技術(shù)領(lǐng)域：
一個(gè)或更多個(gè)示例性實(shí)施例涉及一種生產(chǎn)通過(guò)使包括黃芪的混合物發(fā)酵獲得的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法及利用該方法生產(chǎn)的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。
背景技術(shù)：
：由于現(xiàn)代社會(huì)的生活、工作或人際關(guān)系的迅速變化所造成的壓力，導(dǎo)致越來(lái)越多的人正遭受諸如血液循環(huán)障礙、糖尿病、癌癥、神經(jīng)痛或關(guān)節(jié)炎的疾病困擾。另外，不規(guī)律的飲食習(xí)慣和頻繁食用快餐的習(xí)慣導(dǎo)致缺乏諸如維生素、纖維素或礦物質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)，加劇了罹患各種疾病的危險(xiǎn)。因此，對(duì)有助于補(bǔ)充諸如維生素、纖維素或礦物質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)并預(yù)防各種疾病的黃芪的關(guān)注日益增長(zhǎng)。黃芪是一種豆科多年生草本植物，其包含有益組分，諸如芒柄花黃素(C16H12O4)、甜菜堿(C5H11NO2)、膽堿(C5H15NO2)、異甘草素(C15H12O4)、礦物質(zhì)、維生素、纖維素等、發(fā)揮降血壓作用的GABA(γ-氨基丁酸)、具有滋補(bǔ)效果的皂苷、以及具有抗癌效果的類(lèi)黃酮。類(lèi)黃酮尤其是黃芪的代表性的組分，類(lèi)黃酮是有益組分，其不但提供抗癌效果，而且提供諸如控制血糖或消除氧自由基的其他有益功能。第0906074號(hào)韓國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)了基于包括黃芪的各種草藥來(lái)制造東方醫(yī)藥保健飲品。在包括黃芪的大部分現(xiàn)有技術(shù)中，黃芪的應(yīng)用范圍局限于僅將黃芪用作傳統(tǒng)草藥或者將黃芪的提取物生產(chǎn)并添加到飲料或食品。另外，當(dāng)用水煮黃芪以將其作為茶飲用或者當(dāng)把黃芪與將要食用的食物混合時(shí)，處于聚合物形式的黃芪的有益組分不會(huì)容易吸收到人體內(nèi)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：一個(gè)或更多個(gè)示例性實(shí)施例包括生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法，其中，黃芪的聚合物形式的有益組分被分解為小分子從而易于吸收到人體內(nèi)，黃芪發(fā)酵產(chǎn)物還包含各種生物活性物質(zhì)，并可應(yīng)用于各種類(lèi)型的產(chǎn)品。一個(gè)或更多個(gè)示例性實(shí)施例包括通過(guò)利用該方法生產(chǎn)的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。另外的方面將在下面的描述中部分地闡述，并且部分地將根據(jù)該描述而明了，或者可以通過(guò)給出的實(shí)施例的實(shí)踐而習(xí)得。根據(jù)一個(gè)或更多個(gè)示例性實(shí)施例，生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法，包括：在培養(yǎng)基中培養(yǎng)乳酸菌引酵物或酵母引酵物；將黃芪、糖和水輸入發(fā)酵罐；通過(guò)將乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到混合物中使混合物發(fā)酵，所述混合物中混合有被輸入到發(fā)酵罐的黃芪、糖和水；測(cè)量在發(fā)酵步驟中產(chǎn)生的發(fā)酵物料的pH；將測(cè)得的pH在預(yù)定范圍內(nèi)的發(fā)酵物料過(guò)濾；將過(guò)濾后的發(fā)酵物料干燥。在培養(yǎng)引酵物的步驟中，可使用MRS培養(yǎng)基培養(yǎng)乳酸菌引酵物，可使用YM培養(yǎng)基培養(yǎng)酵母引酵物。培養(yǎng)引酵物的步驟可以包括：將MRS培養(yǎng)基或YM培養(yǎng)基在120℃或更高的高溫下滅菌；將滅菌后的MRS或YM培養(yǎng)基冷卻到20℃至30℃；將乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到冷卻后的MRS或YM培養(yǎng)基中；在將MRS培養(yǎng)基或YM培養(yǎng)基保持在20℃至30℃的溫度的同時(shí)，培養(yǎng)在接種步驟中接種的乳酸菌引酵物或酵母引酵物；將通過(guò)培養(yǎng)步驟培養(yǎng)的物質(zhì)過(guò)濾以提取乳酸菌引酵物或酵母引酵物?？梢允褂妹鞔榫?Leuconostoc)屬作為在MRS培養(yǎng)基中培養(yǎng)的乳酸菌引酵物，可以使用釀酒酵母(Saccaromyces)屬作為在YM培養(yǎng)基中培養(yǎng)的酵母引酵物。在輸入步驟中，可以每100重量份的水輸入10至12重量份的黃芪、25至31重量份的糖以及10至12重量份的乳酸菌引酵物或酵母引酵物，并可以通過(guò)將每100重量份的水10至12重量份的乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到混合物中來(lái)執(zhí)行發(fā)酵，所述混合物由每100重量份的水混合10至12重量份的黃芪和25至31重量份的糖形成。在過(guò)濾步驟中，可以通過(guò)使用具有直徑約8至10微米的小孔的濾紙利用真空過(guò)濾法將測(cè)量步驟中測(cè)得的pH3.8或更低的發(fā)酵物料過(guò)濾。根據(jù)一個(gè)或更多個(gè)示例性實(shí)施例，可以根據(jù)以上描述的方法來(lái)生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。附圖說(shuō)明通過(guò)下面結(jié)合附圖進(jìn)行的實(shí)施例的描述，這些和/或其他方面將變得明了并更容易理解，在附圖中：圖1是根據(jù)示例性實(shí)施例的生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法的流程圖，在該方法中包括圖2的操作；圖2是根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的示例性實(shí)施例的生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法中包括的引酵物培養(yǎng)操作的詳細(xì)視圖；圖3是示出根據(jù)對(duì)比示例2生產(chǎn)的未發(fā)酵的混合物的香味成分的氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)分析的結(jié)果的曲線(xiàn)；圖4是示出根據(jù)示例1生產(chǎn)的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的香味成分的GC-MS分析的結(jié)果的曲線(xiàn)；圖5是示出根據(jù)圖1所示的方法生產(chǎn)的示例1的有機(jī)酸含量的曲線(xiàn)。具體實(shí)施方式現(xiàn)在，將詳細(xì)地對(duì)實(shí)施例作出參考，附圖中示出了實(shí)施例的示例。發(fā)明構(gòu)思涉及一種黃芪發(fā)酵產(chǎn)物，其通過(guò)以下方法生產(chǎn)：通過(guò)將乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到將要被發(fā)酵的混合物中來(lái)生成發(fā)酵物料，該混合物中混合有黃芪、糖和水，并且將該發(fā)酵物料過(guò)濾和干燥。通過(guò)以下方法獲得黃芪發(fā)酵產(chǎn)物：相對(duì)于100重量份的水，混合10至12重量份的黃芪、25至31重量份的糖以及10至12重量份的乳酸菌引酵物或酵母引酵物，并且在將混合物保持在20℃至30℃的溫度的同時(shí)，通過(guò)間歇地?cái)嚢柙摶旌衔飦?lái)培養(yǎng)上述組分的混合物。稍后將詳細(xì)描述用于生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的黃芪、糖、乳酸菌或酵母以及水的性質(zhì)和用途。黃芪是用作藥或藥的原料的藥用植物的種子，并且是剝掉甜苦參(sweetsophoraflavescens)的周皮之后獲得的甜苦參的根的干燥產(chǎn)物。甜苦參是豆科多年生草本植物。黃芪的外觀顏色為淺褐色或黃褐色，其內(nèi)里為黃白色并且是光滑的，其特征在于它的甜味。黃芪包含有益組分，諸如芒柄花黃素(C16H12O4)、甜菜堿(C5H11NO2)、膽堿(C5H15NO2)、異甘草素(C15H12O4)、礦物質(zhì)、維生素、纖維素等、產(chǎn)生降血壓效果的GABA(γ-氨基丁酸)、具有滋補(bǔ)效果的皂苷、以及具有抗癌效果的類(lèi)黃酮。類(lèi)黃酮指具有C6-C3-C6碳骨架的植物色素。類(lèi)黃酮的示例包括黃酮、黃烷酮、異黃酮、花黃素(anthochlor)、花青素(anthocyan)和兒茶素。類(lèi)黃酮經(jīng)常包含在植物的葉、根、花和莖中，并且包含在紅葡萄中。類(lèi)黃酮?dú)⑺腊┘?xì)胞并抑制新血管生長(zhǎng)，提高免疫力以提供反抗癌細(xì)胞的抗癌效果，降低血糖比例因而有益于高血糖患者，并且防止氧自由基的影響從而預(yù)防諸如癌癥或心血管紊亂的慢性衰退疾病。具體地，作為一種類(lèi)型的類(lèi)黃酮的槲皮素(C15H10O7)使癌細(xì)胞的增殖停止并殺死癌細(xì)胞。另外，類(lèi)黃酮通過(guò)形成重金屬螯合物來(lái)去除氧自由基。隨著吸收到人體內(nèi)的氧被用于氧化過(guò)程而在各種新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生氧自由基，氧自由基是具有強(qiáng)氧化力的氧，并且攻擊活的組織并對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損害。因此，氧自由基會(huì)造成諸如癌癥、動(dòng)脈硬化、糖尿病或中風(fēng)的疾病?？梢岳妙?lèi)黃酮去除這樣的氧自由基，從而預(yù)防和治療各種疾病。再者，黃芪包含很小量的諸如鎂(Mg)、鐵(Fe)、錳(Mn)、鋅(Zn)、銅(Cu)、銣(Rb)、鉬(Mo)、鉻(Cr)和硒(Se)的二十多種元素。硒(Se)尤其防止對(duì)細(xì)胞的損害并執(zhí)行抗氧化功能，硒(Se)的效果是維生素E的效果的大約500倍高。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的方法生產(chǎn)的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物包括有益組分，這些有益組分以諸如類(lèi)黃酮的聚合物形式包括在黃芪中并被分解為小分子。因此，與用水煮黃芪以作為茶來(lái)飲用時(shí)或者將其用食物混合時(shí)相比，有益組分可以更容易吸收到人體內(nèi)。因此，可以提高預(yù)防或治療各種疾病的功效。另外，黃芪的纖維素用作培養(yǎng)乳酸菌或酵母菌的食物，通過(guò)食用這樣的纖維素而生長(zhǎng)的乳酸菌或酵母菌排放各種有機(jī)酸作為代謝活動(dòng)的產(chǎn)物。有機(jī)酸是指諸如檸檬酸、蘋(píng)果酸、乙酸、酒石酸或琥珀酸的具有酸性的有機(jī)化合物，根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的示例1產(chǎn)生的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物含有大量的諸如草酸、酒石酸或乳酸的有機(jī)酸。這些有機(jī)酸在活體內(nèi)具有抗菌活性，以殺滅有害細(xì)菌并促進(jìn)腸道內(nèi)的菌落平衡。另外，有機(jī)酸可幫助新陳代謝以提高身體力量且?guī)椭朔?，并且還有助于胃酸活性以刺激消化功能。有機(jī)酸中的羥基酸具有防止皮膚衰老、減輕或防止痤瘡、防止色素沉著等的效果，從而用于化妝品產(chǎn)品中。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思，每100重量份的水使用10至12重量份的黃芪。如果每100重量份的水使用的黃芪少于10重量份，則包含在黃芪中的有益組分不會(huì)充分地提供給發(fā)酵物料，并且不會(huì)獲得根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的期望 效果。如果每100重量份的水使用的黃芪多于12重量份，則培養(yǎng)基內(nèi)用于乳酸菌或酵母菌棲息和繁殖的空間會(huì)因黃芪的體積而擁擠，降低乳酸菌或酵母菌的增殖效率并造成不充分發(fā)酵。相對(duì)于乳酸菌或酵母過(guò)量的黃芪不會(huì)充分發(fā)酵而浪費(fèi)，從而造成損失。乳酸菌是指分解糖(諸如葡萄糖)以生成乳酸的細(xì)菌，也稱(chēng)為乳酸桿菌(Lactobacillus)。通過(guò)使用乳酸菌的乳酸發(fā)酵生成的乳酸具有抑制病原菌和有害菌生長(zhǎng)的性質(zhì)，利用這種性質(zhì)來(lái)制造諸如乳產(chǎn)品、韓式泡菜或釀酒產(chǎn)品的產(chǎn)品。另外，乳酸菌是用作醫(yī)治腸道紊亂的重要菌，乳酸菌棲息在哺乳動(dòng)物的腸道內(nèi)并抑制各種病菌引起的異常發(fā)酵，其是一種兼性厭氧菌。乳酸菌的示例包括乳酸桿菌屬、明串珠菌屬和鏈球菌屬。使用乳酸菌的發(fā)酵被稱(chēng)為乳酸發(fā)酵。在乳酸發(fā)酵中，糖被分解而形成乳酸。乳酸發(fā)酵是活生物體的兩種發(fā)酵方法之一，另一種是酒精發(fā)酵，動(dòng)物組織的發(fā)酵也對(duì)應(yīng)于乳酸發(fā)酵。經(jīng)歷乳酸發(fā)酵的微生物為諸如根霉的毛霉菌和諸如乳酸菌的菌。經(jīng)歷乳酸發(fā)酵的其他微生物的示例為異乳酸發(fā)酵菌(異構(gòu)乳酸發(fā)酵菌)和除了明串珠菌屬之外的乳酸桿菌的一些其他屬，其中，除了乳酸之外，異乳酸發(fā)酵菌還生成諸如乙醇、乙酸和二氧化碳的副產(chǎn)物。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的示例1，使用屬于明串珠菌屬的腸膜明串珠菌作為乳酸菌來(lái)進(jìn)行發(fā)酵。發(fā)明構(gòu)思中使用的腸膜明串珠菌(Leuconostocmesenteriodes)是從韓式泡菜分離而獲得的。腸膜明串珠菌在pH4.8以下難以生長(zhǎng)，并且腸膜明串珠菌在21℃至25℃的溫度范圍內(nèi)具有生命力，因而應(yīng)該保持適當(dāng)?shù)臏囟群蚿H。酵母是一種在制作面包、啤酒或葡萄酒中使用的微生物，且其對(duì)應(yīng)于霉菌或真菌，指既沒(méi)有菌絲又沒(méi)有光合能力或運(yùn)動(dòng)能力的所有單細(xì)胞生物。酵母是屬于真菌的真核細(xì)胞，具有很小的大小且肉眼難以察覺(jué)。酵母將糖分解以生成乙醇和二氧化碳，并經(jīng)常用于生產(chǎn)酒精飲料。使用酵母的發(fā)酵被稱(chēng)為酵母發(fā)酵或酒精發(fā)酵。這里，酵母在無(wú)氧或存在不充足的氧的情況下將葡萄糖分解以生成乙醇和二氧化碳。對(duì)于根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的示例2產(chǎn)生的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物，利用屬于釀酒酵母屬的卡氏酵母(Saccaromycescarlbergensis)進(jìn)行發(fā)酵?？ㄊ辖湍概c釀酒酵母具有類(lèi)似的生理性質(zhì)。在稍后將要描述的發(fā)酵操作30中，通過(guò)將明串珠菌屬引酵物或釀酒酵母 屬引酵物接種到由混合黃芪、糖和水獲得的混合物中來(lái)執(zhí)行發(fā)酵，使得包含在黃芪中的并為聚合物形式的有益元素轉(zhuǎn)化成小分子。例如，包含在黃芪中并為聚合物形式的類(lèi)黃酮因發(fā)酵而轉(zhuǎn)化成小分子并被吸收到小腸中。被吸收的類(lèi)黃酮具有諸如控制血糖的效果或抗癌的效果。同時(shí)，發(fā)酵物料中包括的糖可經(jīng)過(guò)發(fā)酵合成為聚合物形式的葡聚糖。葡聚糖指人體內(nèi)的消化酶無(wú)法分解的膳食纖維，由于其分子量大而無(wú)法吸收到小腸內(nèi)。沒(méi)有被吸收到小腸內(nèi)的葡聚糖是大腸內(nèi)的益生菌的食物，從而促進(jìn)益生菌的活性和腸道活動(dòng)。另外，葡聚糖吸附大腸中存在的多余廢物以促進(jìn)腸道活動(dòng)。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思，每100重量份的水使用10至12重量份的乳酸菌或酵母。如果乳酸菌或酵母少于10重量份，則由乳酸菌或酵母的新陳代謝活動(dòng)形成的有機(jī)酸和各種有益組分的量會(huì)減少，不會(huì)充分提供發(fā)酵中需要的乳酸菌或酵母，發(fā)酵不會(huì)適當(dāng)執(zhí)行。如果乳酸菌或酵母超過(guò)12重量份，與培養(yǎng)基相比乳酸菌或酵母的量會(huì)過(guò)剩，因而用于培養(yǎng)的食物會(huì)不足，乳酸菌或酵母棲息和繁殖的空間會(huì)小，發(fā)酵不會(huì)適當(dāng)進(jìn)行。于是，不會(huì)產(chǎn)生根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思，糖用作培養(yǎng)乳酸菌或酵母的食物，通常使用葡萄糖。葡萄糖是活生物體內(nèi)具有重要作用的單糖，并且廣泛存在于生物世界。當(dāng)游離時(shí)，葡萄糖大量存在于甜水果或蜂蜜中，少量葡萄糖包含在動(dòng)物的血液、腦脊髓液或淋巴液中。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思，每100重量份的水使用25至31重量份的糖。如果糖少于25重量份，糖不足夠提供作為用于培養(yǎng)乳酸菌或酵母的食物，乳酸菌或酵母的增殖效率低，發(fā)酵不會(huì)適當(dāng)執(zhí)行。如果糖超過(guò)31重量份，滲透壓現(xiàn)象會(huì)降低乳酸菌或酵母的增殖效率，發(fā)酵不會(huì)適當(dāng)進(jìn)行。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思，除了黃芪、糖和乳酸菌引酵物或酵母引酵物之外的其他組分是水，水用作原材料的溶劑。水具有高比熱容，使得水參與調(diào)整恒溫動(dòng)物的體溫，水對(duì)諸如溫度的狀態(tài)變化不敏感，并且不與其他物質(zhì)反應(yīng)，因而適合用作溶劑。通過(guò)相對(duì)于每100重量份的水混合10至12重量份的黃芪、25至31重量份的糖以及10至12重量份的乳酸菌引酵物或酵母引酵物來(lái)生產(chǎn)根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物，這些組分的混合比例是用于生產(chǎn)根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的黃芪 發(fā)酵產(chǎn)物的最優(yōu)條件，將在下面描述優(yōu)選的示例性實(shí)施例。在下文中，將參照附圖詳細(xì)描述根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的示例性實(shí)施例的生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法。圖1是根據(jù)示例性實(shí)施例的生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法的流程圖，在該方法中包括圖2的操作。圖1的方法包括圖2的引酵物培養(yǎng)操作，通過(guò)利用圖2的生產(chǎn)操作獲得的引酵物用于圖1的方法中，因而將首先描述圖2。圖2是根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的示例性實(shí)施例的生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法中包括的引酵物培養(yǎng)操作的詳細(xì)視圖。參照?qǐng)D2，引酵物培養(yǎng)操作10包括制備操作11、滅菌操作12、冷卻操作13、接種操作14、培養(yǎng)操作15以及引酵物過(guò)濾操作16。在操作11中，當(dāng)使用乳酸菌執(zhí)行發(fā)酵時(shí)，制備MRS培養(yǎng)基，當(dāng)使用酵母執(zhí)行發(fā)酵時(shí)，制備YM培養(yǎng)基。詳細(xì)地，MRS培養(yǎng)基的物質(zhì)促進(jìn)乳酸菌的生長(zhǎng)并抑制與乳酸菌競(jìng)爭(zhēng)的其他菌的生長(zhǎng)。另外，YM培養(yǎng)基在培養(yǎng)酵母時(shí)使用，主要在培養(yǎng)對(duì)酸性有抵抗力的微生物時(shí)使用。MRS培養(yǎng)基和YM培養(yǎng)基可以被制造或從市場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)，并用于發(fā)酵中。在操作12中，將培養(yǎng)乳酸菌的引酵物或酵母的引酵物中使用的MRS培養(yǎng)基或YM培養(yǎng)基在大約120℃或更高的高溫下滅菌15至30分鐘。在操作11中制備的培養(yǎng)基包含各種菌和污染物物質(zhì)，因此，在操作12中去除包含在培養(yǎng)基中的污染物物質(zhì)和各種菌。如果不執(zhí)行操作12，則未去除的各種菌會(huì)在稍后將要描述的操作15中過(guò)度繁殖，并且會(huì)妨礙乳酸菌或酵母菌的增殖。因此，操作12的滅菌是必要的。在操作13中，將滅菌后的MRS或YM培養(yǎng)基冷卻到20℃至30℃。由于操作12在120℃或更高的高溫下執(zhí)行，因此培養(yǎng)基非常熱。乳酸菌引酵物或酵母引酵物是對(duì)溫度敏感的微生物，在高溫培養(yǎng)基中無(wú)法正常繁殖而是變?yōu)闇缃^。因此，將已經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基冷卻到20℃至30℃，該溫度是在將乳酸菌或酵母的引酵物接種到培養(yǎng)基中之前用于培養(yǎng)乳酸菌或酵母的引酵物的最優(yōu)溫度。例如，可以通過(guò)使培養(yǎng)基在室溫下放置4至6小時(shí)而使滅菌后的高溫培養(yǎng)基慢慢冷卻，或者使用低溫冷藏機(jī)迅速冷卻。然而，倘若使用冷藏機(jī)將培養(yǎng)基迅速冷卻，則培養(yǎng)基的狀態(tài)會(huì)改變。因此，在發(fā)明構(gòu)思的實(shí)施例1和2中，通過(guò)使培養(yǎng)基在室溫下放置來(lái)慢慢冷卻培養(yǎng)基。在操作14中，將乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到在操作13中冷卻了 的MRS培養(yǎng)基或YM培養(yǎng)基。在發(fā)明構(gòu)思的示例1中，將明串珠菌屬的腸膜明串珠菌接種到MRS培養(yǎng)基中作為乳酸菌引酵物的示例，并將釀酒酵母屬的卡氏酵母接種到Y(jié)M培養(yǎng)基中作為酵母引酵物的示例，以對(duì)應(yīng)于培養(yǎng)基體積的10vol％的量來(lái)接種上述乳酸菌引酵物或酵母引酵物。在操作15中，通過(guò)將MRS培養(yǎng)基或YM培養(yǎng)基保持在20℃至30℃的溫度范圍內(nèi)來(lái)培養(yǎng)在操作14中接種的乳酸菌引酵物或酵母引酵物。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的示例性實(shí)施例，可以通過(guò)將乳酸菌引酵物或酵母引酵物在保持溫度20℃至30℃、pH4.2至4.8、酸度0.8至1.2的條件下培養(yǎng)12至24小時(shí)來(lái)使乳酸菌引酵物或酵母引酵物增殖。在稍后要描述的操作30中，將操作15中增殖的乳酸菌引酵物或酵母引酵物與黃芪、糖和水混合以在發(fā)酵中使用。在操作16中，通過(guò)將操作15中培養(yǎng)的物質(zhì)過(guò)濾而獲得乳酸菌引酵物或酵母引酵物。例如，操作15中培養(yǎng)的物質(zhì)包含混合物，該混合物不但包括乳酸菌或酵母的引酵物，還包括由于培養(yǎng)基和培養(yǎng)生成的各種副產(chǎn)物，在操作16中去除這些副產(chǎn)物。如果不去除由于培養(yǎng)基或培養(yǎng)生成的副產(chǎn)物而將該物質(zhì)用于操作30中，則這些副產(chǎn)物會(huì)與稍后將要描述的黃芪、糖和水混合，由該混合物形成的混合培養(yǎng)基會(huì)被污染。因此，出于這個(gè)原因而執(zhí)行操作16。在操作16中，使用濾紙將操作15中培養(yǎng)12至24小時(shí)的物質(zhì)過(guò)濾，該濾紙具有大約8微米至大約10微米大小的小孔。過(guò)濾的示例是真空過(guò)濾、重力過(guò)濾和壓力過(guò)濾。如上所述，通過(guò)執(zhí)行包括操作11、操作12、操作13、操作14、操作15和操作16的引酵物培養(yǎng)操作10，可以獲得在圖1的生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法中使用的乳酸菌引酵物或酵母引酵物。通過(guò)執(zhí)行針對(duì)引酵物培養(yǎng)而優(yōu)化的引酵物培養(yǎng)操作10來(lái)獲得相對(duì)于預(yù)定重量具有高菌落形成單位(cfu)值的乳酸菌或酵母的引酵物。圖1是根據(jù)示例性實(shí)施例的生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的方法的流程圖，該方法包括圖2的操作。根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法包括圖2的引酵物培養(yǎng)操作10，并包括輸入操作20、發(fā)酵操作30、測(cè)量操作40、將發(fā)酵物料過(guò)濾的過(guò)濾操作50以及干燥操作60，這些步驟用于生產(chǎn)根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。在操作20中，將黃芪、糖和水輸入發(fā)酵罐。根據(jù)本示例性實(shí)施例，在操作20中，相對(duì)于100重量份的水，將10至12重量份的黃芪和25至31重量份的糖輸入到發(fā)酵罐。操作20還可以包括準(zhǔn)備黃芪的操作?？梢詮氖袌?chǎng)購(gòu)買(mǎi)或者種植黃芪。這樣的黃芪包含各種副產(chǎn)物，諸如其表面上的泥土，因而要清洗，可以從清洗后的黃芪塊中選擇要在培養(yǎng)中使用的黃芪，可以將選出的黃芪脫水。將上述黃芪切成片待用，以增大其與乳酸菌引酵物或酵母引酵物的反應(yīng)面積。另外，使用含糖量為大約15Brix的葡萄糖作為在步驟20中輸入的糖。在操作30中，通過(guò)將操作10中培養(yǎng)的乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到混合物中(該混合物中混合有輸入到發(fā)酵罐的黃芪、糖和水)使該混合物發(fā)酵。根據(jù)本示例性實(shí)施例，在操作30中，通過(guò)將每100重量份的水10至12重量份的乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到由每100重量份的水混合10至12重量份的黃芪和25至31重量份的糖形成的混合物中執(zhí)行發(fā)酵。將上述混合物保持在大約20℃至大約30℃的溫度范圍內(nèi)的同時(shí)，進(jìn)行4天至10天的發(fā)酵。上述混合物培養(yǎng)基的溫度范圍是由發(fā)明構(gòu)思的發(fā)明人在制造黃芪發(fā)酵產(chǎn)物期間發(fā)現(xiàn)的最優(yōu)溫度條件。因此，在發(fā)酵期間，將混合物的溫度保持在20℃至30℃。當(dāng)用水煮黃芪以作為茶飲用時(shí)或?qū)ⅫS芪添加于食品時(shí)，包含在黃芪中并處于聚合物形式的有益組分不易被吸收到人體內(nèi)。然而，根據(jù)發(fā)明構(gòu)思，通過(guò)發(fā)酵操作30使黃芪的處于聚合物形式的有益組分被分解成小分子，使得有益組分易于被吸收到人體內(nèi)。此時(shí)，由微生物的活動(dòng)生成的生物活性物質(zhì)(諸如活性酶、維生素、礦物質(zhì)或有機(jī)酸等)增多，從而進(jìn)一步提高了黃芪發(fā)酵產(chǎn)物中的營(yíng)養(yǎng)含量。同時(shí)，在根據(jù)本示例性實(shí)施例的操作30中使用的乳酸菌或酵母是兼性厭氧菌，因此不使用供氣裝置等來(lái)額外供氧，而是可以通過(guò)不完全密封發(fā)酵罐的上部而使空氣流通一定程度來(lái)供氧。另外，在操作30中，間歇地?cái)嚢杞臃N有乳酸菌引酵物或酵母引酵物的混合物。然而，過(guò)于頻繁的攪拌會(huì)對(duì)乳酸菌引酵物或酵母引酵物有壓力，因此可執(zhí)行最少次數(shù)的攪拌，使得在操作20中輸入的物質(zhì)與乳酸菌或酵母適當(dāng)混合。在操作40中，測(cè)量在操作30中產(chǎn)生的發(fā)酵物料的pH。從操作30開(kāi)始之后至少四天起，取發(fā)酵罐中的少量發(fā)酵物料以測(cè)量發(fā)酵物料的pH，當(dāng)測(cè)得的發(fā)酵物料的pH保持在3.8或更低時(shí)，執(zhí)行稍后將描述的操作50，如果發(fā)酵物料的pH為3.8或更高，則還繼續(xù)發(fā)酵最多到操作30開(kāi)始之后10天。如果到操作30開(kāi)始之后的10天后，發(fā)酵產(chǎn)物的pH仍為3.8或更高，則 丟棄發(fā)酵產(chǎn)物。如果發(fā)酵持續(xù)超過(guò)10天，用于培養(yǎng)的食物不足會(huì)使乳酸菌或酵母的活性下降，發(fā)酵不會(huì)正常執(zhí)行。另外，如果發(fā)酵進(jìn)行超過(guò)10天，則發(fā)酵罐中的混合物會(huì)變質(zhì)，在打開(kāi)或關(guān)閉發(fā)酵罐的蓋子以測(cè)量pH時(shí)，外來(lái)物質(zhì)會(huì)與混合物混合并會(huì)污染發(fā)酵物料。當(dāng)使用酵母執(zhí)行發(fā)酵時(shí)，酵母的特有異味會(huì)增大并使發(fā)酵物料難以使用，因而丟棄酵母。同時(shí)，可以通過(guò)打開(kāi)發(fā)酵罐的蓋子在發(fā)酵罐中取出少量發(fā)酵物料并測(cè)量該物料的pH來(lái)執(zhí)行pH測(cè)量?？梢允褂玫喂芑蚪臃N環(huán)取出少量發(fā)酵物料。在操作50中，將在操作40中測(cè)得的具有預(yù)定范圍內(nèi)的pH值的發(fā)酵物料過(guò)濾。上述操作30中形成的發(fā)酵物料包括微生物的團(tuán)、切成片的黃芪、葡萄糖和由發(fā)酵導(dǎo)致的各種副產(chǎn)物。在根據(jù)本示例性實(shí)施例的操作50中，通過(guò)真空過(guò)濾來(lái)過(guò)濾pH為3.8或更低的發(fā)酵物料，在真空過(guò)濾中使用具有大約8微米大小的小孔的濾紙。因此，微生物的團(tuán)、切成片的黃芪、葡萄糖和由發(fā)酵導(dǎo)致的各種副產(chǎn)物在操作50中去除。可以在真空過(guò)濾之前使用鑷子或過(guò)濾器去除大小相對(duì)大的黃芪。這里，真空過(guò)濾是指通過(guò)將過(guò)濾區(qū)的壓力設(shè)定為比大氣壓力低的壓力來(lái)執(zhí)行的過(guò)濾方法。對(duì)于真空過(guò)濾來(lái)說(shuō)，需要布氏瓶、布氏漏斗、電動(dòng)抽吸器和濾紙等。抽吸器產(chǎn)生真空。通過(guò)將抽吸器連接到已連接有布氏漏斗的布氏瓶，然后將被調(diào)整為布氏漏斗大小的濾紙附到布氏漏斗來(lái)執(zhí)行真空過(guò)濾。根據(jù)本示例性實(shí)施例，使用具有大約8微米大小的小孔的濾紙來(lái)去除微生物的團(tuán)、切成片的黃芪、葡萄糖和由發(fā)酵導(dǎo)致的各種副產(chǎn)物，使得僅留下發(fā)酵產(chǎn)物的有益組分。在操作60中，將發(fā)酵物料冷凍干燥以完成黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。冷凍干燥是指這樣一種方法：通過(guò)將水溶液或含水量大的物料冷凍并減壓，使水升華成冰以去除水分，獲得干燥的產(chǎn)物。具體地，在微生物包含很多水分并對(duì)熱敏感且不穩(wěn)定的情況下，通常可以在大約－30℃至大約－10℃的低溫下將它們干燥以獲得它們的粉末。當(dāng)通過(guò)冷凍干燥執(zhí)行操作60時(shí)，可以保持黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的均勻組分，不造成額外的反應(yīng)或污染，因此可以將黃芪在其最佳狀態(tài)下保存很長(zhǎng)時(shí)間，黃芪的效果也可以保持很長(zhǎng)時(shí)間。根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的操作10、20、30、40、50和60產(chǎn)生的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物為粉末的形式，并可以按照它原來(lái)的樣子攝入或與其他有益組分混合而被生產(chǎn)為用于攝入的藥丸。另外，粉末形式的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物可以通過(guò)與膳食補(bǔ)品、 加工過(guò)的食品、用于化妝品的復(fù)合物或動(dòng)物飼料相混合而用于各種領(lǐng)域中。除了上述目的之外，根據(jù)發(fā)明構(gòu)思的生產(chǎn)方法生產(chǎn)的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物可以用于其他各種領(lǐng)域，其用途的目的和形式不受限制。在下文中，將參照示例、對(duì)比示例和實(shí)驗(yàn)示例詳細(xì)描述黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。然而，提供示例性實(shí)施例僅為了說(shuō)明發(fā)明構(gòu)思，發(fā)明構(gòu)思的范圍不受示例性實(shí)施例的限制。<示例1>根據(jù)上述發(fā)明構(gòu)思的示例性實(shí)施例，按以下生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。在上面提供而下面沒(méi)描述的細(xì)節(jié)也可以應(yīng)用于本示例性實(shí)施例。首先，將MRS培養(yǎng)基在大約120℃的高溫下滅菌20分鐘，使MRS培養(yǎng)基在室溫下放置4小時(shí)以使MRS培養(yǎng)基冷卻至20℃至30℃的溫度。然后，在保持20℃至30℃的溫度的MRS培養(yǎng)基中，將腸膜明串珠菌培養(yǎng)24小時(shí)然后過(guò)濾以獲得腸膜明串珠菌的引酵物。接下來(lái)，將100kg的水、10kg的黃芪、25kg的葡萄糖以及10kg的在上述過(guò)程中培養(yǎng)的腸膜明串珠菌的引酵物輸入到發(fā)酵罐并在20℃至30℃下發(fā)酵5天。每5小時(shí)攪拌發(fā)酵罐中的物料，每次執(zhí)行1小時(shí)的攪拌。然后，測(cè)量上面生成的發(fā)酵物料的pH，當(dāng)發(fā)酵物料的pH為3.8或更低時(shí)，使用具有8微米大小的孔的濾紙將發(fā)酵物料真空過(guò)濾。然后，將發(fā)酵物料冷凍干燥以獲得黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。<示例2>根據(jù)上述發(fā)明構(gòu)思的示例性實(shí)施例，按以下生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。在上面提供而下面沒(méi)描述的細(xì)節(jié)也可以應(yīng)用于本示例性實(shí)施例。首先，將YM培養(yǎng)基在大約120℃的高溫下滅菌20分鐘，使YM培養(yǎng)基在室溫下放置4小時(shí)以使YM培養(yǎng)基冷卻至20℃至30℃的溫度。然后，在保持20℃至30℃的溫度的YM培養(yǎng)基中，將卡氏酵母菌培養(yǎng)24小時(shí)，然后過(guò)濾以獲得卡氏酵母的引酵物。接下來(lái)，將100kg的水、10kg的黃芪、25kg的葡萄糖以及10kg的在上述過(guò)程中培養(yǎng)的卡氏酵母的引酵物輸入到發(fā)酵罐并在20℃至30℃下發(fā)酵5天。每5小時(shí)攪拌發(fā)酵罐中的物料，每次執(zhí)行1小時(shí)的攪拌。然后，測(cè)量上面生成的發(fā)酵物料的pH，當(dāng)發(fā)酵物料的pH為3.8或更低時(shí)，使用具有8微米大小的孔的濾紙將發(fā)酵物料真空過(guò)濾。然后，將發(fā)酵物料冷凍干燥以獲得 黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。<對(duì)比示例1>將100kg的水和10kg的黃芪輸入熱發(fā)酵罐，并在200℃下加熱至沸騰15分鐘，然后冷卻到60℃并再度加熱至沸騰大約20分鐘，然后在室溫下慢慢冷卻以制成黃芪茶。<對(duì)比示例2>通過(guò)按照下面修改示例1的條件來(lái)生產(chǎn)根據(jù)對(duì)比示例2的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物。首先，將MRS培養(yǎng)基在大約120℃的高溫下滅菌20分鐘，然后將MRS培養(yǎng)基在室溫下放置4小時(shí)以使MRS培養(yǎng)基冷卻到20℃至30℃的溫度。然后，在保持20℃至30℃溫度的MRS培養(yǎng)基中，將腸膜明串珠菌培養(yǎng)24小時(shí)并過(guò)濾以獲得腸膜明串珠菌引酵物。接下來(lái)，將100kg的水、10kg的黃芪、25kg的葡萄糖以及10kg的在上述過(guò)程中培養(yǎng)的腸膜明串珠菌的引酵物輸入到發(fā)酵罐以混合，從而制成未發(fā)酵的混合物。<實(shí)驗(yàn)示例1>為了比較和測(cè)量根據(jù)示例1生產(chǎn)的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物和根據(jù)對(duì)比示例1生產(chǎn)的黃芪茶的抗癌效果，將體重20g至25g并患有惡性腫瘤的小鼠分成三組并對(duì)其展開(kāi)15天的實(shí)驗(yàn)。對(duì)于實(shí)驗(yàn)組1的小鼠，每天口服喂給根據(jù)示例1的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物2mg和生理鹽溶液0.1ml的混合物。對(duì)于實(shí)驗(yàn)組2的小鼠，每天口服喂給根據(jù)對(duì)比示例1的黃芪茶2mg和生理鹽溶液0.1ml的混合物。為了與實(shí)驗(yàn)組對(duì)比，對(duì)照組僅口服喂給生理鹽溶液0.1ml。表1中示出15天之后對(duì)瘤的重量進(jìn)行比較的結(jié)果。[表1]組瘤重量(g)減輕率(％)對(duì)照組(生理鹽溶液)3.11±0.58-實(shí)驗(yàn)組1(黃芪發(fā)酵產(chǎn)物+生理鹽溶液)2.28±0.5926.69實(shí)驗(yàn)組2(黃芪茶+生理鹽溶液)2.54±0.6418.32如表1中所示，與僅喂給生理鹽溶液的對(duì)照組相比，喂給黃芪發(fā)酵產(chǎn)物或黃芪茶的實(shí)驗(yàn)組的瘤重量減輕。與對(duì)照組的大約3.11g的瘤重量相比，喂給黃芪發(fā)酵產(chǎn)物15天的實(shí)驗(yàn)組1的瘤重量減輕了大約26.69％。與對(duì)照組的大約3.11g的瘤重量相比，喂給黃芪茶15天的實(shí)驗(yàn)組2的瘤重量減輕了大約 18.32％。因此，喂給黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)組1的瘤重量比喂給黃芪茶的實(shí)驗(yàn)組2的瘤重量減輕得更多。確定的是，黃芪中包含的聚合物形式的有益組分通過(guò)發(fā)酵分解成小分子，從而容易吸收到人體內(nèi)以幫助治療疾病。即，該結(jié)果表明黃芪發(fā)酵產(chǎn)物具有抗癌效果。<實(shí)驗(yàn)示例2>借助氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)分析對(duì)根據(jù)示例1生產(chǎn)的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的香味成分與根據(jù)對(duì)比示例2生產(chǎn)的未發(fā)酵混合物進(jìn)行對(duì)比。取根據(jù)示例1的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物8g和根據(jù)對(duì)比示例2的未發(fā)酵混合物8g，并且對(duì)其進(jìn)行GC-MS分析，獲得圖3和圖4中示出的香氣分析結(jié)果。圖3是根據(jù)對(duì)比示例2生產(chǎn)的未發(fā)酵混合物的香味成分的GS-MS分析的結(jié)果。圖4是根據(jù)示例1生產(chǎn)的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的香味成分的GS-MS分析的結(jié)果。在根據(jù)圖3和圖4的GC-MS分析的曲線(xiàn)中，保留時(shí)間(RT)是指從樣品注入至樣品排出的時(shí)間段，各組分的峰面積與各組分的濃度成比例。[表2]GS-MS分析示出：在利用乳酸菌執(zhí)行的發(fā)酵之前和之后，香味成分改變很大，表2示出一些GS-MS分析結(jié)果。參照表2，在7.322分鐘之后出現(xiàn)甲苯的氣相色譜(GC)峰；甲苯在發(fā)酵之前具有78.077％的面積而在發(fā)酵之后具有48.793％的面積，因此，通過(guò)發(fā)酵使甲苯的量減少大約37％。如上所示，在表2中示出的化合物當(dāng)中，甲苯、吡嗪和甲基吡嗪在發(fā)酵之后減少了大約50％或更多，乙酸乙酯、乙酸戊酯、1,3-二甲基-苯、己酸乙酯、1-戊醇、3-辛醇、1-己醇和1-辛烯-3-醇在發(fā)酵之后顯著增加。尤其地，添加以改善食品風(fēng)味的調(diào)味組分己酸乙酯和乙酸戊酯的含量增大，因此，當(dāng)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物用作食品時(shí)，可以改善食品的風(fēng)味。<示例3>通過(guò)高效液相色譜(HPLC)分析來(lái)分析在根據(jù)示例1的黃芪發(fā)酵產(chǎn)物的制造工藝期間由微生物的新陳代謝活動(dòng)生成的各種有機(jī)酸組分。表3中示出有機(jī)酸的含量根據(jù)發(fā)酵天數(shù)的變化。乳酸和乙酸的含量隨著發(fā)酵的持繼而增長(zhǎng)。詳細(xì)地，比其他有機(jī)酸的含量高的乳酸的含量表明在發(fā)酵中使用了乳酸菌。[表3]蘋(píng)果酸和草酸的含量隨著發(fā)酵的持續(xù)沒(méi)有很大量的改變，但是酒石酸的含量隨著發(fā)酵的持續(xù)而減少。另外，從發(fā)酵開(kāi)始5天起，琥珀酸和檸檬酸完全去除。圖5中示出關(guān)于上面的表3的曲線(xiàn)。已經(jīng)參照優(yōu)選示例、對(duì)比示例和實(shí)驗(yàn)示例描述了發(fā)明構(gòu)思。雖然已經(jīng)參照本發(fā)明的實(shí)施例具體示出和描述了本發(fā)明，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解應(yīng) 僅以描述性含義而非出于限制的目的來(lái)考慮優(yōu)選實(shí)施例。因此，發(fā)明構(gòu)思的范圍受權(quán)利要求而非發(fā)明構(gòu)思的具體實(shí)施方式的限制，該范圍內(nèi)的所有差異將被理解為包括在發(fā)明構(gòu)思中。根據(jù)一個(gè)或更多個(gè)示例性實(shí)施例，可以通過(guò)將乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到混合物中(該混合物中混合有黃芪、糖和水)而執(zhí)行的發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)黃芪發(fā)酵產(chǎn)物，使得黃芪中包含的聚合物形式的有益組分被分解成小分子以容易吸收到人體內(nèi)，其中，由乳酸菌或酵母的新陳代謝活動(dòng)生成的生物活性物質(zhì)包含在黃芪發(fā)酵產(chǎn)物中，并可以向人體提供各種營(yíng)養(yǎng)。另外，通過(guò)將相對(duì)于100重量份的水的10至12重量份的乳酸菌引酵物或酵母引酵物接種到混合物中(該混合物通過(guò)相對(duì)于100重量份的水混合10至12重量份的黃芪和25至31重量份的糖形成)可使黃芪的效果最大化，使得包含在黃芪中的有益組分盡可能多地供給發(fā)酵物料，同時(shí)黃芪充分發(fā)酵。另外，根據(jù)包括培養(yǎng)引酵物、輸入物料、發(fā)酵、測(cè)量、過(guò)濾和干燥的方法制造的粉末狀黃芪發(fā)酵產(chǎn)物可以不經(jīng)任何加工而使用，或者可以與其他有益組分混合從而在各種領(lǐng)域中使用。應(yīng)該理解，僅以描述性含義而非出于限制的目的來(lái)考慮在這里描述的示例性實(shí)施例。每個(gè)示例性實(shí)施例之內(nèi)的特征和方面的描述應(yīng)該通常被考慮為可用于其他示例性實(shí)施例中的其他類(lèi)似的特征或方面。雖然已經(jīng)參照附圖描述了一個(gè)或更多個(gè)示例性實(shí)施例，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解的是，在不脫離如權(quán)利要求所限定的發(fā)明構(gòu)思的精神和范圍的情況下，可以在示例性實(shí)施例中做出形式和細(xì)節(jié)上的各種變化。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3