技術(shù)領(lǐng)域：
本申請(qǐng)涉及任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段及其使用方法。關(guān)于聯(lián)邦資助的研究或開發(fā)的聲明本發(fā)明是在美國國立衛(wèi)生研究院授予的撥款號(hào)AR051749下的政府支持進(jìn)行的。政府在本發(fā)明中具有某些權(quán)利。發(fā)明背景補(bǔ)體系統(tǒng)是先天免疫系統(tǒng)的核心部分。認(rèn)為補(bǔ)體系統(tǒng)的活化有助于人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)中、特別是在非常早期的疾病中的炎癥和組織損傷(Okroj等人,2007,Ann.Med.39:517-530;Sturfelt和Truedsson,2012,Nat.Rev.Rheumatol.8:458-468;Zvaifler,1974,ArthritisRheum.17:297-305)。RA是具有遺傳和環(huán)境組分的復(fù)雜自身免疫性疾病，其影響全世界約1％的人群(Helmick等人,2008,Arthritisandrheumatism58:15-25)。自身抗體，特別是作為免疫復(fù)合物(IC)的成分，在觸發(fā)該疾病中的炎癥中起核心作用(Arend和Firestein,2012,Nat.Rev.Rheumatol.8:573-586;Klareskog等人,2008,Annualreviewofimmunology26:651-675)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)補(bǔ)體系統(tǒng)在膠原抗體誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(CAIA)和炎性關(guān)節(jié)炎的其它動(dòng)物模型中的炎癥和組織損傷的發(fā)展中起主要作用(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Hietala等人,2002,J.Immunol.169:454-459;Ji等人,2002,Immunity16:157-168;Wang等人,2000,J.Immunol.164:4340-4347)。含有IgG同種型的Ab的IC存在于患有RA的患者的關(guān)節(jié)的軟骨和滑膜中，并且涉及通過活化補(bǔ)體系統(tǒng)來誘導(dǎo)局部組織損傷(Cooke等人,1975,ArthritisRheum.18:541-551;Ghose等人,1975,J.Clin.Pathol.28:109-117;Ohno和Cooke,1978,ArthritisRheum.21:516-527)。補(bǔ)體系統(tǒng)可以通過三種途徑活化：經(jīng)典途徑(CP)、凝集素途徑(LP)和旁路途徑(AP)。先前已經(jīng)顯示人RA中的關(guān)節(jié)炎相關(guān)IC中的IgGAbs活化補(bǔ)體系統(tǒng)的CP和AP(Banda等人,2008,ArthritisRheum.58:3081-3089;Ratnoff等人,1983,SpringerSemin.Immunopathol.6:361-371;Wouters等人,2006,ArthritisRheum.54:1143-1150)。在CAIA中，使用通過特定途徑組分的基因靶向和失活而開發(fā)的補(bǔ)體系統(tǒng)的途徑特異性功能缺陷，以前得出結(jié)論是，單獨(dú)的AP通過其在起始過程和擴(kuò)增環(huán)中的作用是CAIA的發(fā)展是必需和足夠的(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912)。使用MBL-A/C和C4缺陷小鼠推斷LP作用的缺乏(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Ji等人,2002,Immunity16:157-168;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109)，并且對(duì)于使用C4和C1q缺陷小鼠推斷CP作用的缺乏(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109)，其中疾病在很大程度上沒有改變。CP由IC中的C1q與Ab的結(jié)合起始，導(dǎo)致C1r、C1s的活化和隨后CPC3轉(zhuǎn)化酶C4b2b的形成。當(dāng)指定為膠原凝素(其成員為甘露糖結(jié)合凝集素(MBL)、無花果酶(人中的三種被指定為H、L和M)和膠原凝素-11(也稱為CL-K1))的模式識(shí)別分子家族的成員與MBL相關(guān)的絲氨酸蛋白酶(MASP-1、MASP-2和MASP-3)一起結(jié)合至存在于微生物和其它靶表面和分子的表面上的特定單糖或修飾的碳水化合物的陣列時(shí)，起始LP。值得注意的是，在人類中，發(fā)現(xiàn)一種MBL，而在小鼠中，存在兩種，MBL-A和MBL-C；此外，在小鼠中與膠原凝素-11一起發(fā)現(xiàn)兩種無花果酶(無花果酶-A和無花果酶-B)(Hansen等人,2000,J.Immunol.164:2610-2618;Kawai等人,2002,Bioscience,biotechnology,andbiochemistry66:2134-2145;Ohashi和Erickson,1998,Archivesofbiochemistryandbiophysics360:223-232;Ohtani等人,1999,J.Biol.Chem.274:13681-13689)。該過程導(dǎo)致通過MASP-2的活性(Thiel等人,1997,Nature386:506-510)以需要MASP-1的初始接合的方式形成共享的CP/LPC3轉(zhuǎn)化酶C4b2b(Moller-Kristensen等人,2007,Int.Immunol.19:141-149;Heja等人,2012,Proc.Natl.Acad.Sci.USA109:10498-10503)。AP通過如下起始：C3的自發(fā)轉(zhuǎn)換，以及水解C3(H2O)的瞬時(shí)形成，隨后因子D(FD)的結(jié)合，以及因子B(FB)的切割和產(chǎn)生AP起始C3轉(zhuǎn)化酶C3(H2O)Bb(Pangburn等人,1983,J.Immunol.131:1930-1935)。C3的切割還暴露共價(jià)附接至靶表面上的胺和羧基的C3b中的短壽命硫酯(Pangburn等人,1983,J.Immunol.131:1930-1935)。在通過任何三種途徑形成C3b后，通過結(jié)合FB和通過FD切割以形成C3bBbC3轉(zhuǎn)化酶來起始擴(kuò)增環(huán)(Rosen等人,1989,Science244:1483-1487)。AP也可以通過與含有靶的分子模式結(jié)合的備解素(Kemper等人,2010,Annu.Rev.Immunol.28:131-155)或通過粘附IgG或IgA(Wouters等人,2006,ArthritisRheum.54:1143-1150;Hiemstra等人,1988,Mol.Immunol.25:527-533)來起始。此外，據(jù)報(bào)道，小鼠中的AP依賴于pro-FD的MASP-1/3切割以在循環(huán)中形成成熟FD(Takahashi等人,2010,J.Exp.Med.207:29-37)，并且缺乏MASP-1和MASP-3的小鼠具有缺陷的AP和LP(Takahashi等人,2008,J.Immunol.180:6132-6138)。最近，已經(jīng)顯示MASP-1/3-/-/fH-/-小鼠在其循環(huán)中具有pro-DF，并且AP存在，但仍有一些缺陷(Ruseva等人,2013,Clin.Exp.Immunol.)。然而，與小鼠相反，功能性AP存在于據(jù)報(bào)道缺乏MASP-1和MASP-3的患者的血清中(Degn等人,2012,J.Immunol.189:3957-3969)。MBL、無花果酶和膠原凝素-11在與MASP-1、-2和-3和兩種額外蛋白(MAp19和MAp44，分別也稱為sMAP和MAP1)的復(fù)合物中循環(huán)(Degn等人,2012,J.Immunol.189:3957-3969;Degn等人,2010,J.Immunol.Methods361:37-50)。MASP作為前酶存在，并且一旦MBL、無花果酶或膠原凝素-11結(jié)合配體就被活化。從通過由MASP-1基因編碼的RNA的可變剪接形成的mRNA翻譯三種蛋白MASP-1、MASP-3和MAp44(Degn等人,2012,J.Immunol.189:3957-3969)。MASP-1和MASP-3是共享其前五個(gè)結(jié)構(gòu)域(CUB1-EGF-CUB2-CCP1-CCP2)、但具有由不同外顯子編碼的不同絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域的兩種蛋白酶(Dahl等人,2001,Immunity15:127-135)。MAp44與MASP-1和MASP-3共享前四個(gè)結(jié)構(gòu)域，隨后是由單獨(dú)的外顯子編碼的17個(gè)獨(dú)特的C-末端氨基酸殘基(Degn等人,2010,J.Immunol.Methods361:37-50)。由于前三個(gè)結(jié)構(gòu)域介導(dǎo)與MBL的結(jié)合，MAp44、MASP-1和MASP-3結(jié)合MBL上的相同位點(diǎn)。缺乏絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域的MAp44因此可以與MASP競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合MBL和其它集合素，并且通過這種機(jī)制調(diào)節(jié)LP的活性(Degn等人,2009,J.Immunol.183:7371-7378)。MASP-2活化嚴(yán)格依賴于MASP-1的起始活化，因?yàn)镸ASP-1的抑制阻止MASP-2的自體活化(Heja等人,2012,Proc.Natl.Acad.Sci.USA109:10498-10503)，并且在缺乏MASP-1的小鼠中不存在LP(Takahashi等人,2008,J.Immunol.180:6132-6138)。MAp44也可以從MBL或無花果酶置換MASP-1和MASP-2，進(jìn)一步抑制MASP-2的活化并隨后切割C4和C2(Degn等人,2009,J.Immunol.183:7371-7378)。通過這些活性，MAp44被認(rèn)為是LP的天然內(nèi)源性抑制劑(Pavlov等人,2012,Circulation126:2227-2235)。以前，補(bǔ)體系統(tǒng)的不同組分缺陷的小鼠中的研究已經(jīng)顯示，AP是介導(dǎo)CAIA所必需且足夠的，因?yàn)樗坪醪恍枰狶P和CP(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109)。此外，顯示缺乏MASP-1、MASP-3和MAp44的小鼠(MASP-1/3-/-)對(duì)CAIA耐受(Banda等人,2010,J.Immunol.185:5598-5606)，可能因?yàn)樗鼈內(nèi)狈Τ墒斓腇D和功能性AP(Takahashi等人,2008,J.Immunol.180:6132-6138)。雖然AP可以起始和擴(kuò)增CAIA，但LP(和CP)也可以發(fā)揮功能以起始疾病過程。由于LP以前沒有顯示在CAIA中起重要作用，我們假設(shè)無花果酶-A或-B或膠原凝素-11可以不依賴于MBL-A/C介導(dǎo)配體的識(shí)別。此外，C3的直接MASP介導(dǎo)的切割(Matsushita和Fujita,1995,Immunobiology194:443-448)可以允許C3活化和擴(kuò)增環(huán)的參與，甚至在MBL-A/C或C4不存在下。使用MAp44作為所有MASP的內(nèi)源性抑制劑，由于其干擾識(shí)別分子和MASP之間的相互作用，應(yīng)當(dāng)允許LP的更完全損傷。MAp44作為治療劑的有效性可通過其靶向與組織損傷或疾病相關(guān)的補(bǔ)體活化位點(diǎn)而增加。天然抗體存在于有免疫能力的個(gè)體中，并且可以在未知已經(jīng)由抗體結(jié)合的特定抗原刺激的個(gè)體的血清或血漿中發(fā)現(xiàn)。本發(fā)明人和同事的先前研究已經(jīng)顯示，某些類型的天然抗體識(shí)別缺血組織上的表位，并催化缺血-再灌注損傷的起始和隨后的發(fā)展(Fleming等人,2002,J.Immunol.169:2126-2133;Rehrig等人,2001,J.Immunol.167:5921-5927)。已知缺血-再灌注損傷以及低血容量休克和隨后的組織損傷由補(bǔ)體和Fc受體活化以及嗜中性粒細(xì)胞和其它炎性細(xì)胞的募集和活化引起(Rehrig等人，2001，同上)。還已經(jīng)顯示，與磷脂和其它細(xì)胞外或細(xì)胞內(nèi)抗原(諸如DNA)廣泛反應(yīng)的單克隆抗體可在缺乏其它抗體(即B細(xì)胞缺陷小鼠)的小鼠中引起缺血-再灌注損傷。缺血-再灌注(IR)損傷是指當(dāng)在一段時(shí)間的缺血(血液供應(yīng)中的限制)后血液供應(yīng)返回至組織時(shí)引起的對(duì)組織的損傷。血液中不存在氧和營(yíng)養(yǎng)物導(dǎo)致其中循環(huán)的恢復(fù)導(dǎo)致炎癥和氧化損傷、而不是恢復(fù)正常功能的病況。缺血-再灌注損傷可與創(chuàng)傷性損傷(包括出血性休克)以及許多其它醫(yī)學(xué)狀況(諸如中風(fēng)或大血管閉塞)相關(guān)，并且是主要的醫(yī)學(xué)問題。更具體地，缺血-再灌注損傷在心臟病發(fā)作、中風(fēng)、血管外科手術(shù)后的腎衰竭、移植后損傷和慢性排斥以及各種類型的創(chuàng)傷性損傷(其中出血將導(dǎo)致器官灌注不足，然后隨后的液體復(fù)蘇期間的再灌注損傷)中是重要的。在多種自身免疫和炎性疾病中也觀察到缺血-再灌注損傷或由再灌注和缺血事件引起的損傷。不依賴于其它因素，缺血-再灌注損傷導(dǎo)致死亡率增加。還有越來越多的證據(jù)證明自身免疫和炎性疾病中發(fā)現(xiàn)的再灌注損傷，所述自身免疫和炎性疾病不足傳統(tǒng)上被認(rèn)為與再灌注損傷相關(guān)的。例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者中的滑膜是經(jīng)受恒定再灌注應(yīng)激(例如，低pH、大量組織壓力和較差灌注)的部位。在具有這種疾病的超活動(dòng)患者中發(fā)現(xiàn)的較高量的滑液引起關(guān)節(jié)內(nèi)壓力的增加，其然后由關(guān)節(jié)運(yùn)動(dòng)加劇。這可通過缺氧/再灌注機(jī)制加劇局部炎癥，其進(jìn)而導(dǎo)致由間歇性缺血引起的氧化損傷(例如,參見Punzi等人,Rheumatology2001;40:202-204;Pianon等人,Reumatismo1996;48(Suppl.1):93;和Jawed等人,AnnRheumDis1997;56:686-9)。多種炎性和自身免疫性疾病也可以與類似于或模擬再灌注損傷中的一些變化的局部細(xì)胞的細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的類似變化相關(guān)。Kulik等人顯示需要識(shí)別膜聯(lián)蛋白IV的病原性天然抗體以發(fā)展腸缺血-再灌注損傷。J.Immunol.2009;182:5363-5373。美國專利申請(qǐng)公開號(hào)2011/0014270公開了用于預(yù)防和/或治療與各種疾病和病況相關(guān)的缺血-再灌注損傷和再灌注損傷的脂質(zhì)、膜聯(lián)蛋白和脂質(zhì)-膜聯(lián)蛋白復(fù)合物。本文提及的所有出版物、專利、專利申請(qǐng)和公開的專利申請(qǐng)的公開內(nèi)容在此處以其整體通過引用并入本文。發(fā)明簡(jiǎn)述在一個(gè)方面，本公開提供了治療個(gè)體中的補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病是關(guān)節(jié)炎。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含SEQIDNO:44的序列。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段長(zhǎng)度為約50至約380個(gè)氨基酸，并且包含SEQIDNO:44中的連續(xù)序列。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含SEQIDNO:44的氨基酸1-137、氨基酸1-176、氨基酸1-296或氨基酸1-363。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含選自SEQIDNO:46、48、50和52的一種或多種序列。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體還包含靶向部分，諸如其抗體或其片段(例如，抗原結(jié)合片段)，例如天然存在的抗體或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述天然存在的抗體或其片段識(shí)別膜聯(lián)蛋白IV或磷脂，諸如天然存在的抗體B4或C2。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制單克隆抗體B4與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合與單克隆抗體B4相同的表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷損傷的組織中或鄰近于經(jīng)歷損傷的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制單克隆抗體C2與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合與單克隆抗體C2相同的表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷和/或氧化損傷的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷和/或氧化損傷的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在上述方法中任一種的一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由肽接頭連接。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在所述方法的一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段是scFv。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段是Fab、Fab’或F(ab’)2。在另一個(gè)方面，本公開提供了包含非天然存在的MAp44片段的構(gòu)建體，其中所述MAp44片段包含SEQIDNO:44的序列的至少約50個(gè)連續(xù)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44片段長(zhǎng)度為約50至約350個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44片段包含SEQIDNO:44的氨基酸1-137、氨基酸1-176、氨基酸1-296或氨基酸1-363。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含選自SEQIDNO:46、48、50和52的一種或多種序列。在所述構(gòu)建體的一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體還包含抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV，并且包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:1或7的序列(例如，輕鏈CDR1序列)、SEQIDNO:2或8的序列(例如，輕鏈CDR2序列)或SEQIDNO:3或9的序列(例如，輕鏈CDR3序列)；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:4或10的序列(例如，重鏈CDR1序列)、SEQIDNO:5或11的序列(例如，重鏈CDR2序列)或SEQIDNO:6或12的序列(例如，重鏈CDR3序列)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:1或7的序列、SEQIDNO:2或8的序列和SEQIDNO:3或9的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:4或10的序列、SEQIDNO:5或11的序列和SEQIDNO:6或12的序列。在所述構(gòu)建體的一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:13或14的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:15或16的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或片段是具有SEQIDNO:17或18的序列的scFv。在所述構(gòu)建體的一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制單克隆抗體B4與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合與單克隆抗體B4相同的表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上。在所述構(gòu)建體的一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體包含抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，并且包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:25或31的序列(例如，輕鏈CDR1序列)、SEQIDNO:26或32的序列(例如，輕鏈CDR2序列)或SEQIDNO:27或33的序列(例如，輕鏈CDR3序列)；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列(例如，重鏈CDR1序列)、SEQIDNO:29的序列(例如，重鏈CDR2序列)或SEQIDNO:30的序列(例如，重鏈CDR3序列)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:25或31的序列、SEQIDNO:26或32的序列和SEQIDNO:27或33的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列和SEQIDNO:30的序列。在所述構(gòu)建體的一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:34或35的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或片段是具有SEQIDNO:37或38的序列的scFv。在所述構(gòu)建體的一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制單克隆抗體C2與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合與單克隆抗體C2相同的表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合MDA。在所述構(gòu)建體的一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段和所述MAp44片段通過肽接頭連接。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段和所述MAp44片段直接連接。在另一個(gè)方面，本公開提供了包含上述構(gòu)建體中的任一種的藥物組合物。在另一個(gè)方面，本公開提供了治療個(gè)體中的補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含上述構(gòu)建體中的任一種的藥物組合物。在一些實(shí)施方案中，治療個(gè)體中的補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病的方法包括向個(gè)體施用包含外源核酸的載體，所述外源核酸包含用于表達(dá)上述構(gòu)建體的序列。在一些實(shí)施方案中，所述載體選自腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺相關(guān)病毒和質(zhì)粒。在一些實(shí)施方案中，所述載體是腺病毒。還提供了可用于本文所述的方法的單位劑型、試劑盒和制品。應(yīng)當(dāng)理解，可以組合本文所述的各個(gè)實(shí)施方案的性質(zhì)中的一種、一些或所有以形成本發(fā)明的其它實(shí)施方案。附圖簡(jiǎn)述圖1.通過用AdhMAp44預(yù)處理顯著降低抗CIImAb誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的CDA。使用較高(HD)和較低(LD)劑量的AdhMAp44顆粒。圖1A.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)關(guān)節(jié)炎的患病率(％)。圖1B.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的CDA。黑色箭頭顯示在第-5天、第0天和第3天的AdhMAp44或AdGFP的注射時(shí)間。對(duì)于B中的數(shù)據(jù)，與AdGFP治療相比，*p<0.05。圖1C.在組織處理和切片的甲苯胺藍(lán)染色后進(jìn)行來自五個(gè)關(guān)節(jié)(2個(gè)前爪、右后膝、右后踝和右后爪)的炎癥(黑色實(shí)心條)、關(guān)節(jié)翳形成(白色陰影條)、軟骨損傷(白色空心條)和骨損傷(白色線狀條)的所有關(guān)節(jié)平均(AJM)組織學(xué)評(píng)分。圖1D.呈現(xiàn)在滑膜內(nèi)(黑色實(shí)心條)、軟骨表面上(白色空心條)檢查的五個(gè)關(guān)節(jié)中的C3沉積的AJM和總評(píng)分(白色線狀條)。數(shù)據(jù)表示為疾病平均值±SEM(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)n=5)。圖2.來自用AdGFP或AdhMAp44(HD)處理的WT小鼠的膝關(guān)節(jié)的代表性組織病理學(xué)和C3沉積圖像。最上面從左到右的兩個(gè)小圖(圖2A和2C)顯示來自用AdGFP(左小圖)和AdhMAp44(右小圖)處理的WT小鼠的膝關(guān)節(jié)的甲苯胺藍(lán)染色。第二組從左到右的兩個(gè)小圖(圖2B和2D)顯示來自用AdGFP(左小圖)和AdhMAp44(右小圖)處理的WT小鼠的踝關(guān)節(jié)的甲苯胺藍(lán)染色。第三組從左到右的兩個(gè)小圖(圖2E和2G)顯示來自用AdGFP(左小圖)和AdhMAp44(右小圖)處理的WT小鼠的膝關(guān)節(jié)的抗C3Ab染色。第四組從左到右的兩個(gè)小圖(圖2F和2H)顯示來自用AdGFP(左小圖)和AdhMAp44(右小圖)處理的WT小鼠的踝關(guān)節(jié)的抗C3Ab染色。標(biāo)識(shí)了滑膜(S-黑色箭頭)、軟骨(C-黑色箭頭)、骨骼(B)和半月板(M)的區(qū)域。在研究中使用LD或HD的AdhMAp44的數(shù)據(jù)是不可區(qū)分的；因此，我們顯示僅來自HD的AdhMAp44的代表性圖像。圖2中顯示的所有膝關(guān)節(jié)圖像的放大倍數(shù)為20X，并且圖2中顯示的所有踝關(guān)節(jié)的放大倍數(shù)為10X。比例尺為0.1mm(100μm)。圖3.AdhMAp44對(duì)C5a水平和C3活化的影響。圖3A.AdhMAp44治療的小鼠的循環(huán)中C5a的絕對(duì)水平降低。小鼠i.p.注射PBS、AdGFP或AdhMAp44。在誘導(dǎo)CAIA之前(第-5天)、之后(第10天)使用來自小鼠的血清測(cè)量C5a的絕對(duì)水平。A中的數(shù)據(jù)表示基于每組n=5的平均值±SEM。LD=低劑量AdhMAp44。HD=高劑量AdhMAp44。與AdGFP治療相比，*p<0.05。圖3B.顯示使用來自AdhMAp44治療的小鼠的血清在體外甘露聚糖誘導(dǎo)的(LP)C3活化減少的ELISA。針對(duì)體外C3活化分析從在第10天i.p.注射PBS、AdGFP或AdhMAp44的小鼠獲得的血清。使用來自沒有CAIA的WT小鼠(無Tx)的血清作為陽性對(duì)照。使用來自C3-/-和MBL/Df-/-小鼠的血清作為陰性對(duì)照。圖3B中的數(shù)據(jù)表示基于沒有Tx且沒有CAIA的WT小鼠(n=4)、C3-/-(n=4)和MBL/Df-/-(n=4)的平均值±SEM。與AdGFP治療相比，*p<0.05。圖3C.顯示在體外通過重組人MAp44的具有Ca++的GVB緩沖液中的體外LPS誘導(dǎo)的C3活化(所有補(bǔ)體途徑都有活性)的總體減少的ELISA。用rhMAp44或抗fB抑制性抗體預(yù)治療來自沒有任何CAIA的小鼠的WT血清。圖3D.顯示在體外通過重組人MAp44的具有Mg++EGTA的Ca缺陷緩沖液中的LPS-誘導(dǎo)的C3活化(僅AP有活性)的減少的ELISA。用rhMAp44或抗fB抑制性抗體預(yù)治療來自沒有任何CAIA的小鼠的WT血清。圖3C和3D中的數(shù)據(jù)表示基于每個(gè)治療組n=4的平均值±SEM。與來自WT小鼠的無Tx血清相比，p<0.05。圖4.用或不用AdMAp44治療的CAIA小鼠的循環(huán)中人MAp44的水平。圖4A.在i.p.注射PBS或AdGFP或LD和HD的AdhMAp44之前的第-5天在小鼠的循環(huán)中人MAp44水平。圖4B.注射PBS或AdGFP或AdhMAp44的小鼠的循環(huán)中在第0天的人MAp44的水平。圖4C.注射PBS或AdGFP或AdhMAp44的小鼠的循環(huán)中在第3天的人MAp44水平。圖4D.注射PBS或AdGFP或AdhMAp44的具有CAIA的小鼠的循環(huán)中在第10天的人MAp44的水平。針對(duì)人MAp44進(jìn)行ELISA。來自注射LD或HD劑量的AdhMAp44的具有CAIA的小鼠的血清表現(xiàn)出有些相似水平的人MAp44。相比之下，注射PBS或AdGFP的小鼠沒有可檢測(cè)水平的人MAp44。數(shù)據(jù)代表基于每組n=5的平均值±SEM(ng/ml)，除了注射HD的AdhMAp44的小鼠(n=4)。與PBS或AdGFP治療相比，*p<0.01。圖5.在CAIA中由用AdmMAp44預(yù)治療產(chǎn)生的CDA的減少。顯示的數(shù)據(jù)源自抗CIImAb和LPS注射后指定天數(shù)。小圖A和B中的箭頭指示注射AdGFP或AdmMAp44的天數(shù)。圖5A.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)關(guān)節(jié)炎的患病率(％)。圖5B.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的CDA。數(shù)據(jù)表示每組的平均值±SEM(n=5)。箭頭指示AdmMAp44和AdGFP的注射天數(shù)。與AdGFP治療相比，*p<0.05。圖6.與AdGFP相比，用AdmMAp44治療的具有CAIA的小鼠的膝關(guān)節(jié)中炎癥、關(guān)節(jié)翳、軟骨損傷和骨損傷以及C3沉積的染色的評(píng)分減少。圖6A.在組織處理和切片的甲苯胺藍(lán)染色后進(jìn)行來自五個(gè)關(guān)節(jié)(2個(gè)前爪、右后膝、右后踝和右后爪)的炎癥(黑色實(shí)心條)、關(guān)節(jié)翳形成(白色陰影條)、軟骨損傷(白色空心條)和骨損傷(白色線狀條)的組織學(xué)評(píng)分的AJM。圖6B.組織學(xué)評(píng)分(總評(píng)分)和CDA之間的Pearson相關(guān)性(r)。圖6C.呈現(xiàn)在滑膜中(黑色實(shí)心條)、軟骨表面上(白色空心條)的五個(gè)關(guān)節(jié)的C3沉積的AJM和總評(píng)分(白色線狀條)。圖6D.C3沉積總評(píng)分(滑膜和軟骨)和CDA之間的Pearson相關(guān)性(r)。數(shù)據(jù)表示為疾病平均值±SEM(n=5)。圖7.對(duì)于抗CIImAb誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎，通過AdmMAp44或AdGFP的局部右膝關(guān)節(jié)注射的總CDA的減少。WT小鼠在第-5天、第0天和第3天在右膝關(guān)節(jié)中局部注射三次。在前爪和左后肢檢查效果。顯示的數(shù)據(jù)源自mAb和LPS注射后的指定天數(shù)。圖7A.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的所有關(guān)節(jié)中的CDA。圖7B.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)所有關(guān)節(jié)中的關(guān)節(jié)炎的患病率(％)。圖7C.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的右膝關(guān)節(jié)中的CDA。圖7D.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的左后肢中的CDA。圖7E.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的右前爪中的CDA。圖7F.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的左前爪中的CDA。數(shù)據(jù)表示每組的平均值±SEM(n=5)。與用AdGFP治療相比，對(duì)于AdmMAp44，*p<0.05。黑色箭頭顯示AdmMAp44和AdGFP的注射時(shí)間。圖8.通過使用蛋白印跡分析在誘導(dǎo)CAIA之前和之后WT小鼠血清中的小鼠MAp44上的HA標(biāo)簽來評(píng)估AAdmMAp44或AdhMAp44的體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)和表達(dá)效率。小鼠在分開的研究中i.p.注射AdmMAp44或AdhMAp44，并且也在右膝關(guān)節(jié)中局部注射。SDS-PAGE和轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素后，用抗HA兔抗體探測(cè)印跡。血清中的HA條帶(約43-50kDa)的存在表明在用AdmMAp44治療的小鼠中細(xì)胞的成功轉(zhuǎn)導(dǎo)和蛋白表達(dá)。圖8A.在小鼠在第-2天(泳道2)i.p.注射AdmMAp44后第0天(泳道3)、第3天(泳道4)和第10天(泳道5)血清中存在HA條帶。圖8B.小鼠在第-5天(泳道2)在右膝關(guān)節(jié)中注射AdmMAp44后第3天(泳道4)和第10天(泳道5)血清中存在HA條帶。使用來自沒有注射腺病毒載體的WT小鼠的血清作為陰性對(duì)照(泳道1)。圖8C.在第-5天i.p.注射AdhMAp44后血清中與MBL結(jié)合的MAp44。使用甘露糖-瓊脂糖珠粒拉下MBL-MAp44復(fù)合物，并且使用兔抗HA抗體檢測(cè)在第0天(泳道4)、第3天(泳道5)和第10天(泳道6)的血清中人MAp44上HA標(biāo)簽的存在。還檢測(cè)來自沒有甘露糖-瓊脂糖制劑的WT小鼠的血清(泳道1)以及來自沒有注射Ad載體的WT小鼠的血清(泳道2)作為對(duì)照。圖9.具有CAIA的小鼠中的代表性IHS，其比較在第-2天和第0天i.p.注射的AdGFP和AdmMAp44的體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在第10天處死所有小鼠，以通過IHS通過免疫熒光測(cè)定GFP的存在或使用抗HA標(biāo)簽抗體測(cè)定HA標(biāo)簽(砂粒顆粒)的存在。圖9A.小鼠并不注射AdGFP或AdmMAp44，而僅注射PBS兩次。在滑膜和半月板中沒有看到綠色熒光。圖9C.小鼠用AdGFP注射兩次，并且綠色熒光蛋白在滑膜中清晰可見，如通過白色箭頭所標(biāo)記。圖9E.小鼠用AdmMAp44注射兩次，并且在滑膜中沒有綠色熒光。圖9B.小鼠既不注射AdGFP也不注射AdmMAp44，但用PBS注射兩次。在滑膜或半月板中沒有看到砂粒顆粒。圖9D.小鼠用AdGFP注射兩次，并且在通過黑色箭頭標(biāo)記的滑膜中沒有看到砂粒顆粒。圖9F.小鼠用AdmMAp44注射兩次，并且在整個(gè)滑膜中存在非常不同的砂粒顆粒(HA)?；さ膱A形區(qū)域在插圖中已增強(qiáng)4倍，以更清楚地顯示HA染色的砂粒顆粒。標(biāo)識(shí)滑膜(S)和半月板(M)的區(qū)域。左小圖中所有圖像的放大倍數(shù)為10X。比例尺為0.1mm(100μm)。右小圖中所有圖像的放大倍數(shù)為40X。比例尺為0.04mm(40μm)。圖10A.說明AdhMAp44中間載體的構(gòu)建和Ad顆粒的生產(chǎn)的數(shù)字序列圖。由WelgenInc將人MAp44cDNA克隆至pENTCMVMAP44HA載體中。使用HA序列作為標(biāo)簽以跟蹤人和小鼠AdMAp44的表達(dá)?？寺⌒∈驧Ap44基因，并以相同的方式構(gòu)建AdmMAp44。圖10B.以相同的方式構(gòu)建AdGFP載體。使用AdGFP作為陰性對(duì)照并檢查各種器官中的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。圖11A和11B顯示具有CAIA的WT中的臨床疾病活動(dòng)和患病率。注射單獨(dú)的抗膠原mAb(arthritomab)或單獨(dú)的LPS的WT小鼠沒有發(fā)展疾病到發(fā)展低水平的疾病，相比之下，注射抗膠原mAb、隨后注射LPS的小鼠發(fā)展嚴(yán)重的疾病。圖11A.在第0天和第3天注射抗CIImAb/LPS、在第0天注射抗CIImab或在第3天注射LPS的WT中的CDA。圖11B.注射抗CIImAb/LPS、抗CIImab或LPS的WT小鼠中的疾病患病率(％)。數(shù)據(jù)表示基于每組n=5的平均值±SEM。與抗CII或LPS治療相比，*p<0.05。圖11C和11D顯示在分開的CAIA實(shí)驗(yàn)過程中重量的百分比變化。在疾病過程中，發(fā)現(xiàn)AdhMAp44、AdmMAp44或AdGFP與PBS相比對(duì)小鼠的體重沒有主要影響。圖11C.i.p.注射的HD和LD的AdhMAp44與AdGFP和PBS相比對(duì)體重的影響。圖11D.i.p.注射的AdmMAp44與AdGFP相比對(duì)體重的影響。數(shù)據(jù)顯示為起始體重的百分比(％)(平均值±SEM)。每個(gè)圖中的黑色箭頭顯示AdhMAp44、AdmMAp44、AdGFP或PBS的注射時(shí)間。圖12.來自i.p.注射AdmMAp44或AdGFP、隨后注射抗CIImAb和LPS的小鼠的膝關(guān)節(jié)的代表性組織病理學(xué)和C3沉積圖像。最上面從左到右的兩個(gè)小圖(圖12A和12C)顯示來自用AdGFP(左小圖)和AdmMAp44(右小圖)處理的WT小鼠的膝關(guān)節(jié)的甲苯胺藍(lán)染色。第二組從左到右的兩個(gè)小圖(圖12B和12D)顯示來自用AdGFP(左小圖)和AdmMAp44(右小圖)處理的WT小鼠的踝關(guān)節(jié)的甲苯胺藍(lán)染色。第三組從左到右的兩個(gè)小圖(圖12E和12G)顯示來自用AdGFP(左小圖)和AdmMAp44(右小圖)處理的WT小鼠的膝關(guān)節(jié)的抗C3Ab染色。第四組從左到右的兩個(gè)小圖(圖12F和12H)顯示來自用AdGFP(左小圖)和AdmMAp44(右小圖)處理的WT小鼠的踝關(guān)節(jié)的抗C3Ab染色(棕色)。標(biāo)識(shí)了滑膜(S-黑色箭頭)、軟骨(C-黑色箭頭)、骨骼(B)和半月板(M)的區(qū)域。圖12中顯示的所有膝關(guān)節(jié)和踝關(guān)節(jié)圖像的放大倍數(shù)為20X。比例尺為0.1mm(100μm)。圖13.AdhMAp44對(duì)RRV誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的影響。在第-3天、第0天和第0天在左后足墊中注射AdGFP或AdhMAp44的WT小鼠。顯示的數(shù)據(jù)源自在右足墊中RRV注射后的指定天數(shù)。圖13A.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的CDA。圖13B.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的重量變化(％)。數(shù)據(jù)表示基于每組n=4的平均值±SEM。圖14.關(guān)節(jié)炎的小鼠模型。描繪膠原抗體誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎和膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的動(dòng)物方案的示意圖。圖15.膠原抗體誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎。僅在注射抗CII抗體、隨后注射LPS的動(dòng)物中發(fā)生嚴(yán)重的關(guān)節(jié)炎。圖16.天然抗體C2和B4對(duì)亞最大誘導(dǎo)的CAIA的影響。圖16A.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的CDA。圖16B.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)關(guān)節(jié)炎的患病率(％)。數(shù)據(jù)表示每組的平均值±SEM。箭頭指示指定IgM或PBS的注射天數(shù)。*p<0.05。圖17.來自CAIA小鼠的爪的代表性圖像。圖17A和17B。LPS注射后第3天來自CAIA小鼠的爪的圖像。圖17C-17F。LPS注射后第10天來自CAIA小鼠的爪的圖像。圖18.與WT小鼠相比，MASP-2/sMAp-/-小鼠中抗膠原mAb誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的臨床疾病活動(dòng)顯著降低。WT和MASP-2/sMAp-/-小鼠在第0天注射8mg/小鼠/i.p.的ArthritoMab。所有小鼠都以50μg/小鼠/i.p.注射LPS(大腸桿菌菌株，0111B4)。在第10天處死所有小鼠。圖18A.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)的臨床疾病活動(dòng)(CDA)。與WT小鼠相比，在MASP-2/sMAp-/-小鼠中，在第10天的CDA降低70％。圖18B.在實(shí)驗(yàn)持續(xù)時(shí)間內(nèi)關(guān)節(jié)炎的患病率(％)。在第10天，在WT和MASP-2/sMAp-/-小鼠中的疾病患病率為100％。數(shù)據(jù)表示為疾病平均值±SEM(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)n=5)。與WT小鼠相比，*p<0.05。發(fā)明詳述本申請(qǐng)?zhí)峁┝薓Ap44多肽、其新型片段和這些MAp44多肽及其片段用于治療補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病諸如關(guān)節(jié)炎的用途。本申請(qǐng)部分地基于凝集素途徑和MAp44，特別是在膠原抗體誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎疾病模型中的重要作用的發(fā)現(xiàn)。在本申請(qǐng)之前，LP和MAp44，特別是在介導(dǎo)炎性疾病中的作用是不清楚的。例如，補(bǔ)體系統(tǒng)的不同組分缺陷的小鼠中的研究已經(jīng)顯示，AP是介導(dǎo)CAIA所必需且足夠的，因?yàn)樗坪醪恍枰狶P和CP。使用MBL-A/C和C4缺陷小鼠的LP研究(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Ji等人,2002,Immunity16:157-168;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109)顯示疾病很大程度上不受LP的影響。本申請(qǐng)已經(jīng)證明，腺病毒介導(dǎo)的MAp44的表達(dá)急劇減弱CAIA并降低小鼠中RRV誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重性，這表明LP在這些模型中的組織損傷的發(fā)展中是重要的。本申請(qǐng)?zhí)峁┝嘶贛Ap44及其片段的使用的有效治療方法，包括但不限于涉及MAp44的靶向遞送的方法。因此，在一個(gè)方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝税芜x地與靶向部分(諸如抗體或其片段)連接的MAp44或其新型片段的構(gòu)建體。在另一個(gè)方面，提供了治療個(gè)體中補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的MAp44或其新型片段，其任選地與靶向部分(諸如抗體或其片段)連接。還提供了可用于本文所述的方法的單位劑型、試劑盒和制品。定義術(shù)語“個(gè)體”是指哺乳動(dòng)物，包括人。個(gè)體包括但不限于人、牛、馬、貓、犬、嚙齒動(dòng)物或靈長(zhǎng)類動(dòng)物。在一些實(shí)施方案中，所述個(gè)體是人。如本文所用，“治療（treatment）”或“治療（treating）”是用于獲得有益或期望的結(jié)果（包括臨床結(jié)果）的方法。為了本發(fā)明的目的，有益或期望的臨床結(jié)果包括但不限于以下中的一種或多種：減輕由疾病導(dǎo)致的一種或多種癥狀，減輕疾病的程度，穩(wěn)定疾病(例如，預(yù)防或延遲疾病的惡化)，預(yù)防或延遲疾病的傳播，預(yù)防或延遲疾病的復(fù)發(fā)，延遲或延緩疾病的進(jìn)展，改善疾病狀態(tài)，提供疾病的(部分或全部)緩解，減少治療疾病所需的一種或多種其它藥物的劑量，延遲疾病的進(jìn)展，增加或改善生活質(zhì)量，增加體重增加和/或延長(zhǎng)存活期。“治療”還涵蓋減少疾病的病理后果。本發(fā)明的方法涵蓋治療的這些方面中的任何一個(gè)或多個(gè)。本文使用的術(shù)語“有效量”是指化合物或組合物足以治療特定病癥、病況或疾病，諸如改善、緩和、減輕和/或延遲其一種或多種癥狀的量。如本文所用，“藥學(xué)上可接受的”或“藥理學(xué)上相容的”是指不是生物學(xué)或其它方面不期望的材料，例如，該材料可以摻入向個(gè)體或患者施用的藥物組合物中，而不引起任何顯著的不期望的生物效應(yīng)或以有害方式與包含它的組合物的任何其它組分相互作用。藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑優(yōu)選滿足毒理學(xué)和制造測(cè)試的所需標(biāo)準(zhǔn)和/或包括在由美國食品和藥物管理局準(zhǔn)備的非活性成分指南中。如本文和所附權(quán)利要求中所用，單數(shù)形式“一個(gè)/種(a)”、“一個(gè)/種(an)”和“該/所述(the)”包括復(fù)數(shù)對(duì)象，除非上下文另有明確說明。本文中對(duì)“約”值或參數(shù)的提及包括(并描述)涉及該值或參數(shù)本身的實(shí)施方案。例如，涉及“約X”的描述包括“X”的描述。應(yīng)當(dāng)理解，本文所述的本發(fā)明的方面和實(shí)施方案包括“由方面和實(shí)施方案組成”和/或“基本上由方面和實(shí)施方案組成”。MAp44多肽及其片段本文所述的構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段，其中所述MAp44多肽或其片段作為補(bǔ)體活性的抑制劑發(fā)揮功能。與其它MASP蛋白諸如MASP-1和MASP-3相比以低水平存在于血清中的MAp44，作為局部凝集素途徑特異性補(bǔ)體抑制劑發(fā)揮功能。Skjodt等人,MolecularImmunology,47:2229-30(2010)。補(bǔ)體活性降低可以是增量性的(例如，活性降低10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%或90%)或全部的。例如，在一些實(shí)施方案中，在標(biāo)準(zhǔn)體外紅細(xì)胞溶血測(cè)定或體外CH50eq測(cè)定或Wieslab?補(bǔ)體測(cè)定(EuroDiagnostica)中，MAp44多肽或其片段可以將補(bǔ)體活性抑制至少10%(例如，至少15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%或95%或更高百分比)。參見，例如，Kabat和Mayer(編),“ExperimentalImmunochemistry,2ndEdition,”135-240,Springfield,IL,CCThomas(1961),第135-139頁，或該測(cè)定的常規(guī)變型，諸如雞紅細(xì)胞溶血方法，如描述于，例如，Hillmen等人(2004)NEnglJMed350(6):552。CH50eq測(cè)定法是用于測(cè)量血清中總經(jīng)典補(bǔ)體活性的方法。該測(cè)試是裂解測(cè)定法，其使用抗體敏化的紅細(xì)胞作為經(jīng)典補(bǔ)體途徑的活化劑，并使用測(cè)試血清的不同稀釋液來確定實(shí)現(xiàn)50%裂解所需的量(CH50)。例如，可以使用分光光度計(jì)確定溶血百分比。CH50eq測(cè)定法提供了終末補(bǔ)體復(fù)合物(TCC)形成的間接測(cè)量，因?yàn)門CC自身直接負(fù)責(zé)所測(cè)量的溶血。所述測(cè)定法是公知的，并且是本領(lǐng)域技術(shù)人員經(jīng)常使用的。簡(jiǎn)言之，為了活化經(jīng)典補(bǔ)體途徑，將未稀釋的血清樣品(例如，人血清樣品)添加到含有抗體敏化的紅細(xì)胞的微測(cè)定孔中，從而產(chǎn)生TCC。接下來，在微測(cè)定孔中稀釋活化的血清，所述微測(cè)定孔包被有捕獲試劑(例如，結(jié)合TCC的一種或多種組分的抗體)。活化的樣品中存在的TCC結(jié)合包被微測(cè)定孔表面的單克隆抗體。將孔洗滌，并向每個(gè)孔中添加可檢測(cè)標(biāo)記并識(shí)別結(jié)合的TCC的檢測(cè)試劑?？蓹z測(cè)的標(biāo)記可以是，例如，熒光標(biāo)記或酶標(biāo)簽。測(cè)定結(jié)果表示為每毫升CH50單位當(dāng)量(CH50UEq/mL)。Wieslab?補(bǔ)體測(cè)定是可用于確定血清樣品中CP、AP或LP的特異性活化的商業(yè)試劑盒。簡(jiǎn)言之，將血清稀釋在阻斷未測(cè)定的補(bǔ)體途徑的溶液中，然后在用所測(cè)定的特定途徑的活化劑包被的孔中溫育?？捎糜跈z測(cè)推定抑制劑對(duì)LP活化的影響的測(cè)定法描述于Degn等人,2009,J.Immunol.183:7371-7378。簡(jiǎn)言之，將LP的推定抑制劑與MBL溫育，其后添加MASP-2，將混合物轉(zhuǎn)移至甘露聚糖包被的孔中。洗滌孔并添加人補(bǔ)體C4并允許溫育?？梢酝ㄟ^添加生物素標(biāo)記的抗C4抗體、隨后添加與可檢測(cè)標(biāo)記物(例如放射性或熒光標(biāo)簽)綴合的鏈霉抗生物素蛋白來檢測(cè)C4片段的沉積。用于在體外檢測(cè)和/或測(cè)量補(bǔ)體活性的其它方法記載和例舉于工作實(shí)施例中。在一個(gè)方面，本申請(qǐng)?zhí)峁┝藰?gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含MAp44多肽(SEQIDNO:44)或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段長(zhǎng)度為約50至約100個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約100至約150個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約150至約200個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約200至約250個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約250至約300個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約300至約350個(gè)氨基酸，或長(zhǎng)度為約350至約380個(gè)氨基酸，且包含SEQIDNO:44中發(fā)現(xiàn)的連續(xù)序列。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含SEQIDNO:44的氨基酸1-137、氨基酸1-176、氨基酸1-296或氨基酸1-363。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段長(zhǎng)度為少于約100個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為少于約200個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為少于約250個(gè)氨基酸，或長(zhǎng)度為少于約300個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含選自CUB1、EGF、CUB2和CCP1的一個(gè)或多個(gè)MAp44結(jié)構(gòu)域。例如，在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含選自SEQIDNO:46、48、50和52的一種或多種序列。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段與SEQIDNO:44至少約50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%同源。靶向部分在一些實(shí)施方案中，本文所述的構(gòu)建體還包含靶向部分。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是抗體(諸如識(shí)別在靶向疾病部位的新表位的抗體)。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是2型補(bǔ)體受體(CR2)的片段，或以類似方式作用的分子，其將所述構(gòu)建體引導(dǎo)至補(bǔ)體活化部位。PCT專利申請(qǐng)?zhí)朩O2004/045520提供了示例性的基于CR2的靶向部分，并且具體地通過引用并入本文。在其它實(shí)施方案中，所述靶向部分是將該構(gòu)建體引導(dǎo)至炎癥、缺血或氧化或其它形式損傷的部位的肽或其它分子。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是碳水化合物。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV或磷脂的抗體或其片段。膜聯(lián)蛋白IV屬于鈣依賴性磷脂結(jié)合蛋白的家族。膜聯(lián)蛋白的結(jié)構(gòu)由四個(gè)膜聯(lián)蛋白重復(fù)(對(duì)于膜聯(lián)蛋白IV，八個(gè))保守的Ca2+和膜結(jié)合核心和可變N-末端區(qū)域構(gòu)成。膜聯(lián)蛋白是可溶性細(xì)胞溶質(zhì)蛋白，但雖然缺乏明顯的信號(hào)序列和明顯不能進(jìn)入經(jīng)典分泌途徑，膜聯(lián)蛋白已經(jīng)在細(xì)胞外液中鑒定到或通過理解較少的結(jié)合位點(diǎn)與外部細(xì)胞表面締合。膜聯(lián)蛋白IV主要由上皮細(xì)胞產(chǎn)生，并且在肺、腸、胰腺、肝和腎中也以高水平發(fā)現(xiàn)。Rescher等人,J.CellSci.,(2004),117:2631-2639和Zernii等人,Biochemistry(Mosc).,(2003),68(1):129-60。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷（或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷（或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷氧化損傷（或處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷氧化損傷（或處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷缺血-再灌注損傷（或處于經(jīng)歷缺血-再灌注損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷缺血-再灌注損傷（或處于經(jīng)歷缺血-再灌注損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，膜聯(lián)蛋白IV上對(duì)于所述抗體或其片段的表位存在于在經(jīng)歷組織損傷（或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷（或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)，但不存在于在未經(jīng)歷組織損傷（或未處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于未經(jīng)歷組織損傷（或未處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的細(xì)胞的表面上。在一些實(shí)施方案中，膜聯(lián)蛋白IV上對(duì)于所述抗體或其片段的表位存在于在經(jīng)歷氧化損傷（或處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷氧化損傷（或處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的細(xì)胞的表面上，但不存在于在未經(jīng)歷氧化損傷（或未處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于未經(jīng)歷氧化損傷（或未處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的細(xì)胞的表面上。在一些實(shí)施方案中，膜聯(lián)蛋白IV上對(duì)于所述抗體或其片段的表位存在于在經(jīng)歷缺血-再灌注損傷（或處于經(jīng)歷缺血-再灌注損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷缺血-再灌注損傷（或處于經(jīng)歷缺血-再灌注損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)，但不存在于在未經(jīng)歷缺血-再灌注損傷（或未處于經(jīng)歷缺血-再灌注損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于未經(jīng)歷缺血-再灌注損傷（或未處于經(jīng)歷缺血-再灌注損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的細(xì)胞的表面上。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，其包括但不限于磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)、磷脂酰膽堿(PC)，并且在本申請(qǐng)的上下文中也旨在涵蓋鞘脂和丙二醛(MDA)。PE、CL和PC是在生物膜中發(fā)現(xiàn)的磷脂類。磷脂酰膽堿更常見于細(xì)胞膜的質(zhì)膜外葉（exoplasmicleaflet）或外葉（outerleaflet）。據(jù)認(rèn)為其通過磷脂酰膽堿轉(zhuǎn)移蛋白(PCTP)在細(xì)胞內(nèi)的膜之間轉(zhuǎn)運(yùn)。磷脂由膽堿頭基和甘油磷酸與各種脂肪酸構(gòu)成，所述脂肪酸一種是飽和脂肪酸，一種是不飽和脂肪酸。PE由用兩種脂肪酸和磷酸酯化的甘油的組合組成。雖然在磷脂酰膽堿中組合磷酸酯基團(tuán)與膽堿，在PE中將其與乙醇胺組合。兩種脂肪酸可以是相同或不同的，并且通常在1,2位(雖然它們可以在1,3位)。心磷脂(IUPAC名稱“1,3-雙(sn-3'-磷脂?；?-sn-甘油”)是內(nèi)線粒體膜的重要組分，其中其構(gòu)成總脂質(zhì)組成的約20％。心磷脂(CL)是一種二磷脂酰甘油脂質(zhì)，其中兩個(gè)磷脂酰甘油與中心的甘油骨架連接以形成二聚結(jié)構(gòu)。在大多數(shù)動(dòng)物組織中，心磷脂含有18碳脂肪烷基鏈，其中每個(gè)具有2個(gè)不飽和鍵。已經(jīng)提出，(18:2)4?；湗?gòu)型是CL對(duì)哺乳動(dòng)物線粒體中的內(nèi)膜蛋白的高親和力的重要結(jié)構(gòu)要求。已經(jīng)在具有年齡相關(guān)性黃斑變性的眼中顯示磷脂積累(Lommatzsch,等人(2008)GraefesArchClinExpOphthalmol.246(6):803-10)。丙二醛(MDA)由活性氧(ROS)產(chǎn)生，因此通常在體內(nèi)作為氧化應(yīng)激的生物標(biāo)志物進(jìn)行測(cè)定。活性氧物質(zhì)降解多不飽和脂質(zhì)，形成丙二醛。該化合物是反應(yīng)性醛，并且是在細(xì)胞中引起毒性應(yīng)激并形成被稱為高級(jí)脂氧化終產(chǎn)物(ALE)的共價(jià)蛋白加合物的許多反應(yīng)性親電體物質(zhì)之一。這種醛的產(chǎn)生也用作測(cè)量生物體中氧化應(yīng)激水平的生物標(biāo)志物。已經(jīng)在具有年齡相關(guān)性黃斑變性的眼睛和濕性AMD的小鼠激光誘導(dǎo)的CNV模型中顯示MDA修飾(Weissman等人(2011)Nature.478(7367):76-81)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)存在于在經(jīng)歷組織損傷(或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)存在于在經(jīng)歷眼病(或處于經(jīng)歷眼病的風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷眼病(或處于經(jīng)歷眼病的風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體的細(xì)胞的表面上(或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)存在于在經(jīng)歷氧化損傷(或處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷氧化損傷(或處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體的細(xì)胞的表面上(或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合的磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)的表位存在于在經(jīng)歷組織損傷（或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷（或處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上或病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中，但不存在于在未經(jīng)歷組織損傷（或未處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于未經(jīng)歷組織損傷（或未處于經(jīng)歷組織損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的細(xì)胞的表面上或病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合的磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)的表位存在于在經(jīng)歷眼?。ɑ蛱幱诮?jīng)歷眼病的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷眼?。ɑ蛱幱诮?jīng)歷眼病的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上或病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中，但不存在于在未經(jīng)歷眼病（或未處于經(jīng)歷眼病的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于未經(jīng)歷眼?。ɑ蛭刺幱诮?jīng)歷眼病的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的細(xì)胞的表面上或病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合的磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)上的表位存在于在經(jīng)歷氧化損傷（或處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于經(jīng)歷氧化損傷（或處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的細(xì)胞的表面上或病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中，但不存在于在未經(jīng)歷氧化損傷（或未處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織中或鄰近于未經(jīng)歷氧化損傷（或未處于經(jīng)歷氧化損傷的風(fēng)險(xiǎn)下）的組織的細(xì)胞的表面上或病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。如本文所述，在如本文所述的特定組織中或鄰近于如本文所述的特定組織的細(xì)胞(和/或病理結(jié)構(gòu))包括作為組織或器官的一部分或鄰近于(鄰近，直接鄰近，其微環(huán)境中，鄰接，側(cè)接，接近)組織或器官的細(xì)胞(和/或病理結(jié)構(gòu)，例如脈絡(luò)膜小疣)，其中特定事件(諸如非缺血性損傷或氧化損傷)將發(fā)生、可能發(fā)生或正在開始發(fā)生。在鄰近細(xì)胞的情況下，細(xì)胞充分在特定組織或器官的微環(huán)境內(nèi)，使得氧化損傷和/或炎癥的條件影響鄰近細(xì)胞以及特定組織或器官。此類細(xì)胞可以展示應(yīng)激跡象，包括但不限于展示“應(yīng)激蛋白”(例如，熱休克蛋白和與細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)的其它蛋白，包括膜聯(lián)蛋白)或細(xì)胞表面上的其它分子(磷脂，碳水化合物部分)，包括展示異常水平的蛋白、修飾的蛋白或細(xì)胞表面上的其它分子。此類細(xì)胞可能經(jīng)歷凋亡或顯示凋亡的跡象，此類征象包括細(xì)胞中的形態(tài)變化，染色質(zhì)縮聚，細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白相互作用的變化，細(xì)胞內(nèi)鈣水平的變化，磷脂的外化，細(xì)胞脫離，細(xì)胞表面結(jié)構(gòu)的損失等。如本文所用，術(shù)語“選擇性結(jié)合”是指一種蛋白與另一種蛋白、脂質(zhì)或碳水化合物部分的特異性結(jié)合(例如，抗體、其片段或結(jié)合配偶體與抗原的結(jié)合)，其中通過任何標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定(例如，免疫測(cè)定)測(cè)量的結(jié)合水平統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著高于測(cè)定的背景對(duì)照。例如，當(dāng)進(jìn)行免疫測(cè)定時(shí)，對(duì)照通常包括單獨(dú)含有抗體或抗原結(jié)合片段(即，在抗原不存在下)的反應(yīng)孔/管，其中在抗原不存在下所述抗體或其抗原結(jié)合片段的反應(yīng)性(例如，與孔的非特異性結(jié)合)的量被認(rèn)為是背景。結(jié)合可以使用本領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)的多種方法測(cè)量，包括但不限于：蛋白印跡、免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)、放射免疫測(cè)定(RIA)、免疫沉淀、表面等離子共振、化學(xué)發(fā)光、熒光偏振、磷光、免疫組織化學(xué)分析、基質(zhì)輔助激光解吸/電離飛行時(shí)間(MALDI-TOF)質(zhì)譜、微細(xì)胞計(jì)數(shù)、微陣列、顯微鏡、熒光活化的細(xì)胞分選(FACS)和流式細(xì)胞術(shù)。根據(jù)本發(fā)明，通常關(guān)于抗體將給定蛋白或肽或其它分子的“表位”定義為抗體或其抗原結(jié)合片段將結(jié)合并針對(duì)其產(chǎn)生抗體的較大分子的一部分或其上的位點(diǎn)。術(shù)語表位可以與術(shù)語給定蛋白或抗原的“抗原決定簇”、“抗體結(jié)合位點(diǎn)”或“保守結(jié)合表面”互換使用。更具體地，表位可以通過參與抗體結(jié)合的氨基酸殘基以及通過其在三維空間中的構(gòu)象(例如，構(gòu)象表位或保守結(jié)合表面)來定義。表位可以包括在小至約4-6個(gè)氨基酸殘基的肽中，或者可以包括在蛋白的較大區(qū)段中，并且當(dāng)提及表位的三維結(jié)構(gòu)、特別是關(guān)于抗體結(jié)合表位時(shí)，不需要由連續(xù)的氨基酸殘基構(gòu)成?？贵w結(jié)合表位通常是構(gòu)象表位，而不是順序表位(即線性表位)，或換句話說，由抗體結(jié)合的蛋白或多肽表面上的三維排列的氨基酸殘基定義的表位。如上所提及，構(gòu)象表位并不由氨基酸殘基的連續(xù)序列構(gòu)成，反而，所述殘基可能在一級(jí)蛋白序列中廣泛分開，并且通過蛋白以其在三維中的天然構(gòu)象折疊的方式結(jié)合在一起形成結(jié)合表面。競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定可以使用本領(lǐng)域的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)(例如競(jìng)爭(zhēng)性ELISA或其它結(jié)合測(cè)定)進(jìn)行。例如，競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑可以通過其抑制抗原與已知的標(biāo)記抗體(例如mAbB4)或已知含有針對(duì)特定抗原的抗體的血清或另一種組合物(例如，已知含有針對(duì)抗原的天然抗體的血清)結(jié)合的能力來檢測(cè)和定量。根據(jù)本發(fā)明，抗體的特征在于它們包含免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域，因此它們是蛋白的免疫球蛋白超家族的成員。一般來說，抗體分子包含兩種類型的鏈。一種類型的鏈被稱為重鏈或H鏈，而另一種被稱為輕鏈或L鏈。兩條鏈以等摩爾比存在，其中每個(gè)抗體分子通常具有兩條H鏈和兩條L鏈。兩條H鏈通過二硫鍵連接在一起，且每條H鏈通過二硫鍵與L鏈連接。僅存在被稱為lambda(λ)和kappa(κ)鏈的兩種類型的L鏈。相反，存在五種被稱為同種型的主要的H鏈類別。這五類包括免疫球蛋白M(IgM或μ)、免疫球蛋白D(IgD或δ)、免疫球蛋白G(IgG或λ)、免疫球蛋白A(IgA或α)和免疫球蛋白E(IgE或ε)。此類同種型之間的區(qū)別特征由免疫球蛋白的恒定結(jié)構(gòu)域定義，并在下面詳細(xì)討論。人免疫球蛋白分子包含九種同種型，IgM，IgD，IgE，以及IgG的四個(gè)亞類，包括IgG1(γ1)、IgG2(γ2)、IgG3(γ3)和IgG4(γ4)，和IgA的兩個(gè)亞類，包括IgA1(α1)和IgA2(α2)。在人類中，IgG亞類3和IgM是最有效的補(bǔ)體活化劑(經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng))，而IgG亞類1和（在甚至更低的程度上）2是經(jīng)典補(bǔ)體系統(tǒng)的中至低活化劑。IgG4亞類不活化補(bǔ)體系統(tǒng)(經(jīng)典或旁路)。已知活化旁路補(bǔ)體系統(tǒng)的唯一人免疫球蛋白同種型是IgA。在小鼠中，IgG亞類是IgG1、IgG2a、IgG2b和IgG3。鼠IgG1不活化補(bǔ)體，而IgG2a、IgG2b和IgG3是補(bǔ)體活化劑。免疫球蛋白分子的每條H或L鏈包含兩個(gè)區(qū)域，其被稱為L(zhǎng)鏈可變結(jié)構(gòu)域(VL結(jié)構(gòu)域)和L鏈恒定結(jié)構(gòu)域(CL結(jié)構(gòu)域)和H鏈可變結(jié)構(gòu)域(VH結(jié)構(gòu)域)和H鏈恒定結(jié)構(gòu)域(CH結(jié)構(gòu)域)。完整CH結(jié)構(gòu)域包含三個(gè)亞結(jié)構(gòu)域(CH1、CH2、CH3)和鉸鏈區(qū)。一條H鏈和一條L鏈在一起可以形成具有免疫球蛋白可變區(qū)的免疫球蛋白分子的臂。完整免疫球蛋白分子包含兩個(gè)締合(例如，二硫鍵連接的)臂。因此，整個(gè)免疫球蛋白的每個(gè)臂包含VH+L區(qū)和CH+L區(qū)。如本文所用，術(shù)語“可變區(qū)”或“V區(qū)”是指VH+L區(qū)(也稱為Fv片段)、VL區(qū)或VH區(qū)。同樣如本文所用，術(shù)語“恒定區(qū)”或“C區(qū)”是指CH+L區(qū)、CL區(qū)或CH區(qū)。免疫球蛋白分子的抗原特異性由可變區(qū)或V區(qū)的氨基酸序列賦予。因此，不同免疫球蛋白分子的V區(qū)可以根據(jù)其抗原特異性顯著變化。V區(qū)的某些部分比其它部分更保守并且被稱為構(gòu)架區(qū)(FR區(qū))。相比之下，V區(qū)的某些部分是高度可變的并且被稱為高變區(qū)。當(dāng)VL和VH結(jié)構(gòu)域在免疫球蛋白分子中配對(duì)時(shí)，來自每個(gè)結(jié)構(gòu)域的高變區(qū)締合并產(chǎn)生形成抗原結(jié)合位點(diǎn)(抗原組合位點(diǎn))的高變環(huán)。因此，高變環(huán)決定免疫球蛋白的特異性，并被稱為互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)，因?yàn)樗鼈兊谋砻媾c抗原互補(bǔ)。L鏈和H鏈V基因區(qū)段都含有具有實(shí)質(zhì)性氨基酸序列變異性的三個(gè)區(qū)域。此類區(qū)域分別被稱為L(zhǎng)鏈CDR1、CDR2和CDR3，以及H鏈CDR1、CDR2和CDR3。L鏈CDR1的長(zhǎng)度可以在不同VL區(qū)之間顯著變化。例如，CDR1的長(zhǎng)度可以從約7個(gè)氨基酸至約17個(gè)氨基酸變化。相比之下，L鏈CDR2和CDR3的長(zhǎng)度通常在不同VL區(qū)之間不變化。H鏈CDR3的長(zhǎng)度可以在不同VH區(qū)之間顯著變化。例如，CDR3的長(zhǎng)度可以從約1個(gè)氨基酸至約20個(gè)氨基酸變化。每個(gè)H和L鏈CDR區(qū)側(cè)接FR區(qū)。用蛋白酶有限消化免疫球蛋白可以產(chǎn)生兩個(gè)片段?？乖Y(jié)合片段被稱為Fab、Fab'或F(ab')2片段。缺乏結(jié)合抗原的能力的片段被稱為Fc片段。Fab片段包含免疫球蛋白分子的一個(gè)臂，其含有與VH區(qū)和CH區(qū)的部分(CH1結(jié)構(gòu)域)配對(duì)的L鏈(VL+CL結(jié)構(gòu)域)。Fab'片段對(duì)應(yīng)于Fab片段，其具有連接至CH1結(jié)構(gòu)域的鉸鏈區(qū)的部分。F(ab')2片段對(duì)應(yīng)于兩個(gè)Fab'片段，其通常通過通常在鉸鏈區(qū)中的二硫鍵與彼此共價(jià)連接。本發(fā)明的分離的抗體可以包括含有此類抗體的血清，或已經(jīng)純化至不同程度的抗體。本發(fā)明的整個(gè)抗體可以是多克隆或單克隆的。或者，本發(fā)明中也可以采用整個(gè)抗體的功能等效物，諸如其中一個(gè)或多個(gè)抗體結(jié)構(gòu)域被截短或不存在的抗原結(jié)合片段(例如Fv、Fab、Fab'或F(ab’)2片段)，以及基因工程改造抗體或其抗原結(jié)合片段，包括單鏈抗體(例如scFv)，人源化抗體，可以結(jié)合多于一個(gè)表位的抗體(例如雙特異性抗體)，或可以結(jié)合一種或多種不同抗原的抗體(例如雙特異性或多特異性抗體)。在一些實(shí)施方案中，本文提供的靶向構(gòu)建體的靶向部分包含抗體。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是scFv。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是scFv，其包含(i)SEQIDNO:13的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和/或(ii)SEQIDNO:15的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是scFv，其包含(i)SEQIDNO:14的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和/或(ii)SEQIDNO:16的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是具有SEQIDNO:17的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是具有SEQIDNO:18的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是scFv，其包含(i)SEQIDNO:34的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和/或(ii)SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是scFv，其包含(i)SEQIDNO:35的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和/或(ii)SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是具有SEQIDNO:37的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是具有SEQIDNO:38的序列的scFv。在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的靶向構(gòu)建體包括人源化抗體或其片段(諸如人源化scFv)。人源化抗體或其片段是具有源自來自非人物種的免疫球蛋白的抗原結(jié)合位點(diǎn)的分子，所述分子的剩余的源自免疫球蛋白的部分源自人免疫球蛋白。所述抗原結(jié)合位點(diǎn)可以包含與人恒定結(jié)構(gòu)域融合的完全可變區(qū)或僅包含移植至可變結(jié)構(gòu)域中的適當(dāng)人框架區(qū)上的互補(bǔ)決定區(qū)(CDR)。人源化抗體或其片段可以例如通過將抗體可變結(jié)構(gòu)域建模且使用遺傳工程改造技術(shù)諸如CDR移植產(chǎn)生抗體來產(chǎn)生。用于產(chǎn)生人源化抗體的各種技術(shù)的描述見于例如Morrison等人(1984)Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:6851-55;Whittle等人(1987)Prot.Eng.1:499-505;Co等人(1990)J.Immunol.148:1149-1154;Co等人(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA88:2869-2873;Carter等人(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA89:4285-4289;Routledge等人(1991)Eur.J.Immunol.21:2717-2725和PCT專利公開號(hào)WO91/09967;WO91/09968和WO92/113831。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:1的序列(例如，輕鏈CDR1序列)、SEQIDNO:2的序列(例如，輕鏈CDR2序列)或SEQIDNO:3的序列(例如，輕鏈CDR3序列)；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:4的序列(例如，重鏈CDR1序列)、SEQIDNO:5的序列(例如，重鏈CDR2序列)或SEQIDNO:6的序列(例如，重鏈CDR3序列)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:7的序列(例如，輕鏈CDR1序列)、SEQIDNO:8的序列(例如，輕鏈CDR2序列)或SEQIDNO:9的序列(例如，輕鏈CDR3序列)；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:10的序列(例如，重鏈CDR1序列)、SEQIDNO:11的序列(例如，重鏈CDR2序列)或SEQIDNO:12的序列(例如，重鏈CDR3序列)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:1的序列、SEQIDNO:2的序列和SEQIDNO:3的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:7的序列、SEQIDNO:8的序列和SEQIDNO:9的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:4的序列、SEQIDNO:5的序列和SEQIDNO:6的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:10的序列、SEQIDNO:11的序列和SEQIDNO:12的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:1的序列、SEQIDNO:2的序列和SEQIDNO:3的序列；和(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:4的序列、SEQIDNO:5的序列和SEQIDNO:6的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:7的序列、SEQIDNO:8的序列和SEQIDNO:9的序列；和(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:10的序列、SEQIDNO:11的序列和SEQIDNO:12的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:1的輕鏈CDR1；(ii)SEQIDNO:2的輕鏈CDR2；(iii)SEQIDNO:3的輕鏈CDR3；(iv)SEQIDNO:4的重鏈CDR1；(v)SEQIDNO:5的重鏈CDR2；和(vi)SEQIDNO:6的重鏈CDR3。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:7的輕鏈CDR1；(ii)SEQIDNO:8的輕鏈CDR2；(iii)SEQIDNO:9的輕鏈CDR3；(iv)SEQIDNO:10的重鏈CDR1；(v)SEQIDNO:11的重鏈CDR2；和(vi)SEQIDNO:12的重鏈CDR3。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:13的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:15的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:14的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:16的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:13的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和(ii)SEQIDNO:15的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:14的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和(ii)SEQIDNO:16的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或片段是具有SEQIDNO:17的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或片段是具有SEQIDNO:18的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:25的序列(例如，輕鏈CDR1序列)、SEQIDNO:26的序列(例如，輕鏈CDR2序列)或SEQIDNO:27的序列(例如，輕鏈CDR3序列)；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列(例如，重鏈CDR1序列)、SEQIDNO:29的序列(例如，重鏈CDR2序列)或SEQIDNO:30的序列(例如，重鏈CDR3序列)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:31的序列(例如，輕鏈CDR1序列)、SEQIDNO:32的序列(例如，輕鏈CDR2序列)或SEQIDNO:33的序列(例如，輕鏈CDR3序列)；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列(例如，重鏈CDR1序列)、SEQIDNO:29的序列(例如，重鏈CDR2序列)或SEQIDNO:30的序列(例如，重鏈CDR3序列)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:25的序列、SEQIDNO:26的序列和SEQIDNO:27的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:31的序列、SEQIDNO:32的序列和SEQIDNO:33的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列和SEQIDNO:30的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:25的序列、SEQIDNO:26的序列和SEQIDNO:27的序列；和(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列和SEQIDNO:30的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:31的序列、SEQIDNO:32的序列和SEQIDNO:33的序列；和(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列和SEQIDNO:30的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含：(i)SEQIDNO:25的輕鏈CDR1；(ii)SEQIDNO:26的輕鏈CDR2；(iii)SEQIDNO:27的輕鏈CDR3；(iv)SEQIDNO:28的重鏈CDR1；(v)SEQIDNO:29的重鏈CDR2；和(vi)SEQIDNO:30的重鏈CDR3。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂，且包含：(i)SEQIDNO:31的輕鏈CDR1；(ii)SEQIDNO:32的輕鏈CDR2；(iii)SEQIDNO:33的輕鏈CDR3；(iv)SEQIDNO:28的重鏈CDR1；(v)SEQIDNO:29的重鏈CDR2；和(vi)SEQIDNO:30的重鏈CDR3。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:34的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含SEQIDNO:35的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:34的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和(ii)SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:35的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和(ii)SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或片段是具有SEQIDNO:37的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或片段是具有SEQIDNO:38的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是多價(jià)抗體或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是雙特異性抗體或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV和磷脂的雙特異性抗體或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是雙特異性抗體或其片段，其中所述抗體或其片段的第一臂結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV，且所述抗體或其片段的第二臂結(jié)合磷脂。例如，在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是雙特異性抗體或其片段，其中(a)所述抗體或其片段的第一臂結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV，且包含上述抗體或其片段的結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的序列；且(b)所述抗體或其片段的第二臂結(jié)合磷脂，且包含上述抗體或其片段的結(jié)合磷脂的序列。例如，在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是雙特異性抗體或其片段，包含(a)第一臂，其為天然存在的抗體B4的臂；和(b)第二臂，其為天然存在的抗體C2的臂。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體，其包含(a)如上所述的結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV和磷脂的雙特異性抗體或其片段；和(b)補(bǔ)體活性的抑制劑(諸如MAp44多肽或其片段)。應(yīng)當(dāng)理解，本文描述的構(gòu)建體可以用于本發(fā)明中描述的任何方法。MAp44構(gòu)建體本文所述的方法包括施用MAp44構(gòu)建體。本申請(qǐng)還提供了新型MAp44構(gòu)建體(諸如本文所述的新型MAp44片段和/或新型靶向部分-MAp44融合構(gòu)建體)。在本部分中詳細(xì)描述了MAp44構(gòu)建體，并且本文部分中描述的任何構(gòu)建體可用于本發(fā)明中描述的任何方法。本申請(qǐng)還提供了通過向個(gè)體施用本文所述的構(gòu)建體中的任一種而將本文公開的MAp44多肽或其片段中的任一種遞送至個(gè)體的方法。本申請(qǐng)還提供了通過向個(gè)體施用本文所述的構(gòu)建體中的任一種而將本文公開的MAp44多肽或其片段中的任一種遞送至補(bǔ)體活化的部位、組織損傷(諸如非缺血性組織損傷)的部位或補(bǔ)體相關(guān)疾病的部位的方法。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含含有SEQIDNO:44的序列的MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段長(zhǎng)度為約50至約100個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約100至約150個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約150至約200個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約200至約250個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約250至約300個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為約300至約350個(gè)氨基酸，或長(zhǎng)度為約350至約380個(gè)氨基酸，且包含SEQIDNO:44中發(fā)現(xiàn)的連續(xù)序列。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含SEQIDNO:44的氨基酸1-137、氨基酸1-176、氨基酸1-296或氨基酸1-363。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段長(zhǎng)度為少于約100個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為少于約200個(gè)氨基酸，長(zhǎng)度為少于約250個(gè)氨基酸，或長(zhǎng)度為少于約300個(gè)氨基酸。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段包含選自SEQIDNO:46、48、50和52的一種或多種序列。在一些實(shí)施方案中，所述MAp44多肽或其片段與SEQIDNO:44至少約50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%同源。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段(以下也稱為“靶向部分”)和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:1的序列、SEQIDNO:2的序列或SEQIDNO:3的序列；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:4的序列、SEQIDNO:5的序列或SEQIDNO:6的序列。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:7的序列、SEQIDNO:8的序列或SEQIDNO:9的序列；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:10的序列、SEQIDNO:11的序列或SEQIDNO:12的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:1的序列、SEQIDNO:2的序列和SEQIDNO:3的序列。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:7的序列、SEQIDNO:8的序列和SEQIDNO:9的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:4的序列、SEQIDNO:5的序列和SEQIDNO:6的序列。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:10的序列、SEQIDNO:11的序列和SEQIDNO:12的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:1的序列、SEQIDNO:2的序列和SEQIDNO:3的序列；和(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:4的序列、SEQIDNO:5的序列和SEQIDNO:6的序列。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:7的序列、SEQIDNO:8的序列和SEQIDNO:9的序列；和(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:10的序列、SEQIDNO:11的序列和SEQIDNO:12的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:1的輕鏈CDR1；(ii)SEQIDNO:2的輕鏈CDR2；(iii)SEQIDNO:3的輕鏈CDR3；(iv)SEQIDNO:4的重鏈CDR1；(v)SEQIDNO:5的重鏈CDR2；和(vi)SEQIDNO:6的重鏈CDR3。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:7的輕鏈CDR1；(ii)SEQIDNO:8的輕鏈CDR2；(iii)SEQIDNO:9的輕鏈CDR3；(iv)SEQIDNO:10的重鏈CDR1；(v)SEQIDNO:11的重鏈CDR2；和(vi)SEQIDNO:12的重鏈CDR3。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含SEQIDNO:13的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含SEQIDNO:15的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含SEQIDNO:14的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含SEQIDNO:16的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:13的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和(ii)SEQIDNO:15的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:14的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和(ii)SEQIDNO:16的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或片段是具有SEQIDNO:17的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或片段是具有SEQIDNO:18的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:25的序列、SEQIDNO:26的序列或SEQIDNO:27的序列；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列或SEQIDNO:30的序列。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:31的序列、SEQIDNO:32的序列或SEQIDNO:33的序列；和/或(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列或SEQIDNO:30的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面、基底膜(例如，布魯赫膜)上或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:25的序列、SEQIDNO:26的序列和SEQIDNO:27的序列。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:31的序列、SEQIDNO:32的序列和SEQIDNO:33的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面、基底膜(例如，布魯赫膜)上或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列和SEQIDNO:30的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面、基底膜(例如，布魯赫膜)上或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:25的序列、SEQIDNO:26的序列和SEQIDNO:27的序列；和(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列和SEQIDNO:30的序列。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)輕鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:31的序列、SEQIDNO:32的序列和SEQIDNO:33的序列；和(ii)重鏈可變結(jié)構(gòu)域，其包含SEQIDNO:28的序列、SEQIDNO:29的序列和SEQIDNO:30的序列。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面、基底膜(例如，布魯赫膜)上或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:25的輕鏈CDR1；(ii)SEQIDNO:26的輕鏈CDR2；(iii)SEQIDNO:27的輕鏈CDR3；(iv)SEQIDNO:28的重鏈CDR1；(v)SEQIDNO:29的重鏈CDR2；和(vi)SEQIDNO:30的重鏈CDR3。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:31的輕鏈CDR1；(ii)SEQIDNO:32的輕鏈CDR2；(iii)SEQIDNO:33的輕鏈CDR3；(iv)SEQIDNO:28的重鏈CDR1；(v)SEQIDNO:29的重鏈CDR2；和(vi)SEQIDNO:30的重鏈CDR3。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面、基底膜(例如，布魯赫膜)上或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含SEQIDNO:34的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含SEQIDNO:35的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面、基底膜(例如，布魯赫膜)上或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:34的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和(ii)SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或其片段包含：(i)SEQIDNO:35的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域；和(ii)SEQIDNO:36的重鏈可變結(jié)構(gòu)域。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面、基底膜(例如，布魯赫膜)上或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或片段是具有SEQIDNO:37的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，提供了構(gòu)建體(或包含所述構(gòu)建體的組合物諸如藥物組合物，或用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的載體)，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂(諸如PE、CL、MDA和/或PC)；和(b)MAp44多肽或其片段，其中所述抗體或片段是具有SEQIDNO:38的序列的scFv。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面、基底膜(例如，布魯赫膜)上或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是多價(jià)抗體或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是雙特異性抗體或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV和磷脂的雙特異性抗體或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是雙特異性抗體或其片段，其中所述抗體或其片段的第一臂結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV，且所述抗體或其片段的第二臂結(jié)合磷脂。例如，在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是雙特異性抗體或其片段，其中(a)所述抗體或其片段的第一臂結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV，且包含上述抗體或其片段的結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的序列；且(b)所述抗體或其片段的第二臂結(jié)合磷脂，且包含上述抗體或其片段的結(jié)合磷脂的序列。例如，在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分是雙特異性抗體或其片段，包含(a)第一臂，其為天然存在的抗體B4的臂；和(b)第二臂，其為天然存在的抗體C2的臂。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段直接鍵合、共價(jià)鍵合或可逆鍵合。本文使用的“靶向構(gòu)建體”是指包含“靶向部分”和MAp44多肽或其片段的非天然存在的分子。所述靶向部分能夠特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV或磷脂。所述靶向構(gòu)建體的靶向部分負(fù)責(zé)將分子靶向遞送至例如補(bǔ)體活化的部位。所述MAp44多肽或其片段負(fù)責(zé)治療活性，例如特異性抑制補(bǔ)體活化。所述靶向構(gòu)建體分子的靶向部分和MAp44多肽或其片段可以通過本領(lǐng)域已知的任何方法連接在一起，只要維持兩個(gè)部分的所需功能。因此，本文所述的靶向構(gòu)建體通常具有結(jié)合由本文所述的抗體識(shí)別的表位并發(fā)揮治療活性的雙重功能。“單克隆C2抗體或B4抗體的表位”是指結(jié)合天然存在的C2或B4抗體的任何分子，其包括結(jié)合C2或B4抗體的表位，其結(jié)合親和力為天然結(jié)合C2或B4抗體的表位的約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100％中的任一種。結(jié)合親和力可以通過本領(lǐng)域已知的任何方法確定，包括例如表面等離子共振、量熱法滴定、ELISA和流式細(xì)胞術(shù)。在一些實(shí)施方案中，本文所述的靶向構(gòu)建體通常能夠抑制補(bǔ)體活化(例如抑制凝集素途徑的活化)。所述靶向構(gòu)建體可以是比如本文所述的MAp44多肽或其片段更有效的補(bǔ)體抑制劑。例如，在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體的補(bǔ)體抑制活性為如本文所述的MAp44多肽或其片段的補(bǔ)體抑制活性的約1.5、2、2.5、3、3.5、4、5、6、7、8、9、10、12、14、16、18、20、25、30、40或更多倍中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體的EC50小于約100nM、90nM、80nM、70nM、60nM、50nM、40nM、30nM、20nM或10nM中的任一種，包括端值，包括這些數(shù)字之間的任何值。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體的EC50為約5至60nM，包括例如8至50nM、8至20nM、10至40nM和20至30nM中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體的補(bǔ)體抑制活性為如本文所述的MAp44多肽或其片段的補(bǔ)體抑制活性的約50％、60％、70％、80％、90％或100％中的任一種。補(bǔ)體抑制可以基于本領(lǐng)域已知的任何方法來評(píng)估，包括例如體外酵母聚糖測(cè)定，用于裂解紅細(xì)胞的測(cè)定，抗體或免疫復(fù)合物活化測(cè)定，旁路途徑活化測(cè)定和甘露聚糖活化測(cè)定。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體是融合蛋白。本文使用的“融合蛋白”是指與彼此可操作連接的兩個(gè)或更多個(gè)肽、多肽或蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段與彼此直接融合。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段通過氨基酸接頭序列連接。接頭序列的實(shí)例是本領(lǐng)域已知的，且包括例如(Gly4Ser)、(Gly4Ser)2、(Gly4Ser)3、(Gly3Ser)4、(SerGly4)、(SerGly4)2、(SerGly4)3和(SerGly4)4。連接序列還可以包含在補(bǔ)體因子的不同結(jié)構(gòu)域之間發(fā)現(xiàn)的“天然”連接序列。靶向部分和MAp44多肽或其片段在融合蛋白中的順序可以變化。例如，在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分的C末端與靶向構(gòu)建體的MAp44多肽或其片段的N末端(直接或間接)融合。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分的N末端與靶向構(gòu)建體的MAp44多肽或其片段的C末端(直接或間接)融合。在一些實(shí)施方案中，靶向構(gòu)建體的靶向部分由包含SEQIDNO:19-24和57中的任一個(gè)的核酸序列的多核苷酸編碼。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體分子由多核苷酸編碼，所述多核苷酸包含與SEQIDNO:19-24和57中的任一個(gè)的核酸序列至少約50%、60%、70%、80%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99％相同的核酸序列。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體包含經(jīng)由化學(xué)交聯(lián)劑連接的靶向部分和MAp44多肽或其片段。兩個(gè)部分的連接可以發(fā)生在位于兩個(gè)部分上的反應(yīng)性基團(tuán)上?？梢允褂媒宦?lián)劑靶向的反應(yīng)性基團(tuán)包括伯胺、巰基、羰基、碳水化合物和羧酸或可以添加至蛋白的活性基團(tuán)?；瘜W(xué)接頭的實(shí)例是本領(lǐng)域公知的，包括但不限于雙馬來酰亞胺基己烷，馬來酰亞胺基苯甲?；?N-羥基琥珀酰亞胺酯，NHS-酯-馬來酰亞胺交聯(lián)劑諸如SPDP，碳二亞胺，戊二醛，MBS，磺基-MBS，SMPB，磺基-SMPB，GMBS，磺基-GMBS，EMCS，磺基-EMCS，亞胺酯交聯(lián)劑諸如DMA，DMP，DMS，DTBP，EDC和DTME。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段非共價(jià)連接。例如，兩個(gè)部分可以通過兩個(gè)相互作用橋聯(lián)蛋白(諸如生物素和鏈霉抗生物素蛋白)結(jié)合在一起，每個(gè)相互作用橋聯(lián)蛋白與靶向部分或MAp44多肽或其片段連接。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體的靶向部分(例如，直接或通過接頭)連接至MAp44多肽或其片段的氨基末端。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體的靶向部分(例如，直接或通過接頭)連接至MAp44多肽或其片段的羧基末端。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體的靶向部分的輕鏈與至少一個(gè)MAp44多肽或其片段連接，且所述重鏈與至少一個(gè)MAp44多肽或其片段連接。兩個(gè)或更多個(gè)MAp44多肽或其片段可以是相同或不同的。例如，在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體包含本文所述的靶向部分的Fab片段，其中：(i)Fab片段的輕鏈(在其C末端)與本文所述的MAp44多肽或其片段連接；且(ii)Fab片段的重鏈(在其C末端)與本文所述的相同或不同的MAp44多肽或其片段連接?？梢灶A(yù)期兩條鏈的適當(dāng)配對(duì)作為Fab的固有性質(zhì)發(fā)生。所述MAp44多肽或其片段和Fab的輕鏈或重鏈可以直接或借助接頭序列(諸如本文所述的那些中的任一種)連接在一起。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體包含本文所述的兩個(gè)或更多個(gè)(相同或不同)靶向部分。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體包含本文所述的兩個(gè)或更多個(gè)(相同或不同)MAp44多肽或其片段。這兩個(gè)或更多個(gè)靶向部分或MAp44多肽或其片段可以與彼此串聯(lián)連接(諸如融合)。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體包含靶向部分和兩個(gè)或更多個(gè)(諸如三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)或更多個(gè))MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段和兩個(gè)或更多個(gè)(諸如三個(gè)、四個(gè)、五個(gè)或更多個(gè))靶向部分。在一些實(shí)施方案中，所述靶向構(gòu)建體包含兩個(gè)或更多個(gè)靶向部分和兩個(gè)或更多個(gè)MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，提供了分離的構(gòu)建體。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體形成二聚體或多聚體。所述靶向構(gòu)建體中的MAp44多肽或其片段和靶向部分可以來自相同物種(諸如人或小鼠)或來自不同物種。構(gòu)建體的變體還涵蓋了構(gòu)建體的變體。本文所述的構(gòu)建體的變體可以是：(i)其中靶向部分和/或MAp44多肽或其片段的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基被保守或非保守氨基酸殘基(優(yōu)選保守氨基酸殘基)取代且此類取代的氨基酸殘基可以是或可以不是由遺傳密碼編碼的氨基酸殘基的變體；(ii)靶向和/或MAp44多肽或其片段中的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基包括取代基的變體，(iii)其中所述構(gòu)建體與另一種化合物諸如增加構(gòu)建體的半衰期的化合物(例如聚乙二醇)融合的變體，(iv)其中額外的氨基酸(諸如前導(dǎo)序列或分泌序列或用于純化構(gòu)建體的序列)與構(gòu)建體(諸如靶向部分或MAp44多肽或其片段)融合的變體，或(v)其中構(gòu)建體與較大多肽(即人白蛋白、抗體或Fc)融合以增加效果持續(xù)時(shí)間的變體。根據(jù)本文的教導(dǎo)，這些變體被認(rèn)為在本領(lǐng)域技術(shù)人員的范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，構(gòu)建體的變體含有在一個(gè)或多個(gè)預(yù)測(cè)的、優(yōu)選非必需氨基酸殘基處進(jìn)行的保守氨基酸取代(下文進(jìn)一步定義)?！胺潜匦琛卑被釟埢菑牡鞍椎囊吧托蛄懈淖兌桓淖兩锘钚缘臍埢?，而“必需”氨基酸殘基是生物活性所需的?！氨Ｊ匕被崛〈笔瞧渲邪被釟埢痪哂邢嗨苽?cè)鏈的氨基酸殘基替代的取代。在蛋白中通常發(fā)現(xiàn)20種氨基酸。基于它們側(cè)鏈的化學(xué)性質(zhì)，那些氨基酸可以分成九個(gè)類別或組。在同一類別或組內(nèi)一種氨基酸殘基對(duì)另一種氨基酸殘基的取代在本文中稱為“保守”取代。通?？梢栽诘鞍字羞M(jìn)行保守氨基酸取代而不顯著改變蛋白的構(gòu)象或功能。一種氨基酸殘基對(duì)來自不同類別或組的另一種氨基酸殘基的取代在本文中稱為“非保守”取代。相反，非保守氨基酸取代傾向于破壞蛋白的構(gòu)象和功能。本領(lǐng)域中已經(jīng)定義了具有相似側(cè)鏈的氨基酸殘基家族。這些家族包括具有堿性側(cè)鏈(例如賴氨酸、精氨酸、組氨酸)、酸性側(cè)鏈(例如天冬氨酸、谷氨酸)、不帶電荷的極性側(cè)鏈(例如甘氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸)、非極性側(cè)鏈(例如丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸)、β-支鏈側(cè)鏈(例如蘇氨酸、纈氨酸、異亮氨酸)和芳族側(cè)鏈(例如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸)的氨基酸。(參見下表1。)表1：氨基酸分類的實(shí)例小/脂族殘基：Gly,Ala,Val,Leu,Ile環(huán)狀氨基酸：Pro含羥基殘基：Ser,Thr酸性殘基：Asp,Glu酰胺殘基：Asn,Gln堿性殘基：Lys,Arg咪唑殘基：His芳族殘基：Phe,Tyr,Trp含硫殘基：Met,Cys在一些實(shí)施方案中，保守氨基酸取代包括用甘氨酸(G)、丙氨酸(A)、異亮氨酸(I)、纈氨酸(V)和亮氨酸(L)中的任一種取代這些脂族氨基酸中的任何其它氨基酸；用絲氨酸(S)取代蘇氨酸(T)，反之亦然；用天冬氨酸(D)取代谷氨酸(E)，反之亦然；用谷氨酰胺(Q)取代天冬酰胺(N)，反之亦然；用賴氨酸(K)取代精氨酸(R)，反之亦然；用苯丙氨酸(F)、酪氨酸(Y)和色氨酸(W)取代這些芳族氨基酸中的任何其它氨基酸；且用甲硫氨酸(M)取代半胱氨酸(C)，反之亦然。其它取代也可被認(rèn)為是保守的，這取決于特定氨基酸的環(huán)境及其在蛋白的三維結(jié)構(gòu)中的作用。例如，甘氨酸(G)和丙氨酸(A)可以經(jīng)常是可互換的，丙氨酸(A)和纈氨酸(V)也是如此。相對(duì)疏水的甲硫氨酸(M)通常可以與亮氨酸和異亮氨酸互換，有時(shí)與纈氨酸互換。賴氨酸(K)和精氨酸(R)在其中氨基酸殘基的顯著特征是其電荷且這兩個(gè)氨基酸殘基的不同pK不顯著的位置中經(jīng)常是可互換的。其它變化在特定環(huán)境中可以被認(rèn)為是“保守的”(參見，例如，Biochemistryatpp.13-15，第2版，LubertStryer編(StanfordUniversity);Henikoff等人,Proc.Nat’lAcad.Sci.USA(1992)89:10915-10919;Lei等人,J.Biol.Chem.(1995)270(20):11882-11886)。引入構(gòu)建體的靶向部分和/或MAp44多肽或其片段中的氨基酸取代以改善構(gòu)建體的功能性。例如，可以將氨基酸取代引入靶向構(gòu)建體的靶向部分，以增加靶向部分與其配體的結(jié)合親和力，增加靶向構(gòu)建體與其配體的結(jié)合特異性，改善靶向構(gòu)建體至所需位點(diǎn)的靶向，增加靶向構(gòu)建體的二聚化或多聚化，和改善靶向構(gòu)建體的藥代動(dòng)力學(xué)。類似地，可以將氨基酸取代引入構(gòu)建體的MAp44多肽或其片段，以增加構(gòu)建體分子的功能性且改善構(gòu)建體的藥代動(dòng)力學(xué)。在一些實(shí)施方案中，將構(gòu)建體與另一種化合物諸如增加構(gòu)建體的半衰期和/或降低構(gòu)建體的潛在免疫原性的化合物(例如聚乙二醇，“PEG”)融合。PEG可用于為構(gòu)建體賦予水溶性、大小、緩慢腎清除率和降低的免疫原性。參見，例如，美國專利號(hào)6,214,966。在PEG化的情況下，本文所述的構(gòu)建體與PEG的融合可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何方法完成。例如，PEG化可以通過如下完成：首先將半胱氨酸突變引入靶向部分或MAp44多肽或其片段，隨后用PEG-馬來酰亞胺進(jìn)行位點(diǎn)特異性衍生化?？梢詫腚装彼崽砑又翗?gòu)建體的C末端。參見，例如，Tsutsumi等人(2000)Proc.Natl.Acad.Sci.USA97(15):8548-8553?？蓪?duì)構(gòu)建體進(jìn)行的另一修飾包括生物素化。在某些情況下，使構(gòu)建體生物素化、使得其可以容易地與鏈霉抗生物素蛋白反應(yīng)是有用的。蛋白生物素化的方法是本領(lǐng)域公知的。另外，硫酸軟骨素可以與構(gòu)建體連接。在一些實(shí)施方案中，將構(gòu)建體與另一部分融合，其進(jìn)一步提高構(gòu)建體的靶向效率。例如，包含B4抗體的構(gòu)建體可以與例如C2抗體或具有結(jié)合或以其它方式附著于血管內(nèi)皮細(xì)胞的能力的另一抗體(稱為“血管內(nèi)皮靶向氨基酸配體”)融合。示例性血管內(nèi)皮靶向配體包括但不限于VEGF、FGF、整聯(lián)蛋白、纖連蛋白、I-CAM、PDGF或針對(duì)在血管內(nèi)皮細(xì)胞表面上表達(dá)的分子的抗體。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體與細(xì)胞間粘附分子的配體綴合(諸如融合)。例如，所述構(gòu)建體分子可以與結(jié)合細(xì)胞間粘附分子的一個(gè)或多個(gè)碳水化合物部分綴合。所述碳水化合物部分促進(jìn)構(gòu)建體分子定位至損傷部位。所述碳水化合物部分可以借助細(xì)胞外事件諸如化學(xué)或酶連接附接至構(gòu)建體分子，或者可以是通過表達(dá)適當(dāng)酶實(shí)現(xiàn)的細(xì)胞內(nèi)加工事件的結(jié)果。在一些實(shí)施方案中，所述碳水化合物部分結(jié)合特定類別的粘附分子諸如整聯(lián)蛋白或選擇素，包括E-選擇素、L-選擇素或P-選擇素。在一些實(shí)施方案中，所述碳水化合物部分包含N-連接的碳水化合物，例如復(fù)合型，包括巖藻糖基化和唾液酸化的碳水化合物。在一些實(shí)施方案中，所述碳水化合物部分與路易斯X抗原、例如唾液酸化的路易斯X抗原相關(guān)。對(duì)于眼病諸如AMD的治療，所述構(gòu)建體可以與識(shí)別脈絡(luò)膜小疣的表位的抗體綴合(諸如融合)。也可以使用其它靶向分子諸如小靶向肽。構(gòu)建體的其它修飾包括例如糖基化、乙?；⒘姿峄?、酰胺化、通過已知的保護(hù)/封閉基團(tuán)的衍生化等。所述構(gòu)建體可以包括添加免疫活性結(jié)構(gòu)域，諸如抗體表位或其它標(biāo)簽，以促進(jìn)多肽的靶向或純化。使用6xHis和GST(谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶)作為標(biāo)簽是公知的。在融合連接處或附近包括切割位點(diǎn)將促進(jìn)純化后從構(gòu)建體去除外來多肽?？梢园ㄔ跇?gòu)建體中的其它氨基酸序列包括功能結(jié)構(gòu)域，諸如來自酶的活性位點(diǎn)，諸如水解酶、糖基化結(jié)構(gòu)域和細(xì)胞靶向信號(hào)。構(gòu)建體的變體包括具有與本文所述的構(gòu)建體的氨基酸序列足夠相似的氨基酸序列的多肽。術(shù)語“足夠相似”意指第一氨基酸序列相對(duì)于第二氨基酸序列含有足夠或最小數(shù)目的相同或等同的氨基酸殘基，使得第一和第二氨基酸序列具有共同的結(jié)構(gòu)域和/或共同功能活性。例如，含有至少約45％、優(yōu)選約75％至98％相同的共同結(jié)構(gòu)域的氨基酸序列在本文中被定義為足夠相似的。變體包括由在嚴(yán)格條件下與本發(fā)明的多核苷酸或其互補(bǔ)物雜交的多核苷酸編碼的構(gòu)建體的變體。此類變體通常保留本發(fā)明的構(gòu)建體的功能活性。多核苷酸片段的文庫可用于產(chǎn)生多樣化片段群體用于篩選和隨后的選擇。例如，片段文庫可以通過如下產(chǎn)生：在其中每個(gè)分子僅出現(xiàn)約一次切口的條件下用核酸酶處理多核苷酸的雙鏈PCR片段，使雙鏈DNA變性，使DNA復(fù)性以形成雙鏈DNA，其可以包括來自不同切口產(chǎn)物的有義/反義對(duì)，通過用S1核酸酶處理來從重新形成的雙鏈體去除單鏈部分，和將所得片段文庫連接至表達(dá)載體中。通過該方法，技術(shù)人員可以得到編碼本發(fā)明的構(gòu)建體的各種大小的N末端和內(nèi)部片段的表達(dá)文庫。變體包括由于誘變而氨基酸序列不同的構(gòu)建體。此外，構(gòu)建體的生物等效類似物也可以通過在靶向部分和/或MAp44多肽或其片段中的殘基或序列上進(jìn)行各種取代來構(gòu)建。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體在其N末端融合至信號(hào)肽。此類信號(hào)肽可用于構(gòu)建體的分泌。合適的信號(hào)肽包括例如CD5蛋白的信號(hào)肽(諸如人CD5蛋白的信號(hào)肽，MPMGSLQPLATLYLLGMLVAS，SEQIDNO:54)。在一些實(shí)施方案中，使用CR2蛋白的信號(hào)肽。例如，在一些實(shí)施方案中，使用人CR2蛋白的信號(hào)肽(MGAAGLLGVFLALVAPG，SEQIDNO:55或MGAAGLLGVFLALVAPGVLG，SEQIDNO:56)。構(gòu)建體產(chǎn)生方法可以使用分子生物學(xué)和蛋白化學(xué)領(lǐng)域中已知的多種技術(shù)來產(chǎn)生本文所述的構(gòu)建體。例如，可以將編碼本文所述的構(gòu)建體的核酸插入表達(dá)載體中，所述表達(dá)載體含有轉(zhuǎn)錄和翻譯調(diào)控序列，其包括，例如，啟動(dòng)子序列、核糖體結(jié)合位點(diǎn)、轉(zhuǎn)錄起始和終止序列、翻譯起始和終止序列、轉(zhuǎn)錄終止子信號(hào)、多聚腺苷酸化信號(hào)和增強(qiáng)子或激活子序列。所述調(diào)控序列包括啟動(dòng)子和轉(zhuǎn)錄起始和終止序列。此外，所述表達(dá)載體可以包括多于一個(gè)復(fù)制系統(tǒng)，以便它可以保持在兩種不同的生物體中，例如，在用于表達(dá)的哺乳或昆蟲細(xì)胞中以及在用于克隆和擴(kuò)增的原核宿主中。幾種可能的載體系統(tǒng)可用于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中從核酸表達(dá)構(gòu)建體。一類載體依賴于所需基因序列整合進(jìn)宿主細(xì)胞基因組中。通過同時(shí)引入藥物抗性基因諸如大腸桿菌gpt(Mulligan和Berg(1981)ProcNatlAcadSciUSA78:2072)或Tn5neo(Southern和Berg(1982)MolApplGenet1:327)，可以選擇具有穩(wěn)定整合的DNA的細(xì)胞。可以將可選擇的標(biāo)記基因連接到待表達(dá)的DNA基因序列，或者通過共轉(zhuǎn)染(Wigler等人(1979)Cell16:77)引入相同的細(xì)胞。第二類載體利用將自主復(fù)制能力賦予染色體外質(zhì)粒的DNA元件。這些載體可來源于動(dòng)物病毒，諸如牛乳頭瘤病毒(Sarver等人(1982)ProcNatlAcadSciUSA,79:7147)、多瘤病毒(Deans等人(1984)ProcNatlAcadSciUSA81:1292)或SV40病毒(Lusky和Botchan(1981)Nature293:79)?？梢砸赃m合于隨后的核酸表達(dá)的方式將表達(dá)載體引入細(xì)胞中。引入的方法很大程度上取決于如下討論的靶向的細(xì)胞類型。示例性方法包括CaPO4沉淀、脂質(zhì)體融合、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染(lipofectin)、電穿孔、病毒感染、葡聚糖介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染、聚凝胺介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染、原生質(zhì)體融合和直接顯微注射。適于表達(dá)構(gòu)建體的宿主細(xì)胞包括酵母、細(xì)菌、昆蟲、植物以及上文所述的哺乳動(dòng)物細(xì)胞。感興趣的是細(xì)菌諸如大腸桿菌、真菌諸如釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)和巴斯德畢赤酵母(Pichiapastoris)、昆蟲細(xì)胞(諸如SF9)、哺乳動(dòng)物細(xì)胞系(例如，人細(xì)胞系)、以及原代細(xì)胞系(例如，原代哺乳動(dòng)物細(xì)胞)。在一些實(shí)施方案中，可以在中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞或合適的骨髓瘤細(xì)胞系諸如(NS0)中表達(dá)所述構(gòu)建體。合適的細(xì)胞系還包括，例如，BHK-21(幼倉鼠腎)細(xì)胞；293(人胚腎)細(xì)胞；HMEpC(人乳腺上皮細(xì)胞)；3T3(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)細(xì)胞。靶向部分和一個(gè)或多個(gè)MAp44多肽或其片段可以任選地直接與彼此連接，或可以任選地通過接頭連接在一起。當(dāng)靶向部分和MAp44多肽或其片段直接連接時(shí)，制備雜合載體，其中使用已知的科學(xué)方法將編碼靶向和MAp44多肽或其片段的DNA本身與彼此直接連接。當(dāng)使用接頭部分時(shí)，制備雜合載體，其中編碼靶向部分的DNA與編碼接頭的一個(gè)末端的DNA連接；編碼MAp44多肽或其片段的DNA與接頭的另一末端連接。以合適的方向進(jìn)行此類連接的方法是已知的。此類連接可以串聯(lián)或作為三路連接來進(jìn)行?？梢猿洚?dāng)本發(fā)明中的接頭序列的序列的實(shí)例包括長(zhǎng)度約2至約16個(gè)氨基酸的短肽。可用作本發(fā)明中的接頭的肽序列是(Gly-Ser)n，其中n=1至8；(GlyGlyGlySer)n，其中n=1至4；(GlySerSerGly)n，其中n=1至4?？捎米鞅景l(fā)明中的接頭序列的其它實(shí)例包括來自以下補(bǔ)體相關(guān)蛋白中的一種或多種的一個(gè)或多個(gè)短保守區(qū)(SCR)結(jié)構(gòu)域：因子H；補(bǔ)體受體1；補(bǔ)體受體2；因子B；DAF；和其它。在一些實(shí)施方案中，本文所述的構(gòu)建體可以在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（例如，轉(zhuǎn)基因哺乳動(dòng)物）中表達(dá)并從其中純化。例如，本文所述的構(gòu)建體可以在轉(zhuǎn)基因非人哺乳動(dòng)物(例如，嚙齒動(dòng)物、綿羊或山羊)中產(chǎn)生，并從乳液中分離，描述于，例如，Houdebine(2002)CurrOpinBiotechnol13(6):625-629;vanKuik-Romeijn等人(2000)TransgenicRes9(2):155-159;和Pollock等人(1999)JImmunolMethods231(1-2):147-157。用于在哺乳動(dòng)物乳產(chǎn)物中產(chǎn)生蛋白的其它方法描述于，例如，美國專利申請(qǐng)公開號(hào)200600105347和20040006776以及美國專利號(hào)7,045,676。通過在足以允許所述構(gòu)建體表達(dá)的條件和一定時(shí)間下培養(yǎng)以含有編碼所述構(gòu)建體的核酸的表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的??宿主細(xì)胞而從細(xì)胞產(chǎn)生本文所述的構(gòu)建體。此類蛋白表達(dá)的條件將隨著表達(dá)載體和宿主細(xì)胞的選擇而變化，并且本領(lǐng)域技術(shù)人員將通過常規(guī)實(shí)驗(yàn)容易確定。例如，可以從包涵體重新折疊大腸桿菌中表達(dá)的多肽（見，例如，Hou等人(1998)Cytokine10:319-30）。細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)及其使用方法是本領(lǐng)域公知的(參見，CurrentProtocolsinMolecularBiology,Wiley&Sons，和MolecularCloning--ALaboratoryManual--第三版,ColdSpringHarborLaboratoryPress,NewYork(2001))。密碼子、合適的表達(dá)載體和合適的宿主細(xì)胞的選擇將根據(jù)多種因素而變化，并且可以很容易根據(jù)需要而優(yōu)化。本文所述的構(gòu)建體可以在哺乳細(xì)胞或其它表達(dá)系統(tǒng)包括但不限于酵母、桿狀病毒和體外表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)（參見，例如，Kaszubska等人.(2000)ProteinExpressionandPurification18:213-220）。表達(dá)之后，可以分離所述構(gòu)建體。如應(yīng)用于本文所述的任何蛋白（例如，構(gòu)建體、靶向部分和/或MAp44多肽或其片段）的術(shù)語“純化的”或“分離的”是指已經(jīng)從表達(dá)蛋白的原核生物中與之天然相伴的組分（例如，蛋白或其它天然存在的生物或有機(jī)分子）（例如，其它蛋白、脂質(zhì)和核酸）分離或純化的多肽。通常，當(dāng)多肽構(gòu)成樣品中的總蛋白至少60（例如，至少65、70、75、80、85、90、92、95、97或99）重量％時(shí)，純化該多肽?？梢愿鶕?jù)何種其它組分存在于樣品中而以本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種方式分離或純化本文所述的構(gòu)建體。標(biāo)準(zhǔn)的純化方法包括電泳、分子、免疫學(xué)和色譜技術(shù)，包括離子交換、疏水性、親和力和反相HPLC色譜。例如，可以使用標(biāo)準(zhǔn)抗融構(gòu)建體抗體親和柱純化構(gòu)建體。超濾和滲濾技術(shù)，連同蛋白濃縮，也是有用的。參見，例如，Scopes(1994)“ProteinPurification,3rdedition,”Springer-Verlag,NewYorkCity,NewYork。必要的純化程度將根據(jù)所需的用途而不同。在一些情況下，不必要純化其表達(dá)多肽。用于確定純化多肽的產(chǎn)率或純度的方法是本領(lǐng)域已知的，包括，例如，Bradford測(cè)定法、UV光譜學(xué)、縮二脲蛋白測(cè)定法、Lowry蛋白測(cè)定法、酰胺基黑蛋白測(cè)定法、高壓液相色譜（HPLC）、質(zhì)譜（MS）和凝膠電泳方法（例如，使用蛋白染色諸如考馬斯亮藍(lán)或膠體銀染色）。在一些實(shí)施方案中，可以使用本領(lǐng)域公知的化學(xué)方法，全部或部分地從頭合成本文所述的構(gòu)建體。例如，組分氨基酸序列可以通過固相技術(shù)合成，從樹脂切割下來，并通過制備型高效液相色譜進(jìn)行純化，隨后化學(xué)連接而形成所需多肽?？梢酝ㄟ^氨基酸分析或測(cè)序確認(rèn)合成肽的組成。一旦表達(dá)和/或純化，就可以使用體外或體內(nèi)測(cè)定法(諸如本文所述的任何測(cè)定)，測(cè)定本文所述的構(gòu)建體的多種所需性質(zhì)中的任一種。例如，可以測(cè)定本文所述的構(gòu)建體的抑制如本文所述的補(bǔ)體活性的能力。在一些實(shí)施方案中，可以從融合蛋白制備物去除內(nèi)毒素。用于從蛋白樣品中去除內(nèi)毒素的方法是本領(lǐng)域已知的。例如，可以用商業(yè)上獲得的試劑從蛋白樣品中去除內(nèi)毒素，所述試劑包括但不限于，ProteoSpin?內(nèi)毒素去除試劑盒(NorgenBiotekCorporation)、Detoxi-Gel內(nèi)毒素去除凝膠(ThermoScientific;PierceProteinResearchProducts)、MiraCLEAN?內(nèi)毒素去除試劑盒(Mirus)或Acrodisc?-Mustang?Emembrane(PallCorporation)。用于檢測(cè)和/或測(cè)量（純化之前和之后）樣品中存在的內(nèi)毒素的量的方法是本領(lǐng)域已知的，并且商業(yè)試劑盒是可以獲得的。例如，可以使用QCL-1000Chromogenic試劑盒(BioWhittaker)、基于鱟變形細(xì)胞溶解物(LAL)的試劑盒諸如從AssociatesofCapeCodIncorporated獲得的Pyrotell?、Pyrotell?-T、Pyrochrome?、Chromo-LAL和CSE試劑盒測(cè)定蛋白樣品中內(nèi)毒素的濃度。表達(dá)和純化之后，可以修飾本文所述的構(gòu)建體。所述修飾可以是共價(jià)或非共價(jià)修飾?？梢酝ㄟ^如下將此類修飾引入構(gòu)建體，例如，使靶向部分和/或MAp44多肽或其片段中的目標(biāo)氨基酸殘基與有機(jī)衍生試劑反應(yīng)，所述有機(jī)衍生試劑能夠與所選的側(cè)鏈或末端殘基反應(yīng)。可以使用多種標(biāo)準(zhǔn)中的任一種（包括，例如，本文所述的構(gòu)建體的結(jié)構(gòu)分析或氨基酸序列分析）選擇適于修飾的位點(diǎn)。在一些實(shí)施方案中，本文所述的構(gòu)建體可以與異源部分綴合。在其中異源部分是多肽的實(shí)施方案中，本文所述的構(gòu)建體和相應(yīng)的異源部分可以通過融合蛋白的方式連接。所述異源部分可以是，例如，異源多肽、治療劑(例如，毒素或藥物)或可檢測(cè)的標(biāo)記，諸如，但不限于，放射性標(biāo)記、酶學(xué)標(biāo)記、熒光標(biāo)記或發(fā)光標(biāo)記。合適的異源多肽包括，例如，用于純化構(gòu)建體的抗原性標(biāo)記(例如，F(xiàn)LAG、聚組氨酸、血凝素(HA)、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)或麥芽糖結(jié)合蛋白(MBP))。異源多肽還包括可用作診斷或可檢測(cè)標(biāo)記物的多肽，例如，熒光素酶、綠色熒光蛋白(GFP)或氯霉素乙酰轉(zhuǎn)移酶(CAT)。當(dāng)異源部分是多肽時(shí)，所述部分可被并入本文所述的構(gòu)建體中，產(chǎn)生融合蛋白。綴合物在一些實(shí)施方案中，通過將兩個(gè)獨(dú)立產(chǎn)生的多肽片段(例如，抗體(例如，B4或C2抗體的Fab片段)和補(bǔ)體調(diào)節(jié)多肽(例如，MAp44多肽或其片段))連接而產(chǎn)生本文所述的融合分子。在某些實(shí)施方案中，所述靶向部分通過賴氨酸、半胱氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或精氨酸氨基酸與MAp44多肽或其片段綴合。靶向部分可以通過如下與MAp44多肽或其片段綴合：例如包含巰基化的靶向部分和MAp44多肽或其片段的麥芽?；?活化的胺的反應(yīng)；EDC/NHS-活化的靶向部分和MAp44多肽或其片段的胺的反應(yīng)；或MAp44多肽或其片段的EDC/NHS-活化的羧酸和靶向部分的胺的反應(yīng)。在一些實(shí)施方案中，可以使用任何多種已知的化學(xué)交聯(lián)劑使兩個(gè)蛋白(例如，本文所述的構(gòu)建體和異源部分，或融合蛋白的兩個(gè)組成部分)化學(xué)交聯(lián)。此類交聯(lián)劑的實(shí)例是經(jīng)由包括“阻礙”二硫鍵的連接將兩個(gè)氨基酸殘基連接的交聯(lián)劑。在這些連接中，交聯(lián)單元內(nèi)的二硫鍵被保護(hù)(通過阻礙二硫鍵任一側(cè)上的基團(tuán))免于例如還原型谷胱甘肽或酶二硫鍵還原酶的還原作用。一種合適的試劑4-琥珀酰亞胺基氧基羰基-α-甲基-α(2-硫代吡啶)甲苯(SMPT)利用一個(gè)蛋白上的末端賴氨酸和另一個(gè)蛋白上的末端半胱氨酸而在兩個(gè)蛋白之間形成此類連接。也可以使用通過每個(gè)蛋白上不同偶聯(lián)部分進(jìn)行交聯(lián)的異雙功能試劑。其它可用的交聯(lián)劑包括，但不限于，連接2個(gè)氨基的試劑(例如，N-5-疊氮基-2-硝基苯甲?；趸牾啺?、連接2個(gè)巰基的試劑(例如，1,4-雙-馬來酰亞胺丁烷)、連接氨基和巰基的試劑(例如，m-馬來酰亞胺苯甲?；?N-羥基琥珀酰亞胺酯)、連接氨基和羧基的試劑(例如，4-[對(duì)疊氮基水楊基氨基]丁胺)和連接氨基和存在于精氨酸側(cè)鏈中的胍基的試劑(例如，對(duì)疊氮基苯基乙二醛一水合物)。在一些實(shí)施方案中，本文所述的融合蛋白可以含有異源部分，所述異源部分與所述融合蛋白化學(xué)連接。例如，在一些實(shí)施方案中，可以將本文所述的藥物、熒光標(biāo)記、順磁標(biāo)記、放射性標(biāo)記等直接綴合至構(gòu)建體和/或靶向部分的氨基酸骨架(例如，用于標(biāo)記的構(gòu)建體用于進(jìn)行體內(nèi)成像研究)。在一些實(shí)施方案中，例如，可以用提高抗體在循環(huán)中(例如，在血液、血清或其它組織中)的穩(wěn)定和/或駐留的部分修飾所述構(gòu)建體。例如，本文所述的構(gòu)建體是PEG化的，如描述于，例如，Lee等人(1999)BioconjugChem10(6):973-8;Kinstler等人(2002)AdvancedDrugDeliveriesReviews54:477-485;和Roberts等人(2002)AdvancedDrugDeliveryReviews54:459-476。所述穩(wěn)定部分可以將多肽的穩(wěn)定性或駐留提高至少1.5(例如，至少2、5、10、15、20、25、30、40或50或更多)倍。在一些實(shí)施方案中，本文所述的構(gòu)建體可以是糖基化的。在一些實(shí)施方案中，本文所述的構(gòu)建體可以進(jìn)行酶學(xué)或化學(xué)處理，或從細(xì)胞產(chǎn)生，使得所述構(gòu)建體、靶向部分和/或MAp44多肽或其片段糖基化降低或缺少糖基化。用于產(chǎn)生具有糖基化降低的多肽的方法是本領(lǐng)域已知的，并描述于，例如，美國專利號(hào)6,933,368;Wright等人(1991)EMBOJ10(10):2717-2723;和Co等人(1993)MolImmunol30:1361-1367。藥物組合物本文還提供了包含構(gòu)建體和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物，所述構(gòu)建體包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段。所述藥物組合物可適用于本文所述的各種施用模式，包括例如全身或局部施用。所述藥物組合物可以是滴眼劑、可注射溶液或適于吸入(通過口或鼻)或口服施用的形式。本文所述的藥物組合物可以包裝成單一單位劑量或多劑量形式。在一些實(shí)施方案中，藥物組合物含有包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段的構(gòu)建體和適于施用于人的藥學(xué)上可接受的載體。在一些實(shí)施方案中，藥物組合物含有包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段的構(gòu)建體和適于眼內(nèi)注射的藥學(xué)上可接受的載體。在一些實(shí)施方案中，藥物組合物含有包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段的構(gòu)建體和適于局部應(yīng)用于眼睛的藥學(xué)上可接受的載體。在一些實(shí)施方案中，藥物組合物含有包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段的構(gòu)建體和適于靜脈內(nèi)注射的藥學(xué)上可接受的載體。在一些實(shí)施方案中，藥物組合物含有包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段的構(gòu)建體和適于注射入動(dòng)脈(諸如腎動(dòng)脈)的藥學(xué)上可接受的載體。所述組合物通常被配制為無菌、基本等滲的，并且完全符合美國食品與藥品管理局的所有藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(GMP)規(guī)定。在一些實(shí)施方案中，所述組合物不含病原體。對(duì)于注射，所述藥物組合物可以是液體溶液的形式，例如，在生理學(xué)相容的緩沖液諸如漢克氏溶液或林格氏液中。此外，本文提供的藥物組合物可以是固體形式，并在即將使用前重新溶解或重懸浮。還包括凍干組合物。對(duì)于口服施用，所述藥物組合物可采取例如通過常規(guī)方式用藥學(xué)上可接受的賦形劑制備的片劑或膠囊的形式，所述藥學(xué)上可接受的賦形劑諸如粘合劑(例如，預(yù)膠化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)；填料(例如，乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)；潤(rùn)滑劑(例如，硬脂酸鎂、滑石或二氧化硅)；崩解劑(例如，馬鈴薯淀粉或羧基乙酸淀粉鈉)；或潤(rùn)濕劑(例如，十二烷基硫酸鈉)。用于口服施用的液體制劑可采用例如溶液、糖漿或懸液的形式，或者可將它們提供為干燥產(chǎn)品，在使用前用水或其它合適的媒介物復(fù)原?？赏ㄟ^常規(guī)方式用藥學(xué)上可接受的添加劑來制備此類液體制劑，所述藥學(xué)上可接受的添加劑諸如懸浮劑(例如，山梨醇糖漿、纖維素衍生物或氫化食用脂肪)；乳化劑(例如，卵磷脂或阿拉伯膠)；非水性媒介物(例如，油、油性酯、乙醇或分餾植物油)；和防腐劑(例如，對(duì)羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸丙酯或山梨酸)。所述制劑還可以適當(dāng)時(shí)含有緩沖鹽、調(diào)味劑、著色劑和甜味劑。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了含有包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段的構(gòu)建體和適于施用于眼睛的藥學(xué)上可接受的載體的組合物。此類藥物載體可以是無菌液體，諸如水和油，包括石油、動(dòng)物、植物或合成來源的那些，諸如花生油、大豆油、礦物油等。鹽水溶液和右旋糖水溶液、聚乙二醇(PEG)和甘油溶液也可以用作液體載體，特別是用于可注射溶液。合適的藥物賦形劑包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、大米、鈉狀態(tài)、甘油單硬脂酸酯、甘油、丙烯、水等。如果需要，所述藥物組合物還可以含有少量的潤(rùn)濕劑或乳化劑或pH緩沖劑。組合物的構(gòu)建體和其它組分可以包裹在聚合物或纖維蛋白膠中以提供構(gòu)建體的受控釋放。這些組合物可以采取溶液、懸浮液、乳液、軟膏、凝膠或其它固體或半固體組合物等的形式。所述組合物通常具有4.5至8.0的范圍內(nèi)的pH。所述組合物還必須配制成具有與眼睛和眼組織的眼房水相容的滲透壓值。此類滲透壓值將通常在約200至約400毫滲透壓摩爾/千克水(“mOsm/kg”)的范圍內(nèi)，但優(yōu)選為約300mOsm/kg。在一些實(shí)施方案中，根據(jù)常規(guī)程序?qū)⑺鼋M合物配制為適于靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)或玻璃體內(nèi)注射的藥物組合物。通常，用于注射的組合物是無菌等滲水性緩沖液中的溶液。如果需要，所述組合物還可以包括增溶劑和用于減少注射部位的疼痛的局部麻醉劑(諸如利諾卡因)。通常，將成分分別提供或在單位劑型中混合在一起，例如，作為表明活性劑的量的密封容器(諸如，安瓿或藥袋)中的干燥凍干粉或無水濃縮物。當(dāng)通過輸注施用所述組合物時(shí)，可以用含有無菌藥用級(jí)水或鹽水的輸液瓶來將其分散。當(dāng)通過注射施用所述組合物時(shí)，可以提供無菌注射用水或鹽水的安瓿，使得可以在施用前混合成分。所述組合物還可以包含其它成分，例如防腐劑、緩沖劑、張度劑、抗氧化劑和穩(wěn)定劑、非離子型潤(rùn)濕劑或澄清劑、增粘劑等。適合用于溶液種的防腐劑包括聚季銨鹽-1、苯扎氯銨、硫汞撒、氯丁醇、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、苯乙醇、乙二胺四乙酸二鈉、山梨酸、芐索氯銨等。通常(但非必需)，可以以0.001重量%至1.0重量%的水平采用此類防腐劑。合適的緩沖劑包括硼酸、碳酸氫鈉和碳酸氫鉀、硼酸鈉和硼酸鉀、碳酸鈉和碳酸鉀、醋酸鈉、磷酸氫鈉等，其量足以將pH維持在約pH6至pH8，優(yōu)選約pH7至pH7.5。合適的張度劑包括葡聚糖40、葡聚糖70、葡萄糖、甘油、氯化鉀、丙二醇、氯化鈉等，使得眼用溶液的氯化鈉當(dāng)量為0.9±0.2%。合適的抗氧化劑和穩(wěn)定劑包括亞硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉、硫脲等。合適的潤(rùn)濕劑和澄清劑包括聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20、泊洛沙姆282和泰洛沙泊。合適的粘度增強(qiáng)劑包括葡聚糖40、葡聚糖70、凝膠、甘油、羥乙基纖維素、羥甲基丙基纖維素、羊毛脂、甲基纖維素、礦物脂、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纖維素等?？善谕褂谜扯仍鰪?qiáng)劑以提供粘度大于簡(jiǎn)單水溶液的粘度的局部組合物，以增加靶組織對(duì)活性化合物的眼吸收或增加眼中的保留時(shí)間。此類粘度增強(qiáng)劑包括例如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它試劑。此類試劑通常以0.01重量％至2重量％的水平使用。在一些實(shí)施方案中，提供了用于遞送編碼包含構(gòu)建體的核苷酸的藥物組合物，所述構(gòu)建體包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段。用于基因療法的藥物組合物可以在可接受的稀釋劑中，或者可以包含其中嵌入基因遞送載體或化合物的緩釋基質(zhì)?；蛘?，當(dāng)完整的基因遞送系統(tǒng)可以從重組細(xì)胞例如逆轉(zhuǎn)錄病毒載體完整產(chǎn)生時(shí)，所述藥物組合物可以包含一種或多種產(chǎn)生基因遞送系統(tǒng)的細(xì)胞。在臨床環(huán)境中，可以通過多種方法中的任一種將基因治療劑的基因遞送系統(tǒng)引入受試者。例如，可以全身性引入基因遞送系統(tǒng)的藥物組合物，例如通過靜脈內(nèi)注射，并且靶細(xì)胞中的蛋白的特異性轉(zhuǎn)導(dǎo)主要發(fā)生于基因遞送載體提供的轉(zhuǎn)染的特異性、由于控制受體基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)序列而導(dǎo)致的細(xì)胞類型或組織類型表達(dá)或其組合。在其它實(shí)施方案中，重組基因的初始遞送更受限制，其中引入動(dòng)物中是相當(dāng)局部的。例如，基因遞送載體可以通過導(dǎo)管（參見美國專利5,328,470）或通過立體定向注射（Chen等人(1994),Proc.Natl.Acad.Sci.,USA91:3054-3057）引入。編碼構(gòu)建體的多核苷酸可以在基因療法構(gòu)建體中使用所述技術(shù)（Dev等人(1994),CancerTreat.Rev.20:105-115）通過電穿孔來遞送。在一些實(shí)施方案中，提供了用于向眼睛進(jìn)行基因遞送的藥物組合物?？捎糜趦?chǔ)存和/或遞送表達(dá)載體的眼科溶液已經(jīng)公開于例如WO03077796A2中。治療疾病的方法在一些實(shí)施方案中，本申請(qǐng)?zhí)峁┝嗽趥€(gè)體中抑制補(bǔ)體活化、抑制炎癥或治療炎性疾病的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，通過注射，諸如腸胃外、靜脈內(nèi)、皮下、眼內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)或肌內(nèi)注射，施用所述組合物。在一些實(shí)施方案中，提供了將MAp44多肽或其片段遞送至個(gè)體中的組織損傷(諸如非缺血性組織損傷)的部位的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體還包含靶向部分(諸如抗體)。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體中抑制補(bǔ)體活化、抑制炎癥或治療炎性疾病的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)MAp44多肽或其片段；和(b)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV或磷脂。在一些實(shí)施方案中，通過注射，諸如腸胃外、靜脈內(nèi)、皮下、眼內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)或肌內(nèi)注射，施用所述組合物。在一些實(shí)施方案中，提供了將MAp44多肽或其片段遞送至個(gè)體中的組織損傷(諸如非缺血性組織損傷)的部位的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)MAp44多肽或其片段；和(b)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV或磷脂。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體組織中抑制補(bǔ)體活化(或抑制炎癥，例如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述組織是肝或門管、心臟、肌肉、腦、中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道、肺、肢體、動(dòng)脈或靜脈血管系統(tǒng)、皮膚、骨髓細(xì)胞(包括紅細(xì)胞、血小板和有核細(xì)胞)、胰腺、眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述組織是眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述炎癥(諸如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)與由炎性病癥、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥導(dǎo)致的組織損傷相關(guān)。在一些實(shí)施方案中，至少約10％(包括例如至少約20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或100％中的任一種)補(bǔ)體活化或炎癥被抑制。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體組織中抑制補(bǔ)體活化(或抑制炎癥，例如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述組織是肝或門管、心臟、肌肉、腦、中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道、肺、肢體、動(dòng)脈或靜脈血管系統(tǒng)、皮膚、骨髓細(xì)胞(包括紅細(xì)胞、血小板和有核細(xì)胞)、胰腺、眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述組織是眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述炎癥(諸如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)與由炎性病癥、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥導(dǎo)致的組織損傷相關(guān)。在一些實(shí)施方案中，至少約10％(包括例如至少約20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或100％中的任一種)補(bǔ)體活化或炎癥被抑制。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體組織中抑制補(bǔ)體活化(或抑制炎癥，例如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂；和(b)MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述組織是肝或門管、心臟、肌肉、腦、中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道、肺、肢體、動(dòng)脈或靜脈血管系統(tǒng)、皮膚、骨髓細(xì)胞(包括紅細(xì)胞、血小板和有核細(xì)胞)、胰腺、眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述組織是眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述炎癥(諸如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)與由炎性病癥、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥導(dǎo)致的組織損傷相關(guān)。在一些實(shí)施方案中，至少約10％(包括例如至少約20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或100％中的任一種)補(bǔ)體活化或炎癥被抑制。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體中具有氧化損傷的組織中抑制補(bǔ)體活化(或抑制炎癥，例如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述組織是肝或門管、心臟、肌肉、腦、中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道、肺、肢體、動(dòng)脈或靜脈血管系統(tǒng)、皮膚、骨髓細(xì)胞(包括紅細(xì)胞、血小板和有核細(xì)胞)、胰腺、眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述組織是眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述炎癥(諸如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)與由炎性病癥、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥導(dǎo)致的組織損傷相關(guān)。在一些實(shí)施方案中，至少約10％(包括例如至少約20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或100％中的任一種)補(bǔ)體活化或炎癥被抑制。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體中具有氧化損傷的組織中抑制補(bǔ)體活化(或抑制炎癥，例如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述組織是肝或門管、心臟、肌肉、腦、中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道、肺、肢體、動(dòng)脈或靜脈血管系統(tǒng)、皮膚、骨髓細(xì)胞(包括紅細(xì)胞、血小板和有核細(xì)胞)、胰腺、眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述組織是眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述炎癥(諸如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)與由炎性病癥、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥導(dǎo)致的組織損傷相關(guān)。在一些實(shí)施方案中，至少約10％(包括例如至少約20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或100％中的任一種)補(bǔ)體活化或炎癥被抑制。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體中具有氧化損傷的組織中抑制補(bǔ)體活化(或抑制炎癥，例如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂；和(b)MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(或在病理結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述組織是肝或門管、心臟、肌肉、腦、中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)、胃腸道、肺、肢體、動(dòng)脈或靜脈血管系統(tǒng)、皮膚、骨髓細(xì)胞(包括紅細(xì)胞、血小板和有核細(xì)胞)、胰腺、眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述組織是眼、關(guān)節(jié)和腎中的任一種。在一些實(shí)施方案中，所述炎癥(諸如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)與由炎性病癥、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥導(dǎo)致的組織損傷相關(guān)。在一些實(shí)施方案中，至少約10％(包括例如至少約20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或100％中的任一種)補(bǔ)體活化或炎癥被抑制。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體中治療炎性疾病(或涉及氧化損傷的疾病)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述炎性疾病是炎性疾病、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的，諸如超急性異種移植注射)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)(諸如藥物過敏和IL-2誘導(dǎo)的血管滲漏綜合征)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥中的任一種。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體中治療炎性疾病(或涉及氧化損傷的疾病)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV；和(b)MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)與膜聯(lián)蛋白IV的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體B4)結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(和/或在病理學(xué)結(jié)構(gòu)中)。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV由有核細(xì)胞(諸如哺乳動(dòng)物細(xì)胞)產(chǎn)生。在一些實(shí)施方案中，所述膜聯(lián)蛋白IV是重組蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述炎性疾病是炎性疾病、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的，諸如超急性異種移植注射)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)(諸如藥物過敏和IL-2誘導(dǎo)的血管滲漏綜合征)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥中的任一種。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體中治療炎性疾病(或涉及氧化損傷的疾病)的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合磷脂；和(b)MAp44多肽或其片段。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段競(jìng)爭(zhēng)性抑制病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)與磷脂的結(jié)合。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其抗體片段與病原性抗體(諸如單克隆抗體C2)結(jié)合磷脂的相同表位。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂存在于在經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織中或鄰近于經(jīng)歷組織損傷(諸如，非缺血性損傷)和/或氧化損傷(或處于經(jīng)歷其風(fēng)險(xiǎn)下)的組織的個(gè)體中的細(xì)胞的表面上(或在病理學(xué)結(jié)構(gòu)(例如，脈絡(luò)膜小疣)中)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂選自磷脂酰乙醇胺(PE)、心磷脂(CL)和磷脂酰膽堿(PC)。在一些實(shí)施方案中，所述抗體或其片段結(jié)合丙二醛(MDA)。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是中性的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是帶正電荷的。在一些實(shí)施方案中，所述磷脂是氧化的。在一些實(shí)施方案中，所述構(gòu)建體是融合蛋白。在一些實(shí)施方案中，所述靶向部分和所述MAp44多肽或其片段經(jīng)由接頭(諸如肽接頭)連接。在一些實(shí)施方案中，所述炎性疾病是炎性疾病、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的，諸如超急性異種移植注射)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)(諸如藥物過敏和IL-2誘導(dǎo)的血管滲漏綜合征)、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥中的任一種。還提供了將包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段的構(gòu)建體遞送至個(gè)體中的組織損傷部位的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物，其中所述構(gòu)建體包含(a)MAp44多肽或其片段；和/或(b)抗體或其片段，其中所述抗體或其片段特異性結(jié)合膜聯(lián)蛋白IV或磷脂。在一些實(shí)施方案中，提供了在個(gè)體中抑制補(bǔ)體活化、抑制炎癥或治療炎性疾病的方法，其包括向個(gè)體施用用于將包含用于表達(dá)所述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入個(gè)體的媒介物，所述構(gòu)建體包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段，其中所述載體選自腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺相關(guān)病毒和質(zhì)粒。還提供了將包含任選地與靶向部分連接的MAp44多肽或其片段的構(gòu)建體遞送至個(gè)體中的組織損傷部位的方法，其包括向個(gè)體施用用于將包含用于表達(dá)上述構(gòu)建體的序列的外源核酸引入患者的載體，其中所述載體選自腺病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒、腺相關(guān)病毒和質(zhì)粒。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病是眼病。在一些實(shí)施方案中，所述疾病是與補(bǔ)體活化相關(guān)的眼病。在一些實(shí)施方案中，所述疾病是年齡相關(guān)性黃斑變性(“AMD”)，包括濕性AMD和干性AMD。可通過本文所述的方法治療的其它眼病包括但不限于CMV視網(wǎng)膜炎、黃斑水腫、葡萄膜炎、青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、視網(wǎng)膜色素變性、視網(wǎng)膜脫離、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變和眼黑色素瘤。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病是炎性關(guān)節(jié)炎。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病是腎病，包括但不限于急性腎損傷、腎小球腎炎、慢性腎病和局灶性節(jié)段性腎小球硬化。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病是炎性病癥，其包括但不限于燒傷、內(nèi)毒素血癥、感染性休克、成人呼吸窘迫綜合征、心肺轉(zhuǎn)流、血液透析、過敏性休克、哮喘、血管性水腫、克羅恩氏病、鐮狀細(xì)胞貧血、鏈球菌感染后腎小球腎炎、膜性腎炎和胰腺炎。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病是妊娠相關(guān)疾病，其包括但不限于HELLP(溶血性貧血、肝酶升高和低血小板計(jì)數(shù))、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)和先兆子癇。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病是自身免疫疾病或免疫復(fù)合物病癥，其包括但不限于重癥肌無力、阿爾茨海默氏病、多發(fā)性硬化、視神經(jīng)脊髓炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、狼瘡腎炎、IgG4相關(guān)疾病、胰島素依賴性糖尿病、急性播散性腦脊髓炎、阿狄森氏病、抗磷脂抗體綜合征、血栓性血小板減少性紫癜、自身免疫性肝炎、克羅恩氏病、古德帕斯徹氏綜合征、格雷夫斯氏病、格林-巴利綜合征、橋本氏病、特發(fā)性血小板減少性紫癜、天皰瘡、干燥綜合征、高安氏動(dòng)脈炎、自身免疫性腎小球腎炎、II型膜增生性腎小球腎炎、膜性疾病、陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿、年齡相關(guān)性黃斑變性、糖尿病性黃斑病變、葡萄膜炎、視網(wǎng)膜變性病癥、糖尿病性腎病、局灶性節(jié)段性腎小球硬化、ANCA相關(guān)血管炎、溶血性尿毒綜合征、志賀毒素相關(guān)的溶血性尿毒綜合征和非典型溶血性尿毒綜合征。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病是自身免疫性腎小球腎炎，其包括但不限于免疫球蛋白A腎病或I型膜增生性腎小球腎炎。待治療的疾病本文所述的治療方法可用于治療多種疾病，包括但不限于炎性疾病、移植物排斥、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、由缺血-再灌注損傷引起的組織損傷、眼病、腎病、關(guān)節(jié)疾病和自身免疫或免疫復(fù)合物疾病。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病包括但不限于系統(tǒng)性紅斑狼瘡和腎小球腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、心肺轉(zhuǎn)流和血液透析、器官移植中的超急性排斥、心肌梗塞、缺血/再灌注損傷、抗體介導(dǎo)的同種異體移植物排斥（例如，在腎臟中）和成人呼吸窘迫綜合征。此外，其它炎性病況和自身免疫/免疫復(fù)合物疾病也與補(bǔ)體活化密切相關(guān)，包括但不限于熱損傷、嚴(yán)重哮喘、過敏性休克、腸炎、蕁麻疹、血管性水腫、血管炎、多發(fā)性硬化、重癥肌無力、心肌炎、膜增生性腎小球腎炎、非典型溶血性尿毒綜合征、干燥綜合征、腎和肺缺血/再灌注和其它器官特異性炎性疾病。因此，在一些實(shí)施方案中，本文所述的方法特別可用于治療補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病，包括但不限于炎性疾病、移植物排斥、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、由缺血-再灌注損傷引起的組織損傷、眼病、腎病、關(guān)節(jié)疾病或自身免疫或免疫復(fù)合物病癥。在一些實(shí)施方案中，本文還提供了治療個(gè)體中的補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病的方法，其包括向個(gè)體施用有效量的本文所述的任何組合物(諸如包含構(gòu)建體的組合物)。本文所述的方法特別可用于治療炎性疾病，包括但不限于燒傷、內(nèi)毒素血癥、敗血性休克、成人呼吸窘迫綜合征、心肺轉(zhuǎn)流、血液透析、過敏性休克、哮喘、血管性水腫、克羅恩氏病、鐮狀細(xì)胞貧血、鏈球菌感染后腎小球腎炎、膜性腎炎、胰腺炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、急性肺損傷和彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)。在一些實(shí)施方案中，所述炎癥(諸如補(bǔ)體介導(dǎo)的炎癥)與由炎性或自身炎癥性病癥、移植物排斥(細(xì)胞或抗體介導(dǎo)的)、妊娠相關(guān)疾病、不良藥物反應(yīng)、變性、新生血管、溶血性、血栓形成、血管炎、關(guān)節(jié)炎、再生、創(chuàng)傷、自身免疫或免疫復(fù)合物病癥導(dǎo)致的組織損傷相關(guān)。本文所述的組合物還可用于治療移植物排斥，包括但不限于超急性移植物排斥、抗體介導(dǎo)的移植物排斥、細(xì)胞介導(dǎo)的移植物排斥、急性移植物排斥和慢性移植物排斥。在一些實(shí)施方案中，所述移植物是異種移植物、同種異體移植物或同種移植物。在一些實(shí)施方案中，所述移植物是流體、細(xì)胞、組織或器官。在一些實(shí)施方案中，所述移植物選自：心臟、肝臟、腎臟、肺、胰腺、腸、胃、睪丸、手、手臂、腿、子宮、卵巢和胸腺。在一些實(shí)施方案中，所述移植物選自：骨、腱、角膜、皮膚、心臟瓣膜、朗格漢斯胰島、骨髓、造血干細(xì)胞、輸血和靜脈。在一些實(shí)施方案中，所述移植物是心臟、肝臟或腎臟。移植物排斥可以導(dǎo)致幾種并發(fā)癥，諸如移植物抗宿主病。在一些實(shí)施方案中，補(bǔ)體介導(dǎo)的疾病是移植物抗宿主疾病。本文所述的方法還特別用于治療妊娠相關(guān)疾病，包括但不限于HELLP(溶血性貧血、肝臟酶升高和低血小板計(jì)數(shù))、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)、非典型溶血性尿毒綜合征、胎兒缺氧綜合征、高血壓疾病和先兆子癇。此外，本文所述的方法可用于治療不良藥物反應(yīng)，包括但不限于藥物過敏、放射照相造影介質(zhì)過敏和IL-2誘導(dǎo)的血管滲漏。本文所述的方法還可用于治療由缺血-再灌注損傷引起的組織損傷，包括但不限于急性心肌梗塞、動(dòng)脈瘤、動(dòng)脈瘤修復(fù)、深部低溫循環(huán)停止、止血帶使用、實(shí)體器官移植、中風(fēng)（包括圍產(chǎn)期中風(fēng)）、出血性休克、擠壓損傷、多器官功能衰竭、血液透析、血容量減少的休克、脊髓損傷、外傷性腦損傷、腸缺血、視網(wǎng)膜缺血、心肺轉(zhuǎn)流、針對(duì)失敗的經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)的緊急冠狀動(dòng)脈手術(shù)以及用血管交叉鉗夾的任何血管手術(shù)、操作胰腺或膽管后的胰腺炎。在一些實(shí)施方案中，可以在觸發(fā)缺血-再灌注損傷的缺血事件(諸如腸缺血)之前、期間或之后治療組織損傷。在一些實(shí)施方案中，通過在再灌注之前施用本文公開的構(gòu)建體(或包含構(gòu)建體的組合物或用于表達(dá)構(gòu)建體的載體)用本文公開的任何方法治療組織損傷。在一些實(shí)施方案中，通過在再灌注之后施用本文公開的構(gòu)建體(或包含構(gòu)建體的組合物或用于表達(dá)構(gòu)建體的載體)用本文公開的任何方法治療組織損傷。在一些實(shí)施方案中，所述缺血-再灌注損傷選自：心肌缺血-再灌注、腎缺血-再灌注損傷、胃腸缺血-再灌注損傷、肝缺血-再灌注損傷、骨骼肌缺血-再灌注損傷、腦缺血-再灌注損傷、肺缺血-再灌注損傷、腸缺血-再灌注損傷、視網(wǎng)膜缺血-再灌注損傷和關(guān)節(jié)缺血-再灌注損傷。在一些實(shí)施方案中，所述組織損傷由氧化損傷引起。存在療法或外科手術(shù)誘導(dǎo)再灌注、但不誘導(dǎo)缺血的情況(本文被稱為非缺血-再灌注損傷)。此類療法或外科手術(shù)包括但不限于藥理學(xué)溶栓，包括針對(duì)中風(fēng)、急性冠狀動(dòng)脈綜合征、外周動(dòng)脈閉塞、肺栓塞、腎動(dòng)脈閉塞、機(jī)械溶栓的靜脈內(nèi)和血管內(nèi)療法，例如經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入、外周動(dòng)脈血管成形術(shù)、內(nèi)臟動(dòng)脈血管成形術(shù)、冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)、頸動(dòng)脈內(nèi)膜切除術(shù)，針對(duì)腸系膜缺血、休克（包括出血、心源性、神經(jīng)源性、過敏性）、翻門失?。╢lap-failure）的療法，例如，整形外科手術(shù)、足趾和四肢的重新植入以及絞窄腸。因此，在一些實(shí)施方案中，通過施用本文公開的構(gòu)建體(或包含構(gòu)建體的組合物或用于表達(dá)構(gòu)建體的載體)用本文公開的任何方法治療由非缺血再灌注損傷引起的組織損傷。本文所述的方法還特別可用于治療腎病，包括但不限于急性腎損傷、溶血性尿毒綜合征、腎小球腎炎、膜性腎小球腎炎、系膜增生性腎小球腎炎、急性感染后腎小球腎炎(諸如鏈球菌感染后腎小球腎炎)、冷球蛋白血癥腎小球腎炎、狼瘡腎炎、膜性增生性腎小球腎炎(諸如系膜毛細(xì)血管性腎小球腎炎)、致密沉積病、微小變化疾病、糖尿病性腎病、亨-舍二氏紫癜性腎炎、IgA腎病、慢性腎病、腎移植的延遲移植功能、急性和慢性腎移植物排斥、蛋白尿性腎病和腎病綜合征、高血壓性腎病和局灶性節(jié)段性腎小球硬化。在一些實(shí)施方案中，所述腎病是腎小球疾病。例如，所述方法可用于治療導(dǎo)致天然IgM與受損腎小球結(jié)合的腎小球疾病。在一些實(shí)施方案中，受損腎小球可以是機(jī)械、代謝、化學(xué)、氧化或免疫應(yīng)激的結(jié)果。在一些實(shí)施方案中，受損腎小球可以是缺血、糖尿病、高血壓和繼發(fā)性局灶性節(jié)段性腎小球硬化的結(jié)果。受損腎小球的癥狀包括炎癥反應(yīng)，諸如細(xì)胞因子釋放和纖維化，諸如膠原系膜基質(zhì)沉積、腎小管細(xì)胞損傷和腎小管間質(zhì)纖維化。所述方法還可用于治療腎病，諸如作為腎小球的炎癥的腎小球腎炎。腎小球腎炎通常與含有補(bǔ)體組分(包括C3)的腎小球中電子致密物質(zhì)的沉積相關(guān)。所述方法還可用于治療與腎缺血相關(guān)的急性腎損傷。缺血是急性腎損傷的主要原因。缺血和隨后的再灌注通過內(nèi)皮功能障礙、白細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥和減少的微血管血流量引發(fā)急性腎損傷，其可以導(dǎo)致腎小管周圍毛細(xì)血管的稀少、將至皮質(zhì)延髓連接的氧供應(yīng)和需求的脆弱平衡轉(zhuǎn)移到負(fù)氧平衡。平衡的改變引起缺氧環(huán)境，并且可以導(dǎo)致纖維化的積累和隨后的慢性腎病的發(fā)展。在一些實(shí)施方案中，所述腎病是由于因子H缺乏。本文所述的方法還可用于治療關(guān)節(jié)疾病，包括但不限于關(guān)節(jié)炎(諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)和與感染相關(guān)的關(guān)節(jié)炎癥(諸如乙型肝炎感染)、炎性疾病(諸如炎性腸病)或自身免疫性疾病(諸如系統(tǒng)性紅斑狼瘡)。在一些實(shí)施方案中，本文提供的方法可用于治療關(guān)節(jié)疾病，包括但不限于關(guān)節(jié)炎、淀粉樣關(guān)節(jié)病、淀粉樣變性、強(qiáng)直性脊柱炎、腕管綜合征、顳動(dòng)脈炎、風(fēng)濕性多肌痛、多關(guān)節(jié)痛、腱炎、Whipple氏病、滑囊炎、三叉神經(jīng)痛、纖維肌瘤、纖維組織炎、自身免疫性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年型關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎、狼瘡關(guān)節(jié)炎、多關(guān)節(jié)炎、不是由自身免疫性疾病或病癥引起的炎性關(guān)節(jié)炎，諸如感染性關(guān)節(jié)炎，即由病原體諸如細(xì)菌(包括支原體)、病毒、真菌、膿毒性關(guān)節(jié)炎或骨關(guān)節(jié)炎引起的關(guān)節(jié)疼痛、痛、僵硬和腫脹。關(guān)節(jié)疾病可以與癥狀諸如關(guān)節(jié)僵硬、疼痛、虛弱、關(guān)節(jié)疲勞、壓痛和腫脹相關(guān)。因此，在一些實(shí)施方案中，可以通過施用本文公開的構(gòu)建體(或包含構(gòu)建體的組合物或用于表達(dá)構(gòu)建體的載體)用本文公開的任何方法治療關(guān)節(jié)疾病的癥狀。例如，所述組合物可用于治療關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)炎的癥狀。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)炎選自：類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、幼年型發(fā)病類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、銀屑病關(guān)節(jié)炎和狼瘡關(guān)節(jié)炎。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)炎是骨關(guān)節(jié)炎。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)炎是由細(xì)菌病原體引起的感染性關(guān)節(jié)炎、所述細(xì)菌病原體諸如流感嗜血桿菌、弓形菌屬、支原體屬、腦膜炎球菌屬、肺炎球菌屬、鏈球菌屬、葡萄球菌屬、沙門氏菌屬、布魯氏菌屬、奈瑟氏菌屬、念珠狀鏈桿菌（哈佛希爾熱）、結(jié)核分枝桿菌、梅毒螺旋體（梅毒）、雅司螺旋體（雅司病）或立克次氏體。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)炎是由病毒病原體引起的感染性關(guān)節(jié)炎，所述病毒病原體諸如風(fēng)疹病毒、腮腺炎病毒、水痘帶狀皰疹病毒、腺病毒、艾柯病毒、單純皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、細(xì)小病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒和甲病毒或肝炎病毒。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)炎是由真菌引起的感染性關(guān)節(jié)炎，所述真菌諸如球孢子菌屬、組織胞漿菌屬、芽生菌屬、隱球菌屬、假絲酵母屬或孢子菌屬。作為另一個(gè)實(shí)例、所述組合物可用于治療關(guān)節(jié)疾病或關(guān)節(jié)疾病的癥狀。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)疾病是關(guān)節(jié)炎、淀粉樣關(guān)節(jié)病、淀粉樣變性、強(qiáng)直性脊柱炎、腕管綜合征、顳動(dòng)脈炎、風(fēng)濕性多肌痛、多關(guān)節(jié)痛、腱炎、Whipple氏病、滑囊炎、三叉神經(jīng)痛、纖維肌瘤和纖維組織炎。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)疾病與關(guān)節(jié)炎相關(guān)。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)疾病先于關(guān)節(jié)炎的發(fā)展。在一些實(shí)施方案中，所述關(guān)節(jié)疾病由于關(guān)節(jié)炎的發(fā)作而發(fā)展。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎影響約1％的人群，其中女性受影響的頻率是男性的超過三倍。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和幼年型發(fā)病類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是除了其關(guān)節(jié)炎癥方面之外還具有多種病理表現(xiàn)的全身性疾病。在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中，這些表現(xiàn)包括血管炎(血管的炎癥)，其可影響幾乎任何器官系統(tǒng)并可引起許多病理性后遺癥，包括多發(fā)性神經(jīng)病、皮膚潰瘍和內(nèi)臟梗塞。胸膜肺表現(xiàn)包括胸膜炎、間質(zhì)性纖維化、胸膜肺結(jié)節(jié)、肺炎和動(dòng)脈炎。其它表現(xiàn)包括在各種關(guān)節(jié)周圍結(jié)構(gòu)(諸如伸肌表面以及胸膜和髓膜)上發(fā)展炎性類風(fēng)濕性結(jié)節(jié)。骨骼肌的虛弱和萎縮是常見的。許多患有系統(tǒng)性紅斑狼瘡的患者也發(fā)展被稱為狼瘡關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)炎癥。系統(tǒng)性紅斑狼瘡是原因未知的自身免疫性疾病，其中許多不同的細(xì)胞、組織和器官被致病性自身抗體和免疫復(fù)合物損傷。系統(tǒng)性紅斑狼瘡的臨床表現(xiàn)多種多樣，且包括各種斑狀丘疹、腎炎、腦炎、血管炎、血液異常（包括血細(xì)胞減少和凝血障礙）、心包炎、心肌炎、胸膜炎、胃腸道癥狀和前述關(guān)節(jié)炎癥。骨關(guān)節(jié)炎代表最常見的慢性關(guān)節(jié)疾病。其表現(xiàn)為所涉及關(guān)節(jié)的疼痛、僵硬和腫脹。負(fù)責(zé)關(guān)節(jié)的最關(guān)鍵的機(jī)械功能的關(guān)節(jié)軟骨是骨關(guān)節(jié)炎的主要靶組織，并且骨關(guān)節(jié)炎中的關(guān)節(jié)軟骨的分解由各種酶諸如金屬蛋白酶、纖溶酶和組織蛋白酶介導(dǎo)，其進(jìn)而由也可以充當(dāng)炎癥介質(zhì)的各種因子刺激。這些因子包括細(xì)胞因子諸如白介素-1，已知其活化病原性軟骨和滑膜蛋白酶。隨著疾病進(jìn)展，滑膜炎癥變得更加頻繁。銀屑病關(guān)節(jié)炎是慢性炎性關(guān)節(jié)疾病，其影響5％至8％的銀屑病患者。顯著百分比(四分之一)的這些個(gè)體發(fā)展進(jìn)行性破壞性疾病。25％的具有關(guān)節(jié)炎癥的銀屑病患者發(fā)展類似于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)炎癥表現(xiàn)的對(duì)稱關(guān)節(jié)炎癥，并且超過一半的這些患者發(fā)展不同程度的關(guān)節(jié)破壞。本文所述的方法可用于治療自身免疫或免疫復(fù)合物，包括但不限于重癥肌無力、阿爾茨海默氏病、多發(fā)性硬化、肺氣腫、肥胖癥、視神經(jīng)脊髓炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、狼瘡腎炎、IgG4相關(guān)疾病、胰島素依賴性糖尿病、急性播散性腦脊髓炎、阿狄森氏病、抗磷脂抗體綜合征、血栓性血小板減少性紫癜、自身免疫性肝炎、克羅恩氏病、古德帕斯徹氏綜合征、格雷夫斯氏病、格林-巴利綜合征、橋本氏病、特發(fā)性血小板減少性紫癜、天皰瘡、干燥綜合征、高安氏動(dòng)脈炎、自身免疫性腎小球腎炎、致密沉積病(也稱為II型膜增生性腎小球腎炎)、膜性疾病、陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿、年齡相關(guān)性黃斑變性、糖尿病性黃斑病變、葡萄膜炎、視網(wǎng)膜變性病癥、糖尿病性腎病、局灶性節(jié)段性腎小球硬化、ANCA相關(guān)血管炎、溶血性尿毒綜合征、志賀毒素相關(guān)的溶血性尿毒綜合征、非典型溶血性尿毒綜合征和炎癥相關(guān)的心肺轉(zhuǎn)流和血液透析。在一些實(shí)施方案中，待治療的疾病是自身免疫性腎小球腎炎，其包括但不限于免疫球蛋白A腎病或I型膜增生性腎小球腎炎。在一些實(shí)施方案中，自身免疫或免疫復(fù)合物病癥是炎性疾病。本文所述的方法特別可用于治療眼病，包括但不限于年齡相關(guān)性黃斑變性(“AMD”)，包括濕性AMD和干性AMD、CMV視網(wǎng)膜炎、黃斑水腫、葡萄膜炎、青光眼、糖尿病視網(wǎng)膜病變、視網(wǎng)膜色素變性、視網(wǎng)膜脫離、增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變和眼黑色素瘤。例如，所述方法可用于治療年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)。AMD在臨床上的特征在于中心視力的進(jìn)行性喪失，其由于被稱為黃斑的視網(wǎng)膜區(qū)域中的感光細(xì)胞的損傷而發(fā)生。AMD已廣泛地分為兩種臨床狀態(tài)：濕性形式和干性形式，其中干性形式占總病例的80-90％。干性形式的臨床特征在于存在黃斑脈絡(luò)膜小疣（其為視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)和布魯赫膜之間的局部沉積物）以及特征在于具有疊加的光感受器萎縮的RPE細(xì)胞死亡的地理性萎縮。占嚴(yán)重視力喪失的約90％的濕性AMD與黃斑區(qū)域的新血管形成和這些新血管的滲漏相關(guān)。血液和液體的積累可引起視網(wǎng)膜脫離、隨后快速光感受器變性和視力喪失。通常公認(rèn)的是，AMD的濕性形式在干性形式之后并由干性形式產(chǎn)生。AMD患者中的脈絡(luò)膜小疣的含量的分析已經(jīng)顯示大量的炎性蛋白，包括淀粉樣蛋白、凝血因子和大量補(bǔ)體途徑的蛋白。補(bǔ)體因子H中的遺傳變異實(shí)質(zhì)上提高了年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)的風(fēng)險(xiǎn)，表明不受控的補(bǔ)體活化是AMD的發(fā)病機(jī)制的基礎(chǔ)。Edward等人,Science2005,308:421;Haines等人,Science2005,308:419;Klein等人,Science308:385-389;Hageman等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA2005,102:7227。在一些實(shí)施方案中，本文所述的方法可用于治療巨細(xì)胞病毒(CMV)視網(wǎng)膜炎。CMV視網(wǎng)膜炎是引起視網(wǎng)膜中感光細(xì)胞炎癥的感染。CMV通常在免疫活性個(gè)體中是罕見的。然而，免疫受損(例如通過疾病、移植或化療)的個(gè)體對(duì)CMV視網(wǎng)膜炎特別敏感。視網(wǎng)膜炎通常在一只眼睛中開始，但經(jīng)常進(jìn)展至另一只眼睛。沒有治療的情況下，對(duì)視網(wǎng)膜的進(jìn)行性損傷可導(dǎo)致4-6個(gè)月或更少的失明。在一些實(shí)施方案中，本文所述的方法可用于治療黃斑水腫。當(dāng)液體和蛋白沉積物聚集在眼睛的黃斑上面或下面、引起其變稠和腫脹時(shí)，發(fā)生黃斑水腫。腫脹可能扭曲個(gè)體的中心視力，因?yàn)辄S斑具有緊密填充的錐體，其提供敏捷清晰的中心視覺，使人能夠看到直接在凝視方向上的細(xì)節(jié)、形式和顏色。黃斑水腫可分為兩種類型。囊性黃斑水腫(CME)包括繼發(fā)于異常的中心凹周視網(wǎng)膜毛細(xì)血管通透性的外叢狀層中的液體積聚。糖尿病性黃斑水腫(DME)類似地由滲漏的黃斑毛細(xì)血管引起。DME是增殖性和非增殖性糖尿病性視網(wǎng)膜病變中視覺喪失的最常見原因。在某些實(shí)施方案中，本文所述的方法可用于治療葡萄膜炎，即葡萄膜(虹膜、睫狀體和鞏膜下眼睛的脈絡(luò)膜)的炎癥。葡萄膜炎通常與眼部感染、眼部損傷和/或自身免疫性疾病相關(guān)。然而，在許多情況下，原因是未知的。葡萄膜炎的最常見形式是前葡萄膜炎，其涉及虹膜中的炎癥。后葡萄膜炎影響眼睛中部中的脈絡(luò)膜、血管層和結(jié)締組織層。另一種形式的葡萄膜炎是睫狀體扁平部炎。這種炎癥影響虹膜和脈絡(luò)膜之間的狹窄區(qū)域(睫狀體扁平部)。在某些實(shí)施方案中，本文所述的方法可用于治療青光眼，一組導(dǎo)致視神經(jīng)損傷的眼睛病況，和視力喪失。神經(jīng)損傷涉及以特征性模式的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的損失。許多不同的青光眼亞型可以都被認(rèn)為是視神經(jīng)病變。升高的眼內(nèi)壓(高于21mmHg或2.8kPa)是青光眼的最重要且唯一可改變的風(fēng)險(xiǎn)因素。眼內(nèi)壓是通過眼睛的睫狀突過程產(chǎn)生液體房水和其通過小梁網(wǎng)的排出的函數(shù)。房水從睫狀突過程流入后室，所述后室在后面由晶狀體和Zinn的小區(qū)域界定，并且在前面由虹膜界定。然后其通過虹膜的瞳孔流入前室，所述前室在后面由虹膜界定，并且在前面由角膜界定。從這里，小梁網(wǎng)經(jīng)由施萊姆管將房水排出到鞏膜叢和一般的血液循環(huán)中。在開放/廣角青光眼中，由于小梁網(wǎng)（其原始功能是吸收房水）的退化和阻塞，通過小梁網(wǎng)的流體減少。房水吸收的損失導(dǎo)致增加的阻力，并因此導(dǎo)致眼內(nèi)壓的慢性、無痛構(gòu)建。在閉合/窄角中，虹膜角膜角度完全閉合，因?yàn)楹缒さ淖罱K的卷和根部針對(duì)角膜的向前位移，導(dǎo)致房水不能從后部流到前房，然后流出小梁網(wǎng)。房水的這種積累引起壓力和疼痛的急劇增加。在一些實(shí)施方案中，本文所述的方法可用于治療糖尿病性視網(wǎng)膜病變，引起由微血管視網(wǎng)膜變化導(dǎo)致的損傷的糖尿病并發(fā)癥。小血管諸如眼睛中的小血管，特別容易受較差血糖控制的影響。葡萄糖和/或果糖的過度積累損害視網(wǎng)膜中的微小血管。高血糖誘導(dǎo)的周細(xì)胞死亡和基底膜的增厚導(dǎo)致血管壁的滲透性增加，其改變血液-視網(wǎng)膜屏障的形成。在一些個(gè)體中，糖尿病性視網(wǎng)膜病變伴有黃斑水腫。隨著糖尿病性視網(wǎng)膜病變發(fā)展，視網(wǎng)膜中氧的缺乏引起脆弱的新血管沿著視網(wǎng)膜和玻璃體液生長(zhǎng)。沒有及時(shí)治療的情況下，這些新血管可以出血，視覺模糊，并且破壞視網(wǎng)膜和/或引起牽引性視網(wǎng)膜脫離。在某些實(shí)施方案中，本文所述的方法可用于治療視網(wǎng)膜色素變性(RP)，一組引起嚴(yán)重視力障礙和失明的遺傳性變性眼病。已知超過60種基因的突變引起視網(wǎng)膜色素變性。約20％的RP是常染色體顯性的(ADRP)，20％是常染色體隱性的(ARRP)，且10％是X連鎖的(XLRP)，而剩余的50％發(fā)現(xiàn)于沒有任何已知受影響親屬的患者。與視網(wǎng)膜色素變性相關(guān)的基因在視網(wǎng)膜中光感受器的結(jié)構(gòu)和功能中起重要作用，并且這些細(xì)胞的進(jìn)行性變性引起視力喪失。在某些實(shí)施方案中，本文所述的方法可用于治療增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變，即在眼睛內(nèi)形成瘢痕組織，其通常是孔源性視網(wǎng)膜脫離的并發(fā)癥。在孔源性視網(wǎng)膜脫離期間，來自玻璃體液的液體進(jìn)入視網(wǎng)膜孔。視網(wǎng)膜下空間中液體的積累和玻璃體在視網(wǎng)膜上的牽引力導(dǎo)致孔源性視網(wǎng)膜脫離。在該過程期間，視網(wǎng)膜細(xì)胞層與玻璃體細(xì)胞因子接觸，其觸發(fā)視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)的增殖和遷移。RPE細(xì)胞經(jīng)歷上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)并發(fā)展遷移到玻璃體內(nèi)的能力。在該過程期間，RPE細(xì)胞層-神經(jīng)視網(wǎng)膜粘附和RPE-ECM(細(xì)胞外基質(zhì))粘連丟失。RPE細(xì)胞位于纖維膜下，而它們遷移且這些膜在視網(wǎng)膜處收縮和牽拉，并且這可能導(dǎo)致在主視網(wǎng)膜脫離手術(shù)后的次視網(wǎng)膜脫離。在某些實(shí)施方案中，本文所述的治療方法可以與例如用于修復(fù)視網(wǎng)膜淚、孔或脫離的手術(shù)或與例如用于治療眼黑色素瘤的放射療法聯(lián)合使用。在某些實(shí)施方案中，本文所述的組合物和方法可用于治療和/或改善角膜傷口愈合和/或角膜移植的結(jié)果。角膜傷口愈合反應(yīng)是涉及上皮細(xì)胞、基質(zhì)角膜細(xì)胞、角膜神經(jīng)、淚腺、淚膜和免疫系統(tǒng)細(xì)胞之間的細(xì)胞因子介導(dǎo)的相互作用的復(fù)合級(jí)聯(lián)。組織變化的反應(yīng)取決于刺激損傷（incitinginjury）。例如，切口、薄層和表面刮擦損傷，如用于角膜屈光手術(shù)程序中的損傷，隨后是典型的傷口愈合反應(yīng)，其在一些方面類似、但在其它方面不同。例如，在身體的其它地方，傷口愈合在瘢痕形成和血管形成中達(dá)到高峰，而角膜傷口愈合的最關(guān)鍵的方面之一是如何使愈合過程旨在使這些最終結(jié)果（否則這將具有嚴(yán)重的視覺后果）最小化。角膜瘢痕形成的原因包括幾乎任何對(duì)正常角膜結(jié)構(gòu)和功能的破壞，無論是由于感染、激光屈光手術(shù)、角膜移植、眼部創(chuàng)傷(化學(xué)或物理)還是角膜營(yíng)養(yǎng)不良。角膜移植(也稱為角膜移植法)是其中損傷或患病的角膜被捐贈(zèng)的角膜組織(移植物)整體(穿透性角膜移植術(shù))或部分地(層狀角膜移植術(shù))置換的外科手術(shù)程序。移植物取自最近死亡的個(gè)體，其沒有已知的疾病或可能影響所捐獻(xiàn)組織的活力或受體的健康的其它因素。由于角膜沒有血管(其從房水獲得營(yíng)養(yǎng)物)，所以其比皮膚上的切口愈合慢得多。風(fēng)險(xiǎn)類似于其它眼內(nèi)外科手術(shù)程序，但另外包括移植物排斥(終身)、層狀移植物的脫離或移位和主要移植物衰竭。還有感染的風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明提供了通過施用有效量的包含構(gòu)建體的組合物來治療本文所述的眼病的方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療本文所述的眼病的一個(gè)或多個(gè)方面或癥狀的方法，所述眼病包括但不限于眼部脈絡(luò)膜小疣的形成，眼部或眼組織中的炎癥，感光細(xì)胞的損失，視力(包括例如視敏度和視野)的損失，新血管形成(諸如脈絡(luò)膜新血管形成或CNV)和視網(wǎng)膜脫離。還包括其它相關(guān)方面，諸如光感受器變性、RPE變性、視網(wǎng)膜變性、脈絡(luò)膜視網(wǎng)膜變性、視錐細(xì)胞變性、視網(wǎng)膜功能障礙、響應(yīng)于曝光(諸如恒定曝光)的視網(wǎng)膜損傷、布魯赫膜的損傷、RPE功能的損失、RPE功能的增加、正常黃斑的細(xì)胞和/或細(xì)胞外基質(zhì)的組織結(jié)構(gòu)的完整性的損失、黃斑中細(xì)胞功能的損失、光感受器營(yíng)養(yǎng)不良、粘多糖病、桿-錐營(yíng)養(yǎng)不良、錐-桿營(yíng)養(yǎng)不良、前和后葡萄膜炎和糖尿病性神經(jīng)病變。在一些實(shí)施方案中，提供了治療脈絡(luò)膜小疣相關(guān)疾病的方法。術(shù)語“脈絡(luò)膜小疣相關(guān)疾病”是指其中發(fā)生脈絡(luò)膜小疣或脈絡(luò)膜小疣樣細(xì)胞外疾病斑的形成發(fā)生且脈絡(luò)膜小疣或脈絡(luò)膜小疣樣細(xì)胞外疾病斑引起或促成其或代表其體征的任何疾病。例如，特征在于形成黃斑脈絡(luò)膜小疣的AMD被認(rèn)為是脈絡(luò)膜小疣相關(guān)疾病。非眼部脈絡(luò)膜小疣相關(guān)疾病包括但不限于淀粉樣變性、彈性組織變性、致密沉積病和/或動(dòng)脈粥樣硬化。施用模式本文所述的組合物可通過任何途徑施用于個(gè)體，所述途徑包括，但不限于，靜脈內(nèi)(例如，輸注泵)、腹膜內(nèi)、眼內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、肺內(nèi)、經(jīng)口、囊泡內(nèi)、肌肉內(nèi)、氣管內(nèi)、皮下、眼內(nèi)、囊內(nèi)、經(jīng)皮、經(jīng)胸膜、局部、吸入(例如，噴霧)、粘膜(諸如，經(jīng)鼻粘膜)、胃腸、關(guān)節(jié)內(nèi)、腦池內(nèi)、心室內(nèi)、直腸(即，通過栓劑)、陰道(即，經(jīng)陰道藥栓)、顱內(nèi)、尿道內(nèi)、肝內(nèi)和腫瘤內(nèi)。在一些實(shí)施方案中，全身性施用(例如，通過靜脈內(nèi)注射)所述組合物。在一些實(shí)施方案中，局部施用(例如，通過動(dòng)脈內(nèi)或眼內(nèi)注射)所述組合物。在一些實(shí)施方案中，將所述組合物直接施用于眼或眼組織。在一些實(shí)施方案中，將所述組合物局部施用于眼，例如，在滴眼劑中。在一些實(shí)施方案中，通過注射將所述組合物施用于眼(眼內(nèi)注射)或與眼相關(guān)的組織?？梢允┯盟鼋M合物，例如，通過眼內(nèi)注射、眼周注射、視網(wǎng)膜下注射、玻璃體內(nèi)注射、經(jīng)中隔注射、鞏膜下注射、脈絡(luò)膜內(nèi)注射、前房注射、結(jié)膜下的注射、特農(nóng)（Tenon）囊下注射、眼球后注射、球周注射或后部近鞏膜遞送。這些方法是本領(lǐng)域中已知的。例如，對(duì)于示例性的視網(wǎng)膜藥物遞送的眼周途徑的描述，參見Periocularroutesforretinaldrugdelivery,Raghava等人(2004),ExpertOpin.DrugDeliv.1(1):99-114.可以將所述組合物施用于，例如，玻璃體、房水、鞏膜、結(jié)膜、鞏膜和結(jié)膜之間的區(qū)域、脈絡(luò)膜組織、黃斑或個(gè)體的眼內(nèi)或眼附近的其它區(qū)域。還可以將所述組合物作為植入物施用于個(gè)體。優(yōu)選的植入物是生物相容的和/或生物可降解的持續(xù)釋放制劑，其在一段時(shí)間逐漸釋放化合物。用于藥物遞送的眼植入物是本領(lǐng)域公知的。參見，例如，美國專利號(hào)5,501,856、5,476,511和6,331,313。還可以使用離子電滲法將所述組合物施用于個(gè)體，所述離子電滲法包括，但不限于，美國專利號(hào)4,454,151和美國專利申請(qǐng)公開號(hào)2003/0181531和2004/0058313中描述的離子電滲法。在一些實(shí)施方案中，血管內(nèi)施用，諸如靜脈內(nèi)(IV)或動(dòng)脈內(nèi)施用所述組合物。在一些實(shí)施方案(例如用于治療腎病)中，將所述組合物直接施用于動(dòng)脈(諸如腎動(dòng)脈)。在一些實(shí)施方案中，將所述組合物直接施用于關(guān)節(jié)組織。在一些實(shí)施方案中，將所述組合物施用于滑膜。所述組合物的最佳有效量可以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定，并且將取決于疾病的類型和嚴(yán)重性、施用途徑、疾病進(jìn)展和個(gè)體的健康、質(zhì)量和身體面積。此類測(cè)定在本領(lǐng)域技術(shù)人員的技術(shù)范圍內(nèi)。有效量也可以基于體外補(bǔ)體活化測(cè)定法來確定?？捎糜诒疚乃龅姆椒ǖ臉?gòu)建體的劑量的實(shí)例包括但不限于在約0.01μg/kg至約300mg/kg、或約0.1μg/kg至約40mg/kg、或約1μg/kg至約20mg/kg、或約1μg/kg至約10mg/kg的任何劑量范圍內(nèi)的有效量。例如，當(dāng)眼內(nèi)施用時(shí)，所述組合物可以低微克范圍施用，包括例如約0.1μg/kg或更少，約0.05μg/kg或更少，或0.01μg/kg或更少。在一些實(shí)施方案中，施用于個(gè)體的構(gòu)建體的量為每劑量約10μg至約500mg，包括例如每劑量約10μg至約50μg、約50μg至約100μg、約100μg至約200μg、約200μg至約300μg、約300μg至約500μg、約500μg至約1mg、約1mg至約10mg、約10mg至約50mg、約50mg至約100mg、約100mg至約200mg、約200mg至約300mg、約300mg至約400mg或約400mg至約500mg中的任一種。所述組合物可以以單次每日劑量進(jìn)行施用，或總每日劑量可以以每天2、3或4次的分份劑量進(jìn)行施用。所述組合物的施用頻率還可以少于每日施用，例如，每周6次、每周5次、每周4次、每周3次、每周2次、每周1次、每2周1次、每3周1次、每個(gè)月1次、每2個(gè)月1次、每3個(gè)月1次或每6個(gè)月1次。所述組合物還可以在持續(xù)釋放制劑中施用，諸如在這樣的植入物中，所述植入物在一段時(shí)間中逐漸釋放所用組合物，且允許組合物以較低頻率施用，諸如每個(gè)月1次、每2-6個(gè)月1次、每年1次或甚至單次施用。持續(xù)釋放裝置(諸如小丸、納米顆粒、微米顆粒、納米球、微米球等)可以通過注射施用或手術(shù)植入眼睛或與眼睛相關(guān)的組織中的各個(gè)位置，諸如眼內(nèi)、玻璃體內(nèi)、視網(wǎng)膜下、眼周、結(jié)膜下或特農(nóng)（Tenon）囊下。所述藥物組合物可以單獨(dú)施用或與已知對(duì)視網(wǎng)膜附著或損傷的視網(wǎng)膜組織具有有益作用的其它分子（包括能夠組織修復(fù)和再生和/或抑制炎癥的分子）組合施用。有用的輔因子的實(shí)例包括抗VEGF劑(諸如針對(duì)VEGF的抗體)、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)、睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)、軸激肽(CNTF的突變蛋白)、白血病抑制因子(LIF)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白3(NT-3)、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)蛋白-4(NT-4)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子II、前列腺素E2、30kD存活因子、?；撬岷途S生素A。其它有用的輔因子包括癥狀緩解輔因子，包括防腐劑、抗生素、抗病毒和抗真菌劑和止痛劑和麻醉劑?；虔煼ㄋ鰳?gòu)建體也可以通過其體內(nèi)表達(dá)來遞送，這通常被稱為“基因療法”。例如，可以用編碼所述構(gòu)建體的多核苷酸(DNA或RNA)將細(xì)胞離體工程改造，然后，將工程改造的細(xì)胞提供給待用融合蛋白治療的個(gè)體。此類方法是本領(lǐng)域公知的。例如，可以通過本領(lǐng)域已知的程序通過使用含有編碼本發(fā)明的融合蛋白的RNA的逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒來將細(xì)胞工程改造。使用基因療法局部遞送本發(fā)明的構(gòu)建體可以向靶區(qū)域，例如向眼睛或眼睛組織提供治療劑。基因遞送的方法是本領(lǐng)域已知的。這些方法包括，但不限于，直接DNA轉(zhuǎn)移，參見，例如，Wolff等人(1990)Science247:1465-1468；2)脂質(zhì)體介導(dǎo)的DNA轉(zhuǎn)移，參見，例如，Caplen等人(1995)NatureMed.3:39-46;Crystal(1995)NatureMed.1:15-17;Gao和Huang(1991)Biochem.Biophys.Res.Comm.179:280-285；3)逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的DNA轉(zhuǎn)移，參見，例如，Kay等人(1993)Science262:117-119;Anderson(1992)Science256:808-813；和4)DNA病毒介導(dǎo)的DNA轉(zhuǎn)移。此類DNA病毒包括腺病毒(優(yōu)選基于Ad2或Ad5的載體)、皰疹病毒(優(yōu)選基于單純皰疹病毒的載體)和細(xì)小病毒(優(yōu)選基于"缺陷型"或非自主型細(xì)小病毒的載體，更優(yōu)選基于腺相關(guān)病毒的載體，最優(yōu)選基于AAV-2的載體)。參見，例如，Ali等人(1994)GeneTherapy1:367-384；美國專利號(hào)4,797,368，其通過引用并入本文，和美國專利號(hào)5,139,941?？梢匝苌衔乃龅哪孓D(zhuǎn)錄病毒質(zhì)粒載體的逆轉(zhuǎn)錄病毒包括，但不限于，Moloney小鼠白血病病毒、脾壞死病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒，諸如勞斯肉瘤病毒、哈維肉瘤病毒、禽白血病病毒、長(zhǎng)臂猿白血病病毒、人免疫缺陷病毒、腺病毒、骨髓增生性肉瘤病毒和乳腺腫瘤病毒。在一些實(shí)施方案中，所述逆轉(zhuǎn)錄病毒質(zhì)粒載體源自Moloney小鼠白血病病毒。腺病毒具有以下優(yōu)勢(shì)：其具有寬的宿主范圍，可以感染靜止期或終末分化的細(xì)胞(諸如神經(jīng)元或肝細(xì)胞)，并基本表現(xiàn)為非致瘤性。參見，例如，Ali等人(1994)，同上，第367頁。腺病毒似乎不整合入宿主基因組。因?yàn)樗鼈冊(cè)谌旧w外存在，所以插入誘變的風(fēng)險(xiǎn)大大降低。Ali等人(1994)，同上，第373頁。腺相關(guān)病毒表現(xiàn)出與基于腺病毒的載體相似的優(yōu)勢(shì)。然而，AAV表現(xiàn)出人染色體19上的位點(diǎn)特異性整合(Ali等人(1994)，同上，第377頁)?；虔煼ㄝd體可以包括一種或多種啟動(dòng)子。在一些實(shí)施方案中，所述載體具有驅(qū)動(dòng)多種細(xì)胞類型中的表達(dá)的啟動(dòng)子。在一些實(shí)施方案中，所述載體具有驅(qū)動(dòng)特定細(xì)胞類型(諸如視網(wǎng)膜的細(xì)胞或腎中的細(xì)胞)中的表達(dá)的啟動(dòng)子?？梢允褂玫暮线m的啟動(dòng)子包括，但不限于，逆轉(zhuǎn)錄病毒LTR；SV40啟動(dòng)子；和描述于Miller等人(1989)Biotechniques7(9):980-990中的人巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動(dòng)子，或任何其它啟動(dòng)子(例如，細(xì)胞啟動(dòng)子，諸如真核細(xì)胞啟動(dòng)子，包括，但不限于，組蛋白、polIII和β-肌動(dòng)蛋白啟動(dòng)子)。可以使用的其它病毒啟動(dòng)子包括，但不限于，腺病毒啟動(dòng)子、胸苷激酶(TK)啟動(dòng)子和B19細(xì)小病毒啟動(dòng)子。根據(jù)本文含有的教導(dǎo)，合適的啟動(dòng)子的選擇對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見的。編碼構(gòu)建體的核酸序列在合適的啟動(dòng)子的控制下?？梢允褂玫暮线m的啟動(dòng)子包括，但不限于，腺病毒啟動(dòng)子，諸如腺病毒主要晚期啟動(dòng)子；或異源啟動(dòng)子，諸如巨細(xì)胞病毒(CMV)啟動(dòng)子；呼吸道合胞病毒(RSV)啟動(dòng)子；誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，諸如MMT啟動(dòng)子，金屬硫蛋白啟動(dòng)子；熱休克啟動(dòng)子；白蛋白啟動(dòng)子；ApoA1啟動(dòng)子；人球蛋白啟動(dòng)子；病毒胸苷激酶啟動(dòng)子，諸如單純皰疹胸苷激酶啟動(dòng)子；逆轉(zhuǎn)錄病毒LTR(包括上文所述的修飾的逆轉(zhuǎn)錄病毒LTR)；β-肌動(dòng)蛋白啟動(dòng)子；和人生長(zhǎng)激素啟動(dòng)子。逆轉(zhuǎn)錄病毒質(zhì)粒載體可用于轉(zhuǎn)導(dǎo)包裝細(xì)胞系，以形成生產(chǎn)細(xì)胞系?？赡鼙晦D(zhuǎn)染的包裝細(xì)胞的實(shí)例描述于Miller(1990)HumanGeneTherapy1:5-14。所述載體可以通過本領(lǐng)域已知的任何方式轉(zhuǎn)導(dǎo)包裝細(xì)胞。此類方式包括，但不限于，電穿孔、脂質(zhì)體的使用和CaPO4沉淀。在一個(gè)替代方案中，可以將逆轉(zhuǎn)錄病毒質(zhì)粒載體封裝在脂質(zhì)體中或與脂質(zhì)偶聯(lián)，然后施用于宿主。生產(chǎn)細(xì)胞系產(chǎn)生感染性逆轉(zhuǎn)錄病毒載體顆粒，其包括編碼多肽的核酸序列。然后，可以使用此類逆轉(zhuǎn)錄病毒載體顆粒在體外或體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)真核細(xì)胞。轉(zhuǎn)導(dǎo)的真核細(xì)胞將表達(dá)編碼多肽的核酸序列?？梢员晦D(zhuǎn)導(dǎo)的真核細(xì)胞包括，但不限于，胚胎干細(xì)胞、胚胎癌細(xì)胞以及造血干細(xì)胞、肝細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、成肌細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和支氣管上皮細(xì)胞。在一些實(shí)施方案中，使用引導(dǎo)構(gòu)建體在眼中表達(dá)的基因遞送載體。用于基因遞送至眼睛的載體是本領(lǐng)域已知的，并且已經(jīng)公開于例如美國專利號(hào)6,943,153和美國專利申請(qǐng)公開號(hào)US20020194630、US20030129164、US200600627165。在一些實(shí)施方案中，通過使體液與包含構(gòu)建體的組合物在允許構(gòu)建體發(fā)揮功能來抑制補(bǔ)體活化的條件下離體接觸來抑制補(bǔ)體活化。合適的體液包括可回輸至個(gè)體的體液，諸如血液、血漿或淋巴液。親和吸附血漿分離置換法通常描述于Nilsson等人(1988)Blood58(1):38-44;Christie等人(1993)Transfusion33:234-242;Richter等人(1997)ASAIOJ.43(1):53-59;Suzuki等人(1994)Autoimmunity19:105-112;U.S.Pat.No.5,733,254;Richter等人(1993)Metabol.Clin.Exp.42:888-894;和Wallukat等人(1996)Int’lJ.Card.54:1910195.因此，本發(fā)明包括治療個(gè)體中的一種或多種本文所述的疾病的方法，其包括在允許分子發(fā)揮功能來抑制補(bǔ)體活化的條件下用包含構(gòu)建體的組合物體外(即，機(jī)體外或離體)處理所述個(gè)體的血液，以及將血液回輸至個(gè)體。單位劑量、制品和試劑盒還提供了構(gòu)建體組合物的單位劑量形式，每個(gè)劑量含有約0.01mg至約50mg，包括例如約0.1mg至約50mg、約1mg至約50mg、約5mg至約40mg、約10mg至約20mg或約15mg中任一種的構(gòu)建體。在一些實(shí)施方案中，構(gòu)建體組合物的單位劑量形式包含0.01mg-0.1mg、0.1mg-0.2mg、0.2mg-0.25mg、0.25mg-0.3mg、0.3mg-0.35mg、0.35mg-0.4mg、0.4mg-0.5mg、0.5mg-1.0mg、10mg-20mg、20mg-50mg、50mg-80mg、80mg-100mg、100mg-150mg、150mg-200mg、200mg-250mg、250mg-300mg、300mg-400mg或400mg-500mg中任一種的構(gòu)建體。在一些實(shí)施方案中，所述單位劑量形式包含約0.25mg構(gòu)建體。術(shù)語"單位劑量形式"是指適于作為個(gè)體的單位劑量的物理離散的單位，每個(gè)單位含有經(jīng)計(jì)算產(chǎn)生所需治療效果的預(yù)定量的活性物質(zhì)，以及合適的藥學(xué)載體、稀釋劑或賦形劑。這些單位劑量形式可以保存在單個(gè)或多個(gè)單位劑量的合適的包裝中，并且還可以進(jìn)一步滅菌和密封。還提供了在合適的包裝中包含本文所述的組合物的制品。適于本文所述的組合物(諸如，眼用組合物)的包裝是本領(lǐng)域已知的，并包括，例如，小瓶(諸如密封小瓶)、容器、安瓿、瓶、罐、軟包裝(例如，密封的聚酯薄膜袋或塑料袋)等。這些制品可以進(jìn)一步滅菌和/或密封。本文還提供了包含本文所述的組合物(或單位劑量形式和/或制品)的試劑盒，并且還可以包含使用所述組合物的方法(諸如本文所述的用途)的說明書。本文所述的試劑盒還可以包括從商業(yè)和使用者角度所需的其它材料，包括其它緩沖液、稀釋劑、過濾器、針、注射器與進(jìn)行本文所述的任何方法的說明書。實(shí)施例實(shí)施例1：通過使用腺病毒編程顯示的凝集素途徑在膠原抗體誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎中的必要作用材料和方法小鼠8至10周齡的WTC57BL/6雄性小鼠(n=73)用于本研究。我們獲得了最初來自MichaelCarroll博士的C4-/-小鼠和來自GregoryStahl博士的C1q/MBL-/-小鼠。我們實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)在維持C4-/-和C1q/MBL-/-C57BL/6純合小鼠的集落；來自這些小鼠的血清用于各種ELISA。WTC57BL/6小鼠獲自JacksonLaboratories。將所有小鼠在使用前稱重，并保持在具有12小時(shí)光/暗循環(huán)的氣候受控環(huán)境的屏障動(dòng)物設(shè)施中。使用過濾器頂籠，其中在每個(gè)籠具有三只小鼠。在本研究期間，所有實(shí)驗(yàn)小鼠都飼喂由科羅拉多大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物護(hù)理中心(CenterforLaboratoryAnimalCare,UniversityofColoradoSchoolofMedicine)提供的飼養(yǎng)者飼料。AdMAp44載體的構(gòu)建使用購自ThermoFisher(Waltham,MA)的人MAp44cDNA，由Welgen,Inc(Worcester,MA)產(chǎn)生人AdMAp44(AdhMAp44)構(gòu)建體。將HA-Tag(人流感血凝素，序列"YPYDVPDYA")添加至MAp44的C末端，以促進(jìn)在通過施用AdhMAp44或AdmMAp44產(chǎn)生的小鼠的循環(huán)中檢測(cè)重組MAp44。為了檢測(cè)在具有和不具有CAIA的小鼠的血清中HA的存在，使用抗HA標(biāo)簽抗體。關(guān)于本文所述的載體和特異性元件的信息見于圖10中。將額外的RGD序列添加至用于AdhMAp44、但不是AdmMAp44的構(gòu)建體，以刺激在除CAR以外的滑膜細(xì)胞中腺病毒進(jìn)入的受體(Bakker等人,2001,GeneTher.8:1785-1793)。簡(jiǎn)言之，用Xho1/Xba1切割pBSK-MAp-1-HA，并將MAp44-HA片段連接至用相同酶消化的pEntCMV穿梭載體。篩選陽性克隆并測(cè)序以進(jìn)行確認(rèn)。用LRClonaseII(Invitrogen)處理pEntCMV-MAp44-HA，并與質(zhì)粒pAd5連接。重組產(chǎn)物用于轉(zhuǎn)化大腸桿菌。培育過夜后，選擇克隆并生長(zhǎng)，并純化粘粒DNA。用PacI消化純化的粘粒DNA(2mg)，然后根據(jù)制造商的說明書用Lipofectamine2000(LifeTechnologies)轉(zhuǎn)染至293細(xì)胞中。293細(xì)胞在37℃、5％CO2下生長(zhǎng)。到轉(zhuǎn)染后7天，Ad斑塊生長(zhǎng)是明顯的。將病毒顆粒(vp)的滴度進(jìn)一步擴(kuò)增至1012vp/ml。在2個(gè)連續(xù)的氯化銫梯度上純化擴(kuò)增的Ad，然后針對(duì)含有10％甘油的PBS(pH7.4)進(jìn)行透析。從260nm處的吸光度估計(jì)純化病毒的滴度。AdhMAp44的最終滴度為1.0x1012個(gè)顆粒/ml。具有巨細(xì)胞病毒(CMV)序列和綠色熒光蛋白(GFP)的編程表達(dá)的Ad(AdGFP)用作所有CAIA研究的陰性對(duì)照。人重組MAp44如在別處詳細(xì)描述產(chǎn)生人重組MAp44(hrMAp44)(Degn等人,2009,J.Immunol.183:7371-7378)。簡(jiǎn)言之，使用PEI作為轉(zhuǎn)染試劑，用編碼人MAp44的載體轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞HEK293F細(xì)胞。通過在MBL包被的珠粒上的親和色譜純化上清液中表達(dá)的MAp44。膠原抗體誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎的誘導(dǎo)如前所述(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109;Banda等人,2010,J.Immunol.185:5598-5606)，使用懸浮于無菌PBS中的5種牛CII的mAb的混合物(Arthritomab-CIA,Chondrex)在WT小鼠中誘導(dǎo)CAIA。根據(jù)Arthritomab和LPS的供應(yīng)商建議的標(biāo)準(zhǔn)方案，WT小鼠在第0天i.p.注射4mg/小鼠的Arthritomab，且在第3天i.p.注射50μg/小鼠的來自大腸桿菌菌株0111B4的LPS(Chondrex)，以使關(guān)節(jié)炎的發(fā)展同步化。小鼠在第4天開始發(fā)展關(guān)節(jié)炎，并在第10天處死。當(dāng)分別以6mg/小鼠/i.p或50μg/小鼠/i.p.單獨(dú)i.p.注射抗CIIab或LPS時(shí)，小鼠的確發(fā)展非常輕度的瞬時(shí)關(guān)節(jié)炎并且持續(xù)幾天沒有組織學(xué)損傷(數(shù)據(jù)未顯示)(圖11A)。此外，用單獨(dú)的抗CIIab或LPS注射的小鼠發(fā)展不一致的疾病，如從患病率所顯見，并且難以評(píng)估補(bǔ)體抑制劑的因果關(guān)系(圖11B)。因此，需要注射抗膠原mAb，隨后注射LPS，以持續(xù)產(chǎn)生最少10天的伴隨組織學(xué)損傷的疾病，且觀察到補(bǔ)體抑制劑的作用(圖11A)。根據(jù)我們先前公開的研究(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109;Banda等人,2010,J.Immunol.185:5598-5606)，通過不知道治療的觀察者每天檢查臨床疾病活動(dòng)(CDA)，直到第10天。在Ad研究中，WT小鼠在第-5天、第0天和第3天i.p.注射AdhMAp44(以較高劑量(1x1011個(gè)顆粒)或較低劑量(5.0x1010個(gè)顆粒))、AdGFP(1x1011個(gè)顆粒)或單獨(dú)的PBS（對(duì)每個(gè)治療n=5）。在第0天照常注射Arthritomab。對(duì)于局部關(guān)節(jié)注射實(shí)驗(yàn)，在第-5天、第0天(抗CIImAb注射后)和第3天(LPS注射后)在右膝關(guān)節(jié)中注射含有5.0x1010個(gè)AdmMAp44或AdGFP顆粒的50μl。羅斯河病毒誘導(dǎo)的炎性關(guān)節(jié)炎的小鼠模型如前所述(Morrison等人,2007,J.Virol.81:5132-5143;Morrison等人,2008,J.Virol.82:11263-11272;Morrison等人,2006,J.Virol.80:737-749)，三至四周齡的WTC57BL/6小鼠在左后足墊中接種10μl體積中的103PFU的羅斯河病毒(RRV)。如前所述(Morrison等人,2007,J.Virol.81:5132-5143;Morrison等人,2008,J.Virol.82:11263-11272;Morrison等人,2006,J.Virol.80:737-749)，通過評(píng)估握力\后肢無力和改變的步態(tài)來確定疾病得分。在RRV誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎中，與用于膝蓋注射的CAIA研究中使用的劑量相同的病毒顆粒劑量（即在第-3天、第0天和第3天在右后足墊中5x1010）注射AdhMAp44和AdGFP。所有關(guān)節(jié)的組織病理學(xué)和免疫組織化學(xué)根據(jù)我們公開的方法(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109;Banda等人,2010,Clin.Exp.Immunol.159:100-108)，將來自在第10天具有CAIA的WT小鼠的兩個(gè)前肢的膝關(guān)節(jié)和右后肢膝關(guān)節(jié)、踝和爪固定于4％多聚甲醛中，并通過免疫組織化學(xué)染色(IHS)檢查甲苯胺藍(lán)(T-blue)和C3沉積。此外，IHS用于檢測(cè)來自用AdhMAp44和AdGFP轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠的滑膜和膝關(guān)節(jié)切片中的整聯(lián)蛋白αvβ5(抗體稀釋度1:500)。蘇木精(VWR)染色用于顯示滑膜的存在。根據(jù)公開的標(biāo)準(zhǔn)(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109;Banda等人,2010,Clin.Exp.Immunol.159:100-108)，甲苯胺藍(lán)染色用于評(píng)估組織病理學(xué)用于確定炎癥、關(guān)節(jié)翳形成和軟骨和骨損傷。切割7μm切片用于組織學(xué)，并處理用于T-blue和C3IHS。在光學(xué)顯微鏡下以20X或10X的放大倍數(shù)以盲法方式觀察所有載片的組織病理學(xué)和C3沉積，并根據(jù)公開的標(biāo)準(zhǔn)(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109;Banda等人,2010,Clin.Exp.Immunol.159:100-108)進(jìn)行評(píng)分。來自C57BL/6背景下的未處理的C3-/-小鼠的膝關(guān)節(jié)用作陰性對(duì)照。檢測(cè)器官中的GFP和HA標(biāo)簽的免疫組織化學(xué)將來自在第10天具有和不具有CAIA的WT小鼠的右后肢的膝關(guān)節(jié)、肝臟、脾臟和腎臟固定于4％多聚甲醛中，并通過IHS檢查GFP。使用抗GFP多克隆兔(稀釋度1:200)和二抗(山羊抗兔，AlexaFlour488(1:200稀釋度)(Invitrogen))來檢測(cè)GFP。使用Olympus(型號(hào)-BX51)顯微鏡在紫外光下觀察切片。在UV光下綠色熒光的存在表明組織中存在GFP表達(dá)。此外，我們檢查來自在第10天i.p.注射AdhMAp44和AdmMAp44的小鼠的膝關(guān)節(jié)的滑膜中HA的存在。在處死時(shí)，收集肝臟、脾臟、腎臟和膝關(guān)節(jié)并將其固定于10％中性緩沖的福爾馬林中，處理并切片。在用抗HA抗體(稀釋度1:1000)(CellSignal)染色且使用抗兔EnVisionplusPolymerHRP-綴合和隨后的DABplusChromogen(Dako)顯色，通過光學(xué)顯微鏡使切片可視化并拍照。體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的檢查和蛋白印跡分析由于AdhMAp44和AdmMAp44構(gòu)建體均使用HA標(biāo)簽，我們?cè)趇.p.注射后第-5天或第-2天、第0天、第3天和第10天使用蛋白印跡分析分析血清中HA的存在。類似地，我們使用蛋白印跡分析分析在第5天、第0天、第3天和第10天在膝關(guān)節(jié)中注射AdmMAp44的小鼠的血清中HA的存在。蛋白印跡分析使用10％Bis-Tris還原SDS凝膠用于分離小鼠血清中的蛋白。轉(zhuǎn)移后，將印跡在40℃下與對(duì)HA特異性的兔Ab(稀釋度1:1000)(CellSignal)培育過夜。使用抗兔HRP綴合的Ab作為二級(jí)Ab(稀釋度1:2000)(HycultBiotech)。將印跡在1xPBS0.5%Tween20中洗滌3x10分鐘，并使用SuperSignalWestPico化學(xué)發(fā)光底物(ThermoScientific)的1:1混合物顯色3分鐘。血清中在約43-50kDa的HA和MAp44條帶的存在鑒定了AdhMAp44或AdmMAp4在循環(huán)中的存在，表明成功的合成和分泌。我們還評(píng)估了表達(dá)的hMAp44蛋白是否具有功能活性，即其是否與MBL結(jié)合。這通過將血清與甘露糖-瓊脂糖珠粒培育來檢查，所述甘露糖-瓊脂糖珠粒結(jié)合MBL，因此應(yīng)當(dāng)通過其與MBL的相互作用間接結(jié)合MAp44。如上所述，從珠粒洗脫的材料通過蛋白印跡分析來分析，并用抗HAAb探測(cè)。mRNA表達(dá)水平的定量RT-PCR在誘導(dǎo)后第10天從具有CAIA的小鼠收獲膝關(guān)節(jié)。使用RNAeasymini試劑盒(Qiagen)從在第-5天、第0天和第3天i.p.注射PBS、AdhMAp44LD、AdhMAp44HD或AdGFP的所有實(shí)驗(yàn)小鼠的左膝關(guān)節(jié)提取總RNA。根據(jù)公開的方法(Schmittgen和Livak,2008,Nat.Protoc.3:1101-1108)，通過RT-PCR使用40個(gè)循環(huán)分析樣品中小鼠MBL-A、MBL-C、無花果酶-A(Ficolin-A)(FCN-A)、MASP-1、MASP-2、MASP-3、FD、TNF-α、IL-1α和IL-1β的存在。使用基于cDNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線分析所有RT-PCR數(shù)據(jù)。通過分別使用來自小鼠脂肪組織(對(duì)于FDL)和肝臟(對(duì)于MBL-A、MBL-C、FCN-A、TNF-α、IL-1α和IL-1β以及MASP)的mRNA來構(gòu)建編碼FD、MASP-1、MASP-2和MASP-3的mRNA的標(biāo)準(zhǔn)曲線。平行地，還確定來自沒有CAIA和沒有任何治療的周齡匹配的WT小鼠的膝關(guān)節(jié)的各種目標(biāo)的基線mRNA水平。在請(qǐng)求后，用于測(cè)定mRNA濃度的引物序列可得自相應(yīng)的作者。人MAp44測(cè)定根據(jù)最近公開的研究(Degn等人,2010,J.Immunol.Methods361:37-50)，使用夾心型免疫測(cè)定方法來測(cè)定注射PBS、AdGFP或AdhMAp44(低劑量或高劑量)的WT小鼠的循環(huán)中存在的人MAp44的絕對(duì)水平。該測(cè)定法對(duì)于人MAp44是高度特異性和敏感的，并且可以用于確定小鼠血清中人MAp44的水平。為了測(cè)量MAp44的水平，將在第-5天、第0天、第3天和第10天獲得的來自每只小鼠的血清1:15稀釋于結(jié)合緩沖液中。使用具有已知水平的人MAp44的標(biāo)準(zhǔn)人血漿合并物來建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。如所述(Degn等人,2010,J.Immunol.Methods361:37-50)，一式兩份測(cè)試所有樣品，并且在每個(gè)測(cè)定中包括三個(gè)質(zhì)量控制。血清中C5a的絕對(duì)水平的測(cè)量根據(jù)我們公開的方法(Banda等人,2012,J.Immunol.188:1469-1478)，使用標(biāo)準(zhǔn)ELISA方案測(cè)量注射AdhMAp44或AdGFP或PBS的WT小鼠中疾病發(fā)展之前(第-5天)和之后(第10天)的C5a的血清水平。血清中LP誘導(dǎo)的C3的測(cè)量根據(jù)前述方法(Banda和Takahashi,2014,Methodsinmolecularbiology1100:365-371)，通過使用甘露聚糖顆粒預(yù)包被的ELISA板，確定使用來自在第10天用PBS或AdGFP或AdhMAp44LD或AdhMAp44HD治療的CAIA小鼠的血清的LP誘導(dǎo)的C3活化。使用來自沒有CAIA的WT小鼠的血清作為陽性對(duì)照。使用來自C3-/-和MBL/Df-/-小鼠的血清作為陰性對(duì)照。重組人MAp44對(duì)LPS誘導(dǎo)的C3活化的影響的分析通過使用ELISA確定重組人MAp44(rhMAp44)經(jīng)由LP和AP對(duì)LPS誘導(dǎo)的C3活化的影響。將96孔ELISA板用5μg/孔來自大腸桿菌菌株0111B4的LPS預(yù)包被。將來自無疾病的WT小鼠的血清稀釋(1:10)，并用GBV+緩沖液(Ca++-充分緩沖液)或Mg2+EGTA緩沖液(Ca++-缺陷緩沖液)中的rhMAp44(10μg/10μl血清)預(yù)處理30分鐘。根據(jù)由(Kimura等人,2008,Blood111:732-740)描述的方法測(cè)量LPS誘導(dǎo)的C3活化。平行地，來自WT小鼠的血清也用作為陽性對(duì)照的抑制性抗因子B抗體(4μg/10μl血清)預(yù)處理，以抑制特異性來自AP的C3活化。使用來自C3-/-小鼠的血清作為陰性對(duì)照，并且沒有預(yù)期的C3活化。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析使用GraphPadPrism?4統(tǒng)計(jì)學(xué)程序，使用Student'st檢驗(yàn)計(jì)算p-值。所有圖和柱狀圖中的數(shù)據(jù)顯示為平均值+SEM，其中p<0.05被認(rèn)為是顯著的。使用Pearson相關(guān)性來計(jì)算組織學(xué)參數(shù)C3沉積和CDA間的r2值。使用w-統(tǒng)計(jì)學(xué)的零假設(shè)的初步分析表明數(shù)據(jù)是正態(tài)分布的。結(jié)果人AdMAp44防止具有CAIA的小鼠中的疾病的起始AdGFP、AdhMAp44和AdmMAp44的產(chǎn)生在材料和方法中詳細(xì)描述，并在圖10中說明。為了確定人MAp44表達(dá)的效果，我們檢查了用較高和較低劑量的AdhMAp44（與AdGFP和單獨(dú)的PBS緩沖液相比）治療的WT小鼠中CAIA的發(fā)展。在第-5天、第0天和第3天，用AdhMAp44、AdGFP或單獨(dú)的PBS治療小鼠。在第0天i.p.注射抗CIImAb。在第10天，每種條件下的疾病患病率為100％(圖1A)。與注射等效更高劑量的AdGFP的WT小鼠相比，注射更高(HD)或更低劑量(LD)的AdhMAp44的WT小鼠中的CDA分別顯著降低了81％和75％(圖1B)。具體地，用HD和LD的AdhMAp44治療的小鼠中，在第10天的CDA分別為2.0±0.4和2.6±0.4。相比之下，在用PBS和AdGFP治療的小鼠中，在第10天的CDA分別為10.6±1.8和8.8±2.0。這些結(jié)果證明，雖然用任一劑量的AdhMAp44預(yù)治療都不能防止CAIA，但其顯著降低了嚴(yán)重性。與用AdGFP治療的小鼠相比，在用HD的AdhMAp44治療的小鼠中，在總體組織病理學(xué)評(píng)分(p<0.034)以及炎癥(p<0.0080)、關(guān)節(jié)翳(p<0.006)、軟骨損傷(p<0.007)和骨損傷(p<0.009)的個(gè)體評(píng)分中看到顯著減少(圖1C)。在用LD的AdhMAp44治療的小鼠中觀察到幾乎相同的結(jié)果(圖1C)。CDA和組織學(xué)評(píng)分之間的相關(guān)性系數(shù)(r2)是高度陽性的(0.99)。在分別i.p.注射AdGFP或AdhMAp44(HD)的小鼠的膝關(guān)節(jié)(圖2A，C)和踝(圖2B，D)中顯示了組織學(xué)的代表性組織切片。與注射AdGFP或PBS的小鼠相比，在注射任一劑量的AdhMAp44的小鼠中，滑膜和軟骨中C3沉積的水平也顯著降低(圖1D)。與用AdGFP治療的小鼠相比，在用LD的AdhMAp44治療的小鼠中，在總C3沉積評(píng)分以及滑膜(p<0.001)和軟骨(p<0.003)的個(gè)體評(píng)分中看到顯著減少(圖1D)。在用HD的AdhMAp44治療的小鼠中看到幾乎相同的結(jié)果(圖1D)?？傮w而言，在用LD或HD的AdhMAp44治療的小鼠的膝關(guān)節(jié)中，C3沉積減少超過90％。在分別i.p.注射AdGFP或AdhMAp44(HD)的小鼠的膝關(guān)節(jié)(圖2E，G)和踝關(guān)節(jié)(圖2F，H)中顯示了C3沉積的代表性組織切片。與AdGFP或PBS相比，用LD或HD的AdhMAp44治療的小鼠中，在疾病發(fā)展之前、期間和之后對(duì)小鼠的體重沒有影響(圖11C)。AdhMAp44對(duì)血清中的C5a水平的影響與AdGFP轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠相比，使用分別使用LD或HD的AdhMAp44治療的小鼠的血清，注意到第10天時(shí)C5a水平降低22%(p<0.045)和45%(p<0.001)(圖3A)。在第-5天，即在治療之前，C5a的絕對(duì)水平是相同的，并且如預(yù)期在所有治療組中沒有顯著差異。CAIA的血清中C5a的絕對(duì)水平的降低與所述模型中AdMAp44治療對(duì)補(bǔ)體活化的預(yù)期效果是一致的。AdhMAp44對(duì)甘露聚糖誘導(dǎo)的C3活化的影響甘露聚糖顆粒通過LP特異性活化C3。來自分別用AdhMAp44LD和AdhMAp44HD(相比于AdGFP)治療的小鼠的血清誘導(dǎo)的C3活化在第10天減少40％和49％(圖3B)。WT血清的O.D.值為1.187±0.108，PBS為1.383±0.035，AdGFP為1.258±0.078，AdhMAp44LD為0.750±0.086(相比于AdGFP，p<0.002)，且AdhMAp44HD為0.646±0.122(相比于AdGFP，p<0.003)。相比之下，在來自用PBS或單獨(dú)的AdGFP治療的小鼠的血清中未看到C3活化的減少。如預(yù)期，使用來自C3-/-和MBL/Df-/-小鼠的血清沒有C3活化。使用來自C3-/-和MBL/Df-/-小鼠的血清作為ELISA的陰性對(duì)照。這些結(jié)果顯示存在于CAIA小鼠的循環(huán)中的重組人MAp44影響LP的活化。重組人MAp44對(duì)LPS誘導(dǎo)的C3沉積的影響已知LPS通過LP和AP活化補(bǔ)體。在被動(dòng)輸注抗CIImAb后，LPS用于我們的CAIA的疾病模型中，雖然LPS加重疾病的機(jī)制是未知的。存在rhMAp44可抑制LPS通過補(bǔ)體系統(tǒng)的LP或AP對(duì)CAIA引發(fā)的增強(qiáng)作用的可能性。我們通過在Ca++-充分緩沖液（使得所有3個(gè)補(bǔ)體途徑有效）或具有Mg++EGTA的Ca++-缺陷緩沖液(其中只有AP具有活性)存在下使用LPS-包被的板和血清在體外誘導(dǎo)C3沉積來檢查這個(gè)問題。在Ca++存在下的LPS誘導(dǎo)的C3沉積從2.28±0.10O.D.（在rhMAp44不存在下）減少至1.45±0.13O.D.（在rhMAp44存在下），減少36%(p<0.002)，在抗FBmAb存在下，減少至0.679±0.042，減少70％(p<0.001)(圖2C)。在Ca++-缺陷緩沖液中觀察到更顯著的結(jié)果，其中沒有治療的LPS誘導(dǎo)的C3沉積的O.D.值為0.161±0.017，rhMAp44為0.044±0.003(p<0.0004)，抗FBmAb為0.027±0.003(p<0.0002)(圖2D)；這些減少分別為72％和83％。這些結(jié)果表明rhMAp44可以主要通過AP抑制補(bǔ)體的誘導(dǎo)。在注射AdhMAp44后，人MAp44存在于小鼠的循環(huán)中使用ELISA發(fā)現(xiàn)，在來自用LD或HD的AdhMAp44治療的具有CAIA的小鼠的第-5天、第0天、第3天和第10天的血清中存在人MAp44，但在來自注射PBS或單獨(dú)的AdGFP的小鼠的血清中不存在人MAp44(圖4A-D)。在第0天，在用LD或HD劑量AdhMAp44治療的小鼠的循環(huán)中看到人MAp44水平的巨大的高度顯著的增加(P<0.001)(圖4)。在第3天，分別用LD或HD的AdhMAp44治療的小鼠的循環(huán)中，人MAP44的水平分別為808.6±170.54(ng/ml)和1841.0±1173.9(ng/ml)(圖4C)。在第10天，分別用LD或HD的AdhMAp44治療的小鼠的循環(huán)中，人MAp44的水平分別為238.39±70.66(ng/ml)和127.25±56.08(ng/ml)(圖4D)。在第10天，LD和HD的AdhMAp44之間的人MAp44水平的差異不是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的(p>0.5)。如預(yù)期，使用來自無任何治療的WT小鼠的血清沒有檢測(cè)到人MAp44(數(shù)據(jù)未顯示)。在小鼠的第0天、第3天和第10天的循環(huán)中人MAp44的存在證明，Ad靶向的細(xì)胞被AdhMAp44有效轉(zhuǎn)導(dǎo)以產(chǎn)生人MAp44。AdmMAp44治療還基本上預(yù)防具有CAIA的小鼠中的臨床疾病活動(dòng)為了確認(rèn)AdhMAp44的影響不是由于人蛋白在小鼠中的非生理影響，還檢查了小鼠MAp44表達(dá)的影響。為了評(píng)價(jià)這個(gè)問題，如材料和方法中所述，用AdmMAp44和對(duì)照AdGFPi.p.注射小鼠。在第10天，注射AdGFP和AdmMAp44的WT小鼠中的CDA分別為9.0+1.65和3.4+1.60(圖5B)。因此，在第10天，與用AdGFP相同預(yù)處理的小鼠相比，在用AdmMAp44預(yù)治療的小鼠中，CDA減少60%(p<0.026)。在注射AdGFP或AdmMAp44的WT小鼠中，在第10天的疾病的患病率分別為100％和60％(圖5A)。與AdmMAp44相比，對(duì)用AdGFP治療的小鼠的重量沒有顯著影響(圖11D)。這些數(shù)據(jù)證明，與AdhMAp44類似，用AdmMAp44治療防止CAIA的發(fā)展。外源性小鼠MAp44表達(dá)防止CAIA中的關(guān)節(jié)中的組織學(xué)變化和C3沉積為了進(jìn)一步檢查AdmMAp44的治療效果，在來自i.p.注射AdGFP或AdmMAp44的小鼠的固定關(guān)節(jié)中進(jìn)行組織病理學(xué)分析。與AdGFP相比，在用AdmMAp44治療的小鼠中，在總體組織病理學(xué)評(píng)分(p<0.023)以及炎癥(p<0.040)、關(guān)節(jié)翳(p<0.015)、軟骨損傷(p<0.021)和骨損傷(p<0.026)的個(gè)體評(píng)分中看到顯著減少(圖6A)。CDA和組織學(xué)評(píng)分之間的相關(guān)性系數(shù)(r2)為0.93(圖6B)。與用AdGFP轉(zhuǎn)導(dǎo)相比，用AdmMAp44轉(zhuǎn)導(dǎo)的小鼠中滑膜和軟骨中的C3沉積的水平也顯著降低(p<0.02)(圖6C)。CDA和C3沉積之間的相關(guān)性系數(shù)(r2)是高度陽性的(0.95)(圖6D)。在i.p.注射AdGFP或AdmMAp44的小鼠的膝關(guān)節(jié)(圖12A，C)和踝(圖12B，D)中顯示了代表性組織切片。在注射AdGFP或AdmMAp44的小鼠的膝關(guān)節(jié)(圖12E，G)和踝(圖12F，H)中顯示了C3沉積的代表性組織切片。注射至右膝關(guān)節(jié)中的AdmMAp44的全身性影響在第-5天、第0天和第3天(在第0天注射抗CIImAb)在CAIA的發(fā)展期間，AdmMAp44或AdGFP在右膝中注射三次；未注射的左膝充當(dāng)對(duì)照。與注射AdGFP的小鼠相比，在用AdmMAp44預(yù)治療CAIA的小鼠中的所有指定關(guān)節(jié)中的總CDA顯著減少55％；AdGFP和AdmMAp44的CDA值分別為10.1+1.26和4.5+1.40(p<0.008)(圖7A)。在用AdGFP或AdmMAp44預(yù)治療的CAIA小鼠中，在第10天的疾病的患病率分別為100％和60％(圖7B)。在右膝關(guān)節(jié)中的注射導(dǎo)致該關(guān)節(jié)中的CDA減少(圖7C)。在右膝關(guān)節(jié)中注射后，在左后肢(圖7D)、右前爪(圖7E)和左前爪(圖7F)中也觀察到CDA的減少。該實(shí)驗(yàn)在右膝中以相同的注射方案重復(fù)兩次，并合并數(shù)據(jù)。因此，除了證明AdmMAp44預(yù)防局部注射的右膝關(guān)節(jié)內(nèi)的小鼠中的CAIA之外，影響是全身性的，因?yàn)樗嘘P(guān)節(jié)中的CDA基本上減少。AdhMAp44治療降低了羅斯河病毒誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎和肌炎的嚴(yán)重性為了評(píng)估AdhMAp44在另一個(gè)LP依賴性肌肉骨骼炎性疾病模型中的影響，我們使用了羅斯河病毒(RRV)誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎和肌炎的小鼠模型(Morrison等人,2006,J.Virol.80:737-749)(圖13)。以前的研究已經(jīng)表明補(bǔ)體系統(tǒng)的LP在RRV誘導(dǎo)的疾病的發(fā)展中的作用，因?yàn)榕cWT小鼠相比，C3-和MBL-缺陷小鼠表現(xiàn)出降低的RRV誘導(dǎo)的疾病嚴(yán)重性和組織破壞(Morrison等人,2007,J.Virol.81:5132-5143;Morrison等人,2006,J.Virol.80:737-749)。為了評(píng)估人MAp44是否可以減輕RRV誘導(dǎo)的疾病，在第-3天、第0天和第3天在小鼠的右后足墊中施用AdhMAp44或AdGFP，在第0天在左后足墊中接種RRV。如所示，用AdhMAp44預(yù)治療顯著(p<0.05)降低RRV誘導(dǎo)的疾病體征的嚴(yán)重性(圖13A)。對(duì)重量沒有影響(圖13B)。在AdmMAp44或AdhMAp44治療后循環(huán)中存在HA標(biāo)記的小鼠MAp44在誘導(dǎo)CAIA之前和之后，在注射AdmMAp44或AdhMAp44的小鼠中，使用針對(duì)HA標(biāo)簽的ELISA檢查血清中Ad來源的小鼠或人MAp44的存在(圖8)。在第-2天、第0天、第3天和第10天使用針對(duì)HA標(biāo)簽的蛋白印跡分析檢查來自i.p.注射AdmMAp44的小鼠的血清(圖8A)。同樣，在第-5天、第0天、第3天和第10天使用針對(duì)HA標(biāo)簽的蛋白印跡分析檢查來自右膝關(guān)節(jié)中注射AdmMAp44的小鼠的血清(圖8B)。約43-50kDa的條帶存在于i.p.注射AdmMAp44的小鼠中，但如預(yù)期在注射前第-2天缺失(圖8A，泳道2)。類似地，約43-50kDa的條帶存在于膝關(guān)節(jié)中注射AdmMAp44的小鼠的血清中，但其在注射前第-5天不存在(圖7B，泳道2)。使用來自未治療的無疾病小鼠的血清未檢測(cè)到HA(圖8A、B，泳道1)。在第0天、第3天和第10天血清中HA的存在清楚地表明小鼠重組MAp44存在于循環(huán)中。此外，在i.p.施用AdhMAp44后產(chǎn)生的人MAp44顯然是功能性的，因?yàn)槠浣Y(jié)合MBL，如使用甘露聚糖-瓊脂糖珠粒從血清拉下HA標(biāo)記的蛋白所確認(rèn)(圖8C)。這些結(jié)果還顯示AdmMAp44或AdhMAp44有效地轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞并導(dǎo)致體內(nèi)重組蛋白表達(dá)，而無論注射途徑。我們使用蛋白印跡分析來檢測(cè)HA標(biāo)簽，因?yàn)闇y(cè)量小鼠MAp44的ELISA不可用。通過檢測(cè)GFP和HA檢測(cè)膝關(guān)節(jié)滑膜中的體內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)效率為了具體確定具有CAIA的小鼠的膝關(guān)節(jié)中的滑膜是否用AdmMAp44轉(zhuǎn)導(dǎo)，我們使用IHS。小鼠i.p.注射AdGFP或AdmMAp44后，在膝關(guān)節(jié)的滑膜中評(píng)估GFP和HA標(biāo)簽的存在(圖9)。我們發(fā)現(xiàn)，在注射AdGFP后第10天，在具有CAIA的小鼠的膝關(guān)節(jié)中，GFP通過IHS是清楚可見的(圖9C)。相比之下，在注射PBS(圖9A)或AdmMAp44(圖9E)的小鼠中沒有綠色熒光可見。然而，我們發(fā)現(xiàn)，HA標(biāo)簽在i.p.注射AdmMAp44的小鼠的細(xì)胞中可檢測(cè)為沙粒(圖9F)，但在注射PBS(圖9B)或AdGFP(圖9D)的小鼠中則沒有。這些數(shù)據(jù)顯示AdmMAp44轉(zhuǎn)導(dǎo)滑膜中的細(xì)胞亞群。我們不知道細(xì)胞的確切身份，但它們可以是滑膜細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞和/或巨噬細(xì)胞，因?yàn)樵贑AIA中存在這些細(xì)胞群體(Banda等人,2012,J.Immunol.188:1469-1478)。AdMAp44對(duì)具有CAIA的膝關(guān)節(jié)中的凝集素、MASP、FD和細(xì)胞因子mRNA水平的影響為了確定人MAp44表達(dá)對(duì)MBL-A、MBL-C、FCN-A、MASP-1、MASP-2、MASP-3和FD的表達(dá)以及促炎細(xì)胞因子的影響，我們測(cè)量在第10天來自i.p.注射三次PBS、AdGFP、AdhMAp44LD或AdhMAp44HD的具有CAIA的小鼠的膝關(guān)節(jié)的mRNA水平(表2)。在沒有CAIA和沒有任何治療的小鼠的膝關(guān)節(jié)中存在所有目標(biāo)的最低基線mRNA水平(表2)。使用肝臟作為陽性對(duì)照以檢查所有10種目標(biāo)的mRNA水平。與AdGFP治療的小鼠相比，在用LD或HD的AdhMAp44治療的小鼠的膝關(guān)節(jié)中FCN-A的mRNA水平分別減少42％和60％；這種降低是顯著的(對(duì)于LD，P<0.0017，對(duì)于HD，P<0.08)。在用PBS、AdGFP、AdhMAp44LD或AdhMAp44HD治療的小鼠的膝關(guān)節(jié)中，在40個(gè)PCR循環(huán)以下，存在MBL-A或MBL-C的mRNA的最低水平。與注射AdGFP或PBS的小鼠相比，在注射任一劑量的AdhMAp44的小鼠的膝關(guān)節(jié)中的MASP-1、MASP-2、MASP-3和FD的mRNA水平存在統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的(p<0.05)減少。在用LD或HD的AdhMAp44治療的小鼠的膝關(guān)節(jié)中，TNF-α、IL-1α和IL-1β的mRNA水平也分別存在66％、87％和85％的顯著減少(p<0.02或更大)(表2)。這些mRNA數(shù)據(jù)顯示用AdhMAp44治療CAIA小鼠降低了關(guān)節(jié)中FCN-A、FD和MASP以及促炎細(xì)胞因子的mRNA水平。表2：具有和沒有CAIA的WT小鼠的膝關(guān)節(jié)中的因子D、MASP和細(xì)胞因子的mRNA11數(shù)據(jù)表示為基于所示小鼠數(shù)（n）的pg/ng18srRNA與平均值±SEM。用PBS（n=5）、AdGFP（n=5）、AdhMAp44LD（n=5）或AdhMAp44HD（n=5）治療的CAIA小鼠。2來自無CAIA且無任何治療的WT小鼠的各種mRNA目標(biāo)的基線水平（n=4）。3LD=低劑量，4HD=高劑量。5MBL-A和MBL-C的mRNA水平非常低。來自WT小鼠的肝臟用作陽性對(duì)照以測(cè)量mRNA水平（數(shù)據(jù)未顯示）。將用AdhMAp44LD或AdhMAp44HD處理的小鼠中的不同mRNA的所有p-值與用AdGFP處理的WT小鼠的相應(yīng)值進(jìn)行比較。每欄中已經(jīng)顯示與用AdGFP處理的小鼠相比用AdhMAp44處理的小鼠中的mRNA水平的百分比（%）減少。在用AdGFP和AdhMAp44LD或AdhMAp44HD處理的小鼠之間比較p值。p<0.05被認(rèn)為是統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的。討論通過使用人和小鼠MAp44的Ad編程表達(dá)，這些研究已經(jīng)顯示補(bǔ)體系統(tǒng)的LP在CAIA發(fā)展中的意想不到的重要作用。用腺病毒表達(dá)的MAp44預(yù)防臨床疾病與軟骨和滑膜C3沉積的減少、組織學(xué)損傷評(píng)分的顯著改善以及LP和AP組分以及促炎細(xì)胞因子的局部mRNA水平的降低相關(guān)。人和小鼠MAp44都似乎在改善疾病中是有效的，并且兩種分子都是功能性的，如通過在體內(nèi)與MBL結(jié)合所評(píng)估。使用全身和局部關(guān)節(jié)內(nèi)注射，用Ad治療是有效的，在后一種情況中發(fā)現(xiàn)的全身改善可能是由于循環(huán)重組MAp44的最終效果?？傊?，我們的研究已經(jīng)顯示LP在補(bǔ)體活化的起始中的中心作用，并且對(duì)炎性關(guān)節(jié)炎的分子發(fā)病機(jī)制的理解必須擴(kuò)展以并入LP的作用。使用MBL-A/C或C4缺陷的小鼠的現(xiàn)有研究已經(jīng)證明對(duì)CAIA中關(guān)節(jié)損傷的發(fā)展沒有影響。MBL是LP內(nèi)的主要模式識(shí)別分子，并且LP活化C3的主要方式是通過MASP-1-和MASP-2介導(dǎo)的C4和C2的切割以產(chǎn)生共享的CP/LPC3轉(zhuǎn)化酶C4b2b。MBL-A/C或C4的缺失對(duì)CAIA中組織損傷的進(jìn)展的不存在明顯影響已經(jīng)表明其對(duì)LP不存在主要作用。然而，最近的發(fā)現(xiàn)表明可能在LP的起始中重要的額外模式識(shí)別分子的存在(Kawai等人,2002,Bioscience,biotechnology,andbiochemistry66:2134-2145)。還參見Matsushita和Fujita,1995,Immunobiology194:443-448,Presanis等人,2004,Mol.Immunol.40:921-929,和Degn等人,2009,J.Immunol.183:7371-7378。MAp44以nM親和力與MBL和無花果酶相互作用并形成Ca2+依賴性同二聚體(Skjoedt等人,2010,J.Biol.Chem.285:8234-8243)。MAp44通過競(jìng)爭(zhēng)性抑制或置換、破壞活化復(fù)合物、因此損害LP介導(dǎo)的補(bǔ)體活化來阻斷MBL和無花果酶與MASP之間的相互作用(Degn等人,2013,J.Immunol.191:1334-1345)。來自體外結(jié)構(gòu)和功能研究的結(jié)果已經(jīng)通過體內(nèi)研究證實(shí)，所述體內(nèi)研究顯示MAp44減弱MBL-A/C依賴性模型中的心肌損傷和動(dòng)脈血栓形成(Pavlov等人,2012,Circulation126:2227-2235)。因此，建議MAp44作為L(zhǎng)P的天然體內(nèi)內(nèi)源性抑制劑(Pavlov等人,2012,Circulation126:2227-2235)。雖然CAIA模型不需要MBL-A/C接合，但我們假設(shè)如果MAp44抑制其它膠原凝素-MASP相互作用，則其可以影響小鼠中CAIA的發(fā)展。由于大量純化的MAp44蛋白不可用于實(shí)驗(yàn)，我們使用AdhMAp44和AdmMAp44來產(chǎn)生人和小鼠HA標(biāo)記的MAp44的持續(xù)體內(nèi)生產(chǎn)來用于CAIA研究。我們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)小鼠用AdhMAp44(相比于AdGFP)治療時(shí)，通過LP的C3活化減少超過40％。人血清中MAp44的濃度為1.7μg/ml(Degn等人,2010,J.Immunol.Methods361:37-50;Skjoedt等人,2010,J.Biol.Chem.285:8234-8243)。雖然小鼠MAp44的水平是未知的，但顯著的臨床效果的證明顯示我們已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了治療有效劑量。這是由于以下事實(shí)：僅僅在第-5天單次注射AdhMAp44，在第0天MAp44的水平存在巨大的1000倍增加，這些數(shù)據(jù)與MAp44的蛋白印跡分析一致。使用在10天時(shí)（這是通過拉下實(shí)驗(yàn)評(píng)估的較低水平的點(diǎn)）獲得的血清測(cè)量的人MAp44的水平在100-300ng/ml范圍內(nèi)。選擇腺病毒5型作為本研究的遞送載體，因?yàn)槠涫褂每滤_奇-腺病毒受體(CAR，細(xì)胞粘附分子)來結(jié)合細(xì)胞(Bakker等人,2001,GeneTher.8:1785-1793)，隨后通過Arg-Gly-Asp(RGD)序列與整聯(lián)蛋白αvβ5和αvβ3的結(jié)合進(jìn)行內(nèi)化(Bai等人,1993,J.Virol.67:5198-5205;Mathias等人,1994,J.Virol.68:6811-6814;Wickham等人,1993,Cell73:309-319)?；ぜ?xì)胞在其表面上表達(dá)CAR或RGD結(jié)合整聯(lián)蛋白，其由腺病毒使用以進(jìn)入細(xì)胞。我們通過使用FACS分析發(fā)現(xiàn)，源自具有CIA的小鼠的滑膜的成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞(FLS)細(xì)胞系在其表面上表達(dá)顯著水平(約60％)的整聯(lián)蛋白αvβ5(數(shù)據(jù)未顯示)。IHS數(shù)據(jù)還顯示RGD結(jié)合整聯(lián)蛋白在具有和沒有關(guān)節(jié)炎的小鼠滑膜中高度表達(dá)(數(shù)據(jù)未顯示)(Nikkari等人,1995,J.Rheumatol.22:16-23;Pirila和Heino,1996,J.Rheumatol.23:1691-1698;Rinaldi等人,1997,Ann.Rheum.Dis.56:729-736)，并且在構(gòu)建體中包括RGD序列顯著改善進(jìn)入滑膜細(xì)胞的遞送(Heja等人,2012,Proc.Natl.Acad.Sci.USA109:10498-10503)，因?yàn)槭┯脹]有RGD的AdmMAp44，雖然部分減弱CAIA，但其不是高度統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的(數(shù)據(jù)未顯示)。因此，AdMAp44中的RGD序列充當(dāng)有效遞送載體以將AdMAp44歸巢于小鼠膝關(guān)節(jié)中的滑膜，而不影響疾病本身，因?yàn)锳dGFP也含有RGD。例如，含有小鼠白介素1受體拮抗劑(mIL-1Ra)的腺病毒抑制膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(CIA)(Bakker等人,2001,GeneTher.8:1785-1793)，并且已經(jīng)顯示攜帶人脂聯(lián)素APN(Ad-APN)基因的Ad載體顯著減少膝關(guān)節(jié)中的CIA和C3沉積(Ebina等人,2009,Biochem.Biophys.Res.Commun.378:186-191)。CAIA是研究LP的作用的合適模型。補(bǔ)體系統(tǒng)（先天免疫的一部分）保護(hù)免受侵入性病原體，而且在自身免疫和炎癥疾病諸如RA的病理過程中起核心作用。我們的研究先前已經(jīng)顯示在CAIA中，AP是組織損傷發(fā)展的主要貢獻(xiàn)者(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912)。另外，MASP-1和MASP-3切割被稱為pro-FD的FD酶原(Takahashi等人,2010,J.Exp.Med.207:29-37)。顯示缺乏MASP-1和MASP-3的小鼠缺少LP且具有降低的AP活性(Takahashi等人,2010,J.Exp.Med.207:29-37;Takahashi等人,2008,J.Immunol.180:6132-6138)。類似地，已經(jīng)報(bào)道MASP-1和MASP-3缺陷的患者具有降低、但可檢測(cè)的AP活性(Degn等人,2012,J.Immunol.189:3957-3969)。在fH-/-/MASP-1/3-/-小鼠的循環(huán)中沒有觀察到Pro-FD的切割；AP活性在這些小鼠中降低，并且僅在注射眼鏡蛇毒液因子（CobraVenomFactor）后才可能活化(Ruseva等人,2013,Clin.Exp.Immunol.)?？傮w而言，MASP-1/3-/-小鼠表現(xiàn)出缺陷的AP活化，因?yàn)樵谘h(huán)中僅有pro-FD、而沒有成熟FD，甚至在纖溶酶、凝血酶和激肽釋放酶的存在下(Takahashi等人,2010,J.Exp.Med.207:29-37;Takahashi等人,2008,J.Immunol.180:6132-6138;Banda等人,2010,J.Immunol.185:5598-5606)。與這些觀察一致，我們已經(jīng)顯示MASP-1/3-/-小鼠不僅具有補(bǔ)體系統(tǒng)的缺陷AP，而且對(duì)CAIA顯著耐受(Banda等人,2010,J.Immunol.185:5598-5606)。因此，對(duì)于CAIA的發(fā)展，補(bǔ)體系統(tǒng)的AP是必需的，并且缺乏AP的任何組分的小鼠對(duì)關(guān)節(jié)炎耐受(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Kemper等人,2010,Annu.Rev.Immunol.28:131-155;Banda等人,2010,Clin.Exp.Immunol.159:100-108)。在目前的CAIA研究中，我們已經(jīng)做出了幾個(gè)新的觀察。首先，AdhMAp44顯著減弱小鼠中的CAIA。在用AdhMAp44治療的CAIA小鼠的循環(huán)中，在第0天、第3天和第10天可檢測(cè)到重組hMAp44。此外，AdhMAp44的施用降低了小鼠中RRV誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重性。第二，使用全身或局部注射作為遞送途徑，AdmMAp44也減輕小鼠中的CAIA。第三，與AdGFP治療的小鼠相比，用AdhMAp44治療的WT小鼠的循環(huán)中的C5a水平降低，這與MAp44表達(dá)的預(yù)期效果一致(圖3A)。第四，在用AdhMAp44治療的小鼠的膝關(guān)節(jié)中，MAp44不僅抑制MASP與其配體之間的相互作用，而且導(dǎo)致MASP-1、MASP-2、MASP-3和pro-FDmRNA表達(dá)以及促炎細(xì)胞因子表達(dá)的水平降低。第五，MAp44的改善效果不是一種關(guān)節(jié)炎模型特有的，因?yàn)楫?dāng)我們使用另一種小鼠模型（不依賴于補(bǔ)體的AP的RRV誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎，但其部分依賴于LP配體MBL）(Morrison等人,2007,J.Virol.81:5132-5143;Morrison等人,2008,J.Virol.82:11263-11272;Morrison等人,2006,J.Virol.80:737-749)時(shí)，我們?cè)俅伟l(fā)現(xiàn)AdhMAp44顯著降低關(guān)節(jié)炎。最后，我們得出結(jié)論，MAp44的Ad介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移可以用作用于治療關(guān)節(jié)炎的潛在工具。人MAp44存在于循環(huán)中，并且通過這種方法遞送的MAp44可以對(duì)炎性關(guān)節(jié)炎具有長(zhǎng)期抑制作用，甚至在轉(zhuǎn)導(dǎo)效率降低的情況下。此外，Ad基因遞送系統(tǒng)在體外和體內(nèi)將基因轉(zhuǎn)移至多種增殖和靜止細(xì)胞方面是高度有效的(Wilson,1996,N.Engl.J.Med.334:1185-1187)。還已經(jīng)顯示，具有短軸纖維的遺傳修飾的Ad5載體在RA成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞(FLS)和人和鼠滑膜的轉(zhuǎn)導(dǎo)中是高度有效的(Toh等人,2005,J.Immunol.175:7687-7698)。使用AdhMAp44序列的顯著疾病預(yù)防提供了證據(jù)證明，應(yīng)當(dāng)評(píng)估含有補(bǔ)體抑制劑基因的Ad載體和/或使用單獨(dú)的重組MAp44作為人類炎性關(guān)節(jié)炎的治療方法。實(shí)施例2：用于MAp44研究的關(guān)節(jié)炎的小鼠模型以下小鼠品系用于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)研究：C57BL/6(JacksonLaboratories)和DBA/1lacJ(JacksonLaboratories)。C57BL/6和DBA/1lacJ小鼠分別對(duì)抗膠原抗體(被動(dòng))和膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(主動(dòng))是敏感的，并且廣泛用于研究炎性關(guān)節(jié)炎。雄性和雌性小鼠在用牛II型膠原免疫或注射針對(duì)膠原的單克隆抗體的混合物(Arthrogen)后同樣易于發(fā)展關(guān)節(jié)炎。我們使用被稱為膠原抗體誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(CAIA)和膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(CIA)的兩種RA小鼠模型。CAIA是依賴于補(bǔ)體系統(tǒng)的小鼠RA模型，且CIA依賴于T細(xì)胞、B細(xì)胞和補(bǔ)體。用500μl的阿芬太尼(腹膜內(nèi)注射：劑量0.75mg/g)麻醉8-10周齡的C57BL/6和DBA1/lacJ以及各種KO雄性和雌性。阿芬太尼是用于我們的所有外科手術(shù)的麻醉劑。其可得自Sigma。對(duì)于CAIA，用單克隆抗膠原抗體的混合物(Arthrogen混合物含有5種抗體)腹膜內(nèi)(IP)注射小鼠。C57BL/6小鼠需要8mg/小鼠的Arthrogen。在第3天，使用25G針頭用LPS(脂磷脂)腹膜內(nèi)注射所有小鼠(50μl總體積，50μg/小鼠的濃度)。LPS的注射是在該模型中循環(huán)疾病所必需的。注射單獨(dú)的抗CII抗體或LPS的小鼠發(fā)展非常低水平的關(guān)節(jié)炎。相反，注射抗CII抗體、隨后注射LPS的小鼠發(fā)展嚴(yán)重的關(guān)節(jié)炎(圖15)。小鼠在第4天開始顯示臨床疾病的體征，并且在第10天處死所有小鼠。小鼠在如前所提及的LPS注射后立即在第4天開始顯示臨床疾病的體征。在第4天，前爪和后爪變得微紅色。后來在膝上，關(guān)節(jié)由于關(guān)節(jié)僵硬而腫脹。我們已經(jīng)建立并公開了以下標(biāo)準(zhǔn)來檢查小鼠中的臨床疾病。對(duì)于CIA，在第0天，使用25G針頭用含有4mg/ml滅活的結(jié)核分枝桿菌的不完全弗氏佐劑中的200μgII型牛膠原在尾基部皮下注射(總體積100μl)小鼠。三周(21天)后，將小鼠用阿芬太尼麻醉，并接受含有4mg/ml滅活的分枝桿菌的不完全弗氏佐劑中的200ugII型牛膠原的第二次加強(qiáng)注射。在第21天的加強(qiáng)注射對(duì)于循環(huán)疾病和產(chǎn)生關(guān)節(jié)炎發(fā)展所必需的抗體是必需的。皮內(nèi)給予兩次膠原注射。該方案廣泛用于誘導(dǎo)DBA1/J小鼠中的膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎。弗氏佐劑和滅活的結(jié)核分枝桿菌是誘導(dǎo)該關(guān)節(jié)炎模型所必需的。如果我們不使用滅活的結(jié)核分枝桿菌以及IFA，小鼠不發(fā)展一致和嚴(yán)重水平的關(guān)節(jié)炎。為了檢查不同蛋白和抗體的效果，小鼠必須發(fā)展嚴(yán)重的關(guān)節(jié)炎，否則我們不能比較不同治療組的結(jié)果。每天監(jiān)測(cè)動(dòng)物的關(guān)節(jié)炎的發(fā)展。關(guān)節(jié)炎通常在第一次膠原注射后4至5周發(fā)生。關(guān)節(jié)炎的早期體征是前和后肢出現(xiàn)發(fā)紅。對(duì)照組由WT小鼠組成。在關(guān)節(jié)炎發(fā)生后2-3周，通過給予麻醉來處死所有組的動(dòng)物以獲得血液，然后頸椎脫臼。對(duì)于IV或膝關(guān)節(jié)注射，我們使用1ccU-10027G5/8(0.40x1600)胰島素注射器。該注射器具有永久連接的針。每個(gè)爪在3點(diǎn)量表對(duì)臨床疾病活動(dòng)(CDA)進(jìn)行評(píng)分：0=正常關(guān)節(jié)；1=輕微炎癥和發(fā)紅；2=嚴(yán)重的紅斑和腫脹，影響整個(gè)爪，且抑制使用；和3=變形的爪或具有強(qiáng)直的關(guān)節(jié)，關(guān)節(jié)僵硬和功能喪失。臨床疾病活動(dòng)的總評(píng)分基于所有4個(gè)爪，并且對(duì)于每只小鼠最大值為12。在第10天（對(duì)于CAIA研究）或第35天（對(duì)于CIA研究），從所有小鼠手術(shù)取出前爪和整個(gè)右后肢，包括爪、踝和膝，并立即固定于10％緩沖的福爾馬林(BiochemicalSciences,Inc.,Swedesboro,NJ)中。如前所述(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109)，進(jìn)行組織樣品的制備和組織學(xué)分析。所有切片由訓(xùn)練的觀察者讀取，所述訓(xùn)練的觀察者也不知道小鼠類型和每只小鼠的臨床疾病活動(dòng)評(píng)分。將關(guān)節(jié)切片針對(duì)炎癥、關(guān)節(jié)翳、軟骨損傷和骨損傷的變化從0-5的量表評(píng)分，并且將總評(píng)分計(jì)算為四個(gè)單獨(dú)參數(shù)的總和。每個(gè)參數(shù)表示為每只小鼠5個(gè)關(guān)節(jié)的平均值。在第10天或第35天處死時(shí)，從所有小鼠手術(shù)取出整個(gè)右后肢，包括爪、踝和膝，并立即固定于10％緩沖的福爾馬林(BiochemicalSciences,Inc.,Swedesboro,NJ)中。通過使用多克隆山羊抗小鼠C3抗血清(ICNPharmaceuticals,Aurora,OH)免疫組織化學(xué)評(píng)估所有實(shí)驗(yàn)小鼠的關(guān)節(jié)中的C3沉積。將組織學(xué)切片與抗鼠C3抗體在4℃下培育過夜(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109)。將組織切片依次與生物素化的兔抗山羊免疫球蛋白(VectorLaboratories,Burlington,CA)培育，然后另外用DakoLSAB2鏈霉抗生物素蛋白-HRP(DakoCytomation,Carpinteria,CA)處理。染色用液體DAB+(DakoCytomation,Carpentaria,CA)顯色并用蘇木精復(fù)染。MAC的免疫組織化學(xué)染色使用相同方法進(jìn)行。C3免疫組織化學(xué)染色評(píng)分如下進(jìn)行：基于3點(diǎn)評(píng)分系統(tǒng)對(duì)滑膜和周圍組織進(jìn)行評(píng)分，其中0表示無染色，且3表示3+染色。還評(píng)估軟骨中的染色。軟骨染色的標(biāo)準(zhǔn)如下：0–不存在染色，0.5–一個(gè)關(guān)節(jié)存在軟骨細(xì)胞的染色最少的1個(gè)區(qū)域，1–一個(gè)關(guān)節(jié)中存在軟骨細(xì)胞的染色中等的1個(gè)區(qū)域，2–軟骨細(xì)胞的染色中等的多個(gè)區(qū)域–多個(gè)關(guān)節(jié)受影響，3–軟骨細(xì)胞的強(qiáng)染色的多個(gè)區(qū)域和/或關(guān)節(jié)軟骨損傷的彌漫性多病灶染色。對(duì)于每個(gè)動(dòng)物，分別為5個(gè)關(guān)節(jié)中的每一個(gè)確定滑膜和軟骨評(píng)分。確定總動(dòng)物評(píng)分(所有5個(gè)關(guān)節(jié)，最大評(píng)分為30)和5個(gè)關(guān)節(jié)平均動(dòng)物評(píng)分(最大值為6)，以及每個(gè)個(gè)體(滑膜或軟骨)參數(shù)的總和(最大值為15)和平均值(最大值為3)。我們已經(jīng)公開了針對(duì)C3和IgG的上述免疫組織化學(xué)評(píng)分方法(Banda等人,2006,J.Immunol.177:1904-1912;Banda等人,2007,J.Immunol.179:4101-4109;Banda等人,2012,J.Immunol.188:1469-1478)。當(dāng)前第1頁1 2 3