相關(guān)申請(qǐng)

本申請(qǐng)要求2014年8月7日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)系列號(hào)62/034,547的優(yōu)先權(quán)益，其內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。

背景

谷氨酰胺通過代謝和非-代謝機(jī)制支持癌細(xì)胞的細(xì)胞生存、生長(zhǎng)和增殖。在活性增殖細(xì)胞中，谷氨酰胺的代謝是細(xì)胞的構(gòu)建塊和能量的主要來源。當(dāng)谷氨酰胺從癌細(xì)胞生長(zhǎng)于其中的培養(yǎng)基中撤消時(shí)，細(xì)胞經(jīng)常停止生長(zhǎng)或死亡。在癌細(xì)胞中，由細(xì)胞攝取的大量谷氨酰胺通過酶谷氨酰胺酶的作用轉(zhuǎn)化為谷氨酸。因此，谷氨酰胺經(jīng)由谷氨酰胺酶向谷氨酸的轉(zhuǎn)化是谷氨酰胺代謝的控制點(diǎn)。

自從warburg觀察到腹水腫瘤細(xì)胞在氧的存在下顯示出高的葡萄糖消耗和乳酸分泌速率以來，研究人員一直在探索癌細(xì)胞如何利用代謝途徑以便能夠繼續(xù)活性增殖。數(shù)個(gè)報(bào)道已經(jīng)證實(shí)谷氨酰胺代謝如何支持細(xì)胞復(fù)制必需的大分子合成。

因此，已有理論認(rèn)為谷氨酰胺酶為治療以活性增殖細(xì)胞為特征的疾病，例如癌癥的潛在性治療靶標(biāo)。具有良好藥用性質(zhì)的合適谷氨酰胺酶抑制劑的缺乏使得難以開發(fā)出用于臨床用途的谷氨酰胺酶抑制劑。因此，創(chuàng)建特異性的并能夠配制為體內(nèi)使用的谷氨酰胺酶抑制劑可導(dǎo)致一種新的類型的治療劑。特別地，用于制備和配制谷氨酰胺酶抑制劑的改進(jìn)的組合物和方法是需要的。

發(fā)明簡(jiǎn)述

本發(fā)明的一個(gè)方面涉及具有式(i)結(jié)構(gòu)的結(jié)晶化合物或化合物的結(jié)晶鹽，

(i)。

本發(fā)明的另一方面涉及制備式(i)的結(jié)晶化合物和結(jié)晶鹽的方法。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供適合用于人患者的藥物制劑，其包含式(i)化合物的結(jié)晶化合物或結(jié)晶鹽，和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。在某些實(shí)施方案中，藥物制劑可用于治療或預(yù)防如本文描述的病癥或疾病。在某些實(shí)施方案中，藥物制劑具有適合靜脈用于人患者的足夠低的熱源活性。

本發(fā)明還提供治療或預(yù)防如本文描述的癌癥、免疫疾病或神經(jīng)疾病的方法，其包括給予本發(fā)明的結(jié)晶化合物或結(jié)晶鹽。

附圖詳述

圖1是cb-839hcl，晶型i的x-射線衍射(xrd)圖譜。

圖2是cb-839hcl，晶型ii的xrd圖譜。

圖3是cb-839tsoh的xrd圖譜。

圖4是cb-839msoh的xrd圖譜。

圖5是cb-839hbr的xrd圖譜。

圖6是cb-839，游離堿，晶型b的xrd圖譜。

圖7是cb-839，游離堿，晶型a的xrd圖譜。

發(fā)明詳述

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供具有式(i)結(jié)構(gòu)的結(jié)晶化合物，或具有式(i)結(jié)構(gòu)的化合物的結(jié)晶鹽，

(i)。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供包含式(i)化合物的結(jié)晶化合物或結(jié)晶鹽和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物制劑。在某些實(shí)施方案中，藥物制劑可用于治療或預(yù)防如本文描述的病癥或疾病。在某些實(shí)施方案中，藥物制劑具有適合靜脈用于人患者的足夠低的熱源活性。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及治療或預(yù)防癌癥或免疫疾病或神經(jīng)疾病的方法，其包括給予式(i)化合物的結(jié)晶化合物或結(jié)晶鹽。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于制備具有式(i)結(jié)構(gòu)的化合物的結(jié)晶鹽的方法，其包括a)提供在第一有機(jī)溶劑中的式(i)化合物的游離堿漿液；b)使游離堿漿液與包含酸和任選的第二有機(jī)溶劑的試劑溶液在足以形成包含式(i)化合物的鹽的混合物的條件下接觸；和c)從包含式(i)化合物的鹽的混合物結(jié)晶式(i)化合物的鹽。

本文描述的任何結(jié)晶化合物或其結(jié)晶鹽可用于制備治療本文公開的任何疾病或病癥的藥物。

在某些實(shí)施方案中，結(jié)晶鹽是鹽酸鹽、甲苯磺酸鹽、硝酸鹽、甲磺酸鹽，或氫溴酸鹽。在特定實(shí)施方案中，結(jié)晶鹽是鹽酸鹽。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的鹽可裝配成一個(gè)以上的晶體形成。在示例性實(shí)施方案中，具有式(i)結(jié)構(gòu)的化合物的結(jié)晶鹽酸鹽作為如下文詳細(xì)描述的“晶型i”和“晶型ii”存在。

在某些實(shí)施方案中，結(jié)晶鹽的多晶型物通過粉末x-射線衍射(xrd)來表征。θ代表以度測(cè)量的衍射角。在某些實(shí)施方案中，用于xrd的衍射計(jì)測(cè)量作為2倍衍射角θ的衍射角。因此，在某些實(shí)施方案中，本文描述的衍射圖譜指針對(duì)角2θ測(cè)量的x-射線強(qiáng)度。

在某些實(shí)施方案中，結(jié)晶hcl鹽的晶型i具有2θ值16.70；17.26；21.09；和22.69。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，晶型i具有2θ值16.70；17.26；18.18；21.09；22.69；23.46；25.22；25.49；和26.72。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，晶型i具有2θ值9.53；11.63；16.70；17.26；18.18；19.10；19.80；21.09；22.16；22.69；23.46；24.63；25.22；25.49；25.91；26.72；28.45；29.38；31.39；31.82；和34.91。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，晶型i具有2θ值8.62；9.53；11.63；15.89；16.70；17.26；18.18；19.10；19.80；21.09；22.16；22.69；23.46；24.63；25.22；25.49；25.91；26.72；28.45；29.38；31.39；31.82；32.76；33.61；33.74；34.27；34.91；35.53；39.36；和39.73。

在某些實(shí)施方案中，式(i)化合物的結(jié)晶hcl鹽的晶型i具有基本上如圖1所示的xrd圖譜。

在某些實(shí)施方案中，結(jié)晶hcl的晶型ii具有2θ值8.34；18.83；和21.10。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，晶型ii具有2θ值6.26；8.34；15.82；18.83；21.10；23.42；24.10；24.45；25.25；和25.74。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，晶型ii具有2θ值6.26；8.34；11.02；12.58；14.80；15.61；15.82；17.58；18.20；18.83；19.81；20.00；21.10；22.58；23.42；24.10；24.45；25.25；25.74；26.36；27.83；28.70；29.84；30.46；31.81；和32.38。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，晶型ii具有2θ值3.10；6.26；8.34；9.04；9.96；11.02；12.58；13.47；14.80；15.61；15.82；16.15；17.58；18.20；18.83；19.81；20.00；21.10；22.02；22.58；23.42；24.10；24.45；25.25；25.74；26.36；27.22；27.83；28.70；29.84；30.46；31.81；32.38；33.23；35.68；36.57；37.40；39.36；和41.79。

在某些實(shí)施方案中，式(i)化合物的結(jié)晶hcl鹽的晶型ii具有基本上如圖2所示的xrd圖譜。

在某些實(shí)施方案中，式(i)化合物的鹽是二鹽酸鹽。在某些這樣的實(shí)施方案中，所述鹽是非晶形的。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的游離堿可裝配成一個(gè)以上的晶體形成。在示例性實(shí)施方案中，具有式(i)結(jié)構(gòu)的化合物的結(jié)晶游離堿作為如下文詳細(xì)描述的“晶型a”、“晶型b”或者其混合物存在。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及式(i)的游離堿結(jié)晶化合物。在某些實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型b具有2θ值18.39；19.10；21.37；24.65。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型b具有2θ值7.92；18.39；19.10；20.12；21.37；24.10；24.65；25.14。在更進(jìn)一步的實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型b具有2θ值7.32；7.92；11.98；15.54；15.87；18.06；18.39；19.10；20.06；20.12；21.37；22.41；22.74；24.10；24.65；25.14；25.78；27.32。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型b具有2θ值3.64；7.32；7.92；8.53；9.30；9.38；11.02；11.98；14.70；15.54；15.87；16.50；16.59；18.06；18.39；19.10；20.06；20.12；20.61；21.37；21.89；22.41；22.74；23.72；24.10；24.65；25.14；25.78；26.49；27.32；27.55；28.26；29.88；31.20；31.80；31.52；32.80；34.30；35.20；36.41；38.53；40.08；40.94；和43.86。在其它實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型b具有基本上如圖6所示的xrd圖譜。

在某些實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型a具有2θ值7.57；18.50；18.69。在某些實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型a具有2θ值7.57；9.67；11.00；12.93；15.20；18.50；18.69；23.33；24.87。在某些實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型a具有2θ值5.47；7.57；9.67；11.00；12.93；14.14；15.20；17.74；18.50；18.69；19.40；20.54；21.13；23.33；24.37；24.87；25.52。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型a具有2θ值5.47；6.01；7.57；9.20；9.67；10.15；11.00；12.93；14.14；15.20；15.81；16.56；17.74；18.50；18.69；19.40；19.94；20.54；20.59；21.13；22.00；22.60；23.33；23.98；24.37；24.87；25.52；26.27；26.62；27.79；29.59；30.64；33.30；35.01；37.93；38.72。在其它實(shí)施方案中，結(jié)晶游離堿的晶型a具有基本上如圖7所示的xrd圖譜。

在某些實(shí)施方案中，式(i)的結(jié)晶化合物不是溶劑化的(例如，晶格不包含溶劑的分子)。在某些備選的實(shí)施方案中，式(i)的結(jié)晶化合物是溶劑化的。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的結(jié)晶鹽化合物可以是式(i)化合物的前藥的鹽，例如，其中母體化合物中的c(o)-nh部分被衍生為用可被水解或者另外裂解以恢復(fù)c(o)-nh部分的基團(tuán)替代酰胺的氫原子。在某些這樣的實(shí)施方案中，前藥在體內(nèi)被代謝為活性母體化合物。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種藥物組合物，其包含式(i)化合物的結(jié)晶化合物或結(jié)晶鹽和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑。在某些實(shí)施方案中，藥物組合物選自片劑、膠囊，和混懸劑。

如本文所用的術(shù)語“基本純的”，指大于90%純的結(jié)晶多晶型物，意指含有少于10%的任何其它化合物，包括相應(yīng)的非晶型化合物或可供選擇的結(jié)晶鹽的多晶型物。優(yōu)選地，結(jié)晶多晶型物是大于95%純，或甚至大于98%純的。

術(shù)語“前藥”意欲涵蓋在生理?xiàng)l件下轉(zhuǎn)化為本發(fā)明的治療活性劑(例如，式i的化合物)的化合物。一種制備前藥的普通方法是包括在生理?xiàng)l件下被水解以顯示所需分子的一或多個(gè)選擇的部分。在其它實(shí)施方案中，前藥通過宿主動(dòng)物的酶活性被轉(zhuǎn)化。

制備結(jié)晶鹽的方法

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及用于制備具有式(i)結(jié)構(gòu)的化合物的結(jié)晶鹽的方法，其包括a)提供在第一有機(jī)溶劑中的式(i)化合物的游離堿混合物；b)使游離堿混合物與包含酸和任選的第二有機(jī)溶劑的試劑溶液在足以形成包含式(i)化合物的鹽的混合物的條件下接觸；和c)從包含式(i)化合物的鹽的混合物結(jié)晶式(i)化合物的鹽。

在某些實(shí)施方案中，在步驟b)中形成的包含式(i)化合物的鹽的混合物是溶液。在某些實(shí)施方案中，在步驟b)中形成的混合物是漿液或懸浮液。

在某些實(shí)施方案中，包含式(i)化合物的鹽的混合物是溶液，和從混合物結(jié)晶所述鹽的步驟包括使所述溶液過度飽和，導(dǎo)致式(i)化合物的鹽從溶液沉淀出來。

在某些實(shí)施方案中，使包含式(i)化合物的鹽的混合物過度飽和包括緩慢加入反溶劑，例如庚烷、己烷、乙醇，或另一種與所述有機(jī)溶劑混溶的極性或非-極性液體，使溶液冷卻(有或沒有種晶溶液)，減少溶液的體積，或其任何組合。在某些實(shí)施方案中，使包含式(i)化合物的鹽的混合物過度飽和包括加入反溶劑，冷卻溶液至室溫或室溫以下的溫度，和減少溶液的體積，例如，通過從溶液蒸發(fā)溶劑。在某些實(shí)施方案中，使溶液冷卻可以是被動(dòng)的(例如，使溶液靜置在環(huán)境溫度下)或主動(dòng)的(例如，在冰浴或冷凍裝置中冷卻溶液)。

在某些實(shí)施方案中，制備方法還包括分離所述鹽晶體，例如通過過濾晶體，通過從晶體中傾析流體，或通過任何其它合適的分離技術(shù)。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，制備方法還包括洗滌晶體。

在某些實(shí)施方案中，制備方法還包括誘導(dǎo)結(jié)晶。該方法還可包括例如在減壓下干燥晶體的步驟。在某些實(shí)施方案中，誘導(dǎo)沉淀或結(jié)晶包括二次成核，其中成核在種子晶體或與環(huán)境的相互作用(結(jié)晶器壁、攪拌葉輪、超聲處理等)的存在下發(fā)生。

在某些實(shí)施方案中，在第一有機(jī)溶劑中的式(i)化合物的游離堿混合物是漿液。在某些實(shí)施方案中，式(i)化合物在第一有機(jī)溶劑中的游離堿混合物是溶液。

在某些實(shí)施方案中，第一有機(jī)溶劑和第二有機(jī)溶劑，如果存在，包含乙腈、n,n-二甲基乙酰胺(dma)、二甲基甲酰胺(dmf)、二甲亞砜(dmso)、乙醇、乙酸乙酯、庚烷、己烷、乙酸異丙酯、甲醇、甲乙酮、n-甲基-2-吡咯烷酮(nmp)、四氫呋喃、甲苯、2-丙醇、1-丁醇、水，或其任何組合。在某些優(yōu)選的實(shí)施方案中，有機(jī)溶劑是乙醇、甲苯、四氫呋喃，或乙腈。在一個(gè)示例性實(shí)施方案中，第一有機(jī)溶劑和第二有機(jī)溶劑各自獨(dú)立地包含乙醇或乙腈。在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，第一有機(jī)溶劑和第二有機(jī)溶劑各自獨(dú)立地包含二甲亞砜或乙醇。在另一個(gè)示例性實(shí)施方案中，第一有機(jī)溶劑和第二有機(jī)溶劑各自獨(dú)立地包含n-甲基-2-吡咯烷酮或乙醇。

在某些實(shí)施方案中，第一有機(jī)溶劑和第二有機(jī)溶劑，如果存在，是相同的。在備選的實(shí)施方案中，第一有機(jī)溶劑和第二有機(jī)溶劑，如果存在，是不同的。

在某些實(shí)施方案中，洗滌晶體包括用選自反溶劑、乙腈、乙醇、庚烷、己烷、甲醇、四氫呋喃、甲苯、水，或其組合的液體洗滌。如本文所用的，“反溶劑”意指鹽晶體是不溶、微溶，或部分可溶于其中的溶劑。實(shí)際上，將反溶劑加入到鹽晶體溶于其中的溶液中降低鹽晶體在溶液中的溶解性，從而刺激所述鹽的沉淀。在某些實(shí)施方案中，晶體用反溶劑和有機(jī)溶劑的組合洗滌。在某些實(shí)施方案中，反溶劑是水，而在其它實(shí)施方案中，它是鏈烷烴溶劑，例如己烷或戊烷，或芳烴溶劑，例如苯、甲苯，或二甲苯。在某些實(shí)施方案中，反溶劑是乙醇。

在某些實(shí)施方案中，洗滌晶體包括用上文描述的溶劑或一種或多種溶劑的混合物洗滌式(i)的結(jié)晶化合物。在某些實(shí)施方案中，溶劑或溶劑的混合物在洗滌之前被冷卻。

在某些實(shí)施方案中，所述酸是鹽酸、對(duì)-甲苯磺酸、甲磺酸、硝酸，或氫溴酸。在該方法的某些實(shí)施方案中，在其中游離堿漿液和試劑溶液彼此接觸的反應(yīng)容器中，試劑溶液的酸以在游離堿漿液中的式(i)化合物的摩爾量的從約1.0至約1.5倍的摩爾量的存在。

酶抑制劑的應(yīng)用

谷氨酰胺作為氮、碳和能量的載體起著重要的作用。其用于肝脲合成、用于腎臟氨產(chǎn)生、用于糖異生，和作為許多細(xì)胞的呼吸燃料。谷氨酰胺轉(zhuǎn)化為谷氨酸通過線粒體酶，谷氨酰胺酶(“gls”)啟動(dòng)。有兩種主要形式的酶，k-型和l-型，它們通過其對(duì)谷氨酰胺的km值和對(duì)谷氨酸的反應(yīng)來區(qū)別，其中km值或米氏常數(shù)(michaelisconstant)，是達(dá)到最大速率一半所需的底物濃度。l-型，也稱為“肝-型”或gls2，具有對(duì)谷氨酰胺的高km并且為谷氨酸抗性的。k-型，也稱為“腎-型”或gls1，具有對(duì)谷氨酰胺的低km并且受谷氨酸的抑制。gls1的可選剪接形式，稱為谷氨酰胺酶c或“gac”，最近已被鑒定并具有g(shù)ls1特有的類似活性。在某些實(shí)施方案中，所述化合物可選擇性地抑制gls1、gls2和gac。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述化合物選擇性地抑制gls1和gac。

除了用作蛋白合成的基本結(jié)構(gòu)塊，還已經(jīng)顯示氨基酸對(duì)生長(zhǎng)和分裂細(xì)胞至關(guān)重要的許多過程有貢獻(xiàn)，并且這對(duì)于癌細(xì)胞尤其如此。幾乎所有的癌癥定義包括涉及失調(diào)的增殖。對(duì)癌癥中的谷氨酰胺代謝的大量研究表明許多腫瘤是谷氨酰胺的饑渴消費(fèi)者。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明是使用如本文描述的式(i)化合物的結(jié)晶化合物或結(jié)晶鹽治療或預(yù)防癌癥或免疫疾病或神經(jīng)疾病的方法。

如本文所用的，“預(yù)防”疾病或病癥的治療劑指在統(tǒng)計(jì)樣本中，相對(duì)于未治療的對(duì)照樣本在治療的樣本中減少疾病或病癥的發(fā)生或頻率，或相對(duì)于未治療的對(duì)照樣本延遲疾病或病癥的一種或多種癥狀的發(fā)作或減輕其嚴(yán)重性的化合物。因此，癌癥的預(yù)防包括，例如，相對(duì)于未治療的對(duì)照群體減少在接受預(yù)防性治療的患者群體中的可檢測(cè)的癌癥生長(zhǎng)數(shù)目，和/或相對(duì)于未治療的對(duì)照群體延遲治療的群體出現(xiàn)可檢測(cè)的癌癥生長(zhǎng)，例如，達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)和/或臨床顯著量。感染的預(yù)防包括，例如，相對(duì)于未治療的對(duì)照群體減少治療的群體中感染的診斷數(shù)目，和/或相對(duì)于未治療的對(duì)照群體延遲治療的群體中感染的癥狀的發(fā)作。疼痛的預(yù)防包括，例如，相對(duì)于未治療的對(duì)照群體，在治療的群體中減輕由受試者經(jīng)歷的疼痛感覺的強(qiáng)度，或可供選擇地延遲由受試者經(jīng)歷的疼痛感覺。

術(shù)語“治療”包括預(yù)防性治療和/或治療性治療。術(shù)語“預(yù)防性或治療性”治療為本領(lǐng)域公認(rèn)的并包括給予宿主一種或多種本組合物。如果在不需要的病癥(例如，宿主動(dòng)物的疾病或其它不需要的狀態(tài))的臨床表現(xiàn)之前給藥，那么治療是預(yù)防性的(即，它保護(hù)宿主免于出現(xiàn)不需要的病癥)，而如果在不需要的病癥表現(xiàn)之后給藥，則治療是治療性的(即，它意欲減輕、緩解或穩(wěn)定已存在的不需要的病癥或其副作用)。

在某些實(shí)施方案中，癌癥可以是以下癌癥的一種或其變體：急性成淋巴細(xì)胞白血病(all)、急性髓性白血病(aml)、腎上腺皮質(zhì)癌、肛門癌、闌尾癌、非典型畸胎樣瘤/橫紋肌樣瘤、基底細(xì)胞癌、膽管癌、膀胱癌、骨癌、腦瘤、星形細(xì)胞瘤、腦和脊髓瘤、腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)非典型畸胎樣瘤/橫紋肌樣瘤、中樞神經(jīng)系統(tǒng)胚胎瘤、乳腺癌、支氣管腫瘤、伯基特氏淋巴瘤、類癌腫瘤、未知的原發(fā)性癌、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、宮頸癌、兒童期癌癥、脊索癌、慢性淋巴細(xì)胞白血病(cll)、慢性髓性白血病(cml)、慢性骨髓增生性疾病、結(jié)腸癌、結(jié)腸直腸癌、顱咽管瘤、皮膚t-細(xì)胞淋巴瘤、導(dǎo)管原位癌(dcis)、胚胎瘤、子宮內(nèi)膜癌、成室管膜細(xì)胞瘤、室管膜瘤、食道癌、鼻腔神經(jīng)膠質(zhì)瘤、尤因氏肉瘤、顱外生殖細(xì)胞瘤、性腺外生殖細(xì)胞瘤、肝外膽管癌、眼癌、骨的纖維組織細(xì)胞瘤、膽囊癌、胃癌、胃腸道類癌腫瘤、胃腸道間質(zhì)瘤(gist)、生殖細(xì)胞瘤、顱外生殖細(xì)胞瘤、性腺外生殖細(xì)胞瘤、卵巢生殖細(xì)胞瘤、妊娠滋養(yǎng)層腫瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、毛細(xì)胞白血病、頭頸癌、心臟癌、肝細(xì)胞癌、組織細(xì)胞增多癥、郎格罕氏細(xì)胞癌、霍奇金氏淋巴瘤、下咽癌、眼內(nèi)黑色素瘤、胰島細(xì)胞瘤、卡波濟(jì)氏肉瘤、腎癌、朗格罕氏細(xì)胞組織細(xì)胞增多癥、喉癌、白血病、嘴唇和口腔癌、肝癌、小葉原位癌(lcis)、肺癌、淋巴瘤、aids-相關(guān)淋巴瘤、巨球蛋白血癥、男性乳腺癌、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、髓質(zhì)上皮瘤、黑色素瘤、默克爾細(xì)胞癌、惡性間皮瘤、隱匿性原發(fā)性轉(zhuǎn)移鱗狀頸癌、涉及nut基因的中線道癌、口腔癌、多發(fā)性內(nèi)分泌瘤綜合征、多發(fā)性骨髓瘤/漿細(xì)胞瘤、蕈樣真菌病、骨髓增生異常綜合征、骨髓增生異常/骨髓增殖性腫瘤、慢性髓性白血病(cml)、急性髓性白血病(aml)、骨髓瘤、多發(fā)性骨髓瘤、慢性骨髓增殖性病癥、鼻腔癌、副鼻竇癌、鼻咽癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、非-霍奇金氏淋巴瘤、非-小細(xì)胞肺癌、口癌、口腔癌、唇癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳頭狀瘤病、副神經(jīng)節(jié)瘤、副鼻竇癌、鼻腔癌、甲狀旁腺癌、陰莖癌、咽癌、嗜鉻細(xì)胞瘤、中間分化松果體實(shí)質(zhì)瘤、松果體母細(xì)胞瘤、垂體瘤、漿細(xì)胞瘤、胸膜肺母細(xì)胞瘤、乳腺癌、原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)(cns)淋巴瘤、前列腺癌、直腸癌、腎細(xì)胞癌、腎盂癌、輸尿管癌、移行細(xì)胞癌、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、橫紋肌肉瘤、唾腺癌、肉瘤、塞澤里綜合征(sézarysyndrome)、皮膚癌、小細(xì)胞肺癌、小腸癌、軟組織肉瘤、鱗狀細(xì)胞癌、隱匿性原發(fā)性轉(zhuǎn)移鱗狀頸癌、胃癌、幕上原始神經(jīng)外胚層瘤、t-細(xì)胞淋巴瘤、睪丸癌、喉癌、胸腺瘤、胸腺癌、甲狀腺癌、腎盂和輸尿管移行細(xì)胞癌、不明原因的原發(fā)性妊娠滋養(yǎng)層腫瘤、不尋常的兒童癌癥、尿道癌、子宮癌、子宮肉瘤、瓦爾登斯特倫巨球蛋白血癥和維爾姆斯腫瘤(wilmstumor)。

在某些情況下，致瘤突變促進(jìn)谷氨酰胺代謝。表達(dá)致瘤k-ras的細(xì)胞顯示出谷氨酰胺利用的增加。在某些實(shí)施方案中，癌細(xì)胞具有突變的k-ras基因。在某些實(shí)施方案中，癌癥與膀胱、骨髓、乳腺、結(jié)腸、腎、肝、肺、卵巢、胰腺、前列腺、皮膚或甲狀腺的組織有關(guān)。已知c-myc基因在許多癌癥中有改變。增加的myc蛋白表達(dá)與增加的谷氨酰胺酶的表達(dá)相關(guān)，導(dǎo)致谷氨酰胺代謝的上調(diào)。在某些實(shí)施方案中，癌細(xì)胞具有致瘤c-myc基因或升高的myc蛋白表達(dá)。在某些實(shí)施方案中，癌癥與膀胱、骨、腸、乳腺、中樞神經(jīng)系統(tǒng)(例如，腦)、結(jié)腸、胃系統(tǒng)(例如胃和腸)、肝、肺、卵巢、前列腺、肌肉和皮膚的組織相關(guān)。

腎細(xì)胞癌(rcc)的最常見類型，透明細(xì)胞型(ccrcc)與希伯爾-林德奧二氏病(vonhippel-lindau)(vhl)基因突變密切相關(guān)。由于自葡萄糖制備脂肪酸的能力喪失，已顯示vhl-缺陷細(xì)胞系具有對(duì)谷氨酰胺的增加的需要(metallo等，nature2013)。這種對(duì)谷氨酰胺的依賴性使得細(xì)胞易受谷氨酰胺酶抑制劑的影響(gameiro等,cellmetab.2013)。本發(fā)明的某些實(shí)施方案涉及本文描述的化合物治療vhl-缺陷癌癥的用途。在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是rcc。在某些實(shí)施方案中，所述癌癥是ccrcc。

谷氨酰胺酶抑制在某些具有tca循環(huán)酶包括延胡索酸水合酶(fh)、琥珀酸脫氫酶(sdh)，或異檸檬酸脫氫酶(idh)的突變或缺失的罕見癌癥中可以是有效的。谷氨酸在這些突變或缺失發(fā)生的上游進(jìn)入tca循環(huán)。發(fā)表的研究顯示谷氨酰胺代謝在延胡索酸和琥珀酸的合成中是重要的。除了fh和sdh外，有證據(jù)顯示谷氨酰胺有助于2-羥基戊二酸的產(chǎn)生，其為腫瘤形成的另一個(gè)驅(qū)動(dòng)因素，它在帶有酶異檸檬酸脫氫酶突變的腫瘤患者中積聚。因此，谷氨酰胺酶的抑制劑可通過限制上游起始原料的可利用性阻斷這些突變或缺失的作用。fh中的罕見的突變導(dǎo)致遺傳性平滑肌瘤病和腎細(xì)胞癌(hlrcc)的發(fā)生，其中患者可出現(xiàn)皮膚、子宮或腎的腫瘤。一些胃腸道間質(zhì)瘤(gist)，因缺乏sdh的表達(dá)而發(fā)生，并且常常是遺傳性的。其它缺乏sdh功能的突變發(fā)現(xiàn)于帶有罕見的頭頸癌(稱為副神經(jīng)節(jié)瘤)，和罕見的腎上腺或腎上腺外(extra-adrenal)癌(稱為嗜鉻細(xì)胞瘤)，和罕見的亞群透明細(xì)胞rcc的患者中。一些患有神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦癌形式、軟骨肉瘤、罕見的骨癌、膽管癌、罕見的膽管瘤、aml、高危險(xiǎn)脊髓發(fā)育不良/骨髓增生性疾病、血液疾病類型的患者具有idh1或idh2驅(qū)動(dòng)因子突變。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，本文描述的化合物可被用來治療經(jīng)鑒定具有fh、sdh或idh(1和2)突變的疾病。在某些實(shí)施方案中，所述疾病是遺傳性平滑肌瘤病或腎細(xì)胞癌(hlrcc)。在某些實(shí)施方案中，所述疾病是gist、副神經(jīng)節(jié)瘤、嗜鉻細(xì)胞瘤，或透明細(xì)胞rcc。在某些實(shí)施方案中，疾病是神經(jīng)膠質(zhì)瘤、軟骨肉瘤、膽管癌、aml，或脊髓發(fā)育不良/骨髓增生性疾病。

雖然許多癌細(xì)胞的存活依賴于外源性谷氨酰胺，但谷氨酰胺在腫瘤細(xì)胞亞型中的依賴程度可使得細(xì)胞群更容易受谷氨酰胺的減少的影響。作為一個(gè)例子，乳腺癌的基因表達(dá)分析已鑒定5個(gè)內(nèi)在亞型(腔(luminal)a、腔b、基底的(basal)、her2+和正常-樣)。雖然谷氨酰胺剝奪對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和生存力具有影響，基底樣細(xì)胞似乎對(duì)外源性谷氨酰胺的減少更加敏感。這支持了谷氨酰胺是基底樣乳腺癌細(xì)胞系中的非常重要的能量來源的概念，并提示谷氨酰胺酶的抑制作用在治療包含基底樣細(xì)胞的乳腺癌中將是有益的。三陰乳腺癌(tnbc)的特征在于缺乏雌激素受體、孕酮受體和人上皮生長(zhǎng)因子受體2表達(dá)。這種癌癥在化學(xué)療法后具有較高的復(fù)發(fā)率，和與其它乳腺癌亞型相比較差的預(yù)后。有趣的是，在tnbc細(xì)胞和基底樣乳腺癌細(xì)胞之間的代謝概況中似乎有著明顯的相似性(未公布的數(shù)據(jù))。因此，本發(fā)明的某些實(shí)施方案涉及本文所述的化合物用于治療tnbc和基底-型乳腺癌的用途。

惡病質(zhì)，即肌肉質(zhì)量的大量喪失，常常與癌癥患者的差的功能狀態(tài)和高的死亡率有關(guān)。這種過程背后的理論是腫瘤需要比由膳食正常供應(yīng)的更多的谷氨酰胺，所以肌肉，谷氨酰胺的主要來源，開始分解以向腫瘤供應(yīng)足夠的營(yíng)養(yǎng)素。因此，抑制谷氨酰胺酶可以減少對(duì)分解肌肉的需要。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及本化合物預(yù)防、抑制或減輕惡病質(zhì)的用途。

最常見的神經(jīng)遞質(zhì)是谷氨酸，其衍生自谷氨酰胺經(jīng)由谷氨酰胺酶的酶促轉(zhuǎn)化。已顯示高水平的谷氨酸是神經(jīng)毒性的。在對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的創(chuàng)傷損害后，出現(xiàn)神經(jīng)遞質(zhì)釋放的升高，特別是谷氨酸。因此，谷氨酰胺酶的抑制作用已被假設(shè)為缺血性損害，例如中風(fēng)后的治療的一種手段(newcomb,pctwo99/09825)。亨廷頓氏病(huntington’sdisease)是一種進(jìn)行性、致命性神經(jīng)性病癥。在亨廷頓氏病的遺傳小鼠模型中，觀察到該病的早期表現(xiàn)與失調(diào)的谷氨酸釋放相關(guān)。在hiv-相關(guān)癡呆中，hiv感染的巨噬細(xì)胞表現(xiàn)出谷氨酰胺酶活性上調(diào)和谷氨酸釋放增加，導(dǎo)致神經(jīng)元損傷。類似地，在另一種神經(jīng)性疾病中，在雷特綜合征(rettsyndrome)中的激活的小膠質(zhì)細(xì)胞釋放谷氨酸，引起神經(jīng)元損害。過量的谷氨酸釋放已與谷氨酰胺酶的上調(diào)相關(guān)。在經(jīng)繁殖而減少谷氨酰胺酶水平的小鼠中，對(duì)精神病刺激性藥物，例如安非他明的敏感性被極大地降低，因此提示谷氨酰胺酶抑制作用在治療精神分裂癥中可為有益的。雙相型障礙是一種破壞性疾病，其以狂躁和抑郁的反復(fù)發(fā)作為標(biāo)志。這種疾病用情緒穩(wěn)定劑例如鋰和丙戊酸鹽治療；然而，這些藥物的長(zhǎng)期使用似乎增加谷氨酸受體的豐度，其可導(dǎo)致藥物的有效性隨時(shí)間的推移而降低。因此，可供選擇的治療可以是通過抑制谷氨酰胺酶而減少谷氨酸的量。這可以與或可以不與情緒穩(wěn)定劑聯(lián)合使用。美金剛，一種n-甲基-d-天冬氨酸受體(nmdar)的部分拮抗劑，是經(jīng)批準(zhǔn)治療阿爾茨海默氏病的治療劑。當(dāng)前，正在進(jìn)行將美金剛視為治療血管性癡呆和帕金森氏病的手段的研究。因?yàn)橐扬@示美金剛也部分地阻斷nmda谷氨酸受體，有理由推測(cè)通過抑制谷氨酰胺酶來降低谷氨酸水平也可治療阿爾茨海默氏病、血管性癡呆和帕金森氏病。阿爾茨海默氏病、雙相型障礙、hiv-相關(guān)癡呆、亨廷頓氏病、缺血性損害、帕金森氏病、精神分裂癥、中風(fēng)、創(chuàng)傷性損害和血管性癡呆僅僅是幾種與增加的谷氨酸水平相關(guān)的神經(jīng)性疾病。因此，用本文描述的化合物抑制谷氨酰胺酶可減輕或預(yù)防神經(jīng)性疾病。因此，在某些實(shí)施方案中，所述化合物可以用于治療或預(yù)防神經(jīng)性疾病。

t淋巴細(xì)胞的激活誘導(dǎo)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生，從而使細(xì)胞具有能量和生物合成需求。谷氨酰胺用作核苷酸合成的胺基團(tuán)供體，而谷氨酸，谷氨酰胺代謝中的第一個(gè)成分，在氨基酸和谷胱甘肽合成中起直接的作用，以及能夠進(jìn)入用于能量產(chǎn)生的三羧酸循環(huán)(krebscycle)。有絲分裂原-誘導(dǎo)的t細(xì)胞增殖和細(xì)胞因子產(chǎn)生需要高水平的谷氨酰胺代謝，因此抑制谷氨酰胺酶可用作免疫調(diào)節(jié)的手段。在多發(fā)性硬化，即一種炎性自身免疫性疾病中，激活的小膠質(zhì)細(xì)胞顯示出上調(diào)的谷氨酰胺酶和釋放增加的細(xì)胞外谷氨酸水平。谷氨酰胺水平經(jīng)膿毒癥、損傷、燒傷、手術(shù)和耐力訓(xùn)練而降低。這些情形將個(gè)體置于免疫抑制的危險(xiǎn)中。事實(shí)上，一般來說，谷氨酰胺酶基因表達(dá)和酶活性兩者在t細(xì)胞活動(dòng)期間均增加。骨髓移植后給予谷氨酰胺的患者導(dǎo)致較低水平的感染和減少的移植物抗宿主疾病。t細(xì)胞增殖和激活涉及許多免疫性疾病，例如炎性腸病、克羅恩氏病、膿毒癥、牛皮癬、關(guān)節(jié)炎(包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)、多發(fā)性硬化、移植物抗宿主疾病、感染、狼瘡和糖尿病。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，本文所述的化合物可用于治療或預(yù)防免疫性疾病。

肝性腦病(he)表示肝病或門體分流術(shù)的患者中的一系列短暫性和可逆性神經(jīng)和精神病功能障礙。he不是一種單一的臨床實(shí)體并可反映可逆性代謝性腦病、腦萎縮、腦水腫，或這些因素的組合；然而，目前的假設(shè)是大部分來自腸的氨的積聚在病理生理學(xué)方面起關(guān)鍵作用。谷氨酰胺在小腸、腎和肌肉合成中的脫氨作用都有利于氨的產(chǎn)生。由肝細(xì)胞清除或門體分流術(shù)造成的受損肝清除引起氨的積聚增加。氨毒性經(jīng)由谷氨酰胺合成酶而影響腦中的星形膠質(zhì)細(xì)胞，所述谷氨酰胺合成酶使氨代謝以產(chǎn)生增加的谷氨酰胺。谷氨酰胺繼而將水吸收進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞，導(dǎo)致線粒體腫脹和氧化性功能障礙。所產(chǎn)生的腦水腫被認(rèn)為引起在he中觀察到的神經(jīng)功能障礙。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，本文所述的化合物可用來治療或預(yù)防he。

已顯示出背根神經(jīng)節(jié)中的初級(jí)感覺神經(jīng)元在炎癥后升高其谷氨酰胺酶活性。認(rèn)為作為結(jié)果的增加的谷氨酸產(chǎn)生促使中樞和外周二者敏感化，確定為疼痛。本發(fā)明的一個(gè)方面為本文的化合物用于治療或減輕疼痛的用途。在某些實(shí)施方案中，疼痛可以是神經(jīng)性疼痛、化學(xué)療法-誘導(dǎo)的疼痛或炎性疼痛。

高血糖水平、高胰島素水平，和胰島素抵抗是發(fā)展糖尿病的危險(xiǎn)因素。類似地，高血壓是發(fā)生心血管疾病的危險(xiǎn)因素。在最近得自大規(guī)模的人群組(cohort)研究的報(bào)告中，這四種危險(xiǎn)因素與血流中的谷氨酰胺-對(duì)-谷氨酸的比率呈負(fù)相關(guān)性。此外，血漿谷氨酰胺-對(duì)-谷氨酸的比率與糖尿病在12年中的最終發(fā)病率呈負(fù)相關(guān)性。采用動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)與這些結(jié)果一致。喂給富含谷氨酰胺飲食的小鼠在空腹6小時(shí)后的葡萄糖耐受試驗(yàn)中表現(xiàn)出較低的血糖水平，和將谷氨酰胺腹膜內(nèi)注射進(jìn)入小鼠快速地降低其血壓。因此，似乎合理的是谷氨酰胺酶抑制劑，其引起谷氨酰胺水平增加并降低谷氨酸水平，將降低糖尿病和心血管性疾病的發(fā)病率。特別是，肝和小腸是患糖尿病動(dòng)物的谷氨酰胺利用的主要場(chǎng)所，而谷氨酰胺酶活性在鏈脲霉素(streptozotocin)-誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的這些器官中高于正常(watford等,biochemj,1984；mithieux等,amjphysiolendrocrinolmetab,2004)。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，本文所述的化合物可用于治療糖尿病。在本發(fā)明的其它實(shí)施方案中，本化合物可用于降低高血壓。

在某些實(shí)施方案中，治療或預(yù)防癌癥、免疫性疾病和神經(jīng)性疾病的方法可包括聯(lián)合化療劑給予如本文描述的式(i)化合物的結(jié)晶化合物或鹽?？梢耘c本發(fā)明的化合物聯(lián)合給予的化療劑包括：氨魯米特、安吖啶、阿那曲唑、天冬酰胺酶、卡介苗(bacilluscalmette-guérinvaccine)(bcg)、比卡魯胺、博來霉素、布舍瑞林、白消安、喜樹堿(campothecin)、卡倍他濱、卡鉑、卡莫司汀、苯丁酸氮芥、氯喹、順鉑、克拉屈濱、氯膦酸(clodronate)、秋水仙堿、環(huán)磷酰胺、環(huán)丙孕酮、阿糖胞苷、達(dá)卡巴嗪、放線菌素d、柔紅霉素、脫甲綠膠酶素、二氯乙酸酯、己二烯雌酚、己烯雌酚、多西他賽、多柔比星、表阿霉素、雌二醇、雌莫司汀、依托泊苷、依維莫司、依西美坦、非格司亭、氟達(dá)拉濱、氟氫可的松、氟尿嘧啶、氟甲睪酮、氟他胺、吉西他濱、染料木素、戈舍瑞林、羥基脲、伊達(dá)比星、異環(huán)磷酰胺、伊馬替尼、干擾素、伊立替康、來曲唑、亞葉酸、亮丙瑞林、左旋咪唑、洛莫司汀、氯尼達(dá)明、氮芥、甲羥孕酮、甲地孕酮、美法侖、巰基嘌呤、美司鈉、二甲雙胍、甲氨蝶呤、絲裂霉素、米托坦、米托蒽醌、尼魯米特、諾考達(dá)唑、奧曲肽、奧沙利鉑、紫杉醇、帕米膦酸鹽、噴司他丁、哌立福辛、普卡霉素、卟吩姆(porfimer)、丙卡巴肼、雷替曲塞、利妥昔單抗、索拉非尼、鏈佐星、舒尼替尼、蘇拉明、他莫昔芬、替莫唑胺、坦羅莫司、替尼泊苷、睪酮、硫鳥嘌呤、塞替派、二氯二茂鈦(titanocenedichloride)、托泊替康、曲妥珠單抗、維a酸、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春地辛，或長(zhǎng)春瑞濱。

已開發(fā)用于治療癌癥的許多組合療法。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以與組合療法聯(lián)合給予。本發(fā)明的化合物可以聯(lián)合給予的組合療法的實(shí)例包括在表1中。

表1：用于治療癌癥的示例性組合療法

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可與免疫調(diào)節(jié)劑聯(lián)合給予。本發(fā)明的化合物可以在組合療法中與之聯(lián)合給予的免疫調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括粒細(xì)胞集落刺激因子(g-csf)、干擾素、咪喹莫特、il-2、il-7、il-12、各種趨化因子、合成的胞嘧啶磷酸-鳥苷(cpg)寡脫氧核苷酸、葡聚糖，和合成小分子例如阿普斯特(apremilast)、cc-122、cc-11006、cc-10015、來那度胺、泊馬度胺(pomalidomide)，和沙利度胺。在某些實(shí)施方案中，免疫調(diào)節(jié)劑是沙利度胺類似物，例如在wo1999/46258、wo2008/033567、wo2010/093434、wo2010/093605、wo2011/100380，和wo2012/097116中公開的那些。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可與選自酶抑制劑(例如激酶抑制劑)、有絲分裂抑制劑、dna-改性劑，和胞苷類似物的抗癌劑聯(lián)合給予。本發(fā)明的化合物可以在組合療法中與之聯(lián)合給予的抗癌劑的實(shí)例包括微管裝配抑制劑、akt抑制劑、mtor抑制劑、mek抑制劑、rtk抑制劑、atm抑制劑、atr抑制劑、pi3k抑制劑、egfr抑制劑、b-raf抑制劑、c-kit抑制劑、dna交聯(lián)劑、dna嵌入劑，和胞苷類似物。在某些實(shí)施方案中，抗癌劑是長(zhǎng)春新堿、卡鉑、順鉑、吉西他濱、mk2206、依維莫司、曲美替尼(trametinib)、舒尼替尼、索拉非尼、bez235、紫杉醇、多西他賽、厄洛替尼、司美替尼(selumetinib)、西羅莫司、曲美替尼(trametinib)、坦羅莫司、帕唑帕尼(pazopanib)，或gsk1120212。

癌細(xì)胞的增殖需要脂質(zhì)合成。正常地，用于脂質(zhì)合成的乙?；o酶a由丙酮酸的線粒體庫形成，丙酮酸衍生自糖酵解。然而在低氧條件下，例如通常在腫瘤環(huán)境中發(fā)現(xiàn)的那些低氧條件下，在線粒體內(nèi)丙酮酸向乙?；o酶a的轉(zhuǎn)化被下調(diào)。最近的研究揭示，在這樣的低氧條件下，細(xì)胞取而代之地主要轉(zhuǎn)變成使用這樣的途徑，所述途徑涉及α-酮戊二酸的還原性羧化作用以生產(chǎn)用于脂質(zhì)合成的乙?；o酶a。在這個(gè)途徑中的第一個(gè)步驟涉及經(jīng)由谷氨酰胺酶將谷氨酰胺轉(zhuǎn)化為谷氨酸。隨后，谷氨酸被轉(zhuǎn)化為α-酮戊二酸，而生成的α-酮戊二酸在由異檸檬酸脫氫酶介導(dǎo)的還原性羧化步驟中被轉(zhuǎn)化為異檸檬酸。轉(zhuǎn)換到這種還原性羧化作用途徑也發(fā)生在某些腎癌細(xì)胞系中，所述腎癌細(xì)胞系含有或者受損的線粒體或者減弱的信號(hào)，供誘導(dǎo)負(fù)責(zé)將糖酵解丙酮酸轉(zhuǎn)化為乙酰基輔酶a的酶。一種類似的轉(zhuǎn)換發(fā)生在暴露于線粒體呼吸鏈抑制劑例如二甲雙胍、魚藤酮和抗霉素的細(xì)胞中。因此，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，發(fā)明人提議使用線粒體呼吸鏈抑制劑和谷氨酰胺酶抑制劑的組合以同時(shí)地增加癌細(xì)胞對(duì)用于脂質(zhì)合成的谷氨酰胺酶-依賴性途徑的依賴性，同時(shí)恰好抑制這些途徑。

對(duì)腫瘤細(xì)胞中糖酵解的依賴性增加很可能是由于低氧的腫瘤環(huán)境削弱了線粒體呼吸。此外，葡萄糖的耗盡誘導(dǎo)用myc致癌基因轉(zhuǎn)化的細(xì)胞的細(xì)胞凋亡。這些結(jié)果提示抑制糖酵解將具有預(yù)防癌細(xì)胞增殖的治療價(jià)值。目前存在許多文獻(xiàn)記載的糖酵解抑制劑。然而，如zhao等(2012)所指出的，“可獲得的糖酵解抑制劑通常不是很有效的，且需要高劑量，而高劑量可引起高水平的系統(tǒng)毒性”。因?yàn)榘┘?xì)胞典型地以比正常細(xì)胞更高的水平利用葡萄糖和谷氨酰胺二者，那些代謝物的每一種的弱化的利用將可能具有協(xié)同作用。因此，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，發(fā)明人提議使用糖酵解途徑抑制劑和谷氨酰胺酶抑制劑的組合。這樣的糖酵解抑制劑包括2-脫氧葡萄糖、氯尼達(dá)明、3-溴代丙酮酸、伊馬替尼(imatinib)、羥基硫胺素、雷帕霉素，及其藥理學(xué)等價(jià)物。糖酵解可通過耗盡nad+，經(jīng)由通過聚(adp-核糖)聚合酶激活的途徑的dna烷基化劑而誘導(dǎo)的dna損害被間接地抑制。因此，在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，發(fā)明人提議使用dna烷基化劑和谷氨酰胺酶抑制劑的組合。癌細(xì)胞利用磷酸戊糖途徑連同糖酵解途徑一起，以產(chǎn)生衍生自葡萄糖的代謝中間體。因此，在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，發(fā)明人提議使用磷酸戊糖抑制劑例如6-氨基煙酰胺連同谷氨酰胺酶抑制劑的組合。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的結(jié)晶化合物或鹽可以與癌癥治療的非化學(xué)方法聯(lián)合給予。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以與放射療法聯(lián)合給予。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以與手術(shù)、與熱消融療法、與聚焦超聲療法、與冷凍療法，或與這些療法的任何組合聯(lián)合給予。

在某些實(shí)施方案中，不同的本發(fā)明的化合物可以與一種或多種本發(fā)明的其它化合物聯(lián)合給予。而且，這樣的組合可以與其它治療劑，例如其它適合用于治療癌癥、免疫性疾病或神經(jīng)性疾病的藥物，例如上文指定的藥物聯(lián)合給予。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供一種藥劑盒，其包含：a)一種或多種單一劑型的本發(fā)明的結(jié)晶化合物或鹽；b)一種或多種如上提及的單一劑型的化療劑；和c)給予本發(fā)明的結(jié)晶化合物或鹽和化療劑的使用說明書。

本發(fā)明提供一種藥劑盒，其包含：

a)含有本發(fā)明的結(jié)晶化合物或鹽的藥物制劑(例如，一種或多種單一劑型)；和

b)給予藥物制劑，例如用于治療或預(yù)防上文討論的任何病癥的使用說明書。

在某些實(shí)施方案中，藥劑盒還包括用于聯(lián)合給予包含本發(fā)明的結(jié)晶化合物或鹽的藥物制劑與如上提及的化學(xué)治療劑的使用說明書。在某些實(shí)施方案中，藥劑盒還包括第二種藥物制劑(例如，作為一種或多種單一劑型)，其包含如上提及的化學(xué)治療劑。

藥物組合物

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包含式(i)化合物的結(jié)晶化合物或鹽和一種或多種藥學(xué)上可接受的賦形劑的藥物組合物。

示例性的藥學(xué)上可接受的賦形劑在此提出，并包括例如粘合劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、矯味劑、增溶劑、助懸劑、乳化劑、包衣劑、環(huán)糊精，和/或緩沖劑。雖然劑量將根據(jù)患者的癥狀、年齡和體重，要治療或預(yù)防的疾病性質(zhì)和嚴(yán)重性，給藥途徑和藥物的形式而變化，一般來說，對(duì)于成人患者推薦從0.01至3000mg化合物的每日劑量，并且這可以單一劑量或以分劑量給予。可與載體材料混合以產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量將通常是產(chǎn)生治療效果的化合物的量。

就給定的患者中的治療效果而言，將產(chǎn)生最有效的結(jié)果的給藥的準(zhǔn)確次數(shù)和/或組合物的量將取決于特定化合物的活性、藥代動(dòng)力學(xué)，和生物利用度，患者的生理狀況(包括年齡、性別、疾病類型和階段，一般身體狀況，對(duì)給定劑量的響應(yīng)，和藥物類型)，給藥途徑等。然而，上述指導(dǎo)方針可被用作微調(diào)治療的基礎(chǔ)，例如，確定給藥的最佳次數(shù)和/或量，這將不需要超過由監(jiān)測(cè)患者和調(diào)整劑量和/或時(shí)間選擇組成的常規(guī)實(shí)驗(yàn)。

在某些實(shí)施方案中，組合物被給予的個(gè)體是哺乳動(dòng)物例如人，或非-人哺乳動(dòng)物。當(dāng)給予動(dòng)物，例如人時(shí)，所述組合物或化合物優(yōu)選地作為包含，例如，本發(fā)明的化合物和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物給予。藥學(xué)上可接受的載體是本領(lǐng)域熟知的并包括，例如，含水溶液例如水或生理緩沖鹽水或其它溶劑或溶媒例如二醇、甘油、油例如橄欖油，或可注射的有機(jī)酯。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)這樣的藥物組合物給予人，特別是用于侵入途徑給藥(即，避開通過上皮屏障運(yùn)輸或擴(kuò)散的途徑，例如注射或植入)時(shí)，含水溶液是無熱原的，或基本上無熱原的?？蛇x擇賦形劑，例如，以實(shí)現(xiàn)藥物的延遲釋放或選擇性地靶向一或多個(gè)細(xì)胞、組織或器官。藥物組合物可呈劑量單位形式例如片劑、膠囊(包括粉末膠囊和明膠膠囊)、顆粒劑、用于重構(gòu)的凍干制劑、粉末劑、溶液劑、糖漿劑、栓劑、注射劑等。組合物也可存在于透皮遞送系統(tǒng)，例如皮膚貼劑中。組合物也可存在于適合局部給藥的溶液劑，例如通過眼粘膜給予的滴眼劑中。

藥學(xué)上可接受的載體可含有生理學(xué)上可接受的試劑，其起著例如穩(wěn)定、增加化合物例如本發(fā)明的化合物的溶解性，或增加其吸收的作用。這樣的生理學(xué)上可接受的試劑包括，例如，碳水化合物，例如葡萄糖、蔗糖或右旋糖酐、抗氧化劑，例如抗壞血酸或谷胱甘肽，螯合劑，低分子量蛋白或其它穩(wěn)定劑或賦形劑。藥學(xué)上可接受的載體，包括生理學(xué)上可接受的試劑的選擇取決于例如，組合物的給藥途徑。制劑或藥物組合物可以是自乳化藥物遞送系統(tǒng)或自微乳化藥物遞送系統(tǒng)。藥物組合物(制劑)也可以是脂質(zhì)體或其它聚合物基質(zhì)，其中可包含例如本發(fā)明的化合物。例如包括磷脂或其它脂質(zhì)的脂質(zhì)體是無毒性的、生理學(xué)上可接受的和可代謝的載體，其制備和給藥都是相對(duì)簡(jiǎn)單的。

本文使用短語"藥學(xué)上可接受的"是指在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)，適合用于與人和動(dòng)物的組織接觸，而無過度的毒性、刺激性、過敏反應(yīng)，或其它問題或并發(fā)癥，與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比相稱的那些化合物、材料、組合物和/或劑型。

如本文所用的短語"藥學(xué)上可接受的載體"意指藥學(xué)上可接受的材料、組分或溶媒，例如液體或固體填充劑、稀釋劑、賦形劑、溶劑或包封材料。每種載體在與制劑的其它成分適配和對(duì)患者無害的意義上，必須是"可接受的"?？捎米魉帉W(xué)上可接受的載體的材料的一些例子包括：(1)糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，例如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；(3)纖維素，及其衍生物，例如羧基甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；(4)粉末化黃蓍膠；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石粉；(8)賦形劑，例如可可酯和栓劑蠟；(9)油，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和豆油；(10)二醇，例如丙二醇；(11)多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩沖劑，例如氫氧化鎂和氫氧化鋁；(15)藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩沖溶液；和(21)其它用于藥物制劑中的無毒適配物質(zhì)。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的藥物組合物是無熱原的，即，當(dāng)給予患者時(shí)，并不引起顯著的溫度升高。

術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”指所述化合物的相對(duì)無毒的、無機(jī)和有機(jī)酸加成鹽。這些鹽可在化合物的最終分離和純化期間原位制備，或通過使其游離堿形式的純化的化合物分別與合適的有機(jī)或無機(jī)酸反應(yīng)，并分離如此形成的所述鹽。代表性的鹽包括氫溴酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘酸鹽(naphthylate)、甲磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖醛酸鹽、月桂基磺酸鹽，和氨基酸鹽等。結(jié)晶鹽的制備在以下實(shí)施例中詳細(xì)說明(見，例如，berge等(1977)“藥用鹽”,j.pharm.sci.66:1-19)。

在其它情況下，可用于本發(fā)明的方法的化合物可含有一或多個(gè)酸性官能團(tuán)，因此，能夠與藥學(xué)上可接受的堿形成藥學(xué)上可接受的鹽。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”在這些例子中指化合物的相對(duì)無毒的無機(jī)和有機(jī)堿加成鹽。這些鹽可同樣地在化合物的最終分離和純化期間原位制備，或通過使其游離酸形式的純化的化合物分別與合適的堿，例如藥學(xué)上可接受的金屬陽離子的氫氧化物、碳酸鹽，或碳酸氫鹽，與氨，或與藥學(xué)上可接受的有機(jī)伯胺、仲胺或叔胺反應(yīng)。代表性的堿金屬或堿土金屬鹽包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂，和鋁鹽等。對(duì)形成堿加成鹽有用的代表性有機(jī)胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等(見，例如，berge等，同上)。

可通過多種給藥途徑中的任何一種給予患者藥物組合物(制劑)，所述給藥途徑包括，例如，口服(例如，作為在水性或非-水性溶液或懸浮液中的浸液、片劑、膠囊(包括粉末膠囊和明膠膠囊)、大丸劑(boluses)、粉末劑、顆粒劑、應(yīng)用于舌頭的糊劑)；通過口腔粘膜吸收(如，舌下)；肛門、直腸或陰道(例如，作為陰道栓、霜?jiǎng)┗蚺菽瓌?；胃腸外(包括肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、皮下或鞘內(nèi)，作為例如，無菌溶液或懸浮液)；鼻內(nèi)；腹膜內(nèi)；皮下；透皮(例如作為應(yīng)用于皮膚的貼劑)；和局部(例如，作為應(yīng)用于皮膚的霜?jiǎng)?、軟膏劑或噴霧劑，或作為滴眼劑)。所述化合物也可為吸入而配制。在某些實(shí)施方案中，化合物可簡(jiǎn)單地溶于或懸浮于無菌水中。合適的給藥途徑和適合于所述給藥途徑的組合物的細(xì)節(jié)可例如參見美國(guó)專利號(hào)6,110,973、5,763,493、5,731,000、5,541,231、5,427,798、5,358,970和4,172,896，以及其中引用的專利。

制劑可以便利地以單位劑型存在并可以通過制藥領(lǐng)域中熟知的任何方法制備?？膳c載體材料混合以產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量將取決于要治療的宿主、特定的給藥方式而變化?？膳c載體材料混合以產(chǎn)生單一劑型的活性成分的量將通常是產(chǎn)生治療效果的化合物的量。一般來說，按照百分比計(jì)，該量范圍為從約1%至約99%活性成分，優(yōu)選從約5%至約70%，最優(yōu)選從約10%至約30%。

制備這些制劑或組合物的方法包括使活性化合物，例如本發(fā)明的化合物，與載體和任選的一種或多種輔助成分混合的步驟。一般來說，通過使本發(fā)明的化合物與液體載體，或細(xì)分散的固體載體，或二者均勻和充分地混合，然后如果必要的話，使產(chǎn)物成形來制備制劑。

適合于口腔給藥的本發(fā)明的制劑可以膠囊(包括粉末膠囊和明膠膠囊)、扁囊劑、丸劑、片劑、糖錠劑(使用香料基質(zhì)(flavoredbasis)，通常是蔗糖和阿拉伯膠或黃蓍膠)、凍干制劑、粉劑、顆粒劑、或作為在水性或非水性液體中的溶液劑或懸浮劑，或作為水包油或油包水液體乳劑，或作為酏劑或糖漿劑，或作為軟錠劑(使用惰性基質(zhì)，例如明膠和甘油，或蔗糖和阿拉伯膠)和/或作為漱口劑等，各自含有預(yù)定量的本發(fā)明化合物作為活性成分。組合物或化合物也可作為大丸劑、藥糖劑或糊劑給藥。

為制備口腔給藥的固體劑型(膠囊(包括粉末膠囊和明膠膠囊)、片劑、丸劑、糖衣丸、粉末劑、顆粒劑等)，將活性成分與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體混合，例如檸檬酸鈉或磷酸二鈣、和/或任何以下的載體：(1)填充劑或增量劑，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘合劑，例如，羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯膠；(3)濕潤(rùn)劑，例如甘油；(4)崩解劑，例如瓊脂-瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸鹽，和碳酸鈉；(5)溶液阻滯劑，例如石蠟；(6)吸收促進(jìn)劑，例如季胺化合物；(7)潤(rùn)濕劑，例如，鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯；(8)吸收劑，例如高嶺土和膨潤(rùn)土；(9)潤(rùn)滑劑，例如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉，及其混合物；(10)絡(luò)合劑(complexingagents)，例如，改性和未改性的環(huán)糊精；和(11)著色劑。在膠囊(包括粉末膠囊和明膠膠囊)、片劑和丸劑的情況下，藥物組合物也可包含緩沖劑。也可使用類似類型的固體組合物，使用這樣的賦形劑如乳糖(lactose)或乳糖(milksugars)，以及高分子量聚乙二醇等作為在軟和硬-填充明膠膠囊中的填充劑。

片劑可以通過壓制或模制，任選地用一種或多種輔助成分制得。壓制片劑可以使用粘合劑(例如，明膠或羥丙基甲基纖維素)、潤(rùn)滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如，羥基乙酸淀粉鈉或交聯(lián)羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑制備。模制片劑可以通過在合適的機(jī)器中將經(jīng)惰性液體稀釋劑濕潤(rùn)的粉末化化合物的混合物模壓成形而制得。

藥物組合物的片劑和其它固體劑型，例如糖錠劑、膠囊(包括粉末膠囊和明膠膠囊)、丸劑和顆粒劑，可任選劃痕或用包衣和殼制備，例如腸溶包衣和制藥領(lǐng)域熟知的其它包衣。它們也可使用例如各種比例的羥丙基甲基纖維素(以提供所需的釋放曲線)、其它聚合物基質(zhì)、脂質(zhì)體和/或微球體來配制，以提供緩慢釋放或控制釋放其中的活性成分。它們可以例如，通過細(xì)菌截留濾器而過濾，或通過包括可溶于無菌水的無菌固體組合物形式的滅菌劑，或通過在臨用前包括某些其它無菌可注射的介質(zhì)來滅菌。這些組合物也可任選地含有遮光劑并且可以具有僅釋放活性成分的組分，或優(yōu)先地在胃腸道的某些部分，任選地，以延遲方式釋放?？梢允褂玫陌窠M合物的實(shí)例包括聚合物質(zhì)和蠟?；钚猿煞忠部梢晕⒛倚问酱嬖?，如果合適的話，與一種或多種上述賦形劑一起。

可用于口腔給藥的液體劑型包括藥學(xué)上可接受的乳劑、用于重構(gòu)的凍干制劑、微乳劑、溶液劑、混懸劑、糖漿劑和酏劑。除了活性成分，液體劑型還可含有本領(lǐng)域常用的惰性稀釋劑，例如，水或其它溶劑、環(huán)糊精及其衍生物、增溶劑和乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(特別是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氫呋喃醇、聚乙二醇和脫水山梨醇脂肪酸酯，及其混合物。

除了惰性稀釋劑，本發(fā)明的口服組合物還可包括輔助劑例如濕潤(rùn)劑、潤(rùn)滑劑、乳化劑和助懸劑例如月桂基硫酸鈉和硬脂酸鎂，或甜味劑、矯味劑、著色劑、香料、防腐劑，或抗氧化劑。

除了活性化合物，混懸劑還可含有助懸劑，例如，乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和脫水山梨醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁(aluminummetahydroxide)、膨潤(rùn)土、瓊脂-瓊脂和黃蓍膠，及其混合物。

用于直腸、陰道或尿道給藥的藥物組合物的制劑可以作為栓劑呈現(xiàn)，其可以通過使一種或多種活性化合物與一種或多種合適的非刺激性賦形劑或載體混合來制備，所述賦形劑或載體包括，例如，可可酯、聚乙二醇、栓劑蠟或水楊酸酯(salicylate)，且其于室溫下為固體，但在體溫下為液體，因而將在直腸或陰道腔中融化并釋放活性化合物。

給予口腔的藥物組合物的制劑可以作為漱口劑，或口腔噴霧劑，或口腔軟膏劑呈現(xiàn)。

作為選擇或另外地，組合物可被配制為用于經(jīng)由導(dǎo)管、支架、線(wire)，或其它管腔內(nèi)裝置遞送。經(jīng)由這樣的裝置遞送可以特別用于遞送至膀胱、尿道、輸尿管、直腸或小腸。

適合于陰道給藥的制劑也包括陰道栓、棉塞、霜?jiǎng)⒛z劑、糊劑、泡沫劑或噴霧劑制劑，所述制劑含有本領(lǐng)域已知合適的此類載體。

用于局部或透皮給藥的劑型包括粉末劑、噴霧劑、軟膏劑、糊劑、霜?jiǎng)?、洗劑、凝膠劑、溶液劑、貼劑和吸入劑?；钚曰衔锟梢栽跓o菌條件下與藥學(xué)上可接受的載體，和與可能需要的任何防腐劑、緩沖劑，或拋射劑混合。

除了活性化合物，軟膏劑、糊劑、霜?jiǎng)┖湍z劑還可含有賦形劑，例如動(dòng)物和植物脂肪、油、蠟、石蠟、淀粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨潤(rùn)土、硅酸、滑石粉和氧化鋅，或其混合物。

除了活性化合物，粉末劑和噴霧劑還可含有賦形劑例如乳糖、滑石粉、硅酸、氫氧化鋁、硅酸鈣和聚酰胺粉末，或這些物質(zhì)的混合物。噴霧劑可另外地含有慣用的拋射劑，例如氯氟烴和揮發(fā)性的未取代烴，例如丁烷和丙烷。

本文描述的化合物可供選擇地經(jīng)氣溶膠給予。這通過制備含水氣溶膠、脂質(zhì)體制劑，或含有組合物的固體顆粒實(shí)現(xiàn)?？墒褂靡环N非水性(例如，碳氟化合物拋射劑)混懸劑。聲波噴霧器是優(yōu)選的，因?yàn)樗鼈冏畲笙薅鹊販p少藥物對(duì)剪切力的暴露，后者可導(dǎo)致化合物的降解。

普通地，含水氣溶膠通過將藥物的水性溶液或混懸液與常規(guī)的藥學(xué)上可接受的載體和穩(wěn)定劑一起配制來制備。載體和穩(wěn)定劑隨著特定組合物的需求而變化，但通常包括非離子型表面活性劑(吐溫類,、普流羅尼克、脫水山梨醇酯、卵磷脂、乳浮)、藥學(xué)上可接受的共溶劑例如聚乙二醇、無害蛋白像血清白蛋白、油酸、氨基酸例如甘氨酸、緩沖劑、鹽、糖，或糖醇。氣溶膠一般由等滲溶液制備。

透皮貼劑具有提供控制遞送本發(fā)明的化合物至身體的附加優(yōu)點(diǎn)。這樣的劑型可通過將活性化合物溶解于或分散于適當(dāng)介質(zhì)中而制得。也可使用吸收促進(jìn)劑以增加化合物穿過皮膚的流量。這樣的流通速率可通過或者提供速率控制膜，或者將化合物分散于聚合物基質(zhì)或凝膠中進(jìn)行控制。

也考慮了在本發(fā)明的范圍內(nèi)的眼科制劑，眼膏劑、粉末劑、溶液等。示例性眼科制劑描述于美國(guó)公布號(hào)2005/0080056、2005/0059744、005/0031697和2005/004074和美國(guó)專利號(hào)6,583,124中，其內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。如果需要，液體眼科制劑具有類似于淚液、房水或玻璃體液的性質(zhì)或與這樣的液體相容。優(yōu)選的給藥途徑是局部給藥(例如，局部給藥，例如滴眼劑，或經(jīng)由植入物給藥)。

本文所用短語"胃腸外給藥"和"非腸道給藥"意指非經(jīng)腸的給藥和局部給藥的方式，通常通過注射，并包括，但不限于靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、鞘內(nèi)、囊內(nèi)、眼眶內(nèi)、心內(nèi)、皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)氣管、皮下、角質(zhì)層下、關(guān)節(jié)內(nèi)、囊下、蛛網(wǎng)膜下、脊椎內(nèi)和胸骨內(nèi)注射和輸注。適合于胃腸外給藥的藥物組合物包含與一種或多種藥學(xué)上可接受的無菌等滲水性或非水性溶液、分散液、懸浮液或乳液，或無菌粉末組合的一種或多種活性化合物，所述粉末可以在臨用前重構(gòu)成無菌可注射的溶液或分散液，其可含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑、使制劑與計(jì)劃的接受者的血液等滲的溶質(zhì)，或助懸劑或增稠劑。

如本文所用的短語“系統(tǒng)給藥”、“全身給藥”、“外周給藥”和“周圍給藥”意指給予不直接進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)的配體、藥物，或其它材料，以使它進(jìn)入患者的系統(tǒng)，因而經(jīng)受代謝和其它類似的過程，例如，皮下給予。

可以用于本發(fā)明的藥物組合物中的合適的水性和非水性載體的實(shí)例包括水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)，及其合適的混合物，植物油，例如橄欖油，和可注射的有機(jī)酯，例如油酸乙酯。例如，通過使用包衣材料，例如卵磷脂，通過在分散液的情況下維持需要的粒度，和通過使用表面活性劑，可維持適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性。

這些組合物也可含有輔助劑例如防腐劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑和分散劑。預(yù)防微生物的作用可以通過包含各種抗菌劑和抗真菌劑，例如，對(duì)羥基苯甲酸酯，氯丁醇、苯酚、山梨酸等來確保。在組合物中包含等滲劑，例如糖、氯化鈉等也可是需要的。此外，可注射的藥物形式的延長(zhǎng)吸收可通過包含延長(zhǎng)吸收的試劑例如單硬脂酸鋁和明膠來實(shí)現(xiàn)。

在某些情況下，為延長(zhǎng)藥物的作用，期望減慢來自皮下或肌內(nèi)注射的藥物的吸收。這可通過使用具有水溶性差的結(jié)晶或無定形材料的液體混懸劑實(shí)現(xiàn)。藥物的吸收速率則取決于其溶解速率，這繼而可取決于結(jié)晶粒度和晶型。作為選擇，胃腸外給予藥物形式的延遲吸收可通過使藥物溶解于或懸浮于油性溶媒中實(shí)現(xiàn)。

可注射的貯庫形式通過在生物可降解的聚合物例如聚乙交酯-聚丙交酯中形成本化合物的微囊化基質(zhì)而制得。根據(jù)藥物與聚合物的比例，和所用的特定聚合物的性質(zhì)，可控制藥物釋放的速率。其它生物可降解的聚合物的實(shí)例包括聚(原酸酯)和聚(酐)?？勺⑸涞馁A庫制劑也通過使藥物嵌入與身體組織相容的脂質(zhì)體或微乳液中制備。

藥物的制劑可經(jīng)口服、胃腸外、局部，或直腸給予。當(dāng)然，它們通過適合于各自的給藥途徑的形式給予。例如，它們以片劑或膠囊形式，通過注射、吸入、眼用洗劑、軟膏劑、栓劑、輸注給予；通過洗劑或軟膏劑局部給予；和通過栓劑經(jīng)直腸給予。優(yōu)選口服給藥。

為用于本發(fā)明的方法，活性化合物可原樣給予或作為含有，例如，與藥學(xué)上可接受的載體組合的0.1-99.5%(更優(yōu)選0.5-90%)的活性成分的藥物組合物給予。

也可由可再填充的或生物可降解的裝置提供導(dǎo)入的方法。近年來為控制遞送藥物，包括蛋白質(zhì)的生物藥物，已開發(fā)了各種緩慢釋放聚合物裝置并在體內(nèi)進(jìn)行了測(cè)試。各種生物相容性聚合物(包括水凝膠)，包括生物可降解的和非-降解的聚合物二者，可用于形成在特定的靶位點(diǎn)持續(xù)釋放化合物的植入物。

這些化合物可給予人和其它動(dòng)物，以供經(jīng)任何合適的給藥途徑的療法，所述給藥途徑包括經(jīng)口、鼻，如通過例如噴霧、直腸、陰道內(nèi)、非腸道、腦池內(nèi)，以及局部，如通過粉末劑、軟膏劑或滴劑，包括頰下和舌下。

不管選擇的給藥途徑，化合物(其可以合適的水合形式使用)，和/或本發(fā)明的藥物組合物，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的常規(guī)方法配制為藥學(xué)上可接受的劑型。

藥物組合物中活性成分的實(shí)際劑量水平可以變化，以獲得有效達(dá)到對(duì)特定患者的所需治療反應(yīng)的一定量的活性成分、組合物，和給藥方式，而對(duì)患者沒有毒性。

選擇的劑量水平將取決于多種因素，包括具體化合物的活性或所用化合物，或其酯、鹽或酰胺的組合、給藥途徑、給藥次數(shù)、所用具體化合物的排泄速率、治療持續(xù)時(shí)間、與具體化合物組合使用的其它藥物、化合物和/或物質(zhì)、所治療患者的年齡、性別、體重、狀況、一般健康和先前病史等醫(yī)學(xué)領(lǐng)域熟知的因素。一般來說，本發(fā)明的組合物可以供胃腸外給予的含有約0.1-10%w/v的本文公開化合物(在其它物質(zhì)中)的水性溶液提供。典型的劑量范圍是從約0.01至約50mg/kg體重每天，以1個(gè)單一劑量或2-4個(gè)分劑量給予。每個(gè)分劑量可含有相同的或不同的本發(fā)明的化合物。

具有本領(lǐng)域普通技能的醫(yī)師或獸醫(yī)可容易地確定和開具治療有效量的所需藥物組合物。例如，醫(yī)師或獸醫(yī)可以低于達(dá)到所需治療效果所需要的水平的藥物組合物或化合物的劑量開始并逐漸增加劑量直至達(dá)到所需效果。涉及本治療方法的化合物的“治療有效量”，指化合物在制劑中的量，其當(dāng)作為所需劑量方案的部分給予(哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人)時(shí)，根據(jù)為治療疾病或病癥或?yàn)榛瘖y目的的臨床可接受的標(biāo)準(zhǔn)(例如，以合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比應(yīng)用于任何醫(yī)學(xué)治療)，可減輕癥狀，改善病情，或延緩疾病狀態(tài)的發(fā)作。一般認(rèn)為化合物的有效量將根據(jù)患者的體重、性別，年齡及病史而變化。影響有效量的其它因素可包括，但不限于患者病癥的嚴(yán)重性、所治療的疾病、化合物的穩(wěn)定性，以及如果需要，與本發(fā)明化合物一起給予的另一種類型的治療劑。較大的總劑量可通過多次給予藥物而遞送。確定功效和劑量的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的(isselbacher等(1996)哈里森內(nèi)科學(xué)原理(harrison’sprinciplesofinternalmedicine)第13版,1814-1882，通過引用結(jié)合到本文中)。

一般來說，用于本發(fā)明的組合物和方法的活性化合物的合適日劑量將是有效產(chǎn)生治療效果的最低劑量的化合物的量。這樣的有效劑量通常將取決于上述因素。

如果需要，活性化合物的有效日劑量可作為1、2、3、4、5、6或更多個(gè)亞劑量給予，其在整天以合適間隔，任選地以單位劑型分開給予。在本發(fā)明的某些實(shí)施方案中，活性化合物可以每日給予2或3次。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，活性化合物將每日給予1次。

接受這種治療的患者是有需要的任何動(dòng)物，包括靈長(zhǎng)類動(dòng)物，特別是人，和其它哺乳動(dòng)物例如馬、牛、豬和羊；以及一般家禽和寵物。

在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物可以單獨(dú)使用或與另一種類型的治療劑聯(lián)合使用。如本文所用的，短語“聯(lián)合給藥”指二種或更多種不同的治療化合物的任何給藥形式，以便在先前給予的治療化合物在體內(nèi)仍然有效時(shí)給予第二化合物(例如，兩種化合物在患者中同時(shí)有效，這可包括兩種化合物的協(xié)同作用)。例如，不同的治療化合物可以同一制劑或者以分開的制劑，同時(shí)地或者順序地給予。在某些實(shí)施方案中，不同的治療化合物可彼此在1小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、36小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)或1周內(nèi)給予。因此，接受這樣治療的個(gè)體可得益于不同的治療化合物的聯(lián)合作用。

本發(fā)明包括本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽在本發(fā)明的組合物和方法中的用途。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明考慮的鹽包括，但不限于烷基、二烷基、三烷基或四烷基銨鹽。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明考慮的鹽包括，但不限于l-精氨酸、苯乙芐胺(benenthamine)、芐星、甜菜堿、氫氧化鈣、膽堿、地阿諾、二乙醇胺、二乙胺、2-(二乙基氨基)乙醇、乙醇胺、乙二胺、n-甲基葡糖胺、海巴明(hydrabamine)、1h-咪唑、鋰、l-賴氨酸、鎂、4-(2-羥基乙基)嗎啉、哌嗪、鉀、1-(2-羥基乙基)吡咯烷、鈉、三乙醇胺、氨丁三醇和鋅鹽。在某些實(shí)施方案中，本發(fā)明考慮的鹽包括，但不限于na、ca、k、mg、zn或其它金屬鹽。

藥學(xué)上可接受的酸加成鹽也可作為各種溶劑合物，例如與水、甲醇、乙醇、二甲基甲酰胺等的溶劑合物存在。也可制備這樣的溶劑合物的混合物。這樣的溶劑合物的來源可來自結(jié)晶的溶劑，制劑或結(jié)晶的溶劑固有的，或?qū)τ谒鋈軇橥鈦淼摹?/p>

潤(rùn)濕劑、乳化劑和潤(rùn)滑劑，例如十二烷基硫酸鈉和硬脂酸鎂，以及著色劑、釋放劑、包衣劑、甜味劑、矯味劑和芳香劑、防腐劑和抗氧化劑也可存在于組合物中。

藥學(xué)上可接受的抗氧化劑的實(shí)例包括：(1)水-溶性抗氧化劑，例如抗壞血酸、半胱氨酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、偏亞硫酸氫鈉、亞硫酸鈉等；(2)油-溶性抗氧化劑，例如抗壞血酸棕櫚酸酯、丁羥茴醚(bha)、丁羥甲苯(bht)、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-生育酚等；和(3)金屬-螯合劑，例如檸檬酸、乙二胺四乙酸(edta)、山梨醇、酒石酸、磷酸等。

現(xiàn)在一般描述本發(fā)明，通過參考以下實(shí)施例將更容易理解本發(fā)明，包括所述實(shí)施例僅僅是為了說明本發(fā)明的某些方面和實(shí)施方案的目的，并不打算限制本發(fā)明。

實(shí)施例

材料和方法

x-射線衍射

用panalyticalx'pertprompd衍射計(jì)，使用cu輻射的入射光束(使用optix的長(zhǎng)的、細(xì)焦點(diǎn)源產(chǎn)生)，收集大多數(shù)x-射線粉末衍射圖譜。橢圓分級(jí)多層鏡(ellipticallygradedmultilayermirror)被用來聚焦通過樣品并到達(dá)檢測(cè)器上的cukαx-射線。在分析前，分析硅樣品(nistsrm640d)以驗(yàn)證si111峰的觀察位置與nist-認(rèn)證的位置一致。樣本的樣品被夾在3-μm-厚薄膜之間并以傳輸幾何分析。光束截止、短的防散射延伸，和防散射刀口被用來最大限度地減少空氣產(chǎn)生的背景。對(duì)于入射光束和衍射光束的索勒狹縫(sollerslits)被用來最大限度地減少來自軸向散度的擴(kuò)大。使用定位于240mm的掃描位敏探測(cè)器(x'celerator)，從樣品和數(shù)據(jù)收集器軟件v.2.2b收集衍射圖譜。

一個(gè)xrpd圖譜用panalyticalx'pertprompd衍射計(jì)，使用采用一個(gè)長(zhǎng)的、細(xì)焦點(diǎn)源和鎳過濾器產(chǎn)生的cukα輻射的入射光束收集。衍射計(jì)使用對(duì)稱的bragg-brentano幾何配置。在分析之前，分析硅樣品(nistsrm640d)以驗(yàn)證si111峰的觀察位置與nist-認(rèn)證的位置一致。樣本的樣品被制備為一種中心在硅零背景底物上的薄的環(huán)形層。防散射狹縫(ss)被用來最大限度地減少空氣產(chǎn)生的背景。對(duì)于入射光束和衍射光束的索勒狹縫被用來最大限度地減少來自軸向散度的擴(kuò)大。使用定位于240mm的掃描位敏探測(cè)器(x'celerator)，從樣品和數(shù)據(jù)收集器軟件v.2.2b收集衍射圖譜。

差示掃描量熱法

dsc使用tainstrumentsq2000差示掃描量熱儀進(jìn)行。使用nist-可追蹤的銦金屬進(jìn)行溫度校準(zhǔn)。將樣本放置在一個(gè)用蓋覆蓋的dsc鋁盤中，并準(zhǔn)確記錄重量。將配置為樣本盤的經(jīng)稱重的鋁盤放置在單元格的參考側(cè)。所用的盤為tzero卷邊盤(tzerocrimpedpans)，在熱譜圖上的注釋域中縮寫為“t0c”。將樣本以10℃/min，從-30℃加熱至250℃(在熱譜圖上的方法領(lǐng)域中縮寫為“(-30)-250-10”)。

熱重分析

tg分析使用tainstruments2050熱重分析儀進(jìn)行。溫度校準(zhǔn)使用鎳和alumel?進(jìn)行。將樣本放置在一個(gè)鉑盤中并插入tg爐中。在氮?dú)獯迪聪录訜釥t。將樣本以10℃/min，從25℃加熱至300℃(在熱譜圖上的方法領(lǐng)域中縮寫為“00-300-10”)。

實(shí)施例1：化合物cb-839的合成方案

注釋：化合物670備選地被稱為cb-839

向3升反應(yīng)容器中裝入2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酸(93.34g,0.43mol,1.0equiv)、6-氯噠嗪-3-胺(55.51g,0.43mol,1.0equiv.)、乙酸乙酯(1.42l,15vol.相對(duì)于酸)、n,n-二異丙基乙胺(60.92g,0.47mol,1.1equiv.)，然后配備攪拌棒和溫度探針。將反應(yīng)容器的內(nèi)容物置于氬氣氛(g)下并攪拌15分鐘，此時(shí)混合物是混濁的，在反應(yīng)容器底部有固體。經(jīng)由壓力均衡加料漏斗，在40分鐘的過程中，伴有20.3℃增加至28.1℃的溫度下，向攪拌的混合物中加入丙基膦酸酐(t3p；300ml在乙酸乙酯中的50%溶液,0.47mmol,1.1equiv.)。在加入的過程中，混合物的顏色變紅/橙色且渾濁消除。通過tlc(6:4己烷/乙酸乙酯)監(jiān)測(cè)反應(yīng)，通常運(yùn)行時(shí)間為4-6小時(shí)。當(dāng)認(rèn)為反應(yīng)完成時(shí)，加入水(1.5l)并將混合物攪拌另外15分鐘。將該混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗并分層。有機(jī)層用水(1.5l)洗滌，分離各層且有機(jī)層用10%氯化鈉溶液(500ml)洗滌。分離各層，將有機(jī)層轉(zhuǎn)移至圓底燒瓶中并在減壓下除去揮發(fā)物，得到灰白色、黃色固體。向燒瓶中加入己烷(500ml)并劇烈攪拌內(nèi)容物15分鐘，然后過濾。用己烷(500ml)再次洗滌固體并風(fēng)干至恒定重量，提供n-(6-氯噠嗪-3-基)-2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺(112824)：得量121.1g,(85%)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ11.63(s,1h),8.38(d,j=9.4hz,1h),7.88(d,j=9.4hz,1h),7.52–7.27(m,4h),3.90(s,2h)。

向5升反應(yīng)容器中裝入4-氰基丁基溴化鋅(2l,0.5m在thf中,1000mmol,3.0equiv，相對(duì)于112824)，接著加入二氯(1,3-雙(二苯基膦基)丙烷)鎳(27.10g,0.05mol,0.15equiv.)、2-甲基四氫呋喃(400ml,3.6vol.相對(duì)于112824)，然后配備攪拌棒和溫度探針。將反應(yīng)容器的內(nèi)容物置于氬氣氛下并經(jīng)由壓力均衡加料漏斗，在45分鐘的過程中，伴有24.8℃增加至32.9℃的溫度下，加入112824的2-甲基四氫呋喃溶液(110.56g,0.33mol,1.0equiv.,900ml)。(在t=15分鐘時(shí)插入25分鐘中止，加入400ml以允許混合物從32.6℃冷卻至28.8℃)。通過tlc(1:1己烷/乙酸乙酯)監(jiān)測(cè)反應(yīng)，通常運(yùn)行時(shí)間為4-6小時(shí)。當(dāng)認(rèn)為反應(yīng)完成時(shí)，加入0.5mhcl(1.5l)并攪拌1小時(shí)，此時(shí)可見斷相，低相變得透明并呈藍(lán)色。將混合物轉(zhuǎn)移至分液漏斗并分層。有機(jī)層用含水的、飽和乙二胺四乙酸溶液(1l)洗滌2x、水(1l)洗滌1x、10%氯化鈉溶液(500ml)洗滌1x，分離有機(jī)層，轉(zhuǎn)移至3l圓底燒瓶中并在減壓下除去揮發(fā)物，得到稠厚的深紅色油。用乙酸乙酯(300ml)稀釋油狀物并在減壓下除去揮發(fā)物(重復(fù)兩次添加)。然后使油與己烷(300ml)混合并在減壓下除去揮發(fā)物，得到赭石色蠟樣固體。然后將該固體與己烷(500ml)一起攪拌、過濾并風(fēng)干至恒定重量，提供n-(6-(4-氰基丁基)噠嗪-3-基)-2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺(112825)：得量105.7g(84%)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ11.41(s,1h),8.28(d,j=9.2hz,1h),7.65(d,j=9.2hz,1h),7.52–7.27(m,4h),3.89(s,2h),2.92(t,j=7.5hz,2h),2.56(t,j=7.0hz,2h),1.80(m,2h),1.61(m,2h)。

使112825(92.3g,0.24mol,1.0equiv)溶于在3000ml的3頸圓底燒瓶中的三氟甲苯(923ml,10.0vol，相對(duì)于112825)中。向反應(yīng)溶液中加入氨基硫脲(26.7g,0.29mol,1.2equiv.)。將三氟乙酸(369ml,4vol.)邊攪拌邊緩慢加入到反應(yīng)容器中。在具有頂部開放的回流冷凝器的65℃浴中加熱反應(yīng)漿液。5小時(shí)后，反應(yīng)通常完成(通過lc/ms確定)。將反應(yīng)溶液轉(zhuǎn)移至4000ml錐形燒瓶中并于0℃浴中冷卻。用2.5n氫氧化鈉(aq)(1800ml,~20vol.)將ph調(diào)節(jié)至ph~8。當(dāng)ph變成中性時(shí)出現(xiàn)沉淀。在復(fù)查ph之前，攪拌漿液30分鐘。如果必要，用更多的2.5n氫氧化鈉(aq)或1mhcl再次調(diào)節(jié)ph至ph=6.5-8.5的范圍內(nèi)。通過büchner漏斗過濾沉淀物并用乙酸乙酯(2x185ml,2vol)淋洗兩次。在高真空下干燥過濾材料至恒定重量，提供n-(6-(4-(5-氨基-1,3,4-噻二唑-2-基)丁基)噠嗪-3-基)-2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰胺(110826)；得量94.2g(87%)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ11.33(s,1h),8.21(d,j=9.2hz,1h),7.58(d,j=9.2hz,1h),7.51-7.26(m,4h),6.99(s,2h),3.88(s,2h),2.87(m,4h),1.71(m,4h)。

向在250ml的3頸圓底燒瓶中的110826(5.5g,12.3mmol,1.0equiv.)的n,n-二甲基乙酰胺(44ml,8.0vol.相對(duì)于110826)溶液中加入2-吡啶基乙酸(2.56g,14.8mmol,1.2equiv.)。將丙基膦酸酐(在乙酸乙酯中的11.0g50%溶液，17.3mmol,1.41equiv.)加入25ml加料漏斗中并以5ml/min的速率滴加入反應(yīng)溶液中。在加入期間，內(nèi)部溫度從20.1℃增加至26.1℃。4小時(shí)后，反應(yīng)通常完成(通過lc/ms確定)。然后使反應(yīng)溶液于0℃浴中冷卻，用甲乙酮(50ml)稀釋。向攪拌的反應(yīng)溶液中加入h2o(50ml)。用2.5n氫氧化鈉(aq)(28ml)將ph調(diào)節(jié)至ph~6。黃色沉淀經(jīng)抽吸過濾收集并用異丙醇和水(1:1,50ml)淋洗。然后將風(fēng)干的固體轉(zhuǎn)移至100ml圓底燒瓶中并在異丙醇和水(9:1,50ml)中制漿。將漿液加熱至65.1℃的內(nèi)部溫度8小時(shí)，然后經(jīng)16小時(shí)冷卻至室溫。經(jīng)抽吸過濾收集灰白色沉淀物并用1x異丙醇(10ml)淋洗。在高真空下干燥滯留物至恒定重量，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺(cb-839)；得量5.27g(76%)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.67(s,1h),11.32(s,1h),8.53-8.49(m,1h),8.22-8.19(d,j=9.12hz,1h),7.78-7.76(t,1h),7.58-7.26(m,7h),4.01(s,2h),3.87(s,2h),3.01(bs,2h),2.90(bs,2h),1.73(bs,4h)。

cb-839結(jié)晶游離堿，晶型b的xrd圖譜示于圖6中。cb-839游離堿，晶型b具有2θ值3.64；7.32；7.92；8.53；9.30；9.38；11.02；11.98；14.70；15.54；15.87；16.50；16.59；18.06；18.39；19.10；20.06；20.12；20.61；21.37；21.89；22.41；22.74；23.72；24.10；24.65；25.14；25.78；26.49；27.32；27.55；28.26；29.88；31.20；31.80；31.52；32.80；34.30；35.20；36.41；38.53；40.08；40.94；和43.86。

cb-839結(jié)晶游離堿，晶型a如下制備：

使cb-839游離堿，晶型b(2.02g,3.53mmol)懸浮于配備有磁力攪拌棒、半球形加熱罩和內(nèi)部溫度探針的150ml3頸圓底燒瓶中的異丙醇:甲苯:水(36.8ml:24.6ml:3.2ml,32體積)的混合物中。經(jīng)90分鐘將淡黃色漿液加熱至70℃的內(nèi)部溫度。移去加熱罩以使黃色溶液冷卻至室溫。將反應(yīng)漿液攪拌18小時(shí)，然后通過抽吸過濾收集。于70℃烘箱中真空干燥濾餅至恒定重量，提供結(jié)晶2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺(cb-839)，游離堿，晶型a；得量1.60g(79%)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.65(s,1h),11.29(s,1h),8.50-8.48(m,1h),8.20-8.17(d,j=9.11hz,1h),7.77-7.75(t,1h),7.57-7.54(m,1h),7.47-7.40(m,1h),7.40-7.35(m,3h),7.26-7.24(m,2h),4.00(s,2h),3.85(s,2h),3.01(bs,2h),2.89(bs,2h),1.73(bs,4h)。

cb-839結(jié)晶游離堿，晶型a的xrd圖譜示于圖7。cb-839游離堿，晶型a具有2θ值5.47；6.01；7.57；9.20；9.67；10.15；11.00；12.93；14.14；15.20；15.81；16.56；17.74；18.50；18.69；19.40；19.94；20.54；20.59；21.13；22.00；22.60；23.33；23.98；24.37；24.87；25.52；26.27；26.62；27.79；29.59；30.64；33.30；35.01；37.93；和38.72。

dsc數(shù)據(jù)顯示結(jié)晶，無水cb-839，晶型a于約189℃熔化。

實(shí)施例2：化合物cb-839的鹽的制備

2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺鹽酸鹽，晶型i(cb-839hcl，晶型i)。在配備有內(nèi)部溫度探針、50ml加料漏斗和磁力攪拌器的250ml3-頸圓底燒瓶中，將化合物670，或cb-839游離堿(4.57g,8.00mmol)在無水乙醇(69ml)中制漿。設(shè)置半球形織物罩以加熱漿液至70℃的內(nèi)部溫度并于此所需的溫度下保持90分鐘。在一個(gè)關(guān)閉的50ml圓底燒瓶中，將無水乙醇(23ml)與乙酰氯(0.682ml,9.59mmol)一起攪拌5分鐘，然后加入加料漏斗中。以15ml/min的速率加入乙醇化hcl。反應(yīng)物的內(nèi)部溫度在加入期間下降至60.3℃。將漿液加入到溶液中并澄清5分鐘，此時(shí)可見沉淀物。生成的漿液在5分鐘內(nèi)用濕冰浴冷卻至15℃。移開浴并將漿液于室溫下攪拌4小時(shí)。通過抽吸過濾收集灰白色固體，并將滯留物于75℃真空烘箱中干燥過夜，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺鹽酸鹽晶型i(cb-839hcl,3.98g)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.80(s,1h),11.37(s,1h),8.73(d,j=5.31hz,1h),8.23(m,2h),7.75(d,j=7.93hz,1h),7.68(t,j=6.32hz,1h),7.62(d,j=9.19hz,1h),7.47(t,j=8.09hz,1h),7.36(m,2h),7.24(d,j=7.90hz,1h),4.25(s,2h),3.86(s,2h),3.03(s,2h),2.89(s,2h),1.73(s,4h)。

xrd圖譜示于圖1。cb-839hcl，晶型i具有2θ值8.62；9.53；11.63；15.89；16.70；17.26；18.18；19.10；19.80；21.09；22.16；22.69；23.46；24.63；25.22；25.49；25.91；26.72；28.45；29.38；31.39；31.82；32.76；33.61；33.74；34.27；34.91；35.53；39.36；和39.73。

2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺鹽酸鹽晶型ii(cb-839hcl，晶型ii)。在配備有內(nèi)部溫度探針、1000ml加料漏斗和機(jī)械攪拌器的5000ml3-頸圓底燒瓶中，將化合物670，或cb-839游離堿(129.5g,227mmol)在無水乙醇(2590ml)中制漿。設(shè)置半球形織物罩以加熱漿液至60℃的內(nèi)部溫度并于此所需的溫度下保持60分鐘。在一個(gè)關(guān)閉的1000ml圓底燒瓶中，將無水乙醇(648ml)與乙酰氯(23.1g,295mmol)一起攪拌10分鐘，然后加入加料漏斗中。以34ml/min的速率加入乙醇化hcl。加料漏斗用無水乙醇(130ml)淋洗。使生成的漿液經(jīng)15小時(shí)冷卻至19℃。通過抽吸過濾收集灰白色固體，并將滯留物于75℃真空烘箱中干燥過夜，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺鹽酸鹽晶型ii(cb-839hcl,117.2g)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.76(s,1h),11.32(s,1h),8.67(d,j=4.56hz,1h),8.21(d,j=9.16hz,1h),8.12(t,j=7.33hz,1h),7.67(d,j=7.78hz,1h),7.59(d,j=9.19hz,2h),7.44(t,j=7.84hz,1h),7.35(m,2h),7.24(d,j=7.90hz,1h),4.18(s,2h),3.85(s,2h),3.00(s,2h),2.89(s,2h),1.73(s,4h)。

xrd圖譜示于圖2。cb-839hcl，晶型ii具有2θ值3.10；6.26；8.34；9.04；9.96；11.02；12.58；13.47；14.80；15.61；15.82；16.15；17.58；18.20；18.83；19.81；20.00；21.10；22.02；22.58；23.42；24.10；24.45；25.25；25.74；26.36；27.22；27.83；28.70；29.84；30.46；31.81；32.38；33.23；35.68；36.57；37.40；39.36；和41.79。

2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺鹽酸鹽晶型i(cb-839hcl，晶型i)。

在配備有內(nèi)部溫度探針和磁力攪拌器的250ml3-頸圓底燒瓶中，將cb-839hcl晶型ii(2.35g,3.89mmol)在無水乙醇(71ml)中制漿。設(shè)置半球形織物罩以加熱漿液至65℃的內(nèi)部溫度并于此所需的溫度下保持60分鐘。用2%cb-839hcl晶型i晶體(47mg)種晶漿液并于該溫度保持7.5小時(shí)。然后經(jīng)18小時(shí)使?jié){液冷卻至室溫，通過抽吸過濾收集灰白色固體并將滯留物于50℃真空烘箱中干燥，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺鹽酸鹽晶型i(cb-839hcl,2.13g)。

2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺二鹽酸鹽(cb-8392xhcl)。在配備有內(nèi)部溫度探針、25ml加料漏斗和機(jī)械攪拌棒的100ml3-頸圓底燒瓶中，將化合物670，或cb-839游離堿(1.05g,1.84mmol)在無水乙醇(21ml)中制漿。設(shè)置半球形織物罩以加熱漿液至65℃的內(nèi)部溫度并于此所需的溫度下保持60分鐘。在一個(gè)關(guān)閉的25ml圓底燒瓶中，將無水乙醇(5.3ml)與乙酰氯(640μl,9.19mmol)一起攪拌5分鐘，然后加入加料漏斗中。經(jīng)2分鐘加入乙醇化hcl，使反應(yīng)混合物溶于黃色溶液，此時(shí)移去加熱罩。于38℃的內(nèi)部溫度經(jīng)20分鐘后觀察到沉淀。將反應(yīng)物經(jīng)18小時(shí)進(jìn)一步冷卻至19℃。通過抽吸過濾收集淺黃色固體，并將滯留物于60℃真空烘箱中干燥過夜，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺二鹽酸鹽(cb-8392xhcl,754mg)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ13.05(s,1h),11.55(s,1h),8.87(d,j=4.74hz,1h),8.47(m,1h),8.38(d,j=9.22hz,1h),7.96(d,j=7.99hz,1h),7.90(t,j=6.72hz,2h),7.78(d,j=9.22hz,1h),7.49(t,j=8.09hz,1h),7.39(m,2h),7.28(d,j=8.50hz,1h),4.42(s,2h),3.90(s,2h),2.89(m,4h),1.77(s,4h)。

cb-8392xhcl鹽是非晶形的。

2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺4-甲基苯磺酸鹽(cb-839tsoh)。

在配備有內(nèi)部溫度探針、50ml加料漏斗和磁力攪拌器的500ml3-頸圓底燒瓶中，將化合物670，或cb-839游離堿(8.20g,14.3mmol)在無水乙醇(205ml)中制漿。設(shè)置半球形織物罩以加熱漿液至65℃的內(nèi)部溫度并于此所需的溫度下保持120分鐘。在一個(gè)關(guān)閉的50ml圓底燒瓶中，將無水乙醇(41ml)與對(duì)-甲苯磺酸(3.27g,17.2mmol)一起攪拌10分鐘，然后加入加料漏斗中。以14ml/min的速率加入乙醇化對(duì)-甲苯磺酸。漿液短暫地轉(zhuǎn)變成溶液，經(jīng)4小時(shí)使之冷卻至19℃。通過抽吸過濾收集白色固體，并將滯留物于60℃真空烘箱中干燥過夜，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺4-甲基苯磺酸鹽(cb-839tsoh,4.44g)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.77(s,1h),11.32(s,1h),8.70(t,j=4.65hz,1h),8.22(d,j=9.16hz,1h),8.15(t,j=7.40hz,1h),7.65(d,j=18.70hz,1h),7.61(m,2h),7.45(m,3h),7.36(m,2h),7.25(d,j=8.38hz,1h),7.10(d,j=7.87hz,2h),4.18(s,2h),3.85(s,2h),3.02(s,2h),2.89(s,2h),2.28(s,3h),1.74(s,4h)。

cb-839tsoh的xrd圖譜示于圖3。cb-839tsoh具有2θ值5.66；6.84；7.97；11.34；11.55；12.04；13.78；14.42；15.44；15.99；16.58；17.09；18.10；18.66；19.69；20.23；21.11；22.03；22.16；22.50；22.84；23.48；24.05；25.59；25.89；27.80；29.35；30.46；31.10；33.82；35.65；36.67；38.93；39.99；42.65；和43.68。

2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺硝酸鹽(cb-839hno3)。在配備有內(nèi)部溫度探針和機(jī)械攪拌棒的25ml3-頸圓底燒瓶中，將化合物570，或cb-839游離堿(498mg,0.87mmol)在四氫呋喃(2ml)和乙腈(3.5ml)中制漿。設(shè)置半球形織物罩以加熱漿液至60℃的內(nèi)部溫度并于此所需的溫度下保持60分鐘。在一小瓶中，將乙腈(200μl)與硝酸(100μl,1.13mmol)一起攪拌5分鐘，然后加入漿液中。使生成的溶液經(jīng)6小時(shí)冷卻至19℃。通過抽吸過濾收集褐色固體，并將滯留物于60℃真空烘箱中干燥過夜，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺硝酸鹽(cb-839hno3,150mg)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.85(s,1h),11.36(s,1h),8.76(d,j=5.16hz,1h),8.27(m,2h),7.78(d,j=7.93hz,1h),7.71(m,1h),7.63(d,j=9.37hz,1h),7.49(t,j=7.917hz,1h),7.39(m,2h),7.28(d,j=8.17hz,1h),4.24(s,2h),3.88(s,2h),3.04(s,2h),2.92(s,2h),1.76(s,4h)。

2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺甲磺酸鹽(cb-839msa)。在配備有內(nèi)部溫度探針和機(jī)械攪拌棒的50ml3-頸圓底燒瓶中，將化合物670，或cb-839游離堿(1.55g,2.71mmol)在無水乙醇(23ml)中制漿。設(shè)置半球形織物罩以加熱漿液至65℃的內(nèi)部溫度并于此所需的溫度下保持30分鐘。然后將甲烷磺酸(2.71mmol,180μl)加入到反應(yīng)漿液中。漿液短暫地轉(zhuǎn)變成溶液，經(jīng)5小時(shí)使之冷卻至19℃。通過抽吸過濾收集灰白色固體，并將滯留物在60℃真空烘箱中干燥過夜，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺甲磺酸鹽(cb-839msa,960mg)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.87(s,1h),11.38(s,1h),8.79(t,j=5.40hz,1h),8.29(m,2h),7.82(d,j=7.68hz,1h),7.76(m,1h),7.64(d,j=9.10hz,1h),7.49(t,j=8.08hz,1h),7.38(m,2h),7.28(d,j=8.47hz,1h),4.27(s,2h),3.88(s,2h),3.05(s,2h),2.92(s,2h),2.35(s,3h),1.76(s,4h)。

cb-839msa的xrd圖譜示于圖4中。cb-839msa具有2θ值5.86；7.00；8.00；9.37；10.04；11.13；11.76；13.20；14.82；14.42；15.30；15.98；16.50；17.26；17.98；18.88；19.55；19.96；20.25；21.08；21.53；22.07；22.17；22.50；23.09；23.12；23.80；24.05；24.66；25.22；25.73；26.02；26.66；27.13；27.58；29.16；29.53；30.35；31.07；31.87；32.98；33.87；34.34；36.76；37.48；39.35；40.05；40.10；和41.77。

2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺氫溴酸鹽(cb-839hbr)。

在配備有內(nèi)部溫度探針和磁力攪拌器的50ml3-頸圓底燒瓶中，將化合物670，或cb-839游離堿(1.07g,1.87mmol)在無水乙醇(27ml)中制漿。設(shè)置半球形織物罩以加熱漿液至65℃的內(nèi)部溫度并于此所需的溫度下保持60分鐘。在一個(gè)20ml的閃爍瓶(scintillationvial)中，將無水乙醇(5ml)與乙酰溴(0.166ml,2.25mmol)一起攪拌5分鐘，然后經(jīng)2分鐘加入到反應(yīng)漿液中。漿液變稀且顏色稍稍變深。使?jié){液冷卻至室溫并攪拌6.5小時(shí)。通過抽吸過濾收集灰白色固體，并將滯留物在50℃真空烘箱中干燥過夜，提供2-(吡啶-2-基)-n-(5-(4-(6-(2-(3-(三氟甲氧基)苯基)乙酰氨基)噠嗪-3-基)丁基)-1,3,4-噻二唑-2-基)乙酰胺氫溴酸鹽晶型i(cb-839hbr,1.02g)。¹hnmr(300mhz,dmso-d6)δ12.80(s,1h),11.33(s,1h),8.73(d,j=4.47hz,1h),8.21(d,j=8.76hz,2h),7.75(d,j=7.86hz,1h),7.68(m,1h),7.60(d,j=8.89hz,1h),7.45(t,j=7.42hz,1h),7.35(m,2h),7.24(d,j=7.87hz,1h),4.21(s,2h),3.84(s,2h),3.00(s,2h),2.88(s,2h),1.72(s,4h)。

xrd圖譜示于圖5。cb-839hbr具有2θ值5.08；6.58；10.20；10.83；12.52；12.89；15.19；15.98；16.32；17.28；18.60；19.36；19.96；20.54；21.13；21.76；22.34；22.92；24.44；25.77；25.84；26.43；26.49；和30.27。

實(shí)施例3：化合物測(cè)定

在體外生物化學(xué)測(cè)定和細(xì)胞增殖測(cè)定二者中測(cè)定化合物670。實(shí)驗(yàn)方案和測(cè)定的結(jié)果見于美國(guó)專利號(hào)8,604,016中，或者見于美國(guó)專利申請(qǐng)公布號(hào)2014/0050699a1中。

通過引用結(jié)合

本文提及的所有的出版物和專利通過引用以其全文結(jié)合到本文中，如同各個(gè)出版物和專利特別地和單獨(dú)地指明通過引用結(jié)合到本文中一樣。在有沖突的情況下，以本申請(qǐng)，包括本文的任何定義為準(zhǔn)。

等同物

雖然已經(jīng)討論了本發(fā)明的特定實(shí)施方案，上述說明書僅僅舉例說明而不是限制性的。本發(fā)明的許多變化在本領(lǐng)域技術(shù)人員審閱本說明書和所附權(quán)利要求書后，將變得顯而易見。本發(fā)明的全部范圍應(yīng)通過參考權(quán)利要求書，連同它們的等同物的全部范圍，以及說明書，連同此類變化來確定。