本發(fā)明涉及不含兒茶素的茶水、包含該茶水的組合物及所述不含兒茶素的茶水的制備方法。
背景技術(shù)：
：茶水是通過將山茶科的茶(Camelliasinensis)的芽和葉子泡制而得。茶水早已從公元前之前被用作飲品。茶水中含有的活性成分如兒茶素、氨基酸、維生素C、β-胡蘿卜素、膳食纖維等的有益的藥理機(jī)制在逐漸被闡明。尤其，茶中所含的成分的效果如抗氧化、抗老化、抗癌、降低血膽固醇、重金屬解毒、防蛀牙和預(yù)防口臭效果備受關(guān)注。其中，茶的兒茶素因存在諸多羥基(-OH)而可易于與各種物質(zhì)相結(jié)合而具有抗氧化、抗癌、心血管疾病預(yù)防和解毒效果。因此，對(duì)富含作為綠茶的有用成分的兒茶素的茶水的制備方法的研究正積極展開著。然而，兒茶素因其澀味而降低了作為飲品的茶的喜好感。此外，由于存在諸多羥基(-OH)，當(dāng)在室溫下保存茶時(shí)經(jīng)過氧化而茶會(huì)變成褐色。進(jìn)一步，所述兒茶素經(jīng)常會(huì)阻礙所述茶中所含的其他活性成分如咖啡因的吸收。因此，當(dāng)用含兒茶素的茶水來制備化妝品或藥品時(shí)，會(huì)存在如下問題，即使所述茶中所含的其他活性成分氧化，因此降低它們的功效并產(chǎn)生異味和變色?！鞠嚓P(guān)領(lǐng)域參考文獻(xiàn)】韓國專利公布號(hào)2013-0010984韓國專利公布號(hào)2013-0022471技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：技術(shù)問題本發(fā)明旨在提供用作化妝品或藥品的不含兒茶素的茶水、包含該茶水的組合物及該茶水的制備方法。技術(shù)方案一方面，本發(fā)明提供不含兒茶素的茶水，所述茶水包含占所述茶水總重量的1wt％或以下的兒茶素。另一方面，本發(fā)明提供皮膚外用組合物和用于修復(fù)皮膚屏障功能或皮膚保濕的組合物，所述組合物包含所述不含兒茶素的茶水。另一方面，本發(fā)明提供所述不含兒茶素的茶水的制備方法，該方法包括：通過對(duì)原始茶葉進(jìn)行汽蒸處理而使酶失活并對(duì)該茶葉進(jìn)行榨汁來獲取茶汁的步驟；和通過從所榨取的茶汁中去除兒茶素來獲取不含兒茶素的茶水的步驟。有益效果本發(fā)明的不含兒茶素的茶水是通過對(duì)未加工的原始茶葉進(jìn)行汽蒸處理來使酶失活而防止所述茶葉的氧化并之后去除兒茶素來制備的。因此，包含本發(fā)明的茶水的化妝品或藥物組合物不會(huì)產(chǎn)生異味和變色，從而可穩(wěn)定地用于如食品、化妝品、藥品等各種產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域中。此外，本發(fā)明的茶水通過去除兒茶素而不會(huì)產(chǎn)生異味和變色。因?yàn)楸景l(fā)明的不含兒茶素的茶水包含大量的源自原始茶葉的礦物質(zhì)、氨基酸和游離糖，從而所述茶水可以提供優(yōu)異的修復(fù)皮膚屏障功能或皮膚保濕的效果。附圖說明圖1展示了制備本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例的不含兒茶素的茶水并制備包含所述茶水的化妝品組合物的過程；圖2展示了用于分析實(shí)施例1所制備的不含兒茶素的茶水中所含的兒茶素的針對(duì)兒茶素GC、EGCG、CAF、EC、EGCG、EGCG、ECG和CG標(biāo)準(zhǔn)的HPLC分析數(shù)據(jù)(標(biāo)準(zhǔn)曲線)；圖3展示了實(shí)施例1的的HPLC分析結(jié)果，表明實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水中不包含兒茶素；圖4展示了在一個(gè)圖表中的圖2的兒茶素標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)和圖3的實(shí)施例1的數(shù)據(jù)；圖5展示了用未處理組(non-treated)、陽性對(duì)照組、本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例(實(shí)施例1)的不含兒茶素的茶水和第二次沖茶(對(duì)比實(shí)施例1)處理的角質(zhì)形成細(xì)胞中的絲聚蛋白基因的表達(dá)水平；圖6比較了本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例的不含兒茶素的茶水與對(duì)照組之間隨時(shí)間的經(jīng)表皮水分流失(g/m2h)；圖7比較了本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例的不含兒茶素的茶水與對(duì)照組之間隨時(shí)間的經(jīng)表皮水分流失(g/m2h)的變化；圖8比較了本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例的不含兒茶素的茶水與對(duì)照組之間隨時(shí)間的皮膚水合能力(A.U.)的變化。具體實(shí)施方式將2014年2月28日申請(qǐng)的韓國專利申請(qǐng)?zhí)?0-2014-0024064作為參考全部引入本發(fā)明中。本申請(qǐng)主張作為參考整體引入其中的韓國專利申請(qǐng)?zhí)?0-2014-0024064的優(yōu)先權(quán)。在本發(fā)明中，“皮膚”是指，覆蓋動(dòng)物身體表面的組織。這里使用的該術(shù)語為廣義上的概念，既包括身體和臉部的表面組織，還包括毛發(fā)和頭皮。在本發(fā)明中，“茶水”廣泛地指源自茶葉的任何液體。具體地，可以為將未加工或加工的茶葉浸泡在水中后獲得的水、茶葉的提取物、將通過加熱茶葉而產(chǎn)生的蒸氣進(jìn)行冷凝處理來獲得的液體、通過對(duì)茶葉進(jìn)行汽蒸處理并加入冷水或離子水來進(jìn)行提取而獲得的液體等。所述茶水既包含茶葉中含有的水，也包含對(duì)人體有利的成分。下面，將具體說明本發(fā)明。本發(fā)明提供不含兒茶素的茶水，該茶水包含占所述茶水總重量的1wt％或以下的兒茶素。具體地，本發(fā)明提供含有0.5wt％、0.3wt％、0.1wt％、0.01wt％、或0.0001wt％或以下的兒茶素。更具體地，本發(fā)明提供完全不包含兒茶素的茶水。在本發(fā)明中，“原始茶葉”是指未加工的茶葉。所述“茶葉”是指，茶(Camelliasinensis)的芽或葉子，且不限于其質(zhì)量或種類。具體地，可以使用在春天、夏天或秋天收獲的茶葉,還可以使用通過遮光來增加葉綠素含量的玉露茶(okrotea)，但不限于此。干燥茶葉或加工茶葉中存在的問題在于，在加熱的過程中所述茶葉中所含的水、揮發(fā)性成分和其他水溶性成分會(huì)流失。相反地，由于本發(fā)明中所用的原始茶葉富含礦物質(zhì)和氨基酸，當(dāng)被涂抹到皮膚上時(shí)它可以提供修復(fù)皮膚屏障功能和皮膚保濕的效果。所述兒茶素具有化學(xué)式1的結(jié)構(gòu)。具體地，沒食子兒茶素(GC)、表沒食子兒茶素(EGC)、兒茶素(C)、咖啡因(CAF)、表兒茶素(EC)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)、沒食子兒茶素沒食子酸酯(GCG)、表兒茶素沒食子酸酯(ECG)、兒茶素沒食子酸酯(CG)等被稱為茶兒茶素?！净瘜W(xué)式1】通常，茶葉包含基于其總干重的10-15％的茶兒茶素，且EGCG占所述茶兒茶素的50-60％。然而，已知所述含量會(huì)根據(jù)氣候、土壤條件或茶品種而有所不同。從化學(xué)式1中所示，由于所述兒茶素具有很多羥基(-OH)，它展示了有助于人的效果，如抗氧化效果。另一方面，當(dāng)茶水中含有所述兒茶素時(shí)，在室溫下的茶水中的兒茶素會(huì)因羥基的存在而降低其他活性成分的活性。此外，隨著兒茶素被氧化，茶水會(huì)產(chǎn)生異味和變色。因此，當(dāng)被用于化妝品時(shí)難以保證穩(wěn)定性。本發(fā)明提供選自原始茶葉的茶水，其中酶被滅活，具體地提供通過對(duì)原始茶葉進(jìn)行汽蒸處理并之后去除兒茶素而獲得的茶水。例如，本發(fā)明可以提供通過對(duì)原始茶葉進(jìn)行汽蒸處理并之后通過吸附兒茶素來去除兒茶素并之后進(jìn)行過濾來獲得的茶水。在本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例中，所述經(jīng)過滅活的酶可包括多酚氧化酶。具體地，本發(fā)明的不含兒茶素的茶水的制備方法包括：通過對(duì)原始茶葉進(jìn)行汽蒸處理而使酶失活并提取茶汁來獲得茶汁的步驟；和通過從所提取的茶汁中去除兒茶素來獲得不含兒茶素的茶水的步驟。參考圖1，將詳細(xì)說明本發(fā)明的制備方法。首先，在獲得所述茶汁的步驟中，茶汁是待將原始茶葉(原材料)的酶失活后獲得的。所述原始茶葉可以為已保存在冰箱內(nèi)以防止被氧氣氧化的茶葉。此外，在獲得所述茶汁的步驟中，原始茶葉中的酶可通過讓原始茶葉與蒸汽(汽蒸)接觸而對(duì)其進(jìn)行滅活。所述汽蒸可以在90-110℃下進(jìn)行、具體為95-105℃，更具體為97-103℃。此外，所述汽蒸可以進(jìn)行0.1-3分鐘、具體為0.1-2分鐘，更具體為25-35秒。根據(jù)本發(fā)明，通過所述汽蒸處理的酶滅活，可以防止茶葉的氧化，且通過使植物組織變軟來可以提高茶汁的產(chǎn)量。當(dāng)所述汽蒸的溫度和時(shí)間高于所述較高界限時(shí)，可能會(huì)發(fā)生熱氧化。此外，當(dāng)所述溫度和時(shí)間低于所述較低界限時(shí)，所述酶可能不會(huì)被100％滅活，且可能會(huì)發(fā)生酶氧化。在通過對(duì)所述原始茶葉進(jìn)行榨汁來獲得其中酶被滅活的茶汁的步驟中，所述榨汁可通過選自齒輪式榨汁、壓式榨汁、研磨式榨汁機(jī)和酶降解式榨汁中的一種或多種方法來進(jìn)行，具體地通過壓式榨汁來進(jìn)行。在本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例中，去除所述兒茶素的過程可包括：吸附包含來自所榨取的茶汁的兒茶素的產(chǎn)生異味和變色的成分的除臭和脫色步驟；和將經(jīng)過所述除臭和脫色步驟的茶汁進(jìn)行過濾而去除所吸附的含有兒茶素的產(chǎn)生異味和變色的成分和殘余固體的過濾步驟。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，所述除臭和脫色步驟可包括：通過使用硅藻土和活性炭中的一種或多種來吸附包含有兒茶素的所述產(chǎn)生異味和變色的成分。所述產(chǎn)生異味和變色的成分包含有色成分，如葉綠素。具體地，通過使用硅藻土來吸附所述產(chǎn)生異味和變色的成分的方法包括：將所榨取的茶汁流過硅藻土，而通過使用活性炭來吸附所述產(chǎn)生異味和變色的成分的方法包括：將活性炭放入所榨取的茶汁中而使兩者進(jìn)行反應(yīng)。在本發(fā)明的另一個(gè)示例性實(shí)施例中，所述除臭和脫色步驟可包括：通過利用有機(jī)溶劑的沉淀、高壓處理等來去除含有兒茶素的所述產(chǎn)生異味和變色的成分。然而，任一種能去除兒茶素的方法均可不受限地使用。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，在所述過濾步驟中，所吸附的含有兒茶素的所述產(chǎn)生異味和變色的成分和殘余固體可通過將已經(jīng)過所述除臭和脫色步驟的茶汁穿過過濾器來進(jìn)行去除，所述過濾器具有0.2-1.5μm的孔徑，更具體為1μm。在本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例中，獲得所述茶水的步驟可進(jìn)一步包括：待從所述茶汁中去除兒茶素之后，通過利用水、有機(jī)溶劑或其混合物來提取水溶性成分而獲得所述茶水。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，所述有機(jī)溶劑可包括，例如，如1,3-丁二醇和1,3-丙二醇的多元醇，且所述有機(jī)溶劑的濃度可以為，例如0.1-12％。本發(fā)明的不含兒茶素的茶水是因?yàn)槟芊乐褂蓛翰杷匾鹚霾杷淖兩梢苑乐乖疾枞~中所含有的其他生理學(xué)上有益的成分的變性。因此，所述茶水不會(huì)產(chǎn)生異味和變色，且其他有益成分的效果可有效地發(fā)揮作用。本發(fā)明還提供皮膚外用組合物，該組合物包含所述不含兒茶素的茶水。在另一個(gè)示例性實(shí)施例中，本發(fā)明提供用于修復(fù)皮膚屏障功能或皮膚保濕的組合物，該組合物包含所述不含兒茶素的茶水。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，所述組合物可包含占所述組合物總重量的0.01-100wt％的所述不含兒茶素的茶水，具體地0.015wt％、0.1wt％、1wt％、10wt％、20、30、40、50、或60wt％或以上且100wt％、90wt％、或80wt％或以下。所述皮膚屏障功能是指，從外部環(huán)境如化學(xué)物質(zhì)、空氣污染物、干燥、紫外線等中的各種刺激中保護(hù)皮膚的功能，且防止從皮膚中有過多水分流失。這種功能只有在由角質(zhì)形成細(xì)胞構(gòu)成的角質(zhì)層(hornylayer)正常形成時(shí)才可以維持。具體地，當(dāng)舊的角質(zhì)形成細(xì)胞從皮膚脫落并由新的角質(zhì)形成細(xì)胞所替代的角質(zhì)化(表皮細(xì)胞的分化)過程中，角質(zhì)形成細(xì)胞形成角質(zhì)層，同時(shí)產(chǎn)生天然保濕因子(NMF)和細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)(神經(jīng)酰胺、膽固醇、脂肪酸等)，從而角質(zhì)層具有堅(jiān)固性和靈活性，以具有皮膚屏障功能。然而，所述角質(zhì)層會(huì)因習(xí)慣性因素如過度洗臉、洗澡等、環(huán)境因素如干燥空氣、污染物等和內(nèi)源性疾病如過敏性皮膚、老年性皮膚等而容易喪失本身的功能。但是角質(zhì)層可能由于諸如過度洗臉、洗澡等的習(xí)慣因素，諸如干燥空氣、污染物等的環(huán)境因素以及諸如特應(yīng)性皮膚，老年皮膚等的內(nèi)源性疾病而容易失去其功能。所述皮膚屏障功能的衰竭會(huì)引起各種皮膚疾病，如皮膚干燥、特應(yīng)性皮炎、接觸性皮炎、牛皮癬等。由于本發(fā)明的不含兒茶素的茶水富含源自原始茶葉的礦物質(zhì)、氨基酸、游離糖等，所述茶水能夠促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞的分化，且因不含兒茶素，所述茶水沒被氧化而可以有效地發(fā)揮其功能。因此，包含所述茶水的組合物可以提供優(yōu)異的修復(fù)或強(qiáng)化皮膚屏障功能和皮膚保濕的效果。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，本發(fā)明可以提供含有所述不含兒茶素的茶水的化妝品組合物，該化妝品組合物為用于修復(fù)皮膚屏障功能或皮膚保濕的化妝品組合物。具體地，本發(fā)明的化妝品組合物可包含化妝品學(xué)上或皮膚學(xué)上可接受的介質(zhì)或基底。可以提供任何局部涂抹劑型、如溶液、凝膠、固體、水包油乳液、油包水乳液、多重乳液、懸浮劑、微乳劑、微膠囊、微粒劑、離子(脂質(zhì)體)或非離子囊泡分散劑、霜?jiǎng)⒒瘖y水、營養(yǎng)水、粉末、軟膏、噴霧劑、清潔劑或遮瑕棒。此外，本發(fā)明的組合物可被使用成泡沫形式或進(jìn)一步含有壓縮推進(jìn)劑的氣溶膠組合物形式。這些組合物可通過相關(guān)領(lǐng)域中常用的方法進(jìn)行制備。所述化妝品組合物可附加地包含其他可對(duì)主要效果提供協(xié)同效果的其他成分，這些成分在不對(duì)所述主要效果產(chǎn)生負(fù)面影響的范圍內(nèi)。考慮到所述化妝品組合物的劑型或使用目的，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可容易地選擇這些成分。例如，所述化妝品組合物可進(jìn)一步包含皮膚吸收促進(jìn)劑，以增強(qiáng)所述化妝品組合物的效果。此外，本發(fā)明的化妝品組合物可進(jìn)一步包含選自水溶性維生素、油溶性維生素、多肽、多糖、鞘脂和海藻提取物中的一種或多種物質(zhì)。進(jìn)一步，除了所述必要成分外，本發(fā)明的化妝品組合物可進(jìn)一步包含根據(jù)需要常添加于化妝品組合物中的其他成分?？砂?，例如，油、脂肪、保濕劑、潤膚劑、表面活性劑、有機(jī)或無機(jī)顏料、有機(jī)粉末、紫外線吸收劑、防腐劑、消毒劑、抗氧化劑、植物提取物、pH調(diào)節(jié)劑、著色劑、香料、血液循環(huán)促進(jìn)劑、清涼劑、止汗劑、純凈水等?？砂诒景l(fā)明的化妝品組合物中的所述附加成分不受上述內(nèi)容的限制，且添加量也是在不對(duì)本發(fā)明的目的和效果產(chǎn)生負(fù)面影響的范圍內(nèi)。本發(fā)明的化妝品組合物的劑型不受特別限制，且基于目的可適當(dāng)?shù)剡x取。例如，它們被制成選自皮膚柔軟劑(化妝水和營養(yǎng)水)、滋養(yǎng)水、精華液、滋養(yǎng)霜、按摩霜、粉餅、口紅、妝前乳、粉底、貼劑、噴霧劑、凝膠、精華液、眼霜、眼部精華液、清潔霜、清潔泡沫、清潔水、清潔劑、潤體乳、潤體霜、身體油和身體精華中的一種或多種劑型，但不限于此。本發(fā)明可以提供包含所述不含兒茶素的茶水的藥物組合物，該藥物組合物為用于修復(fù)皮膚屏障功能或皮膚保濕的藥物組合物。具體地，本發(fā)明的藥物組合物可通過加入常用的無機(jī)或有機(jī)載體來制成用于口服或腸胃外給藥的固體、半固體或液體劑型。本發(fā)明的藥物組合物可根據(jù)常用方法容易地進(jìn)行配制，且可適當(dāng)?shù)厥褂帽砻婊钚詣?、賦形劑、著色劑、香料、穩(wěn)定劑、防腐劑、保存劑、潤濕劑、乳化促進(jìn)劑、懸浮劑、用于控制滲透壓的鹽和/或緩沖劑、或其他常用佐劑。用于口服給藥的劑型可包括，例如，片劑、顆粒劑、軟或硬膠囊、粉末、細(xì)顆粒劑、細(xì)粉劑、液體、乳劑、糖漿、丸劑等。除了所述活性成分之外，這些劑型可進(jìn)一步包含稀釋劑(例如，乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素或甘氨酸)、潤滑劑(例如，二氧化硅、滑石、硬脂酸或其鎂或鈣鹽、或聚乙二醇)或粘合劑(例如，硅酸鎂鋁、淀粉糊、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉或聚乙烯吡咯烷酮)。根據(jù)需要，它們可進(jìn)一步包含藥物添加劑，例如，如淀粉、瓊脂、藻酸或其鈉鹽的崩解劑、吸收劑、著色劑、矯味劑、甜味劑等。所述片劑可以通過常用的混合、制粒或包衣方法制成。用于腸胃外給藥的劑型可包括，例如，用于皮膚外用劑型、注射劑、滴劑、洗劑、軟膏、凝膠、霜?jiǎng)腋?、乳劑、栓劑、貼劑或噴霧劑，但不限于此。本發(fā)明的藥物組合物可口服給藥或腸胃外給藥，例如，直腸給藥、局部給藥、經(jīng)皮給藥、靜脈內(nèi)給藥、肌內(nèi)給藥、腹膜內(nèi)給藥等。所述活性成分的給藥劑量會(huì)根據(jù)待治療的受試者的年齡、性別和體重、待治療的特定疾病或病理狀況、疾病或病理狀況的嚴(yán)重性、給藥途徑和診斷者的判斷而有所不同?？紤]到這些因素，所述給藥劑量是在本領(lǐng)域的技術(shù)人員的水平的范圍內(nèi)確定。在一個(gè)示例性實(shí)施例中，本發(fā)明可提供用于修復(fù)皮膚屏障功能或皮膚保濕的食品組合物，該食品組合物包含所述不含兒茶素的茶水。所述食品組合物的劑型不受特別限制。所述食品組合物可以為固體或飲料形式。下面，通過實(shí)施例、對(duì)比實(shí)施例和測(cè)試實(shí)施例，將更詳細(xì)地說明本發(fā)明。然而，下面的實(shí)施例、對(duì)比實(shí)施例和測(cè)試實(shí)施例僅用來說明，本發(fā)明的范圍不限于這些實(shí)施例、對(duì)比實(shí)施例和測(cè)試實(shí)施例?！緦?shí)施例1】不含兒茶素的茶水的制備作為本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例，不含兒茶素的茶水是通過以下方法制備。首先，在100℃下對(duì)1kg的收割1小時(shí)內(nèi)的原始茶葉(新鮮葉子，從JangwonCo.Ltd.購買)進(jìn)行汽蒸處理30秒，以使酶滅活。將所述酶失活的原始茶葉送至冷藏室內(nèi)，通過擠壓(壓縮)所述原始茶葉來獲得3kg茶汁。然后，為了去除兒茶素，通過先用硅藻土再用孔徑為1μm的筒式過濾器對(duì)所述茶汁進(jìn)行過濾。待加入活性炭后，所述茶汁再次通過孔徑為1μm的筒式過濾器進(jìn)行過濾。將所述茶汁與水以1:99的比例進(jìn)行混合后，在室溫下通過提取2小時(shí)來提取2噸的不含兒茶素的茶水。然后，通過添加作為1,3-丙二醇的原料的費(fèi)曼二醇和生物檸檬液來制備不含兒茶素的茶水(實(shí)施例1)，以防止微生物的增殖。通過高效液相色譜儀(HPLC)，分析所制備的不含兒茶素的茶水中所含有的兒茶素含量。具體地，根據(jù)健康功能食品編碼指南中對(duì)分析方法的指引，通過對(duì)注入和濃度條件進(jìn)行微調(diào)來進(jìn)行測(cè)量。通過利用HPLC-PDA，進(jìn)行分離和定量。所述HPLC分析條件為如下。-HPLC:WatersAlliance2695LC(Waters,Milford,MA,USA)；-檢測(cè)器:Waters2996光二極管陣列檢測(cè)器(280nm)；-柱:ThermoSyncronisC18(250﹡4.60mm,5μm)或等同物，類似柱；-流速:1.0mL/分鐘；-注入體積:20μL；-柱溫:40℃；-室溫:10℃；-流動(dòng)相:0.1％的DW中的乙酸(A溶液),乙腈(B溶液)?！颈?】時(shí)間流速(mL/分鐘)％A％B曲線0.01.09010610.01.09010630.01.08515642.01.08020644.01.0595645.01.0595649.01.09010650.01.090106為了確定所述HPLC分析樣本(實(shí)施例1)中的兒茶素濃度，在20ml的50％甲醇/DW中溶解作為兒茶素標(biāo)準(zhǔn)的GC、EGCG、CAF、EC、EGCG、EGCG、ECG和CG((Sigma-Aldrich,USA)，且待稀釋至不同濃度之后通過HPLC進(jìn)行分析。這個(gè)過程獨(dú)立地重復(fù)3次，然后將結(jié)果進(jìn)行平均。獲得如圖2所示的平均曲線。然后，通過獨(dú)立地重復(fù)2次HPLC，分析根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水中所含有的成分。對(duì)所述HPLC數(shù)據(jù)進(jìn)行平均化并展示在圖3中。最后，在一個(gè)圖表(圖4)中顯示了標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖2)和實(shí)施例1的分析結(jié)果(圖3)。如圖3和圖4所示，相比于圖2中的兒茶素標(biāo)準(zhǔn)的HPLC數(shù)據(jù)時(shí)，在本發(fā)明的實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水中并沒有觀察到所述兒茶素標(biāo)準(zhǔn)(圖2)中所發(fā)現(xiàn)的峰值。這表明，從實(shí)施例1的茶水中完全去除了兒茶素?！緦?duì)比實(shí)施例1】普通茶水的制備(第二次沖茶)為了比較本發(fā)明的不含兒茶素的茶水的效果，根據(jù)常用方法制備第二次沖茶。首先，從JangwonCo.Ltd.購買經(jīng)過初級(jí)加工(100℃下用蒸汽進(jìn)行汽蒸30秒->在95℃下用熱風(fēng)進(jìn)行第一次干燥45分鐘->在室溫下揉捻20分鐘->進(jìn)行第二次干燥40分鐘->在90℃下進(jìn)行最后干燥->80℃下用熱風(fēng)進(jìn)行干燥)的綠茶。然后，待在冷水中對(duì)綠茶提取3天后，用合成防腐劑進(jìn)行處理，通過孔徑為1μm的筒式過濾器進(jìn)行過濾來制備第二次沖茶(對(duì)比實(shí)施例1)?！緶y(cè)試實(shí)施例1】角質(zhì)形成細(xì)胞內(nèi)的絲聚蛋白基因的表達(dá)的促進(jìn)程度的比較為了評(píng)估本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例的不含兒茶素的茶水對(duì)角質(zhì)形成細(xì)胞的分化的效果，在角質(zhì)形成細(xì)胞中，將作為構(gòu)成皮膚屏障的角蛋白結(jié)合蛋白的絲聚蛋白基因的表達(dá)的促進(jìn)能力與未處理組和對(duì)比實(shí)施例1進(jìn)行比較。首先，將從Invitrogen(SanDiego,CA,USA)購買的正常人角質(zhì)形成細(xì)胞(NHKs)在37℃的潮濕大氣(95％空氣和5％CO2)下進(jìn)行培養(yǎng)。然后，待用50ppm、100ppm或200ppm(0.005％、0.01％或0.02％)的所述不含兒茶素的茶水(實(shí)施例1)、用50ppm、100ppm、200ppm或500ppm(0.005％、0.01％、0.02％或0.05％)的所述第二次沖茶(對(duì)比實(shí)施例1)或作為陽性對(duì)照組的1.2mMCa2+對(duì)所述正常人角質(zhì)形成細(xì)胞處理24小時(shí)，通過實(shí)時(shí)PCR來研究絲聚蛋白(FLG)的表達(dá)。如圖5所示，所述絲聚蛋白基因在低濃度50ppm和100ppm(0.005％和0.01％)的對(duì)比實(shí)施例1的第二次沖茶和本發(fā)明的實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水中均沒有表達(dá)。當(dāng)濃度為200ppm(0.02％)時(shí)，本發(fā)明的實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水中的絲聚蛋白表達(dá)與所述未處理組相比增加了1.5倍或以上，然而對(duì)比實(shí)施例1的第二次沖茶中的絲聚蛋白表達(dá)反而降低。這表明，不含兒茶素的茶水可通過促進(jìn)絲聚蛋白表達(dá)來展示出能修復(fù)或強(qiáng)化皮膚屏障功能和皮膚保濕的效果，從而促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞的分化?！緶y(cè)試實(shí)施例2】皮膚屏障功能的修復(fù)的比較為了研究本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例的不含兒茶素的茶水對(duì)因皮膚受損的受損皮膚屏障功能的修復(fù)效果，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。首先，選取年齡在20-50的22名成年女性。她們的平均年齡為38.41。在五次訪問(訪問1-5)的過程中測(cè)量皮膚屏障功能的修復(fù)。從第二次訪問(訪問2)起，每天在同一時(shí)間，在測(cè)試區(qū)域上涂抹實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水，共涂抹2周。通過利用水分蒸散計(jì)(vapometer，DelfinVapoMeterSWL4255,DelfinTechnologiesLtd,Finland)，測(cè)量作為皮膚水合能力和皮膚屏障功能的尺度的經(jīng)表皮水分流失(TEWL)的修復(fù)，然后利用圖像分析儀(VisioscanVC98,Courage-KhazakaElectronicGmbH,Germany)拍攝所述測(cè)試區(qū)域。為了每次的測(cè)量和拍攝，還測(cè)量并拍攝作為對(duì)照組的未涂抹實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水的區(qū)域。具體地，在第一次訪問時(shí)，待為前臂的測(cè)試區(qū)域上的受損皮膚屏障貼上貼劑后，測(cè)量經(jīng)表皮水分流失(TEWL)的修復(fù)并拍攝所述測(cè)試區(qū)域(拜訪1：-1天)。在第二天的第二次拜訪中，待去除所述貼劑后立即用相同方法測(cè)量和拍攝皮膚損傷(拜訪2：0天)。然后，將實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水涂抹到所述測(cè)試區(qū)域上。在次日的第三次拜訪中，用相同方法測(cè)量和拍攝皮膚損傷(拜訪3：1天)。然后，在所述測(cè)試區(qū)域上每天在同一時(shí)間涂抹一次實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水涂。在第二次訪問一周后的第四次訪問中，用相同方法測(cè)量和拍攝皮膚損傷(拜訪4：1周)。最后，在第二次訪問二周后的第五次訪問中，用相同方法測(cè)量和拍攝皮膚損傷(拜訪5：2周)。在表2和圖6中展示了根據(jù)水分蒸散計(jì)在5次訪問(訪問1-5)中的經(jīng)表皮水分流失(TEWL)的測(cè)量結(jié)果。此外，在圖7中展示了表皮水分流失的變化(TEWLchange)?！颈?】如圖6和圖7中所示，待將本發(fā)明的實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水涂抹經(jīng)過一天(訪問3)、進(jìn)過一周(訪問4)和經(jīng)過兩周(訪問5)后，表皮水分流失迅速地減少了(p<0.05)。具體地，所述皮膚修復(fù)與所述對(duì)照組相比高出經(jīng)過1天后13.72％、經(jīng)過一周后45.96％和經(jīng)過兩周后58.68％。此外，向那些使用過實(shí)施例1的不含兒茶素的測(cè)試受試者進(jìn)行調(diào)查(全球效能調(diào)查評(píng)估)。分別有86％、82％、45％、45％和91％的受試者評(píng)估出，實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水對(duì)皮膚水合能力、皮膚紋理改善、涂抹性、吸收性和粘附性是有效的，且86％的受試者評(píng)估出，實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水具有中等或良好的香氣。由此確認(rèn)，本發(fā)明的不含兒茶素的茶水不僅能良好地修復(fù)皮膚屏障功能，而且皮膚保濕、使用感和如香氣的喜好度也良好。【測(cè)試實(shí)施例3】皮膚保濕的對(duì)比為了研究本發(fā)明的一個(gè)示例性實(shí)施例的不含兒茶素的茶水對(duì)皮膚保濕的持續(xù)性的效果，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。首先，選取年齡在20-50的21名成年女性。她們的平均年齡為41.10±4.44。在三次拜訪中測(cè)量所述測(cè)試區(qū)域的皮膚保濕度。前臂的測(cè)試區(qū)域上涂抹一次實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水。在20-25℃和40-60％濕度的條件下，通過利用corneometer(CM825,Courage-KhazakaElectronicGmbH,Germany)來測(cè)量將所述測(cè)試區(qū)域清洗干凈之后的皮膚保濕度，測(cè)量30分鐘。對(duì)相同測(cè)試區(qū)域測(cè)量三次，然后將結(jié)果平均化。具體地，在第一次拜訪時(shí)，測(cè)量實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水的涂抹前和涂抹后的皮膚水合能力。在第一次訪問時(shí)涂抹實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水后再經(jīng)過24小時(shí)之后測(cè)量所述皮膚水合能力。最后，在第一次訪問時(shí)涂抹實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水后再經(jīng)過72小時(shí)之后測(cè)量所述皮膚水合能力。其測(cè)量結(jié)果在表3和圖8中展示。在圖8中，y軸表示任意單位(A.U.)中的皮膚水合能力?！颈?】如表3和圖8中所示，在涂抹本發(fā)明的實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水后立即、24小時(shí)后和48小時(shí)后，所述皮膚水合能力有增加，且沒有一個(gè)受試者出現(xiàn)如紅斑、皮疹或瘙癢的副作用。此外，對(duì)測(cè)試受試者進(jìn)行關(guān)于功效和使用感的調(diào)差(全球效能調(diào)查評(píng)估)。分別有71％、76％、66％、85％、14％和57％的受試者評(píng)估出實(shí)施例1的不含兒茶素的茶水對(duì)皮膚水合能力、皮膚紋理改善、吸收性、粘附性、香氣和整體使用感是有效的。由此確認(rèn)，本發(fā)明的不含兒茶素的茶水具有超過72小時(shí)的優(yōu)異的皮膚保濕效果，且沒有皮膚副作用。當(dāng)前第1頁1 2 3