯示，接受23、115和230mg/kg劑量的研究中的制劑的動物的全部所研究的參數(shù)與施用期結(jié)束后2周安慰劑組動物的相應(yīng)指數(shù)之間無差別。
尸體剖檢檢查的初步結(jié)果顯示，在所研究制劑的作用下，用于測定亞慢性毒性的實驗，未表現(xiàn)出在肝、腎、腎上腺、脾、胸腺、胃、胰腺、心臟、肺、卵巢、睪丸和腦組織中形態(tài)改變。
所進行的對比的組織學(xué)分析顯示，在所研究的制劑在所研究的內(nèi)臟或組織中的作用下未產(chǎn)生細胞形態(tài)改變。
對兩種性別的兔子進行的局部刺激作用研究顯示，施用用于治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎的多聚復(fù)合物凝膠30天對直腸粘膜無任何刺激作用。
對用于治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎的所述多聚復(fù)合物凝膠的致敏能力的初步研究顯示，研究中的制劑未顯示出任何致敏作用。
局部麻醉作用的研究表明，研究中的制劑對兔子眼角膜未表現(xiàn)出任何局部刺激作用。
經(jīng)證實，用于治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎的多聚復(fù)合物凝膠提供了顯著的抗炎作用。
基于研究中的制劑、即“用于治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎的多聚復(fù)合物凝膠”的急性和亞慢性毒性、后遺效應(yīng)和局部刺激作用以及致敏能力和特異性藥理學(xué)活性(抗微生物和抗炎)的評價結(jié)果，這些結(jié)果通過生化、血液和組織學(xué)研究結(jié)果得到，可以推薦該制劑用于治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病和瘺，其作為并發(fā)癥在所述疾病以及其它腸疾病過程中出現(xiàn)。
本發(fā)明的實施方案
每日(在晚間)通過直腸施用用于治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎的多聚復(fù)合物凝膠，每日1次。治療過程視疾病的嚴(yán)重性而定。
實施例1.
為了治療非特異性潰瘍性結(jié)腸炎，可以應(yīng)用具有如下組成的多聚復(fù)合物凝膠：
甲硝唑：1.0g；
胸腺原：0.01g；
卡波姆：1.0g；
丙二醇：10.0g；
edta二鈉鹽：0.05g；
對羥基苯甲酸丙酯：0.02g；
對羥基苯甲酸甲酯：0.04g；
氫氧化鈉：足以提供必需ph的用量；
蒸餾水：余量。
實施例2.
為了治療克羅恩病，可以應(yīng)用具有如下組成的多聚復(fù)合物凝膠：
甲硝唑：0.8g；
胸腺原：0.002g；
卡波姆：1.0g；
丙二醇：10g；
edta二鈉鹽：0.04g；
對羥基苯甲酸丙酯：0.025g；
對羥基苯甲酸甲酯：0.04g；
氫氧化鈉：足以提供必需ph的用量；
蒸餾水：余量。
實施例3.
為了治療瘺，可以使用具有如下組成的多聚復(fù)合物凝膠：
甲硝唑：1.2g；
胸腺原：0.015g；
卡波姆：1.0g；
丙二醇：10g；
edta二鈉鹽：0.05g；
對羥基苯甲酸丙酯：0.02g；
對羥基苯甲酸甲酯：0.04g；
氫氧化鈉：足以提供必需ph的用量；
蒸餾水：余量。