本申請要求于2014年5月13日提交的美國臨時專利申請序列號61/992,658、于2015年1月21日提交的美國臨時專利申請序列號62/105,992、以及于2015年2月10日提交的美國臨時專利申請序列號62/114,336的優(yōu)先權和權益。每一個這些申請的全部內(nèi)容通過在此引用特此結合。

背景

癌癥繼續(xù)是主要的全球健康負擔。盡管在癌癥的治療方面有所進展，但一直存在對更有效且毒性更小的療法的未滿足的醫(yī)療需要，尤其對于患有對現(xiàn)有治療劑有抗性的晚期疾病或癌癥的那些患者。

免疫系統(tǒng)，特別是T細胞介導的細胞毒性，在腫瘤控制中的作用是公認的。有越來越多的證據(jù)表明T細胞在癌癥患者中控制腫瘤生長和存活，無論是在該疾病的早期和晚期階段。然而，腫瘤特異性T細胞應答很難在癌癥患者中裝配和維持。

迄今為止收到顯著關注的兩個T細胞通路通過毒性T淋巴細胞抗原-4(CTLA-4，CD152)和程序性死亡配體1(PD-L1，也被稱為B7-H1或CD274)發(fā)信號。

CTLA4在活化的T細胞上表達，并隨著CD28介導的T細胞激活作為共抑制劑以抑制T細胞應答。CTLA4被認為在TCR接合之后調(diào)節(jié)幼稚和記憶性T細胞的早期激活幅度，并且是影響抗腫瘤免疫和自身免疫兩者的中央抑制途徑的一部分。CTLA4專門在T細胞中表達，并且其配體CD80(B7.1)和CD86(B7.2)的表達主要限于抗原提呈細胞、T細胞、和其他免疫介導的細胞。已經(jīng)報道了阻斷CTLA4信號通路的拮抗性抗CTLA4抗體增強T細胞激活。一個這樣的抗體易普利姆瑪在2011年被FDA批準用于轉移性黑色素瘤的治療。另一個抗CTLA4抗體曲美木單抗，在III期臨床試驗中測試了對于晚期黑色素瘤的治療，但相比當時的標準治療(替莫唑胺或達卡巴嗪)沒有顯著增加患者的整體存活率。

PD-L1也是涉及控制T-細胞激活的受體和配體的復雜系統(tǒng)的一部分。在正常組織中，PD-L1在T細胞、B細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、間充質干細胞、骨髓源性肥大細胞以及不同非造血細胞上表達。它的正常功能是通過與它的兩個受體程序性死亡1(又稱為PD-1或CD279)和CD80(又稱為B7-1或B7.1)的相互作用來調(diào)節(jié)T-細胞激活與耐受之間的平衡。PD-L1還通過腫瘤來表達并且在多個部位上起作用以幫助腫瘤避開由宿主免疫系統(tǒng)進行的檢測和消除。PD-L1在寬范圍的癌癥中高頻率地表達。在一些癌癥中，PD-L1的表達與存活降低和不利預后相關聯(lián)。阻斷B7-H1與它的受體之間的相互作用的抗體能夠在體外解除PD-L1依賴性免疫抑制作用并且增強抗腫瘤T細胞的細胞毒性活性。MEDI4736是針對人PD-L1的能夠阻斷PD-L1與PD-1和CD80受體兩者的結合的人單克隆抗體。

盡管在過去十年在開發(fā)用于對抗癌癥和其他疾病的策略中做出了顯著的進步，但是患有晚期、難治性和轉移性疾病的患者具有有限的臨床選擇?；?、放射、和高劑量化療已成為劑量限制。仍然存在對新的毒性更少的方法和具有更好的治療效果、更長的臨床益處、和改進的安全性特性的治療劑的大量未滿足的需要，特別是對于那些患有對現(xiàn)有的治療劑耐藥的晚期疾病或癌癥的患者。

簡要概述

本發(fā)明提供一種在人類患者中治療非小細胞肺癌(NSCLC)的方法，該方法包括向患者給予1mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予3mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予15mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予15mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予20mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予15mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予20mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予20mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予3mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予3mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予1mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括向患者給予1mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

本發(fā)明還提供一種治療的方法，包括將MEDI4736或其抗原結合片段(例如，以1mg/kg、3mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、或20mg/kg)和曲美木單抗或其抗原結合片段(例如，以1mg/kg、3mg/kg、10mg/kg)給予至被鑒定為患有PD-L1^-或PD-L1⁺NSCLC的患者。

在任何上述方法的具體實施例中，MEDI4736是每4周一次給予的。在一個具體實施例中，MEDI4736每4周一次給予了49周。在任何上述方法的具體實施例中，MEDI4736是每2周一次給予的。在另一個實施例中，給予了總共13個劑量的MEDI4736。

在上述方面的具體實施例中，對于前21周曲美木單抗是每4周一次給予的。在上述方面的其他實施例中，從第25至49周曲美木單抗是每12周一次給予的。在上述方面的其他實施例中，給予了總共9個劑量的曲美木單抗。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括將10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段給予患者，其中MEDI4736是每2周一次給予的。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括將10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段給予患者，其中MEDI4736是每2周一次給予的。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括將10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段給予患者，其中MEDI4736是每2周一次給予的。

在上述方面的具體實施例中，對于前25周曲美木單抗是每4周一次給予的。在上述方面的其他實施例中，從第25至49周曲美木單抗是每12周一次給予的。在上述方面的其他實施例中，給予了總共9個劑量的曲美木單抗。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括將MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段給予患者，其中這些給予導致了腫瘤反應。

在本發(fā)明的方法中，相比于給予單獨的MEDI4736或其抗原結合片段抑或單獨的曲美木單抗或其抗原結合片段，這些給予導致腫瘤反應增加。

在一些實施例中，腫瘤反應可以在第2、4、6、8、或10周檢測到。在其他實施例中，腫瘤反應可以在第33周檢測到。在其他實施例中，腫瘤反應可以在第50周檢測到。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括將MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段給予患者，其中這些給予增加了無進展存活期。在一些實施例中，相比于給予單獨的MEDI4736或其抗原結合片段或者單獨的曲美木單抗或其抗原結合片段，這些給予導致無進展存活期的增加。

本發(fā)明還提供一種在人類患者中治療NSCLC的方法，該方法包括將MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段給予患者，其中這些給予增加了總存活期。在一些實施例中，相比于給予單獨的MEDI4736或其抗原結合片段或者單獨的曲美木單抗或其抗原結合片段，這些給予導致總存活期的增加。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，這些給予導致腫瘤反應。在一些實施例中，相比于給予單獨的MEDI4736或其抗原結合片段或者單獨的曲美木單抗或其抗原結合片段，這些給予導致腫瘤反應的增加。在一些實施例中，腫瘤反應可以在第8周檢測到。在一些實施例中，腫瘤反應可以在第33周檢測到。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，這些給予增加無進展存活期。在一些實施例中，相比于給予單獨的MEDI4736或其抗原結合片段或者單獨的曲美木單抗或其抗原結合片段，這些給予導致無進展存活期的增加。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，這些給予增加總存活期。在一些實施例中，相比于給予單獨的MEDI4736或其抗原結合片段或者單獨的曲美木單抗或其抗原結合片段，這些給予導致總存活期的增加。

在任何上述方法的具體實施例中，MEDI4736是每4周一次給予的。在一個具體實施例中，MEDI4736每4周一次給予了49周。在另一個實施例中，給予了總共13個劑量的MEDI4736。

在上述方面的具體實施例中，對于前21周曲美木單抗是每4周一次給予的。在上述方面的其他實施例中，從第25至49周或最前6個劑量之后曲美木單抗是每12周一次給予的。在上述方面的其他實施例中，給予了總共9個劑量的曲美木單抗。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，曲美木單抗或其抗原結合片段每4周一次給予了7次，然后每12周一次給予。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，這些給予減少了可溶性PD-L1。在一些實施例中，可溶性PD-L1減少了至少約65％、80％、90％、95％或99％。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，該腫瘤對于至少一種化學治療劑是難治性的。這樣的化學治療劑可包括但不限于威羅菲尼、埃羅替尼、阿法替尼、西妥昔單抗、卡鉑、貝伐單抗、埃羅替尼、吉非替尼或培美曲塞。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，該患者具有0-1的東部腫瘤協(xié)作組(ECOG)行為狀態(tài)。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，在給予MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段之前，該患者是免疫療法初治的。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，在給予MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段之前，該患者已接受腫瘤療法。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，MEDI4736或其抗原結合片段的給予是通過靜脈輸注。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，曲美木單抗或其抗原結合片段的給予是通過靜脈輸注。

在本發(fā)明的方法的具體實施例中，這些給予減少腫瘤大小至少相對于基線約10％、25％、50％、75％或100％。

在本發(fā)明的方法的具體實施例中，人類患者患有局部晚期不可切除或轉移的NSCLC。在本發(fā)明的方法的具體實施例中，該NSCLC是鱗狀的或非鱗狀的。在本發(fā)明的方法的其他實施例中，該NSCLC包括KRAS突變或EGFR突變。

在本發(fā)明的方法的一些實施例中，該MEDI4736或其抗原結合片段是MEDI4736，并且其中該曲美木單抗或其抗原結合片段是曲美木單抗。

在另一個方面，本發(fā)明為治療癌癥的方法提供與曲美木單抗或曲美木單抗的抗原結合片段組合的MEDI4736或MEDI4736的抗原結合片段。在本發(fā)明的一些實施例中，該癌癥是選自前列腺癌、乳腺癌、三陰性乳腺癌、結腸癌、肺癌、非小細胞肺癌、頭頸部癌、黑色素瘤、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、腎細胞癌、和肝癌。

附圖/圖簡要說明

圖1顯示了治療計劃。MTD＝最大耐受劑量。

圖2顯示了劑量遞增和劑量擴張計劃。

圖3顯示了劑量遞增研究設計。DLT＝劑量限制性毒性。

圖4提供了顯示MEDI4736的藥代動力學(PK)曲線的圖和表格。Q4W＝每4周一次。LLOQ＝定量下限。AUC＝曲線下面積。

圖5提供了顯示曲美木單抗的藥代動力學(PK)曲線的圖和表格。

圖6是顯示可溶性PD-L1的絕對濃度曲線(sPD-L1)的圖。

圖7是顯示可溶性PD-L1的抑制百分比的圖。

圖8是顯示在個體患者中MEDI4736的藥代動力學(PK)參數(shù)的圖。

圖9是顯示在個體患者中曲美木單抗的藥代動力學(PK)參數(shù)的圖。

圖10A和10B是顯示MEDI4736和曲美木單抗由于1級或2級毒性(10A)和3級或4級毒性(10B)的劑量改變的表格。

圖11是顯示研究標準的表格。

圖12顯示了研究登記。

圖13顯示了對于給藥的患者的相關不良事件(AE)。

圖14顯示了在最前4個組群中腫瘤大小從基線的變化。

圖15顯示了研究的MEDI4736和曲美木單抗劑量和計劃。

圖16顯示了在接受MEDI4736和曲美木單抗的組合的個體患者中sPD-L1的抑制。

圖17顯示了在接受MEDI4736和曲美木單抗的組合的通過組群分組的個體患者中sPD-L1的抑制。

圖18顯示了相比于在接受單獨的MEDI4736的那些受試者中的增加，在接受MEDI4736和曲美木單抗的受試者中CD4 Ki67+和CD8 Ki67增生細胞從基線的增加。CD4 Ki67+和CD8 Ki67增生細胞從基線的增加與增加的曲美木單抗劑量相關。

圖19顯示了相比于在接受單獨的MEDI4736的那些受試者中的增加，在接受MEDI4736和曲美木單抗的受試者中CD4 ICOS+和CD4 HLADR+細胞從基線的增加。CD4 ICOS+和CD4 HLADR+細胞從基線的增加與增加的曲美木單抗劑量相關。

圖20顯示了相比于在接受單獨的MEDI4736的那些受試者中的增加，在接受MEDI4736和曲美木單抗的受試者中CD4+T效應細胞從基線的增加。CD4+T效應細胞從基線的增加與增加的曲美木單抗劑量相關。

圖21顯示了相比于在接受單獨的MEDI4736的那些受試者中的增加，在接受MEDI4736和曲美木單抗的受試者中Treg細胞從基線的增加。Treg細胞從基線的增加與增加的曲美木單抗劑量相關。

圖22是顯示與MEDI4736單藥療法相比MEDI4736與曲美木單抗組合的療法的臨床活性的表格。

圖23是顯示在由曲美木單抗劑量錨定的組群中腫瘤大小從基線的變化的蜘蛛圖：1mg/kg(左上小圖)；10mg/kg(右上小圖)；以及3mg/kg(下部小圖)。

圖24是顯示與MEDI4736單藥療法相比，在由曲美木單抗劑量(1mg/kg；10mg/kg；和3mg/kg)錨定的組合組群中相關的≥3級不良事件(AE)開始的時間的圖。

圖25是顯示在由MEDI4736劑量錨定的組群中腫瘤大小從基線的變化的蜘蛛圖：10mg/kg Q4W(左上小圖)；15mg/kg Q4W(右上小圖)；20mg/kg Q4W(左下小圖)；以及10mg/kg Q2W(右下小圖)。

圖26是顯示與MEDI4736單藥療法相比，在由MEDI4736劑量(1mg/kg；10mg/kg；和3mg/kg)錨定的組合組群中相關的≥3級不良事件(AE)開始的時間的圖。

圖27是顯示與接受單獨的MEDI4736(10mg/kg Q4W)的那些(右小圖)相比，在接受MEDI4736和曲美木單抗的NSCLC患者(左小圖)的選擇性組群中腫瘤大小從基線的變化的蜘蛛圖。

圖28是顯示與MEDI4736單藥療法(左小圖)相比，在選擇性組合組群(左和右小圖)中相關的≥3級不良事件(AE)開始的時間的圖。

圖29是顯示在接受MEDI4736和曲美木單抗的患有NSCLC的患者的所有研究組群中腫瘤大小從基線的變化的蜘蛛圖。

圖30是顯示與接受單獨的MEDI4736(10mg/kg；CP1108)的那些(右小圖)相比，在接受MEDI4736和曲美木單抗的PD-L1陰性NSCLC患者(左小圖)的選擇性組群中腫瘤大小從基線的變化的蜘蛛圖。

圖31是顯示與接受單獨的MEDI4736(10mg/kg；CP1108)的那些(右小圖)相比，在接受MEDI4736和曲美木單抗的PD-L1陽性NSCLC患者(左小圖)的選擇性組群中腫瘤大小從基線的變化的蜘蛛圖。

圖32是由曲美木單抗劑量錨定的蜘蛛圖(1mg/kg(左小圖)，3mg/kg(中小圖)，和10mg/kg(右小圖))，該蜘蛛圖顯示了在接受MEDI4736和曲美木單抗的PD-L1陰性NSCLC患者的選擇性組群中腫瘤大小從基線的變化。

圖33是由MEDI4736劑量錨定的蜘蛛圖(10mg/kg Q4W(左上小圖)，15mg/kg(右上小圖)，和20mg/kg(左下小圖))，該蜘蛛圖顯示了在接受MEDI4736和曲美木單抗的PD-L1陰性NSCLC患者的選擇性組群中腫瘤大小從基線的變化。

圖34A-34D是顯示在根據(jù)NSCLC PD-L1狀態(tài)分組的在圖29中接受MEDI4736和曲美木單抗的NSCLC患者中腫瘤大小從基線的變化的蜘蛛圖：所有NSCLC患者(34A)；被鑒定為患有PD-L1^-NSCLC的患者(34B)；被鑒定為患有PD-L1⁺NSCLC的患者(34C)；以及NSCLC PD-L1狀態(tài)未知的患者(34D)。

圖35是顯示在接受MEDI4736和曲美木單抗的NSCLC患者中腫瘤大小從基線的最好變化的瀑布圖。

圖36是顯示在根據(jù)NSCLC的PD-L1狀態(tài)鑒定的在圖35中接受MEDI4736和曲美木單抗的NSCLC患者中腫瘤大小從基線的最好變化的瀑布圖。

圖37是顯示在接受MEDI4736和曲美木單抗的NSCLC患者中隨訪的持續(xù)時間的泳道圖。

詳細說明

應當指出的是，術語“一個/種(a或an)”實體是指一個/種或多個/種該實體；例如，“一個/種抗體”應理解為代表一個/種或多個/種抗體。因此，術語“一個”(或“一種”)、“一個或多個(一種或多種)”、以及“至少一個(至少一種)”在此可以互換地使用。

在此提供的是使用MEDI4736和曲美木單抗治療非小細胞肺癌(NSCLC)的方法。有三個主要的NSCLC亞型：鱗狀細胞癌、腺癌和大細胞(未分化)癌。其他亞型包括腺鱗癌和肉瘤樣癌。NSCLC可以包括在KRAS或表皮生長因子受體中的突變。這類突變在本領域是已知的并且描述于，例如，賴利(Riley)等人，美國胸腔學會會議錄(Proc Am Thorac Soc.)2009年04月15日；6(2)：201-5，其通過引用結合在此。

此外，本文提供的是使用MEDI4736和曲美木單抗治療癌癥或腫瘤增殖的方法。本文所用的“癌癥”是指由異常細胞不受控制的分裂引起的疾病。癌癥的實例包括前列腺癌、乳腺癌、三陰性乳腺癌、結腸癌、肺癌、非小細胞肺癌、頭頸部癌、黑色素瘤、胃癌、胰腺癌、卵巢癌、腎細胞癌、和肝癌。

所提供的這些方法包括給予有效量的MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段。

“MEDI4736”意指選擇性地結合PD-L1多肽的抗體或其抗原結合片段，并包含輕鏈可變區(qū)的至少一部分和/或重鏈可變區(qū)的至少一部分，該輕鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列，該重鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列。

關于用于在此提供的方法中的MEDI4736(或其抗原結合片段)的信息可以見于美國專利號8,779,108，其披露內(nèi)容通過引用以其全文結合在此。MEDI4736的片段可結晶(Fc)結構域在IgG1重鏈的恒定結構域中含有三重突變，該三重突變使與負責介導抗體依賴性細胞介導的細胞毒性(ADCC)的補體組分C1q和Fcγ受體的結合減少。MEDI4736對PD-L1有選擇性并且阻斷了PD-L1與PD-1和CD80受體的結合。MEDI4736可以在體外解除PD-L1介導的對人T-細胞激活的抑制，并且通過T-細胞依賴性機制在異種移植物模型中抑制腫瘤生長。

用于在此提供的這些方法中的MEDI4736包含重鏈和輕鏈或重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)。在一個特定方面，用于在此提供的這些方法中的MEDI4736或其抗原結合片段包含輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：1的氨基酸序列，該重鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列。在一個特定方面，用于在此提供的這些方法中的MEDI4736或其抗原結合片段包含重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，其中該重鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：3-5的卡巴特(Kabat)定義的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且其中該輕鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：6-8的卡巴特定義的CDR1、CDR2和CDR3序列。本領域技術人員將能夠容易地鑒定對于本領域技術人員而言已知的喬西亞(Chothia)定義、Abm定義或其他CDR定義。在一個特定方面，用于在此提供的這些方法中的MEDI4736或其抗原結合片段包含如在美國專利號8,779,108中所披露的2.14H9OPT抗體的可變重鏈和可變輕鏈CDR序列，該專利通過引用以其全文結合在此。

“曲美木單抗”意指選擇性地結合CTLA4多肽的抗體或其抗原結合片段，并包含輕鏈可變區(qū)的至少一部分和/或重鏈可變區(qū)的至少一部分，該輕鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：9的氨基酸序列，該重鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：10的氨基酸序列。示例性的抗CTLA4抗體描述于例如美國專利號6,682,736；7,109,003；7,123,281；7,411,057；7,824,679；8,143,379；7,807,797；和8,491,895中(其中，曲美木單抗是11.2.1)，這些專利通過引用結合在此。曲美木單抗是示例性抗CTLA4抗體。在下面的序列表中提供了曲美木單抗序列。

關于用于在此提供的方法中的曲美木單抗(或其抗原結合片段)的信息可以見于US 6,682,736(其中它被稱為11.2.1)，該專利的披露內(nèi)容通過引用以其全文結合在此。曲美木單抗(也稱為CP-675,206、CP-675、CP-675206、和ticilimumab)是一種人類IgG₂單克隆抗體，該單克隆抗體對于CTLA4有高度選擇性并阻斷了CTLA4與CD80(B7.1)和CD86(B7.2)的結合。它已被證明導致體外免疫激活，并且用曲美木單抗治療的一些患者已表現(xiàn)出腫瘤消退。

用于在此提供的這些方法中的曲美木單抗和其抗原結合片段包含重鏈和輕鏈或重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)。在一個特定方面，用于在此提供的這些方法中的曲美木單抗或其抗原結合片段包含輕鏈可變區(qū)和重鏈可變區(qū)，該輕鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：9的氨基酸序列，該重鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：10的氨基酸序列。在一個特定方面，用于在此提供的這些方法中的曲美木單抗或其抗原結合片段包含重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，其中該重鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：11-13的卡巴特(Kabat)定義的CDR1、CDR2和CDR3序列，并且其中該輕鏈可變區(qū)包含SEQ ID NO：14-16的卡巴特定義的CDR1、CDR2和CDR3序列。本領域技術人員將能夠容易地鑒定對于本領域技術人員而言已知的喬西亞(Chothia)定義、Abm定義或其他CDR定義。在一個特定方面，用于在此提供的方法中的曲美木單抗或其抗原結合片段包括如在U.S.6,682,736中所披露的11.2.1抗體的可變重鏈和可變輕鏈CDR序列，該專利通過引用以其全文結合在此。

術語“抗原結合片段”是指完整抗體的一部分和/或是指完整抗體的抗原決定可變區(qū)。已知的是，抗體的抗原結合功能可以由全長抗體的片段來執(zhí)行?？贵w片段的實例包括但不限于：Fab、Fab′、F(ab′)2、以及Fv片段、線性抗體、單鏈抗體、雙抗體(diabodies)、以及由抗體片段形成的多特異性抗體。

在某些方面中，呈現(xiàn)具有NSCLC的患者被給予MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段。MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段可以僅被給予一次或偶爾給予，而仍然為該患者提供益處。在另外的方面中，該患者被給予另外的后繼劑量。可以取決于該患者的年齡、體重、臨床評價、腫瘤負荷和/或其他因素(包括主治醫(yī)生的判斷)，在不同時間間隔下給予后續(xù)劑量。

MEDI4736或其抗原結合片段的劑量之間的間隔可以是每4周一次。曲美木單抗或其抗原結合片段的劑量之間的間隔可以是每4周一次。曲美木單抗或其抗原結合片段的劑量之間的間隔可以是每12周一次。曲美木單抗或其抗原結合片段的劑量之間的間隔可以是每4周一次持續(xù)6個周期，然后每12周一次。

在某些方面，MEDI4736或其抗原結合片段是與曲美木單抗或其抗原結合片段大約一樣的頻率給予的。在某些方面，MEDI4736或其抗原結合片段是與曲美木單抗或其抗原結合片段大約3倍的頻率給予的。

在一些實施例中，向該患者給予至少兩個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段。在一些實施例中，可以向該患者給予至少三個劑量、至少四個劑量、至少五個劑量、至少六個劑量、至少七個劑量、至少八個劑量、至少九個劑量、至少十個劑量或至少十五個劑量或更多。在一些實施例中，在四周治療周期內(nèi)、在八周治療周期內(nèi)、在十六周治療周期內(nèi)、在二十周治療周期內(nèi)、在二十四周治療周期內(nèi)或在一年或更長治療周期內(nèi)給予MEDI4736或其抗原結合片段。在一些實施例中，在四周治療周期內(nèi)、在八周治療周期內(nèi)、在十二周治療周期內(nèi)、在十六周治療周期內(nèi)、在十二周治療周期內(nèi)、在二十四周治療周期內(nèi)、在三十六周治療周期內(nèi)、在四十八周治療周期內(nèi)、或在一年或更長治療周期內(nèi)給予曲美木單抗或其抗原結合片段。

在一些實施例中，MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段是在同一天被給予的。在一些實施例中，MEDI4736或其抗原結合片段與曲美木單抗或其抗原結合片段同時被給予。在其他實施例中，MEDI4736或其抗原結合片段在曲美木單抗或其抗原結合片段給予后約1小時被給予。

有待向該患者給予的MEDI4736或其抗原結合片段的量和曲美木單抗或其抗原結合片段的量將取決于不同參數(shù)，如該患者的年齡、體重、臨床評價、腫瘤負荷和/或其他因素，包括主治醫(yī)生的判斷。

在某些方面中，該患者被給予一個或多個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約1mg/kg。在某些方面中，該患者被給予一個或多個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約3mg/kg。在某些方面中，該患者被給予一個或多個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約10mg/kg。在某些方面中，該患者被給予一個或多個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約15mg/kg。在某些方面中，該患者被給予一個或多個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約20mg/kg。

在某些方面中，該患者被給予至少兩個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約1mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少兩個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約3mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少兩個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約10mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少兩個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約15mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少兩個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約20mg/kg。在一些實施例中，相隔約四周給予該至少兩個劑量。

在某些方面中，該患者被給予至少三個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約1mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少三個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約3mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少三個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約10mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少三個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約15mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少三個劑量的MEDI4736或其抗原結合片段，其中該劑量是約20mg/kg。在一些實施例中，相隔約四周給予該至少三個劑量。

在某些方面中，該患者被給予一個或多個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約1mg/kg。在某些方面中，該患者被給予一個或多個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約3mg/kg。在某些方面中，該患者被給予一個或多個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約10mg/kg。

在某些方面中，該患者被給予至少兩個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約1mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少兩個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約3mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少兩個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約10mg/kg。在一些實施例中，相隔約四周給予該至少兩個劑量。在一些實施例中，相隔約十二周給予該至少兩個劑量。

在某些方面中，該患者被給予至少三個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約1mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少三個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約3mg/kg。在某些方面中，該患者被給予至少三個劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段，其中該劑量是約10mg/kg。在一些實施例中，相隔約四周給予該至少三個劑量。在一些實施例中，相隔約十二周給予該至少三個劑量。

在某些方面中，根據(jù)在此提供的這些方法給予MEDI4736或其抗原結合片段和/或曲美木單抗或其抗原結合片段是通過腸胃外給予的。例如，可以通過靜脈內(nèi)輸注或通過皮下注射來給予MEDI4736或其抗原結合片段和/或曲美木單抗或其抗原結合片段。在一些實施例中，該給予是通過靜脈內(nèi)輸注。

在某些方面，向患者給予1mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予1mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予1mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

在某些方面，向患者給予3mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予3mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予3mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

在某些方面，向患者給予10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予10mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

在某些方面，向患者給予15mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予15mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予15mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

在某些方面，向患者給予20mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和1mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予20mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和3mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。在某些方面，向患者給予20mg/kg的MEDI4736或其抗原結合片段和10mg/kg的曲美木單抗或其抗原結合片段。

在此提供的這些方法可以減弱、延遲或穩(wěn)定腫瘤生長。在一些方面中，該減小或延遲可以是統(tǒng)計學上顯著的?？梢酝ㄟ^與基線處的患者腫瘤的生長、針對預期的腫瘤生長、針對基于大的患者群體的預期的腫瘤生長或針對對照群體的腫瘤生長進行比較來測量腫瘤生長的減少。在某些方面，腫瘤反應使用實體瘤反應評價標準(RECIST)來進行測量。

在某些方面，腫瘤反應在第8周是可檢測的。在某些方面，腫瘤反應在第33周是可檢測的。在某些方面，腫瘤反應在第50周是可檢測的。

在某些方面中，在給予MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段后，腫瘤反應是可檢測的。在某些方面中，在給予8次劑量的MEDI4736或其抗原結合片段和7次劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段后，腫瘤反應是可檢測的。在某些方面中，在給予13次劑量的MEDI4736或其抗原結合片段和9次劑量的曲美木單抗或其抗原結合片段后，腫瘤反應是可檢測的。

在某些方面中，患者實現(xiàn)了疾病控制(DC)。疾病控制可以是完全應答(CR)、部分應答(PR)或疾病穩(wěn)定(SD)。

“完全應答”(CR)、“部分應答”(PR)、和“疾病穩(wěn)定”(SD)可以如在下面表1中所定義的來確定。

在某些方面中，給予MEDI4736或其抗原結合片段可以使無進展存活期(PFS)增加。

在某些方面中，給予MEDI4736或其抗原結合片段可以使總體存活期(OS)增加。

在一些實施例中，該患者先前已經(jīng)接受了用至少一種化學治療劑進行的治療。在一些實施例中，該患者先前已經(jīng)接受了用至少兩種化學治療劑進行的治療。該化學治療劑可以是例如并且不限于威羅菲尼、埃羅替尼、阿法替尼、西妥昔單抗、卡鉑、貝伐單抗、埃羅替尼、吉非替尼、和/或培美曲塞。

在一些實施例中，該NSCLC是至少一種化學治療劑難治愈的或該NSCLC對至少一種化學治療劑有抗性。在一些實施例中，該腫瘤是至少兩種化學治療劑難治愈的或該腫瘤對至少兩種化學治療劑有抗性。該腫瘤可能是以下各項中的一種或多種難治愈的或該腫瘤對以下各項中的一種或多種有抗性：例如并且不限于威羅菲尼、埃羅替尼、阿法替尼、西妥昔單抗、卡鉑、貝伐單抗、埃羅替尼、吉非替尼、和/或培美曲塞。在一些實施例中，該NSCLC對于PD-L1是陰性的。在一些實施例中，該NSCLC對于PD-L1是陽性的。

在一些實施例中，在給予MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段之前，該患者具有0或1的東部腫瘤協(xié)作組(ECOG)(奧肯·MM(Oken MM)等人，美國臨床腫瘤學雜志(Am.J.Clin.Oncol.)，5：649-55(1982))行為狀態(tài)。

根據(jù)在此提供的這些方法，如在一些早期數(shù)據(jù)中所示，給予MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段可導致理想的藥代動力學參數(shù)?？梢允褂谩扒€下面積”(AUC)來評估總藥物暴露?！癆UC(τ)”是指從時間0至時間τ的給藥間隔的AUC，而“AUC(∞)”是指直到無窮時間的AUC。給藥可產(chǎn)生MEDI4736或其抗原結合片段的約600至約3,000μg/mL*天的AUC(τ)和曲美木單抗或其抗原結合片段的約250至約350μg/mL*天的AUC(τ)。給藥可產(chǎn)生約60至約300μg/mLMEDI4736或其抗原結合片段和約25至約35μg/mL曲美木單抗或其抗原結合片段的最大觀察濃度(Cmax)。給藥可產(chǎn)生約5至約40μg/mL MEDI4736或其抗原結合片段和約4至約6μg/mL曲美木單抗或其抗原結合片段的C最低值(最小血藥濃度)。

如在此所提供，MEDI4736或其抗原結合片段還可以使游離(可溶的)PD-L1水平降低。游離(可溶的)PD-L1是指沒有結合的PD-L1(例如，通過MEDI4736)。在一些實施例中，PD-L1水平被降低至少65％。在一些實施例中，PD-L1水平被降低至少80％。在一些實施例中，PD-L1水平被降低至少90％。在一些實施例中，PD-L1水平被降低至少95％。在一些實施例中，PD-L1水平被降低至少99％。在一些實施例中，在給予MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段之后，PD-L1水平是不可檢測的。

在一些實施例中，在給予MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少65％。在一些實施例中，在單次給予MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少80％。在一些實施例中，在單次給予MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少90％。在一些實施例中，在單次給予MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少95％。在一些實施例中，在單次給予MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少99％。在一些實施例中，在單次給予MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平是不可檢測的。

在一些實施例中，在給予兩次劑量的MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少65％。在一些實施例中，在給予兩次劑量的MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少80％。在一些實施例中，在給予兩次劑量的MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少90％。在一些實施例中，在給予兩次劑量的MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少95％。在一些實施例中，在給予兩次劑量的MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平被降低至少99％。在一些實施例中，在給予兩次劑量的MEDI4736或其抗原結合片段之后，PD-L1水平是不可檢測的。

使用MEDI4736或其抗原結合片段和曲美木單抗或其抗原結合片段兩者(即，組合療法)來治療患有實體瘤的患者可導致協(xié)同效應。本文所用的術語“協(xié)同”是指組合療法(例如，MEDI4736或其抗原結合片段與曲美木單抗或其抗原結合片段組合)比單藥療法的加和效應更加有效。

組合療法(例如，MEDI4736或其抗原結合片段與曲美木單抗或其抗原結合片段組合)的協(xié)同效應允許向患有實體瘤的患者使用一種或多種這些治療劑的更低劑量和/或向患有實體瘤的患者以更少的頻率給予所述治療劑。利用治療劑的更低劑量和/或以更少頻率給予所述療法的能力減少與向受試者給予所述療法相關的毒性而不降低所述療法在實體瘤的治療中的療效。此外，協(xié)同效應可以導致治療劑在實體瘤的管理、治療或改善中的功效增加。治療劑的組合的協(xié)同效應可避免或減少與使用任一單一療法相關的不良或不需要的副作用。

在組合療法中，MEDI4736或其抗原結合片段可以任選地被包括在與曲美木單抗或其抗原結合片段相同的藥物組合物中，或者可以被包括在單獨的藥物組合物中。在后一種情況下，包括MEDI4736或其抗原結合片段的藥物組合物適合在給予包含曲美木單抗或其抗原結合片段的藥物組合物之前、同時或之后給予。在某些情況下，將MEDI4736或其抗原結合片段在與單獨的組合物中的曲美木單抗或其抗原結合片段重疊的時期給予。

患有肺癌(例如，非小細胞肺癌)的受試者可以在選擇治療方法的過程中對PD-L1多核苷酸或多肽表達進行測試。被鑒定為具有對PD-L1是陰性的腫瘤的患者(例如，如通過Ct或IHC-M的分數(shù)定義的)或由具有相對于參考水平減少的或不可檢測的PD-L1水平鑒定的患者被鑒定為響應抗PD-L1抗體和曲美木單抗的組合治療。向這樣的患者給予MEDI4736或其抗原結合片段與曲美木單抗或其抗原結合片段的組合。

實例

實例1：患者與方法

(a)受試者

這項研究中的受試者被要求年齡為18歲或以上并具有組織學或細胞學證實的非小細胞肺癌(NSCLC；鱗狀和非鱗狀)，根據(jù)實體瘤反應評價標準(RECIST)準則v1.1，該非小細胞肺癌具有至少一個可測量的病灶，該RECIST準則v1.1通過引用以其全文結合在此。

對于劑量遞增和劑量擴張兩個階段，組群特定的免疫治療前的要求如下：a)免疫治療初治的組群：必須沒有事先暴露于免疫治療，例如但不限于，排除疫苗的其他抗CTLA-4、抗PD-1、或抗PD-L1的抗體；和b)免疫治療預處理組群：在MEDI4736和曲美木單抗首次劑量之前必須有事先暴露于免疫治療大于28天，這些免疫治療是，例如但不限于，排除疫苗的其他抗-CTLA-4、抗PD-1、或抗PD-L1抗體。

受試者還被要求未能響應標準治療、標準治療后已復發(fā)、已拒絕標準治療、或尚不符合標準治療。受試者具有0-1的東部腫瘤協(xié)作組(ECOG)行為狀態(tài)。

具有中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)轉移的受試者在研究的第1天必須是無癥狀的。此外，在第1天，必須有至少28周沒有CNS轉移的進展，如在使用輻射治療的最后一天之后和從皮質類固醇的末次劑量的至少14天之后通過磁共振成像(MRI)/計算機斷層掃描(CT)所證明。

受試者還被要求有足夠的器官(肝和腎)和造血功能。足夠的器官和造血功能被定義為：血紅蛋白≥為9g/dL；絕對嗜中性粒細胞計數(shù)≥1500個/mm³；血小板計數(shù)≥100,000個/mm³；總膽紅素≤1.5×正常值的上限(ULN)，除非與吉爾伯特綜合征或肝轉移相關聯(lián)(對于這些受試者，基線總膽紅素必須≤3.0mg/dL)；丙氨酸氨基轉移酶(ALT)和天冬氨酸氨基轉移酶(AST)必須≤2.5×ULN，除非與肝轉移相關聯(lián)(對于這些受試者，ALT和AST必須≤5×ULN)；以及血清肌酐≤2.0mg/dL。

如果受試者正在進行任何同步化療、免疫治療、生物或激素療法用于癌癥治療，則他們不能參加。如果受試者在MEDI4736和曲美木單抗的首次劑量之前的28天內(nèi)已經(jīng)承受任何試驗性抗癌治療，則他們不能參加。如果受試者在接受免疫治療(包括抗CTLA-4治療)時有任何事先≥3級免疫相關不良事件(irAE)或任何未解決的irAE＞1級，則他們不能參加。如果受試者在MEDI4736和曲美木單抗的第一劑量之前的28天之內(nèi)經(jīng)歷了重大外科手術(如研究者所定義的)或如果他們?nèi)哉趶闹暗氖中g恢復，則他們也不能參加。除了納入標準中列出的脫發(fā)和實驗室值之外，如果受試者具有來自以前的抗癌治療的未解決的毒性，該毒性被定義為未解決至美國國立癌癥研究所不良事件通用術語標準(NCI CTCAE)V4.03的0級或1級。具有合理地預期不被MEDI4736和曲美木單抗加劇的不可逆的毒性的受試者可以被包括在內(nèi)。除了不超過10mg/天的強的松或等效物的在生理劑量的鼻內(nèi)和吸入的糖皮質激素或全身皮質類固醇激素之外，如果受試者目前正在使用免疫抑制藥物或在MEDI4736和曲美木單抗首次劑量前14天內(nèi)已經(jīng)使用免疫抑制藥物，他們也被排除。

除了不需要系統(tǒng)治療的白癜風、斑禿、格雷夫斯病或銀屑病(在過去的3年之內(nèi))之外，如果受試者在過去3年之內(nèi)具有活性的或之前的自身免疫性疾病，包括炎性腸病、憩室炎、腸易激病、乳糜瀉、韋格納綜合征和橋本綜合征，則他們不能參加。如果受試者有原發(fā)性免疫缺陷或結核病的歷史，如果受試者具有已知的活性或慢性病毒性肝炎A、B、或C；如果受試者有人類免疫缺陷病毒(HIV)；其他活性嚴重疾病或不受控制的間發(fā)性疾病；在MEDI4736和曲美木單抗首次劑量之前28天內(nèi)已接受活的減毒疫苗；5年之內(nèi)具有其他侵入性惡性腫瘤；或對研究藥物配制品的已知的過敏或過敏癥，則他們也不能參加。

如果受試者具有晚期NSCLC，該NSCLC具有容納間變性淋巴瘤受體酪氨酸激酶(ALK)基因重排或表皮生長因子受體(EGFR)敏化突變的腫瘤，并沒有接受合適的酪氨酸激酶抑制劑(TKI)治療，則他們也不能參加。這些受試者可以在用文件證明進展或不能耐受合適的TKI后進行登記。

(b)研究設計

這項研究是MEDI4736和曲美木單抗組合的開放開放性1b期研究(圖1)。對于組群的重點研究標準顯示在圖11中。這項研究將在劑量遞增階段和劑量擴張階段納入約36名受試者，并且在免疫治療初治和免疫治療預處理組群中各納入至少20名受試者。在劑量遞增階段為免疫治療初治組群確定的最大耐受劑量(MTD)或對于每個藥劑沒有超過MTD的最高協(xié)議定義的劑量將作為在免疫治療預處理組群納入的受試者作為劑量遞增階段的部分的起始劑量。對于免疫治療預處理組群的劑量探索將與免疫治療初治組群的劑量擴張階段平行進行。

劑量遞增階段

免疫療法初治組群

在研究的劑量遞增階段，MEDI4736和曲美木單抗最初將在3-6名免疫治療初治受試者的連續(xù)組群中給予，每個受試者經(jīng)由靜脈輸注接受曲美木單抗Q4W持續(xù)6次劑量和每12周一次(Q12W)持續(xù)3次劑量(即，曲美木單抗劑量7是在劑量6的4周后給予并且劑量8是在劑量7的12周后給予)和MEDI4736 Q4W持續(xù)13次劑量，共計1年(圖2)。按照標準的3+3設計和改進的基于區(qū)域的設計，每個組群將納入至少3個受試者。在第一組群(組群1)中的受試者將接受3mg/kg MED4736和1mg/kg曲美木單抗的劑量。如果在在第一劑量組群中觀察到≥2的劑量限制毒性(DLT)，起始劑量將按照圖1逐步減量。如果在給定的劑量組群中6名受試者中不超過1名經(jīng)歷了DLT，劑量遞增將繼續(xù)。

隨后的組群將接受曲美木單抗(Q4W給予6次劑量接著Q12W給予3次劑量)和MEDI4736(Q4W給予13次劑量)，直到MTD或對于每個藥劑沒有超過MTD的最高協(xié)議定義的劑量被鑒定。

一旦在劑量遞增階段在免疫治療初治受試者中確定了MTD或對于每個藥劑沒有超過MTD的最高協(xié)議定義的劑量，免疫治療初治組群(見圖1)的擴張階段將開始?；趶膭┝繑U張階段在免疫治療初治組群中對PK和藥效學、安全性和效力參數(shù)的評估，可以在擴張階段評估來自一個或多個中間基于區(qū)域的組群的沒有超過MTD的一個或多個另外的劑量。

免疫治療預處理組群

在劑量遞增階段為免疫治療初治組群(見圖1)確定的MTD或對于每個藥劑沒有超過MTD的最高協(xié)議定義的劑量將作為在免疫治療預處理組群納入的受試者作為劑量遞增階段的部分的起始劑量。對于使用3+3設計的免疫治療預處理組群的劑量探索將與免疫治療初治組群的劑量擴張階段平行進行。一旦在劑量遞增階段在免疫治療預處理受試者中確定了MTD或對于每個藥劑沒有超過MTD的最高協(xié)議定義的劑量，免疫治療預處理組群的劑量擴張階段可開始?；趶膭┝繑U張階段在免疫治療預處理組群中對PK和藥效學、安全性和效力參數(shù)的評估，可以在劑量擴張階段評估來自一個或多個中間基于區(qū)域的組群的沒有超過MTD的一個或多個另外的劑量。

劑量擴張階段

兩個劑量擴張組群將被使用：免疫初治和免疫預處理(慘見圖1)。在劑量遞增階段中鑒定的MTD或對于每個藥劑沒有超過MTD的最高協(xié)議定義的劑量將被用于在劑量擴張階段的兩個組群。另外，基于形成的受試者數(shù)據(jù)，包括安全性、PK、藥效學、生物標志物、以及來自仍在進行的試驗的反應連同數(shù)據(jù)，不超過MTD的來自一個或多個中間基于區(qū)域的組群的一個或多個劑量可以包括作為在劑量擴張階段用于免疫治療預處理和免疫治療初治組群的一個或多個另外的劑量。

最初，在每個免疫治療初治組群和免疫治療預處理組群中大約20名NSCLC受試者將被納入。依賴于形成的受試者數(shù)據(jù)，包括安全性、PK、藥效學、生物標志物、以及來自仍在進行的試驗的反應和數(shù)據(jù)，在劑量擴張階段可以對免疫治療初治組群每個納入另外的受試者，多達總共60名受試者。

治療方案

受試者將在研究的劑量遞增或劑量擴張階段中進行治療。在研究的劑量遞增和劑量擴張階段，曲美木單抗將每四周一次(Q4W)被給予6次劑量，接著每十二周一次(Q12W)給予3次劑量，其中劑量7是在劑量6的4周后給予，劑量8是在劑量7的12周后給予。MEDI4736將Q4W被給予13次劑量。兩種藥劑將通過IV輸注給予總共1年(圖2)。

曲美木單抗將在250mL的0.9％的氯化鈉中通過靜脈內(nèi)被給予。MEDI4736將在250mL的0.9％的氯化鈉中通過靜脈內(nèi)被給予。曲美木單抗將首先被給予。曲美木單抗輸注結束后約1小時將開始MEDI4736輸注。在組群1中，曲美木單抗的第一IV輸注將持續(xù)大約1小時和MEDI4736的第一IV輸注將持續(xù)大約為4小時；對于在這個組群中的受試者的后續(xù)輸注和對于剩余組群的所有輸注將持續(xù)大約1小時。

直到12個月MEDI4736和曲美木單抗治療期結束時，實現(xiàn)和保持疾病控制(DC)(即完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、或疾病穩(wěn)定(SD))的受試者將進入隨訪。根據(jù)在隨訪期間疾病進展(PD)的證據(jù)，如果受試者還沒有接受針對他們的疾病的其他治療并仍然滿足研究協(xié)議的納入和排除標準，則在最初12月期間可用相同的治療指南向受試者重新給予MEDI4736和曲美木單抗最多另外12個月。只允許有一輪使用MEDI4736和曲美木單抗的復治。

該研究利用3+3劑量遞增階段并將遵循圖3中所示的方案。在各個劑量組群中將納入至少3個受試者。如果在一個劑量組群中的3名患者中沒有患者具有劑量限制性毒性(DLT)，下一個劑量遞增組群將被啟動。如果在一個劑量組群中的3名患者中1名患者具有DLT，另外的3名患者將被納入相同的組群中。如果6名受試者中不超過1名經(jīng)歷DLT，下一個劑量遞增組群將被啟動。如果在評價期間在一個劑量組群中有2名或更多名患者經(jīng)歷DLT，則沒有另外的受試者將被納入那個劑量組群中。

最大耐受劑量(MTD)被定義為在6名患者中不超過1名患者經(jīng)歷DLT的組群中曲美木單抗或MEDI4736的最高劑量。這在劑量遞增階段中對免疫治療初治和預處理組群都進行確定。在擴張階段(免疫治療初治和免疫治療預處理組群)中的患者將以在劑量遞增階段中確定的MTD水平進行治療。

由于如在圖10A和10B中所描述的毒性，MEDI4736和曲美木單抗給予可以被改變或被停止。對于不明顯歸因于MEDI4736或曲美木單抗的不良事件(AE)(例如，意外事件)或對于被認為不具有臨床意義的實驗室異常情況，劑量改變不是必需的。

(c)藥代動力學、抗腫瘤、生物標志物、可溶性因子、和安全性評估

在血清中MEDI4736和曲美木單抗?jié)舛鹊臏y定將使用經(jīng)過驗證的免疫測定來進行。

用于藥代動力學評估的血液樣品將在劑量遞增階段的以下天數(shù)收集：第1天(給藥前和輸注結束)，第8天(±1天)，第15天(±1天)，第29天(給藥前和輸注結束；±3天)，第57天(給藥前和輸注結束；±3天)，第85天(給藥前和輸注結束；±3天)，第113天(給藥前和輸注結束；±3天)，第141天(給藥前和輸注結束；±3天)，第169天(給藥前和輸注結束；±3天)，第197天(給藥前和輸注結束；±3天；僅MEDI4736)，第225天(給藥前和輸注結束；±3天；僅MEDI4736)，第253天(給藥前和輸注結束；±3天)，第281天(給藥前和輸注結束；±3天；僅MEDI4736)，第309天(給藥前和輸注結束；±3天)，第337天(給藥前和輸注結束；±3天)，在治療結束時，治療結束后60天，和治療結束后90天。

用于藥代動力學評估的血液樣品將在劑量擴張階段的以下天數(shù)收集：第1天(給藥前和輸注結束)、第29天(±3天)、第57天(±3天)、第85天(±3天)、第113天(±3天)、第141天(±3天)、第169天(±3天)、第197天(±3天；僅MEDI4736)、第225天(±3天；僅MEDI4736)、第253天(±3天)、第281天(±3天；僅MEDI4736)、第309天(±3天；僅MEDI4736)、第337天(±3天)、在治療結束時、治療結束后60天、和治療結束后90天。

抗藥物抗體(ADA)的存在將在以下天數(shù)進行評估：第1天和第29天(±3天)、第85天(±3天)、第141天(±3天)、第169天(±3天)、第253天(±3天)、和第337天(±3天)、在治療結束時、治療結束后60天、和治療結束后90天。使用中尺度發(fā)現(xiàn)平臺的驗證電化學發(fā)光測定法將用于人血清中抗MEDI4736抗體的確定和用于人血清中抗曲美木單抗抗體的確定。

血液樣品將被收集用于循環(huán)可溶性因子(包括可溶性PD-L1(sPD-L1))的分析。在劑量遞增階段中，sPD-L1的水平將在以下天數(shù)進行評估：第1天、第8天(±1天)、第15天(±1天)、第29天(±3天)、第57天(±3天)、第85天(±3天)、第113天(±3天)、第141天(±3天)、第169天(±3天)、第197天(±3天)、第225天(±3天)、第253天(±3天)、第281天(±3天)、第309天(±3天)、第337天(±3天)、在治療結束時、治療結束后60天、和治療結束后90天。在劑量擴張階段中，sPD-L1的水平將在以下天數(shù)進行評估：第1天、第29天(±3天)、第57天(±3天)、第85天(±3天)、第113天(±3天)、第141天(±3天)、第169天(±3天)、第197天(±3天)、第225天(±3天)、第253天(±3天)、第281天(±3天)、第309天(±3天)、第337天(±3天)、在治療結束時、治療結束后60天、和治療結束后90天。

在篩選過程中(第-28天至第-1天)、在第8周(第50天±3天)、在第33周(第225天±3天)、在劑量遞增階段中將進行腫瘤的評估。腫瘤評價將基于修改過的RECIST準則v1.1，并包括以下評估：體格檢查(如果適用的話使用皮膚病灶的照片和測量值)，胸、腹和骨盆的CT或MRI掃描，以及大腦的CT或MRI掃描。僅在篩選時進行大腦的計算機斷層攝影術或MRI掃描。

抗腫瘤活性的評價是基于腫瘤病灶的測量、靶病灶的評估、非靶病灶的評估、和新病灶的出現(xiàn)。

靶病灶評估

對于靶病灶的評估，完全緩解被定義為所有靶病灶的消失。任何病理性淋巴結(無論是靶或非靶)必須在短軸減少至＜10mm(如果有靶節(jié)點，總和可能不是“0”)。

對于靶病灶的評估，部分緩解被定義為在靶病灶的直徑總和減少至少30％，以基線總和直徑作為參考。

對于靶病灶的評估，疾病進展被定義為在靶病灶的直徑總和增加至少20％，以研究上的最小總和作為參考(這包括基線總和，如果它是研究上的最小總和)。除了20％的相對增加，總和也必須表現(xiàn)出至少5mm的絕對增加。一個或多個新病灶的出現(xiàn)也被認為是進展。

對于靶病灶的評估，病情穩(wěn)定(SD)既不是足夠的收縮以符合PR，也不是足夠的增加以符合PD，在研究上以直徑最小的總和作為參考。

非靶病灶評估

對于非靶病灶的評估，完全緩解(CR)被定義為所有非靶病灶的消失。所有的淋巴結必須在短軸上＜10mm。

對于非靶病灶的評估，非完全緩解/非疾病進展被定義為一個或多個非靶病灶的持續(xù)和/或腫瘤標志物水平保持在正常范圍以上。

對于非靶病灶的評估，疾病進展被定義為非靶疾病大量惡化的總體水平，使得即使在靶疾病中存在SD或PR，整體腫瘤負荷已經(jīng)增加到足以值得停止治療。在不存在可測量的疾病時，非可測量的疾病的變化幅度與將對可測量的疾病需要聲明PD的增加大致相當。

新病灶

根據(jù)RECIST準則v1.1，新病灶的出現(xiàn)被考慮為PD?？紤]到對于免疫療法已觀察到獨特的反應動力學，新病灶可能不代表真實的疾病進展。在沒有快速臨床惡化時，受試者可繼續(xù)接受使用MEDI4736和曲美木單抗的治療。

總體反應

可以通過自第一次記載之日起不少于四周的重復連續(xù)評價來要求CR、PR、連同PD的確認。如在下面的表1中的，確定了基于靶病灶、非靶病灶、和新病灶的評估的總體反應的評估。

表1：總體反應的評估

^a被定義為在基線的非靶病灶。

^b不可評估的被定義為在評價中沒有病灶測量或只有病灶的小部分測量被進行。

在給予MEDI4736之后監(jiān)測不良事件。其他評價包括體格檢查、生命體征監(jiān)測和實驗室測量。

實例2：結果

(a)登記和隨訪

以每3名受試者一個組群對12名受試者進行治療：組群1a(1mg/kg曲美木單抗和3mg/kg MEDI4736)、組群2a(1mg/kg曲美木單抗和10mg/kg MEDI4736)、組群3a(1mg/kg曲美木單抗和15mg/kg MEDI4736)、和組群3b(3mg/kg曲美木單抗和10mg/kg MEDI4736)。組群1a中的2名受試者(1名受試者在兩個藥劑的2次劑量后撤回了同意)完成了大約115天的隨訪；組群2a中的受試者完成了大約56天的隨訪；并且組群3a和組群3b中的受試者完成了28天的隨訪(圖12)。

(b)藥物代謝動力學

由以3mg/kg和10mg/kg給予MEDI4736(與1mg/kg曲美木單抗組合)得到的藥物代謝動力學數(shù)據(jù)被概述于圖4中。由給予MEDI4736得到的單個PK參數(shù)被顯示于圖8中。在由第一劑量得到的這個早期數(shù)據(jù)中，對于接受3mg/kg MEDI4736的受試者的平均Cmax為67.36μg/ml。對于接受3mg/kg MEDI4736的受試者的平均AUCτ為625.3μg/ml*天。對于接受3mg/kg MEDI4736的受試者的平均C_最低值(C_trough)為8.85μg/ml。對于接受10mg/kg MEDI4736的受試者的平均Cmax為266.7μg/ml。對于接受10mg/kg MEDI4736的受試者的平均AUCτ為2860μg/ml*天。對于接受10mg/kg MEDI4736的受試者的平均C_最低值(C_trough)為35.65μg/ml。MEDI4736顯示了表示非線性PK的超過與劑量成比例的AUC的增加。參見圖4。

由以1mg/kg給予曲美木單抗(與3mg/kg MEDI4736或10mg/kg MEDI4736組合)得到的藥物代謝動力學數(shù)據(jù)被概述于圖5中。由給予曲美木單抗得到的單個PK參數(shù)被顯示于圖9中。

對于接受1mg/kg曲美木單抗與3mg/kg MEDI4736組合的受試者的平均Cmax為27.07μg/ml。對于接受1mg/kg曲美木單抗與10mg/kg MEDI4736組合的受試者的平均Cmax為30.40μg/ml。

對于接受1mg/kg曲美木單抗與3mg/kg MEDI4736組合的受試者的平均AUCτ為262.2μg/ml*天。對于接受1mg/kg曲美木單抗與10mg/kg MEDI4736組合的受試者的平均AUCτ為338.8μg/ml*天。

對于接受1mg/kg曲美木單抗與3mg/kg MEDI4736組合的受試者的平均C_最低值(C_trough)為4.21μg/ml。對于接受1mg/kg曲美木單抗與10mg/kg MEDI4736組合的受試者的平均C_最低值為5.33μg/ml。

(c)可溶性PD-L1評價

由給予3mg/kg和10mg/kg MEDI4736和1mg/kg曲美木單抗得到的sPD-L1數(shù)據(jù)被顯示于圖6(絕對濃度)、圖7和圖8(抑制，基線的％)中。MEDI4736給藥后，在6名受試者的5名中觀察到完全sPD-L1抑制。在1名受試者中，在MEDI4736的第二次劑量觀察到大約65％的sPD-L1抑制。

(d)安全性

在12名受試者中的10名報道了治療突發(fā)性不良事件(TEAE)。最頻繁報道的TEAE是疲乏(41.7％；5名受試者)、增加的淀粉酶(25.0％；3名受試者)、瘙癢和上呼吸道感染(16.7％；各2名受試者)沒有受試者經(jīng)歷了劑量限制性毒性。經(jīng)歷了TEAE的10名受試者中的9名具有嚴重度為1級或2級的事件。1名受試者(組群2a)經(jīng)歷了3級增加的天冬氨酸轉移酶(AST)和增加的丙氨酸氨基轉移酶(ALT)和致命性(5級)重癥肌無力。12名受試者中2名經(jīng)歷了治療突發(fā)性嚴重不良事件(SAE)。2名受試者由于TEAE停止了治療。圖13顯示了相關的不良事件。

顯示腫瘤大小從基線的變化的早期結果被顯示于圖14中。腫瘤大小的降低可見于1mg/kg(T)+10mg/kg(M)、1mg/kg(T)+15mg/kg(M)和3mg/kg(T)+10mg/kg(M)組的患者中。

這項研究說明MEDI4736和曲美木單抗具有良好的藥代動力學特性并且藥劑的組合抑制sPD-L1。此外，在目前正在治療的大多數(shù)受試者中很好地耐受了MEDI4736。

實例3：在患有晚期NSCLC的患者中MEDI4736與曲美木單抗組合的1b期開放性研究

抑制性PD-L1和CTLA-4通路在控制的T細胞激活中起到了主要的作用。MEDI4736(M)是阻斷PD-L1與PD-1和CD-80結合的人類IgG1單克隆抗體。曲美木單抗(T)是靶向CTLA-4的人類IgG2單克隆抗體。作為單劑，MEDI4736和曲美木單抗都顯示了令人鼓舞的安全概況和有前景的臨床活性；因為他們阻止促進免疫抑制不同的相互作用，MEDI4736+曲美木單抗組合療法可在患有晚期非小細胞肺癌的患者(pts)中提供與單獨的任何一個藥劑相比更高的抗腫瘤活性。

這項1期研究正在患有晚期NSCLC的患者中評價MEDI4736+曲美木單抗組合療法的安全性/耐受性、抗腫瘤活性、藥代動力學(PK)和免疫原性。該研究具有劑量遞增和擴張階段。

結果：截至2014年12月4日，已治療61名患者(表2)。

表2

MEDI4736(M)+曲美木單抗(T)

Q4W＝每4周一次；Q2W＝每2周一次

總體而言，最常見的藥物相關的所有等級的不良事件(之10％的患者)是腹瀉、疲乏、瘙癢、增加的丙氨酸轉氨酶(ALT)和淀粉酶；它們使用標準治療指南包括類固醇是可管理的。所有患者中最常見的≥3級藥物相關的AE(≥5％)是結腸炎、腹瀉、增加的天冬氨酸轉氨酶(AST)和ALT。導致停藥的藥物相關的AE是結腸炎(6.6％)、腹瀉(3.3％)、肺炎(3.3％)、增加的AST(3.3％)和ALT(1.6％)、咳嗽(1.6％)和呼吸困難(1.6％)；在10mg/kg M q4w+1mg/kg T組群中有1例治療相關的死亡(多肌炎)。經(jīng)過至少一個8周掃描的31名受試者中，在8例患者(26％)中報道了最好的總體反應；在11例患者(36％)中報道了疾病穩(wěn)定。

這些有前景的結果表明，該MEDI4736+曲美木單抗組合具有可管理的安全性和早期臨床活性。

結果：截至2015年1月27日，已治療10個組群中的74名患者(表3)。

對組合給予的MEDI4736和曲美木單抗的各種劑量和時間表進行了檢查(圖15)。MEDI4736劑量和時間表包括3mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、和20mg/kg每4周一次(q4w)，和10mg/kg每2周一次(q2w)。曲美木單抗劑量和時間表包括1mg/kg、3mg/kg、和10mg/kg每4周一次(q4w x 6次劑量)和每12周一次(q12w x 3次劑量)。

觀察到在劑量≥15mg/kg Q4W MEDI4736的完全sPD-L1抑制(圖16)。在10mg/kg Q4W和15mg/kg Q4W的各一名受試者在一些診治中顯示了部分sPD-L1，接著在重復劑量后顯示了完全抑制。一名受試者在15mg/kg Q4W之后在第29天沒有被抑制。相比之下，使用以劑量＞3mg/kg Q2W的單一藥劑MEDI4736(研究1108)觀察到了完全抑制。當單個sPD-L1概況通過組群被檢查時，在＞95％的受試者中在給予10mg/kg Q2W劑量后觀察到完全sPD-L1抑制(圖17)。

當MEDI4736和曲美木單抗組合給予時，也觀察到T細胞增加的增殖(圖18)。通過對標記CD4和CD8與Ki67(細胞增殖的標記)的組合的FACS分析，對細胞進行了分選。當增加曲美木單抗劑量，觀察到CD4+Ki67+細胞峰值單調(diào)遞增，其比當使用單獨的MEDI4736時CD4+Ki67+細胞峰值的增加更大。使用MEDI4736與曲美木單抗的組合比使用單獨的MEDI4736的CD8+增殖反應更大。

相比單獨的MEDI4736，在接受MEDI4736和曲美木單抗的受試者中觀察到CD4 ICOS+和CD4 HLADR+細胞的增加(圖19)。使用單獨的MEDI4736觀察到CD4+ICOS+細胞和CD4+HLADR+細胞中的最小變化，所有測試的組合劑量都具有與MEDI4736可區(qū)別的模式。使用10mg/kg曲美木單抗劑量觀察到在CD4+ICOS+細胞和CD4+HLADR+細胞的最大增加。相比單獨的MEDI4736，在接受MEDI4736和曲美木單抗的受試者中觀察到CD4+T效應細胞和調(diào)節(jié)性T細胞(CD25hi Cd127lo表型也可以包括一些激活的T細胞)的增加(圖20和21)。

相比于用MEDI4736單藥療法(10mg/kg Q2W)的治療，用MEDI4736和曲美木單抗(所有劑量)的治療時觀察到在NSCLC中的臨床活性，該用MEDI4736和曲美木單抗(所有劑量)的治療顯示了總體反應率增加(圖22)。在有可測量疾病的治療患者中在基線+≥1隨訪掃描(包括在第一次隨訪掃描之前由于疾病進展或死亡的的停藥)反應是可評估的。對于MEDI4736 NSCLC(CP1 108)，只有具有≥12周隨訪的患者被包括在內(nèi)?？傮w反應率(ORR)包括確認的和未確認的完全緩解(CR)或部分緩解(PR)。對于MEDI4736 NSCLC單藥治療(CP1108，10mg/kg Q2W)，呈現(xiàn)了具有最少12周持續(xù)時間的疾病穩(wěn)定(SD)的最佳總體反應(BOR)。對于MEDI4736和曲美木單抗的組合，呈現(xiàn)了具有最少7周持續(xù)時間的SD的BOR。

在給予了MEDI4736和曲美木單抗(曲美木單抗的劑量為1mg/kg；3mg/kg；和10mg/kg)的大多數(shù)NSCLC患者中可見腫瘤大小的減小和穩(wěn)定(圖23)。3級不良事件的發(fā)生表明，增加曲美木單抗的劑量也減少不良事件發(fā)生的時間(圖24)。在給予了MEDI4736和曲美木單抗(MEDI4736的劑量為10mg/kg；315mg/kg；和20mg/kg(Q4W)或10mg/kg(Q2W))的大多數(shù)NSCLC患者中可見腫瘤大小的減小和穩(wěn)定(圖25)。3級不良事件的發(fā)生表明，比起增加MEDI4736的劑量，增加曲美木單抗的劑量影響了不良事件發(fā)生的時間(圖26)。因此，MEDI4736和曲美木單抗劑量的選擇將考慮到功效和安全性。

在癌癥治療中的單一藥劑曲美木單抗的暴露數(shù)據(jù)已經(jīng)支持了需要更高的暴露(＞30mg/mL)以最大化功效。平均而言，這些水平在劑量＞3mg/kg被獲得?；趩我凰巹┍┞?安全性關系的分析，在給予1mg/kg的曲美木單抗之后實現(xiàn)的暴露比3mg/kg預期產(chǎn)生更少的毒性。不受限于具體的理論，1mg/kg的曲美木單抗部分地抑制CTLA4，因為在1mg/kg下仍觀察到免疫介導的不良反應(盡管在較低的發(fā)病率)。如果觀察到協(xié)同效應并且安全性特征相對于更高的曲美木單抗劑量提高了，1mg/kg的曲美木單抗與MEDI4736組合可能是最佳的。

在一項研究中，在劑量≥3mg/kg Q2W MEDI4736時觀察到在血清中PD-L1下降和sPD-L1的完全抑制。基于在大多數(shù)受試者中實現(xiàn)＞99％的下降飽和度，使用在小鼠模型中產(chǎn)生最大腫瘤生長抑制(TGI)的藥物水平(100mg/mL被鑒定為最小靶最低濃度)，選擇10mg/kg Q2W的劑量用作單一藥劑。在10mg/kg Q4W與曲美木單抗組合后，在一些受試者中觀察到sPD-L1的抑制。使用MEDI4736 Q2W的劑量密度更高且使用Q4W的Cmax更高。使用Q4W的計劃可以提供更大的便利。在其他受試者中觀察到不完全抑制，可能是由于PD-L1的上調(diào)和在此劑量水平實現(xiàn)的次優(yōu)的最低水平。在10mg/kg Q4W的MEDI4736，與曲美木單抗組合評估，產(chǎn)生低于100mg/mL目標的最低濃度。然而，使用在15mg/kg和20mg/kg Q4W的MEDI4736實現(xiàn)了目標水平，并且更高劑量的MEDI4736在迄今為止評估的所有受試者中保持了sPD-L1抑制。如果觀察到協(xié)同效應并且提高了安全性特征，在10mg/kg或更高的MEDI4736與曲美木單抗組合可能是最佳的。

總體而言，相比于MEDI4736單藥治療，MEDI4736和曲美木單抗的組合的趨勢是減少或穩(wěn)定疾病，并且在測試的最高劑量的MEDI4736和曲美木單抗與不良事件增加的發(fā)生率相關(圖27-29)。這些結果表明，MEDI4736和曲美木單抗的組合耐受性良好并具有成為針對NSCLC的有效療法的潛力。

實例4：使用MED14736和曲美木單抗治療在NSCLC中的PD-L1陰性腫瘤。

以每3名受試者一個組群對12名受試者進行治療：組群1a(1mg/kg曲美木單抗和3mg/kg MEDI4736)、組群2a(1mg/kg曲美木單抗和10mg/kg MEDI4736)、組群3a(1mg/kg曲美木單抗和15mg/kg MEDI4736)、和組群3b(3mg/kg曲美木單抗和10mg/kg MEDI4736)。組群1a中的2名受試者(1名受試者在兩個藥劑的2次劑量后撤回了同意)完成了大約115天的隨訪；組群2a中的受試者完成了大約56天的隨訪；并且組群3a和組群3b中的受試者完成了28天的隨訪。

將在研究中對于7名受試者的PD-L1腫瘤表達數(shù)據(jù)的基線水平提供在表4(以下)中。將其他信息提供在表5中。

通過在福爾馬林固定和石蠟包埋的組織樣品中的免疫組織化學來表征NSCLC患者的受試者組織的PD-L1表達。如果樣品含有25％或更多的具有PD-L1膜染色的腫瘤細胞，則樣品被確定為“PD-L1陽性”。這被表示為免疫組織化學膜(M)-評分。對于PD-L1表達所有樣品均被評分為“負數(shù)”。腫瘤評價可7例患者的6例中可獲得。對3例患者使用曲美木單抗和MEDI4736的組合來治療。

兩例患者被鑒定為未確認的部分緩解(PR)，2例具有疾病穩(wěn)定(SD)，以及2例具有疾病進展(PD)。在所有6例患者中，在對PD-L1表達分析前＞6個月收集腫瘤樣品，并且6個活檢樣品中的3個在分析前2年以上被收集。這些數(shù)據(jù)表明，基于存儲的組織樣本在PD-L1陰性NSCLC中，MEDI4736和曲美木單抗的組合是有活性的。

相比MEDI4736單藥治療(CP1108，10mg/kg Q2W)，當給予MEDI4736和曲美木單抗時，具有PD-L1陰性NSCLC的大多數(shù)患者響應組合療法，并表現(xiàn)出腫瘤大小的降低或穩(wěn)定(圖30)。相比MEDI4736單藥治療，具有PD-L1陽性NSCLC的患者還響應MEDI4736和曲美木單抗的組合，并表現(xiàn)出腫瘤大小的降低或穩(wěn)定(圖31)。當通過曲美木單抗的劑量對具有PD-L1陰性NSCLC的患者的結果進行分組時，1mg/kg曲美木單抗或3mg/kg曲美木單抗與在10mg/kg Q4W或15mg/kg Q4W的MEDI4736組合給予在控制或減少疾病方面是有效的(圖32)。當通過MEDI4736的劑量對結果分組時，結果還表明，1mg/kg至3mg/kg的曲美木單抗與在10mg/kg Q4W或15mg/kg Q4W的MEDI4736組合給予在控制或減少疾病方面是有效的(圖33)。接受MEDI4736和曲美木單抗的所有NSCLC患者的分析表明，PD-L1-和PD-L1+NSCLC患者對治療有反應(圖34A-34D和圖35-37；表6-9)。

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盡管出于清晰理解的目的已經(jīng)借助于說明和實例相當詳細地描述了前述發(fā)明，但顯而易見可以在所附權利要求書的范圍內(nèi)實踐某些變化和修改。