本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種包含青錢(qián)柳葉和苦丁茶的保健組合物及其制劑和用途。
背景技術(shù)：
：青錢(qián)柳(cyclocaryapaliurus(Batal.)Ijinsk)為胡桃科青錢(qián)柳屬植物，是國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)的瀕危植物之一，它是一種高大速生喬木，廣泛分布于江西、浙江、湖南、廣東等長(zhǎng)江以南地區(qū)。據(jù)《中華本草》記載，具有祛風(fēng)、消炎止痛和殺蟲(chóng)止癢等功效。其主要成分有皂苷、黃酮、萜類(lèi)、多糖、微量元素等。青錢(qián)柳葉味甜，研究表明青錢(qián)柳葉具有多種功效：能明顯抑制脂肪酶活性、減少脂肪的消化吸收，并能促進(jìn)脂類(lèi)物質(zhì)的代謝分解；能有效降低血糖、明顯改善糖耐量；抗氧化、抗疲勞。苦丁茶(IlexkudingchaC.J.Tseng)是冬青科冬青屬苦丁茶種常綠喬木，俗稱(chēng)茶丁、富丁茶、皋盧茶，主要分布在西南地區(qū)(四川、重慶、貴州、湖南、湖北)及華南地區(qū)(江西、廣東、福建、海南)等地，是純天然保健飲料?？喽〔柚泻锌喽≡磉啊被?、維生素C、多酚類(lèi)、黃酮類(lèi)、咖啡堿、蛋白質(zhì)等200多種成分。成品茶清香有苦味、而后甘涼，具有清熱消暑、明目益智、生津止渴、利尿強(qiáng)心、潤(rùn)喉止咳、降壓減肥、抑癌防癌、抗衰老、活血脈等多種功效，素有“保健茶”、“美容茶”、“減肥茶”、“益壽茶”等美稱(chēng)。糖尿病是一種常見(jiàn)的多病因的有遺傳傾向的內(nèi)分泌代謝紊亂性疾病，隨著生活水平的提高，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)，成為繼癌癥、心腦血管疾病之后危害人體健康的第三殺手。2012年的最新研究報(bào)告顯示，我國(guó)糖尿病人位居全球第一，美國(guó)估計(jì)約有1600萬(wàn)以上的糖尿病患者，約占人口總數(shù)的6％。該病如得不到控制，將會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重慢性并發(fā)癥進(jìn)而致殘致死。因此，加強(qiáng)糖尿病的防治措施已受到世界各國(guó)的重視，研究防治糖尿病的新型藥物和保健食品是國(guó)內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域的前沿課題。非藥物性治療糖尿病已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、食品科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。引起糖尿病的原因固然很多，但是我國(guó)人們的生活習(xí)慣以及飲食結(jié)構(gòu)使血糖處于較高狀態(tài)也是不爭(zhēng)的事 實(shí)。這就成了誘發(fā)糖尿病潛在的危險(xiǎn)群體，因此國(guó)內(nèi)很多大的企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)，爭(zhēng)相研究和開(kāi)發(fā)降糖藥物或者替代產(chǎn)品。盡管產(chǎn)品琳瑯滿(mǎn)目，但大多都因價(jià)格昂貴、載體不理想、效果不穩(wěn)定或者服用麻煩而不被人們認(rèn)可和接受。目前治療糖尿病的藥物主要有：1、磺脲類(lèi)西藥如苯磺環(huán)己脲，甲磺吡脲，美吡達(dá)，利糖妥等；2、雙胍類(lèi)：苯乙雙胍，二甲雙胍等；3、胰島素敏感性增強(qiáng)劑類(lèi)：吡格列酮，羅格列酮等；4、胰島素類(lèi)以及一些治療糖尿病的中成藥。西藥治療效果雖然明顯，但副作用大，如磺脲類(lèi)久用傷害肝臟、腎臟及血細(xì)胞；雙胍類(lèi)久用產(chǎn)生高乳酸血癥，胰島素類(lèi)久用易產(chǎn)生抗體。此外，高血壓、高血脂也是近年來(lái)困擾人們的“現(xiàn)代文明病”，對(duì)人體健康的危害極大。對(duì)其防治的困難與糖尿病類(lèi)似。高脂血癥(hyperlipemia)又稱(chēng)高脂蛋白血癥，可表現(xiàn)為膽固醇血癥，高三酰甘油血癥或兩者兼有，它與動(dòng)脈粥樣性硬化、糖尿病、脂肪肝、腎病等關(guān)系十分密切。尤其在心腦血管病的發(fā)病中有重要的地位而日益引起人們的重視。中醫(yī)認(rèn)為高脂血癥屬“濁阻”、“痰濕、“肥胖、“濕熱”等范疇。高血壓是一種以動(dòng)脈壓異常升高為主要特征的心血管疾病。按病因分為原發(fā)性高血壓和繼發(fā)性高血壓。根據(jù)血壓升高的程度，危險(xiǎn)因素的數(shù)量，靶器官損害的程度以及并存的臨床情況把高血壓分為三期：(1)輕度高血壓：無(wú)器官損害客觀條件；(2)中度高血壓：至少有一項(xiàng)器官損害表現(xiàn)(左心室肥厚，視網(wǎng)膜動(dòng)脈變窄，蛋白尿和血肌酐升高，超聲檢查有動(dòng)脈硬化斑塊)；(3)重度高血壓：出現(xiàn)器官損害的臨床表現(xiàn)(心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、短暫腦缺血發(fā)作、腦卒中、高血壓腦病、視網(wǎng)膜出血、腎功能衰竭、動(dòng)脈閉塞性疾病)。本病屬于中醫(yī)的“眩暈”、“頭痛”等范疇?！叭摺辈∫驈?fù)雜，目前病因尚不完全明確，西醫(yī)一般認(rèn)為，主要是由：遺傳因素、環(huán)境因素，高胰島素血癥和胰島素抵抗、肥胖、脂代謝異常等相互影響所致。目前西醫(yī)治療療效比較肯定，但對(duì)合并癥及其并發(fā)癥的治療困難較大，同時(shí)程度不同的副作用，患者往往難以忍受，不能堅(jiān)持治療。中醫(yī)對(duì)上述疾病的認(rèn)識(shí)和防治，則是從整體調(diào)理、辨證論治入手的，雖然沒(méi)有西藥快速，但通過(guò)整體調(diào)理，癥狀和指標(biāo)都會(huì)得到有效控制，同時(shí)能夠有效保護(hù)靶器官等。國(guó)內(nèi)大量臨床資料表明，中醫(yī)藥預(yù)防和治療“三高”及其并發(fā)癥療效肯定，且副作用少。從臨床上看，往往是高血脂、高血糖、高血壓常合并出現(xiàn)，互為因果?？茖W(xué)研究證明，輕度的長(zhǎng)期的慢性高血糖就可以導(dǎo)致所有慢性并發(fā)癥的發(fā)生，而長(zhǎng)期血壓增高，同樣導(dǎo)致各種心腦血管系統(tǒng)疾病的發(fā)生。中醫(yī)認(rèn)為，現(xiàn)代人“三高”患者多表現(xiàn)為“氣陰不足，痰瘀有余”，但 目前能同時(shí)治療“三高”的中成藥的確了了無(wú)幾，因此，研究并開(kāi)發(fā)能同時(shí)預(yù)防和治療“三高”及其合并癥的安全有效的保健組合為是當(dāng)務(wù)之急，迫在眉睫。雖然目前我國(guó)生產(chǎn)具有降糖功能的藥物及替代產(chǎn)品的種類(lèi)很多，但是具有理想的兼具降血糖、降血壓和降血脂效果的藥物組合物卻十分罕見(jiàn)。本發(fā)明人經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的研究實(shí)踐，在浩瀚的藥食原材料中，通過(guò)創(chuàng)造性的勞動(dòng)開(kāi)發(fā)生產(chǎn)了一種包含青錢(qián)柳葉、桑葉和苦丁茶的同時(shí)具有降血糖、降血壓和降血脂功能的保健組合物，并經(jīng)藥效試驗(yàn)和分析對(duì)比意外的發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的保健組合物對(duì)控制糖尿病患者的血糖以及降血壓和降血脂方面產(chǎn)生了明顯的協(xié)同作用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種兼具降血糖、降血壓和降血脂功能、包含青錢(qián)柳葉、桑葉和苦丁茶的保健組合物，從而克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷。一方面，本發(fā)明提供了一種包含青錢(qián)柳葉和苦丁茶的保健組合物，其中青錢(qián)柳葉和苦丁茶的重量百分比為1-98％∶1-98％：。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述青錢(qián)柳葉和苦丁茶的重量百分比為10-80％∶10-80％。進(jìn)一步優(yōu)選的，所述青錢(qián)柳葉和苦丁茶的重量百分比為20-60％∶20-60％。更優(yōu)選的，所述青錢(qián)柳葉和苦丁茶的重量百分比為50％∶50％。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，所述保健組合物中還可以包含桑葉、綠茶、玉竹、紅茶、枸杞葉中的一種或其任意組合。所述青錢(qián)柳葉、苦丁茶與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為10-90％∶10-90％∶10-90％。優(yōu)選的，青錢(qián)柳葉、苦丁茶與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為20-60％∶20-60％∶20-60％。進(jìn)一步優(yōu)選的，青錢(qián)柳葉、苦丁茶與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為40％∶30％∶30％。在本發(fā)明的又一個(gè)實(shí)施方案中，上述保健組合物中還可包含選自由蕎麥葉、龍眼葉、楊梅葉、番薯葉、枇杷葉、枸杞子、黃精、昆布、烏梅、石斛、 桑白皮、人參、三七、女貞子、山茱萸、川芎、蒼術(shù)、玄參、生地黃、當(dāng)歸、紅景天、西洋參、蘆薈、五味子、麥門(mén)冬、制大黃、知母、蒺藜、銀杏葉、黃芪、絞股藍(lán)、苦瓜、苦蕎麥、南瓜、魔芋、芹菜、玉米須、銀耳、猴頭菇和大蒜所組成的組中的一種或更多種。在本發(fā)明中，所述保健組合物可以通過(guò)本領(lǐng)域任何常規(guī)的制備方法進(jìn)行制備。另一方面，本發(fā)明提供了所述保健組合物在制備輔助治療高血糖、高血壓或高血脂保健組合物方面的應(yīng)用。再一方面，本發(fā)明提供了一種含有所述保健組合物的藥物制劑。本發(fā)明的保健組合物可以根據(jù)需要和藥學(xué)上可接受的輔料制備成任何合適的口服制劑用于降血糖、降血壓或降血脂的治療。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述口服制劑可以為片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、泡騰劑、代用茶、袋泡劑等劑型。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述藥學(xué)上可接受的輔料例如可以選自預(yù)膠化淀粉、β-環(huán)糊精、卡波姆、微晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素、聚乙二醇(PEG)、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、乙基纖維素、甘露醇、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠、阿斯巴甜、碳酸氫鈉、碳酸鈉中的一種或更多種。本發(fā)明中各主要原料藥的功效活性青錢(qián)柳葉：味微苦、辛，性平。具有健脾化濕、清熱通腑、疏肝理氣、滋陰補(bǔ)腎的作用，對(duì)因脾運(yùn)不健、痰濁、嗜食肥甘厚味、懶動(dòng)、腹?jié)M積食、肝淤氣滯而致的肥胖，有良好的改善。苦丁茶：味苦，甘涼。具有清熱消暑、明目益智、生津止渴、利尿強(qiáng)心、潤(rùn)喉止咳、降壓減肥、抑癌防癌、抗衰老、活血脈等多種功效。桑葉：氣淡，味微苦澀。具有降壓利尿、降血脂等功效，能抑制α-葡萄糖苷酶，并能競(jìng)爭(zhēng)性地阻斷小腸粘膜細(xì)胞刷狀緣內(nèi)的麥芽糖酶和蔗糖酶等雙糖水解酶，具有降糖作用。綠茶：具有醒腦提神、利尿解乏、緩解疲勞、抗衰老之功效，適用于油膩食品食用過(guò)多者、高血壓、小便不利、發(fā)熱口渴的人群。陳皮：味苦、辛，性溫；歸肺、脾經(jīng)；具有理氣健脾，燥濕化痰之功效，用于脘腹脹滿(mǎn)、食少吐瀉、咳嗽痰多等癥。山藥：味甘、性平，歸脾、肺、腎經(jīng)；具有補(bǔ)脾養(yǎng)胃，生津益肺，補(bǔ)腎澀精之功效，用于治療脾虛、久瀉、肺虛、腎虛、帶下、尿頻等癥。白芍：性涼、味苦酸，微寒，具有補(bǔ)血養(yǎng)血、平抑肝陽(yáng)、柔肝止痛、斂陰止汗等功效，適用于陰虛發(fā)熱、月經(jīng)不調(diào)、胸腹脅肋疼痛、四肢攣急，瀉痢腹痛、自汗盜汗、崩漏、帶下等癥。茯苓：味甘、淡，性平。歸心、肺、脾、腎經(jīng)。具有利水滲濕，健脾，寧心之功效。用于水腫尿少，痰飲眩悸，脾虛食少，便溏泄瀉，心神不安，驚悸失眠等癥。葛根：味甘、辛，性涼。歸肺、胃經(jīng)。具有解肌退熱、透疹、生津止渴、升陽(yáng)止瀉之功效，用于表證發(fā)熱、項(xiàng)背強(qiáng)痛、麻疹不透、熱病口渴、陰虛消渴、熱瀉熱痢、脾虛泄瀉等癥。本發(fā)明具有如下的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明人意外的發(fā)現(xiàn)按照本發(fā)明的用量配比組成的含有青錢(qián)柳葉、桑葉和苦丁茶的保健組合物兼具降血糖、降血壓和降血脂的優(yōu)異效果，并在降血糖、降血壓和降血脂功能方面產(chǎn)生了明顯的協(xié)同作用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明根據(jù)青錢(qián)柳葉的中藥特點(diǎn)，在眾多中藥和食品中進(jìn)行了大量篩選，從而得到了一種保健組合物，其具有療效明確、使用方便、無(wú)毒副作用、協(xié)同作用明顯和易于大眾服用等優(yōu)點(diǎn)。具體實(shí)施方式下面將進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。需要指出的是，以下說(shuō)明僅僅是對(duì)本發(fā)明要求保護(hù)的技術(shù)方案的舉例說(shuō)明，并非對(duì)這些技術(shù)方案的任何限制。本發(fā)明的保護(hù)范圍以所附權(quán)利要求書(shū)記載的內(nèi)容為準(zhǔn)。實(shí)施例1配方組成：青錢(qián)柳葉9.0kg、苦丁茶1.0kg。制備方法：2.1按照上述配方準(zhǔn)確稱(chēng)取各味中藥，將原料分別破碎，過(guò)60目篩，以 除去原料細(xì)粉；2.2將青錢(qián)柳葉、綠茶、桑葉于混合機(jī)中混合約20分鐘至混合均勻，得混合物料；2.3按1.5g/袋進(jìn)行分裝，三角包狀，包裝材料為尼龍膜；實(shí)施例21、配方組成：青錢(qián)柳葉6.0kg、苦丁茶4.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例31、配方組成：青錢(qián)柳葉4.0kg、苦丁茶3.0kg、桑葉3.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例41、配方組成：青錢(qián)柳葉3.0kg、苦丁茶2.0kg、桑葉2.0kg、玉竹1.0kg、枸杞葉1.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例51、配方組成：青錢(qián)柳葉2.0kg、苦丁茶1.0kg、桑葉1.0kg、紅茶1.0kg、玉竹1.0kg、綠茶1.0kg、枇杷葉1.0kg、蕎麥葉1.0kg、龍眼葉1.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例61、配方組成：青錢(qián)柳葉1.0kg、綠茶1.0kg、陳皮1.0kg、山藥1.0kg、紅茶1.0kg、玄參1.0kg、西洋參1.0kg、銀杏葉1.0kg、絞股藍(lán)1.0kg、玉米須1.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。對(duì)比例1選取青錢(qián)柳葉10kg按實(shí)施例1中的制備方法制得的樣品作為對(duì)比例1。對(duì)比例2選取苦丁茶10kg按實(shí)施例1中的制備方法制得的樣品作為對(duì)比例2。對(duì)比例3選取青錢(qián)柳葉3.5kg、綠茶3.5kg、桑葉3.0kg按實(shí)施例1中的制備方法制得樣品作為對(duì)比例3本發(fā)明的范圍并不局限于以上實(shí)施例，上述實(shí)施例中的各組分均可選自市售商品，通過(guò)本領(lǐng)域常規(guī)的制劑工藝，可以制成藥劑學(xué)上所說(shuō)的多種劑型，例如膠囊劑、顆粒劑、粉劑、片劑、口服液、袋泡茶等。實(shí)驗(yàn)例1：降血糖實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1樣品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；鏈脲佐菌素，SIGMA公司產(chǎn)品，規(guī)格：1g/支，批號(hào)：SLBJ7785V；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；高脂飼料配方(79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油)，苦味酸等。1.2儀器W-80A漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠(chǎng)產(chǎn)品；電子天平，mettlerToledo，madebymettler-toledogroup，型號(hào)：pl303；LDZ5-2離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠(chǎng)；強(qiáng)生穩(wěn)豪血糖儀(強(qiáng)生(中國(guó))醫(yī)療器材有限公司)；BECKMANSynchronCX5全自動(dòng)血液生化分析儀(美國(guó))；酶標(biāo)儀，bio-rad(美國(guó))，型號(hào)：iMark；其他：臺(tái)秤、固定籠等。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD大鼠，體重160～180g，雄性，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(粵)2011-0015。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果2.1方法2.1.1大鼠飼料普通飼料：玉米粉80％，面粉15％，黃豆粉5％；高脂飼料：79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油。2.1.2造模：取160-180gSPF級(jí)SD大鼠110只，雄性，體重160～180g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對(duì)照組，以正常飼料喂養(yǎng)，其它各組先用高脂飼料喂養(yǎng)1個(gè)月，抽查血脂指標(biāo)明顯升高后，腹腔注射STZ35mg/kg誘發(fā)糖尿病模型(STZ臨用前用0.1mmol/LpH＝4.5的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液配成6mg/mL的溶液，且在60min內(nèi)用完)。于注射后第7d，斷尾采集空腹靜脈血，以血糖儀測(cè)定血糖，將血糖值大于等于16.7mmol/L視為建模成功。模型穩(wěn)定后，根據(jù)血脂血糖高低分組，口服給予受試藥物以及對(duì)照藥物，觀察各項(xiàng)指標(biāo)。2.1.3分組與給藥：選取狀態(tài)較好的100只造模成功動(dòng)物按照血糖值和體重均勻分成10組：每組10只，即II型糖尿病模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。正常不造模的SD大鼠10只為正常對(duì)照組(給予蒸餾水)。各組按相應(yīng)劑量口服給藥，每天給藥1次，給藥周期：4周(4W)。2.2測(cè)定指標(biāo)2.2.1使用血糖儀分別測(cè)定給藥前以及給藥后4W血糖值。2.2.2糖耐量試驗(yàn)：于實(shí)驗(yàn)結(jié)束前兩天進(jìn)行檢測(cè)；糖耐量檢測(cè)：動(dòng)物禁食約6小時(shí)，各組給予不同濃度受試樣品，15-20分鐘后經(jīng)口給予葡萄糖2.0g/kg，測(cè)定給葡萄糖后0、0.5、2小時(shí)的血糖值，觀察模型對(duì)照組與受試樣品組給葡萄糖后各時(shí)間點(diǎn)血糖曲線(xiàn)下面積的變化。血糖曲線(xiàn)下面積＝1/2×(0小時(shí)血糖值+0.5小時(shí)血糖值)×0.5+1/2×(2小時(shí)血糖值+0.5小時(shí)血糖值)×1.5＝0.25×(0小時(shí)血糖值+4×0.5小時(shí)血糖值+3×2小時(shí)血糖值)。2.3結(jié)果2.3.1對(duì)II型糖尿病大鼠血糖的影響由表1可見(jiàn)，與正常對(duì)照組比較，給藥前糖尿病造模各組大鼠血糖顯著升高，表明糖尿病模型造模成功。給藥4w后，S1-S6組血糖均有下降。表1.樣品對(duì)II型糖尿病大鼠血糖的影響()組別n給藥前血糖(mmol/L)給藥4W血糖(mmol/L)正常對(duì)照組105.72±1.205.64±1.31模型對(duì)照組1017.68±3.91##22.94±4.02##S1組1017.65±4.0315.56±3.94*S2組1017.72±4.1415.67±3.82*S3組1017.55±4.2815.32±3.68*S4組1017.64±3.9516.13±4.05*S5組1017.73±4.1016.21±3.62*S6組1017.66±4.0616.25±3.91*D1組1017.58±3.9518.23±4.86D2組1017.69±3.9818.61±5.02D3組1017.65±4.3118.84±5.32注：與正常對(duì)照組比較：##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.052.3.2對(duì)II型糖尿病大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果由表2可見(jiàn)，與模型對(duì)照組比較，S1-S6組的血糖曲線(xiàn)下面積均有下降。表2.樣品對(duì)II型糖尿病大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果()組別n血糖曲線(xiàn)下面積正常對(duì)照組1016.68±3.59模型對(duì)照組1036.91±6.14##S1組1025.17±5.63*S2組1025.95±5.70*S3組1024.88±5.36**S4組1026.41±5.91*S5組1025.97±5.81*S6組1026.10±6.25*D1組1032.57±6.52D2組1033.79±6.90D3組1034.83±6.78注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型對(duì)照組比較：p均大于0.05.3.結(jié)論：S1-S6對(duì)糖尿病模型大鼠具有明顯的降血糖作用，且S1-S6的組合物在降血糖方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實(shí)驗(yàn)例2：降血脂實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1藥品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、 S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；高脂飼料配方(79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油)，蒸餾水、苦味酸，等。1.2儀器W-80A漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠(chǎng)產(chǎn)品；電子天平，mettlerToledo，madebymettler-toledogroup，型號(hào)：pl303；LDZ5-2離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠(chǎng)；BECKMANSynchronCX5全自動(dòng)血液生化分析儀(美國(guó))；其他：臺(tái)秤、固定籠等。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD大鼠，體重160～180g，雄性，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(粵)2011-0015。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果2.1分組與方法取SPF級(jí)SD大鼠110只，雄性，體重160～180g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對(duì)照組，以正常飼料喂養(yǎng)；剩余給予高脂飼料喂養(yǎng)。連續(xù)喂養(yǎng)4周(通過(guò)定時(shí)抽血檢測(cè)血脂四項(xiàng)來(lái)確定造模是否成功)后，選取狀態(tài)較好的100只造模成功動(dòng)物按照血脂數(shù)值和體重均勻分成10組：每組10只，即高脂血癥模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。高脂飼料喂養(yǎng)4周后按以上分組情況開(kāi)始給藥并繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料(正常對(duì)照組喂養(yǎng)普通飼料)，每天1次，連續(xù)給藥4w。末次給藥后，隔夜禁食，次日稱(chēng)量體重后，水合氯醛麻醉，下腔靜脈采血后處死。離心后取上清液測(cè)血清中的生化指標(biāo)。2.2檢測(cè)指標(biāo)：(1)一般狀況觀察，并記錄每周體重。(2)各組大鼠血清脂質(zhì)指標(biāo)：每?jī)芍苎劭綮o脈叢取血，分離血清檢測(cè)： 總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。2.3結(jié)果2.3.1對(duì)血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響表3.造模成功均勻分組后大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)()注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型對(duì)照組比較：p均大于0.05.表4.給藥4W后各組大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)()注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.01由表3可見(jiàn)，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組喂高脂飼料4W后，大鼠血清TC、LDL-C顯著升高(p＜0.01)，TG明顯升高(p＜0.05)，表明高脂血癥大鼠模型造模成功。根據(jù)血脂水平均勻分成4組。由表4可見(jiàn)，給藥4W后，與模型對(duì)照組比較，S1-S6組能降低血清中TC、TG、LDL-C水平(p＜0.05或p＜0.01)。3.結(jié)論：S1-S6對(duì)高脂血癥模型大鼠有明顯的降血脂作用，且S1-S6的組合物在降血脂方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實(shí)驗(yàn)例3：降血壓實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1藥品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；蒸餾水，苦味酸，等。1.2儀器DKB-501A型超級(jí)恒溫水槽，為上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司產(chǎn)品；電熱恒溫干燥箱，為長(zhǎng)沙醫(yī)療器械廠(chǎng)產(chǎn)品；Powlab/4spML125型無(wú)創(chuàng)測(cè)壓系統(tǒng)(ML125/RNIBP，MLT1199BPTrans-ducer/CableKit)，澳大利亞埃德儀器有限公司產(chǎn)品；MP120-1電子天平，為上海第二天平儀器廠(chǎng)產(chǎn)品。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SHR大鼠，體重190～230g，雄性，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)：SCXK(京)2012-0001。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081，SPF級(jí)WISTAR雄性大鼠，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為：SCXK(京)2012-0001。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果將9-10周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)隨機(jī)分10組，每組10只，即高血壓模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。另取正常WISTAR大鼠10只為正常對(duì)照組(給予蒸餾水)。各組動(dòng)物分別灌胃給予各種劑量藥物，每天1次，共給藥4周。分別于給藥前以及給藥后4周以無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈測(cè)壓系統(tǒng)檢測(cè)大鼠尾動(dòng)脈血壓值(收縮壓，SAP，mmHg)。無(wú)創(chuàng)尾套法(NIBP)：將大鼠放入大鼠固定器內(nèi)，露出鼠尾。用紅外取暖器，溫度設(shè)置為38℃，照射加熱鼠尾大約10min后，鼠尾變軟，鼠尾動(dòng)脈充分?jǐn)U張。將其穿過(guò)加壓尾套并固定在鼠尾的根部，使大鼠尾動(dòng)脈與PowerlabML125/R無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈血壓測(cè)定分析系統(tǒng)的脈搏傳感器緊密接觸，同時(shí)觀測(cè)系統(tǒng)的脈搏波形，出現(xiàn)穩(wěn)定的脈搏波時(shí)即可開(kāi)始測(cè)定血壓。待動(dòng)物安靜后，選擇90～420BPM(大鼠加壓檔)給尾套充氣加壓，可見(jiàn)脈搏波逐漸減小至消失，然后尾套開(kāi)始放氣，鼠套壓力降低，當(dāng)壓力等于收縮壓時(shí)，開(kāi)始出現(xiàn)脈搏波，此點(diǎn)的血壓值即為鼠尾收縮壓。重復(fù)測(cè)量3次，取平均值。計(jì)算壓降值(血壓下降值)，給藥后SAP減去給藥前SAP得。結(jié)果見(jiàn)表5：表5樣品對(duì)SHR大鼠血壓(SAP，mmHg)的影響()注：與正常對(duì)照組比較：#為P＜0.01；與模型對(duì)照組比較：＊為P＜0.05.結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠血壓顯著升高，可見(jiàn)自發(fā)性高血壓大鼠模型成功。與模型對(duì)照組，S1-S6組在給藥4W能顯著降低SHR大鼠的血壓(P＜0.05)。3.結(jié)論：S1-S6樣品有顯著的降血壓作用，且S1-S6的組合物在降血壓方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。本
發(fā)明內(nèi)容僅僅舉例說(shuō)明了要求保護(hù)的一些具體實(shí)施方案，其中一個(gè)或更多個(gè)技術(shù)方案中所記載的技術(shù)特征可以與任意的一個(gè)或多個(gè)技術(shù)方案相組合，這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案也在本申請(qǐng)保護(hù)范圍內(nèi)，就像這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案已經(jīng)在本發(fā)明公開(kāi)內(nèi)容中具體記載一樣。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3