本發(fā)明涉及綠茶葉紅參干燥物及其制造方法，更詳細(xì)地，涉及抑制肥胖的效果優(yōu)秀的綠茶葉紅參干燥物及其制造方法。

背景技術(shù)：

一般情況下，紅參是指以人參為原材料，利用蒸氣或其他方法對(duì)未曬干的水參進(jìn)行蒸熟后曬干的水參或紅參，水參作為剛采沒多久的人參，在進(jìn)行常溫保管的情況下，因疏于管理而存在腐爛的憂慮，因此，以剝皮并干燥的白參的方式保管，或者以未剝皮而直接用水蒸氣蒸熟的紅參的方式保管。

紅參不僅可以長(zhǎng)期保存，且在制備過程中可產(chǎn)生對(duì)人體有益的成分，從而有助于解乏、增強(qiáng)免疫力、血液循環(huán)等，但隨著對(duì)健康的關(guān)注，對(duì)此的需要正處于逐漸增加的趨勢(shì)。

并且，紅參被公認(rèn)為具有抑制肥胖的功效，然而作為對(duì)此的現(xiàn)有技術(shù)，公開了韓國(guó)公開特許第10-2010-0013040號(hào)的“包含石榴提取物及紅參提取物的用于預(yù)防或治療糖尿病或肥胖的組合物”，其包含石榴提取物及紅參提取物。

最近，隨著預(yù)防由肥胖引起的成人病的必要性和對(duì)于健康的認(rèn)識(shí)的增加，有必要開發(fā)利用紅參來更加提高肥胖效果的技術(shù)，為此，需要更為具體且容易的紅參的制備方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為了解決如上所述的現(xiàn)有的問題，本發(fā)明的目的在于，提供便于 制備且肥胖效果優(yōu)秀的紅參干燥物。

為了解決如上所述的問題，根據(jù)本發(fā)明的一實(shí)施方式，提供抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法，其特征在于，包括：利用一同燒開水和綠茶葉來產(chǎn)生的水蒸氣，對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟的步驟；對(duì)蒸熟后的上述水參或上述紅參進(jìn)行干燥的步驟；對(duì)干燥后制成的紅參進(jìn)行冷凍干燥的步驟；以及將冷凍干燥后的上述紅參制成粉末的步驟，對(duì)上述水參或上述紅參進(jìn)行蒸熟的步驟包括以下過程：上述綠茶葉相對(duì)于上述水的重量百分比為0.001～50％，以92～98℃的溫度第一次燒開上述水和上述綠茶葉，第一次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，接著，以77～83℃的溫度第二次燒開上述水和上述綠茶葉，第二次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，接著，以92～98℃的溫度第三次燒開上述水和上述綠茶葉，第三次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)。

根據(jù)本發(fā)明的另一實(shí)施方式，提供抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法，其特征在于，包括：利用一同燒開水和綠茶葉來產(chǎn)生的水蒸氣，對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟的步驟；對(duì)蒸熟后的上述水參或上述紅參進(jìn)行干燥的步驟；用水提取如上所述地干燥后制成的上述紅參的步驟；以及對(duì)經(jīng)上述提取而得的液體進(jìn)行濃縮來制成粉末的步驟，對(duì)上述水參或上述紅參進(jìn)行蒸熟的步驟包括以下過程：上述綠茶葉相對(duì)于上述水的重量百分比為0.001～50％，以92～98℃的溫度第一次燒開上述水和上述綠茶葉，第一次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，接著，以77～83℃的溫度第二次燒開上述水和上述綠茶葉，第二次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，接著，以92～98℃的溫度第三次燒開上述水和上述綠茶葉，第三次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，在用水提取上述紅參的步驟中，按上述紅參和上述綠茶葉的混合物和水的重量百分比為1:3～30，在提取機(jī)中裝滿上述紅參和上述綠茶葉的混合物和水之后，在80～95℃的溫度下進(jìn)行2～4次加熱提取，加熱提取的總時(shí)間為8～12小時(shí)，上述紅參和上述綠茶葉的重量百分比為1:0.01～1.5。

根據(jù)本發(fā)明的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物及其制備方法，可提供便于制備且肥胖效果優(yōu)秀的紅參干燥物。

附圖說明

圖1為示出本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法的流程圖。

圖2為用于在本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法中說明蒸熟過程的一例的圖。

圖3為用于在本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法中說明蒸熟過程的另一例的圖。

圖4為示出本發(fā)明第二實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法的流程圖。

圖5至圖14為用于說明本發(fā)明的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物及其制備方法的效果的圖。

圖15為本發(fā)明的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的試驗(yàn)報(bào)告的圖像。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明可通過多種變形來具有多種實(shí)施例，因此，在附圖中例示出特定實(shí)施例來進(jìn)行詳細(xì)說明。需要理解的是，這種特定實(shí)施例并不用于限制本發(fā)明，而是包括本發(fā)明的技術(shù)思想所包括的所有變更、等同技術(shù)方案乃至代替技術(shù)方案。

以下，參照附圖對(duì)本發(fā)明的實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)說明，與附圖文字無關(guān)，對(duì)于相同或相對(duì)應(yīng)的結(jié)構(gòu)要素賦予相同的附圖標(biāo)記，并省略對(duì)此的重復(fù)說明。

本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物利用一同燒開水和綠茶葉來產(chǎn)生的水蒸氣，對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟，并對(duì)蒸熟后的上述水參或上述紅參進(jìn)行干燥，對(duì)干燥后制成的紅參進(jìn)行冷凍干燥，并將冷凍干燥后的上述紅參制成粉末。此時(shí)，可以僅對(duì)紅參進(jìn)行冷凍 干燥來制成粉末，或者與綠茶葉一同對(duì)蒸熟的結(jié)果物進(jìn)行冷凍干燥來將冷凍干燥的紅參和綠茶葉一同制成粉末。在將綠茶葉與紅參一同制成粉末的情況下，在蒸熟的過程中，由于其中含有新產(chǎn)生的人參皂苷，因此可提高人參皂苷的獲得率。

綠茶葉相對(duì)于水的重量百分比可為0.001～50％，水和綠茶葉為了產(chǎn)生水蒸氣，例如，能夠以92～98℃的溫度第一次燒開上述水和上述綠茶葉，第一次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，接著，以77～83℃的溫度第二次燒開上述水和上述綠茶葉，第二次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，接著，以92～98℃的溫度第三次燒開上述水和上述綠茶葉，第三次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)。并且，為了對(duì)蒸熟后的水參或紅參進(jìn)行干燥，例如，能夠以55～65℃的溫度第一次干燥，上述第一次干燥的時(shí)間為8～12小時(shí)，接著，以45～55℃的溫度第二次干燥，上述第二次干燥的時(shí)間為8～12小時(shí)，作為一例，能夠以使水分含量成為12～16％的方式干燥。

本發(fā)明第二實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物利用一同燒開水和綠茶葉來產(chǎn)生的水蒸氣，對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟，對(duì)蒸熟后的上述水參或上述紅參進(jìn)行干燥，用水提取如上所述地干燥后制成的上述紅參，并對(duì)提取的上述液進(jìn)行濃縮來制成粉末，與本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物對(duì)紅參進(jìn)行冷凍不同，用水提取紅參，并對(duì)經(jīng)上述提取而得的液體進(jìn)行濃縮，在這一點(diǎn)上存在差異。并且，可以用水僅提取紅參，或者與紅參一同用水提取蒸熟的結(jié)果物綠茶葉，并對(duì)這種經(jīng)上述提取而得的液體進(jìn)行濃縮來制成粉末。

與本發(fā)明的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法一同更為詳細(xì)地說明本發(fā)明的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物。

圖1為示出本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法的流程圖。

如圖1所示，本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法可包括：步驟S11，利用一同燒開水和綠茶葉來產(chǎn)生的水蒸氣，對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟；步驟S12，對(duì)蒸熟后的水參或紅參進(jìn)行干燥；步驟S13，對(duì)干燥后制成的紅參進(jìn)行冷凍干燥的步驟；以及步驟S14，將冷凍干燥后的上述紅參制成粉末。并且，冷凍干燥步驟S13及粉末化的步驟S14可以僅對(duì)紅參進(jìn)行冷凍干燥來制成粉末，或者與紅參一同對(duì)蒸熟過的綠茶葉進(jìn)行冷凍干燥來將冷凍干燥的紅參和綠茶葉一同制備成粉末。

在對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟的步驟S11中，綠茶葉相對(duì)于水的重量百分比可以為0.001～50％，作為一例，可以為1.67％，例如，可在的水中放入50g的綠茶葉來進(jìn)行混合。其中，綠茶葉相對(duì)于水的重量百分比小于0.001％的情況下，綠茶的主要成分兒茶素極少在水中涌出，從而呈現(xiàn)出與水相同的效果，無法獲得所需的功效，綠茶葉相對(duì)于水的重量百分比大于50％的情況下，在被干燥的綠茶葉吸收水并燒開方面存在困難。

對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟的步驟S11可包括以92～98℃的溫度第一次燒開水和綠茶葉，上述第一次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，接著，以77～83℃的溫度第二次燒開上述水和上述綠茶葉，第二次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)，接著，以92～98℃的溫度第三次燒開上述水和上述綠茶葉，第三次燒開時(shí)間為2～4小時(shí)的過程，然而作為一例，能夠以95℃的溫度第一次燒開上述水和上述綠茶葉，上述第一次燒開時(shí)間為3小時(shí)，接著，以80℃的溫度第二次燒開上述水和上述綠茶葉，上述第二次燒開時(shí)間為3小時(shí)，接著，以95℃的溫度第三次燒開上述水和上述綠茶葉，上述第三次燒開時(shí)間為3小時(shí)。這種蒸熟的時(shí)間范圍和溫度范圍為考慮到Re、Rb2、Rg3、Rg5等生成效率和經(jīng)濟(jì)性而決定的，且也是考慮到防止產(chǎn)生丙烯酰胺等致癌物而決定的。

如圖2所示，對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟的步驟S11可在蒸熟機(jī)10中 放入水和綠茶葉，并借助利用加熱裝置20加熱蒸熟機(jī)10來產(chǎn)生的水蒸氣將位于蒸熟機(jī)10的內(nèi)部的柳條盤11的水參或紅參蒸熟。其中，蒸熟機(jī)10可以為了開閉而設(shè)有能夠拆裝的蓋12，可以在蓋12設(shè)有用于排出水蒸氣的排出口13。

如圖3所示，對(duì)水參或紅參蒸熟的步驟S11可在加熱容器30中放入水和綠茶葉，并向蒸熟容器40供給利用加熱裝置32加熱加熱容器30來產(chǎn)生的水蒸氣，從而將位于蒸熟容器40的內(nèi)部的柳條盤41的水參或紅參蒸熟。其中，蒸熟容器40可以為了開閉而設(shè)有能夠拆裝的蓋42，可以在蓋42設(shè)有用于排出水蒸氣的排出口43。

對(duì)蒸熟后的水參或紅參進(jìn)行干燥的步驟S12可包括使用干燥機(jī)或通過日光干燥來以55～65℃的溫度對(duì)紅參或水參進(jìn)行第一次干燥，上述第一次干燥的時(shí)間為8～12小時(shí)，接著，以45～55℃的溫度第二次干燥，上述第二次干燥的時(shí)間為8～12小時(shí)的過程，作為一例，以60℃的溫度對(duì)蒸熟后的水參或紅參進(jìn)行第一次干燥，上述第一次干燥的時(shí)間為10小時(shí)，接著，以50℃的溫度進(jìn)行第二次干燥，上述第二次干燥的時(shí)間為10小時(shí)。因此，對(duì)通過第一次干燥來蒸熟的水參或紅參的表面部分進(jìn)行干燥，并通過第二次干燥來使蒸熟后的水參或紅參的內(nèi)部水分慢慢涌出。

對(duì)蒸熟后的水參或紅參進(jìn)行干燥的步驟S12可以對(duì)蒸熟后的水參或紅參進(jìn)行干燥，使上述水參或上述紅參的水分含量成為12～16％，作為一例，可以對(duì)蒸熟后的水參或紅參進(jìn)行干燥，使蒸熟后的水參或紅參的水分含量成為14％。

將冷凍干燥后的紅參制成粉末的步驟S14可同時(shí)將紅參干燥物的主根(同體)、支根(主枝)、須根(主枝中的分枝)制成粉末。這是因?yàn)榉鬯橹鞲?、支根及須根時(shí)，他們的粒子均勻，且沒有成分變化。

如圖4所示，本發(fā)明第二實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法可包括：步驟S21，利用一同燒開水和綠茶葉來產(chǎn)生的水蒸氣，對(duì)水參或紅參進(jìn)行蒸熟；步驟S22，對(duì)蒸熟后的水參或紅參進(jìn)行干燥；步驟S23，用水提取如上所述地干燥后制成的上述紅參；以及步驟S24，對(duì)經(jīng)上述提取而得的上述液體進(jìn)行濃縮來制成粉末，與本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法對(duì)紅參進(jìn)行冷卻不同，用水提取紅參，并對(duì)經(jīng)上述提取而得的液體進(jìn)行濃縮，在這一點(diǎn)上存在差異，除此之外，與本發(fā)明第一實(shí)施例的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的制備方法相同。并且，提取步驟S23及粉末化步驟S24可以用水僅提取紅參，或者與紅參一同以水提取蒸熟的結(jié)果物綠茶葉，并對(duì)這種經(jīng)上述提取而得的液體進(jìn)行濃縮來制成粉末。

在用水提取紅參的步驟S23中，可將經(jīng)過干燥制成的上述紅參和上述綠茶葉的混合物和水的重量百分比為1:3～30放入提取機(jī)，在80～95℃溫度下進(jìn)行2～4次加熱提取，加熱提取的總時(shí)間為8～12小時(shí)，作為一例，可在提取機(jī)放入紅參300g和水6L，并在90℃溫度下進(jìn)行3次加熱提取，加熱提取的總時(shí)間為10小時(shí)，從而制備18L的提取液。

用水提取紅參的步驟S23中，可將經(jīng)過干燥制成的上述紅參和上述綠茶葉的混合物和水的重量百分比為1:3～30放入提取機(jī)，在80～95℃溫度下進(jìn)行2～4次加熱提取，加熱提取的總時(shí)間為8～12小時(shí)，紅參和綠茶葉的重量百分比可以為1:0.01～1.5，作為一例，可在提取機(jī)放入紅參300g和水6L，并在90℃溫度下進(jìn)行3次加熱提取，加熱提取的總時(shí)間為10小時(shí)，從而制備18L的提取液。此時(shí)，綠茶葉可以為完成蒸熟步驟S21的結(jié)果物，進(jìn)而，可以為全部完成蒸熟步驟S21和干燥步驟S22的結(jié)果物。

對(duì)經(jīng)上述提取而得的液體進(jìn)行濃縮來制成粉末的步驟S24使紅參或紅參和綠茶葉的提取液在濃縮機(jī)中濃縮之后，通過冷凍或噴霧干燥并利用粉碎機(jī)來制成粉末。

對(duì)本發(fā)明的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物及其制備方法的作用進(jìn)行說明如下。

實(shí)施例1

向蒸參機(jī)放入水3L之后，將干燥的綠茶葉50g均勻混入水中，然后將清洗后的水參放入蒸參機(jī)的柳條盤，并利用燒開后產(chǎn)生的水蒸氣進(jìn)行蒸熟。此時(shí)，前3個(gè)小時(shí)以95℃的溫度進(jìn)行加熱，之后的3個(gè)小時(shí)以80℃的溫度進(jìn)行加熱，最后的3個(gè)小時(shí)以95℃的溫度進(jìn)行加熱，從而進(jìn)行蒸熟。以這種方式蒸熟的水參或紅參在干燥機(jī)中以60℃和50℃的溫度分別干燥10小時(shí)之后，以使水分含量成為14％的方式進(jìn)行日光干燥，之后同時(shí)對(duì)紅參干燥物的主根、支根及須根進(jìn)行冷凍干燥來制成粉末。

比較例1

在實(shí)施例1中除綠茶葉之外，以相同的方法制成了粉末。

實(shí)施例1和比較例1的皂苷含量分析結(jié)果如以下表1所示，使用LC/MS來分析了皂苷含量。

表1

根據(jù)表1，可知與比較例1相比，本發(fā)明的實(shí)施例1的Rh1、Rg3(S)、Rg3(R)、Kk1、Rg5等大有增加，這表示與比較例1相比，本發(fā)明的實(shí)施例1可發(fā)揮出優(yōu)秀的肥胖效果的根據(jù)。

并且，為了驗(yàn)證本發(fā)明的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物及其制備方法抑制肥胖的功效，對(duì)上述實(shí)施例1進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)。

1.實(shí)驗(yàn)材料

1)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和飼料

從多勿科技公司(韓國(guó)大田)接收24只C57BL/6J類小鼠(25g公鼠)之后，在開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)食用前一周，為了使其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境而提供普通的固體飼料。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在結(jié)束適應(yīng)期間之后，利用隨機(jī)分組法來配置成4組，每一組6只。實(shí)驗(yàn)組分為正常組、對(duì)照組、綠茶葉紅參干燥物(實(shí)施例1)20mg組、綠茶葉紅參干燥物(實(shí)施例1)40mg組。向除正常組之外的所有實(shí)驗(yàn)組供給的高脂肪飼料(high fat diet)均添加Lard來自由提供增加了45％千卡脂肪(Kcal fat)熱量的改性AIN 76A純化的飲食(Modified AIN 76A purified rodent diet)(45％千卡脂肪)。向正常組自由提供AIN 93G純化的飲食(AIN 93G purified rodent diet)基本飼料。

2)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組的設(shè)定

整個(gè)實(shí)驗(yàn)組分為4組，且分為正常組、對(duì)照組、綠茶葉紅參干燥物20mg組及綠茶葉紅參干燥物40mg組。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物組和食用飼料

a)正常組(N)：基本飼料(AIN 93G diet)

b)對(duì)照組(Con)：高脂肪(High fat)(45％千卡脂肪)飼料

c)綠茶葉紅參干燥物(實(shí)施例1)20mg給藥組：高脂肪(45％千卡脂肪)diet+綠茶葉紅參干燥物(實(shí)施例1)20mg給藥組

d)綠茶葉紅參干燥物(實(shí)施例1)40mg給藥組：高脂肪(45％千卡脂肪)diet+綠茶葉紅參干燥物(實(shí)施例1)40mg給藥組

3)綠茶葉紅參干燥物的制備及給藥

根據(jù)上述實(shí)施例1來調(diào)劑用于實(shí)驗(yàn)的綠茶葉紅參干燥物。在向綠茶葉紅參干燥物20mg組給藥1g/Kg(B.W.)(120mg/1.2ml D.W)的所調(diào)制的綠茶葉紅參干燥物，向綠茶葉紅參干燥物40mg組給藥2g/kg (B.W.)(240mg/2.4ml D.W.)的所調(diào)制的綠茶葉紅參干燥物之前，直接進(jìn)行稀釋來分別實(shí)施了0.2ml或0.4ml的口服給藥。向正常組和對(duì)照組口服給藥相同量的蒸餾水。

2.實(shí)驗(yàn)方法

1)觀察體重的變化

以開始實(shí)驗(yàn)食用的天為基準(zhǔn)，以一周為間隔，在上述10點(diǎn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重，并在測(cè)定共六周之后，測(cè)定了體重的變化量。

2)食物攝入量與食用效率

以一周為間隔，共六周在規(guī)定時(shí)間點(diǎn)測(cè)定了實(shí)驗(yàn)食物攝入量。食用效率以食物攝入量除以體重增加量的方式進(jìn)行了計(jì)算。食用效率為體重增加量(g)除以食物攝入量(g)。

3)所要分析的飼料的采取及處理

在結(jié)束實(shí)驗(yàn)之后，使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物絕食12小時(shí)，之后在乙醚麻醉?xiàng)l件下切開腹部和胸腔，并從心臟中采集血液。使所采集的血液凝固之后，在3000rpm條件下進(jìn)行20分鐘的離心分離來分離血清，并將此利用于分析血清脂及肥胖相關(guān)激素的濃度中。在深凍冰箱(Deep Freezer)中保管分析前的血液。采取血液后截肢所有動(dòng)物的附睪和腎臟周圍的脂肪組織，并測(cè)定各個(gè)的脂肪重量。之后，一部分動(dòng)物在被切斷下大靜脈之后向左心房注入生理鹽水，并進(jìn)行了5分鐘的放血。在放出所有血液之后，重新通過左心房注入固定液(Bouins solution)來進(jìn)行了灌注(perfusion)固定。從被固定的動(dòng)物中截取大腦、胃腸、肝、胰腺及脂肪組織來利用在制造石蠟(paraffin)切片，而為了制造凍結(jié)切片，向包含20％蔗糖(sucrose)的固定液中重新放入一部分組織(大腦、肝及附睪周圍脂肪)來進(jìn)行后固定。

4)觀察脂肪增加量和脂肪細(xì)胞的大小

在實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后，測(cè)定從實(shí)驗(yàn)組中截肢的附睪周圍脂肪和腎臟周 圍脂肪的重量，并測(cè)定了脂肪增加量的變化。利用Bouins solution來固定一部分附睪周圍脂肪組織之后，在20％蔗糖浸泡一夜，之后制造20um的凍結(jié)節(jié)片，并利用自由浮動(dòng)方法(free floating method)來執(zhí)行油紅O(Oil red O)染色，并通過觀察脂肪細(xì)胞的大小來觀察了抗肥胖效果。

5)觀察基于油紅O染色的肝組織內(nèi)脂質(zhì)的組織學(xué)變化

在結(jié)束實(shí)驗(yàn)之后，截取各組的肝組織，并放入波恩氏溶液(Bouin’s solution)和20％蔗糖溶液一夜來固定之后，利用凍結(jié)切片機(jī)切割成20um的厚度，之后利用自由浮動(dòng)方法來執(zhí)行油紅O染色，并通過觀察各組織內(nèi)脂質(zhì)的組織學(xué)變化來觀察了抗肥胖效果。

3.資料分析

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析利用兼容windows操作系統(tǒng)的社會(huì)科學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件包12.0(SPSS 12.0，由美國(guó)SPSS公司推出)來算出了平均標(biāo)準(zhǔn)值，且適用了單因素方差分析(one-way ANOVA)。為了驗(yàn)證各組之間的差異，執(zhí)行非配對(duì)t檢驗(yàn)(non-paired t-test)，而統(tǒng)計(jì)學(xué)重要水準(zhǔn)設(shè)定成p<0.05。

4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果

(1)體重增加量

在圖5中呈現(xiàn)出了6周的實(shí)驗(yàn)期間內(nèi)的總體重增加量，并在圖6中呈現(xiàn)出了不同周的體重變化。在食用基本飼料的正常組中，每只小鼠的總體重增加量增加了5.42±1.43g(比實(shí)驗(yàn)開始前增加22.6％)，在食用高脂肪飼料的對(duì)照組中，每只小鼠的總體重增加量增加了8.94±3.01g(比實(shí)驗(yàn)開始前增加37.9％)，從而與正常組相比增加了64.9％。食用高脂肪飼料并服用肥胖相關(guān)綠茶葉紅參干燥物(ORG，obesity related red ginseng day matter)20mg和40mg的綠茶葉紅參干燥物20mg組和綠茶葉紅參干燥物40mg組中，增加量分別增加了6.69±1.53g(比實(shí)驗(yàn)開始前增加32％)和6.13±1.20g(比實(shí)驗(yàn)開始前增加28.3％)，從而與對(duì)照組相比分別減少了25.1％和31.4％。不同周的體重變化在綠茶葉紅參干燥物20mg組和40mg組中呈現(xiàn)出從實(shí)驗(yàn)開始1-2周起，比 對(duì)照組下降的傾向。

(2)食物攝入量和食用效率

在圖7和表2中呈現(xiàn)出了6周的實(shí)驗(yàn)期間內(nèi)不同實(shí)驗(yàn)組的每只每天食物攝入量，在圖8中呈現(xiàn)出每只在不同周的每天的食物攝入量的變化。在食用基本飼料的正常組中，每只小鼠每日攝入量為3.06±0.16g，而在食用高脂肪飼料的對(duì)照組中，每只小鼠每日攝入量為2.72±0.14g，這與正常組相比，呈現(xiàn)出12.5％的顯著(p<0.05)性的減少。食用高脂肪飼料并服用綠茶葉紅參干燥物20mg的組中的每只小鼠每日攝入量為2.31±0.27g，這與對(duì)照組相比，雖然獲得了15.0％顯著(p<0.05)性的增加，但在服用綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，每只小鼠每日攝入量為2.81±0.27g，這與對(duì)照組相比增加了3.3％。

在表2中呈現(xiàn)出6周的實(shí)驗(yàn)期間內(nèi)的每只小鼠食用效率。正常組的食用效率為0.042、對(duì)照組的食用效率為0.077，對(duì)照組大于正常組，而在綠茶葉紅參干燥物20mg組和綠茶葉紅參干燥物40mg組中，分別為0.008和0.007，這與對(duì)照組相比減少。

表2

肥胖相關(guān)綠茶葉紅參干燥物對(duì)食用高脂肪的小鼠的每日體重、食物攝入量、食用效率的作用。

1)值意味著±SD

2)正常組和對(duì)比組有明顯的差別；##p<0.01.*，p<0.05；**，p<0.01；***p<0.001

(3)附睪周圍脂肪和腎臟周圍脂肪重量的增加量

在圖9及圖10中呈現(xiàn)出了6周的實(shí)驗(yàn)期間內(nèi)附睪和腎臟周圍脂肪的總重量，附睪周圍脂肪和腎臟周圍正方的各個(gè)重量如圖11所示。在食用基本飼料的正常組中，每只小鼠的附睪和腎臟周圍脂肪重量的總增加量為0.45±0.138g，在食用高脂肪飼料的對(duì)照組中，每只小鼠的附睪和腎臟周圍脂肪重量的總增加量為0.85±0.385g，這與正常組相比增加了88.0％(p<0.01)。在食用高脂肪飼料并服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，附睪和腎臟周圍脂肪重量的總增加量分別為0.54±0.138g和0.58±0.142g，這與對(duì)照組相比，綠茶葉紅參干燥物20mg組減少了36.5％，綠茶葉紅參干燥物40mg組減少了31.8％，然而無法觀察出顯著性。

正常組的附睪周圍脂肪的重量為0.39±0.105g，對(duì)照組的附睪周圍脂肪的重量為0.66±0.278g，這與正常組相比顯示出了69.2％的顯著增加(p<0.05)。在食用高脂肪飼料并服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，附睪周圍脂肪的重量分別為0.43±0.090g和0.49±0.119g，這與對(duì)照組相比雖然有所減少，但無法觀察出顯著性。正常組的腎臟周圍脂肪的重量為0.06±0.032g，對(duì)照組的腎臟周圍脂肪的重量為0.19±0.108g，這與正常組相比顯著增加67％(p<0.05)。在食用高脂肪材料并服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg組中，腎臟周圍脂肪的重量分別為0.10±0.049g和0.09±0.099g，這與對(duì)照組相比雖然有所減少，但僅在綠茶葉紅參干燥物40mg組中觀察出顯著性(p<0.05)。

(4)基于油紅O脂肪染色的附睪脂肪組織大小變化

對(duì)附睪周圍脂肪組織實(shí)施油紅O染色并觀察脂肪細(xì)胞后，進(jìn)行拍攝來呈現(xiàn)于圖12。與正常組相比，脂肪細(xì)胞的大小在對(duì)照組有所增加， 在食用高脂肪飼料并服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，脂肪細(xì)胞的大小與對(duì)照組相比有所減少。若在綠茶葉紅參干燥物20mg組和綠茶葉紅參干燥物40mg組中比較脂肪細(xì)胞的大小，則無法觀察出明顯的差異。

(5)基于油紅O脂質(zhì)染色的肝組織的脂質(zhì)變化

對(duì)肝組織實(shí)施油紅O染色來觀察脂質(zhì)粒子后，進(jìn)行拍攝肝組織來呈現(xiàn)于圖13和圖14。與正常組相比，肝細(xì)胞內(nèi)被油紅O染色的脂質(zhì)粒子在對(duì)照組中有所增加，且脂質(zhì)粒子的大小也有所增加。并且，在染色性方面，正常組為黃橙色(yellowish orange)色，食用高脂肪飼料的對(duì)照組為橙紅色(reddish Orange)，因此，脂質(zhì)的含量更多。與對(duì)照組相比，在食用高脂肪飼料并服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg組中觀察出粒子的大小非常小的脂質(zhì)，而在兩組之間，在綠茶葉紅參干燥物20mg組中觀察出少于綠茶葉紅參干燥物40mg組的脂質(zhì)粒子。

像這樣，利用本發(fā)明的綠茶葉紅參干燥物來執(zhí)行抗肥胖效果的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，并觀察體重的變化、肥胖相關(guān)血清內(nèi)脂質(zhì)和激素的濃度變化及胃腸道和腦組織內(nèi)激素分泌細(xì)胞的表達(dá)等，由此觀察與抗肥胖相關(guān)功能性后得出如下結(jié)論。

與對(duì)照組相比，體重增加量在綠茶葉紅參干燥物20mg組和綠茶葉紅參干燥物40mg組中分別減少25.1％和31.4％。在綠茶葉紅參干燥物20mg組和綠茶葉紅參干燥物40mg組中，食用效率分別為0.008和0.007，這與對(duì)照組相比有所減少。與對(duì)照組相比，綠茶葉紅參干燥物20mg組的附睪和腎臟周圍脂肪總重量減少了36.5％，綠茶葉紅參干燥物40mg組的附睪和腎臟周圍脂肪總重量減少了31.8％。與對(duì)照組相比，服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組的腎臟周圍脂肪的重量相對(duì)減少，僅在綠茶葉紅參干燥物40mg組中觀察出顯著性。與對(duì)照組相比，附睪周圍脂肪組織的大小在服用綠茶葉紅參干燥 物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中有所減少，而與對(duì)照組相比，肝細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)粒子在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中觀察出脂質(zhì)粒子的大小非常小的脂質(zhì)。

此外，利用本發(fā)明的綠茶葉紅參干燥物來觀察與血清內(nèi)脂肪相關(guān)蛋白質(zhì)和激素的變化的結(jié)果如下。與對(duì)照組相比，在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，血清內(nèi)瘦素(leptin)的濃度分別為1130.8±39.6pg/ml和1823.7±107.3pg/ml，這與對(duì)照組相比有所減少。與對(duì)照組相比，在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，血清內(nèi)脂聯(lián)素(adiponectin)的濃度分別為12.06±0.46μl/ml和13.44±0.54μl/ml，有所增加，然而無法觀察出顯著性。與對(duì)照組(52.4±0.9μl U/ml)相比，在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，血清內(nèi)胰島素(insulin)的濃度分別為20.1±0.1μl U/ml和40.6±0.8μl U/ml，有所減少，而在兩組之間，在綠茶葉紅參干燥物20mg組比綠茶葉紅參干燥物40mg更加減少。

并且，血清內(nèi)生化指標(biāo)的結(jié)果如下。與對(duì)照組相比，在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，血清內(nèi)甘油三酯(triglyceride)的濃度分別為257.2±11.6mg/dl和145.3±23.7mg/dl，僅有綠茶葉紅參干燥物40mg組比對(duì)照減少，然而無法觀察出顯著性。與對(duì)照組相比，在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，血清內(nèi)總膽固醇(cholesterol)的濃度分別為138.4±2.8mg/dl和89.5±3.1mg/dl，僅在綠茶葉紅參干燥物40mg組中有所減少，然而無法觀察出顯著性。與對(duì)照組(101.3±1.7mg/dl)相比，在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，血清內(nèi)葡萄糖(glucose)的濃度分別為83.8±4.4mg/dl和127.1±2.1mg/dl，僅在綠茶葉紅參干燥物20mg組中以具有顯著性(p<0.05)的方式減少。

并且，基于肥胖和食欲相關(guān)因子的免疫組織化學(xué)染色的形態(tài)學(xué)觀察的結(jié)果如下。在胰島內(nèi)胰島素分泌細(xì)胞方面，與對(duì)照組相比，服用 綠茶葉紅參干燥物20mg的組比對(duì)照組或綠茶葉紅參干燥物40mg呈現(xiàn)出更強(qiáng)的陽性反應(yīng)，由此認(rèn)定減少胰島素的分泌量。在胰島內(nèi)GLP分泌細(xì)胞方面，與對(duì)照組相比，在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中呈現(xiàn)出低于對(duì)照組的反應(yīng)，由此認(rèn)定通過GLP-1的分泌來抑制食物攝入量。與對(duì)照組相比，在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中，胃的體內(nèi)部饑餓素(ghrelin)分泌細(xì)胞呈現(xiàn)出微弱的免疫染色反應(yīng)，尤其在綠茶葉紅參干燥物40mg組中呈現(xiàn)出更為微弱的免疫染色反應(yīng)，由此認(rèn)定通過促進(jìn)饑餓素的排放來干預(yù)體重調(diào)節(jié)。間腦的NPY分泌神經(jīng)細(xì)胞在服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組中與正常組類似地呈現(xiàn)出微弱的免疫染色反應(yīng)，從而認(rèn)定與對(duì)照組相比，促進(jìn)NPY的分泌來干預(yù)食欲的調(diào)節(jié)。與對(duì)照組或綠茶葉紅參干燥物40mg組相比，綠茶葉紅參干燥物20mg的間腦的食欲素(orexin)分泌神經(jīng)細(xì)胞微弱地染色，由此認(rèn)定促進(jìn)食欲素的分泌來調(diào)節(jié)食欲誘發(fā)。

并且，對(duì)基于與胃的功能相關(guān)的腸內(nèi)分泌細(xì)胞的免疫組織化學(xué)染色的形態(tài)學(xué)觀察的結(jié)果如下。胃的幽門內(nèi)胃泌素(gastrin)分泌細(xì)胞由于綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg比對(duì)照組呈現(xiàn)出微弱的染色反應(yīng)，因此認(rèn)定刺激胃酸分泌及促進(jìn)胰島內(nèi)內(nèi)分泌細(xì)胞的分泌功能和發(fā)達(dá)。胃的幽門內(nèi)5-羥色胺(serotonin)分泌細(xì)胞由于服用綠茶葉紅參干燥物20mg和綠茶葉紅參干燥物40mg的組比對(duì)照組呈現(xiàn)出微弱的免疫染色反應(yīng)，由此認(rèn)為干預(yù)胃腸活性(胰腺的分泌刺激和重炭酸鹽的分泌)。由于綠茶葉紅參干燥物20mg組比對(duì)照組或綠茶葉紅參干燥物40mg組呈現(xiàn)出微弱的免疫反應(yīng)，因此，胃的幽門內(nèi)CGRP分泌細(xì)胞被認(rèn)定為干預(yù)胃的保護(hù)效果及維持胃腸恒常性。

通過以上的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明的綠茶葉紅參干燥物減少了體重、食用效率、內(nèi)臟脂肪及肝內(nèi)脂質(zhì)的積累，并減少血液內(nèi)胰島素、瘦素、中性脂質(zhì)、葡萄糖的濃度，增加了脂聯(lián)素的濃度。并且，可知在胃腸、胰腺及大腦激活食欲相關(guān)因子，且為了維持胃腸的恒常性而 激活腸內(nèi)分泌細(xì)胞來抑制肥胖。

并且，本發(fā)明的抑制肥胖的綠茶葉紅參干燥物的檢查報(bào)告如圖15所示。這是于2013年7月16日向(株)韓國(guó)分析技術(shù)研究院委托成分分析試驗(yàn)(接收序號(hào)：1307-1632)的結(jié)果。其中，試料為通過上述實(shí)施例1來制備的綠綠茶葉紅參干燥物。如圖15所示，可知試料含有16.00mg/100g的兒茶素。兒茶素作為已驗(yàn)證對(duì)抑制肥胖具有優(yōu)秀效果的物質(zhì)，呈現(xiàn)出本發(fā)明的綠茶葉紅參干燥物對(duì)抑制肥胖具有優(yōu)秀的功效。并且，可知飼料中含有2.04mg/100g的維生素C，且可知本發(fā)明的綠茶葉紅參干燥物具有有用的營(yíng)養(yǎng)素。

像這樣，雖然參照附圖來說明了本發(fā)明，但可以在不超出本發(fā)明的技術(shù)思想的范圍內(nèi)進(jìn)行多種變形。因此，本發(fā)明的范圍不應(yīng)局限于上述實(shí)施例，而是通過發(fā)明要求保護(hù)范圍和與這種發(fā)明要求保護(hù)范圍等同的技術(shù)方案來定。