本發(fā)明涉及一種治療白血病的中藥及其應(yīng)用。

技術(shù)背景

白血病人們俗稱血癌，是一種破壞損傷造血干細(xì)胞很強(qiáng)烈的嚴(yán)重危及人類健康的惡性疾病。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，白血病的病因?qū)W已從群體醫(yī)學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)進(jìn)入分子生物學(xué)的研究。盡管許多因素被認(rèn)為和白血病發(fā)生有關(guān)，但人類白血病的確切病因至今未明。目前在白血病的發(fā)病原因方面，仍然認(rèn)為與感染，放射因素，化學(xué)因素，遺傳因素有關(guān)，臨床表現(xiàn)為貧血、出血、感染及各器官浸潤癥狀。白血病治療的方法有很多，大體可以分為西藥和中藥兩種治療手段，而西藥是目前患者經(jīng)常選用的治療方式，目前的治療方法主要有放療，化療，骨髓移植手術(shù)等西醫(yī)方法，放療或化療雖能殺死部分癌細(xì)胞，使病人癥狀暫時(shí)好轉(zhuǎn)或減輕，但在其殺傷癌細(xì)胞的同時(shí)，傷害了正常的免疫細(xì)胞白血球，損害了人體正氣，副作用大，給病人帶來難以忍受的痛苦，有些危重病人被迫中斷治療。西藥不但不能從根本上治好患者疾病，而且毒副作用太大并常常超過其療效，嚴(yán)重與人類日益綠色環(huán)保思想相背離，結(jié)果使許多慢性疾病在治療過程中，原發(fā)疾病未治好，而由于藥物的毒副作用卻又造成更多的疾病，甚至這些疾病的嚴(yán)重性超過原發(fā)疾病。更甚者，有些西藥的毒副作用是潛伏十幾年甚至是隔代發(fā)作的。其實(shí)，中藥對(duì)白血病治療好處多：中藥可誘導(dǎo)白血病細(xì)胞凋亡，促進(jìn)白血病細(xì)胞凋亡；促進(jìn)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化。有的中藥可以促進(jìn)白血病細(xì)胞向正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化，使白血病細(xì)胞改邪歸正，從而使白血病的治療達(dá)到一個(gè)很好的療效；對(duì)抗化療副作用。由于化療對(duì)患者有很大的毒副作用，而中醫(yī)藥能夠?qū)够煾弊饔?，促進(jìn)受化療損傷的消化道黏膜細(xì)胞、心肝腎及其他器官組織細(xì)胞功能的恢復(fù)，保護(hù)毛囊細(xì)胞，減少脫發(fā)，減少患者疼痛；保護(hù)造血功能。中醫(yī)藥還可以保護(hù)正常造血功能骨髓的恢復(fù)，防止化療藥物引起嚴(yán)重的骨髓抑制，減少輸血，減輕出血，緩解不良癥狀；恢復(fù)免疫功能。有的中醫(yī)藥還可以促進(jìn)正常免疫功能的恢復(fù)，減少感染合并癥，避免患者帶來更大的疼痛。

目前，很多患者往往過于重視西醫(yī)白血病的治療，從而忽略了中藥白血病治療方式，很可能能夠失去一個(gè)本來能夠恢復(fù)身體健康，甚至痊愈的機(jī)會(huì)

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種治療白血病的中藥及其應(yīng)用。

本發(fā)明提供的一種治療白血病的中藥，以重量份計(jì)，有效成分含有以下組分：半枝蓮10-30、石見穿20-30、生地榆50-80、苡仁5-20，忍冬藤10-25、昆布10-30、山豆根5-15，槐角10-20，胡麻仁5-15，白蚤休10-30，枳殼15-50，川樸30-60，北沙參5-20，麥冬15-25。 本發(fā)明提供的技術(shù)方案對(duì)白血病臨床上常有的貧血、發(fā)熱、感染、出血和肝脾、淋巴結(jié)腫大有很好的作用，可消除白血病細(xì)胞在骨髓或其他造血組織中的腫瘤性增生。病人連續(xù)服藥兩個(gè)月后，從第三個(gè)月開始，每月只需服藥7天(檢查血象正常，骨髓象緩解后)以鞏固療效4個(gè)月。四個(gè)月后則根據(jù)其白血病類型所屬以其身體內(nèi)在情況。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，對(duì)HL-60細(xì)胞和人PBMC生長具有很好的抑制活性，并且可以作為抗癌藥物使用；并且本發(fā)明中藥組合物制備簡單，基本無毒，原料易得，適于大眾化使用，具有很好的應(yīng)用前景。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

半枝蓮10份、石見穿20-30份、生地榆50-80份、苡仁5-2份0，忍冬藤10-25份、昆布10-30份、山豆根5-15份，槐角10-20份，胡麻仁5-15份，白蚤休10-30份，枳殼15-50份，川樸30-60份，北沙參5-20份，麥冬15-25份。

制備方法：取上述重量組分的各藥材，加藥材總重量的5倍的水，浸泡60分鐘，煎煮2次，每次3小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度1.1的浸膏，該相對(duì)密度是在60攝氏度下的檢測(cè)結(jié)果，加入乙醇至含醇量為75％(v/v)，靜置24小時(shí)，取上清液，回收乙醇濃縮，加水至1000ml，攪勻，分裝，流通蒸汽滅菌35min，即得合劑。

實(shí)施例2

半枝蓮30份、石見穿30份、生地榆80份、苡仁20份，忍冬藤25份、昆布30份、山豆根15份，槐角20份，胡麻仁15份，白蚤休30份，枳殼50份，川樸60份，北沙參20份，麥冬25份。

制備方法：取上述重量組分的各藥材，加藥材總重量的5倍的水，浸泡60分鐘，煎煮2次，每次3小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度1.1的浸膏，該相對(duì)密度是在60攝氏度下的檢測(cè)結(jié)果，加入乙醇至含醇量為75％(v/v)，靜置24小時(shí)，取上清液，回收乙醇濃縮，加水至1000ml，攪勻，分裝，流通蒸汽滅菌35min，即得合劑。

實(shí)施例3

半枝蓮25份、石見穿25份、生地榆70份、苡仁15份，忍冬藤20份、昆布25份、山豆根10份，槐角15份，胡麻仁10份，白蚤休25份，枳殼40份，川樸40份，北沙參15份，麥冬20份。

制備方法：取上述重量組分的各藥材，加藥材總重量的5倍的水，浸泡60分鐘，煎煮2次，每次3小時(shí)，濾過，合并濾液，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度1.1的浸膏，該相對(duì)密度是在60攝氏度下的檢測(cè)結(jié)果，加入乙醇至含醇量為75％(v/v)，靜置24小時(shí)，取上清液，回收乙醇濃縮，加水至1000ml，攪勻，分裝，流通蒸汽滅菌35min，即得合劑。

應(yīng)用試驗(yàn)例1

1、對(duì)HL-60細(xì)胞和人PBMC生長的影響

1.1接種HL-60細(xì)胞和人PBMC與96孔板，每孔2×10₄個(gè)細(xì)胞(100ul)，37℃、5％CO₂，條件下培養(yǎng)24h后，實(shí)驗(yàn)組一次加0.625、1.25、2.5、5.0、10.0mg/mL的中藥合劑，繼續(xù)分別培養(yǎng)24、48、72h后，終止培養(yǎng)，設(shè)只加培養(yǎng)液的對(duì)照組，每個(gè)劑量組設(shè)4個(gè)復(fù)孔。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前4h，每孔加入20ul MTT溶液(5g/L)，繼續(xù)孵育4h，終止培養(yǎng)，小心吸棄上清液，每孔加入150uL DMSO，震蕩10min，選擇570nm波長，在自動(dòng)酶聯(lián)檢測(cè)儀上測(cè)定各孔吸光度(A)值，重復(fù)實(shí)驗(yàn)3次，并計(jì)算其生長抑制率(CI)。

CI＝(陰性對(duì)照組A值-實(shí)驗(yàn)組A值)/陰性對(duì)照組A值×100％。

1.2流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定細(xì)胞凋亡率

收集0、2.5、5.0、10.0ug/mL中藥組合物處理48h的各組細(xì)胞，PBS洗滌2次，加入預(yù)冷的70％乙醇于-20℃固定24h，離心洗滌后加入200uL PI染液，50ul RNA酶，4℃避光放置20min，1500rpm離心5min。調(diào)整細(xì)胞濃度為1×10₅個(gè)/ml～1×10⁶個(gè)/ml，上流式細(xì)胞儀分析，激發(fā)光源為氬離子激光，激發(fā)波長為488nm。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析本實(shí)驗(yàn)結(jié)果應(yīng)用統(tǒng)計(jì)分析

軟件SPSS13.0處理，所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用x±s表示，組間比較采用單因素方差分析。

2結(jié)果

2.1中藥組合物對(duì)HL-60細(xì)胞及PBMC生長的影響

對(duì)照組HL-60細(xì)胞生長活躍，經(jīng)0.625、1.25、2.5、5.0、10.0mg/mL的中藥組合物合劑處理24、48、72h后，HL-60細(xì)胞生長均不同程度的減慢，并呈時(shí)間、濃度依賴性。在相同濃度下，培養(yǎng)72h中藥組合物對(duì)人PBMC幾乎無抑制作用，與HL-60細(xì)胞比較有顯著性差異(P<0.05)(見表1)。

表1 中藥組合物對(duì)HL-60細(xì)胞增殖的影響(x±s，n＝4)

與24h比較*p<0.05**p<0.01；與48h比較△p<0.05，△△p<0.01；與72h比較

▲p<0.05 ▲▲p<0.01

2.2流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HL-60細(xì)胞凋亡

HL-60細(xì)胞與不同濃度的中藥組合物作用48h后，經(jīng)流式細(xì)胞儀分析，結(jié)果顯示G₁期峰前均出現(xiàn)了代表細(xì)胞凋亡的亞二倍體峰，在一定濃度范圍內(nèi)隨著Houttuynoid E濃度增升高，HL-60細(xì)胞凋亡率升高，其中10.0ug/mL Houttuynoid E作用48h凋亡率達(dá)到(27.56±4.87)％(表2)。

表2 中藥組合物作用48h后對(duì)HL-60細(xì)胞凋亡率的影響(x±s，n＝3)

與陰性對(duì)照組比較*p<0.05，**p<0.01

結(jié)論：中藥組合物能夠抑制白血病細(xì)胞(HL-60細(xì)胞)增殖和誘導(dǎo)白血病細(xì)胞(HL-60細(xì)胞)凋亡，因此，可以用來對(duì)白血病進(jìn)行治療。