本發(fā)明涉及一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
血栓形成是目前心腦血管疾病的最主要原因之一，預(yù)防、減緩血栓形成可以大大減少中風(fēng)等疾病的形成。目前對于血栓形成的藥物治療，主要有化藥、生物酶解等，但其昂貴的費(fèi)用和毒副作用一致備受詬病。傳統(tǒng)的中藥、藏藥在血栓性疾病的治療上效果明確，臨床使用越來越多。
八味沉香丸為傳統(tǒng)藏藥，具有清心熱、養(yǎng)心、安神、開竅功效。用于熱病攻心，神昏譫語；主要用于心臟病，如冠心病、心絞痛的治療。文獻(xiàn)《八味沉香膠囊對大鼠血栓形成和微循環(huán)的影響_》初步揭示了八味沉香配方具有一定抗血栓作用，本發(fā)明繼續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，在八味沉香配方基礎(chǔ)上，部分配方藥材增減替換形成的新組方體外、體內(nèi)抗血栓效果更佳。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種具有抗血栓作用的藏藥組合物。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，重量份組成如下：
沉香80-120份、肉豆蔻80-120份、廣棗80-120份、木香160-200份、煨訶子80-120份、木棉花60-110份。
根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述藏藥組合物，還包括蓽茇10-20份、阿魏2-7份、野牛心8-12份；
進(jìn)一步優(yōu)選的，所述藏藥組合物，包括蓽茇10-20份、阿魏2-7份、野牛心8-12份，還包括檳榔40-60份。
本發(fā)明提供如下更為優(yōu)選的技術(shù)方案：
一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，重量份組成如下：
沉香100份、肉豆蔻100份、廣棗100份、木香175份、煨訶子100份、木棉花75份；或者：
沉香80份、肉豆蔻120份、廣棗80份、木香160份、煨訶子80份、木棉花110份；
優(yōu)選的，所述藏藥組合物，還包括蓽茇15份、阿魏5份、野牛心10份；或者：蓽茇10份、阿魏7份、野牛心8份；
更優(yōu)選的，所述藏藥組合物，包括蓽茇15份、阿魏5份、野牛心10份，還包括檳榔50 份。
所述的藏藥組合物，包括原料藥配方組成按照常規(guī)工藝進(jìn)一步制備的活性提取物及其常規(guī)藥學(xué)制劑。
所述的藏藥組合物，包括原料藥配方組成按照常規(guī)工藝制備成的乙酸乙酯提取物和/或水提物。
有益效果
本發(fā)明通過體外、體內(nèi)抗血栓實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)藏藥八味沉香丸去掉乳香和石灰華后仍有較強(qiáng)的抗血栓效果，繼續(xù)增加蓽茇、阿魏、野牛心，尤其增加檳榔后抗血栓效果提升顯著。
附圖說明
圖1為各組體外對纖維蛋白溶解活性對比圖；
圖中橫坐標(biāo)為各個樣品組，1-7分別表示純水空白組、復(fù)方丹參滴丸對照組、f0—水提物組、fw—水提物組、fa—水提物組、fb—水提物組、fb—酯提物組；縱坐標(biāo)為纖維蛋白溶解活性(尿激酶單位/.g樣品原藥材)。
具體實(shí)施方式
實(shí)驗(yàn)例1、抗血栓作用的體外篩選實(shí)驗(yàn)
1、試驗(yàn)材料和儀器
1.1藥物及試劑
復(fù)方丹參滴丸，天津天士力制藥有限公司，批號：120413；尿激酶，杭州澳亞生物技術(shù)有限公司，批號：1301166；牛纖維蛋白(sigmaf8630)；凝血酶(sigmat4648)；pbs緩沖溶液ph7·2-7·4；北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。
1.2儀器
立式壓力蒸汽滅菌鍋(ldzx-50fbs，上海申安)；臺式離心機(jī)(h3，sigma)；電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(101，上海鵬順科學(xué)儀器有限公司)；電子恒溫水浴鍋(dzkw-c型，黃驊市卸甲綜合電器廠)；電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海?，攲?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)；量尺。
2、樣品準(zhǔn)備
2.1分組
實(shí)驗(yàn)樣品分為4組，均由基礎(chǔ)方(簡稱f0)加方組成，各組具體配比如下：
a、f0組＝沉香100g、肉豆蔻100g、廣棗100g、木香175g、煨訶子100g、木棉花75g
b、fw組＝f0+乳香50g+石灰華50g
c、fa組＝f0+蓽茇15g+阿魏5g+野牛心10g
d、fb組＝fa+檳榔50g
2.2給藥方法和劑量
各組樣品分別用藥材8倍重量體積的水煎煮2次，每次1h，濃縮至每1ml含2g藥材；其中fb組增加乙酸乙酯提取物組(簡稱fb-酯組)，即用8倍重量體積的乙酸乙酯加熱提取2次，每次1h，濃縮至每1ml含2g藥材，備用。
3、試驗(yàn)方法
3.1纖維蛋白平板的制備
取直徑9cm無菌培養(yǎng)皿，置于超凈工作臺，向其加入0.5ml凝血酶(30bp/ml)鋪滿整個平板，然后加入預(yù)熱的37℃纖維蛋白原溶液15ml，輕輕快速振蕩混勻，靜置30min，使之凝固成纖維蛋白平板，然后室溫靜置過夜，現(xiàn)用現(xiàn)配以防污染。
3.2試劑配制
牛纖維蛋白粉溶液的配制：取牛纖維蛋白原粉適量，用ph7·4的pbs溶液溶解，制成2.5mg/ml纖維蛋白原溶液。
凝血酶原粉：先用甘油和水各0.5ml混勻后溶解凝血酶，然后各取15μl分裝-20℃保存，使用時用上述pbs溶液稀釋至500μl，制成濃度為30u/ml的溶液。
3.3供試品溶液和陽性對照藥的制備
供試品溶液：取前述各組樣品提取液各5ml加純水15ml超聲處理30min，離心，過濾，取上清液待用。
陽性對照藥：(1)復(fù)方丹參滴丸，取復(fù)方丹參滴丸20粒加水10ml溶解。
(2)尿激酶80iu/ml、60iu/ml、30iu/ml、20iu/ml、10iu/ml.
3.4各組樣品溶栓酶活性的測定
取預(yù)先制備好的纖維蛋白平板，用微量加樣器分別吸取純水及各樣品上清液20μl點(diǎn)在平板的不同位置，加蓋；另取5個平板，分別吸取上述5個濃度的尿激酶樣品點(diǎn)在平板的不同位置，加蓋；所有平板置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中，每間隔1小時觀察溶栓情況。12小時后取出，用量尺測量溶圈直徑。
其中尿激酶平板數(shù)據(jù)整理后，繪制尿激酶的濃度-活性曲線。
3.5分組
每個樣品平板均分別設(shè)試驗(yàn)組﹑純水空白組和陽性對照組，以保證結(jié)果的可靠性和一致性。
4、試驗(yàn)結(jié)果與分析
4.1分析方法
所有數(shù)據(jù)以
4.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果
各組樣品溶栓活性、纖維蛋白溶解活性結(jié)果見表1和圖1，所得尿激酶的濃度-活性曲線為：
y(活性單位，iu/ml)＝4.1576x(溶圈直徑，mm)-27.5632(r＝0.9789)。
表1各組樣品溶栓活性、纖維蛋白溶解活性結(jié)果
(
注：與陰性對照作對比，▲p＜0.01；
與陽性對照作對比，★p＜0.05；
與fw作對比，●p＜0.05，●●p＜0.01。
結(jié)果：表1表明，f0、fw、fa、fb—水、fb—酯各組樣品都有纖溶活性，且均強(qiáng)于對照藥復(fù)方丹參滴丸；基礎(chǔ)方f0組與fw組無顯著性差異；fa、fb均顯著強(qiáng)于fw，尤其fb-水提物組差異極顯著(p＜0.01)，表明基礎(chǔ)方即有顯著纖溶活性，增加乳香50g+石灰華50g(即八味沉香制劑配方)效果有提高趨勢，但不顯著，基礎(chǔ)方增加蓽茇15g、阿魏5g、野牛心10g，尤其增加檳榔50g，差異尤其顯著，提示蓽茇、阿魏、野牛心，尤其檳榔對溶栓活性有顯著增強(qiáng)作用。fb的2種提取物，即水提物、乙酸乙酯提取物效果比較，反而水提物效果更佳，提示在抗血栓作用的藥效基礎(chǔ)偏于水溶性。
上述結(jié)果對臨床常見的血栓性疾病的用藥提供試驗(yàn)依據(jù)。
實(shí)驗(yàn)例2、對電刺激誘導(dǎo)的大鼠體內(nèi)血栓形成的影響
一、試劑樣品
復(fù)方丹參滴片，吉林金麥通制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字z22025356；各樣品組試液稀釋至每1ml含0.2g原藥材，同實(shí)驗(yàn)例1。bt87-ⅲ型體內(nèi)血栓形成測定儀,包頭醫(yī)學(xué)院心血管研究 室。
二、動物及分組
取健康雌性wistar大鼠70只，體重180-220g，適應(yīng)性飼養(yǎng)3d，隨機(jī)分為：空白組——灌胃給予等體積生理鹽水；5個樣品組，分別為f0組、fw組、fa組、fb-水組及fb-酯組——各樣品組分別灌胃給予相應(yīng)樣品，劑量2g原藥材/kg體重；陽性對照藥組——灌胃給予復(fù)方丹參片水混懸液0.3g/kg體重(臨用前現(xiàn)配置成每1ml含0.03g復(fù)方丹參片)。
各組均按1ml/100mg體重灌胃給藥，連續(xù)給藥14天，最后一天給藥24h后，ip3％戊巴比妥鈉麻醉，分離右側(cè)頸動脈15mm，將bt87-ⅲ型實(shí)驗(yàn)性血栓形成測定儀的刺激電極和溫度傳感器探頭鉤于動脈上，近心端置刺激電極，遠(yuǎn)心端置溫度傳感器。電刺激之前先用棉簽蘸取生理鹽水涂抹電極及動脈。刺激電流為1.5mv，刺激時間為7分鐘。從刺激開始至儀器報(bào)警并自動記錄時間，即血栓形成時間(ot)。以ot值和延長率作為判斷藥效的指標(biāo)。延長率＝(給藥組血栓形成時間-空白組血栓形成時間)/空白組血栓形成時間×100％。
表2各組樣品對實(shí)驗(yàn)大鼠體內(nèi)血栓形成的影響(
注：與陰性對照作對比，▲p＜0.01；
與陽性對照作對比，★p＜0.05；
與fw作對比，●p＜0.05，●●p＜0.01。
三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
上述結(jié)果表明，本發(fā)明的藥物組合物對對電刺激誘導(dǎo)的大鼠體內(nèi)血栓形成的影響顯著，各組配方均不弱于對照藥復(fù)方丹參滴丸；基礎(chǔ)方f0組、fa與fw組無顯著性差異；fb則顯著強(qiáng)于fw，尤其fb-乙酸乙酯提物組差異極顯著(p＜0.01)，表明基礎(chǔ)方即有體內(nèi)抗血栓活性，增加乳香50g+石灰華50g(即八味沉香制劑配方)效果有提高趨勢，但不顯著，基礎(chǔ)方增加蓽茇15g、阿魏5g、野牛心10g，再增加檳榔50g，效果提升顯著，并且脂溶性的乙酸乙酯提取物效果尤其顯著，提示蓽茇、阿魏、野牛心、檳榔對體內(nèi)抗血栓活性有顯著增強(qiáng)作 用，水提物、乙酸乙酯提取物均有效，但乙酸乙酯提取物效果更佳。
以下實(shí)施例用以進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不對本發(fā)明構(gòu)成任何限制。
實(shí)施例1、一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，組成如下：
沉香100g、肉豆蔻100g、廣棗100g、木香175g、煨訶子100g、木棉花75g、蓽茇15g、阿魏5g、野牛心10g、檳榔50g；將上述配方藥材加入藥材8倍重量體積的水煎煮2次，每次1h，濃縮至干得水提物。
實(shí)施例2、一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，組成如下：
沉香100g、肉豆蔻100g、廣棗100g、木香175g、煨訶子100g、木棉花75g、蓽茇15g、阿魏5g、野牛心10g、檳榔50g；將上述配方藥材加入8倍重量體積的乙酸乙酯加熱提取2次，每次1h，濃縮至干得乙酸乙酯提取物。
實(shí)施例3、一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，組成如下：
沉香80份、肉豆蔻120份、廣棗80份、木香160份、煨訶子80份、木棉花110份。
實(shí)施例4、一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，組成如下：
沉香100g、肉豆蔻100g、廣棗100g、木香175g、煨訶子100g、木棉花75g、蓽茇15g、阿魏5g、野牛心10g。
實(shí)施例5、一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，組成如下：
沉香120g、肉豆蔻120g、廣棗120g、木香160g、煨訶子100g、木棉花110g、蓽茇10g、阿魏2g、野牛心8g，將上述配方藥材常規(guī)水提后加入常規(guī)輔料進(jìn)一步制成片劑。
實(shí)施例6、一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，組成如下：
沉香100g、肉豆蔻100g、廣棗120g、木香200g、煨訶子100g、木棉花60g、蓽茇20g、阿魏7g、野牛心12g。
實(shí)施例7、一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，組成如下：
沉香100g、肉豆蔻100g、廣棗110g、木香160g、煨訶子100g、木棉花110g、蓽茇20g、阿魏7g、野牛心12g、檳榔40份，將上述配方藥材常規(guī)水提后加入常規(guī)輔料進(jìn)一步制成膠囊。
實(shí)施例8、一種具有抗血栓作用的藏藥組合物，組成如下：
沉香120g、肉豆蔻100g、廣棗110g、木香160g、煨訶子80g、木棉花80g、蓽茇20g、阿魏7g、野牛心12g、檳榔60份。