本發(fā)明涉及維生素D和鋅的組合產(chǎn)品，其用于改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防葡萄糖耐量受損和/或II型糖尿病和/或妊娠期糖尿病和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥。
背景技術(shù)：
：葡萄糖是一種為我們器官內(nèi)的活細(xì)胞提供生命能量的關(guān)鍵營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。葡萄糖可來源于食物，也可在空腹條件下由肝臟和腎臟從頭合成。在消化過程中，來自糖類食物的碳水化合物被轉(zhuǎn)化為葡萄糖，而葡萄糖則通過腸壁進(jìn)入血流。葡萄糖流入血流導(dǎo)致血糖水平升高。血糖水平由激素、胰島素嚴(yán)格調(diào)控。當(dāng)血糖水平升高時(shí)，胰腺分泌胰島素。胰島素是負(fù)責(zé)將葡萄糖帶至胰島素敏感性組織諸如肝臟、肌肉和脂肪組織的激素，從而降低血液中的血糖水平。然而，一些個(gè)體并不對(duì)胰島素充分應(yīng)答。這些個(gè)體具有胰島素抗性或低胰島素敏感性。這可能是因?yàn)橐葝u素敏感組織中的胰島素受體不能對(duì)胰島素產(chǎn)生充分應(yīng)答。響應(yīng)于對(duì)胰島素的不充分應(yīng)答，胰腺可分泌更多胰島素來進(jìn)行補(bǔ)償。這些個(gè)體可能被認(rèn)為是具有葡萄糖耐量受損(下文稱為IGT)。最終，胰腺可能無法與身體對(duì)胰島素的增加需求保持一致，從而導(dǎo)致II型糖尿病。根據(jù)世界衛(wèi)生組織，全世界至少1.71億人患有II型糖尿病。該病的發(fā)病率正在快速增長(zhǎng)，估計(jì)到2030年這一數(shù)字幾乎將翻倍。葡萄糖耐量受損(也稱為前驅(qū)糖尿病)甚至更普遍，并且在美國(guó)三個(gè)成人中就有多于一個(gè)被估計(jì)為“糖尿病前期的”或患有IGT。胰島素抗性(低胰島素敏感性)在懷孕個(gè)體中發(fā)生。這是因?yàn)榧に馗淖冇兄诖_保將營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)從懷孕個(gè)體傳輸至胎兒。如上所述，響應(yīng)于胰島素抗性，胰腺可分泌更多的胰島素，并且如上所述，最終胰腺可能不能滿足身體對(duì)胰島素的增加需求。在懷孕過程中開始發(fā)作或最初識(shí)別的任何程度的葡萄糖耐受不良被稱為妊娠期糖尿病(下文稱為GDM)。GDM影響全世界多至15％的孕婦，并且單獨(dú)在印度就估計(jì)有4百萬婦女患有GDM。葡萄糖耐量受損和/或II型糖尿病與多種疾病例如心血管疾病(下文稱為CVD)風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。CVD占每年全球死亡總?cè)藬?shù)的大約20％，并且一直是發(fā)達(dá)國(guó)家和發(fā)展中國(guó)家死亡的首要原因之一。GDM是可增加許多母體-胎兒病癥風(fēng)險(xiǎn)的懷孕紊亂。改變飲食和生活方式(包括使飲食習(xí)慣更健康和增加運(yùn)動(dòng))可以非常有效地改善IGT并預(yù)防II型糖尿病，但患者依從性可能存在問題。諸如雙胍類和噻唑烷二酮類的藥物可用于改善胰島素敏感性或II型糖尿病。然而，這些藥物許多具有不期望的副作用并且不能用于孕期。而且，沒有用此類藥物預(yù)防IGT的實(shí)踐。因此，需要尋找用于改善個(gè)體的胰島素敏感性以及治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥的替代方式。發(fā)明人驚訝地發(fā)現(xiàn)，維生素D和鋅的組合產(chǎn)品可用于增強(qiáng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的葡萄糖攝取。出乎意料的是，已發(fā)現(xiàn)當(dāng)維生素D和鋅組合使用時(shí)，對(duì)增強(qiáng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞尤其是哺乳動(dòng)物肌細(xì)胞中的葡萄糖攝取的影響大于累加效應(yīng)或協(xié)同效應(yīng)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
發(fā)明內(nèi)容在權(quán)利要求書中陳述。鋅和維生素D的組合產(chǎn)品或包含維生素D和鋅的組合物可用于改善個(gè)體(例如哺乳動(dòng)物，諸如人、貓或狗)的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防葡萄糖耐量受損和/或II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥。就GDM而言，個(gè)體可為懷孕哺乳動(dòng)物或懷孕哺乳動(dòng)物的后代。低胰島素敏感性、IGT、II型糖尿病和/或GDM與多種病癥的風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。低胰島素敏感性、葡萄糖耐量受損和/或II型糖尿病可例如與以下一種或多種病癥相關(guān)：CVD、中風(fēng)、在極端情況下可導(dǎo)致截肢的循環(huán)系統(tǒng)問題、糖尿病視網(wǎng)膜病變、腎衰竭、聽力損失和認(rèn)知能力受損。GDM可例如與以下狀況相關(guān)：早產(chǎn)和剖腹產(chǎn)、對(duì)母親或嬰兒的出生創(chuàng)傷、肩難產(chǎn)、巨大胎兒、后代血糖濃度過高(excessiveoffspringbloodglucoseconcentration)、超重/肥胖和相關(guān)代謝紊亂例如II型糖尿病、后代剛出生和在后來生活中出現(xiàn)的脂肪肝疾病和肥胖癥，以及在后代剛出生和在后來生活中母親患有或發(fā)展2型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)增加。通過改善胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM，鋅和維生素D的組合或包含維生素D和鋅的組合物還可用于治療或預(yù)防個(gè)體的相關(guān)病癥，諸如本文列出的這些。當(dāng)與肌醇(順式-1,2,3,5-反式-4,6-環(huán)己六醇)和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合使用時(shí)，鋅和維生素D的組合可甚至更有效改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM。因此，包含鋅和維生素D的組合物可任選地還包含肌醇(順式-1,2,3,5-反式-4,6-環(huán)己六醇)和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種。所述組合物可更有效改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM。任選地包含在組合物中的鋅和維生素D的組合，以及任選地肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種可經(jīng)腸施用至個(gè)體。鋅和維生素D的組合，以及任選地肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種可以任何適于個(gè)體攝取的形式被施用或利用。其可被包含在以下組合物中，所述組合物包含鋅和維生素D，以及一種或多種如本文列出的其他任選的成分。所述組合物可例如為營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品、食物產(chǎn)品、功能性食物產(chǎn)品、老年保健產(chǎn)品、乳制品、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、藥物制劑、飲料產(chǎn)品或?qū)櫸锸澄锂a(chǎn)品。鋅和維生素D的組合產(chǎn)品和/或包含維生素D和鋅的組合物可用于生產(chǎn)用于改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防葡萄糖耐量受損和/或II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥。維生素D和鋅的組合產(chǎn)品和/或包含維生素D和鋅的組合物可連同指示劑量要求的標(biāo)簽一起提供在試劑盒中，所述試劑盒用于改善個(gè)體的葡萄糖敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或預(yù)防GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥。附圖說明圖1-示出了在培養(yǎng)2小時(shí)后的L6分化型肌細(xì)胞中，在不存在胰島素的情況下，氯化鋅對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖2-示出了在培養(yǎng)2小時(shí)后的L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，1,25-二羥基維生素D3對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖3-示出了在培養(yǎng)2小時(shí)后的L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，氯化鋅和1,25-二羥基維生素D3的組合對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖4-示出了在培養(yǎng)2小時(shí)后的胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，氯化鋅對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖5-示出了在培養(yǎng)2小時(shí)后的胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，1,25-二羥基維生素D3對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖6-示出了在培養(yǎng)2小時(shí)后的胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，氯化鋅和1,25-二羥基維生素D3的組合對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖7-示出了在培養(yǎng)24小時(shí)后的L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，氯化鋅對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖8-示出了在培養(yǎng)24小時(shí)后的L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，1,25-二羥基維生素D3對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖9-示出了在培養(yǎng)24小時(shí)后的L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，氯化鋅和1,25-二羥基維生素D3的組合對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖10-示出了在培養(yǎng)24小時(shí)后的胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，氯化鋅對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖11-示出了在培養(yǎng)24小時(shí)后的胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，1,25-二羥基維生素D3對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。圖12-示出了在培養(yǎng)后的胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中，在存在和不存在胰島素的情況下，氯化鋅和1,25-二羥基維生素D3的組合對(duì)葡萄糖攝取的影響的圖。具體實(shí)施方式在本發(fā)明的第一方面，提供了鋅和維生素D的組合，其用于改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥。如本文所用的術(shù)語“個(gè)體”是指哺乳動(dòng)物，更具體地講是指貓、狗或人。人可以是成年人、兒童或嬰兒(包括早產(chǎn)兒)。就GDM而言，術(shù)語哺乳動(dòng)物指懷孕哺乳動(dòng)物和/或所述懷孕哺乳動(dòng)物的后代，例如懷孕貓、狗或人，或所述懷孕貓、狗或人的后代。通過測(cè)量哺乳動(dòng)物的空腹血糖和/或HbA1c濃度，或通過進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)可確定哺乳動(dòng)物是否患有IGT或患有II型糖尿病。技術(shù)人員將熟悉這些試驗(yàn)以及用于診斷IGT或II型糖尿病的標(biāo)準(zhǔn)。對(duì)于人類而言，美國(guó)糖尿病學(xué)會(huì)(AmericanDiabetesAssociation)在《糖尿病醫(yī)學(xué)診療標(biāo)準(zhǔn)(2014)》(Standardsofmedicalcareindiabetes)中闡述了用于診斷IGT或II型糖尿病的標(biāo)準(zhǔn)。如果人類個(gè)體的空腹血漿葡萄糖濃度等于5.6mmol/L或更高，或如果其空腹HbA1C水平在5.7％至6.4％之間，或75克葡萄糖飲用后2小時(shí)血糖水平范圍在7.8mmol/L至11.0mmol/L之間，則該人類個(gè)體被認(rèn)為患有IGT(糖尿病前期病癥)。如果人類個(gè)體的空腹血糖濃度等于7.0mmol/L或更高，或者如果空腹HbA1c高于6.5％，或者在飲用75g葡萄糖2小時(shí)后的血糖水平高于11.1mmol/L，則認(rèn)為該人類個(gè)體患有II型糖尿病。如本文所用，術(shù)語“GDM”指在懷孕過程中開始發(fā)作或被首次識(shí)別的任何程度的葡萄糖耐量受損。可通過測(cè)量哺乳動(dòng)物的空腹血漿葡萄糖濃度，或通過進(jìn)行口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(OGTT)確定其是否患有GDM。技術(shù)人員將熟悉這些試驗(yàn)和用于診斷葡萄糖耐量受損進(jìn)而診斷GDM的標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)美國(guó)臨床化學(xué)協(xié)會(huì)(AmericanAssociationforclinicalchemistry(AACC))發(fā)布的美國(guó)臨床生化科學(xué)院(NationalAcademyofclinicalbiochemistry(NACB))和國(guó)際糖尿病與妊娠研究組(InternationalAssociationofDiabetesandPregnancyStudyGroup(IADPSG))指南中所示的標(biāo)準(zhǔn)，如果懷孕人類個(gè)體的空腹血漿葡萄糖濃度等于5.1mmol/L或更高，或者如果75克葡萄糖飲用后1小時(shí)其血糖濃度高于10mmol/L，或75克葡萄糖飲用后2小時(shí)血糖濃度高于8.5mmol/L，則所述懷孕人類個(gè)體被認(rèn)為患有GDM。如本文所用，術(shù)語“治療”還涵蓋病癥的改善和/或減輕，即，病癥的癥狀的改善和/或減輕。其可例如涵蓋降低個(gè)體的病癥嚴(yán)重程度。如本文所用的術(shù)語“預(yù)防”是指預(yù)防個(gè)體發(fā)生病癥或降低個(gè)體發(fā)生病癥的風(fēng)險(xiǎn)。如本文所用，術(shù)語“維生素D”指維生素D、其前體和/或其代謝物。如本文所用，術(shù)語“前體”指被施用(例如，被個(gè)體攝取和被所述個(gè)體的身體使用)以產(chǎn)生和/或形成特定化合物的任何物質(zhì)。如本文所用，術(shù)語“代謝物”指在特定化合物施用(例如攝取)后通過個(gè)體的身體由所述特定化合物產(chǎn)生和/或形成的任何物質(zhì)。其包括化合物的活性形式和分解代謝物。適于由個(gè)體攝取的任何來源或形式的維生素D可用于本發(fā)明。具體地講，維生素D可以是維生素D2，維生素D3，維生素D的選自7-脫氫膽鈣化醇的前體，維生素D的選自25-羥基維生素D3、1,25-二羥基維生素D3、25-羥基維生素D2、1,25-二羥基維生素D2的代謝物，以及前述任何物質(zhì)的組合。更具體地講，維生素D是維生素D3，維生素D的選自25-羥基維生素D3、1,25-二羥基維生素的代謝物，以及前述任何物質(zhì)的組合。甚至具體地講，維生素D3是膽鈣化醇?？墒褂眠m于由懷孕個(gè)體攝取的任何來源或形式的鋅。具體地講，鋅可以是鋅鹽，諸如氯化鋅、吡啶甲酸鋅、硫酸鋅、氧化鋅、乙酸鋅、碳酸鋅，以及前述物質(zhì)的組合。更具體地講，鋅是氯化鋅。在一個(gè)實(shí)施方案中，鋅和維生素D的組合與肌醇和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種和/或一種或多種益生菌組合使用。鋅和維生素D以及肌醇(順式-1,2,3,5-反式-4,6-環(huán)己六醇)和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種可特別有效地改善個(gè)體的胰島素敏感性和治療和/或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥。維生素D和鋅的組合產(chǎn)品以及這些列出的成分中的一種或多種可相比于單獨(dú)鋅和維生素D的組合產(chǎn)品提供改善的效果。適于由個(gè)體攝取的任何來源或形式的肌醇可用于本發(fā)明。如本文所用，術(shù)語肌醇指肌醇(順式-1,2,3,5-反式-4,6-環(huán)己六醇)和/或其代謝物。肌醇的代謝物可選自D-手性肌醇和L-手性肌醇。具體地講，代謝物是D-手性肌醇。適于由個(gè)體攝取的任何來源或形式的維生素B2、B6和B12可用于本發(fā)明。如本文所用的術(shù)語“維生素B12”是指維生素B12和/或其代謝物。如本文所用的術(shù)語“維生素B6”是指維生素B6和/或其代謝物。如本文所用的術(shù)語“維生素B2”是指維生素B2和/或其代謝物。具體地講，維生素B6可以是鹽酸吡多醇和/或選自5'-磷酸吡哆醛(下文稱為PLP)的維生素B6代謝物。具體地講，維生素B12可以是氰鈷胺和/或維生素B12的選自羥鈷胺素、甲基鈷胺素、腺苷鈷胺素的代謝物，以及前述任何物質(zhì)的組合。具體地講，維生素B2可以是核黃素(例如以商標(biāo)RiboflavinUniversal銷售的核黃素和/或維生素B2的選自黃素單核苷酸(下文稱為FMN)、黃素腺嘌呤二核苷酸(下文稱為FAD)的代謝物，及其鹽例如核黃素-5′-磷酸鈉鹽，以及前述任何物質(zhì)的組合。如本文所用的術(shù)語“益生菌”是指活益生菌、非復(fù)制型益生菌、死益生菌、無活力益生菌、益生菌的片段如DNA、益生菌的代謝物、益生菌的細(xì)胞質(zhì)化合物、益生菌的細(xì)胞壁材料、益生菌的培養(yǎng)上清液以及任何前述物質(zhì)的組合。具體地講，益生菌是活益生菌、非復(fù)制型益生菌、死益生菌、無活力益生菌以及它們的任何組合。更具體地講，益生菌是活益生菌。一種或多種益生菌可以是任何乳酸菌、雙歧桿菌(Bifidobacteria)或它們的組合，其中已經(jīng)確定了所述乳酸菌和雙歧桿菌的益生特性。乳酸菌菌株的非限制性實(shí)例包括：尤其是可從芬蘭維利奧公司(ValioOy,Finland)購得的商標(biāo)為L(zhǎng)GG的鼠李糖乳桿菌(Lactobacillusrhamnosus)ATCC53103，以及由雀巢研發(fā)上海有限公司(NestléR&DcentreShanghaiLtd)(中國(guó)上海市嘉定區(qū)曹安路13號(hào)橋南，郵編201812)在中國(guó)普通微生物菌種保藏管理中心(ChinaGeneralMicrobiologicalCultureCollectionCentre(CGMCC))并且可以保藏號(hào)CGMCC1.3724獲得。雙歧桿菌菌株的非限制性實(shí)例包括：在德國(guó)微生物菌種保藏中心(CollectionNationaledeCulturesDeMicroorganismes(CNCM))以CNCMI-3446保藏，尤其由丹麥科漢森集團(tuán)公司(ChristianHansencompanyofDenmark)以商標(biāo)Bb12銷售的乳雙歧桿菌(Bifidobacteriumlactis)、由日本的森永乳業(yè)株式會(huì)社(MorinagaMilkIndustryCo.Ltd.ofJapan)以商標(biāo)BB536銷售的長(zhǎng)雙歧桿菌(Bifidobacteriumlongum)ATCCBAA-999、由Danisco以商標(biāo)Bb-03銷售的短雙歧桿菌(Bifidobacteriumbreve)的菌株、由森永乳業(yè)株式會(huì)社(Morinaga)以商標(biāo)M-16V銷售的短雙歧桿菌的菌株和由Rosell生物研究所(InstitutRosell(Lallemand))以商標(biāo)R0070銷售的短雙歧桿菌的菌株。在一個(gè)具體實(shí)施方案中，一種或多種益生菌是鼠李糖乳桿菌CGMCC1.3724和乳雙歧桿菌CNCMI-3446的混合物。鼠李糖乳桿菌CGMCC1.3724和乳雙歧桿菌CNCMI-3446可以1:99至99:1的比例使用，但更具體地講，它們將以1:2至2:1、甚至更具體地以1:1的比例使用。維生素D和鋅的組合產(chǎn)品以及與其任選地組合的任何成分，例如肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種可以任何有效劑量被采用，所述有效劑量提供關(guān)于改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥的益處。有效劑量可以是以任何程度改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或IGT和/或II型糖尿病和/或GDM的任何劑量。確定有效劑量完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)。有效劑量可例如通過測(cè)試一定劑量對(duì)個(gè)體的空腹血漿葡萄糖濃度或空腹HbA1c濃度的影響，或通過進(jìn)行OGTT來確定。有效劑量應(yīng)改善個(gè)體的空腹血糖濃度和/或HbA1c濃度和/或減少個(gè)體的血糖應(yīng)答。通常，有效劑量將取決于個(gè)體的類型、年齡、體型和健康狀態(tài)，取決于個(gè)體的生活方式，以及取決于個(gè)體的遺傳基因。維生素D的特別有用的劑量是1.5μg至100μg，或10μg。鋅的特別有用的劑量是1.1mg至40mg，或10mg。肌醇(如果存在)的特別有用的劑量是0.2mg至5mg、1.5mg至5mg、2g至4g。特別有用的一種或多種益生菌(如果存在)劑量是10e5至10e12個(gè)菌落形成單位(cfu)，或10e7至10e11個(gè)cfu。特別有用的維生素B6(如果存在)劑量是0.19mg至19mg，或2.6mg。特別有用的維生素B12(如果存在)劑量是0.26μg至26μg，或5.2μg。特別有用的維生素B2(如果存在)劑量可以是0.14mg至14mg、1mg至2.5mg、1.5mg至2mg，或1.8mg。如本文所用的術(shù)語“劑量”是指施用于個(gè)體的每日量。每日量或劑量可一次性全部施用，或者可在一天內(nèi)分若干次施用。劑量可通過任何已知的方法施用，尤其是經(jīng)腸施用，例如口服。一種或多種劑量可在任何時(shí)間施用，例如白天或夜間。如果在個(gè)體食用食物或飲用飲料(例如，食用正餐或零食)之前施用，則劑量可特別有效。在一個(gè)實(shí)施方案中劑量分2次施用，具體地講，劑量分2次施用，早上一次，晚上一次，具體為在早餐前和晚餐前。如本文所用的術(shù)語“早餐”是指當(dāng)天的第一餐。如本文所用的術(shù)語“晚餐”是指當(dāng)天的最后一餐。在本發(fā)明的另一方面，提供用于改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或預(yù)防GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥的試劑盒，所述試劑盒包括：a.維生素D和鋅，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6、B12和D中的一種或多種組合b.指示對(duì)于個(gè)體的劑量要求的標(biāo)簽。劑量需求可以是每天施用2次，具體地講，每天在食用任何食物或飲用任何飲料之前施用2次。更具體地講，每天施用2次，其中早上一次，晚上一次。甚至更具體地講，每天施用2次，其中早上早餐前一次，晚上晚餐前一次。對(duì)于治療和/或預(yù)防懷孕個(gè)體和/或其后代的GDM以及預(yù)防與其相關(guān)的病癥，鋅和維生素D的組合，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合，預(yù)期用于向希望懷孕的個(gè)體、懷孕個(gè)體和/或哺乳個(gè)體施用。具體地講，其向希望懷孕和/或懷孕個(gè)體施用。更具體地講，其用于向懷孕個(gè)體施用。如果將鋅和維生素D的組合，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合向希望懷孕的個(gè)體施用，那么其可例如在懷孕或希望懷孕前至少1、2、3或4個(gè)月期間施用。如果將鋅和維生素D的組合，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合向懷孕個(gè)體施用，那么其可根據(jù)個(gè)體的妊娠期，在整個(gè)孕期或部分孕期施用例如持續(xù)至少4周、至少8周、至少12周、至少16周、至少20周、至少24周、至少28周或至少36周。施用還可在所述個(gè)體的整個(gè)哺乳期或部分哺乳期繼續(xù)。因?yàn)樵趹言械娜焉镏衅诤腿焉锿砥贕DM的風(fēng)險(xiǎn)增加，所以在懷孕的妊娠中期和妊娠晚期施用可特別有利。維生素D和鋅，以及肌醇、一種或多種益生菌和維生素B2、B6和B12中的一種或多種可都以提供所述維生素或一種或多種益生菌的持續(xù)釋放的形式提供。這種方式，使用這些化合物的頻率可降低，同時(shí)身體仍能持續(xù)獲得足夠量的這些化合物供應(yīng)。維生素D和鋅可分開、依序或同時(shí)施用。當(dāng)與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合使用時(shí)，維生素D和鋅可與所述肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種在相同的組合物中施用?；蛘?，一種或多種所述肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種可與所述維生素D和/或鋅分開施用，例如維生素D和鋅(任選地與肌醇，以及維生素B2、B6和B12中的一種或多種)可與所述一種或多種益生菌分開施用。分開施用可為同時(shí)但分開的施用，例如維生素D和鋅(任選地與肌醇，以及維生素B6、B12和D中的一種或多種)可同時(shí)施用，但與所述一種或多種益生菌分開施用，例如在兩個(gè)分開的片劑中。維生素D和鋅(任選地與肌醇，以及維生素B2、B6和B12中的一種或多種)可與所述一種或多種益生菌例如分開并緊接地連續(xù)施用，例如在5分鐘、4分鐘、3分鐘、2分鐘、1分鐘內(nèi)。維生素D和鋅，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種以及任何其他任選成分的組合可以適于由個(gè)體攝取的任何形式被施用或利用。它們可例如以組合物的形式利用，所述組合物為例如營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品、食物產(chǎn)品、功能性食物產(chǎn)品、老年保健產(chǎn)品、乳制品、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、藥物制劑、飲料產(chǎn)品、飼料或?qū)櫸锸澄锂a(chǎn)品。如本文所用的術(shù)語“食物產(chǎn)品”是指可供人類或動(dòng)物安全食用的任何種類的產(chǎn)品。所述食物產(chǎn)品可以是固體、半固體或液體形式，并且可包含一種或多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、食物或營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。例如，食物產(chǎn)品可另外包含以下營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和微量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：蛋白質(zhì)來源、脂質(zhì)來源、碳水化合物來源、維生素和礦物質(zhì)。該組合物還可包含抗氧化劑、穩(wěn)定劑(以固體形式提供時(shí))或乳化劑(以液體形式提供時(shí))。如本文所用的術(shù)語“功能性食物產(chǎn)品”是指為個(gè)體提供額外的健康促進(jìn)或疾病預(yù)防功能的食物產(chǎn)品。食物產(chǎn)品和功能性食物產(chǎn)品包括例如：基于谷類的產(chǎn)品、酸奶或其他乳制品和棒。如本文所用的術(shù)語“老年保健產(chǎn)品”可以指旨在作為延長(zhǎng)個(gè)體壽命的手段的飲食或營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑。此類產(chǎn)品可另外含有抗氧化劑或其他化合物，所述其他化合物為例如催產(chǎn)素、胰島素、人絨毛膜促性腺激素(hCG)、促紅細(xì)胞生成素(EPO)、膳食纖維、植物甾醇、PUFA以及它們的組合。如本文所用的術(shù)語“抗氧化劑”是指能夠減緩或防止其他分子氧化的分子。優(yōu)選地，抗氧化劑選自β-胡蘿卜素、維生素C、維生素E、硒、類胡蘿卜素、輔酶Q10、黃酮類、谷胱甘肽、葉黃素、番茄紅素、多酚類、維生素A、維生素B1、維生素B6、維生素B12、維生素C、維生素D、維生素E、玉米黃質(zhì)、硫辛酸、肌肽、N-乙酰半胱氨酸或它們的組合。如本文所用的術(shù)語“營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑”或“飲食補(bǔ)充劑”是指為個(gè)體提供所述個(gè)體可能無法以其他方式足量消耗的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品。例如，營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑可包括維生素、礦物質(zhì)、纖維、脂肪酸或氨基酸。營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑可例如以以下形式提供：丸劑、片劑、錠劑、耐嚼膠囊或片劑、片劑或膠囊、或可例如溶解于水性介質(zhì)(例如水或汁)或撒在食物上的粉末補(bǔ)充劑。此類補(bǔ)充劑通常提供所選擇的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，而不占個(gè)體的總體營(yíng)養(yǎng)需求的大部分。通常它們占個(gè)體的日常能量需求的不大于0.1％、1％、5％、10％或20％。具體類型的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑是懷孕前和/或懷孕和/或哺乳(母乳喂養(yǎng))補(bǔ)充劑。粉末營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑當(dāng)前被消費(fèi)者廣泛接受，所述粉末營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑可例如撒在食物上或溶解于水性介質(zhì)，例如水、汁或奶中。如本文所用的術(shù)語“乳制品”是指由動(dòng)物如牛、山羊、綿羊、牦牛、馬、駱駝以及其他哺乳動(dòng)物生產(chǎn)的食物產(chǎn)品。乳制品的示例是低脂乳(例如，0.1％、0.5％或1.5％的脂肪)、無脂乳、乳粉、全脂乳、全脂乳制品、黃油、酪乳、酪乳制品、脫脂乳、脫脂乳制品、高乳脂產(chǎn)品、煉乳、鮮奶油、奶酪、冰淇淋和甜食產(chǎn)品、益生菌飲料或益生菌酸奶型飲料。如本文所用的術(shù)語“藥物制劑”是指包含至少一種藥物活性劑、化學(xué)物質(zhì)或藥物的組合物。藥物制劑可以是固體或液體形式，并且可包含至少一種本領(lǐng)域技術(shù)人員可識(shí)別的附加活性劑、載劑、溶媒、賦形劑或助劑。如本文所用的術(shù)語“飲料產(chǎn)品”是指可以由個(gè)體安全食用的液體或半液體形式的營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品。如本文所用的術(shù)語“寵物食物產(chǎn)品”是指旨在由寵物食用的營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品。如本文所提及的寵物或伴侶動(dòng)物，應(yīng)理解為選自狗、貓、鳥、魚、嚙齒類動(dòng)物(例如，小鼠、大鼠和豚鼠、兔子)等的動(dòng)物。維生素D和鋅，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種的組合，還可與其他維生素和礦物質(zhì)組合使用，例如鈣、鎂、磷、鐵、銅、碘、硒、維生素A或視黃醇活性等效物(RAE)，例如β胡蘿卜素或類胡蘿卜素、維生素C、維生素B1、煙酸、葉酸、生物素、維生素E的混合物。如果維生素D和鋅，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種的組合與以下量的一種或多種以下微量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)組合使用，則可為特別有益的：100mg至2500mg鈣、35mg至350mg鎂、70mg至3500mg磷、2.7mg至45mg鐵、0.1mg至10mg銅、22μg至1,100μg碘、6μg至400μg硒、77μg至3000μg維生素A或視黃醇活性等效物(RAE)，例如呈β胡蘿卜素或類胡蘿卜素的混合物的形式、8.5mg至850mg維生素C、0.14mg至14mg維生素B1、1.8mg至5mg煙酸、60μg至1000μg葉酸、3μg至300μg生物素、1.9μg至109μg維生素E。在具體的實(shí)施方案中，維生素D和鋅與肌醇、一種或多種益生菌、維生素B2、B6和B12、-胡蘿卜素、葉酸、鐵、鈣和碘組合使用。維生素D和鋅，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種的組合，還可有利地與至少一種寡糖和/或至少一種長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸組合使用，所述長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸諸如花生四烯酸(ARA)、二十碳五烯酸(EPA)和/或二十二碳六烯酸(DHA)。寡糖和長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸可以對(duì)個(gè)體施用安全的任何濃度使用。維生素D和鋅，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種的組合，還可與其他成分組合使用，所述其他成分通常以其中利用所述組合的組合物的形式使用，所述組合物例如為粉末營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、食物產(chǎn)品或乳制品。此類成分的非限制性示例包括：其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，例如選自脂質(zhì)(除DHA和ARA之外的任選脂質(zhì))、碳水化合物和蛋白質(zhì)、微量營(yíng)養(yǎng)素(除了上面列出的那些之外)或藥物活性劑；常規(guī)的食品添加劑，諸如抗氧化劑、穩(wěn)定劑、乳化劑、酸化劑、增稠劑、緩沖劑或pH調(diào)節(jié)劑、螯合劑、著色劑、賦形劑、調(diào)味劑(例如可可粉或蜂蜜)、滲透劑、藥學(xué)上可接受的載體、防腐劑、糖、甜味劑、調(diào)質(zhì)劑、乳化劑、水和其任何組合。然而盡管上文有所描述，但高脂肪攝入可能是不期望的并且與超重和肥胖的風(fēng)險(xiǎn)增加相關(guān)。因此，在具體的實(shí)施方案中，維生素D和鋅，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種的組合，不與長(zhǎng)鏈多不飽和脂肪酸和/或動(dòng)物脂肪和/或植物油組合使用。在另一個(gè)具體的實(shí)施方案中，維生素D和鋅，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種的組合，不與寡糖組合使用。在具體的實(shí)施方案中，鋅和維生素D的組合僅與肌醇組合使用。在具體的實(shí)施方案中，鋅和維生素D的組合僅與維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合使用。在具體的實(shí)施方案中，鋅和維生素D的組合僅與一種或多種益生菌組合使用。在具體的實(shí)施方案中，鋅和維生素D的組合僅與肌醇和維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合使用。在具體的實(shí)施方案中，鋅和維生素D的組合僅與肌醇和與一種或多種益生菌組合使用。在具體的實(shí)施方案中，鋅和維生素D的組合僅與維生素B2、B6和B12中的一種或多種和與一種或多種益生菌組合使用。在具體的實(shí)施方案中，鋅和維生素D的組合僅與肌醇、一種或多種益生菌、維生素B2、B6和B12、-胡蘿卜素、葉酸、鐵、鈣和碘組合使用。在一個(gè)實(shí)施方案中，維生素D和鋅不與任何其他化合物組合使用。如上文所述，個(gè)體的低胰島素敏感性和/或IGT和/或II型糖尿病與影響個(gè)體的多種病癥例如CVD相關(guān)。如果低胰島素敏感性和/或II型糖尿病增加個(gè)體在其生命過程中患有或發(fā)展某一病癥的風(fēng)險(xiǎn)，則認(rèn)為其與該病癥相關(guān)。與低胰島素敏感性和/或IGT和/或II型糖尿病相關(guān)的病癥的非限制性示例包括：CVD、中風(fēng)、在極端情況下可導(dǎo)致截肢的循環(huán)問題、糖尿病性視網(wǎng)膜病、腎衰竭、聽力喪失以及認(rèn)知能力受損。如果GDM增加個(gè)體在懷孕過程中、出生過程中、出生后或所述個(gè)體的后來生活中患有或發(fā)展某一病癥的風(fēng)險(xiǎn)，則認(rèn)為其與該病癥相關(guān)，所述個(gè)體為懷孕個(gè)體或其后代。與GDM相關(guān)的影響懷孕個(gè)體和/或其后代的病癥的非限制性示例包括：早產(chǎn)和剖腹產(chǎn)、對(duì)母親或嬰兒的出生創(chuàng)傷、肩難產(chǎn)、巨大胎兒、后代血糖濃度過高、超重/肥胖和相關(guān)代謝紊亂例如II型糖尿病、后代剛出生和在后來生活中出現(xiàn)的脂肪肝疾病和肥胖癥，以及在后代剛出生和在后來生活中母親患有或發(fā)展2型糖尿病的風(fēng)險(xiǎn)增加。在本發(fā)明的另一方面，提供維生素D和鋅的組合產(chǎn)品，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合，用于生產(chǎn)用于改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥，其中向所述個(gè)體施用所述藥物。在另一方面，提供改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT、II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥的方法，所述方法包括：向所述個(gè)體施用維生素D和鋅的組合產(chǎn)品，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合。在超重或肥胖或如果存在II型糖尿病的家族史的個(gè)體中，低胰島素敏感性、IGT和II型糖尿病更普遍。因此，維生素D和鋅的組合產(chǎn)品，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合，可特別有益于改善個(gè)體的一個(gè)或多個(gè)這些亞組的低胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT、II型糖尿病和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥。在懷孕前罹患GDM、如果個(gè)體超重或肥胖、如果存在GDM或II型糖尿病的家族史的個(gè)體中，GDM更普遍。如果個(gè)體是人并且超過25歲，并且如果個(gè)體是人并且是黑種人、西班牙人、美洲印第安人或亞洲人。因此，鋅和維生素D的組合，任選地與肌醇和/或一種或多種益生菌，和/或維生素B2、B6和B12中的一種或多種組合，可特別有益于治療和/或預(yù)防個(gè)體的一個(gè)或多個(gè)這些亞組的GDM。本發(fā)明的另一方面，提供了包含維生素D和鋅的組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物還包含一種或多種益生菌和/或肌醇，和/或維生素B2、維生素B6、維生素B12、維生素D、B-胡蘿卜素、葉酸、鐵、鈣、碘中的一種或多種。在具體的實(shí)施方案中，一種或多種益生菌是鼠李糖乳桿菌CGMCC1.3724和乳雙歧桿菌CNCMI-3446的混合物。在具體的實(shí)施方案中，組合物包含維生素D和鋅、肌醇、一種或多種益生菌、維生素B2、B6和B12、-胡蘿卜素、葉酸、鐵、鈣和碘，并且一種或多種益生菌優(yōu)選地是鼠李糖乳桿菌CGMCC1.3724和乳雙歧桿菌CNCMI-3446的混合物。上文示出了這些成分在組合物中可使用或利用的有用濃度。上文還示出了可與鋅和維生素D組合使用，因而包含在所述組合物中的其他成分。組合物可為營(yíng)養(yǎng)產(chǎn)品、食物產(chǎn)品、功能性食物產(chǎn)品、老年保健產(chǎn)品、乳制品、營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑、藥物制劑、飲料產(chǎn)品、飲食或?qū)櫸锸澄锂a(chǎn)品。在具體的實(shí)施方案中，組合物是用于懷孕前和/或懷孕和/或哺乳過程中的母體補(bǔ)充劑。如技術(shù)人員將清楚的，本發(fā)明的組合物可用于改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防葡萄糖耐量受損和/或II型糖尿病和/或妊娠期糖尿病和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥。如技術(shù)人員將清楚的，與用于改善個(gè)體的胰島素敏感性和/或治療或預(yù)防IGT和/或II型糖尿病和/或GDM和/或預(yù)防與前述任何一種相關(guān)的病癥的鋅和維生素D的組合相結(jié)合公開的所有特征和實(shí)施方案都相對(duì)于所述組合物同等有效，例如所述組合物可包含如本文所述的可與鋅和維生素D一起使用的任何成分。如技術(shù)人員將理解的，在本文所述的任何方法或用途中，包含鋅和維生素D的組合物可代替鋅和維生素D的組合。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將理解，他們可以自由地組合本文所公開的本發(fā)明的所有特征。具體地講，可將針對(duì)本發(fā)明不同實(shí)施例所描述的特征進(jìn)行組合。對(duì)于具體的特征如果存在已知的等同物，則這些等同物被納入，如同在本說明書中明確提到這些等同物。根據(jù)附圖和非限制性實(shí)施例，本發(fā)明的其他優(yōu)點(diǎn)和特征將顯而易見。現(xiàn)在將通過以下實(shí)施例更詳細(xì)地描述本發(fā)明。實(shí)施例實(shí)施例1包含鋅和維生素D的組合，與肌醇、維生素B2、B6和B12以及鼠李糖乳桿菌GG1和乳雙歧桿菌BB122組合的示例性組合物示出在表1中。表1中的組合物用于粉末形式的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，該粉末形式的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑旨在噴灑到食物上。表1：實(shí)施例1的組合物成分每日劑量中的含量肌醇4g維生素D10μg維生素B62.6mg維生素B125.2μg維生素B21.8mg鋅10mgβ-胡蘿卜素720μg葉酸400μg鐵12μg鈣150μg碘150μg鼠李糖乳桿菌GG1)1×109cfu乳雙歧桿菌BB122)1×109cfu1)以名稱CGMCC1.3724保藏的菌株2)以名稱CNCMI-3446保藏的菌株該組合物可以作為套裝產(chǎn)品提供，該套裝產(chǎn)品包含在一個(gè)小袋中的益生菌粉末和在第二小袋中的所有其他成分。實(shí)施例2提供用于孕婦的待在水中復(fù)水的奶粉飲品，其由每份30g奶粉與表1中所列的成分以表1中提及量的一半量混合所組成。所述組合物在懷孕的至少妊娠晚期過程中，每天向孕婦施用兩次。實(shí)施例3短期(2小時(shí))和長(zhǎng)期(24小時(shí))培養(yǎng)后，測(cè)量L6分化型肌細(xì)胞中鋅和維生素D對(duì)葡萄糖攝取的影響。成分J指氯化鋅，并且成分K指1,25-二羥基維生素D3。以10μM和20μM測(cè)試成分J。以1nM和10nM測(cè)試成分K。在水中制備成分J并儲(chǔ)存在-20℃(母液為2M)下，并且在DMSO中制備成分K并且儲(chǔ)存在-20℃(母液為0.01mM)下。實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，將成分在含有5.5mMD-葡萄糖的無血清培養(yǎng)基(DMEM)中稀釋以達(dá)到最終的測(cè)試濃度和0.1％的DMSO。使L6成肌細(xì)胞保持在補(bǔ)充有10％胎牛血清(FBS)、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的生長(zhǎng)培養(yǎng)基或DMEM25mM葡萄糖中。對(duì)于葡萄糖攝取研究，使細(xì)胞在24孔板上以1000-1500個(gè)細(xì)胞/孔的密度在0.5mL生長(zhǎng)培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。鋪板后五天，在含有2％FBS、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的DMEM25mM葡萄糖中，并且在37℃下在5％CO2氣氛下進(jìn)行分化誘導(dǎo)為肌管。每隔一天更換培養(yǎng)基。對(duì)于短期培養(yǎng)(2小時(shí))，在測(cè)試前一天，將培養(yǎng)基替換為含有0.25％BSA、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的DMEM25mMD-葡萄糖。在測(cè)試后和測(cè)試前一天，洗滌細(xì)胞，并在有和沒有胰島素(100nM)的情況下，在所述成分的存在下，在含有5.5mMD-葡萄糖、0.34％BSA的DMEM中孵育2小時(shí)。為模擬生理?xiàng)l件和產(chǎn)生胰島素抗性，在葡萄糖攝取測(cè)量前，將一些細(xì)胞暴露于游離脂肪酸棕櫚酸酯(PALM)持續(xù)6小時(shí)。對(duì)于長(zhǎng)期培養(yǎng)(24小時(shí))，在測(cè)試前一天，在不存在胰島素的情況下，將細(xì)胞在所測(cè)試成分(成分J、K或其組合)的存在下在含有0.25％BSA、100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素的DMEM25mMD-葡萄糖中預(yù)培養(yǎng)18小時(shí)。在測(cè)試后和測(cè)試前一天，洗滌細(xì)胞，并在沒有胰島素的情況下，在所測(cè)試成分的存在下，在含有5.5mMD-葡萄糖、0.34％BSA的DMEM中將細(xì)胞再培養(yǎng)6小時(shí)。添加胰島素(100nM)持續(xù)最后2小時(shí)。在正常條件和生理?xiàng)l件下，通過將細(xì)胞與放射性標(biāo)記的2-脫氧-D-[1,23H]葡萄糖一起孵育15分鐘來測(cè)量葡萄糖攝取。通過在冰冷的PBS1X中進(jìn)行兩個(gè)洗滌步驟來抑制葡萄糖攝取。然后使細(xì)胞在0.1NNaOH中增溶30分鐘。然后計(jì)數(shù)與射性相關(guān)的細(xì)胞，并且使用Lowry比色法(coloricLowrymethod)確定蛋白質(zhì)定量。每種條件進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)。胰島素(100和1000nM/2小時(shí))和二甲雙胍(1.5mM/24小時(shí))用作陽性對(duì)照。結(jié)果表示為并入的葡萄糖的pmol/min/mg蛋白質(zhì)，和對(duì)照或基礎(chǔ)條件或胰島素0nM(100％)的百分比。進(jìn)行允許多重比較的統(tǒng)計(jì)分析(單因素ANOVA，隨后Dunnettt檢驗(yàn)；相比于對(duì)照條件，*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001)。與對(duì)照或基礎(chǔ)條件相比，顯示葡萄糖攝取顯著增加的所有成分被認(rèn)為是有活性的。結(jié)果示于圖1至圖12中。如從圖1和/或圖4可見，在存在或不存在胰島素的情況下，用成分J在短期培養(yǎng)(2小時(shí))后觀察到，在L6分化型肌細(xì)胞或胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中葡萄糖攝取沒有增加或只有輕微但不顯著的增加。如從圖2和/或圖5可見，在不存在胰島素的情況下，用成分K在短期孵育(2小時(shí))后，在L6分化型肌細(xì)胞和胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中觀察到葡萄糖攝取顯著增加。在胰島素(100nM)的存在下，成分K不增加胰島素誘導(dǎo)的葡萄糖攝取。如從圖3和/或圖6可見，在不存在胰島素的情況下，用成分K和成分J的組合在短期培養(yǎng)(2小時(shí))后，在L6分化型肌細(xì)胞和胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中觀察到葡萄糖攝取顯著增加。用成分K和成分J的組合觀察到的葡萄糖攝取的增加大于單獨(dú)測(cè)試的每種成分的相加值。如從圖7可見，在存在或不存在胰島素的情況下，用成分J在長(zhǎng)期培養(yǎng)(24小時(shí))后觀察到，在L6分化型肌細(xì)胞中葡萄糖攝取沒有增加或只有輕微但不顯著的增加。如從圖10可見，在存在或不存在胰島素的情況下，用成分J在長(zhǎng)期培養(yǎng)(24小時(shí))后觀察到，在胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中葡萄糖攝取沒有增加或只有輕微但不顯著的增加。如從圖8和圖11可見，在不存在胰島素的情況下，用成分K在長(zhǎng)期培養(yǎng)(24小時(shí))后觀察到，在L6分化型肌細(xì)胞和胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中葡萄糖攝取沒有增加或只有輕微但不顯著的增加。在存在胰島素的情況下，用成分K在長(zhǎng)期培養(yǎng)(24小時(shí))后觀察到，在L6分化型肌細(xì)胞和胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中葡萄糖攝取沒有增加或只有輕微但不顯著的增加。如從圖9和/或圖12可見，在不存在胰島素的情況下，用成分K和成分J的組合在長(zhǎng)期培養(yǎng)(24小時(shí))后，在L6分化型肌細(xì)胞和胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中觀察到葡萄糖攝取顯著增加。在存在胰島素的情況下，用成分K和成分J的組合在長(zhǎng)期培養(yǎng)(24小時(shí))后，在胰島素抗性L6分化型肌細(xì)胞中觀察到葡萄糖攝取有輕微但不顯著的增加。用成分K和成分J的組合觀察到的葡萄糖攝取的增加大于單獨(dú)測(cè)試的每種成分的相加值。當(dāng)前第1頁1 2 3