技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及用于治療指甲疾病的藥物遞送系統(tǒng)。具體地，本發(fā)明涉及水醇組合物的制備及其在藥劑制造中的用途。

背景技術(shù)：

病理性指甲失調(diào)可以包括相對無害的病癥，例如通常出現(xiàn)在吸煙者中的色素沉著變化，與使用某些全身性給藥的藥物相關(guān)的變色，或增加的脆性(例如通過持久使用洗滌劑)。然而，指甲失調(diào)可能會更嚴(yán)重，伴隨有疼痛、虛弱的過程，營養(yǎng)不良、肥大和炎癥或感染過程。這些病癥可以從身體角度負(fù)面地影響患者，并伴隨有可以降低生活質(zhì)量的重要的社會和心理成分。

甲癬(影響歐洲的3-10％人口的真菌感染)和牛皮癬(自身免疫病，1-3％的人口患有)是改變指甲板的主要疾病。在牛皮癬和甲癬中，通過使用適當(dāng)?shù)闹苿┐龠M藥物滲透(類固醇和抗真菌劑)可以改善藥物功效，同時減少副作用。在這個意義上，目前用于提高局部治療有效性的主要策略是(Baran R,Tosti A.Topical treatment of nail psoriasis with a new corticoid-containing nail lacquer formation.Journal of Dermatological Treatment.10,201-204,1999；Monti D,Saccomani L,Chetoni P,Burgalassi S,Saettone MF,Mailland F.In vitro transungual permeation of ciclopirox from a hydroxypropyl chitosan-based,water-soluble nail lacquer.Drug Development and Industrial Pharmacy.1:11-17,2005；Mohori M,Torkar A,Friedrich J,Kristl J,Murdan S.A investigation into keratinolytic enzymes to enhance ungual drug delivery.International Journal of Pharmaceutics.332,196-201,2007；Hui X,Shainhouse Z,Tanojo H,Anigbogu A,Markus GE,Maibach HI,Wester RC.Enhanced human nail drug delivery:nail inner drug content assayed by new unique method.Journal of Pharmaceutical Sciences.91,189-195,2002；Hui X,Wester R.C,Barbadillo S,Lee C,Patel B,Wortzmman M,Gans EH,Maibach HI.Ciclopirox delivery into the human nail plate.Journal Of Pharmaceutical Sciences.93,2545-2548,2004)：

-使用更有效的藥物；

-選擇具有合適的物理化學(xué)性質(zhì)的藥物以促進其滲透和擴散至指甲和甲母質(zhì)中；

-使用滲透和擴散增強劑(例如，美國專利號6,042,845、6,159,977、6,224,887、6,391,879)；

-設(shè)計具有高的藥物濃度和在指甲板上具有延長的停留時間以促進藥物的控制釋放的制劑。

Sun等人總結(jié)，局部治療的主要問題與不適合的制劑和不良的藥物釋放有關(guān)(Sun Y,Liu JC,Wang JC T,De Doncker P.Nail penetration.Ontopical Focus delivery of drugs for onychomycosis fungal Treatment.In:Bronaugh,RL,Maibach,HI(Eds),Percutaneus absorption.Drugs-Cosmetics-Mechanims-Methodology,3rd Ed Marcel Dekker Inc,New York,pp.759-787,1999)。

因此，近年來市面有售一些增加載體的停留時間和藥物滲透的局部抗真菌指甲油：或(由Galderma SA提供的5％的阿莫羅芬)、(由Novag Laboratories提供的環(huán)吡酮)，或指甲油(Sanofi Aventis提供的環(huán)吡酮)。

在專利文獻中描述的指甲藥物遞送系統(tǒng)的其它實例是以下專利文件：US 4,957,730(描述產(chǎn)生防水膜的1-羥基-2-吡啶酮溶液)；US 5,120,530(季銨丙烯酸共聚物中的阿莫羅芬)；US 5,264,206(包括在不溶于水的膜中的噻康唑、益康唑、奧昔康唑、咪康唑、托萘酯、萘夫西林鹽酸鹽(naftilina hydrochloride))；US 5,346,692(用尿素和鄰苯二甲酸二丁酯作為增塑劑)；US 5,487,776(灰黃霉素作為膠體懸浮液)；US 5,464,610(水楊酸膏藥)；WO 1999/39680(具有二惡烷、二氧戊烷乙縮醛作為滲透增強劑的指甲油)；US 6,495,124(采用分散于包括環(huán)狀內(nèi)酯作為增塑劑和滲透增強劑的有機溶劑的成膜聚合物精制的抗真菌指甲油)。

上述指甲油(基于有機溶劑)作為抗真菌劑阿莫羅芬的局部給藥的載體的有效性已經(jīng)在Jean-Paul L.Marty,J.European Academy of Dermatology and Venereology,4(Suppl.1),pp.S17-S21(1995)中描述。然而，指甲油通常由分散或溶解在揮發(fā)性有機溶劑中的聚合物組成，從而在溶劑蒸發(fā)時在指甲板表面上形成高粘性的、不透水的膜。然而，有機溶劑的使用表現(xiàn)出重要的缺點，例如它們的毒性、刺激性、藥物和增強劑的低擴散以及真菌感染中的閉塞的、有害的影響。以期將這些影響最小化，已經(jīng)提議采用水性制劑代替有機指甲油。在這些系統(tǒng)中，水溶液或水與共溶劑的混合物被用作指甲油制備中的藥物載體。這組制劑的實例是US2009/0175945，含有水和乙醇的混合物的抗牛皮癬的指甲油；含有溶于水中的丙烯酸聚合物的指甲膏EP039132；EP 0 627 212含有聚氨酯聚合物膜成型和有機化合物可溶全氟烷基型的水性涂料；EP 0 648 485含有處于分散狀態(tài)的水性陰離子聚酯-聚氨酯聚合物的指甲油，EP 0 943 310或US 6,238,679包括水性聚氨酯分散體和增塑劑的成膜組合物和US 7,033,578(由在揮發(fā)性溶劑中的殼聚糖衍生物制成的指甲油)。

因此，對提供用于治療指甲病癥的新的改進的組合物一直受到關(guān)注。

已經(jīng)表明，水合物和溶脹指甲結(jié)構(gòu)促進藥物的滲透和擴散(Gunt HB,Kasting GB.Effect of hydration on the Permeation of ketoconazole through in vitro human nail plate.32,254-260,2007；Gunt HB,Miller MA,Kasting GB.Water diffusivity in human nail plate.Journal of Pharmaceutical Sciences.Vol.96,No.12,3352-3362,2007)。由于這些原因，已經(jīng)提議將水性體系作為指甲的遞送系統(tǒng)：凝膠(半固體)、水凝膠、霜劑或水性漆。專利的實例是WO 2009/089361(含有用于控制釋放的多層的水凝膠)，US 2009/0202602(由烷基-吡咯烷酮的交聯(lián)水凝膠制成的貼片)，US 5,696,105(莫米松糠酸酯霜劑)。

因此，近年來水性系統(tǒng)已經(jīng)吸引了非常多的研究。然而，大多數(shù)藥物在水中具有較差的溶解性，且通過摻入環(huán)糊精已經(jīng)獲得了進一步的改進。已經(jīng)表明，摻入游離環(huán)糊精或環(huán)糊精：聚合物復(fù)合物增加了在水性系統(tǒng)中的藥物水溶性，增加了包括于可溶形式的有效載藥量，并顯著降低水性層的強度(Bibby DC,Davies NM,Tucker IG.Mechanisms by which cyclodextrins modify drug release from polymeric drug delivery systems.International Journal of Pharmaceutics.197,1-11,2000；Brewster M E,Loftsson T.Cyclodextrins as pharmaceutical solubilizers.Advanced Drug Delivery Reviews 59,645-666,2007)。本發(fā)明人他們自己已經(jīng)采用結(jié)合有泊洛沙姆407、藥物、滲透增強劑和環(huán)糊精或水溶性聚合物的熱敏感的水性水凝膠獲得了優(yōu)異的結(jié)果。

事實上，已經(jīng)建立了許多證據(jù)證明水性制劑的益處和摻入有機溶劑(例如乙醇或酯)的缺點，由于它們在指甲水合作用和溶脹中的有害影響。然而，高的指甲溶脹通常與改進的藥物滲透有關(guān)，并且已知有機溶劑會使甲母質(zhì)脫水。它們通常僅在由于溶解性問題而強制使用時使用(例如US 5,391,367)。早期的研究支持這個觀念。Mertin D,Lippold BC.J Pharm Pharmacol.,1997；49,30-34顯示了由于指甲水合作用增加，稀釋的乙醇溶液如何提供比相應(yīng)的純?nèi)芤焊玫乃幬餄B透。此外，Quintar-Guerrero,D.等，Drug Dev.Ind.Pharm.,1998,24(7)，685-90發(fā)現(xiàn)乙醇(用作共溶劑)的存在沒有促進抗真菌藥的通路。根據(jù)作者，雖然乙醇被報道為皮膚滲透增強劑，但它似乎對指甲沒有相同的作用；角質(zhì)細(xì)胞以緊密接合的連續(xù)薄片連接，其邊界重疊，這構(gòu)成對乙醇的作用不敏感的屏障。在Gouri,V.G.等，J.Comet.Sci,1999,50,336-85中討論了鏈長在乙醇中的影響，指出了在具有增加的鏈長的指甲中的藥物滲透減小。

較新的研究指出了同樣的方向。Smith等，J Pharm Sci.,2011年5月23日,“Effects of Organic Solvents on the Barrier Properties of Human Nail”研究了在水性組合物中摻入有機溶劑如乙醇、丙二醇(PPG)或聚乙二醇400(PEG)對指甲屏障的影響。研究顯示這三種有機溶劑如何減少通過指甲的擴散和滲透。分配進入和運輸穿過指甲的滲透劑顯示為隨著二元溶劑系統(tǒng)中有機溶劑的濃度增加而降低。

因此，仍然需要用于藥物遞送至和進入指甲的改進的組合物。提供的具有增加的滲透性和擴散性的遞送系統(tǒng)提高了治療的有效性并減少了副作用。這種組合物優(yōu)選顯示出良好的生物粘附性和長期作用的有效性。此外，具有更好的美容效果和高的干燥速度的組合物是令人滿意的，以便提供進一步的舒適性和增加患者的依從性。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一種用于指甲藥物給藥的水醇藥物系統(tǒng)，其改進了目前的產(chǎn)品。本發(fā)明的組合物出人意料地有效，提供了預(yù)期的指甲滲透和擴散。與目前建立的知識相反，本發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，在本發(fā)明的水性組合物中使用短鏈醇類不會降低藥物遞送性質(zhì)，而是出人意料地增加藥物滲透和擴散至指甲和進入指甲。本發(fā)明的組合物提供了下面討論的進一步的優(yōu)點。

因此，本發(fā)明的第一方面是一藥物組合物，包括(i)泊洛沙姆407，(ii)至少一種滲透增強劑，(iii)至少一種選自由環(huán)糊精、親水性聚合物及其混合物組成的組中的增溶劑，(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)載體，其包括水和C₁-C₃醇，或其混合物。

本發(fā)明的進一步的方面是包括藥物組合物的試劑盒，所述藥物組合物包括(i)泊洛沙姆407，(ii)至少一種滲透增強劑，(iii)至少一種選自由環(huán)糊精、親水性聚合物及其混合物組成的組中的增溶劑(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)載體，其包括水和C₁-C₃醇，或其混合物；和用于所述藥物組合物的指甲施用的說明書。

與通常的理解相反，本發(fā)明的水醇組合物提供了比相應(yīng)的水性系統(tǒng)更好的相應(yīng)的生物活性物質(zhì)的指甲滲透和擴散。

本發(fā)明的進一步的方面涉及

-用作為藥劑的如上文定義的藥物組合物；

-用于治療和預(yù)防指甲病癥的如上文定義的藥物組合物；

-制備藥物組合物的方法，包括混合(i)泊洛沙姆407，(ii)至少一種滲透增強劑，(iii)至少一種選自由環(huán)糊精、親水性聚合物及其混合物組成的組中的增溶劑，(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)載體，包括水和C₁-C₃醇，或其混合物。

附圖說明

圖1顯示了使用水醇溶液和采用水作為唯一載體的相應(yīng)溶液，具有不同泊洛沙姆407比例(PL)、10％w/w CRYSMEB和10％w/w N-乙酰半胱氨酸的制劑之間的釋放曲線的比較，且還與商業(yè)制劑Ony-Tec相比。將0.5ml溶液放置于供體室中。

圖2顯示了環(huán)吡酮胺通過牛蹄的擴散曲線的比較，在以下制劑之間：(A)根據(jù)本發(fā)明的包括水:乙醇(1:1)的制劑；(B)Ony-Tec(對比)；和(C)包括水作為唯一載體的制劑(對比)。組合物(A)和(C)包括5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w CRYSMEB和10％w/w N-乙酰半胱氨酸。將0.5ml溶液放置于供體室中。

圖3顯示了采用0.5ml以下制劑進行11天的擴散試驗之后，牛蹄內(nèi)的環(huán)吡酮胺的水平：(A)根據(jù)本發(fā)明的包括水:乙醇(1:1)的制劑；(B)Ony-Tec(對比)；和(C)包括水作為唯一載體的制劑(對比)。組合物(A)和(C)包括5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w CRYSMEB和10％w/w N-乙酰半胱氨酸。星號表示統(tǒng)計學(xué)顯著差異被發(fā)現(xiàn)為á<0.05(單因素方差分析和多重比較杜凱氏試驗(Tukey test))。

圖4顯示了采用以下制劑進行11天的擴散試驗之后，人指甲內(nèi)的環(huán)吡酮胺的水平：(a)5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSMEB、水:乙醇(1:1)和24.27mg/ml環(huán)吡酮胺；和(b)10％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSMEB、水:乙醇(1:1)和22.90mg/ml環(huán)吡酮胺；和(c)Ony-Tec溶液(對比)。為了進行試驗，在第一天將0.5ml溶液放置于供體室中，和在第五天放置0.5ml溶液。

圖5顯示環(huán)吡酮胺通過人指甲的擴散，在以下組合物：(a)5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSM EB、水:乙醇(1:1)和24.27mg/ml環(huán)吡酮胺，與Ony-Tec的組合物(對比)相比。將2ml溶液放置于供體室中。

圖6顯示了采用制劑進行11天的擴散試驗之后，人指甲內(nèi)的環(huán)吡酮胺的水平，所述制劑包括(a)5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSM EB、水:乙醇(1:1)和24.27mg/ml環(huán)吡酮胺，與Ony-Tec的組合物(對比)相比。將2ml溶液放置于供體室中。

圖7顯示了丙酸氯倍他索牛蹄的擴散，在以下組合物：(d)5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSM EB、水:乙醇(1:1)和1.6mg/ml丙酸氯倍他索，與包括使用FAGRON作為基礎(chǔ)制劑的80mg/ml丙酸氯倍他索的組合物(對比)相比。將0.5ml溶液放置于供體室中。

圖8顯示了丙酸氯倍他索通過人指甲的擴散，在以下組合物：包括(d)5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSM EB、水:乙醇(1:1)和1.6mg/ml丙酸氯倍他索，與包括使用FAGRON作為基礎(chǔ)制劑的80mg/ml丙酸氯倍他索的組合物(對比)相比。將0.5ml溶液放置于供體室中。

圖9a-e顯示了環(huán)吡酮胺擴散穿過采用不同的指甲滲透增強劑制備的本發(fā)明的藥物組合物(2ml)的牛蹄膜(平均值和標(biāo)準(zhǔn)誤差，n＝3)。采用Ony-Tec作為比較，并且使用根據(jù)本發(fā)明的具有N-乙酰基-胱氨酸(N-acetyl-cisteine)(Ac)的藥物組合物作為參照。圖9a顯示了羧甲半胱氨酸的結(jié)果。圖9b顯示了月桂基硫酸鈉(SLS)的結(jié)果。圖9c顯示了磷酸鉀的結(jié)果。圖9d顯示了乳酸的結(jié)果。圖9e顯示了PEG300和PEG300與羧甲半胱氨酸結(jié)合的結(jié)果。在所有情況下，本發(fā)明的藥物組合物提供了良好的效果。

圖10顯示了在制備本發(fā)明的藥物組合物(2ml)中使用的乙醇:水的比例對環(huán)吡酮胺穿過牛蹄膜的擴散的影響。與僅含有水作為溶劑的組合物相比，乙醇的存在增加了所有情況下的藥物擴散速率。

圖11顯示了環(huán)吡酮胺通過人指甲的擴散，在以下組合物：包括(a)5％w/w泊洛沙姆407、5％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSM EB、水:乙醇(1:1)和25mg/ml環(huán)吡酮胺；和(b)5％w/w泊洛沙姆407、1％w/w十二烷基硫酸鈉、10％w/w CRYSMEB、水:乙醇(1:1)和12.83mg/ml環(huán)吡酮胺；(c)5％w/w泊洛沙姆407、1％w/w羧甲半胱氨酸、5％w/w PEG300、10％w/w CRYSM EB、水:乙醇(1:1)和18.79mg/ml環(huán)吡酮胺。

具體實施方式

組合物的成分

本發(fā)明的組合物通過任何適當(dāng)?shù)姆椒ㄊ┯迷谛枰委煹闹讣缀?或其周圍區(qū)域上，例如刷子、噴霧或海綿，僅提及幾個非限制性實例。當(dāng)在受影響的區(qū)域上施用時，該系統(tǒng)在不溶于這些介質(zhì)的水性介質(zhì)中形成水凝膠，即溶脹的三維大分子結(jié)構(gòu)，其粘附于指甲上并且藥物從其中滲透和擴散進入并通過指甲。

因此，可以說本發(fā)明的組合物是熱敏性的，因為泊洛沙姆407在接近體溫的溫度下經(jīng)歷從溶液到凝膠的轉(zhuǎn)變，形成結(jié)構(gòu)化和一致的水凝膠。

根據(jù)本發(fā)明，泊洛沙姆407是通式(I)的嵌段共聚物，

HO(C₂H₄O)_a((CH₃)₂CHO)_b(C₂H₄O)_aH

(I)

其中每個“a”獨立地選自包括在80和115之間的整數(shù)，且“b”來自包括45和75之間的整數(shù)。因此，它是具有中心氧基聚異丙烯嵌段的側(cè)鏈為兩個氧化聚乙烯(oxipolyethylene)嵌段的三嵌段共聚物。在可選擇的實施例中，“a”是包括95和105之間或97和104之間的整數(shù)。根據(jù)進一步的實施例，“a”是包括98和103之間的整數(shù)。在可選擇的實施例中，“b”是包括52和65之間或54和60之間的整數(shù)。根據(jù)進一步的實施例，“a”是包括54和58之間的整數(shù)。泊洛沙姆407的典型分子量包括在9.500和14.600之間，按重量計，氧化聚乙烯的重量相對于泊洛沙姆407的總重量為65至75％。

“a”和“b”的確切數(shù)值可以根據(jù)所使用的具體商購的泊洛沙姆407而變化。例如，在BASF商業(yè)化 F 127NF中，其中“a”通常為101，“b”通常為56，因此具有的分子量近似為12.600，及按重量計，氧化聚乙烯的重量相對于聚合物的總重量近似為70％。該商購的泊洛沙姆407的熔點為56℃，在25℃下在水中的溶解性高于10％。

根據(jù)本發(fā)明，術(shù)語“滲透增強劑”指的是用于增強和促進生物活性物質(zhì)滲透和擴散穿過甲母質(zhì)的物質(zhì)。根據(jù)用于增強指甲藥物滲透的機制，“滲透增強劑”可以分為：

-角質(zhì)層分離增強劑：水合和溶脹指甲板，例如尿素、水楊酸、巰基乙酸

-角質(zhì)層分離酶：將角蛋白水解作為角蛋白酶

-角蛋白巰基橋鍵還原劑，例如半胱氨酸、N-乙酰半胱氨酸、羧甲半胱氨酸、亞硫酸鈉

-表面活性劑：一些離子表面活性劑作為十二烷基硫酸鈉，與角蛋白(主要通過胱氨酸殘基)相互作用，產(chǎn)生該蛋白質(zhì)的構(gòu)型和聚集狀態(tài)的改變。

本發(fā)明的一個實施例包括選自角蛋白巰基橋鍵還原劑，例如半胱氨酸、N-乙酰半胱氨酸或羧甲半胱氨酸的滲透增強劑。根據(jù)進一步的實施例，滲透增強劑選自乳酸、十二烷基硫酸鈉(也稱為十二烷基硫酸鈉，縮寫為SDS、SLS或DSS)和磷酸鉀。其它有用的滲透增強劑是聚乙二醇(PEG)，特別是低分子量的(即分子量低于1000)，例如PEG 300或400。進一步有用的非限制性滲透增強劑是巰基乙酸、亞硫酸鈉、角蛋白酶、過氧化氫、尿素及其混合物。在一個具體實施例中，已選擇N-乙酰半胱氨酸作為滲透增強劑。

作者還發(fā)現(xiàn)，當(dāng)將它們摻入本發(fā)明的制劑中時，特定的增強劑提供了活性成分通過人指甲的更好地擴散。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方例，滲透增強劑是月桂基硫酸鈉(也稱為十二烷基硫酸鈉)，其重量為0.01％至10％w/w，優(yōu)選是1％至8％w/w，更優(yōu)選是2％和6％w/w。

根據(jù)本發(fā)明，滲透增強劑不限于單一化合物，且可以包括兩種或更多種的結(jié)合。包括兩種化合物的示例性滲透增強劑是與羧甲半胱氨酸結(jié)合的PEG，例如，第一種以2至7％w/w的重量存在，第二種為0.01％至0.2％w/w，其提供在人的指甲中的優(yōu)異的擴散曲線。

在具體實施例中，聚乙二醇已經(jīng)被選擇作為滲透增強劑。

本發(fā)明的組合物進一步包括選自由環(huán)糊精、親水性聚合物及其混合物組成的組中的增溶劑。增溶劑增加生物活性物質(zhì)的水溶性。加入增溶劑可以增加系統(tǒng)中生物活性物質(zhì)的有效劑量，降低水層擴散的阻力。然而，這個問題取決于許多因素，一個是活性成分的分子量(Y.Kobayashi,T.Komatsu,M.Sumi,S.Numajiri,M.Miyamoto,D.Kobayashi,K.Sugibayashi,Y.Morimoto.In vitro permeation of several drugs through the human nail plate:relationship between physicochemical properties and nail permeability of drugs.Eur J Pharm Sci,21(2004)471-477)，且環(huán)糊精和親水性聚合物與水性泊洛沙姆407結(jié)合在擴散和滲透中已顯示非同尋常的改進(EP 2 567 710)。

環(huán)糊精由5個或更多個連接的1→4[α]-D-吡喃葡萄糖苷單元組成。最大的良好表征的環(huán)糊精含有32個1,4-脫水吡喃葡萄糖苷單元，然而作為表征不良的混合物，至少150元環(huán)狀低聚糖也是已知的。典型的環(huán)糊精含有許多6個([α]-)、7個([β]-)或8個([γ]-)單元的葡萄糖單體，形成一錐形。

使用于本發(fā)明的藥物組合物的環(huán)糊精優(yōu)選選自[α]-、[β]-和[γ]-環(huán)糊精及其混合物，[α]-、[β]-和[γ]-烷基-環(huán)糊精及其混合物，[α]-、[β]-和[γ]-羥烷基-環(huán)糊精及其混合物，例如，羥乙基-[β]-環(huán)糊精、3-或2-羥丙基-[β]-環(huán)糊精和羥丙基-[γ]-環(huán)糊精及其混合物也是適當(dāng)?shù)?，[α]-、[β]-和[γ]-磺烷基-醚環(huán)糊精，例如，磺基丁基醚-[β]-環(huán)糊精及其混合物也可以用于本發(fā)明。具有一個或兩個葡萄糖基或麥芽糖殘基及其混合物的[α]-、[β]-和[γ]-分支環(huán)糊精及其混合物是本發(fā)明的進一步的實施例。進一步的實例是[α]-、[β]-和[γ]-烷基羧基烷基-環(huán)糊精及其混合物。

術(shù)語“烷基”指的是C₁-C₆直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基或戊基。術(shù)語“羥烷基”指的是被一個或兩個羥基取代的C₁-C₆直鏈或支鏈烷基，例如，2-羥乙基、3-羥丙基或5-羥戊基。術(shù)語磺烷基指的是通過烷基連接到分子其余部分的-SO₃H基團，其中所述烷基是C₁-C₆直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基或戊基。術(shù)語烷基羧基烷基指的是化學(xué)式為烷基-C(＝O)O-烷基的基團，其中每個烷基獨立地是C₁-C₆直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基或戊基。在更具體的實施例中，增溶劑是羥烷基-環(huán)糊精，例如羥丙基-β-環(huán)糊精。根據(jù)可選擇的實施例，增溶劑是部分甲基化的環(huán)糊精。環(huán)糊精可以以不同的形式和等級購買。例如，可以獲得具有不同甲基化的不同環(huán)糊精，例如完全甲基化或每個環(huán)糊精分子甲基化1至20個甲基基團，通常甲基化2至10甲基基團，即每摩爾環(huán)糊精的基團數(shù)目。

在一個具體實施例中，親水性聚合物選自泊洛沙姆、泊洛沙胺(poloxamines)、尿素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚山梨醇酯或聚乙烯醇。在本發(fā)明的進一步的實施例中，親水性聚合物選自泊洛沙胺、尿素、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚山梨醇酯或聚乙烯醇。

適合作為親水性聚合物的泊洛沙姆是泊洛沙姆124、188、181或908。它們可用于增加制劑的鋪展和濕潤或增加疏水性藥物的水溶性。另外，各種泊洛沙姆，例如188或124，可以與泊洛沙姆407混合使用，用于調(diào)節(jié)和優(yōu)化溶膠/凝膠的轉(zhuǎn)變溫度或增加它們的生物粘附性質(zhì)。

此外，溶液還可以含有其它生理上可接受的添加劑，例如酸、堿、抗氧化劑(例如EDTA)、可以加速干燥的溶劑(盡管在優(yōu)選的實施方案中，它們不是必需的)和pH緩沖系統(tǒng)。

用于本發(fā)明的載體包括水和C₁-C₃醇。與已建立的對由于減少指甲水合作用而使用有機溶劑的共識相反，本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)使用C₁-C₃醇改進了進入指甲的擴散和滲透。這種改進對于它們間的寬范圍的比例是可觀察的，例如當(dāng)水:C₁-C₃醇的體積比包括在20:1和1:20之間時。根據(jù)一個具體實施例，水:C₁-C₃醇的體積比包括在10:1和1:10之間，更優(yōu)選是在5:1和1:5之間，更優(yōu)選是在4:1和1:4之間，優(yōu)選是在2:1和1:2之間。根據(jù)具體實施例，水:C₁-C₃醇的體積比為1:1。根據(jù)優(yōu)選的實施例案，水的體積比大于或等于C₁-C₃醇的體積比，例如，水:C₁-C₃醇的體積比包括在20:1和1:1之間，可選擇地在10:1和1:1之間，更優(yōu)選在5:1和1:1之間。根據(jù)一個具體實施例，本發(fā)明的載體由水和C₁-C₃醇組成。相對于單獨的水，本發(fā)明的載體令人驚訝地帶來改進的至指甲板和進入指甲板的滲透和擴散。

本發(fā)明的藥物組合物的增強的性質(zhì)在其組分間的寬范圍的比例下實現(xiàn)。對于特定的活性成分可能需要本發(fā)明范圍內(nèi)的小變化?！埃/w”是指特定組分相對于藥物組合物(除了生物活性物質(zhì)之外)的總重量的重量百分比。在本發(fā)明的一個具體實施例中，水醇藥物組合物包括至多40％w/w泊洛沙姆407。在進一步的實施例中，藥物組合物包括在1％和40％w/w之間的泊洛沙姆407。通過使用3和25％w/w之間的泊洛沙姆407也能獲得好的結(jié)果。泊洛沙姆407的優(yōu)選比例是在3和20％w/w之間，優(yōu)選是在4至12％w/w之間。泊洛沙姆407的典型用量是在5和10％w/w之間。

增溶劑通常以至多30％w/w，通常在1％和25％w/w之間，優(yōu)選是在5％和20％w/w之間，通常至多20％w/w的重量存在。因此，根據(jù)優(yōu)選實施例，本發(fā)明的藥物組合物包括至多20％的環(huán)糊精(或兩種或多種環(huán)糊精的混合物)，更優(yōu)選是在5％至20％w/w之間。

滲透增強劑以在0.01％和15％w/w，優(yōu)選是在5％至12％w/w之間的重量存在于本發(fā)明的藥物組合物中。

添加到溶液中的生物活性物質(zhì)的重量足以遞送所需的療效，并由技術(shù)人員確定。通常添加生物活性物質(zhì)至飽和。

本發(fā)明的進一步的可選擇的實施例是一藥物組合物，包括(i)至多40％w/w泊洛沙姆407，(ii)至多15％w/w的至少一種滲透增強劑，(iii)至多30％w/w的至少一種選自由環(huán)糊精、親水性聚合物及其混合物組成的組中的增溶劑，(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)載體，其包括水和C₁-C₃醇，或其混合物，其含量為足以使總量達到100％w/w。

本發(fā)明的進一步的可選擇的實施例是一藥物組合物，包括(i)在5％和25％w/w之間的泊洛沙姆407，(ii)在0.01％和12％w/w之間的至少一種滲透增強劑，(iii)在5％和25％w/w之間的至少一種選自由環(huán)糊精、親水性聚合物及其混合物組成的組中的增溶劑，(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)載體，其包括水和C₁-C₃醇，或其混合物，其含量為足以使總量達到100％w/w。

本發(fā)明的進一步的可選擇的實施例是一藥物組合物，包括(i)至多40％w/w的泊洛沙姆407，(ii)至多15％w/w的至少一種選自由乙酰半胱氨酸、羧甲碳半胱氨酸、十二烷基硫酸鈉、乳酸、磷酸鉀、聚乙二醇及其混合物組成的組中的滲透增強劑；(iii)至多30％w/w的至少一種選自由環(huán)糊精、親水性聚合物及其混合物組成的組中的增溶劑，(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)載體，其包括水和C₁-C₃醇，或其混合物，其含量為足以使總量達到100％w/w。

本發(fā)明的優(yōu)選實施例是一藥物組合物，包括(i)在3％和25％w/w之間的泊洛沙姆407，(ii)至少一種選自0.01％和1％w/w之間的羧甲半胱氨酸、0.5和5％w/w之間的十二烷基硫酸鈉、1％和10％w/w之間的聚乙二醇及其混合物的滲透增強劑，(iii)在5％和25％w/w之間的環(huán)糊精，(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)包括水和C₁-C₃醇，或其混合物的載體，其含量為足以使總量達到100％w/w。

本發(fā)明的具體實施例是一藥物組合物，包括(i)5％w/w的泊洛沙姆407，(ii)0.1％w/w的羧甲半胱氨酸，(iii)5％w/w的聚乙二醇300，(iv)10％w/w的甲基-β-環(huán)糊精，(v)至少一種生物活性物質(zhì)，和(vi)包括水和乙醇的載體，其含量為足以使總量達到100％w/w。

本發(fā)明的具體實施方例是一藥物組合物，包括(i)5％w/w的泊洛沙姆407，(ii)0.1％w/w的羧甲半胱氨酸，(iii)5％w/w的聚乙二醇300，(iv)10％w/w的羥丙基-β-環(huán)糊精(HPB)，(v)至少一種生物活性物質(zhì)，和(vi)包括水和乙醇的載體，優(yōu)選是1:1的比例(w/w)，其含量為足以使總量達到100％w/w。

本發(fā)明的另一具體實施例是一藥物組合物，包括(i)5％w/w的泊洛沙姆407，(ii)1％w/w的十二烷基硫酸鈉，(iii)10％w/w的甲基-β-環(huán)糊精，(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)包括水和乙醇的載體，優(yōu)選是1:1的比例(w/w)，其含量為足以使總量達到100％w/w。

本發(fā)明的另一具體實施例是一藥物組合物，包括(i)5％w/w的泊洛沙姆407，(ii)1％w/w的十二烷基硫酸鈉，(iii)10％w/w的羥丙基-β-環(huán)糊精(HPB)，(iv)至少一種生物活性物質(zhì)，和(v)包括水和乙醇的載體，其含量為足以使總量達到100％w/w。

組合物的制備

本發(fā)明進一步的方面是制備本發(fā)明的藥物組合物的方法。它包括將泊洛沙姆407、滲透增強劑、增溶劑和至少一種生物活性物質(zhì)分散或溶解在水和C₁-C₃醇中。

該方法基于組分在水性介質(zhì)中的分散和溶解。該方法包括單個階段，且不具有與有機溶劑的使用相關(guān)的環(huán)境或毒理學(xué)問題，這些溶劑在最終產(chǎn)物中的也不存在殘留物。組分的分散或溶解不需要任何特定的順序，并且可以根據(jù)已知的方法制備，例如在EP 2 567 710中所述的方法，盡管所使用的載體存在差異，其描述了用于合成本發(fā)明的藥物組合物的適當(dāng)方法。通常，首先在冷的水/醇中形成泊洛沙姆407的分散體，然后加入增溶劑，接著加入其它組分。

藥物活性

本發(fā)明的組合物摻入生物活性物質(zhì)并被用作藥劑，具體地用于指甲病癥的治療。

術(shù)語“生物活性物質(zhì)”指的是用于治療、治愈或預(yù)防病癥，例如指甲的真菌感染、指甲牛皮癬和指甲的其它疾病(例如特應(yīng)性皮炎或扁平苔癬)的任何物質(zhì)。當(dāng)將一種或多種生物活性物質(zhì)摻入本發(fā)明的藥物組合物中時，它們在分子水平、顆粒水平上分散，與溶液的組分形成復(fù)合物或包含在系統(tǒng)中以改進它們的溶解性或控制其釋放。本發(fā)明的系統(tǒng)適合用于摻入生物活性物質(zhì)，而不管其溶解性質(zhì)。

將本發(fā)明的藥物組合物施用于指甲，其可以包括指甲板(指甲角質(zhì)層)，但也可以在指甲床(指甲下面的表皮的修飾區(qū)域，當(dāng)指甲板在其上生長時會滑動)上發(fā)揮其藥物作用。它還可以同時給藥于甲母質(zhì)(即甲床的近端部分，甲床從中生長出來)和角質(zhì)層和甲下皮上(指甲游離的遠端下的增厚的表皮)。

可以在本發(fā)明的藥物組合物中使用的抗真菌劑的非限制性實例是環(huán)吡酮、兩性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑、灰黃霉素、硝酸咪康唑、鹽酸特比萘芬、酮康唑、伊曲康唑、十一碳烯酸和氯二甲苯酚、環(huán)吡酮、克霉唑、鹽酸丁萘芬、制霉菌素、鹽酸萘替芬、硝酸奧昔康唑、二硫化硒、硝酸益康唑、特康唑、硝酸布康唑、卡寶品紅、氯碘羥喹、龍膽紫、硫代硫酸鈉、硫康唑、噻康唑、托萘酯、伏立康唑、十一碳烯酸和十一碳烯酸鹽。

可以在本發(fā)明的藥物組合物中使用的抗炎藥物的非限制性實例是阿司匹林、布洛芬、萘普生、雙氯芬酸、酮洛芬、氟苯布洛芬和Cox-2抗炎劑，例如羅非考昔、塞來考昔、艾托考昔、伐地考昔和魯米考昔。

可以在本發(fā)明的藥物組合物中使用的甾體抗炎藥物的非限制性實例是氯倍他索、去炎松、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼龍、倍他米松、地塞米松、氫化可的松、醋酸氟輕松、氟氫縮松、鹵倍他索、安西奈德、去羥米松、二氟拉松、醋酸鹵輕松(Halocinonide)、二氟拉松、莫米松、氯可托龍、地奈德、氟替卡松、氫化可的松、潑尼卡酯、阿氯米松(Aclometasone)。

可以在本發(fā)明的藥物組合物中使用的視黃醇藥物的非限制性實例是視黃醇、視黃醛、維甲酸、異維甲酸、阿利維A酸、阿法-14-羥基-反-視黃醇(Alfa-14-hydroxy-retro-retinol)、芬維A胺、酸類藥物(polyprenoic acid)、依曲替酯、阿昔曲丁、異丙基醇(Isoacetritenol)、甲苯壬四酰胺、酸類芳維甲酸乙酯(poloprenoic acid arotinoid ethyl ester)、芳維甲羧酸、芳維乙基磺酰胺、芳維甲基磺酰胺、阿達帕林、他扎羅汀、貝沙羅汀。

可以在本發(fā)明的藥物組合物中使用的維生素D類似物的非限制性實例是骨化三醇、卡泊三醇、阿沙骨化醇(axacalcitol)和他卡醇。

可以在本發(fā)明的藥物組合物中使用的用于光動力學(xué)療法的藥物的非限制性實例是8-羥甲基腎上腺素(8-metoxipsoralen)、5-氨基乙酰丙酸和甲基氨基乙酰丙酸。

可以在本發(fā)明的藥物組合物中使用的抗生素的非限制性實例是頭孢羥氨芐、頭孢唑啉、頭孢氨芐、頭孢噻酚、頭孢匹林、頭孢色洛爾(cephacelor)、頭孢氯丙嗪(cephprozil)、頭孢拉啶(cephadrine)、頭孢孟多、頭孢尼西、頭孢雷特、頭孢呋辛、頭孢克肟、頭孢哌酮、頭孢噻肟、頭孢泊肟、頭孢他啶(ceftaxidime)、頭孢布烯、頭孢唑肟、頭孢曲松、頭孢吡肟、頭孢噻肟、頭孢替坦，頭孢西丁、氯碳頭孢、亞胺培南、紅霉素(和紅霉素鹽，例如丙酸酯十二烷基硫酸酯、乙基琥珀酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖醛酸鹽、硬脂酸鹽)、克拉霉素、地紅霉素、曲馬多霉素、青霉素V、青霉素鹽，和復(fù)合物、甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、氯唑西林、雙氯西林、阿莫西林、和克拉維酸鉀、氨芐青霉素、巴氨西林、卡茚西林鈉(和羧芐青霉素的其它鹽)美洛西林、哌拉西林、哌拉西林和他唑巴坦、替卡西林、替卡西林和克拉維酸鉀、克林霉素、萬古霉素、新生霉素、氨基水楊酸、卷曲霉素、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇HCl和其它鹽、乙硫異煙胺和異煙肼、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、洛美沙星、萘啶酸、諾氟沙星、氧氟沙星、司帕沙星、磺胺西汀、蘇氟嗪(suflamerazine)、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲基醚、柳氮磺吡啶、磺胺異惡唑、磺胺吡嗪、磺胺嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺吡啶、甲硝唑、烏洛托品、磷霉素、呋喃妥因、甲氧芐啶、氯法齊明、共-三唑(co-triamoxazole)、噴他脒和三甲曲沙。

可以在本發(fā)明的組合物中使用的抗病毒劑的非限制性實例是阿昔洛韋、金剛烷胺、安普那韋、西多福韋、地拉韋啶、地達諾新、泛昔洛韋、膦甲酸、更昔洛韋、茚地那韋、干擾素、拉米夫定、奈非那韋、奈韋拉平、帕利珠單抗、噴西洛維、利巴韋林、金剛乙胺、利托那韋、沙奎那韋、司他夫定、三氟尿苷、伐昔洛韋、阿糖腺苷、扎西他濱和齊多夫定。

用于治療牛皮癬的優(yōu)選藥劑是丙酸氯倍他索。

在優(yōu)選的實施例中，生物活性物質(zhì)是抗真菌劑。在更優(yōu)選的實施例中，活性成分是合適用于治療甲癬的抗真菌劑。在一個特別優(yōu)選的實施例中，活性成分是環(huán)吡酮或特比萘芬。

本發(fā)明的藥物組合物中的生物活性物質(zhì)的量足以遞送實現(xiàn)成功的治療效果的“治療有效量”，即劑量方案或治療草案或其組合。這樣的量取決于所使用的特定生物活性物質(zhì)，但可以是，例如，載量為0.01至100mg生物活性物質(zhì)每毫升本發(fā)明的藥物組合物(mg/ml)，優(yōu)選地，在5和30mg/ml之間。

本發(fā)明的藥物組合物增強了治療有效量的生物活性物質(zhì)滲透和擴散進入指甲。術(shù)語“指甲”可以包括指甲床、甲母質(zhì)和/或指甲板。因此，它可以打算和設(shè)計為增強治療有效量的生物活性物質(zhì)向患者的腳趾甲和/或手指甲中的患病的或感染的指甲床、甲母質(zhì)和/或指甲板的遞送。在優(yōu)選的實施例中，所述疾病或感染是甲癬。在可選擇地實施例中，所述病癥是牛皮癬。

在組合物中提供最大可能濃度的生物活性物質(zhì)通常是有利的。這可以通過制備生物活性物質(zhì)的過飽和組合物(長時間攪拌)和接著測量生物活性物質(zhì)的濃度來容易地確定(例如，參考EP 2 567 710的實施例2)。

在具體的實施例中，生物活性物質(zhì)選自甾體抗炎藥物和抗真菌藥物。

在具體的實施例中，抗真菌藥物選自多烯、烯丙胺、咪唑、三唑、如益康唑、環(huán)吡酮、十一碳烯酸和阿莫羅芬及其鹽。

在另一具體的實施例中，甾體抗炎藥物選自由氫化可的松、去炎松、倍他米松、氯貝沙星(clobestol)及其鹽。

在本發(fā)明的進一步的實施例中，所述生物活性物質(zhì)選自丙酸氯倍他索、環(huán)吡酮和特比萘芬。

所述藥物組合物可通過沉積、噴涂、噴霧、霧化和/或浸漬施用至指甲。

實施例

材料和方法

環(huán)吡酮胺由Fagron Iberica提供，丙酸氯倍他索由Crystal Farma提供。

部分甲基化的環(huán)糊精( CRYSMEB EXP)和HPB( HPB)是來自Roquette的贈品。它是幾種β-環(huán)糊精(d-吡喃葡萄糖(葡萄糖)，通過α-1-4鍵連接)與1至7個甲基基團(在仲羥基基團中)，平均為4個甲基基團的混合物，且具有的摩爾取代比(MS)為0.57。平均分子量為1191(Mw＝1135+7×MS×14)。N-乙酰半胱氨酸是來自Acorfarma的贈品。十二烷基硫酸鈉由Fagron Iberica提供，其也被稱為月桂基硫酸鈉。鹽水磷酸鹽緩沖液根據(jù)西班牙藥典(Farmacopeia)從均為分析級的磷酸二氫鉀、氯化鈉和磷酸二氫鈉十二水合物中制備。添加入到緩沖液中以防止微生物生長的疊氮化鈉由Panreac Quimica SA(巴塞隆納，西班牙)供應(yīng)。使用的其余溶劑和試劑均具有分析級別。

實施例1：一般方法

實施例1.1：根據(jù)本發(fā)明的用于制備制劑的一般方法

除了Ony-Tec以外，根據(jù)以下方法制備以下描述的制劑。在連續(xù)攪拌和大約4℃的溫度下將所需量的環(huán)糊精(CRYSMEB或HPB)溶解在相應(yīng)的載體中，以促進泊洛沙姆的溶解和正確均化，環(huán)糊精一旦溶解，將泊洛沙姆摻入其中。

一旦環(huán)糊精和泊洛沙姆完全溶解，保持低溫和連續(xù)攪拌的條件，加入滲透增強劑(例如N-乙酰半胱氨酸、羧甲半胱氨酸或十二烷基硫酸鈉)，且隨后當(dāng)制劑是均勻和清澈時，添加生物活性物質(zhì)至飽和。在室溫下繼續(xù)攪拌過夜。在高濃度泊洛沙姆407的情況下，將溫度保持在4-6℃是必要的。次日，將生物活性物質(zhì)的飽和溶液過濾(在每種情況下，使用與溶劑相容的0.45微米的材料的過濾器)。通過UV分光光度法或HPLC測定生物活性物質(zhì)的濃度。

實施例1.2：指甲/蹄的預(yù)處理

從年齡在25和65歲之間的健康志愿者和患者(具有甲癬和牛皮癬)的手和腳獲得樣品。健康志愿者在知會同意后剪切他們自己的指甲。小心地清理樣品并用水洗滌，在室溫下干燥并在室溫下儲存于玻璃容器中。用于擴散研究的指甲具有大約8mm的長度。

使用的牛蹄從德孔波斯特拉的圣地亞哥的市政屠宰場獲得。將它們清理并用水洗滌并保持冷凍。在使用之前，將它們解凍并在水中保持24小時，以便于剪切厚度大約為0.3-0.8mm的薄片。

實施例1.3：生物活性物質(zhì)的擴散研究

使用下面詳述的方法進行本申請中描述的擴散研究。

通過將樣品放置在由聚四氟乙烯制成的、具有的擴散有效表面積為0.196cm²的兩個圓柱形連接器之間，進行通過人指甲和牛蹄的擴散研究。將這些連接器放置在梅斯默(Franz)擴散池的供體和受體之間。將指甲的背部放置成使其與在供體室中研究的制劑接觸，且腹側(cè)部接觸受體室的介質(zhì)，該介質(zhì)由在37℃的pH 7.4的磷酸鹽緩沖液的鹽水溶液(歐洲藥典)組成，再向其中加入0.003％的疊氮化鈉防止藻類和微生物的生長。在預(yù)設(shè)時間段，從受體室取出樣品，通過補充新鮮介質(zhì)保持體積恒定。

在丙酸氯倍他索的情況下，受體室包括5％w/w的具有0.003％的疊氮化鈉的CRYSMEB。CRYSMEB的摻入旨在保持下沉狀況并防止受體飽和，從而限制甚至防止生物活性物質(zhì)通過指甲的通道。

使用合適的分析技術(shù)(UV分光光度法，HPLC)測定每種物質(zhì)的生物活性物質(zhì)的濃度。在人指甲中測試具有環(huán)吡酮胺的制劑并采用UV光譜分析的的情況下，采用NaOH稀釋樣品以使指甲組分的干擾最小化。

實施例1.4：“體外”滲透研究

還測定擴散試驗完成后滲入指甲的生物活性物質(zhì)的量。在擴散試驗后回收指甲，用水徹底洗滌并用纖維素紙擦拭。將已經(jīng)暴露于制劑的部分剪切成小塊并稱重。加入5ml 5％甲醇溶液，并在室溫下溫育至少6天。

實施例1.5：釋放研究

它們在具有0.79cm²有效擴散面積的梅斯默(Franz)垂直擴散池中進行。除非另有說明，在供體室中加入500μl待研究的制劑，且受體室通過將pH 7.4的磷酸鹽緩沖液的鹽水溶液(歐洲藥典)在37℃和連續(xù)攪拌下，通過MWCO>12,000Da的透析膜從受體室分離形成。在規(guī)定的時間間隔從受體室收集樣品，用磷酸鹽緩沖液補充體積。通過根據(jù)需要稀釋樣品，采用分光光度法測定生物活性物質(zhì)的濃度。

實施例2：環(huán)吡酮胺的釋放研究

按照實施例1.5中描述的方法，通過將水性組合物(對比)與水和乙醇1:1的載體混合物(本發(fā)明的組合物)進行比較來研究環(huán)吡酮胺在采用含有10％的CRYSM EB和10％的N-乙酰半胱氨酸的不同比例的泊洛沙姆407制備的制劑中的釋放。如圖1所示，乙醇的摻入增加了環(huán)吡酮胺的擴散。

實施例3：環(huán)吡酮胺在牛蹄中的滲透研究和擴散

按照實施例1.3中描述的方法，在具有5％w/w泊洛沙姆407，10％w/w N-乙酰半胱氨酸和10％w/w CRYSMEB的組合物中研究環(huán)吡酮胺通過牛蹄的擴散和滲透。圖2顯示了用這些制劑獲得的擴散曲線。觀察到用水制備的對比制劑和Ony-Tec具有相似的擴散曲線。然而，使用水醇溶液(水:乙醇1:1)的本發(fā)明的組合物帶來出人意料的優(yōu)異的通過蹄的藥物擴散。在11天試驗結(jié)束時，測定在蹄內(nèi)存在的環(huán)吡酮胺的重量也發(fā)現(xiàn)比本發(fā)明的制劑(圖3)更大。

實施例4：人指甲中的滲透研究

按照本發(fā)明制備兩種制劑：(a)5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSMEB、水:乙醇(1:1)和24.27mg/ml環(huán)吡酮胺，和(b)10％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSM EB、水:乙醇(1:1)和22.90mg/ml環(huán)吡酮胺。

按照實施例1.3中描述的方法在人指甲上進行研究，但在這種情況下，由于快速擴散，在施用0.5ml的初始劑量后，在測試5天后進一步加入相同的量。如圖4所示，兩種組合物(a)和(b)在指甲中具有比Ony-Tec更大的滲透，具有5％w/w泊洛沙姆407的制劑(a)是特別有利的。

通過比較溶液(a)與Ony-Tec，重復(fù)相同的實驗，但將2ml溶液放置在板上以確保在整個測試的制劑中有足夠量的環(huán)吡酮胺。這相當(dāng)于在根據(jù)本發(fā)明的制劑(a)中的47mg環(huán)吡酮胺的劑量和160mg Ony-Tec。圖5和6中顯示的結(jié)果證實了當(dāng)使用本發(fā)明的制劑時，環(huán)吡酮胺在指甲中的擴散(圖5)和滲透(圖6)的顯著改進。

實施例5：在含有氯倍他索的本發(fā)明制劑中的擴散和滲透研究

按照本發(fā)明制備制劑(d)，其包括5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSMEB、水:乙醇(1:1)的和1.6mg/ml丙酸氯倍他索。在不存在商業(yè)制劑的情況下，采用摻入80mg丙酸氯倍他索的發(fā)格龍(Fagron)的底漆(base lacquer)制備制劑。

按照實施例1.3中描述的一般程序，在牛蹄上進行擴散研究。研究表明，本發(fā)明的制劑(d)提供了顯著更高的擴散值(圖7)。在相同條件下在人指甲上重復(fù)相同的實驗，提供相似的結(jié)果(圖8)。在11天期間，丙酸氯倍他索的恒定流量總計為20mg/cm²，遠遠超過有效治療必需的量。

實施例6：包括不同滲透增強劑的本發(fā)明制劑通過牛蹄的擴散研究

除了Ony-Tec組合物之外，按照實施例1.1中描述的一般程序制備各種制劑，使用5％w/w泊洛沙姆407、10％w/w CRYSMEB、添加環(huán)吡酮胺至飽和、水:乙醇1:1至總量100％和不同比例的不同滲透增強劑。按照實施例1.3描述的一般方法，在所有情況下將制劑與Ony-Tec比較。結(jié)果顯示于圖9a-e中。圖9a顯示了羧甲半胱氨酸的結(jié)果。圖9b顯示了十二烷基硫酸鈉(SDS)的結(jié)果。圖9c顯示了磷酸鉀的結(jié)果。圖9d顯示乳酸的結(jié)果。圖9e顯示具有0.1％w/w羧甲半胱氨酸的聚乙二醇300(PEG300)的結(jié)果。具有N-乙?；?胱氨酸(Ac)的根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物被用于作為參考。對于所有滲透增強劑，甚至是羧甲半胱氨酸(盡管沒有氣味，但由于其差的溶解性而被丟棄許多次)，均觀察到良好的擴散。

實施例7：具有不同比例的水和醇的擴散研究

除了Ony-Tec組合物之外，按照實施例1.1中描述的一般程序制備各種制劑，使用5％w/w泊洛沙姆407、5％w/w CRYSMEB、滲透增強劑、添加環(huán)吡酮胺至飽和，和不同比例的水:乙醇至總量100％。按照實施例1.3中描述的一般程序，在所有情況下將制劑與Ony-Tec和僅使用水的本發(fā)明的相同組合物比較。

在精制指甲油(2ml)中使用的乙醇:水比例對環(huán)吡酮胺穿過牛蹄膜的擴散的影響。與僅含有水作為溶劑的指甲油相比，乙醇的存在增加了所有情況下的藥物擴散速率(參見圖10)。

實施例8：人指甲中的擴散研究

根據(jù)本發(fā)明制備三種制劑：(a)5％w/w泊洛沙姆407、5％w/w N-乙酰半胱氨酸、10％w/w CRYSMEB、水:乙醇(1:1)和25mg/ml環(huán)吡酮胺；(b)5％w/w泊洛沙姆407、1％w/w十二烷基硫酸鈉(SDS)、10％w/w CRYSMEB、水:乙醇(1:1)和12.83mg/ml環(huán)吡酮胺；(c)5％w/w泊洛沙姆407、0.1％w/w羧甲半胱氨酸、5％w/w PEG300、10％w/w CRYSM EB、水:乙醇(1:1)和18.79mg/ml環(huán)吡酮胺。按照實施例1.3中描述的方法在人指甲上進行研究。如圖11所顯示，三種組合物(a)，(b)和(c)在指甲中的具有的滲透性大于Ony-Tec和環(huán)吡酮(Ciclochem)。具有十二烷基硫酸鈉和PEG300的制劑(b)和(c)是特別有利的。