本發(fā)明涉及預(yù)防和/或治療肝病的方法。

背景技術(shù)：

基于疾病的持續(xù)時(shí)間，肝病通常被分類(lèi)為急性或慢性。肝病可以由感染、損傷、暴露于藥物或有毒化合物、酒精、食物中的雜質(zhì)，以及血液中正常物質(zhì)的異常積累、自身免疫過(guò)程、遺傳缺陷(例如血色素沉著病)或未知原因而引起。

肝病是全世界死亡的主要原因。特別地，已經(jīng)看到高脂肪的飲食以驚人地類(lèi)似于肝炎的方式損傷肝臟。美國(guó)肝臟基金會(huì)估計(jì)，超過(guò)20％的人口患有非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)。已表明肥胖、不健康的飲食和久坐的生活方式可能造成NAFLD的高發(fā)病率。當(dāng)不治療時(shí)，NAFLD可進(jìn)展到非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)。一旦NASH發(fā)展，它將導(dǎo)致肝隨時(shí)間膨脹和形成瘢痕(即肝硬化)。

盡管初步報(bào)告表明積極的生活方式可以預(yù)防或逆轉(zhuǎn)肝損傷，但仍沒(méi)有有效的NAFLD的藥物治療。因此，仍然需要提供新的有效的藥物來(lái)治療肝病。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本文公開(kāi)了在需要的患者中治療和/或預(yù)防肝病的方法，包括向患者給藥治療有效量的凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1(ASK1)抑制劑與治療有效量的法尼醇X受體(FXR)激動(dòng)劑的組合。所述肝病可為任何肝病，包括，但不限于，慢性和/或代謝肝病、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。

在具體實(shí)施方案中，本文提供在需要的患者中治療和/或預(yù)防非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的方法，包括向患者給藥治療有效量的ASK1抑制劑與治療有效量的FXR激動(dòng)劑的組合。

在本文提供的方法中，ASK1抑制劑和FXR激動(dòng)劑可共同給藥。在這些實(shí)施方案中，ASK1抑制劑和FXR激動(dòng)劑可作為單一藥物組合物一起給藥，或在多于一種藥物組合物中分開(kāi)給藥。因此，本文還提供包含治療有效量的ASK1抑制劑和治療有效量的FXR激動(dòng)劑的藥物組合物。

發(fā)明詳述

定義和通用參數(shù)

本說(shuō)明書(shū)使用的以下術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)通常意圖具有如在下文中闡述的含義，但上下文另外說(shuō)明的情況除外。

如本文所使用的，在定量測(cè)量的背景下使用的術(shù)語(yǔ)“約”是指指示量±10％，或者指示量±5％或±1％。

如本文所述，“ASK1抑制劑”可以是能夠滅活凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1(ASK1)蛋白的任何試劑。所述試劑可以是化學(xué)化合物或生物分子(例如蛋白質(zhì)或抗體)。ASK1蛋白活性可以通過(guò)幾種不同的方法測(cè)量。例如，ASK1蛋白的活性可以基于ASK1蛋白磷酸化底物蛋白的能力來(lái)確定。用于鑒定ASK1抑制劑的方法是已知的(參見(jiàn)，例如，美國(guó)2007/0276050和美國(guó)2011/0009410，兩者通過(guò)引用整體并入本文)。示例性的ASK1底物蛋白包括MAPKK3、MAPKK4、MAPKK6、MAPKK7或其片段。ASK1蛋白活性還可以通過(guò)ASK1蛋白的磷酸化水平測(cè)量，例如，對(duì)應(yīng)于人全長(zhǎng)ASK1蛋白的蘇氨酸838(T838)或小鼠全長(zhǎng)ASK1蛋白的蘇氨酸845(T845)的ASK1蛋白中的蘇氨酸殘基的磷酸化水平。例如，當(dāng)ASK1蛋白包含全長(zhǎng)人ASK1蛋白序列時(shí)，ASK1抑制劑可減弱全長(zhǎng)人ASK1蛋白序列中T838的磷酸化?？梢允褂冕槍?duì)人ASK1T838或小鼠ASK1T845的位點(diǎn)特異性抗體來(lái)檢測(cè)磷酸化水平。

如本文所用，“FXR激動(dòng)劑”是指能夠結(jié)合和活化可被稱(chēng)為膽汁酸受體(BAR)或NR1H4(核受體亞家族1，H組，成員4)受體的法尼醇X受體(FXR)。FXR激動(dòng)劑可以作為FXR的激動(dòng)劑或部分激動(dòng)劑。所述試劑可以是化學(xué)化合物或生物分子(例如蛋白質(zhì)或抗體)?？梢酝ㄟ^(guò)幾種不同的方法測(cè)量FXR激動(dòng)劑的活性，例如在使用熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)無(wú)細(xì)胞測(cè)定的體外測(cè)定中，如Pellicciari等人，Journal of Medicinal Chemistry，2002vol.15，No.45：3569-72所述。

術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”是指藥物化合物例如式(I)的化合物的鹽，其保持基礎(chǔ)化合物的生物有效性和性質(zhì)，且不是生物上或其它方面不合需要的。存在酸加成鹽和堿加成鹽。藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可從無(wú)機(jī)和有機(jī)酸制備。

用于與基礎(chǔ)化合物反應(yīng)形成藥學(xué)上可接受的鹽(分別為酸加成鹽或堿加成鹽)的酸和堿是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。類(lèi)似地，從基礎(chǔ)化合物制備藥學(xué)上可接受的鹽的方法(在公開(kāi)時(shí))是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的，并且公開(kāi)在例如Berge等人，Journal of Pharmaceutical Science，Jan.1977vol.66，No.1等來(lái)源。

如本文所用，“藥學(xué)上可接受的載體”包括對(duì)所公開(kāi)的化合物或其用途無(wú)害的賦形劑或試劑、例如溶劑、稀釋劑、分散介質(zhì)、包衣、抗細(xì)菌劑和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。使用這樣的載體和試劑制備藥物活性物質(zhì)的組合物是本領(lǐng)域公知的(參見(jiàn)例如Remington's Pharmaceutical Sciences，Mace Publishing Co.，Philadelphia，PA 17th Ed(1985)；和Modern Pharmaceutics，Marcel Dekker，Inc.3rd Ed.(G.S.Banker&C.T.Rhodes，Eds.)。

術(shù)語(yǔ)“治療有效量”和“有效量”可互換使用，并且是指當(dāng)一個(gè)或多個(gè)劑量給藥于需要這種治療的患者(例如，人)時(shí)足以實(shí)現(xiàn)如下定義的治療的化合物的量。治療有效量將根據(jù)患者、所治療的疾病、患者的體重和/或年齡、疾病的嚴(yán)重性或由合格的藥師或護(hù)理者確定的給藥方式而變化。

術(shù)語(yǔ)“治療”或“治療”是指給予式(I)的化合物或藥學(xué)上可接受的鹽用于以下目的：(i)延遲疾病的發(fā)作，即導(dǎo)致疾病的臨床癥狀不出現(xiàn)或延遲其出現(xiàn)；(ii)抑制疾病，即阻止臨床癥狀的發(fā)展；和/或(iii)緩解疾病，即引起臨床癥狀或其嚴(yán)重性的消退。

術(shù)語(yǔ)“烷基”是指一價(jià)支鏈的或直鏈的飽和烴鏈，其具有1至20個(gè)碳原子，或1至15個(gè)碳原子，或1至10個(gè)碳原子，或1至8個(gè)碳原子，或1至6個(gè)碳原子，或1至4個(gè)碳原子。該術(shù)語(yǔ)的實(shí)例為以下基團(tuán)，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正己基、正癸基、十四烷基，等。

術(shù)語(yǔ)“取代的烷基”是指：

1)如上定義的烷基，其具有1、2、3、4或5個(gè)取代基，(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)，所述取代基選自烯基、炔基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)烷氧基、環(huán)烯基氧基、?；?、?；被?、酰基氧基、氨基、取代的氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、巰基、烷基硫基、芳基、芳基氧基、雜芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、雜芳基氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烷氧基氨基、硝基、-S(O)-烷基、-S(O)-環(huán)烷基、-S(O)-雜環(huán)基、-S(O)-芳基、-S(O)-雜芳基、-S(O)₂-烷基、-S(O)₂-環(huán)烷基、-S(O)₂-雜環(huán)基、-S(O)₂-芳基和-S(O)₂-雜芳基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2；或

2)如上定義的烷基，其被1-10個(gè)獨(dú)立選自氧、硫和NR^a的原子(例如1、2、3、4或5個(gè)原子)所中斷，其中R^a選自氫、烷基、環(huán)烷基、烯基、環(huán)烯基、炔基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基。所有取代基可任選進(jìn)一步取代有烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2；或

3)如上定義的烷基，其具有如上定義的1、2、3、4或5個(gè)取代基且還被如上定義的1-10個(gè)原子(例如1、2、3、4或5個(gè)原子)所中斷。

術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷基”是指具有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的一價(jià)支鏈的或直鏈的飽和烴鏈。該術(shù)語(yǔ)的實(shí)例為以下基團(tuán)，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正己基，等。

術(shù)語(yǔ)“取代的低級(jí)烷基”是指具有1至5個(gè)取代基(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)的如上定義的低級(jí)烷基，所述取代基如取代的烷基所定義，或指被1、2、3、4或5個(gè)原子中斷的如上定義的低級(jí)烷基，所述原子如取代的烷基所定義，或指既具有如上定義的1、2、3、4或5個(gè)取代基且還被如上定義的1、2、3、4或5個(gè)原子所中斷的如上定義的低級(jí)烷基。

術(shù)語(yǔ)“亞烷基”是指二價(jià)支鏈或直鏈飽和烴鏈，在一些實(shí)施方案中，具有1至20個(gè)碳原子(例如1-10個(gè)碳原子或1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子)。該術(shù)語(yǔ)的實(shí)例為以下基團(tuán)，如亞甲基(-CH₂-)、亞乙基(-CH₂CH₂-)、亞丙基異構(gòu)體(例如，-CH₂CH₂CH₂-和-CH(CH₃)CH₂-)，等。

術(shù)語(yǔ)“低級(jí)亞烷基”是指二價(jià)支鏈或直鏈的飽和烴鏈，在一些實(shí)施方案中，具有1，2，3，4，5或6個(gè)碳原子。

術(shù)語(yǔ)“取代的亞烷基”是指具有1至5個(gè)取代基(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)的如上定義的亞烷基，所述取代基如取代的烷基所定義。

術(shù)語(yǔ)“芳烷基”是指共價(jià)連接至亞烷基的芳基，其中芳基和亞烷基在本文定義?！叭芜x取代的芳烷基”是指共價(jià)連接至任選取代的亞烷基的任選取代的芳基。這些芳烷基的實(shí)例為芐基、苯基乙基、3-(4-甲氧基苯基)丙基，等。

術(shù)語(yǔ)“芳烷基氧基”是指基團(tuán)-O-芳烷基?！叭芜x取代的芳烷基氧基”是指共價(jià)連接至任選取代的亞烷基的任選取代的芳烷基。這些芳烷基的實(shí)例為芐基氧基、苯基乙基氧基，等。

術(shù)語(yǔ)“烯基”是指具有2至20個(gè)碳原子(在一些實(shí)施方案中，2至10個(gè)碳原子，例如2至6個(gè)碳原子)且具有1至6個(gè)碳-碳個(gè)雙鍵，例如1、2或3個(gè)碳-碳個(gè)雙鍵的一價(jià)支鏈或直鏈的不飽和烴基。在一些實(shí)施方案中，烯基包括乙烯基(即-CH＝CH₂)，1-丙烯(或烯丙基，即-CH₂CH＝CH₂)，異丙烯(-C(CH₃)＝CH₂)，等。

術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烯基”是指具有2至6個(gè)碳原子的如上定義的烯基。

術(shù)語(yǔ)“取代的烯基”是指具有1至5個(gè)取代基(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)的如上定義的烯基，所述取代基如取代的烷基所定義。

術(shù)語(yǔ)“亞烯基”是指二價(jià)支鏈或直鏈的不飽和烴基，其具有2至20個(gè)碳原子(在一些實(shí)施方案中，2至10個(gè)碳原子，例如2至6個(gè)碳原子)且具有1至6個(gè)碳-碳雙鍵，例如1、2或3個(gè)碳-碳雙鍵。

術(shù)語(yǔ)“炔基”是指一價(jià)不飽和烴，在一些實(shí)施方案中，其具有2至20個(gè)碳原子(在一些實(shí)施方案中，2至10個(gè)碳原子，例如2至6個(gè)碳原子)且具有1至6個(gè)碳-碳叁鍵例如1、2或3個(gè)碳-碳叁鍵。在一些實(shí)施方案中，炔基包括乙炔基(-C≡CH)、炔丙基(或丙炔基，即-C≡CCH₃)，等。

術(shù)語(yǔ)“取代的炔基”是指具有1至5個(gè)取代基(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)的如上定義的炔基，所述取代基如取代的烷基所定義。

術(shù)語(yǔ)“亞炔基”是指二價(jià)不飽和烴，在一些實(shí)施方案中，具有2至20個(gè)碳原子(在一些實(shí)施方案中，2至10個(gè)碳原子，例如2至6個(gè)碳原子)且具有1至6個(gè)碳-碳叁鍵例如1、2或3個(gè)碳-碳叁鍵。

術(shù)語(yǔ)“羥基”或“氫氧基”是指基團(tuán)–OH。

術(shù)語(yǔ)“烷氧基”是指基團(tuán)R-O-，其中R為烷基或-Y-Z，其中Y為亞烷基且Z為烯基或炔基，其中烷基、烯基和炔基如本文所定義。在一些實(shí)施方案中，烷氧基為烷基-O-且包括，作為實(shí)例，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己基氧基、1,2-二甲基丁氧基，等。

術(shù)語(yǔ)“低級(jí)烷氧基”是指基團(tuán)R-O-其中R為任選取代的低級(jí)烷基。該術(shù)語(yǔ)的實(shí)例為以下基團(tuán)，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、正己基氧基，等。

術(shù)語(yǔ)“取代的烷氧基”是指基團(tuán)R-O-，其中R為取代的烷基或-Y-Z，其中Y為取代的亞烷基且Z為取代的烯基或取代的炔基，其中取代的烷基、取代的烯基和取代的炔基如本文所定義。

術(shù)語(yǔ)“C_1-3鹵代烷基”是指共價(jià)連接至1至7，或1至6，或1至3個(gè)鹵素的具有1至3個(gè)碳原子的烷基，其中烷基和鹵素在本文定義。在一些實(shí)施方案中，C_1-3鹵代烷基包括，作為實(shí)例，三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、2,2,2-三氟乙基、2,2-二氟乙基、2-氟乙基、3,3,3-三氟丙基、3,3-二氟丙基、3-氟丙基。

術(shù)語(yǔ)“C_1-3羥基烷基”是指具有共價(jià)連接至羥基的碳原子的烷基，其中烷基和羥基在本文定義。在一些實(shí)施方案中，C_1-3羥基烷基包括，作為實(shí)例，2-羥基乙基。

術(shù)語(yǔ)“C_1-3氰基烷基”是指具有共價(jià)連接至氰基的碳原子的烷基，其中烷基和氰基在本文定義。在一些實(shí)施方案中，C_1-3氰基烷基包括，作為實(shí)例，2-氰基乙基。

術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”是指3至20個(gè)碳原子，或3至10個(gè)碳原子的環(huán)烷基，其具有單個(gè)環(huán)或多稠合環(huán)。這些環(huán)烷基包括，作為實(shí)例，單環(huán)結(jié)構(gòu)如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)辛基等，或多環(huán)結(jié)構(gòu)如金剛烷基和雙環(huán)[2.2.1]庚基，或與芳基稠合的環(huán)烷基，例如茚滿(mǎn)基等，條件是連接點(diǎn)是經(jīng)由環(huán)烷基。

術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基”是指具有單個(gè)環(huán)或多個(gè)稠合的環(huán)且具有至少一個(gè)雙鍵的3至20個(gè)碳原子的環(huán)烷基，在一些實(shí)施方案中，具有1至2個(gè)雙鍵。

術(shù)語(yǔ)“取代的環(huán)烷基”和“取代的環(huán)烯基”是指具有1、2、3、4或5個(gè)取代基(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)的環(huán)烷基或環(huán)烯基，所述取代基選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)烷氧基、環(huán)烯基氧基、?；?、?；被Ⅴ；趸?、氨基、取代的氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、巰基、烷基硫基、芳基、芳基氧基、雜芳基、氨基磺酰基、氨基羰基氨基、雜芳基氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烷氧基氨基、硝基、-S(O)-烷基、-S(O)-環(huán)烷基、-S(O)-雜環(huán)基、-S(O)-芳基、-S(O)-雜芳基、-S(O)₂-烷基、-S(O)₂-環(huán)烷基、-S(O)₂-雜環(huán)基、-S(O)₂-芳基和-S(O)₂-雜芳基。術(shù)語(yǔ)“取代的環(huán)烷基”還包括其中環(huán)烷基的一個(gè)或多個(gè)環(huán)碳原子在其上結(jié)合氧代基團(tuán)的環(huán)烷基。此外，環(huán)烷基或環(huán)烯基上的取代基可連接至與取代的環(huán)烷基或環(huán)烯基和6,7-環(huán)體系的連接相同的碳原子，或連接至在取代的環(huán)烷基或環(huán)烯基和6,7-環(huán)體系的連接孿位的碳原子。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷氧基”是指基團(tuán)環(huán)烷基-O-。

術(shù)語(yǔ)“取代的環(huán)烷氧基”是指基團(tuán)取代的環(huán)烷基-O-。

術(shù)語(yǔ)“環(huán)烯基氧基”是指基團(tuán)環(huán)烯基-O-。

術(shù)語(yǔ)“取代的環(huán)烯基氧基”是指基團(tuán)取代的環(huán)烯基-O-。

術(shù)語(yǔ)“芳基”是指具有單個(gè)環(huán)(例如，苯基)或多個(gè)環(huán)(例如，聯(lián)苯基)或多稠合的(稠合)環(huán)(例如，萘基、芴基和蒽基)的6至20個(gè)碳原子的芳族碳環(huán)基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，芳基包括苯基、芴基、萘基、蒽基等。

除非另外被芳基取代基的定義所限制，所述芳基可任選取代有1、2、3、4或5個(gè)取代基(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)，所述取代基選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)烷氧基、環(huán)烯基氧基、酰基、?；被?、酰基氧基、氨基、取代的氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、巰基、烷基硫基、芳基、芳基氧基、雜芳基、氨基磺?；?、氨基羰基氨基、雜芳基氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烷氧基氨基、硝基、-S(O)-烷基、-S(O)-環(huán)烷基、-S(O)-雜環(huán)基、-S(O)-芳基、-S(O)-雜芳基、-S(O)₂-烷基、-S(O)₂-環(huán)烷基、-S(O)₂-雜環(huán)基、-S(O)₂-芳基和-S(O)₂-雜芳基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“芳基氧基”是指基團(tuán)芳基-O-，其中所述芳基如上定義，且包括同樣如上定義的任選取代的芳基。術(shù)語(yǔ)“芳基硫基”是指基團(tuán)R-S-，其中R如芳基所定義。

術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基”、“雜環(huán)”或“雜環(huán)的”是指一價(jià)飽和基團(tuán)，其具有單個(gè)環(huán)或多稠合環(huán)，具有1至40個(gè)碳原子和1至10雜原子，且在環(huán)中具有1至4個(gè)選自氮、硫、磷和/或氧的雜原子。在一些實(shí)施方案中，所述“雜環(huán)基”、“雜環(huán)”或“雜環(huán)的”基團(tuán)通過(guò)環(huán)內(nèi)的一個(gè)雜原子連接至分子的剩余部分。

除非另外被雜環(huán)取代基的定義所限制，所述雜環(huán)基可任選取代有1至5個(gè)取代基(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)，所述取代基選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)烷氧基、環(huán)烯基氧基、?；?、?；被Ⅴ；趸被?、取代的氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、巰基、烷基硫基、芳基、芳基氧基、雜芳基、氨基磺?；?、氨基羰基氨基、雜芳基氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烷氧基氨基、硝基、-S(O)-烷基、-S(O)-環(huán)烷基、-S(O)-雜環(huán)基、-S(O)-芳基、-S(O)-雜芳基、-S(O)₂-烷基、-S(O)₂-環(huán)烷基、-S(O)₂-雜環(huán)基、-S(O)₂-芳基和-S(O)₂-雜芳基。此外，雜環(huán)基上的取代基可連接至與取代的雜環(huán)基和6,7-環(huán)體系的連接相同的碳原子，或連接至在取代的雜環(huán)基和6,7-環(huán)體系的連接孿位的碳原子。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。雜環(huán)基的實(shí)例包括四氫呋喃基、嗎啉代、哌啶基等。

術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)氧基”是指基團(tuán)–O-雜環(huán)基。

術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是指包含單個(gè)或多個(gè)環(huán)的基團(tuán)，所述環(huán)在至少一個(gè)環(huán)內(nèi)包含1至15個(gè)碳原子和1至4個(gè)選自氧、氮和硫的雜原子。術(shù)語(yǔ)“雜芳基”是術(shù)語(yǔ)“芳族雜芳基”和“部分飽和雜芳基”的上位概念。術(shù)語(yǔ)“芳族雜芳基”是指其中至少一個(gè)環(huán)為芳族的雜芳基，無(wú)論連接點(diǎn)為何。芳族雜芳基的實(shí)例包括吡咯，噻吩、吡啶、喹啉、蝶啶。

術(shù)語(yǔ)“部分飽和雜芳基”是指具有與基礎(chǔ)芳族雜芳基等同結(jié)構(gòu)的雜芳基，其在基礎(chǔ)芳族雜芳基的芳環(huán)中的一個(gè)或多個(gè)雙鍵是飽和的。部分飽和雜芳基的實(shí)例包括二氫吡咯、二氫吡啶、色滿(mǎn)、2-氧代-1,2-二氫吡啶-4-基，等。

除非另外被雜芳基取代基的定義所限制，這些雜芳基可任選取代有1至5個(gè)取代基(在一些實(shí)施方案中，1、2或3個(gè)取代基)，所述取代基選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烯基、環(huán)烷氧基、環(huán)烯基氧基、?；?、?；被Ⅴ；趸?、氨基、取代的氨基、氨基羰基、烷氧基羰基氨基、疊氮基、氰基、鹵素、羥基、酮基、硫代羰基、羧基、羧基烷基、芳基硫基、雜芳基硫基、雜環(huán)基硫基、巰基、烷基硫基、芳基、芳基氧基、雜芳基、氨基磺?；被驶被?、雜芳基氧基、雜環(huán)基、雜環(huán)氧基、羥基氨基、烷氧基氨基、硝基、-S(O)-烷基、-S(O)-環(huán)烷基、-S(O)-雜環(huán)基、-S(O)-芳基、-S(O)-雜芳基、-S(O)₂-烷基、-S(O)₂-環(huán)烷基、-S(O)₂-雜環(huán)基、-S(O)₂-芳基和-S(O)₂-雜芳基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。這些雜芳基可具有單個(gè)環(huán)(例如，吡啶基或呋喃基)或多個(gè)稠合的環(huán)(例如，中氮茚基，苯并噻唑或苯并噻吩基)。氮雜環(huán)基和雜芳基的實(shí)例包括包括，但不限于，吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、吲嗪、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、酞嗪、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉等以及含N-烷氧基-氮的雜芳基化合物。

術(shù)語(yǔ)“雜芳基氧基”是指基團(tuán)雜芳基-O-。

術(shù)語(yǔ)“氨基”是指基團(tuán)-NH₂。

術(shù)語(yǔ)“取代的氨基”是指基團(tuán)-NRR，其中各個(gè)R獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基，條件是兩個(gè)R基團(tuán)不都是氫，或R獨(dú)立地為基團(tuán)-Y-Z，其中Y為任選取代的亞烷基且Z為烯基、環(huán)烯基或炔基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“烷基胺”是指R-NH₂，其中R為任選取代的烷基。

術(shù)語(yǔ)“二烷基胺”是指R-NHR，其中各個(gè)R獨(dú)立地為任選取代的烷基。

術(shù)語(yǔ)“三烷基胺”是指NR₃，其中各個(gè)R獨(dú)立地為任選取代的烷基。

術(shù)語(yǔ)“氰基”是指基團(tuán)-CN。

術(shù)語(yǔ)“疊氮基”是指基團(tuán)

術(shù)語(yǔ)“酮基”或“氧代”是指基團(tuán)＝O。

術(shù)語(yǔ)“羧基”是指基團(tuán)-C(O)-OH。

術(shù)語(yǔ)“酯”或“羧基酯”是指基團(tuán)-C(O)OR，其中R為烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其可任選進(jìn)一步取代有烷基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基或–S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“?；北硎净鶊F(tuán)-C(O)R，其中R為氫、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“羧基烷基”是指基團(tuán)-C(O)O-烷基或-C(O)O-環(huán)烷基，其中烷基和環(huán)烷基如本文所定義，且可任選進(jìn)一步取代有烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“氨基羰基”是指基團(tuán)-C(O)NRR，其中各個(gè)R獨(dú)立地為氫、烷基，環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基，或其中兩個(gè)R基團(tuán)連接在一起以形成雜環(huán)基(例如，嗎啉代)。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“?；趸笔侵富鶊F(tuán)–OC(O)-R，其中R為烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“?；被笔侵富鶊F(tuán)-NRC(O)R，其中各個(gè)R獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“烷氧基羰基氨基”是指基團(tuán)–N(R^d)C(O)OR其中R為烷基且R^d為氫或烷基。除非另外被定義所限制，各個(gè)烷基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“氨基羰基氨基”是指基團(tuán)–NR^cC(O)NRR，其中R^c為氫或烷基且各個(gè)R為氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“巰基”是指基團(tuán)-SH。

術(shù)語(yǔ)“硫代羰基”是指基團(tuán)＝S。

術(shù)語(yǔ)“烷基硫基”是指基團(tuán)-S-烷基。

術(shù)語(yǔ)“取代的烷基硫基”是指基團(tuán)-S-取代的烷基。

術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)基硫基”是指基團(tuán)-S-雜環(huán)基。

術(shù)語(yǔ)“芳基硫基”是指基團(tuán)-S-芳基。

術(shù)語(yǔ)“雜芳基巰基”是指基團(tuán)-S-雜芳基，其中所述雜芳基如上定義且包括同樣如上定義的任選取代的雜芳基。

術(shù)語(yǔ)“亞砜”是指基團(tuán)-S(O)R，其中R為烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基。“取代的亞砜”是指基團(tuán)-S(O)R，其中R為取代的烷基、取代的環(huán)烷基、取代的雜環(huán)基、取代的芳基或取代的雜芳基，如上定義。

術(shù)語(yǔ)“砜”是指基團(tuán)-S(O)₂R，其中R為烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基?！叭〈捻俊笔侵富鶊F(tuán)-S(O)₂R，其中R為取代的烷基、取代的環(huán)烷基、取代的雜環(huán)基、取代的芳基或取代的雜芳基，如上定義。

術(shù)語(yǔ)“氨基磺酰基”是指基團(tuán)–S(O)₂NRR，其中每個(gè)R獨(dú)立地為氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基。除非另外被定義所限制，所有取代基可任選進(jìn)一步取代有1、2或3個(gè)選自以下的取代基：烷基、烯基、炔基、羧基、羧基烷基、氨基羰基、羥基、烷氧基、鹵素、CF₃、氨基、取代的氨基、氰基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基和-S(O)_nR^a，其中R^a為烷基、芳基或雜芳基且n為0、1或2。

術(shù)語(yǔ)“羥基氨基”是指基團(tuán)–NHOH。

術(shù)語(yǔ)“烷氧基氨基”是指基團(tuán)–NHOR其中R為任選取代的烷基。

術(shù)語(yǔ)“鹵素”或“鹵”是指氟、溴、氯和碘。

“任選”或“任選地”意思是隨后所述的事件或情形可發(fā)生或可不發(fā)生，且所述描述包括其中所述事件或情形發(fā)生的情況以及其中所述事件或情形不發(fā)生的情況。

“取代的”基團(tuán)包括其中單價(jià)取代基與取代基團(tuán)的單個(gè)原子結(jié)合(例如形成支鏈)的實(shí)施方案，并且還包括其中取代基可以是結(jié)合到取代基的兩個(gè)相鄰原子上的二價(jià)橋接基團(tuán)從而在取代的基團(tuán)上形成稠環(huán)的實(shí)施方案。

當(dāng)給定基團(tuán)(部分)在本文中描述為連接至第二基團(tuán)且連接位點(diǎn)不明確時(shí)，給定基團(tuán)可在給定基團(tuán)的任何可用位點(diǎn)連接至第二基團(tuán)的任何可用位點(diǎn)。例如，其中連接位置不明確的“低級(jí)烷基取代的苯基”中低級(jí)烷基的任何可用位點(diǎn)可以連接到苯基的任何可用位點(diǎn)。在這點(diǎn)上，“可用位點(diǎn)”是基團(tuán)的氫可以被取代基替代的位點(diǎn)。

應(yīng)理解，在上文定義的所有取代基中，通過(guò)用進(jìn)一步的取代基對(duì)取代基自身限定而得到的聚合物(例如，具有取代的芳基作為取代基的取代的芳基，該取代基本身被取代的芳基取代等)不意圖包括在本文中。還不包括無(wú)限數(shù)目的取代基，無(wú)論取代基是相同的還是不同的。在這種情況下，這種取代基的最大數(shù)目為三個(gè)。因此，上述定義中的每一個(gè)受限于一定的限制，即例如，取代的芳基限于-取代的芳基-(取代的芳基)-取代的芳基。

肝病

肝病是在疾病持續(xù)期間對(duì)肝臟的急性或慢性損害。肝損傷可以由感染、損傷、暴露于藥物或有毒化合物例如酒精或食物中的雜質(zhì)、血液中正常物質(zhì)的異常積累、自身免疫過(guò)程、遺傳缺陷(例如血色病)或其他未知原因引起。示例性肝病包括但不限于肝硬化，肝纖維化，非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，酒精性脂肪性肝炎(ASH)，肝缺血再灌注損傷，原發(fā)性膽汁性肝硬化(PBC)和肝炎，包括病毒性和酒精性肝炎。

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是并非由酒精引起的肝細(xì)胞中額外脂肪的積聚。NAFLD可能導(dǎo)致肝臟腫脹(即脂肪性肝炎)，這又可能隨著時(shí)間而引起瘢痕(即肝硬化)，并可能導(dǎo)致肝癌或肝衰竭。NAFLD的特征在于脂肪在肝細(xì)胞中的積累，并且通常與代謝綜合征(例如2型糖尿病、胰島素抵抗、高脂血癥、高血壓)的一些方面相關(guān)。這種疾病的頻率已經(jīng)變得越來(lái)越常見(jiàn)，這是由于消耗富含碳水化合物和高脂肪的飲食。NAFLD患者的一個(gè)亞組(～20％)發(fā)展為非酒精性脂肪性肝炎(NASH)。

NASH是脂肪肝疾病的亞型，是更嚴(yán)重的NAFLD形式。其特征在于大泡性脂肪變性、肝細(xì)胞的球囊變性和/或最終導(dǎo)致肝瘢痕形成(即纖維化)的炎癥。診斷為NASH的患者進(jìn)展到晚期肝纖維化并最終肝硬化。目前對(duì)具有晚期疾病的肝硬化NASH患者的治療是肝移植。

一項(xiàng)研究顯示，大部分比例的已診斷的NASH患者(39％)沒(méi)有進(jìn)行肝活檢以確認(rèn)診斷。相比于文獻(xiàn)報(bào)道，更大比例的診斷的NASH患者具有代謝綜合征參數(shù)(II型糖尿病54％，肥胖71％，代謝綜合征59％)。與實(shí)踐指南建議相比，82％的醫(yī)生使用較低的閾值來(lái)定義顯著的酒精消耗。88％的醫(yī)生為NASH開(kāi)具某種形式的藥物治療(維生素E：為53％的NASH患者開(kāi)具，他汀類(lèi)藥物：57％，二甲雙胍：50％)。因此，絕大多數(shù)患者被開(kāi)具藥物，盡管缺乏確診或顯著數(shù)據(jù)支持該干預(yù)，且排除NASH的酒精閾值低于預(yù)期。

另一種常見(jiàn)的肝病是原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)。它是慢性或長(zhǎng)期肝病，慢慢損傷肝臟內(nèi)部和外部的膽管。在患有PSC的患者中，膽汁由于膽管堵塞而積聚在肝臟中，其逐漸損傷肝細(xì)胞并引起肝硬化或肝臟瘢痕形成。目前，沒(méi)有有效的治療方法來(lái)治愈PSC。許多患有PSC的患者由于肝衰竭最終需要肝移植，通常在被診斷患有該疾病大約10年后。PSC也可能導(dǎo)致膽管癌。

肝纖維化是在大多數(shù)類(lèi)型的慢性肝病中發(fā)生的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白(包括膠原)的過(guò)度積累。晚期肝纖維化導(dǎo)致肝硬化、肝衰竭和門(mén)靜脈高血壓，并且通常需要肝移植。

方法

本文公開(kāi)了在需要的患者中治療和/或預(yù)防肝病的方法，包括向患者給藥治療有效量的ASK1抑制劑與治療有效量的FXR激動(dòng)劑的組合。活性肝病的存在可以通過(guò)血液中升高的酶水平的存在來(lái)檢測(cè)。具體來(lái)說(shuō)，已知高于臨床上接受的正常范圍的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)的血液水平指示正在進(jìn)行的肝損傷。對(duì)肝病患者的ALT和AST的血液水平的常規(guī)監(jiān)測(cè)在臨床上用于測(cè)量在醫(yī)療治療時(shí)肝病的進(jìn)展。將升高的ALT和AST降低到接受的正常范圍內(nèi)作為臨床證據(jù)，反映患者正在進(jìn)行的肝損傷的嚴(yán)重性的降低。

在具體實(shí)施方案中，肝病是慢性肝病。慢性肝病涉及肝實(shí)質(zhì)的進(jìn)行性破壞和再生，導(dǎo)致纖維化和肝硬化。一般來(lái)說(shuō)，慢性肝病可由病毒(例如乙型肝炎、丙型肝炎、巨細(xì)胞病毒(CMV)或Epstein Barr病毒(EBV))、毒性劑或藥物(例如酒精、甲氨蝶呤或呋喃妥因)、代謝性疾病(例如非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、血色素沉著病或威爾遜氏病)、自身免疫性疾病(例如自身免疫性慢性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化或原發(fā)性硬化性膽管炎)或其他原因(例如右心力衰竭)引起。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供了用于降低肝硬化水平的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，肝硬化在病理上的特征為正常微小小葉結(jié)構(gòu)的損失、纖維化和結(jié)節(jié)再生。測(cè)量肝硬化程度的方法是本領(lǐng)域熟知的。在一個(gè)實(shí)施方案中，肝硬化水平降低約5％至約100％。在一個(gè)實(shí)施方案中，在受試者中肝硬化水平降低至少約5％，至少約10％，至少約15％，至少約20％，至少約25％，至少約30％，至少約35％，至少約40％，至少約45％，至少50％，至少約55％，至少約60％，至少約65％，至少約70％，至少約75％，至少約80％，至少約85％，至少約90％，至少約95％，或約100％。

在具體實(shí)施方案中，所述肝病為代謝肝病。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述肝病為非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)。NAFLD與胰島素抵抗和代謝綜合征(肥胖癥、混合型高脂血癥、糖尿病(II型)和高血壓)相關(guān)。認(rèn)為NAFLD涵蓋一系列疾病活性，且開(kāi)始為在肝中的脂肪累積(肝性脂肪變性)。

已經(jīng)顯示，肥胖和胰島素抵抗可能在NAFLD的疾病過(guò)程中發(fā)揮強(qiáng)烈的作用。除了飲食不良之外，NAFLD還有幾種其他已知的原因。例如，NAFLD可由某些藥物引起，例如胺碘酮，抗病毒藥物(例如核苷類(lèi)似物)，阿司匹林(很少作為兒童Reye綜合征的一部分)，皮質(zhì)類(lèi)固醇，甲氨蝶呤，他莫昔芬或四環(huán)素。NAFLD還通過(guò)高果糖玉米糖漿的存在與軟飲料的消耗相關(guān)，這可能引起脂肪在腹部增加的沉積，盡管蔗糖的消耗顯示類(lèi)似的效果(可能是由于其分解成果糖)。遺傳學(xué)也被認(rèn)為發(fā)揮了作用，因?yàn)橐呀?jīng)確定了這種易感性的兩個(gè)遺傳突變。

如果不治療，NAFLD可以發(fā)展成非酒精性脂肪性肝炎(NASH)，其是NAFLD的最極端形式，其中脂肪變性與炎癥和纖維化結(jié)合的狀態(tài)。NASH被認(rèn)為是未知原因的肝硬化的主要原因。因此，本文提供在需要的患者中治療和/或預(yù)防非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的方法，包括向患者給藥治療有效量的ASK1抑制劑與治療有效量的FXR激動(dòng)劑的組合。

本文還提供在需要的患者中治療和/或預(yù)防肝纖維化的方法，包括向患者給藥治療有效量的ASK1抑制劑與治療有效量的FXR激動(dòng)劑的組合。肝纖維化是在大多數(shù)類(lèi)型的慢性肝病中發(fā)生的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白(包括膠原)的過(guò)度積累。在具體實(shí)施方案中，晚期肝纖維化導(dǎo)致肝硬化和肝衰竭。用于測(cè)量肝組織學(xué)的方法，例如纖維化程度、小葉性肝炎和門(mén)靜脈周?chē)鷺蚪訅乃赖淖兓潜绢I(lǐng)域公知的。

在一個(gè)實(shí)施方案中，肝纖維化(其為纖維組織形成、纖維瘤或纖維變性)的水平降低超過(guò)約90％。在一個(gè)實(shí)施方案中，肝纖維化(其為纖維組織形成、纖維瘤或纖維變性)的水平降低至少約90％，至少約80％，至少約70％，至少約60％，至少約50％，至少約40％，至少約30％，至少約20％，至少約10％，至少約5％或至少約2％。

在一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的化合物降低肝臟中的纖維形成水平。肝纖維形成是導(dǎo)致稱(chēng)為纖維化的肝中過(guò)量細(xì)胞外基質(zhì)組分沉積的過(guò)程。它在諸如慢性病毒性乙型肝炎和丙型肝炎，酒精性肝病，藥物誘導(dǎo)的肝病，血色素沉著病，自身免疫性肝炎，威爾遜病，原發(fā)性膽汁性肝硬化，硬化性膽管炎，肝血吸蟲(chóng)病等許多病癥中觀察到。在一個(gè)實(shí)施方案中，纖維形成水平降低超過(guò)約90％。在一個(gè)實(shí)施方案中，纖維形成水平降低至少約90％，至少約80％，至少約70％，至少約60％，至少約50％，至少40％，至少約30％，至少約20％，至少約10％，至少約5％或至少2％。

在其它實(shí)施方案中，本文提供在需要的患者中治療和/或預(yù)防原發(fā)性硬化性膽管炎(PSC)的方法，包括向患者給藥治療有效量的ASK1抑制劑與治療有效量的FXR激動(dòng)劑的組合。

ASK1抑制劑

用于本文公開(kāi)的方法和藥物組合物中的ASK1抑制劑可以是能夠滅活凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1(ASK1)蛋白的任何化學(xué)化合物或生物分子(例如蛋白質(zhì)或抗體)。用于本文所述方法中的ASK1抑制劑是已知的(參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2011/0009410、2013/0197037、2013/0197037、2014/0179663和2014/0018370，其都以其整體在此引入作為參考)，和/或可以通過(guò)已知方法鑒定(參見(jiàn)例如美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2007/0276050和2011/0009410，其通過(guò)引用整體并入本文)。

在具體實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為具有式(I)結(jié)構(gòu)的化合物：

其中：

R¹為烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基氧基、-NO₂、R⁶、-C(O)-R⁶、-OC(O)-R⁶-C(O)-O-R⁶、C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-OC(O)-N(R⁶)(R⁷)、-S-R⁶、-S(═O)-R⁶、-S(═O)₂R⁶、-S(═O)₂-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)₂-O-R⁶、-N(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)-C(O)-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-O-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)-S(═O)₂-R⁶、-CN和-O-R⁶，且其中所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、苯基和苯氧基任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：烷基、環(huán)烷基、烷氧基、羥基和鹵素；其中R⁶和R⁷獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，它們都任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：鹵素、烷基、單烷基氨基、二烷基氨基、烷基酰胺、芳基酰胺、雜芳基酰胺、-CN、低級(jí)烷氧基、-CF₃、芳基和雜芳基；或

R⁶和R⁷連同它們連接的氮一起形成雜環(huán)；

R²為氫、鹵素、氰基、烷氧基、或任選被鹵素取代的烷基；

R³為芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：烷基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、鹵素、氧代、-NO₂、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-CN、-O-R⁶、-O-C(O)-R⁶、-O-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-S-R⁶、-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)-R⁶、-S(═O)₂R⁶、-S(═O)₂-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)₂-O-R⁶、-N(R⁶)-C(O)-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-O-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-C(O)-R⁶、-C(O)-R⁶、-C(O)-N(R⁶)(R⁷)和-N(R⁶)-S(═O)₂-R⁷，其中所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、-NO₂、烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-N(R⁶)(R⁷)、-C(O)-R⁶、-C(O)-O-R⁶、-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-CN、-O-R⁶、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基；條件是所述雜芳基或雜環(huán)基部分包含至少一個(gè)環(huán)氮原子；

X¹、X²、X³、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷和X⁸獨(dú)立地為C(R⁴)或N，其中各個(gè)R⁴獨(dú)立地為氫、烷基、烷氧基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、鹵素、-NO₂、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-CN、-O-R⁶、-S-R⁶、-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)-R⁶、-S(═O)₂R⁶、-S(═O)₂-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)₂-O-R⁶、-N(R⁶)-C(O)-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-O-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-C(O)-R⁶、-C(O)-O-R⁶、-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、或-N(R⁶)-S(═O)₂-R⁷，其中所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基進(jìn)一步任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、-NO₂、-CF₃、-O-CF₃、-N(R⁶)(R⁷)、-C(O)-R⁶、-C(O)-O-R⁷、-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-CN、-O-R⁶；或

X⁵和X⁶或X⁶和X⁷連接以提供任選取代的稠合芳基或任選取代的稠合雜芳基；且

條件是X²、X³和X⁴中至少一個(gè)為C(R⁴)；X⁵、X⁶、X⁷和X⁸中至少兩個(gè)為C(R⁴)；且X²、X³、X⁴、X⁵、X⁶、X⁷和X⁸中至少一個(gè)為N；

或其藥學(xué)上可接受的鹽、異構(gòu)體或混合物。

在具體實(shí)施方案中，式(I)的化合物具有式(IA)的結(jié)構(gòu)：

其中：

R¹為烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基、其中所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基氧基、-NO₂、R⁶、-C(O)-R⁶、-OC(O)-R⁶-C(O)-O-R⁶、C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-OC(O)-N(R⁶)(R⁷)、-S-R⁶、-S(═O)-R⁶、-S(═O)₂R⁶、-S(═O)₂-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)₂-O-R⁶、-N(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)-C(O)-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-O-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-N(R⁶)-S(═O)₂-R⁶、-CN和-O-R⁶，且其中所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、苯基和苯氧基任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：烷基、環(huán)烷基、烷氧基、羥基和鹵素；其中R⁶和R⁷獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，它們都任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：鹵素、烷基、單烷基氨基、二烷基氨基、烷基酰胺、芳基酰胺、雜芳基酰胺，-CN，低級(jí)烷氧基，-CF₃、芳基和雜芳基；或

R⁶和R⁷連同它們連接的氮一起形成雜環(huán)；

R⁸為氫、烷基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、鹵素、氧代、-NO₂、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-CN、-O-R⁶、-O-C(O)-R⁶、-O-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-S-R⁶、-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)-R⁶、-S(═O)₂R⁶、-S(═O)₂-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)₂-O-R⁶、-N(R⁶)-C(O)-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-O-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-C(O)-R⁶、-C(O)-R⁶、-C(O)-N(R⁶)(R⁷)和-N(R⁶)-S(═O)₂-R⁷，其中所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、-NO₂、烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-N(R⁶)(R⁷)、-C(O)-R⁶、-C(O)-O-R⁶、-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-CN、-O-R⁶、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基；條件是所述雜芳基或雜環(huán)基部分包含至少一個(gè)環(huán)氮原子；

X²和X⁵獨(dú)立地為C(R⁴)或N；且

各個(gè)R⁴獨(dú)立地為氫、烷基、烷氧基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、鹵素、-NO₂、鹵代烷基、鹵代烷氧基、-CN、-O-R⁶、-S-R⁶、-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)-R⁶、-S(═O)₂R⁶、-S(═O)₂-N(R⁶)(R⁷)、-S(═O)₂-O-R⁶、-N(R⁶)-C(O)-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-O-R⁷、-N(R⁶)-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-C(O)-R⁶、-C(O)-O-R⁶、-C(O)-N(R⁶)(R⁷)或-N(R⁶)-S(═O)₂-R⁷，其中所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基進(jìn)一步任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、-NO₂、-CF₃、-O-CF₃、-N(R⁶)(R⁷)、-C(O)-R⁶、-C(O)-O-R⁷、-C(O)-N(R⁶)(R⁷)、-CN和-O-R⁶；

條件是X²和X⁵中至少一個(gè)為N；

或其藥學(xué)上可接受的鹽、異構(gòu)體或混合物。

用于本文所述的方法和藥物組合物的式(I)和(IA)的示例性化合物可參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2011/0009410，其通過(guò)引用整體并入本文。

在具體實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為式(II)的化合物：

其中：

R²¹為烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有1至4個(gè)選自以下的取代基：鹵素、羥基，氧代、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基氧基、NO₂、R²⁶、C(O)R²⁶、OC(O)R²⁶C(O)OR²⁶、C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、OC(O)N(R²⁶)(R²⁷)、SR²⁶、S(═O)R²⁶、S(═O)₂R²⁶、S(═O)₂N(R²⁶)(R²⁷)、S(═O)₂OR²⁶、N(R²⁶)(R²⁷)、N(R²⁶)C(O)R²⁷、N(R²⁶)C(O)OR²⁷、N(R²⁶)C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、N(R²⁶)S(═O)₂R²⁶、CN和OR²⁶，其中所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳基氧基任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：烷基、環(huán)烷基、烷氧基、羥基和鹵素；

R²⁶和R²⁷獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：鹵素、烷基、單烷基氨基、二烷基氨基、烷基酰胺、芳基酰胺、雜芳基酰胺、CN、低級(jí)烷氧基、CF₃、芳基和雜芳基；或

R²⁶和R²⁷連同它們連接的氮一起形成雜環(huán)；

R²²為芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：烷基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、鹵素、氧代、NO₂、鹵代烷基、鹵代烷氧基、CN、OR²⁶、OC(O)R²⁶、OC(O)N(R²⁶)(R²⁷)、SR²⁶、N(R²⁶)(R²⁷)、S(═O)R²⁶、S(═O)₂R²⁶、S(═O)₂N(R²⁶)(R²⁷)、S(═O)₂OR²⁶、N(R²⁶)C(O)R²⁷、N(R²⁶)C(O)OR²⁷、N(R²⁶)C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、C(O)R²⁶、C(O)OR²⁶、C(O)N(R²⁶)(R²⁷)和N(R²⁶)S(═O)₂R²⁷，且其中所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有一個(gè)或多個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、NO₂、烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、N(R²⁶)(R²⁷)、C(O)R²⁶、C(O)OR²⁶、C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、CN、OR²⁶、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基；條件是所述雜芳基或雜環(huán)基部分包含至少一個(gè)環(huán)氮原子；

R²⁴和R²⁵獨(dú)立地為氫、鹵素、氰基、烷基、烷氧基或環(huán)烷基，其中所述烷基、烷氧基和環(huán)烷基任選取代有鹵素或環(huán)烷基；

X²¹和X²⁵獨(dú)立地為C(R²³)或N，其中每個(gè)R²³獨(dú)立地為氫、鹵素、烷基、烷氧基或環(huán)烷基，其中所述烷基和環(huán)烷基任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、CF₃、OCF₃、N(R²⁶)(R²⁷)、C(O)R²⁶、C(O)OR²⁷、C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、CN和OR²⁶；且

X²²、X²³和X²⁴獨(dú)立地為C(R²³)、N、O或S；條件是X²²、X²³和X²⁴中至少一個(gè)為C(R²³)；且X²²、X²³和X²⁴中只有一個(gè)為O或S；

或其藥學(xué)上可接受的鹽、異構(gòu)體或混合物。

在一些實(shí)施方案中，該ASK1抑制劑為具有式(II)結(jié)構(gòu)的化合物，其中:

R²¹為C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-6環(huán)烷基、芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中所述C_1-6烷基、C_2-6烯基、C_2-6炔基、C_3-6環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有1至4個(gè)選自以下的取代基：鹵素、羥基、氧代、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基、芳基氧基、NO₂、R²⁶、C(O)R²⁶、OC(O)R²⁶C(O)OR²⁶、C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、OC(O)N(R²⁶)(R²⁷)、SR²⁶、S(═O)R²⁶、S(═O)₂R²⁶、S(═O)₂N(R²⁶)(R²⁷)、S(═O)₂OR²⁶、N(R²⁶)(R²⁷)、N(R²⁶)C(O)R²⁷、N(R²⁶)C(O)OR²⁷、N(R²⁶)C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、N(R²⁶)S(═O)₂R²⁶、CN和OR²⁶，其中所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和芳基氧基任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：烷基、環(huán)烷基、烷氧基、羥基和鹵素；

R²⁶和R²⁷獨(dú)立地選自氫、烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基，其中所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、芳基和雜芳基任選取代有1至3個(gè)選自以下的取代基：鹵素、烷基、單烷基氨基、二烷基氨基、烷基酰胺、芳基酰胺、雜芳基酰胺、CN、低級(jí)烷氧基、CF₃、芳基和雜芳基；或

R²⁶和R²⁷連同它們連接的氮一起形成雜環(huán)；

R²²為芳基、雜芳基或雜環(huán)基，其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：烷基、烷氧基、環(huán)烷基、環(huán)烷基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)基烷基、鹵素、氧代、NO₂、鹵代烷基、鹵代烷氧基、CN、OR²⁶、OC(O)R²⁶、OC(O)N(R²⁶)(R²⁷)、SR²⁶、N(R²⁶)(R²⁷)、S(═O)R²⁶、S(═O)₂R²⁶、S(═O)₂N(R²⁶)(R²⁷)、S(═O)₂OR²⁶、N(R²⁶)C(O)R²⁷、N(R²⁶)C(O)OR²⁷、N(R²⁶)C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、C(O)R²⁶、C(O)OR²⁶、C(O)N(R²⁶)(R²⁷)和N(R²⁶)S(═O)₂R²⁷，且其中所述烷基、烷氧基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選取代有一個(gè)或多個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、NO₂、烷基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、N(R²⁶)(R²⁷)、C(O)R²⁶、C(O)OR²⁶、C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、CN、OR²⁶、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基；條件是所述雜芳基或雜環(huán)基部分包含至少一個(gè)環(huán)氮原子；

R²⁴和R²⁵獨(dú)立地為氫、鹵素、氰基、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或C_1-6環(huán)烷基，其中所述烷基、烷氧基和環(huán)烷基任選取代有鹵素或C_3-8環(huán)烷基；

X²¹和X²⁵獨(dú)立地為C(R²³)或N，其中每個(gè)R²³獨(dú)立地為氫、鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基或C_3-8環(huán)烷基，其中所述烷基和環(huán)烷基任選取代有1至5個(gè)選自以下的取代基：鹵素、氧代、CF₃、OCF₃、N(R²⁶)(R²⁷)、C(O)R²⁶、C(O)OR²⁷、C(O)N(R²⁶)(R²⁷)、CN和OR²⁶；且

X²²、X²³和X²⁴獨(dú)立地為C(R²³)、N、O或S；條件是X²²、X²³和X²⁴中至少一個(gè)為C(R²³)；且X²²、X²³和X²⁴中只有一個(gè)為O或S；

或其藥學(xué)上可接受的鹽、異構(gòu)體或混合物。

用于本文所述的方法和藥物組合物的式(II)的示例性化合物可參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2012/0004267，其通過(guò)引用整體并入本文。

在具體實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為式(III)的化合物：

其中：

R³¹為烷基或環(huán)烷基，其中所述烷基或環(huán)烷基任選取代有一至三個(gè)鹵素原子；

R³²為氫或烷基，其中所述烷基任選取代有鹵素，

R³³為氫或烷基；

R³⁴為氫或烷基；

R³⁵為氫、烷基、OR^3a或-NHR^3a；

R³⁶為氫、烷基、鹵代烷基或C₃-C₆環(huán)烷基，其中所述環(huán)烷基任選取代有烷基、鹵代烷基、或1或2個(gè)鹵素原子；

R^3a和R^3b獨(dú)立地為氫、烷基或R^3a和R^3b與它們連接的氮原子組合形成四至六元雜環(huán)，其任選在環(huán)中包含氧或氮原子；

或其藥學(xué)上可接受的鹽、異構(gòu)體或混合物。

在具體實(shí)施方案，所述ASK1抑制劑為具有式(III)的結(jié)構(gòu)的化合物，其中:

R³¹為C₁-C₃烷基或C₃-C₆環(huán)烷基，其中所述烷基或環(huán)烷基任選取代有一至三個(gè)鹵素原子；

R³²為氫或C₁-C₆烷基，其中所述烷基任選取代有鹵素，

R³³為氫或C₁-C₃烷基；

R³⁴為氫或C₁-C₃烷基；

R³⁵為氫、C₁-C₃烷基、OR^3a或-NHR^3a；

R³⁶為氫、C₁-C₃烷基、C₁-C₃鹵代烷基或C₃-C₆環(huán)烷基，其中所述環(huán)烷基任選取代有C₁-C₃烷基、C₁-C₃鹵代烷基、或1或2個(gè)鹵素原子；

R^3a和R^3b獨(dú)立地為氫、C₁-C₃烷基或R^3a和R^3b與它們連接的氮原子組合形成四至六元雜環(huán)，其任選在環(huán)中包含氧或氮原子；

或其藥學(xué)上可接受的鹽、異構(gòu)體或混合物。

用于本文所述的方法和藥物組合物的示例性式(III)化合物可參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2014/0179663，其通過(guò)引用整體并入本文。

在一些實(shí)施方案中，所述ASK 1抑制劑為美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2007/0276050、2011/0009410、2013/0197037、2013/0197037、2014/0179663、2014/0038957、2014/0018370、2009/0318425、2011/0077235、2012/0316194、美國(guó)專(zhuān)利號(hào)8,263,595、美國(guó)臨時(shí)專(zhuān)利申請(qǐng)?zhí)?1/918,784、和PCT專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2011/041293中所述的化合物；其都通過(guò)引用整體并入本文。在具體實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為：

或其藥學(xué)上可接受的鹽、異構(gòu)體或混合物?；衔?、2、3、4和5可使用常用的方法或美國(guó)專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)號(hào)2011/0009410和2013/0197037中所述的方法合成和表征。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為化合物1或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一些實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為化合物2或其藥學(xué)上可接受的鹽。在其它實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為化合物3或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一些其它實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為化合物4或其藥學(xué)上可接受的鹽。在一些其它實(shí)施方案中，所述ASK1抑制劑為化合物5或其藥學(xué)上可接受的鹽。

本申請(qǐng)的化合物可以由結(jié)構(gòu)或化學(xué)名稱(chēng)表示。此外，化合物可以使用化學(xué)領(lǐng)域中公認(rèn)的命名系統(tǒng)和符號(hào)命名，包括：例如，ChemBioDraw Ultra 12.0、Chemical Abstract Service(CAS)和International Union of Pure and Applied Chemistry(IUPAC)。作為實(shí)例，化合物3也可稱(chēng)為5-(4-環(huán)丙基-1H-咪唑-1-基)-N-(6-(4-異丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-2-氟-4-甲基苯甲酰胺、5-(4-環(huán)丙基咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基-N-[6-(4-丙-2-基-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基]苯甲酰胺或5-(4-環(huán)丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-N-(6-(4-異丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4-甲基苯甲酰胺。除非另有所述，本文所述的化合物使用ChemBioDraw Ultra 12.0命名；因此，化合物1可稱(chēng)為3-(4-環(huán)丙基-1H-咪唑-1-基)-N-(6-(4-異丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)苯甲酰胺，化合物2可稱(chēng)為3-(4-環(huán)丙基-1H-咪唑-1-基)-N-(6-(4-環(huán)丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4-甲基苯甲酰胺，化合物3可稱(chēng)為5-(4-環(huán)丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-N-(6-(4-異丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)-4-甲基苯甲酰胺，化合物4可稱(chēng)為4-(4-環(huán)丙基-1H-咪唑-1-基)-N-(3-(4-環(huán)丙基-4H-1,2,4-三唑-3-基)苯基)吡啶酰胺，且化合物5可稱(chēng)為(S)-5-(4-環(huán)丙基-1H-咪唑-1-基)-2-氟-4-甲基-N-(6-(4-(1,1,1-三氟丙-2-基)-4H-1,2,4-三唑-3-基)吡啶-2-基)苯甲酰胺。

FXR激動(dòng)劑

已知法尼醇X受體在肝、腸、腎和腎上腺組織中表達(dá)?；罨腇XR易位至細(xì)胞核并與類(lèi)視黃醇X受體(RXR)形成異質(zhì)二聚體。該二聚體與DNA上的激素反應(yīng)元件結(jié)合，導(dǎo)致膽固醇7α-羥化酶(CYP7A1)(膽汁酸從膽固醇合成的限速酶)的抑制，和腸膽汁酸結(jié)合蛋白(IBABP)的刺激等作用。CYP7A1和IBABP都涉及膽汁酸和膽固醇的自身穩(wěn)定。用于本文公開(kāi)的方法和藥物組合物的FXR激動(dòng)劑可以是能夠結(jié)合并激活FXR的任何化學(xué)化合物或生物分子(例如蛋白質(zhì)或抗體)。例如，GW4064(3-(2,6-二氯苯基)-4-(3'-羧基-2-氯二苯乙烯-4-基)氧基甲基-5-異丙基異噁唑)和膽汁酸如鵝去氧膽酸(CDCA)、石膽酸(LCA)和脫氧膽酸(DCA)已知作為FXR的激動(dòng)劑。FXR激動(dòng)劑的另外的實(shí)例可參見(jiàn)美國(guó)公開(kāi)號(hào)20100184809、20100210660、2012 0232116、20140221659、20140039007、20140187633、20140134262和20140057886。本申請(qǐng)中引用的所有公開(kāi)物通過(guò)引用整體并入。

據(jù)建議FXR是核膽酸傳感器，其調(diào)節(jié)肝臟中的膽汁酸的合成產(chǎn)量和它們?cè)谀c中的循環(huán)(通過(guò)調(diào)節(jié)膽汁酸結(jié)合蛋白)。除了膽汁酸生理機(jī)能之外，F(xiàn)XR可以參與許多不同的生理過(guò)程的調(diào)節(jié)，所述生理過(guò)程與以下多樣疾病的病因?qū)W和治療相關(guān)：膽固醇膽結(jié)石、代謝性疾病例如II型糖尿病、血脂異?；蚍逝职Y、慢性炎性疾病例如炎性腸病或膽汁淤積的慢性肝內(nèi)形式和許多其它疾病(參見(jiàn)Claudel等人，Arteriosclerosis，Thrombosis，and Vascular Biology 2005vol.25，No.10,2020-2030；Westin等人，Mini Review Medicinal Chemistry 2005vol.5，No.8,719-727)。

FXR調(diào)節(jié)肝臟中響應(yīng)基因的復(fù)雜模式。該基因產(chǎn)物對(duì)不同的生理過(guò)程有影響。在FXR的功能分析過(guò)程中，分析的第一調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)是膽汁酸合成的調(diào)節(jié)。雖然LXR通過(guò)誘導(dǎo)調(diào)節(jié)核受體LRH-1誘導(dǎo)膽固醇轉(zhuǎn)化為膽汁酸的關(guān)鍵酶(Cyp7A1)，但FXR通過(guò)上調(diào)編碼SHP的mRNA抑制Cyp7A1的誘導(dǎo)，所述SHP是另一種相對(duì)LRH-1主要抑制性的核受體。由于FXR結(jié)合該途徑的最終產(chǎn)物，初級(jí)膽汁酸例如膽酸(CA)或鵝脫氧膽酸(CDCA)，這可以被認(rèn)為是對(duì)基因表達(dá)水平的反饋抑制的實(shí)例(Goodwin等人，Molecular Cell 2000，vol.6No.3,517-526；Lu等人，Molecular Cell 2000，vol.6，No.3,507-515)。與通過(guò)SHP抑制膽汁酸合成并行，F(xiàn)XR誘導(dǎo)一系列所謂的ABC(對(duì)于ATP結(jié)合盒)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，其負(fù)責(zé)將毒性膽汁酸從肝細(xì)胞胞質(zhì)溶膠輸出到小管(膽汁起源的小膽管分支)。FXR的肝保護(hù)功能首先在FXR敲除小鼠的分析中顯現(xiàn)(Sinai等人，Cell 2000，vol.102,No.6，731-744)，其中顯示了肝臟中幾種ABC-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的低表達(dá)或過(guò)表達(dá)。進(jìn)一步詳細(xì)的分析顯示，主要的膽汁鹽排泄泵BSEP或ABCB11(Ananthanarayanan等人，Journal of Biological Chemisty 2001，vol.276,No.31，28857-28865；Plass等人，Hepatology 2002，vol.35No.3，589-96)以及介導(dǎo)脂質(zhì)從脂蛋白轉(zhuǎn)移至磷脂的關(guān)鍵酶PLTP(Urizar等人，Journal of Biological Chemisty 2000，vol.275,No.50，39313-39317)、和用于磷脂的關(guān)鍵小管膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白MRP-2(ABCC4)(Kast等人，Journal of Biological Chemisty 2002，vol.277,No.4,2908-2915)和MDR-3(ABCB4)(Huang等人，Journal of Biological Chemisty 2003，vol.278，No.51,51085-51090)是通過(guò)FXR進(jìn)行配體指導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄激活的直接靶標(biāo)(參見(jiàn)Miyata，Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 2005，vol.312，No.2,759-766；Rizzo等人，Current Drug Targets-Immune，Endocrine&Metabolic Disorders 2005，vol.5,No.3，289-303)。

給藥和施用

雖然可以單獨(dú)給藥活性成分，但是優(yōu)選將其作為如下所述的藥物制劑或藥物組合物提供。本公開(kāi)的用于獸醫(yī)和人類(lèi)使用的制劑包含至少一種活性成分，以及一種或多種可接受的載體和任選的其它治療成分。載體必須是“可接受的”，意思是與制劑的其它成分相容并且對(duì)其接受者是生理上無(wú)害的。

每種活性成分可以與常規(guī)載體和賦形劑一起配制，其將根據(jù)通常的實(shí)踐進(jìn)行選擇。片劑可以含有賦形劑、助流劑、填充劑、粘合劑等。水性制劑以無(wú)菌形式制備，并且當(dāng)打算用于通過(guò)除口服給藥之外的遞送時(shí)，通常將是等滲的。所有制劑將任選地含有賦形劑，例如Handbook of Pharmaceutical Excipients(1986)中所述的那些。賦形劑包括抗壞血酸和其它抗氧化劑、螯合劑如EDTA、碳水化合物如糊精、羥烷基纖維素、羥烷基甲基纖維素、硬脂酸等。制劑的pH范圍為約3至約11，但通常為約7至10。

活性成分的治療有效量可由熟練的臨床醫(yī)生使用常規(guī)劑量遞增研究容易地確定。通常，活性成分將以0.01毫克至2克的劑量給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，劑量為約10毫克至450毫克。在另一個(gè)實(shí)施方案中，劑量為約25至約250毫克。在另一個(gè)實(shí)施方案中，劑量為約50或100毫克。在一個(gè)實(shí)施方案中，劑量為約100毫克。預(yù)期活性成分可以每天給藥一次、兩次或三次。此外，活性成分可以每周一次或兩次、每?jī)芍芤淮?、每三周一次、每四周一次、每五周一次或每六周一次給藥。

用于活性成分的藥物組合物可以包括適合于上述給藥途徑的那些。制劑可以方便地以單位劑型存在，并且可以通過(guò)藥學(xué)領(lǐng)域熟知的任何方法制備。技術(shù)和制劑通常參見(jiàn)Remington's Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co.，Easton，PA)。這樣的方法包括使活性成分與構(gòu)成一種或多種輔助成分的載體結(jié)合的步驟。通常，制劑通過(guò)將活性成分與液體載體或細(xì)碎的固體載體或兩者均勻和密切地混合，然后如果需要，使產(chǎn)品成型來(lái)制備。

適合于口服給藥的制劑可以作為離散單位存在，例如膠囊、扁囊劑或片劑，每個(gè)含有預(yù)定量的活性成分；作為粉末或顆粒；作為在水性或非水性液體中的溶液或懸浮液；或作為水包油液體乳劑或油包水液體乳劑。活性成分還可以作為大丸劑、藥糖劑或糊劑給藥。在具體實(shí)施方案中，活性成分可以作為皮下注射給藥。

片劑可以通過(guò)壓縮或模制，任選地使用一種或多種輔助成分制備。壓制片劑可以通過(guò)在合適的機(jī)器中壓縮自由流動(dòng)形式的活性成分如粉末或顆粒，任選與粘合劑、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑或表面活性劑混合來(lái)制備。模制片劑可以通過(guò)在合適的機(jī)器中模制用惰性液體稀釋劑潤(rùn)濕的粉末狀活性成分的混合物來(lái)制備。片劑可以任選地被包衣或刻痕，并且任選地被配制以便提供活性成分的緩慢或控制釋放。

活性成分可以通過(guò)適于該病癥的任何途徑給藥。合適的途徑包括口服、直腸、鼻、局部(包括頰和舌下)、陰道和腸胃外(包括皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、鞘內(nèi)和硬膜外)等。應(yīng)當(dāng)理解，優(yōu)選的途徑可以隨例如接受者的狀況而變化。在具體實(shí)施方案中，活性成分是口服生物可利用的，因此可以口服給藥。在一個(gè)實(shí)施方案中，患者是人。

當(dāng)在本文公開(kāi)的方法中組合使用時(shí)，ASK1抑制劑和FXR激動(dòng)劑可以在單一藥物組合物中一起給藥或在多于一種藥物組合物中分開(kāi)(同時(shí)或依次)給藥。在具體實(shí)施方案中，ASK1抑制劑和FXR激動(dòng)劑一起給藥。在其他實(shí)施方案中，ASK1抑制劑和FXR激動(dòng)劑分開(kāi)給藥。在一些方面，ASK1抑制劑在FXR激動(dòng)劑之前給藥。在一些方面，F(xiàn)XR激動(dòng)劑在ASK1抑制劑之前給藥。當(dāng)分別給藥時(shí)，ASK1抑制劑和FXR激動(dòng)劑可以通過(guò)相同或不同的遞送途徑給藥于患者。

藥物組合物

本發(fā)明的藥物組合物提供有效量的ASK1抑制劑和有效量的FXR激動(dòng)劑。

當(dāng)用于口服使用時(shí)，可以制備例如片劑、糖錠、錠劑、水性或油性懸浮液、可分散的粉末或顆粒、乳劑、硬或軟膠囊、糖漿或酏劑。用于口服使用的組合物可以根據(jù)本領(lǐng)域已知的用于制備藥物組合物的任何方法制備，并且這種組合物可以含有一種或多種試劑，包括甜味劑、調(diào)味劑、著色劑和防腐劑，以便提供可口制劑。含有與無(wú)毒的藥學(xué)上可接受的賦形劑(其適于制備片劑)混合的活性成分的片劑，是可接受的。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑，例如碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、一水合乳糖、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、聚維酮、磷酸鈣或磷酸鈉；成粒劑和崩解劑，例如玉米淀粉或藻酸；粘合劑，例如纖維素、微晶纖維素、淀粉、明膠或阿拉伯膠；和潤(rùn)滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。片劑可以是未包衣的，或者可以通過(guò)已知技術(shù)包括微囊化來(lái)包衣，以延遲在胃腸道中的崩解和吸附，從而提供更長(zhǎng)時(shí)間的持續(xù)作用。例如，可以使用延時(shí)材料，例如單獨(dú)的或與蠟一起的單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。

口服使用的制劑也可以是硬明膠膠囊，其中活性成分與惰性固體稀釋劑例如磷酸鈣或高嶺土混合，或作為軟明膠膠囊，其中活性成分與水或油介質(zhì)混合，例如花生油、液體石蠟或橄欖油。

本公開(kāi)的水性懸浮液含有活性材料與適于制備水性懸浮液的賦形劑的混合物。這樣的賦形劑包括懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍膠和阿拉伯膠，以及分散劑或潤(rùn)濕劑，例如天然存在的磷脂(例如，卵磷脂)，環(huán)氧烷與脂肪酸的縮合產(chǎn)物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)，環(huán)氧乙烷與長(zhǎng)鏈脂肪醇的縮合產(chǎn)物(例如十七碳亞乙基氧基鯨蠟醇)，環(huán)氧乙烷與衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產(chǎn)物(例如，聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯)。水性懸浮液還可以含有一種或多種防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或正丙酯，一種或多種著色劑，一種或多種調(diào)味劑和一種或多種甜味劑，例如，蔗糖或糖精。

油懸浮液可以通過(guò)將活性成分懸浮在植物油(例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)中或在礦物油(例如液體石蠟)中配制?？诜鞈乙嚎珊性龀韯?，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤胩鹞秳?，例如上述的那些，以及調(diào)味劑，以提供可口的口服制劑。這些組合物可以通過(guò)加入抗氧化劑例如抗壞血酸來(lái)保存。

適于通過(guò)加入水制備水性懸浮液的本公開(kāi)的可分散粉末和顆粒提供與分散或潤(rùn)濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑混合的活性成分。合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑由上面公開(kāi)的那些舉例說(shuō)明。還可以存在另外的賦形劑，例如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。

本公開(kāi)的藥物組合物也可以是水包油乳液的形式。油相可以是植物油，例如橄欖油或花生油，礦物油，例如液體石蠟，或這些的混合物。合適的乳化劑包括天然存在的樹(shù)膠，例如阿拉伯樹(shù)膠和黃蓍膠，天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂，衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如脫水山梨醇單油酸酯，以及這些偏酯與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯脫水山梨醇單油酸酯。乳劑還可以含有甜味劑和調(diào)味劑。糖漿和酏劑可以用甜味劑，例如甘油，山梨醇或蔗糖配制。這樣的制劑還可以含有緩和劑、防腐劑、矯味劑或著色劑。

本公開(kāi)的藥物組合物可以是無(wú)菌可注射制劑的形式，例如無(wú)菌可注射的水性或油性懸浮液。該懸浮液可以根據(jù)已知技術(shù)使用上述合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和懸浮劑來(lái)配制。無(wú)菌可注射制劑還可以是在無(wú)毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無(wú)菌可注射溶液或懸浮液，例如在1,3-丁二醇中的溶液或制備為凍干粉末?？梢允褂玫目山邮艿妮d體和溶劑是水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無(wú)菌不揮發(fā)性油通?？捎米魅軇┗驊腋〗橘|(zhì)。為此目的，可以使用任何溫和的不揮發(fā)油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。此外，脂肪酸例如油酸也可以用于制備注射劑。

可以與載體材料組合以產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量將根據(jù)所治療的宿主和具體的給藥方式(例如口服給藥或皮下注射)而變化。例如，旨在用于人類(lèi)口服給藥的時(shí)間釋放制劑可以含有約1至1000mg的活性物質(zhì)，其與合適和方便量的載體材料混合，載體材料可為總組合物的約5至約95％(重量：重量)?？梢灾苽渌幬锝M合物以提供易于測(cè)量的給藥量。例如，用于靜脈內(nèi)輸注的水溶液可以含有每毫升溶液約3至500μg的活性成分，以便能夠以約30mL/hr的速率輸注合適的體積。當(dāng)配制用于皮下給藥時(shí)，通常在約2至約4個(gè)月的時(shí)間內(nèi)每月約兩次給藥制劑。

適于腸胃外給藥的制劑包括水性和非水性無(wú)菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑和使制劑與預(yù)期接受者的血液等滲的溶質(zhì)；和水性和非水性無(wú)菌懸浮液，其可以包括懸浮劑和增稠劑。

制劑可以存在于單位劑量或多劑量容器中，例如密封的安瓿和小瓶中，并且可以?xún)?chǔ)存在僅需要在緊接使用前加入無(wú)菌液體載體(例如注射用水)的冷凍干燥(凍干)狀態(tài)下。臨時(shí)注射溶液和懸浮液由前述類(lèi)型的無(wú)菌粉末、顆粒和片劑制備。優(yōu)選的單位劑量制劑是含有活性成分的如上文所述的日劑量或單位每日亞劑量或其適當(dāng)部分的那些。

在一個(gè)實(shí)施方案中，ASK1抑制劑和FXR激動(dòng)劑可以在組合制劑中或在單獨(dú)的藥物組合物中一起給藥，其中每種抑制劑可以配制成任何合適的劑型。在具體實(shí)施方案中，本文提供的方法包括單獨(dú)給藥包含ASK1抑制劑和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物和包含F(xiàn)XR激動(dòng)劑和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。根據(jù)本公開(kāi)的組合制劑包含ASK1抑制劑和FXR激動(dòng)劑以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑和任選地其它治療劑。含有活性成分的組合制劑可以是適于預(yù)期給藥方法的任何形式。