本發(fā)明涉及一種艾迪制劑的新應用，具體是涉及一種艾迪制劑在制備治療神經(jīng)母細胞瘤藥物中的應用。
背景技術：
：神經(jīng)母細胞腫瘤(neuroblastoma,nb)起源于交感神經(jīng)系統(tǒng)的原始神經(jīng)嵴細胞的胚胎性腫瘤，交感神經(jīng)鏈、腎上腺髓質是最常見的原發(fā)部位。nb是兒童最常見的實體腫瘤之一，占所有兒童腫瘤的8％～10％，占嬰兒總癌癥發(fā)病率的28％，為嬰兒發(fā)病率最高的惡性腫瘤。nb病死率高，占所有小兒惡性腫瘤死亡病死率的15％，其發(fā)病多為5歲以下，大約有1％家族史。我國每年新發(fā)病3000例左右，有將近一半的神經(jīng)母細胞瘤發(fā)生在2歲以內的嬰幼兒。神經(jīng)母細胞瘤屬于神經(jīng)內分泌性腫瘤，可以起源于交感神經(jīng)系統(tǒng)的任意神經(jīng)脊部位，其主要轉移途徑為淋巴及血行。在局限性病變病人中約35％有局部淋巴結浸潤，血行轉移主要發(fā)生于骨髓、骨、肝和皮膚，終末期或復發(fā)時可有腦和肺轉移。神經(jīng)母細胞瘤臨床表現(xiàn)復雜多樣，惡性程度高，病情進展迅速，早期易發(fā)生轉移，多數(shù)患兒(大于50％)診斷之后處于晚期高危狀態(tài)，預后較差，長期存活率低。艾迪制劑是以斑蝥、人參、黃芪及刺五加為主要原料，提取其具有藥用價值的提取物作為有效成分而制成的制劑。有清熱解毒、消瘀散結的作用，其中艾迪注射液收載于衛(wèi)生部部頒標準20冊。專利cn03117114.1、名稱為“治療腫瘤的中藥注射制劑及其制作方法”的發(fā)明專利和專利cn200510003151.3、名稱為“一種治療腫瘤的中藥制劑的制備方法”公開了以斑蝥、人參、黃芪及刺五加為處方的艾迪制劑以及其制備方法?，F(xiàn)有技術表明，艾迪制劑對惡性腫瘤具有良好的治療效果。目前研究中報到出艾迪制劑對原發(fā)性肝癌、肺癌、直腸癌、惡性淋巴瘤、婦科惡性腫瘤的治療有很好療效，但是沒有對神經(jīng)母細胞瘤的相關報道。神經(jīng)母細胞瘤就診時常屬晚期，治療難度較大。傳統(tǒng)手術、化療、放療為神經(jīng)母細胞瘤治療的三大主要手段，一般對局限性腫瘤主張先手術切除，再化療。手術不能切除者在確診后采用先化療、后手術、再化療或加放療的策略。但是目前治療神經(jīng)母細胞瘤的藥物效果不佳，不良反應嚴重，預后較差。技術實現(xiàn)要素：發(fā)明的目的是提供一種艾迪制劑在制備治療神經(jīng)母細胞瘤藥物中的應用。本發(fā)明的艾迪制劑由從斑蝥、人參、黃芪和刺五加組成。主要是含有從斑蝥、人參、黃芪和刺五加中提取出的具有藥用價值的提取物作為有效成分。按照重量份計算，本發(fā)明所述艾迪制劑按重量份配比：是由中藥原料斑蝥0.5-5份、人參25-100份、黃芪50-200份和刺五加100-200份經(jīng)提取制備而成。優(yōu)選的配比為：斑蝥1-2份、人參30-70份、黃芪75-125份、刺五加125-175份。最優(yōu)選的配比為：斑蝥1.5份、人參50份、黃芪100份、刺五加150份。在應用時，本發(fā)明的藥物可以根據(jù)需要加入一種或多種藥學上可以接受的載體，如稀釋劑、填充劑、粘合劑、賦形劑、崩解劑、表面活性劑、吸收促進劑和潤滑劑等，制成各種艾迪制劑。前述的艾迪制劑優(yōu)選以注射劑、片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、乳劑、溶液或懸浮劑的形式使用，更優(yōu)選為注射劑。上述劑型均可按照藥學領域的常規(guī)方法制備。前述的艾迪制劑的給藥途徑為口服、經(jīng)皮、靜脈或肌肉注射。本發(fā)明艾迪制劑的制備方法中，其有效成分提取物可以按照專利號為cn03117114.1的方法進行提取，也可以按照專利號為cn200510003151.3中的的方法進行提取，還可以用常規(guī)的方法進行提取。本發(fā)明所述的艾迪制劑，其有效成分斑蝥為芫青科昆蟲南方大斑蝥mylabrisphaleratapallas或黃黑小斑蝥mylabriscichoriilinnaeus的干燥體，性辛、熱，有大毒，具有破血消瘦、攻毒蝕瘡的作用；人參為五加科植物人參panaxginsengc.a.mey.的干燥根，味甘、微苦，微溫，具有大補元氣，補脾益肺，生津益血，安神增智的功效；黃芪為豆科植物蒙古黃芪astragalusmembranaceus(fisch.)bge.var.mongholocus(bge.)或膜莢黃芪的干燥根，具有補氣固表、利尿托毒、排膿、斂瘡生肌的功效；刺五加為五加科植物刺五加acanthopanaxsenticosus(rupr.etmaxim.)harms的干燥根及根莖或莖， 具有益氣健脾、補腎安神的作用。四者合用具有清熱解毒、消瘀散結的作用。艾迪制劑的活性成分為斑蝥、人參、黃芪和刺五加，斑蝥可用于積年頑癬、癓瘕腫塊、惡瘡死肌等；人參可用于元氣虛脫證、肺脾心腎氣虛證、熱病氣虛津傷口渴及消渴證；黃芪可用于氣虛乏力、食少便溏、中氣下陷、表虛自汗；刺五加可用于脾腎陽虛、體虛乏力、食欲不振、腰膝酸痛、失眠多夢等。上述四種藥物具有補中益氣、生津養(yǎng)血的功效，可以促進機體生長，有抗氧化、增強免疫的作用。因此，艾迪制劑對治療神經(jīng)母細胞瘤瘤具有顯著的療效，其副作用小，臨床用藥更為安全。本申請人進一步的試驗研究發(fā)現(xiàn)，艾迪制劑確可用于制備治療神經(jīng)母細胞瘤的藥物。為了使本領域普通技術人員更好的理解本發(fā)明，以下通過實驗例來進一步闡述本發(fā)明艾迪制劑的組成及制備方法，以及艾迪制劑在治療神經(jīng)母細胞瘤藥物中的實驗研究。需要說明的是：以下實施例僅為闡釋本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明。試驗例試驗例1：艾迪制劑抗體外神經(jīng)細胞瘤的活性研究1.1材料及試劑1.1.1藥物名稱和來源：艾迪注射液，取自實施例1-7由不同處方配比制得的艾迪注射液。注射用硫酸長春新堿，山西振東泰盛制藥有限公司；順鉑，長春瑞濱為江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司。配制方法：以上藥物均用無血清培養(yǎng)基配成相應濃度。1.1.2細胞株神經(jīng)母細胞瘤sh-sy5y細胞、神經(jīng)母細胞瘤sk-n-sh細胞，購自美國標準生物品收藏中心(atcc)，神經(jīng)母細胞瘤n2a細胞，購于中科院上海生命科學院細胞資源中心，按照所提供的說明書培養(yǎng)。1.1.3試劑及儀器dmem/f12(1:1)培養(yǎng)基、胎牛血清(美國gibco公司)、青霉素(10萬u/l)、鏈霉素(100mg/l)、co2孵箱、elx800型酶標儀(美國bio-tek公司)。1.2研究方法1.2.1細胞培養(yǎng)以含10％胎牛血清、10萬u/l青霉素和100mg/l鏈霉素的dmem/f12(1:1)培養(yǎng)基，于37℃、5％co2培養(yǎng)箱中常規(guī)傳代培養(yǎng)sh-sy5y細胞、sk-n-sh細胞和n2a細胞。1.2.2細胞抑制率測定取對數(shù)生長期sh-sy5y細胞、sk-n-sh細胞和n2a細胞，分別制成細胞懸液，以40000ml－1細胞密度接種于96孔板(邊緣孔用無菌磷酸鹽緩沖液(pbs)填充)，于5％co2、37℃孵育5小時，藥物分別設5-7個濃度，每個濃度設2個復孔，連續(xù)作用36小時后，每孔加入0.5％mtt溶液20μl，繼續(xù)培養(yǎng)5小時。終止培養(yǎng)，小心吸去孔內培養(yǎng)液，每孔加入150μl二甲基亞砜(dmso)，置于搖床上低速振蕩10min，使結晶物充分溶解。以酶標儀在490nm波長處測定光密度(od)?？瞻讓φ找孕迈r無血清培養(yǎng)基替換。計算藥物抑 制率及半數(shù)抑制濃度(ic50)：藥物抑制率(％)＝(空白對照od－用藥od)/空白對照od×100％半數(shù)抑制濃度(ic50)：指被抑制一半時抑制劑的濃度，即凋亡細胞與全部細胞數(shù)之比等于50％時所對應的濃度。誘導能力越強，該數(shù)值越低。1.3試驗結果長春新堿、順鉑和不同組分的艾迪注射液均對體外神經(jīng)母細胞瘤sh-sy5y細胞、sk-n-sh細胞和n2a細胞有抑制作用，其中按實施例1和實施例7制得的艾迪注射液抑制作用弱于長春新堿和順鉑；按實施例2-6制得的艾迪注射液抑制作用強于長春新堿和順鉑；艾迪(實施例4)對體外神經(jīng)母細胞瘤sh-sy5y細胞、sk-n-sh細胞和n2a細胞的抑制作用最強。具體結果見表1：表1長春新堿、順鉑和艾迪制劑體外神經(jīng)母細胞瘤sh-sy5y細胞、sk-n-sh細胞和n2a細胞抑制率(％)及半數(shù)抑制濃度(ic50)結果1.4實驗結論長春新堿、順鉑和不同組分的艾迪注射液單用均對體外神經(jīng)母細胞瘤sh-sy5y細胞、sk-n-sh細胞和n2a細胞有抑制作用，其中艾迪(實施例1)藥物組分最低，其抑制作用低于長春新堿和順鉑；艾迪(實施例7)藥物組分最高，其抑制作用反而低于長春新堿和順鉑。按實施例2-6制得的艾迪注射液抑制作用強于長春新堿和順鉑，在此范圍內的艾迪注射液處方配比都具有顯著的抗體外神經(jīng)母細胞瘤sh-sy5y細胞、sk-n-sh細胞和n2a細胞增殖作用；艾迪(實施例4)對體外神經(jīng)母細胞瘤sh-sy5y細胞、sk-n-sh細胞和n2a細胞的抑制作用最強，此為最優(yōu)選的艾迪注射液處方配比。試驗例2：艾迪制劑對神經(jīng)母細胞瘤的體內療效研究2.1材料和試劑：2.1.1藥物名稱和來源：艾迪注射液，取自實施例1-7由不同處方配比制得的艾迪注射液；注射用硫酸長春新堿，山西振東泰盛制藥有 限公司；順鉑，長春瑞濱為江蘇豪森藥業(yè)股份有限公司。2.1.2實驗動物和細胞清潔級balb/c小鼠，由山西醫(yī)科大學實驗動物中心提供；神經(jīng)母細胞瘤n2a細胞，購于中科院上海生命科學院細胞資源中心。2.1.3試劑及儀器dmem/f12(1:1)培養(yǎng)基、胎牛血清(美國gibco公司)、青霉素(10萬u/l)、鏈霉素(100mg/l)、倒置顯微鏡、co2孵箱、移液管、吸耳球、酒精燈。2.2試驗方法2.2.1細胞培養(yǎng)n2a細胞接種于含10％胎牛血清、100u/ml鏈霉素和100u/ml青霉素的dmem培養(yǎng)液中，在37℃、飽和濕度的5％co2孵箱中傳代培養(yǎng)。2.2.2注射用細胞懸液的制備選擇對數(shù)生長期細胞，經(jīng)消化、吹打、加培養(yǎng)液等制成單細胞懸液。2.2.3模型建立及給藥balb/c小鼠腹腔注射n2a細胞株，待瘤體積生長至100～200mm3之間后，將動物隨機分為生理鹽水對照組(ns組)、長春新堿組、順鉑組和艾迪組。每組10只，長春新堿組每日腹腔注射注射用硫酸長春新堿0.025mg/kg，2次/周，連續(xù)兩周。順鉑組每日腹腔注射順鉑5mg/kg，1次/周，連續(xù)兩周。艾迪組每日同一時間腹腔注射艾迪注射 液50ml(以0.9％氯化鈉或5～10％葡萄糖注射液400～450ml稀釋后使用)，連續(xù)兩周。對照組每日同一時間腹腔注射ns2ml。每周測2-3次瘤體積，稱鼠重，記錄數(shù)據(jù)。計算腫瘤體積(v)、相對腫瘤體積(rtv)和抑瘤率(ir)。腫瘤體積(v)＝1/2×a(長徑)×b2(寬徑)對腫瘤體積(rtv)＝vt/v0(式中v0為分組給藥時測得的腫瘤體積，vt為每次測量時的腫瘤體積)抑瘤率(ir)％＝(1-長春新堿組或艾迪組或順鉑組平均瘤重/ns組平均瘤重)×100％2.2.4試驗結果長春新堿和艾迪對神經(jīng)母細胞瘤都有一定的治療效果，能明顯抑制神經(jīng)母細胞瘤的生長。其中，按實施例1和實施例7制得的艾迪注射液對神經(jīng)母細胞瘤的治療效果弱于長春新堿和順鉑；按實施例2-6制得的艾迪注射液治療效果比長春新堿和順鉑更加顯著；艾迪(實施例4)對神經(jīng)母細胞瘤的治療效果最好；艾迪(實施例6-7)由于藥物組分最高，毒性最大，導致小鼠出現(xiàn)精神不振和嘔吐癥狀；此外，順鉑給藥后導致一只小鼠出現(xiàn)藥物相關性死亡。表1長春新堿、順鉑和艾迪對神經(jīng)母細胞瘤n2a細胞生長抑制療效注：d0：第一次給藥時間；dn：第一給藥后20天2.3試驗結論長春新堿、順鉑和艾迪單獨給藥時均對神經(jīng)母細胞瘤有顯著的治療效果，能明顯抑制神經(jīng)母細胞瘤的生長；其中，按實施例1制得的艾迪注射液藥物組分最低，對神經(jīng)母細胞瘤的治療效果弱于長春新堿和順鉑；按實施例7制得的艾迪注射液藥物組分最高，毒副作用最大，對神經(jīng)母細胞瘤的治療效果反而弱于長春新堿和順鉑；按實施例2-6制得的艾迪注射液治療效果比長春新堿和順鉑更加顯著；艾迪(實施例4)對體外神經(jīng)母細胞瘤的治療效果最好。綜上所述，艾迪(實施例4)為最優(yōu)選處方配比，能達到最好治療效果。試驗例3：艾迪制劑對神經(jīng)母細胞瘤的治療1、病例選擇：對于有典型癥狀的神經(jīng)母細胞瘤的兒童患者，通過活檢、骨髓穿刺和尿vma/hva確診，篩選出明確診斷為神經(jīng)母細胞瘤患兒18例。根據(jù)uicctnm分期，處于ⅲ期2例，ⅳ期16例。將18例患者隨機分為兩組，治療組10例，男5例，女5例，年齡18-59月，平均38月，處于ⅲ期1例，ⅳ期9例；對照組8例，男4例，女4例，年齡19-56月，平均36.6月，處于ⅲ期1例，ⅳ期7例。所以患者kps評分均小于60。兩組在年齡、性別、病程、病情方面均具有可比性。治療前根據(jù)入組時患者的具體病情，進行x光、ct、mri、骨掃描、骨髓細胞學等檢查，準確評估患者的腫瘤情況。做血常規(guī)、血液生化檢查、心電圖和(或)超聲心動圖等檢查，評估患者基本狀況?；颊哳A計生存大于3個月。2、治療方法：對照組給予注射長春新堿0.05mg/kg，靜脈滴注，d1、2，環(huán)磷酰胺20～80mg/kg，靜脈滴注d1、2各用1次；多柔比星15mg/(m2·次)，靜脈滴注，d1、2各用1次；氟尿嘧啶10mg/kg，靜脈滴注，d3、8、9，阿糖胞苷3mg/kg，靜脈滴注，d3、8、9，每3～4周為1療程。治療組靜脈滴加艾迪注射液100ml(以0.9％氯化鈉或5～10％葡萄糖注射液400～450ml稀釋后使用)/日，療程15天，為一周期，2周期一療程。3、判定方法：療效按recist評價標準進行評定：完全緩解(cr)，部分緩解(pr)，穩(wěn)定(sd)，進展(pd)和無變化(nc)。以cr+pr計算有效率(rr)，以cr+pr+sd計算疾病控制率(dcr)。生活質量評定以kps評分為標準，治療后評分上升10分以上為提高，10分以內為 穩(wěn)定，減少10分以上為降低。4、結果4.1近期療效：治療組10例中有效率(cr+pr)為70％，疾病控制率(cr+pr+sd)為90％；對照組有效率(cr+pr)為62.5％，疾病控制率(cr+pr+sd)為75％；治療組近期療效優(yōu)于對照組。兩組近期療效比較見表1。表1兩組患者近期療效比較4.2近期生活質量：治療組中有7例(70％)患者生活質量得到改善，對照組中生活質量改善為4例(50％)，治療組患者生活質量優(yōu)于對照組。兩組患者近期生活質量比較見表二。表2兩組患者近期生活質量比較組別例數(shù)改善(％)穩(wěn)定(％)下降(％)治療組107(70％)2(20％)1(10％)對照組84(50％)2(25％)2(25％)4.3討論：從上述結果可知，治療組的療效和患者的生活質量均優(yōu)于對照組，艾迪制劑作為質量神經(jīng)母細胞瘤藥物優(yōu)于長春新堿和環(huán)磷酰胺、多柔比星聯(lián)合用藥。艾迪制劑對惡性神經(jīng)母細胞瘤具有良好的 療效和潛在的治療價值。具體實施方式實施例1：艾迪注射液的制備(低組分)原料：斑蝥4g、人參200g、黃芪450g、刺五加900g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達到60％，用7％氫氧化鈉溶液調ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實施例2：艾迪注射液的制備原料：斑蝥5g、人參250g、黃芪500g、刺五加1000g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達到60％，用7％氫氧化鈉溶液調ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實施例3：艾迪注射液的制備原料：斑蝥10g、人參300g、黃芪750g、刺五加1250g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用， 提取液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達到60％，用7％氫氧化鈉溶液調ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實施例4：艾迪注射液的制備原料：斑蝥15g、人參500g、黃芪1000g、刺五加1500g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，備用；取人參切片，用 480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達到60％，用7％氫氧化鈉溶液調ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實施例5：艾迪注射液的制備原料：斑蝥20g、人參700g、黃芪1250g、刺五加1750g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃 縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達到60％，用7％氫氧化鈉溶液調ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實施例6：艾迪注射液的制備原料：斑蝥50g、人參1000g、黃芪2000g、刺五加2000g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使 含醇量達到60％，用7％氫氧化鈉溶液調ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。實施例7：艾迪注射液的制備(高組分)原料：斑蝥60g、人參1100g、黃芪2100g、刺五加2100g制備方法：取斑蝥藥材，粉碎，用400ml100％乙醇加熱回流提取5次，提取時間分別為：2h、1h、0.5h、0.5h、0.5h，濾過，藥渣備用，提取液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，減壓回收乙醇，濾過，加水稀釋至1000ml，用12％鹽酸溶液調至ph6-7，靜置，冷藏，離心濾過，上清液用4％氫氧化鈉溶液調至ph8-9，備用；取人參切片，用480ml60％乙醇加熱回流提取3h，濾過，藥渣備用，提取液減壓回收乙醇，濃縮液加水至體積為150ml，上大孔吸附樹脂，加水洗脫5倍柱體積，再用80％乙醇5倍柱體積洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，濃縮，濾過，備用；取黃芪、刺五加藥材，與人參、斑蝥藥渣合并，加24960ml水煎煮5次，提取時間分別為：3h、2h、1h、0.5h、0.5h，合并煎液，濾過，濃縮至體積為1560ml，過濾，上清液加乙醇，使含醇量達到60％，用7％氫氧化鈉溶液調ph7，冷藏，過濾，上清液再加乙醇，使含醇量達到60％，冷藏，過濾，回收乙醇，加水至1200ml，用12％鹽酸溶液調ph4～5，加入0.3％活性炭煮沸脫色40min，離心 過濾；上清液與人參、斑蝥提取液合并，加注射用水至10000ml，調節(jié)藥液ph值為3，過濾，灌封、滅菌，即得艾迪注射制劑1000支，劑量為10ml/支，每支含斑蝥素(c10h12o4)為0.008～0.030mg。當前第1頁12