本發(fā)明涉及組織粘合性止血產(chǎn)品，其包含多孔固體基質(zhì)和含有親電活化的聚噁唑啉(el-pox)的涂料。這種新型的止血產(chǎn)品表現(xiàn)出優(yōu)異的可生物降解性、粘合性以及止血性能。本發(fā)明涵蓋的止血產(chǎn)品的實例包括止血網(wǎng)、止血泡沫和止血粉末。還提供了制備組織粘合性止血產(chǎn)物的方法，其包括用親電活化的聚噁唑啉(el-pox)涂布多孔固體基質(zhì)。發(fā)明背景傷口敷料形成了全球傷口護(hù)理市場的一個重要部分。這些產(chǎn)品廣泛用于治療諸如傷口、出血、受損組織和出血組織的傷病。理想的敷料應(yīng)當(dāng)在合理的成本以及對患者造成最小不便的情況下防止過度的出血并且促進(jìn)快速治愈。傷口敷料的止血性能由材料的質(zhì)地和孔隙度決定。對于孔隙度，敷料的孔通常很小以至于它們在粗略觀察時對于人眼是不可見的。然而，所述孔具有足夠的尺寸，其不僅允許皮膚水分和傷口蒸汽充分散發(fā)，并且允許吸收血液，使得一旦血液凝固，所述敷料牢固地固定于組織。傷口敷料應(yīng)當(dāng)能夠維持傷口附近濕潤的環(huán)境、有效的氧氣循環(huán)以便幫助細(xì)胞和組織再生，并且有助于低的細(xì)菌負(fù)荷。在手術(shù)期間使用的傷口敷料以及留在體內(nèi)的傷口敷料應(yīng)當(dāng)是可生物降解的和完全可吸收的。常規(guī)的組織粘合性傷口敷料包括纖維蛋白密封劑、基于氰基丙烯酸酯的密封劑以及其他合成的密封劑和可聚合的單體。這些組織粘合劑由于具有許多缺點僅適于特定的應(yīng)用，所述缺點包括釋放有毒的降解產(chǎn)物，高成本，需要冷藏儲存，固化慢，受限的機(jī)械強(qiáng)度和感染風(fēng)險。因此，基于反應(yīng)性的聚乙二醇(peg)前體，研發(fā)了水凝膠組織粘合劑。然而，這些水凝膠組織粘合劑過快地溶脹或溶解，或者缺乏足夠的凝聚力，由此降低了其作為手術(shù)粘合劑的效果。此外，這類基于peg的材料的性能不容易控制。止血粉末是廣泛使用的止血產(chǎn)品的另一個實例。市售的止血粉末(也被稱為止血劑(styptic)粉末)的實例包括可吸收的止血明膠粉末(粉末)和鈣負(fù)載形式的沸石(也被稱為)。這些止血粉末可以用于阻止嚴(yán)重的出血。us5,614,587描述了基于膠原的組合物，其用于連接組織，或?qū)⒔M織與合成的植入材料連接。所述組合物包含纖維狀膠原、纖維分解劑和多官能團(tuán)活化的合成的親水聚合物，如聚乙二醇，其中所述膠原與合成聚合物共價鍵合以形成膠原-合成聚合物綴合物。wo2004/028404描述了由合成膠原或合成明膠與親電交聯(lián)劑(以干燥狀態(tài)提供)組成的組織密封劑。在該國際公開中，所述交聯(lián)劑包含親電活化的(ea)聚(乙二醇)(peg)或eapeg衍生物，例如peg-琥珀酰亞胺酯，尤其是peg-丙酸琥珀酰亞胺酯、peg-丁酸琥珀酰亞胺酯或peg-戊二酸琥珀酰亞胺酯。該組合物在適當(dāng)ph下潤濕時，則2個組分發(fā)生反應(yīng)，并且形成具有密封性能的凝膠。us2011/0251574描述了止血的多孔復(fù)合海綿，其包含生物材料基質(zhì)和含反應(yīng)性基團(tuán)的親水性聚合物組分，其中所述聚合物組分涂布在所述生物材料基質(zhì)(matrix)的表面上，或者用所述聚合物材料浸漬所述基質(zhì)，或者兩種情況均存在。在優(yōu)選的實施方案中，所述聚合物是聚氧化烯聚合物，更特別地是多-親電聚乙二醇(peg)。所述基質(zhì)材料可以選自膠原、明膠、纖維蛋白、多糖(例如殼聚糖)、合成的可生物降解的生物材料(例如聚乳酸或聚乙醇酸)，及其衍生物。us2010/069579描述了末端活化的聚噁唑啉(poz)化合物，所述poz化合物包含在其末端具有單一活性官能團(tuán)的poz聚合物，所述官能團(tuán)能夠與目標(biāo)分子上的基團(tuán)反應(yīng)以產(chǎn)生目標(biāo)分子-poz綴合物，其中目標(biāo)分子與poz化合物之間的所有鍵是水解穩(wěn)定的鍵。wo2012/057628描述了由于存在能夠與天然組織中存在的含親核體的化學(xué)實體反應(yīng)的親電基團(tuán)而具有組織粘合性能的交聯(lián)聚噁唑啉聚合物。本發(fā)明的目的是提供具有改善性能的組織粘合性止血產(chǎn)品。發(fā)明概述發(fā)明人發(fā)現(xiàn)可以通過以下方法來產(chǎn)生具有改善性能的組織粘合性止血產(chǎn)品，所述方法包括以下步驟：·提供多孔固體基質(zhì)；·用包含親電活化的聚噁唑啉(el-pox)和溶劑的涂料液體來涂布所述基質(zhì)，以產(chǎn)生經(jīng)涂布的基質(zhì)，所述el-pox含有至少2個反應(yīng)性親電基團(tuán)；·從所述經(jīng)涂布的基質(zhì)去除溶劑。發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)可以通過本方法，在不對基質(zhì)的多孔結(jié)構(gòu)造成不利影響的情況下，將el-pox涂覆(apply)于多孔固體基質(zhì)上。本方法能夠涂覆el-pox涂料而保留基質(zhì)的孔結(jié)構(gòu)大部分完整，使得多孔基質(zhì)吸收體液(例如血液)的能力基本上保持不受影響。通過本方法獲得的經(jīng)el-pox涂布的止血產(chǎn)品，因為存在能夠通過形成共價鍵與組織中天然存在的例如胺基團(tuán)反應(yīng)的親電反應(yīng)性基團(tuán)，而具有優(yōu)異的粘合性質(zhì)。本發(fā)明還提供選自經(jīng)涂布的網(wǎng)、經(jīng)涂布的泡沫和經(jīng)涂布的粉末的組織粘合性止血產(chǎn)品，所述止血產(chǎn)品包含：·多孔固體基質(zhì)，其具有至少5vol.％的孔隙度并且包含含有親核聚合物的外表面，所述親核聚合物含有反應(yīng)性的親核基團(tuán)；·粘合涂料，其覆蓋至少一部分固體基質(zhì)，所述涂料包含親電活化的聚噁唑啉(el-pox)，所述el-pox平均含有至少1個反應(yīng)性親電基團(tuán)。止血產(chǎn)品的涂料中含有的el-pox聚合物提供了以下優(yōu)點：所述聚合物可以攜帶大量的親電反應(yīng)性基團(tuán)，因為實際上所述el-pox聚合物可以含有大量的側(cè)基，各個側(cè)基可以攜帶一個或多個這類反應(yīng)性基團(tuán)。因此，通過選擇具有最佳親電基團(tuán)密度的el-pox，可以針對某一應(yīng)用優(yōu)化止血產(chǎn)品的粘合性能。通過改變側(cè)基的濃度和/或性能，還可以適當(dāng)?shù)貎?yōu)化el-pox的其他性質(zhì)，例如親水/疏水平衡以及更低的臨界溶解溫度。發(fā)明詳述因此，本發(fā)明的一個方面涉及制備組織粘合性止血產(chǎn)品的方法，所述方法包括以下步驟：·提供多孔固體基質(zhì)；·用包含親電活化的聚噁唑啉(el-pox)和溶劑的涂料液體涂布所述基質(zhì)，以產(chǎn)生經(jīng)涂布的基質(zhì)，所述el-pox含有至少2個反應(yīng)性親電基團(tuán)；·從所述經(jīng)涂布的基質(zhì)去除溶劑。如本文所用，術(shù)語“組織粘合”指止血產(chǎn)品由于在所述產(chǎn)品與組織之間形成共價鍵而附著于組織的能力。在本發(fā)明的情況下，組織粘合性止血產(chǎn)品與組織粘合可以需要水的存在。除非另外表明，如本文所用的術(shù)語“多孔的”意指止血產(chǎn)品包含允許液體進(jìn)入產(chǎn)品的孔和/或間隙。術(shù)語“孔隙度”指基質(zhì)或止血產(chǎn)品中的空隙(即，“空的”)空間的量度，并且為空隙相對總體積的體積百分比?？梢赃m當(dāng)?shù)赝ㄟ^本領(lǐng)域已知的方法來確定本發(fā)明止血產(chǎn)品的孔隙度，所述方法例如氣體吸附分析。氣體吸附分析包括在各種條件下將固體多孔材料暴露于氣體或蒸汽，并評估重量上升或樣品體積的變化。這些數(shù)據(jù)的分析提供了關(guān)于固體物理特性的信息，包括：骨架密度、孔隙度和總孔體積。骨架密度通常通過氦測比重實驗來評估，并且當(dāng)不存在閉合的孔隙時表示材料的真實固體密度。應(yīng)理解，基質(zhì)由多于一個部分組成時，孔隙度指單個部分的平均孔隙度。因此，如果基質(zhì)是多孔粉末，孔隙度等于多孔顆粒被孔占據(jù)的體積百分比。如本文所用的術(shù)語“平均孔徑”指通過掃描電子顯微鏡(sem)確定的平均孔直徑。faraj等人,tissueengineering,2007,13,10,2387-2394中描述了適合的方法。如本文所用的術(shù)語“水吸收容量”是多孔固體基質(zhì)吸收水的能力的量度。通過以下步驟來確定多孔固體基質(zhì)的水吸收容量：將干燥多孔基質(zhì)樣品稱重(重量＝wd)，然后將多孔基質(zhì)浸入蒸餾水(37℃)中，持續(xù)45分鐘。然后，將樣品從水中移除，并將附著在基質(zhì)外部的水去除，然后將樣品再次稱重(重量＝ww)。水吸收容量＝100％×(ww-wd)/wd。水吸收容量表明基質(zhì)的孔隙度以及其在存在水時溶脹的能力。如本文所用的術(shù)語“聚噁唑啉”指聚(n-?；鶃喭榛鶃啺?或聚(芳?；鶃喭榛鶃啺?，并且還被稱為pox。pox的實例為聚(2-乙基-2-噁唑啉)。術(shù)語“聚噁唑啉”還涵蓋pox共聚物。術(shù)語“親電基團(tuán)”指容易被親核基團(tuán)親核進(jìn)攻的官能團(tuán)，以及能夠通過形成共價鍵與這類親核基團(tuán)反應(yīng)的官能團(tuán)。親電基團(tuán)通常是帶正電的和/或缺電子的。術(shù)語“親核基團(tuán)”指容易被親電基團(tuán)親電進(jìn)攻的官能團(tuán)，以及能夠通過形成共價鍵與親電基團(tuán)反應(yīng)的官能團(tuán)。親核基團(tuán)通常是富電子的，具有未共用的電子對作為反應(yīng)位點。除非另外表明，術(shù)語“活化”指修飾聚合物以生成或引入新的反應(yīng)性官能團(tuán)，其中所述新的反應(yīng)性官能團(tuán)能夠與另一官能團(tuán)進(jìn)行反應(yīng)以形成共價鍵。如本文所用的術(shù)語“交聯(lián)”指諸如通過共價鍵在分子間結(jié)合的聚合物的組分。兩個可交聯(lián)組分之間的共價鍵合可以是直接的，或是通過連接基團(tuán)間接的。如本文所用的術(shù)語“緩沖系統(tǒng)”指可以用于水性系統(tǒng)中以使溶液達(dá)到某一緩沖ph值的物質(zhì)或物質(zhì)的組合，并且其中所述緩沖系統(tǒng)具有能力防止該緩沖ph值的變化。如本文所用的液體的“緩沖ph值”指將該液體用蒸餾水稀釋10倍后測量得到的在20℃下的ph值。如本文所用的“緩沖容量”指液體抵抗ph值變化的能力。液體(涂料液體或緩沖液體)的緩沖容量β通過在用蒸餾水稀釋10倍后于20℃下來測量，并用mmol.l-1.ph-1來表達(dá)。緩沖容量定義如下：其中dn為加入的堿的無窮小量，而d(p[h+])為得到的氫離子濃度的余對數(shù)的無窮小的變化。根據(jù)本發(fā)明使用的el-pox優(yōu)選地來源于重復(fù)單元由下式(i)表示的聚噁唑啉：(chr1)mncor2r2和各個r1獨立地選自h、任選取代的c1-22烷基、任選取代的環(huán)烷基、任選取代的芳烷基、任選取代的芳基；并且m為2或3。根據(jù)優(yōu)選的實施方案，聚噁唑啉為2-烷基-2-噁唑啉的聚合物，甚至更優(yōu)選為其均聚物，所述2-烷基-2-噁唑啉選自2-甲基-2-噁唑啉、2-乙基-2-噁唑啉、2-丙基-2-噁唑啉、2-丁基-2-噁唑啉及其組合。優(yōu)選地，聚噁唑啉為2-丙基-2-噁唑啉的均聚物，并且更優(yōu)選為2-乙基-噁唑啉的均聚物。el-pox可以在其側(cè)鏈(還被稱為側(cè)鏈親電基團(tuán))、在其末端、或在這兩處攜帶親電基團(tuán)。末端封端的el-pox的實例為琥珀酰亞胺基琥珀酸酯，如ch3o-pox-o2c-ch2-c(ch2co2-nhs)3。側(cè)鏈活化的el-pox的實例為在烷基側(cè)鏈中含有nhs基團(tuán)的pox。el-pox的另一個實例為用nhs-酯終端官能化的星型pox-聚合物。el-pox中存在的親電基團(tuán)優(yōu)選地選自：羧酸酯、磺酸酯、膦酸酯、五氟苯基酯、對硝基苯基酯、對硝基硫代苯基酯、酰鹵基團(tuán)、酸酐、酮、醛、異氰酸根、硫代異氰酸根(異硫代氰酸根)、異氰基、環(huán)氧化物、活化的羥基、烯烴、縮水甘油醚、羧基、琥珀酰亞胺酯、琥珀酰亞胺碳酸酯、琥珀酰亞胺氨基甲酸酯、磺基琥珀酰亞胺酯、磺基琥珀酰亞胺碳酸酯、馬來酰亞氨基(馬來酰亞胺基)、乙烯磺?；?、酰亞氨基酯、乙酰乙酸酯、鹵代縮醛、鄰吡啶基二硫化物、二羥基-苯基衍生物、乙烯基、丙烯酸酯、丙烯酰胺、碘乙酰胺及其組合。更優(yōu)選地，el-pox中存在的親電基團(tuán)選自：羧酸酯、酰氯基、酸酐、酮、醛、異氰酸根、硫代異氰酸根、環(huán)氧化物、活化的羥基、烯烴、羧基、琥珀酰亞胺酯、琥珀酰亞胺碳酸酯、琥珀酰亞胺氨基甲酸酯、磺基琥珀酰亞胺酯、磺基琥珀酰亞胺碳酸酯、馬來酰亞氨基、乙烯磺酰基及其組合。甚至更優(yōu)選地，el-pox中存在的親電基團(tuán)選自醛、異氰酸根、硫代異氰酸根、琥珀酰亞胺酯、磺基琥珀酰亞胺酯、馬來酰亞氨基及其組合。最優(yōu)選地，el-pox中存在的親電基團(tuán)選自異氰酸根、硫代異氰酸根、琥珀酰亞胺酯、磺基琥珀酰亞胺酯、馬來酰亞氨基及其組合?？梢杂米饔H電基團(tuán)的磺酸酯的實例包括甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、硝基苯磺酸酯(nosylate)、三氟甲磺酸酯及其組合?？梢允褂玫南N的實例包括丙烯酸酯、甲基丙烯酸酯、乙基丙烯酸酯及其組合?；罨牧u基的實例包括用選自對硝基苯基氯甲酸酯、羰基二咪唑(例如，1,1-羰基二咪唑)和磺酰氯的活化劑活化的羥基。本方法使用的el-pox優(yōu)選地含有至少10個反應(yīng)性親電基團(tuán)。更優(yōu)選地，el-pox含有至少25個反應(yīng)性親電基團(tuán)，甚至更優(yōu)選地含有至少35個反應(yīng)性親電基團(tuán)，并且最優(yōu)選地含有至少50個反應(yīng)性親電基團(tuán)。本發(fā)明的el-pox有利地含有一個或多個側(cè)鏈親電基團(tuán)。通常，el-pox在每100個單體中含有3至50個側(cè)鏈親電基團(tuán)，更優(yōu)選地在每100個單體中含有4至35個側(cè)鏈親電基團(tuán)，甚至更優(yōu)選地在每100個單體中含有至少5至25個側(cè)鏈親電基團(tuán)。根據(jù)本發(fā)明使用的el-pox通常具有1,000g/mol至100,000g/mol，更優(yōu)選5,000g/mol至50,000g/mol并且最優(yōu)選10,000g/mol至30,000g/mol的平均分子量。在本發(fā)明的一個實施方案中，多孔固體基質(zhì)含有至少50wt.％的多糖，最優(yōu)選至少80wt.％的多糖，所述多糖選自葡聚糖、海藻酸酯、氧化的纖維素、氧化再生纖維素(orc)、羥乙基纖維素、羥甲基纖維素、透明質(zhì)酸及其組合。在特別優(yōu)選的實施方案中，多孔固體基質(zhì)含有至少50wt.％的orc，最優(yōu)選至少80wt.％的orc。纖維素是通過β-糖苷鍵聚合的吡喃葡萄糖的均聚多糖。在氧化前，纖維素可以保持為未再生的并且具有未經(jīng)組織組織的纖維，或者可以經(jīng)再生以形成經(jīng)組織的纖維。當(dāng)用四氧化二氮處理纖維素纖維時，羥基被氧化為羧酸基團(tuán)，產(chǎn)生聚糖醛酸。雖然聚糖醛酸是氧化的纖維素的主要組分，但未氧化的羥基作為纖維組分保留。在本發(fā)明的另一實施方案中，多孔固體基質(zhì)包含含有親核聚合物的外表面，所述親核聚合物含有反應(yīng)性親核基團(tuán)。優(yōu)選地，多孔固體基質(zhì)含有至少5wt.％，更優(yōu)選至少10wt.％并且更優(yōu)選至少50wt.％的親核聚合物。最優(yōu)選地，基質(zhì)由所述親核聚合物組成。親核聚合物通常含有至少2個親核基團(tuán)，更優(yōu)選地含有至少10個親核基團(tuán)，最優(yōu)選地含有至少20個親核基團(tuán)。親核聚合物的親核基團(tuán)優(yōu)選地選自胺基團(tuán)，硫醇基團(tuán)，膦基團(tuán)及其組合。更優(yōu)選地，這些親核基團(tuán)是胺基團(tuán)。這些胺基團(tuán)優(yōu)選地選自伯胺基團(tuán)、仲胺基團(tuán)及其組合。多孔固體基質(zhì)外表面中的親核聚合物優(yōu)選為富氮聚合物，所述富氮聚合物具有至少1wt.％，更優(yōu)選5wt.％-10wt.％并且最優(yōu)選15wt.％-25wt.％的氮含量。親核聚合物優(yōu)選地選自含有反應(yīng)性親核基團(tuán)的蛋白質(zhì)、殼聚糖和合成聚合物或碳水化合物聚合物，所述反應(yīng)性親核基團(tuán)選自胺、硫醇、膦及其組合。更優(yōu)選地，所述親核聚合物選自膠原、殼聚糖及其組合。如本文所用的術(shù)語膠原指膠原的所有形式，包括經(jīng)處理的衍生物。優(yōu)選的膠原不具有端肽區(qū)域(“端肽膠原”)，是可溶的，并且可以是纖維狀形式或非纖維狀形式。膠原可以選自微纖維膠原、合成的人膠原，如i型膠原、iii型膠原，或i型膠原與iii型膠原的組合。也可以將使用加熱、輻射或者諸如戊二醛的化學(xué)試劑交聯(lián)的膠原用于形成特別剛性的交聯(lián)組合物。干燥、多孔、凍干的膠原海綿是特別優(yōu)選的。殼聚糖是可生物降解的、無毒的、甲殼質(zhì)的復(fù)合碳水化合物衍生物(聚-[134]-n-乙?；?d-葡萄糖胺)，其為天然存在的物質(zhì)。殼聚糖是甲殼質(zhì)的脫乙?；问?。通常，當(dāng)脫乙?；潭雀哂?0％時，使用通用術(shù)語殼聚糖，而當(dāng)脫乙?；伙@著或低于20％時，使用通用術(shù)語甲殼質(zhì)。低于100％的脫乙酰化時，殼聚糖多糖是含有n-乙?；?d-葡萄糖胺和d-葡萄糖胺單體單元的直鏈嵌段共聚物。根據(jù)一個優(yōu)選的實施方案，多孔固體基質(zhì)表面中存在的親核聚合物的親核基團(tuán)是胺基團(tuán)，并且el-pox中包含的親電基團(tuán)選自羧酸酯、磺酸酯、膦酸酯、五氟苯基酯、對硝基苯基酯、對硝基硫代苯基酯、酰鹵基、酸酐、酮、醛、異氰酸跟、硫代異氰酸根、異氰基、環(huán)氧化物、活化的羥基、縮水甘油醚、羧基、琥珀酰亞胺酯、琥珀酰亞胺碳酸酯、琥珀酰亞胺氨基甲酸酯、磺基琥珀酰亞胺酯、磺基琥珀酰亞胺碳酸酯、酰亞氨基酯、二羥基-苯基衍生物及其組合?？墒褂玫溺牾啺坊苌锏膶嵗ㄎ於徵牾啺孵?、丙酸琥珀酰亞胺酯、琥珀酰亞胺基琥珀酰胺、琥珀酰亞胺碳酸酯、二琥珀酰亞胺辛二酸酯、雙(磺基琥珀酰亞胺基)辛二酸酯、二硫代雙(丙酸琥珀酰亞胺酯)、雙(2-琥珀酰亞氨基氧基羰基氧基)乙基砜和3,3’-二硫代雙(磺基琥珀酰亞胺丙酸酯)?？梢允褂玫幕腔牾啺坊苌锏膶嵗ɑ腔牾啺坊?4-碘乙?；?氨基苯甲酸酯、雙(磺基琥珀酰亞胺基)辛二酸酯、磺基琥珀酰亞胺基-4-(n-馬來酰亞氨基甲基)-環(huán)己烷-1-羧酸酯、二硫代雙-磺基琥珀酰亞胺丙酸酯、二磺基-琥珀酰亞胺酒石酸酯、雙[2-(磺基-琥珀酰亞胺基氧基羰基氧基乙基砜)]、乙二醇雙(磺基琥珀酰亞胺基琥珀酸酯)、二硫代雙-(丙酸琥珀酰亞胺酯)。二羥基苯基衍生物的實例包括二羥基苯基丙氨酸、3,4-二羥基苯基丙氨酸(dopa)、多巴胺、3,4-二羥基氫化肉桂酸(doha)、去甲腎上腺素、腎上腺素和兒茶酚。根據(jù)另一個優(yōu)選實施方案，多孔固體基質(zhì)外表面中的親核聚合物的親核基團(tuán)為硫醇基團(tuán)，并且el-pox中含有的親電基團(tuán)選自鹵代縮醛、鄰吡啶基二硫化物、馬來酰亞胺、乙烯基砜、二羥基苯基衍生物、乙烯基、丙烯酸酯、丙烯酰胺、碘乙酰胺、琥珀酰亞胺酯、琥珀酰亞胺碳酸酯、琥珀酰亞胺氨基甲酸酯、磺基琥珀酰亞胺酯、磺基琥珀酰亞胺碳酸酯及其組合。更優(yōu)選地，所述親電基團(tuán)選自琥珀酰亞胺酯、鹵代縮醛、馬來酰亞胺或二羥基苯基衍生物及其組合。最優(yōu)選地，親電基團(tuán)選自馬來酰亞胺或二羥基苯基衍生物及其組合。用于本方法的多孔固體基質(zhì)優(yōu)選地具有至少5vol.％的孔隙度。在基質(zhì)是泡沫或網(wǎng)的情況下，所述基質(zhì)優(yōu)選地具有至少50vol.％，更優(yōu)選至少70vol.％并且最優(yōu)選至少85vol.％的孔隙度。在基質(zhì)是多孔粉末的情況下，孔隙度優(yōu)選為至少20vol.％，更優(yōu)選為至少50vol.％并且最優(yōu)選為至少75vol.％。用于本方法的多孔固體基質(zhì)優(yōu)選地具有至少2μm的平均孔徑。在基質(zhì)是泡沫或網(wǎng)的情況下，所述基質(zhì)優(yōu)選地具有5μm至500μm、優(yōu)選10μm至200μm的平均孔徑。在基質(zhì)是多孔粉末的情況下，平均孔徑優(yōu)選為4μm至50μm，更優(yōu)選為6μm至25μm。多孔固體基質(zhì)通常具有至少25％，更優(yōu)選地具有至少100％，甚至更優(yōu)選地具有至少250％并且最優(yōu)選地具有至少1000％的水吸收容量。用于本方法的多孔固體基質(zhì)優(yōu)選地為網(wǎng)或泡沫形式的物體，所述物體具有促進(jìn)經(jīng)涂布的基質(zhì)作為傷口敷料應(yīng)用的形狀，例如片。通常，基質(zhì)具有10mm至200mm的長度，5mm至200mm的寬度和0.5mm至10mm的厚度。在本發(fā)明的一個實施方案中，多孔固體基質(zhì)為網(wǎng)。網(wǎng)的實例為由紡織纖維或非紡織纖維制成的片或薄紗。網(wǎng)內(nèi)包含的纖維優(yōu)選地由生物相容的且可生物降解的聚合物制成，例如明膠、膠原、orc或其組合。在本發(fā)明的另一個實施方案中，多孔固體基質(zhì)為固體泡沫，有時也被稱為海綿。所述固體泡沫優(yōu)選地由交聯(lián)明膠(明膠海綿)制成。在本發(fā)明的另一實施方案中，多孔固體基質(zhì)為粉末。多孔粉末優(yōu)選地由明膠或多糖制成。適合的多糖為淀粉、改性淀粉、海藻酸酯、殼聚糖、葡聚糖及其組合。最優(yōu)選地，使用的多糖為改性淀粉。多孔粉末優(yōu)選為自由流動的無菌粉末的形式。有利地，粉末為微孔粉末。多孔粉末通常具有10μm-200μm、更優(yōu)選地具有25μm-100μm并且最優(yōu)選地具有50μm-75μm的質(zhì)量加權(quán)平均粒徑。用于本方法的涂料液體優(yōu)選地含有至少50wt.％，更優(yōu)選地含有至少60wt.％，最優(yōu)選地含有至少80wt.％的溶劑。所述溶劑優(yōu)選地選自2-丙醇、乙醇、甲醇、二氯甲烷、丙酮、苯甲醚、1-丁醇、2-丁醇、乙酸丁酯、叔丁基甲基醚、異丙苯、二甲基亞砜、乙酸乙酯、乙醚、甲酸乙酯、庚烷、乙酸異丁酯、乙酸異丙酯、乙酸甲酯、3-甲基-1-丁醇、甲基乙基酮、甲基異丁基酮、2-甲基-l-丙醇、戊烷、1-戊醇、1-丙醇、乙酸丙酯及其組合。更優(yōu)選地，所述溶劑選自2-丙醇、乙醇、甲醇、丙酮及其組合。涂料液體可以適當(dāng)?shù)睾幸恍┧?。通常，涂料液體含有小于5wt.％的水，更優(yōu)選地含有小于1wt.％的水。用于本方法的涂料液體優(yōu)選地含有至少1wt.％的el-pox。更優(yōu)選地，涂料液體的el-pox含量為至少5wt.％，甚至更優(yōu)選地為至少10wt.％并且最優(yōu)選地為至少20wt.％。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，通過將涂料液體噴射在基質(zhì)上來涂布多孔固體基質(zhì)。根據(jù)特別優(yōu)選的實施方案，通過超聲波噴嘴將涂料液體噴射在基質(zhì)上。本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，超聲波噴嘴的使用使得用含有大量el-pox的涂料液體均勻地涂布基質(zhì)成為可能。可以通過蒸發(fā)適當(dāng)?shù)貙⑷軇慕?jīng)涂布的基質(zhì)去除。蒸發(fā)優(yōu)選地在減壓下進(jìn)行，例如在小于1mbar的壓力下進(jìn)行。或者，可以通過使經(jīng)涂布的基質(zhì)接觸液化氣體或超臨界流體來將溶劑從經(jīng)涂布的基質(zhì)去除。優(yōu)選地，所述液化氣體或超臨界流體具有至少30bar的壓力。根據(jù)本發(fā)明的有利實施方案，多孔固體基質(zhì)包含含有本文之前描述的親核聚合物的外表面，并且用涂料液體涂布基質(zhì)后，在去除溶劑之前和/或去除溶劑期間，el-pox的反應(yīng)性親電基團(tuán)與親核聚合物的反應(yīng)性親核基團(tuán)通過形成共價鍵而反應(yīng)。優(yōu)選地，所述反應(yīng)在低于50℃的溫度下發(fā)生，更優(yōu)選地在15-25℃的溫度(環(huán)境條件)下發(fā)生。本方法的該實施方案提供了以下優(yōu)點：反應(yīng)性親電基團(tuán)與反應(yīng)性親核基團(tuán)之間的反應(yīng)可以在缺乏緩沖系統(tǒng)的情況下發(fā)生。在本方法中，el-pox中的反應(yīng)性親電基團(tuán)可以與多孔固體基質(zhì)中存在的反應(yīng)性親核基團(tuán)反應(yīng)，和/或與本方法中使用的其他組分(例如，親核交聯(lián)劑)中存在的親核基團(tuán)反應(yīng)。優(yōu)選地，將溶劑從經(jīng)涂布的基質(zhì)去除后，el-pox仍然平均含有至少一個，更優(yōu)選至少5個并且最優(yōu)選至少40個反應(yīng)性親電基團(tuán)。這些反應(yīng)性親電基團(tuán)為經(jīng)涂布的基質(zhì)提供了粘合性能，因為它們可以與例如組織中天然存在的胺基團(tuán)形成共價鍵。用于本方法的涂料液體可以含有溶解形式和/或分散形式的el-pox。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方案，涂料液體含有完全溶解形式的el-pox，并且所述涂料液體還含有分散的緩沖系統(tǒng)。優(yōu)選地，所述涂料液體具有7至11的緩沖ph值，更優(yōu)選地具有8至10的緩沖ph值。涂料液體的緩沖容量優(yōu)選為至少10mmol.l-1.ph-1。更優(yōu)選地，緩沖容量為至少25mmol.l-1.ph-1，最優(yōu)選地，緩沖容量為至少50mmol.l-1.ph-1。在本發(fā)明的另一個實施方案中，涂料液體含有完全溶解形式的el-pox，并且所述方法包括用緩沖液體覆蓋多孔固體基質(zhì)，之后用含el-pox的涂料液體涂布基質(zhì)，所述緩沖液體包含緩沖系統(tǒng)。優(yōu)選地，緩沖液體具有7至11的緩沖ph值，更優(yōu)選地具有8至10的緩沖ph值。緩沖液體的緩沖容量優(yōu)選為至少10mmol.l-1.ph-1。更優(yōu)選地，緩沖容量為至少25mmol.l-1.ph-1，最優(yōu)選地，緩沖容量為至少50mmol.l-1.ph-1。在緩沖液體為水性的情況下，基質(zhì)優(yōu)選地在用緩沖液體覆蓋之后干燥，然后再用涂料液體涂布。因此，不希望的el-pox與基質(zhì)之間的交聯(lián)以及el-pox的分解可以最小化。該實施方案提供了以下優(yōu)點：el-pox可以滲透多孔固體基質(zhì)的孔，并且在這些孔內(nèi)側(cè)形成涂層。根據(jù)本實施方案使用的緩沖液體可以適當(dāng)?shù)睾杏H核交聯(lián)劑，所述親核交聯(lián)劑含有至少2個反應(yīng)性親核基團(tuán)。在另一個實施方案中，當(dāng)涂料液體涂布在多孔固體基質(zhì)上時，涂料液體中存在的至少80wt.％的el-pox是未溶解的。有利地，除了未溶解的el-pox之外，涂料液體含有溶解的或未溶解的緩沖系統(tǒng)。涂料液體優(yōu)選地具有7至11的緩沖ph值，更優(yōu)選地具有8至10的緩沖ph值。涂料液體的緩沖容量優(yōu)選為至少10mmol.l-1.ph-1。更優(yōu)選地，緩沖容量為至少25mmol.l-1.ph-1，甚至更優(yōu)選地，緩沖容量為至少50mmol.l-1.ph-1。優(yōu)選地，在用含有未溶解的el-pox的涂料液體涂布基質(zhì)后，該基質(zhì)被el-pox在其中是可溶的液體溶劑組合物覆蓋。該實施方案提供了以下優(yōu)點：el-pox不進(jìn)入孔，并且el-pox涂層在多孔基質(zhì)的表面上濃縮。根據(jù)特別優(yōu)選的實施方案，液體溶劑組合物含有親核交聯(lián)劑?？梢赃m合使用的親核交聯(lián)劑的實例包括親核活化的peg、親核活化的pox、三賴氨酸及其組合。親核交聯(lián)劑優(yōu)選地含有至少3個反應(yīng)性親核基團(tuán)。親核交聯(lián)劑的親核基團(tuán)優(yōu)選地選自胺基團(tuán)、硫醇基團(tuán)、膦基團(tuán)及其組合。更優(yōu)選地，這些親核基團(tuán)為胺基團(tuán)。根據(jù)優(yōu)選的實施方案，親核交聯(lián)劑中存在的親核基團(tuán)為伯胺基團(tuán)。在本發(fā)明的一個實施方案中，親核交聯(lián)劑是低分子量聚胺，其具有小于1,000g/mol，更優(yōu)選地小于700g/mol并且最優(yōu)選地小于400g/mol的分子量。甚至更優(yōu)選地，親核交聯(lián)劑選自二賴氨酸；三賴氨酸；四賴氨酸；五賴氨酸；二半胱氨酸；三半胱氨酸；四半胱氨酸；五半胱氨酸；包含兩個或更多個選自賴氨酸、鳥氨酸、半胱氨酸、精氨酸及其組合的氨基酸殘基以及其他氨基酸殘基的寡肽；精胺；三(氨基甲基)胺；精氨酸及其組合。根據(jù)本發(fā)明的另一個實施方案，親核交聯(lián)劑是高分子量聚胺，其選自：包含至少兩個胺基團(tuán)的親核活化的pox(nu-pox)；殼聚糖；殼聚糖衍生物(例如wo2009/028965中描述的二羧基-衍生化的殼聚糖聚合物)；聚亞乙基亞胺；聚乙烯胺；聚烯丙基胺；胺官能化的聚(甲基)丙烯酸酯；含有胺官能部分的多糖，例如，諸如4,6-二取代的脫氧鏈霉胺(卡那霉素a、阿米卡星、妥布霉素、地貝卡星、慶大霉素、西索米星、奈替米星)、4,5-二取代的脫氧鏈霉胺(新霉素b、新霉素c和新霉素e(巴龍霉素))以及非脫氧鏈霉胺(鏈霉素)的氨基糖苷；苯乙烯類；包含兩個或更多個選自賴氨酸、鳥氨酸、半胱氨酸、精氨酸及其組合的氨基酸殘基以及其他氨基酸殘基的多肽；及其組合。天然來源的白蛋白或重組體是可適合用作多肽的多肽實例。胺官能化的聚乙二醇是可適合用作親核交聯(lián)劑的高分子量聚胺的另一個實例。根據(jù)另一個優(yōu)選實施方案，親核交聯(lián)劑中存在的親核基團(tuán)為硫醇(巰基)基團(tuán)。在本發(fā)明的一個實施方案中，用于交聯(lián)聚合物的親核交聯(lián)劑是包含2個或更多個硫醇基團(tuán)的低分子量聚硫醇，其具有小于1,000g/mol，更優(yōu)選地小于700g/mol并且最優(yōu)選地小于400g/mol的分子量。甚至更優(yōu)選地，親核交聯(lián)劑選自三巰基丙烷、乙二硫醇、丙二硫醇、2-巰基乙醚、2,2’-(亞乙基二氧基)二乙硫醇、四(乙二醇)二硫醇、五(乙二醇)二硫醇、六乙二醇二硫醇；硫醇修飾的季戊四醇、二季戊四醇、三羥甲基丙烷或二三羥甲基丙烷；含有至少兩個半胱氨酸單元的寡肽。根據(jù)本發(fā)明的另一個實施方案，用于交聯(lián)聚合物的親核交聯(lián)劑是高分子量聚硫醇，其選自：包含至少兩個硫醇基團(tuán)的nu-pox；硫醇官能化的聚(甲基)丙烯酸酯；含有硫醇官能部分的多糖；苯乙烯類；包含兩個或更多個硫醇基團(tuán)的多肽。如本文之前限定的親核交聯(lián)劑可以適當(dāng)?shù)赜糜谕苛弦后w和/或緩沖液體，以便將el-pox共價連接至具有外表面的多孔固體基質(zhì)，所述外表面包含含有反應(yīng)性親電基團(tuán)的聚合物。具有親電基團(tuán)的適合的聚合物為聚(乳酸-共-乙醇酸)；硫酸軟骨素-nhs；硫酸軟骨素琥珀酰亞胺基琥珀酸酯；海藻酸酯-nhs；透明質(zhì)酸-nhs；包含含有甲基丙烯酸酯單體的n-羥基琥珀酰亞胺碳酸酯的共聚物(如cengiz等人,2010,j.ofpolymerscienceparta:polymerchemistry,48卷,21期,4737-4746中描述)；用n-羥基琥珀酰亞胺、n-羥基磺基琥珀酰亞胺或其衍生物修飾含有兩個或更多個羧基的生物低分子量化合物中的至少一個羧基而獲得的生物低分子量的衍生物(如ep1548004中描述)。優(yōu)選地，在涂料液體中使用親核交聯(lián)劑。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選實施方案中，el-pox和親核交聯(lián)劑存在于單獨的流體中，但同時涂布至多孔固體基質(zhì)上。這可以適當(dāng)?shù)赝ㄟ^使用兩個超聲波噴射噴嘴來實現(xiàn)。因此，根據(jù)該有利的實施方案，所述方法包括：·提供固體多孔基質(zhì)，·提供涂料液體，其包含在第一溶劑中的el-pox；·提供包含緩沖系統(tǒng)和/或親核交聯(lián)劑以及第二溶劑的第二液體；·通過使涂料液體流經(jīng)第一超聲波噴嘴來產(chǎn)生第一噴射流；·通過使第二液體流經(jīng)第二超聲波噴嘴來產(chǎn)生第二噴射流；·將固體多孔固體基質(zhì)表面的至少一部分同時暴露于第一噴射流和第二噴射流，以便用包含el-pox以及親核交聯(lián)劑和/或緩沖系統(tǒng)的涂料混合物覆蓋固體多孔基質(zhì)的所述部分；·從涂料混合物去除第一溶劑和第二溶劑，以獲得至少一部分被含有el-pox和親核交聯(lián)劑的干燥層涂布的多孔固體基質(zhì)。該方法中的el-pox可以適當(dāng)?shù)乇籶vp-丙烯酸-nhs或(聚-((n-乙烯基吡咯烷酮)50-共-(丙烯酸)25-共-(丙烯酸n-羥基琥珀酰亞胺酯)25)替代。在上述雙噴射方法使用親核交聯(lián)劑的情況下，在去除溶劑之前、期間或之后，el-pox和親核交聯(lián)劑可彼此反應(yīng)形成交聯(lián)聚合物。在優(yōu)選的實施方案中，干燥層中包含的交聯(lián)聚合物包含未反應(yīng)的親電基團(tuán)。適合的溶劑如本文之前所限定。在優(yōu)選的實施方案中，第一溶劑和第二溶劑是可混溶的，在更優(yōu)選的實施方案中，第一溶劑和第二溶劑是相同的。在第二液體含有緩沖系統(tǒng)的情況下，第二液體優(yōu)選地具有7至11的緩沖ph值，更優(yōu)選地具有8至10的緩沖ph值。所述第二液體的緩沖容量優(yōu)選為至少10mmol.l-1.ph-1。更優(yōu)選地，緩沖容量為至少25mmol.l-1.ph-1，最優(yōu)選地，緩沖容量為至少50mmol.l-1.ph-1。本發(fā)明的另一個方面涉及選自經(jīng)涂布的網(wǎng)、經(jīng)涂布的泡沫或經(jīng)涂布的粉末的粘合性止血產(chǎn)品，所述止血產(chǎn)品包含：·具有至少20vol.％的孔隙度并且包含含有親核聚合物的外表面的多孔固體基質(zhì)，所述親核聚合物含有反應(yīng)性親核基團(tuán)；·覆蓋至少一部分固體基質(zhì)的粘合涂料，所述涂料包含平均含有至少1個反應(yīng)性親電基團(tuán)的el-pox。這種粘合性止血產(chǎn)品可以適當(dāng)?shù)赝ㄟ^本文之前所述的方法來獲得。如本文之前所解釋，由于存在能夠與組織中天然存在的親核基團(tuán)反應(yīng)的親電反應(yīng)性基團(tuán)，止血產(chǎn)品具有優(yōu)異的粘合性能。另外，這種止血產(chǎn)品提供了以下優(yōu)點：在與血液或其他水性流體接觸時，由于el-pox中的反應(yīng)性親電基團(tuán)會通過形成共價鍵與親核聚合物的反應(yīng)性親核基團(tuán)反應(yīng)，粘合涂料將會錨定在多孔基質(zhì)上。粘合性止血材料的涂料中存在的el-pox可以與多孔固體基質(zhì)共價鍵合。此外，el-pox可以交聯(lián)。多孔固體基質(zhì)、el-pox以及親核聚合物的優(yōu)選形式已在本文之前進(jìn)行了描述。止血產(chǎn)品的涂料中的el-pox優(yōu)選地含有5個反應(yīng)性親電基團(tuán)，更優(yōu)選地含有25個反應(yīng)性親電基團(tuán)，并且最優(yōu)選地含有50個反應(yīng)性親電基團(tuán)?；|(zhì)通常占止血產(chǎn)品的至少10wt.％，更優(yōu)選至少50wt.％并且最優(yōu)選至少75wt.％。含el-pox的涂料通常占止血產(chǎn)品的5wt.％-75wt.％。更優(yōu)選地，所述涂料占止血產(chǎn)品的10wt.％-50wt.％，最優(yōu)選地占止血產(chǎn)品的12wt.％-25wt.％。涂料優(yōu)選地含有25wt.％-100wt.％的el-pox。更優(yōu)選地，涂料的el-pox含量為至少50wt.％，最優(yōu)選為至少75wt.％。本發(fā)明能夠制備經(jīng)涂布的止血產(chǎn)品，其中粘合涂料含有與多孔固體基質(zhì)的孔相互連通的孔。根據(jù)特別優(yōu)選的實施方案，粘合止血劑具有至少50％、更優(yōu)選至少80％的孔密度。通過以下非限制性的實施例來進(jìn)一步說明本發(fā)明。實施例實施例1通過以下步驟合成含有25％nhs酯單元的nhs-側(cè)鏈活化的聚[2-(丙基/nhs-酯-乙基)-2-噁唑啉]共聚物(＝el-pox,25％nhs)：通過使用陽離子開環(huán)聚合(crop)，使用75％2-正丙基-2-噁唑啉(npropox)和25％2-甲氧基羰基-乙基-2-噁唑啉(mestox)來合成聚[2-(丙基/甲氧基-羰基-乙基)-2-噁唑啉]共聚物(聚合度＝dp＝約100)。獲得含有25％2-甲氧基羰基-乙基(1h-nmr)的統(tǒng)計共聚物。將含有25％2-甲氧基羰基-乙基的聚合物用氫氧化鈉(1m)水解，得到具有25％2-羧基-乙基(1h-nmr)的共聚物。通過n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)和二異丙基碳二亞胺(dic)將所述2-羧基-乙基活化，得到2-(丙基/nhs-酯-乙基)-2-噁唑啉]共聚物(＝el-pox,25％nhs)。根據(jù)1h-nmr和uv-光譜，該聚合物含有25％nhs-酯基團(tuán)。根據(jù)faraj等人,tissueengineering,2007,13,10,2387-2394中描述的程序制備牛膠原海綿。從奶牛的肌腱中提取膠原。如此獲得的膠原海綿具有95％至98％的孔隙度和80-100μm的平均孔徑。通過比較膠原膜的密度(無空隙空間)與膠原海綿的密度來計算孔隙度。根據(jù)faraj等人,tissueengineering,2007,13,10,2387-2394中描述的方法，使用掃描電子顯微鏡來確定孔徑。將el-pox(25％nhs)溶解于丙酮(180mg/ml)。將該溶液逐滴均勻分布至凍干的牛膠原海綿的頂部。涂布后，立即將海綿在室溫和真空(1mbar)下干燥8小時。獲得具有el-pox(25％nhs)涂料(15mg/cm2)的粘合性膠原海綿。為評估el-pox(25％nhs)與膠原上存在的親核胺基團(tuán)的可能的交聯(lián)，用丙酮沖洗經(jīng)涂布的膠原海綿。丙酮萃取物中回收了所有的el-pox(25％nhs)，說明在涂布和/或干燥期間el-pox中的親電基團(tuán)未與膠原中的胺基團(tuán)反應(yīng)。通過以下步驟來評估經(jīng)涂布的膠原海綿的止血性能：·將100μl新鮮的肝素化的全血逐滴添加至膠原海綿涂布el-pox(25％nhs)一側(cè)的頂部。·將另一塊經(jīng)el-pox(25％nhs)涂布的海綿置于經(jīng)血液涂布的膠原海綿的頂部，使經(jīng)el-pox涂布的一側(cè)面對血液(“夾層法”)?！な褂帽〖喪┘虞p度的壓力持續(xù)10秒。然后，將夾層物置于含水的燒杯中，并將水?dāng)嚢?分鐘。在這些條件下，兩塊膠原海綿保持粘合，并且沒有血液從海綿中漏出，說明止血和粘合。在對照實驗中，使用未經(jīng)涂布的膠原海綿，在水中20秒后該海綿分離，并且水變紅，說明不能止血。實施例2通過以下步驟合成含有15％nhs-酯基團(tuán)的nhs-側(cè)鏈活化的聚2-(丙基/羥基-乙基-酰胺-乙基/nhs-酯-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基)-2-噁唑啉]三元共聚物(＝el-pox,15％nhs)：通過crop，使用70％2-丙基-2-噁唑啉和30％2-甲氧基羰基-乙基-2-噁唑啉來合成聚[2-(丙基/甲氧基-羰基-乙基)-2-噁唑啉]共聚物(dp＝+/-100)。獲得含有30％2-甲氧基羰基-乙基(1h-nmr)的統(tǒng)計共聚物。然后，使含有30％2-甲氧基羰基-乙基的聚合物與乙醇胺反應(yīng)，得到具有30％2-羥基-乙基-酰胺-乙基(1h-nmr)的共聚物。之后，將一部分2-羥基-乙基-酰胺-乙基與琥珀酸酐反應(yīng)，得到具有70％2-丙基、15％2-羥基-乙基-酰胺-乙基和15％2-羧基-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基(根據(jù)1h-nmr)的三元共聚物。最后，通過n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)和二異丙基碳二亞胺(dic)活化2-羧基-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基，得到el-pox(15％nhs)。根據(jù)1h-nmr，該聚合物含有15％nhs-酯基團(tuán)。將el-pox(15％nhs)(130mg)和無水硼酸鈉(47mg)稱重，并添加異丙醇/2-丁酮的溶液(1,6ml,v/v,1:1)，由于無水硼酸鈉在異丙醇/2-丁酮(v/v,1:1)中不可溶，得到細(xì)粒懸浮液。將該懸浮液逐滴均勻分布至凍干的牛膠原海綿的頂部。涂布后，立即將海綿在室溫和真空(1mbar)下干燥8小時。獲得具有el-pox(15％nhs)和無水硼酸鈉涂料(19mg/cm2)的粘合性膠原海綿。通過以下步驟來評估經(jīng)涂布的膠原海綿的止血性能：·將100μl新鮮的肝素化的全血逐滴添加至膠原海綿涂布el-pox(15％nhs)和無水硼酸鈉一側(cè)的頂部?！⒘硪粔K經(jīng)el-pox(15％nhs)和無水硼酸鈉涂布的海綿置于經(jīng)血液涂布的膠原海綿的頂部，使經(jīng)el-pox涂布的一側(cè)面對血液(“夾層法”)?！な褂帽〖喪┘虞p度的壓力持續(xù)10秒。然后，將夾層物置于含水的燒杯中，并將水?dāng)嚢?分鐘。在這些條件下，兩塊膠原海綿保持粘合，并且沒有血液從海綿漏出，說明止血和粘合。實施例3在本實施例中，對多種聚合物測試了剪切強(qiáng)度，表1中提供了樣品的概述。用2-正丙基-2-噁唑啉、2-乙基-2-噁唑啉和2-甲氧基-乙基-2-噁唑啉的crop來合成聚合物(dp＝+/-100)。將用作樣品1-3的el-pox通過實施例1中描述的途徑進(jìn)行后修飾。將用作樣品4-6的el-pox通過實施例2中描述的途徑來合成。通過1h-nmr和uv-光譜對所有活化的聚合物的nhs含量進(jìn)行分析。peg4-臂nhs(季戊四醇聚(乙二醇)醚戊二酸四琥珀酰亞胺酯，樣品7)得自nofamerica公司。將牛膠原海綿(5×7×1cm(寬×長×高))作為對照(樣品8)進(jìn)行測試。如實施例1所描述，制備所有經(jīng)涂布的海綿。制備程序·將多孔膠原海綿稱重(n＝7)。·通過將限定量的聚合物溶解于有機(jī)溶劑(二氯甲烷(dcm)/異丙醇(ipa)(v/v,1:1))直至300mg/ml的最終濃度來制備el-pox溶液?！l-pox溶液逐滴涂布至多孔膠原海綿的一部分(14cm2)，以獲得15mg/cm2的目標(biāo)涂料密度。將經(jīng)涂布的多孔膠原海綿在室溫下于真空烘箱(5mbar)中干燥過夜?！⒔?jīng)涂布的多孔膠原海綿再次稱重，并確定涂料密度。表1中提供了使用的聚合物以及涂料密度的概述。測試程序通過以下方式測試這些聚合物的剪切強(qiáng)度：·將構(gòu)建物剪成5×1cm(寬×高)的相等的塊?！な褂?00μl肝素化的人血液，將經(jīng)涂布的一側(cè)放置在一起，使粘合側(cè)彼此相對。施加重量(10g)持續(xù)10秒，以提供標(biāo)準(zhǔn)壓力?！な箻?gòu)建物交聯(lián)限定的時間：1分鐘(t1)或15分鐘(t15)?！ぴ谙薅ǖ臅r間點，將構(gòu)建物放置在剪切測試器(zwickyroell,20n載荷元件)中，并測量剪切強(qiáng)度直至斷裂?！ぽ敵觯簩y量的力(n)除以構(gòu)建體的重疊面積(cm2)，得到剪切強(qiáng)度(以kpa計)。結(jié)果列于表1。表1：剪切強(qiáng)度檢測結(jié)果由這些結(jié)果可以推論：·el-pox聚合物(1-6)隨著交聯(lián)時間增加顯示出更高的剪切強(qiáng)度。·在t15時，el-pox聚合物(2和5)比聚合物peg4-臂nhs(7)顯示出更高的剪切強(qiáng)度值。·對照樣品(8)顯示出受限的剪切強(qiáng)度至無剪切強(qiáng)度，表明交聯(lián)是通過nhs-酯基團(tuán)產(chǎn)生的。本實施例說明，涂布在膠原上的el-pox能夠在血液存在時交聯(lián)，比涂布在膠原上的同樣濃度的peg4-臂nhs產(chǎn)生了更高的剪切強(qiáng)度。實施例4通過以下步驟合成含有20％nhs-酯基團(tuán)的nhs-側(cè)鏈活化的聚2-(丙基/羥基-乙基-酰胺-乙基/nhs-酯-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基)-2-噁唑啉]三元共聚物(＝el-pox,20％nhs)：通過crop，使用70％2-丙基-2-噁唑啉和30％2-甲氧基羰基-乙基-2-噁唑啉來合成聚[2-(丙基/甲氧基-羰基-乙基)-2-噁唑啉]共聚物(dp＝+/-100)。獲得含有30％2-甲氧基羰基-乙基(1h-nmr)的統(tǒng)計共聚物。然后，將含有30％2-甲氧基羰基-乙基的聚合物與乙醇胺反應(yīng)，得到具有30％2-羥基-乙基-酰胺-乙基(1h-nmr)的共聚物。之后，一部分2-羥基-乙基-酰胺-乙基與琥珀酸酐反應(yīng)，得到具有70％2-丙基、10％2-羥基-乙基-酰胺-乙基和20％2-羧基-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基(根據(jù)1h-nmr)的三元共聚物。最后，通過n-羥基琥珀酰亞胺(nhs)和二異丙基碳二亞胺(dic)活化2-羧基-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基，得到el-pox(20％nhs)。根據(jù)1h-nmr，該聚合物含有20％nhs-酯基團(tuán)。在烷基側(cè)鏈中含有丙基和胺基團(tuán)的胺官能化的nu-pox通過以下合成：通過npropox與mestox的crop，以及后續(xù)的用乙二胺使甲基酯側(cè)鏈酰胺化，以得到聚(2-丙基/氨基乙基酰氨基乙基-2-噁唑啉)共聚物(nu-pox)。根據(jù)1h-nmr，該聚合物含有20％nh2。使用牛膠原海綿(7×5×1cm)，其如實施例1所述制備。對于這些實驗，使用裝有加熱板的exactacoatsc超聲波噴射裝置(sono-tek)來涂布膠原海綿。測試4a：el-pox的溶液根據(jù)表2示出的設(shè)置，通過超聲波噴射，將el-pox(el-pox,20％nhs)在ipa/2-丁酮(v/v,1:1)(90mg/ml)中的溶液均勻地分布在膠原上，得到5mg/cm2的涂料密度。sem-圖像顯示，維持了膠原的多孔結(jié)構(gòu)。將構(gòu)建體剪切成塊(2cm2)，并如實施例3所述，使用剪切強(qiáng)度測試在t15進(jìn)行測試。結(jié)果為10.9+/-3.3kpa(n＝4)，表明了良好的粘合和止血。表2：超聲波噴射參數(shù)測試4b：具有懸浮緩劑的el-pox根據(jù)表2示出的設(shè)置，通過超聲波噴射，將具有懸浮的hepes-緩沖劑(1.7g)的el-pox在ipa/2-丁酮(v/v,1:1)(10mg/ml)中的溶液均勻地分布在膠原上，得到5mg/cm2的涂料密度。sem-圖像顯示，維持了膠原的多孔結(jié)構(gòu)。將構(gòu)建體剪切成塊(2cm2)，并如實施例3所述使用剪切強(qiáng)度測試在t15進(jìn)行測試。測量的平均剪切強(qiáng)度為2.6+/-0.8kpa(n＝3)，表明良好的粘合和止血。測試4c：(1)nu-pox與緩沖劑的溶液+(2)el-pox的溶液根據(jù)表2示出的設(shè)置，通過超聲波噴射，將具有hepes(1.7g)的nu-pox的水溶液(10mg/ml)均勻地分布至膠原上。將溶劑蒸發(fā)30min。之后，根據(jù)表2展示的設(shè)置，通過超聲波噴射，將el-pox在ipa/2-丁酮(v/v,1:1)(15mg/ml)中的溶液均勻地分布至經(jīng)涂布的膠原頂部。涂布后，獲得5mg/cm2(±40wt.％nu-pox和±60wt.％el-pox)的涂料密度。sem-圖像顯示，維持了膠原的多孔結(jié)構(gòu)。將構(gòu)建體切成塊(2cm2)，并如實施例3所述使用剪切強(qiáng)度測試在t15進(jìn)行測試。測量的平均剪切強(qiáng)度為3.9+/-2.9kpa(n＝2)，表明良好的粘合和止血。測試4d：緩沖劑的溶液(el-pox的懸浮液)根據(jù)表2中示出的設(shè)置，通過超聲波噴射將el-pox在ipa/乙醚/三乙銨(v/v/v,50:50:1)中的懸浮液均勻地分布至膠原上。涂布后，獲得4mg/cm2的涂料密度。sem-圖像顯示，維持了膠原的多孔結(jié)構(gòu)。將構(gòu)建體剪切成塊(2cm2)，并如實施例3所述使用剪切強(qiáng)度測試來進(jìn)行測試。測量的平均剪切強(qiáng)度為4.2+/-3.5kpa(n＝3)，表明良好的粘合和止血。另外，通過以下來評估經(jīng)超聲波涂布的膠原海綿4a-4d的止血性能：·將100μl新鮮的肝素化的全血逐滴添加至膠原海綿涂布el-pox一側(cè)的頂部?！⒘硪粔K經(jīng)el-pox涂布的海綿置于經(jīng)血液涂布的膠原海綿的頂部，使經(jīng)el-pox涂布的一側(cè)面對血液(“夾層法”)?！な褂帽〖喪┘虞p度的壓力持續(xù)10秒。然后，將夾層物置于含水的燒杯中，并將水?dāng)嚢鑳煞昼?。在這些條件下，兩塊膠原海綿4a-4d都保持粘合，并且沒有血液從海綿漏出，表明止血和粘合。實施例5如實施例2所述合成nhs-側(cè)鏈活化的聚2-(丙基/羥基-乙基-酰胺-乙基/nhs-酯-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基)-2-噁唑啉]三元共聚物(＝el-pox,20％nhs)。將el-pox(20％nhs)溶解于甲醇(180mg/ml)。將該溶液逐滴均勻地分布至氧化再生纖維素貼片(orc,gelita-cel)的頂部。涂布后，立即將貼片在室溫和空氣流下干燥4小時。獲得具有el-pox(20％nhs)涂料(12mg/cm2)的orc。通過以下來評估經(jīng)涂布的orc的止血性能：·將100μl新鮮的肝素化的全血逐滴添加至orc涂布el-pox(20％nhs)一側(cè)的頂部(1×1cm)?！⒘硪粔K經(jīng)el-pox(20％nhs)涂布的orc置于經(jīng)血液涂布的orc的頂部，使經(jīng)el-pox涂布的一側(cè)面對血液(“夾層法”)?！な褂帽〖喪┘虞p度的壓力持續(xù)10秒。然后，將夾層物置于含水的燒杯中，并將水?dāng)嚢栉宸昼?。在這些條件下，兩塊orc塊保持粘合持續(xù)五分鐘，并且介質(zhì)沒有變紅。在使用未經(jīng)涂布的orc對照實驗中，在水中攪拌的過程中，orc在一分鐘內(nèi)分離并且水變紅，表明不能止血。實施例6如實施例2所述合成nhs-側(cè)鏈活化的聚2-(丙基/羥基-乙基-酰胺-乙基/nhs-酯-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基)-2-噁唑啉]三元共聚物(＝el-pox,20％nhs)。殼聚糖粉末得自sigma-aldrich(脫乙?；潭?5-85％，mn10,000)。淀粉粉末得自biocer,germany。通過以下方法用el-pox(20％nhs(el-pox))單獨涂布粉末?！⒎勰?殼聚糖或淀粉)稱重，并用el-pox(15mg/ml)在dcm中的溶液涂布。·將懸浮液在減壓下干燥?！ぶ?，將干燥的經(jīng)涂布的粉末磨碎，形成均勻的細(xì)粉末。經(jīng)涂布的殼聚糖粉末含有約25wt.％el-pox。經(jīng)涂布的淀粉粉末含有約10wt.％el-pox。作為對照，測試了磨碎的未經(jīng)涂布的殼聚糖粉末、磨碎的未經(jīng)涂布的淀粉粉末和磨碎的el-pox。將經(jīng)el-pox涂布的粉末和對照樣品與(1)碳酸鹽緩沖劑(0.1m,ph9)或(2)肝素化的人血液(ph7.4)混合，以評估止血性能。通過以下方式測試止血性能：將粉末在eppendorf管中稱重，并且與250ul的緩沖劑(1)或血液(2)混合。通過將管上下反轉(zhuǎn)直至形成凝膠來確定凝膠時間。表3中給出了所使用的材料的量以及交聯(lián)測試的結(jié)果。表3：交聯(lián)測試的結(jié)果*由經(jīng)涂布的粉末中的wt％el-pox計算這些結(jié)果顯示，殼聚糖能夠與el-pox(樣品2)交聯(lián)，并且淀粉不能與el-pox(樣品7)交聯(lián)。經(jīng)el-pox涂布的殼聚糖和淀粉都能夠與血液交聯(lián)(樣品1和10)，而未經(jīng)涂布的殼聚糖和淀粉粉末在存在緩沖劑和/或血液的情況下不形成凝膠(樣品3、4、8和9)。el-pox粉末能夠通過與血液中的胺反應(yīng)而形成凝膠(樣品5)，然而當(dāng)el-pox粉末與緩沖劑結(jié)合時未觀察到凝膠形成(樣品6)。發(fā)現(xiàn)含el-pox的凝膠在水中是穩(wěn)定的。相比之下，通過將200mg淀粉或殼聚糖添加至250μl血液而制備的血液凝膠在水中不穩(wěn)定。實施例7如實施例3所述合成nhs-側(cè)鏈活化的聚2-(丙基/羥基-乙基-酰胺-乙基/nhs-酯-乙基-酯-乙基-酰胺-乙基)-2-噁唑啉]三元共聚物(＝el-pox,20％nhs)。peg4-臂nhs(季戊四醇聚(乙二醇)醚戊二酸四琥珀酰亞胺酯，el-peg)得自nofamerica公司。牛膠原海綿(7×5×1cm)如實施例1所述制備。比較兩種應(yīng)用方法：(i)熔化方法和(ii)涂布液體方法。(i)熔化方法(比較例)將已知量的聚合物粉末、el-pox(20％nhs)和el-peg均勻地分布至膠原海綿的頂部，以獲得表4中示出的涂料密度。將el-pox(20％nhs)和el-peg在表4中示出的溫度下加熱，在預(yù)熱的烘箱中保持5min以熔化聚合物粉末。該時間范圍和溫度設(shè)置內(nèi)，el-pox和el-peg均保持穩(wěn)定。制備的構(gòu)建體的sem-圖像顯示，形成的聚合物膜將膠原頂層的多孔結(jié)構(gòu)密封。表4：設(shè)置(i)熔化方法聚合物烘箱溫度(℃)涂料密度(mg/cm2)el-pox,20％nhs14012el-peg6011(ii)涂布液體方法將el-pox(20％nhs)粉末溶解于ipa/dcm(v/v,1:1)(15mg/ml)并通過滴液涂布將該溶液均勻地分布在膠原海綿的頂部，以獲得12mg/cm2的涂料密度。將該海綿在真空烘箱中干燥2小時。sem-圖像顯示，維持了膠原的多孔結(jié)構(gòu)。通過以下來評估經(jīng)涂布的膠原海綿的止血性能：·將100μl新鮮的肝素化的全血逐滴添加至膠原海綿經(jīng)el-pox,20％nhs或el-peg涂布的一側(cè)的頂部?！⒘硪粔K經(jīng)涂布的海綿置于經(jīng)血液涂布的膠原海綿的頂部，使經(jīng)涂布的一側(cè)面對血液(“夾層法”)。·使用薄紗施用輕度的壓力持續(xù)10秒。然后，將夾層物置于含水的燒杯中，并將水?dāng)嚢枰环昼?。通過熔化制備的膠原海綿(el-pox和el-peg)在一分鐘內(nèi)分離，表明不存在止血和粘合。通過滴液涂布制備的膠原海綿(使用el-pox)在1分鐘的時間內(nèi)保持粘合，表明止血和粘合。本實施例顯示出應(yīng)用方法影響膠原中的孔的可用性，并且解釋了由熔化獲得的海綿與由涂布液體獲得的海綿之間的止血和粘合的區(qū)別。實施例8創(chuàng)傷肝臟和脾臟破裂的治療是手術(shù)的主要挑戰(zhàn)。因為脾臟具有優(yōu)異的血液供給，并且脾臟的破裂經(jīng)常伴隨大量的腹部出血。使n＝1的麻醉的豬(家豬，雄性，體重范圍：40kg，成年)經(jīng)受標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)合的穿透脾臟破裂。進(jìn)行中線刨腹手術(shù)以到達(dá)脾臟。使用手術(shù)刀，n＝3(s1…s3)進(jìn)行包囊下標(biāo)準(zhǔn)化損傷(10mm×10mm)。測試三種止血產(chǎn)品，表5提供了概述。表5：測試產(chǎn)品的描述用輕度的壓力來應(yīng)用止血產(chǎn)品。應(yīng)用產(chǎn)品后，對止血時間進(jìn)行評估，參見表6。表6：動物模型結(jié)果tth＝止血時間；n＝實現(xiàn)止血需要的產(chǎn)品編號本實施例顯示出經(jīng)el-pox涂布的海綿在豬脾臟上的止血功效。根據(jù)表6的目的(endpoint)，經(jīng)el-pox涂布的海綿在本模型中獲得止血作用時表現(xiàn)與參考產(chǎn)品(hemopatchtm)同樣好，并且好于對照。此外，觀察到經(jīng)el-pox涂布的海綿的血液吸收容量優(yōu)于參考產(chǎn)品的血液吸收容量。因此，用經(jīng)el-pox涂布的海綿實現(xiàn)的止血受助于血液凝固的快速開始。當(dāng)前第1頁12