本發(fā)明屬于化學生物學技術領域。技術背景在人體內含鈣晶體如：尿酸單鈉，焦磷酸鈣CPPD，堿性磷酸鈣BCP晶體，草酸鈣聚合物等普遍存在。研究表明人體細胞內鈣晶體水平能調控基因表達影響許多生命過程，從細胞生長到凋亡都有影響。而含鈣晶體在骨關節(jié)軟骨和關節(jié)組織的沉積會導致關節(jié)疾病。例如，尿酸單鈉與痛風有關，焦磷酸鈣CPPD與假痛風，堿性磷酸鈣BCP晶體與軟骨退化和急性鈣化性關節(jié)周炎，結石有關，c-fos和c-jun原癌基因表達有關。天然產物結構和生物活性的多樣性，使它在藥物研究史上一直占據著非常重要的地位。以活性天然產物為先導化合物，對其結構修飾改造以獲得高效、低毒的藥物，是當前新藥開發(fā)的重要途徑之一。其中檸檬酸磷酸酯對于含鈣結晶在骨關節(jié)和骨組織沉淀有抑制作用，可用于防止骨關節(jié)炎，風濕性關節(jié)炎和一些相關的疾病如：動脈粥樣硬化，心臟瓣膜鈣化，軟組織腫瘤，軟骨鈣質沉著癥，腎結石，尿路結石等。但由于檸檬酸磷酸酯存在脂溶性差，且穩(wěn)定性較低等缺陷，因此以檸檬酸磷酸酯為先導,尋找與發(fā)現新的具有更高生理活性衍生物是近年來藥物研究與開發(fā)的熱點之一。

技術實現要素：
本發(fā)明的目的是提出磷酸檸檬酸二芐酯在抑制鈣離子沉積疾病中的應用。本發(fā)明所述的磷酸檸檬酸二芐酯結構如下式所示：本發(fā)明的磷酸檸檬酸二芐酯，由檸檬酸經過化學合成而得到的。本發(fā)明所述的磷酸檸檬酸二芐酯在抑制鈣離子沉積疾病中的應用。本發(fā)明所述的磷酸檸檬酸二芐酯可按中國專利ZL200910186332.2檸檬酸磷酸酯的制備方法中中間體磷酸檸檬酸二芐酯的制備方法制備。本發(fā)明選用小鼠成肌細胞C2C12和人骨骼肌細胞HSK做細胞模型，試驗數據表明磷酸檸檬酸二芐酯具有很好的抑制小鼠成肌細胞C2C12的鈣化的作用和能有效的減少人骨骼肌細胞HSK內的鈣離子濃度。選用患有關節(jié)炎的豚鼠做動物模型，采用磷酸檸檬酸二芐酯進行治療后，豚鼠骨關節(jié)骨密度照片明顯變清晰。具體實施方式以下通過實施例對本發(fā)明作進一步說明。實施例1。檸檬酸三芐酯的制備。稱取帶一個結晶水的檸檬酸28.0g，放于100ml的三頸瓶中，再稱芐醇70.0g倒入該三頸瓶中，接上分水器，回流裝置和攪拌器，于160-180℃油浴攪拌反應8h，然后在油浴185℃下減壓蒸餾出過量的芐醇，最后乘熱把該油狀物溶于無水乙醇，靜置數小時即有白色晶體析出，抽濾，用少量無水乙醇洗滌晶體，干燥即得純凈的檸檬酸三芐酯C27H26O7，稱得62.7g,收率為93％。所得檸檬酸三芐酯的技術指標如下：白色針狀晶體m.p.50-51℃.1HNMR(CDCl3),δ:2.86(d,J＝12,2H),2.94(d,J＝12,2H),5.07(s,2H)，5.10(S,4H),7.25～7.35(m,15H)。ESI-MSm/z(％):461([M-H]-,100)。實施例2。磷酸檸檬酸二芐酯的制備。將上述制得的檸檬酸三芐酯稱取30.0g，溶于25ml精制的苯中，一起加入100ml裝有溫度計，攪拌器的三頸瓶中，在冰浴下攪拌冷卻至4℃，在氮氣的保護下，把液體進樣器中溶有的13.6gPCl5的苯溶液100ml緩慢滴加入該溶液中，溫度維持在3-5℃，滴加2h后，滴畢，再攪拌0.5h，在確保溫度不上升(維持在4℃左右)的前提下，再往其中緩慢滴加4.85ml蒸餾水，滴畢，會有白色沉淀生成，再攪拌反應1h，最后抽濾，用少量苯洗滌2-3遍，再在KOH\NaOH環(huán)境下抽干，得到白色針狀晶體即為磷酸檸檬酸二芐酯C20H21O10P，稱重得25.2g，收率為86.3％。所得檸檬酸三芐酯的技術指標如下：1HNMR(acetone-d6),δ:3.58(s,4H),5.26(s,4H),7.52(m,10H),10.74(s,2H)。ESI-MSm/z(％):453([M-H]-,100)。實施例3。磷酸檸檬酸二芐酯對小鼠成肌細胞C2C12鈣化的抑制作用。建立細胞模型，其方法如下：首先，將小鼠成肌細胞C2C12以5×105個/ml接種于24孔板中，第二天加入無血清培養(yǎng)基置培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時。第三天，用1mCi/ml45Ca2+標記的培養(yǎng)基進行細胞換液，隨即加入終濃度為1mM的ATP。用未進行ATP處理或β-甘油磷酸鹽處理的細胞進行陰性對照。48或72小時后，棄去培養(yǎng)基，用低溫Hank’s平衡液清洗細胞5次，加入0.1NNaOH。最后測定細胞裂解產物中放射物質的量，這樣進行三次實驗，求平均值。結果如表1所示。表1：磷酸檸檬酸二芐酯抑制C2C12細胞鈣化的研究含有1mMATP的培養(yǎng)基平均值(cpm)空白組9182Diltiazem10uM(陽性對照)6818磷酸檸檬酸二芐酯1uM7129磷酸檸檬酸二芐酯10uM6263磷酸檸檬酸二芐酯100uM5184實施例3。磷酸檸檬酸二芐酯對人骨骼肌細胞HSK內的鈣離子濃度的減少作用。將人骨骼肌細胞HSK以10000個/孔接種于96孔板中，在含磷酸檸檬酸二芐酯或鈣通道抑制劑Diltiazem的培養(yǎng)基中培養(yǎng)48小時后，隨即加入Fluo-4鈣離子熒光指示劑,并置于熒光讀板器中測定熒光強度。細胞內鈣離子濃度與熒光強度成正比.這樣進行三次實驗，最后求平均值。結果如表2所示。表2：磷酸檸檬酸二芐酯減少HSK細胞內鈣離子濃度的研究培養(yǎng)基平均值對照組23.95Diltiazem1uM12.58Diltiazem10uM11.86磷酸檸檬酸二芐酯1uM14.09磷酸檸檬酸二芐酯10uM13.37磷酸檸檬酸二芐酯100uM12.79