本發(fā)明涉及一種維甲酸多藥共遞送納米粒及其作為腫瘤治療藥物的應用。

背景技術：

1988年，我國學者成功應用全反式維甲酸(ATRA)對急性早幼粒細胞性白血病進行分化治療，使急性早幼粒細胞白血病的緩解率由傳統(tǒng)化療的46％左右提升至95％左右。由此可見，分化治療可能是根治惡性腫瘤的一個突破口。然而，目前在臨床上，維甲酸僅用于治療急性早幼粒細胞白血病，而并未用于其它惡性腫瘤的分化治療。雖然在細胞水平，維甲酸及其衍生物的確能誘導一些實體瘤細胞分化與凋亡，但是維甲酸對這些腫瘤細胞的誘導分化作用十分有限，并且，很多腫瘤細胞，包括急性粒細胞白血病細胞也對維甲酸出現(xiàn)了不同程度的耐藥。如果這種耐藥問題得以解決，就為維甲酸應用于其它惡性腫瘤的分化治療攻破了第一道屏障。

早期研究發(fā)現(xiàn)，組蛋白去乙?；敢种苿毙粤＜毎籽〉木S甲酸耐受具有逆轉(zhuǎn)作用；近期研究表明，全反式維甲酸與組蛋白去乙?；敢种苿┞?lián)合應用也對其他腫瘤細胞，例如成神經(jīng)細胞瘤細胞產(chǎn)生抑制生長的作用。13-順式維甲酸與組蛋白去乙酰化酶抑制劑聯(lián)合應用治療實體瘤已有一期臨床報道，并取得了很好的療效。2014年，Cancer Research上的一篇文章從另一個角度揭示了維甲酸對很多其他惡性腫瘤療效甚微的原因：星形細胞上調(diào)基因1(AEG-1)的過表達通過多種途徑阻斷了維甲酸的信號通路。AEG-1在胰腺癌、肺癌、骨肉瘤、胃癌等多種實體瘤組織中過表達，極有可能是阻礙維甲酸對這些腫瘤組織誘導分化的重要環(huán)節(jié)。

維甲酸、組蛋白去乙?；敢种苿┮约癆EG-1抑制劑聯(lián)用，構成以維甲酸為核心，多種藥物輔助增效的多藥體系，將有可能大幅提高實體瘤對維甲酸的敏感性，從而為維甲酸誘導實體瘤分化凋亡的臨床應用奠定了基礎。如果利用納米材料對腫瘤組織的被動靶向性，將此維甲酸多藥體系制成納米粒，其療效可能進一步提高。

技術實現(xiàn)要素：

針對目前實體瘤對維甲酸耐受等問題，本發(fā)明提供了一種維甲酸多藥共遞送納米粒的配方及制備方法，并將其應用于惡性腫瘤的治療。

該配方搭配合理，各藥物間協(xié)同作用機制明確，制備方法簡便易行，所得納米材料具有較高的穩(wěn)定性及很好的抗腫瘤活性，是一種良好的抗腫瘤藥物制劑。

本發(fā)明是通過以下技術方案來實現(xiàn)：

1.一種維甲酸多藥共遞送納米粒溶液，除水溶劑外，此納米粒溶液還包含以下溶質(zhì)成分，溶質(zhì)成分的質(zhì)量組成為：維甲酸或其異構體1％-20％；組蛋白去乙酰化酶抑制劑0.5％-25％；哌立福辛0.5％-25％；基質(zhì)0％-90％，乳化劑0％-90％，助溶劑0％-10％。

2.技術方案1所述的納米粒，其制備方法由以下步驟組成：

(1)將維甲酸、組蛋白去乙酰化酶抑制劑、哌立福辛、乳化劑、基質(zhì)、助溶劑溶于適量有機溶劑；

(2)將步驟(1)所制得的溶液在高速攪拌下加至水中，制得納米粒；

(3)將步驟(2)所制得的納米粒以透析、超濾、蒸發(fā)、冷凍干燥或噴霧干 燥的方法除去有機溶劑、部分或全部水；得納米?；蚣{米粒水溶液；

(4)納米?；蚣{米粒水溶液放入水中，調(diào)成所需維甲酸多藥共遞送納米粒溶液。

3.技術方案1所述的維甲酸或其異構體是全反式維甲酸、9-順式維甲酸、13-順式維甲酸中的一種或二種以上的任意比例組成的混合物。

4.技術方案1所述的組蛋白去乙酰化酶抑制劑是伏立諾他、西達本胺之中的一種或二種以任意比例組成的混合物。

5.技術方案1所述的基質(zhì)是聚己內(nèi)酯、聚己內(nèi)酯-聚乙二醇嵌段共聚物、聚乳酸、聚羥基乙酸、乳酸-羥基乙酸共聚物中的一種或二種以上的任意比例組成的混合物。

6.技術方案1所述的乳化劑是卵磷脂、豆磷脂、泊洛沙姆188、聚氧乙烯蓖麻油、吐溫80中的一種或二種以上的任意比例組成的混合物。

7.技術方案1所述的助溶劑是乙二胺、乙醇胺中的一種或二種以任意比例組成的混合物。

8.技術方案2中，步驟(1)所述有機溶劑是乙醇、丙酮、四氫呋喃中的一種或二種以上的任意比例組成的混合物。

9.技術方案1所述納米粒溶液作為腫瘤治療藥物的應用。

配方中的基質(zhì)、乳化劑、助溶劑為輔料，起到穩(wěn)定納米粒及調(diào)節(jié)粒徑的作用；組蛋白去乙?；敢种苿⑦吡⒏Ｐ磷鳛檩o助藥物，用于逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞對維甲酸類藥物的耐受；維甲酸及其異構體作為主藥，誘導腫瘤細胞分化與凋亡。各個成分相輔相成，協(xié)同發(fā)揮作用。本發(fā)明藥物搭配合理，作用機制明確，制備工藝簡單，具有腫瘤被動靶向性，有望應用于腫瘤治療領域。

具體實施方式

實施例1

將30.0mg全反式維甲酸、26.4mg伏立諾他、46.2mg哌立福辛、1.00g泊洛沙姆188、7μl乙二胺溶于20ml熱乙醇。在高速攪拌下，將上述乙醇溶液緩緩加入80ml水中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去乙醇，得分散于水中的納米粒。

實施例2

將300mg 9-順式維甲酸、26.4mg伏立諾他、46.2mg哌立福辛、400mg聚己內(nèi)酯、1.60g吐溫80溶于由10ml乙醇及10ml丙酮組成的混合物中。在高速攪拌下，將上述溶液緩緩加入80ml水中，透析除去丙酮及乙醇，得分散于水中的納米粒。

實施例3

將30mg全反式維甲酸、105.6mg伏立諾他、46.2mg哌立福辛、300mg聚己內(nèi)酯-聚乙二醇嵌段共聚物溶于由10ml乙醇及10ml丙酮組成的混合物中。在高速攪拌下，將上述溶液緩緩加入80ml水中，先在真空下低溫蒸發(fā)除去大部分丙酮及乙醇，隨后冷凍干燥，得納米粒粉末。

實施例4

將30mg全反式維甲酸、52.8mg伏立諾他、23.1mg哌立福辛、200mg卵磷脂、100mg泊洛沙姆溶于20ml熱乙醇，在高速攪拌下，將上述乙醇溶液緩緩加入80ml水中，真空下低溫蒸發(fā)除去大部分乙醇，得分散于水中的納米粒。

實施例5

將30mg全反式維甲酸、39.0mg西達本胺、46.2mg哌立福辛、400mg 聚己內(nèi)酯、1.60g吐溫80溶于由10ml乙醇及10ml丙酮組成的混合物中。在高速攪拌下，將上述溶液緩緩加入80ml水中，透析除去丙酮及乙醇，得分散于水中的納米粒。

實施例6

將300mg全反式維甲酸、16.5mg伏立諾他、28.9mg哌立福辛、300mg聚己內(nèi)酯、900mg泊洛沙姆溶于由10ml乙醇及10ml丙酮組成的混合物中。在高速攪拌下，將上述溶液緩緩加入80ml水中，透析除去丙酮及乙醇，并重新稀釋到100ml，得分散于水中的納米粒溶液。

另將MDA-MB-231乳腺癌細胞以8000cells/well的密度接種于96孔板中，孵育24h以使細胞貼壁。將上述納米粒溶液以1640培養(yǎng)基稀釋390倍，與細胞共培養(yǎng)48h，同時以不含藥物的空白納米粒作參照，以MTT法計算增殖率。實驗結(jié)果顯示，上述納米粒能明顯抑制MDA-MB-231細胞的增殖，具有較好的抗腫瘤效果。