本發(fā)明的目的為式(i)的化合物，其在不再以具有抗微生物性質(zhì)的劑量使用，其作為試劑用于使與它們共同施用的抗微生物活性成分增效的用途。特別地，“增效劑+抗微生物劑”組合的目的為預(yù)防和/或治療人或動(dòng)物中的細(xì)菌感染和真菌感染。

本發(fā)明涉及一種用于使抗微生物劑增效的方法，其中將一種或多種式(i)的化合物與所述抗微生物劑共同施用。在這種方法中，以一定劑量使用式(i)的化合物，其單獨(dú)地在此劑量是無(wú)活性的。

背景技術(shù)：

本發(fā)明的目的

背景

本發(fā)明涉及提供與在抗微生物劑的商業(yè)和醫(yī)療使用期間其活性降低或喪失有關(guān)的問(wèn)題的解決方案。因此，本發(fā)明為適用于目前的抗微生物劑的解決方案，并且其將被應(yīng)用于未來(lái)的抗微生物劑。

隨著在1940年代抗微生物劑的出現(xiàn)，很快發(fā)現(xiàn)微生物(細(xì)菌和真菌)有能力適應(yīng)所使用的抗微生物劑。其功效隨著時(shí)間并在其整個(gè)使用中下降。存在2種對(duì)抗耐受的策略，一方面是發(fā)現(xiàn)新的抗微生物分子，另一方面是與選擇性阻斷耐受機(jī)制的分子組合。

大約二十年來(lái)，已經(jīng)觀察到進(jìn)入市場(chǎng)的新抗微生物分子數(shù)量的減少，這導(dǎo)致了耐受性微生物全球流行的大幅增加。因此，對(duì)于具有較難治療的微生物感染的患者，存在復(fù)雜的情況。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

描述

本發(fā)明描述了式(i)的化合物使抗微生物劑增效的用途。出人意料地，這些化合物已經(jīng)證明，其能夠在低劑量(從0.01至100mg/l)使抗微生物劑的作用增效，所述劑量遠(yuǎn)低于它們單獨(dú)可以具有抗微生物性質(zhì)的那些劑量。因此，由于增效，與式(i)的化合物共同施用的抗微生物劑具有比通常觀察到的活性更高的活性。

本發(fā)明旨在使可用于人或動(dòng)物中的“抗微生物劑”增效，而不是所有具有“抗微生物性質(zhì)”的化合物，其反過(guò)來(lái)往往不能向人或動(dòng)物施用，因?yàn)槎拘蕴?，或抗菌活性閾值太高而需要與健康不相容的劑量。

重要的是想到，從絕對(duì)上來(lái)講任何分子都具有抗微生物性質(zhì)。因此，需要用抑制細(xì)菌的最小濃度評(píng)估分子的抗微生物性質(zhì)。

本發(fā)明基于令人驚訝的發(fā)現(xiàn)，即，在非常高的劑量(與藥物在該目的使用不相容的水平)具有抗微生物性質(zhì)，且具有高于5000mg/l，有利地高于10000mg/l的最小抑制濃度(cmi)的化合物，在低劑量(0.01至100mg/l)具有增效作用。在這些劑量，在人或動(dòng)物中使用化合物(i)變得是可以考慮的。

仍然令人驚訝地，已經(jīng)觀察到，在低劑量的化合物(i)中增效作用更好，并且當(dāng)離開(kāi)化合物(i)單獨(dú)地具有抗微生物性質(zhì)的劑量時(shí)，作用(對(duì)于在非常高的劑量具有抗微生物性質(zhì)的化合物)增加。

例如，已經(jīng)出人意料地注意到，在大約1g/l的濃度(cmi高于10000mg/l，即高于1％，取決于菌株)具有抗微生物性質(zhì)的乙酸肉桂酯或苯甲酸芐酯，在接近于cmi的這些濃度(1至3倍稀釋)對(duì)抗生素具有增效作用。

當(dāng)其濃度降低至低于cmi時(shí)，苯甲酸芐酯不再使抗生素增效(參見(jiàn)實(shí)施例1-10)。然后，非常令人驚訝地，已經(jīng)注意到，通過(guò)進(jìn)一步顯著地降低苯甲酸芐酯的濃度，比cmi低10至50倍，苯甲酸芐酯再次在非常大量的菌株中對(duì)非常大量的抗生素具有增效作用，這一次是在與醫(yī)藥用途相容的劑量。

非常有利的是，以遠(yuǎn)低于其功效閾值的劑量使用的化合物(i)是最經(jīng)常用在人或動(dòng)物中而沒(méi)有毒性要求，因?yàn)椴淮嬖诙拘曰蛱幱诳山邮艿亩拘运?。如果期望以具有抗微生物性質(zhì)的高劑量使用它們，或甚至以接近于其cmi的劑量(在此劑量，它們可以使抗微生物劑增效)使用它們，則將不是這樣。

仍然令人驚訝地，用根據(jù)本發(fā)明的化合物觀察到的增效作用不是特異性的針對(duì)特定的耐受機(jī)制，而是在多種菌株上觀察到，不管它們是否產(chǎn)生一種或多種不同的耐受機(jī)制。

現(xiàn)有技術(shù)

現(xiàn)有技術(shù)在許多出版物中描述了一些化合物(i)的抗微生物性質(zhì)。這些出版物沒(méi)有預(yù)期化合物(i)在遠(yuǎn)低于其功效閾值的劑量的增效作用。

對(duì)于化合物(i)的現(xiàn)有技術(shù)是大量的，因?yàn)樗鼈儗儆谠谠S多領(lǐng)域中被很好地研究的化學(xué)物質(zhì)類(lèi)別。本發(fā)明范圍內(nèi)的化合物(i)具有以下特征，所述特征能夠?qū)⑺鼈兣c現(xiàn)有技術(shù)相分離，并且所述特征能夠考慮它們作為施用至人和動(dòng)物的抗微生物劑的增效劑的用途：

a/它們以低劑量(0.01至100mg/l)使用，所述劑量遠(yuǎn)低于它們的抗微生物性質(zhì)閾值，它們的增效作用不是特異性的針對(duì)特定作用或耐受機(jī)制。

b/它們已經(jīng)通過(guò)適合于它們的物理化學(xué)特征的篩選方法來(lái)驗(yàn)證。

c/在它們?cè)鲂У膭┝浚鼈兙哂性试S在人或動(dòng)物中安全使用的作用/毒性比例。

d/它們組成一個(gè)或多個(gè)分離的化學(xué)實(shí)體，其特征在于可以持續(xù)不斷地再生產(chǎn)，因?yàn)橛糜讷@得它們的方法(合成、半合成、提取)允許這點(diǎn)。

e/它們沒(méi)有特別的毒性，所述毒性即使在低劑量時(shí)也將阻止它們的使用(基因毒性、心臟毒性...)。

a/關(guān)于現(xiàn)有技術(shù)中測(cè)量的活性水平

在現(xiàn)有技術(shù)中，用于觀察抗微生物活性的濃度與在人或動(dòng)物中(特別是用于全身應(yīng)用)的未來(lái)使用是不相容的。在大多數(shù)科學(xué)出版物中，考慮了醫(yī)藥用途，而測(cè)量的有效濃度(大約幾mg/ml)與這種用途是不相容的。測(cè)量的抗微生物作用經(jīng)常被測(cè)量為精油或其活性成分的含量，大約幾mg/ml。但是，這樣的濃度不適合在人類(lèi)或動(dòng)物中的未來(lái)使用(特別是全身地)。1mg/ml對(duì)應(yīng)于1g/l或1g/kg或甚至0.1％。如果cmi為1mg/ml，取決于藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，應(yīng)當(dāng)施用至少1g/kg/d體重。例如，對(duì)于牛，有效劑量應(yīng)當(dāng)為至少500g/d，而對(duì)于人，有效劑量應(yīng)當(dāng)為至少60g/d(這對(duì)應(yīng)于最小劑量，因?yàn)檫@里假設(shè)產(chǎn)品被完全吸收并分布在生物體中)。這些過(guò)高的劑量不能被考慮用于在治療中的安全使用。

b/關(guān)于現(xiàn)有技術(shù)中描述的方法的不適當(dāng)性

根據(jù)不同的方法(單獨(dú)的活性成分、天然產(chǎn)物...)工作的作者對(duì)包含化合物(i)的化學(xué)物質(zhì)家族通常使用標(biāo)準(zhǔn)的抗菌作用測(cè)量方法，而沒(méi)有使它們適應(yīng)于萜類(lèi)和苯丙素類(lèi)的疏水揮發(fā)性。

例如，wo99/66796(wisconsinalumniresearchfoundation)描述了一種使微生物細(xì)胞對(duì)抗菌化合物敏感的方法，其包括使抗菌化合物與倍半萜烯接觸的步驟，以改善抗菌化合物的作用。

在本申請(qǐng)中，已經(jīng)用圓盤(pán)擴(kuò)散法確定了cmi，所述方法對(duì)于化合物(i)和相關(guān)家族的揮發(fā)性和疏水性是不合適的。該方法在于將用已知量的待測(cè)試化合物浸透的紙盤(pán)放置在接種有待研究的細(xì)菌的瓊脂介質(zhì)上。化合物的濃度梯度出現(xiàn)在每個(gè)盤(pán)周?chē)沫傊橘|(zhì)上；18小時(shí)后，測(cè)量抑制暈直徑。然而，對(duì)于干擾瓊脂介質(zhì)中濃度梯度的形成的疏水化合物(由于在親水表面上的非常不同的表面張力和接觸角)，該方法是不可靠的。在一些區(qū)域，待測(cè)化合物的濃度遠(yuǎn)高于理論濃度。因此，測(cè)試不能是定量的，而它們可以是定性的。進(jìn)一步地，在乙醇中注意到待測(cè)疏水性化合物的稀釋?zhuān)桓淖兘Y(jié)果，而乙醇為一種抗菌的和揮發(fā)性的化合物。

應(yīng)當(dāng)注意，本申請(qǐng)教導(dǎo)了用不同于倍半萜烯的萜烯不會(huì)獲得任何作用。

c/關(guān)于現(xiàn)有技術(shù)的化合物的毒性

關(guān)于天然化合物和組合物，天然來(lái)源和不存在毒性之間有一些混亂。精油(及其衍生物)通常被描述為低毒性的，這在食品應(yīng)用或香料中通常是正確的，但在治療施用的范圍內(nèi)是錯(cuò)誤的。

對(duì)于分離的化合物，也存在混亂，并且涉及化合物的天然來(lái)源(提取)。

例如，wo2006/120567(advancedscientificdevelopments)描述了藥物組合物，其包含至少一種被描述為無(wú)毒性的活性治療物質(zhì)，所述物質(zhì)選自香葦醇、百里香酚、丁香酚、莰醇、香芹酚、α-紫羅酮、β-紫羅酮和其異構(gòu)體、衍生物和混合物，并且包含作為第二活性治療物質(zhì)的抗生素。單獨(dú)使用的香葦醇、百里香酚、丁香酚、莰醇、香芹酚、α-紫羅酮和β-紫羅酮具有抗菌活性，然而它們中的一些也引起毒性問(wèn)題，這在該申請(qǐng)中被忽略。

例如，香芹酚具有以下毒性數(shù)據(jù)：dl50(小鼠，經(jīng)靜脈)為80mg/kg，而在兩種哺乳動(dòng)物物種(貓和大鼠)中的口服最低致死劑量為100mg/kg。將這些數(shù)據(jù)與在文獻(xiàn)中考慮的(envisagés)0.3mg/ml(即300mg/kg)劑量作比較。

d/關(guān)于現(xiàn)有技術(shù)中描述的化合物的化學(xué)可變性

在質(zhì)量和可再生產(chǎn)性方面，精油在工業(yè)規(guī)模上的使用是一個(gè)問(wèn)題，因?yàn)榫偷慕M成因批次而異。

例如，de19631037(boehringer)描述了茶樹(shù)精油使抗生素對(duì)金黃色葡萄球菌菌株的作用增效的用途。主要組分茶樹(shù)精油為萜品烯-1-醇。

考慮到在人或動(dòng)物中的應(yīng)用，這種可變性尤其具有三個(gè)后果，其限制了工業(yè)化：

‐難以確保治療作用的一致性，

‐難以確保產(chǎn)品的低毒性，

‐與材料的供應(yīng)和質(zhì)量和可再生產(chǎn)性管理相關(guān)的成本是重要的。

下表列出了這些現(xiàn)有技術(shù)的教導(dǎo)：

表1

與在低劑量(遠(yuǎn)低于具有抗微生物活性的劑量)的化合物(i)相關(guān)的工作是新的，并且具我們所知，現(xiàn)有技術(shù)并未考慮到這種用途。

定義

“微生物(micro-organisme)”是指因?yàn)槠湫〕叽缍庋鄄豢梢?jiàn)的任何活的生物體。

“生物體”是指能夠出生，生長(zhǎng)和正常繁殖的任何動(dòng)物或植物生物實(shí)體(生物)。

在本專(zhuān)利中，微生物(microbe)定義占據(jù)了微生物定義，限于本發(fā)明所涉及的醫(yī)藥領(lǐng)域。因此，“微生物”是潛在致病的活的微生物(細(xì)菌、真菌、酵母和分枝桿菌)。因此，該術(shù)語(yǔ)不包括病毒和朊病毒等惰性病原體。

“抗微生物劑”是指用于施用至人或動(dòng)物的、能夠殺死或抑制微生物生長(zhǎng)的任何化合物。這些抗微生物劑的藥學(xué)上可接受的鹽也包括在該定義內(nèi)。其包括例如普魯卡因、二芐胺、乙二胺、乙醇胺、甲基葡糖胺?；撬岬鹊拟c鹽、鉀鹽、鈣鹽等和氨基鹽(selsaminés)，以及酸加成鹽如鹽酸鹽和堿性氨基酸。因此，該術(shù)語(yǔ)集合了用于全身或局部使用的抗生素(其與耐受機(jī)制抑制劑的組合)、抗真菌劑。

“抗微生物性質(zhì)”是指能夠破壞或抑制微生物生長(zhǎng)的任何物質(zhì)的性質(zhì)。具有抗微生物性質(zhì)的產(chǎn)品特別地包括抗微生物劑和殺生物劑。

與集合了用于被施用的抗菌劑、抗真菌劑的術(shù)語(yǔ)“抗微生物劑”相比，術(shù)語(yǔ)“殺生物劑”集合了用于被應(yīng)用至惰性系統(tǒng)(病毒和朊病毒)的、具有抗微生物性質(zhì)的產(chǎn)品。

“抗細(xì)菌性質(zhì)”和“抗真菌性質(zhì)”不僅是指殺細(xì)菌性質(zhì)和殺真菌性質(zhì)(其特征在于破壞細(xì)菌和真菌(和酵母、分枝桿菌))，還指抑制細(xì)菌性質(zhì)和抑制真菌性質(zhì)(其特征在于所述細(xì)菌和真菌(和酵母、分枝桿菌)的生長(zhǎng)抑制)。具有抗細(xì)菌性質(zhì)或抗真菌性質(zhì)的產(chǎn)品特別地包括抗微生物劑。

在本發(fā)明的目的中，抗生素“耐受細(xì)菌”是指耐受至少一種、特別地至少兩種、特別地至少三種、或甚至至少四種常規(guī)使用的抗生素或抗生素家族的細(xì)菌。

在本發(fā)明的目的中，“多重耐受細(xì)菌”是指耐受幾種抗生素(特別地，菌株對(duì)其應(yīng)當(dāng)是敏感的或先驗(yàn)敏感的)的細(xì)菌，更特別地是指具有至少兩種非天然耐受的細(xì)菌。

“天然耐受”和“獲得性耐受”是有區(qū)別的。一些抗生素在無(wú)毒劑量對(duì)一些細(xì)菌菌株或物種從未有效過(guò)。這是天然的耐受。當(dāng)對(duì)細(xì)菌通常有效的抗生素變得不有效或不那么有效時(shí)，則這種細(xì)菌已經(jīng)發(fā)展出獲得性耐受。

在本發(fā)明的目的中，“微生物感染”是指由一種或多種微生物菌株引起的感染，并且包括從宿主定植到病理期的階段。因此，短語(yǔ)“微生物感染”涵蓋了在微生物定植后出現(xiàn)在人或動(dòng)物中的任何不利作用、臨床體征、癥狀或任何疾病。

根據(jù)本發(fā)明，“萜類(lèi)”是指包含接近于萜烯的骨架的任何化合物?！拜葡笔侵敢陨锓绞酵ㄟ^(guò)c5單元的縮合獲得的異戊二烯衍生物，得到例如單萜、倍半萜烯?！敖咏凇笔侵腹羌茴?lèi)似于萜烯，或者其不同在于通常存在的至少一個(gè)烷基取代基可以不存在，或被另一個(gè)原子攜帶。骨架可以進(jìn)一步被不同的基團(tuán)取代，如飽和的或不飽和的、直鏈或環(huán)狀的脂族基團(tuán)(烷基、烯基、亞烷基)、氧基、醛、酯、醇、醚，和其硫或氮等價(jià)物。萜類(lèi)可以有利地為天然來(lái)源的。

根據(jù)本發(fā)明，“苯丙素”是指包含接近于苯丙烷的骨架的任何化合物?！氨奖椤笔侵赣杀奖樯锖铣色@得的衍生物，并且得到c6(芳香烴)-c3(脂肪烴)或c6(芳香烴)-c1(脂肪烴)衍生物和相應(yīng)的內(nèi)酯?！敖咏凇笔侵腹羌茴?lèi)似于苯丙烷，特別是包括苯基單元，或者其不同在于，通常存在的至少一個(gè)烷基取代基可以不存在，或被另一個(gè)原子攜帶。骨架可以進(jìn)一步被不同的基團(tuán)取代，如飽和的或不飽和的、直鏈或環(huán)狀的脂族基團(tuán)(烷基、烯基、亞烷基)、氧基、醛、酯、醇、醚，和其硫或氮等價(jià)物。苯丙素可以有利地為天然來(lái)源的。

在本申請(qǐng)中使用的術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”或“預(yù)防感染”是指臨床體征或感染癥狀發(fā)作的任何延遲程度，以及臨床體征或感染癥狀的嚴(yán)重性的任何抑制程度，包括但不限于所述感染的全面預(yù)防。這要求將抗微生物劑和根據(jù)本發(fā)明的化合物共同施用至人或動(dòng)物用于預(yù)防目的，所述人或動(dòng)物可能被微生物菌株定殖，例如在手術(shù)、醫(yī)療裝置的植入或侵入性醫(yī)療行為之后。為了預(yù)防、改善和/或降低任何隨后的感染的嚴(yán)重性，可以在可能導(dǎo)致感染(特別是醫(yī)院感染)的行為之前、期間或之后進(jìn)行這種預(yù)防性施用。

為了本發(fā)明的目的，術(shù)語(yǔ)“治療”意味著在定殖時(shí)，或在被可能引起感染(如醫(yī)院感染)的微生物菌株污染或疑似污染后，將抗微生物劑和根據(jù)本發(fā)明的化合物共同施用至受試者(人或動(dòng)物)。因此，術(shù)語(yǔ)“治療”或“治療感染”包括：

‐借助于抗微生物劑+根據(jù)本發(fā)明的化合物共同施用實(shí)現(xiàn)的任何治療作用(生長(zhǎng)抑制或微生物破壞)，以及觀察到的臨床體征或癥狀的改善，以及受試者狀況的改善；

‐減緩、中斷以及阻止感染的進(jìn)展。事實(shí)上，抗微生物劑-根據(jù)本發(fā)明的化合物的共同施用還能夠減緩微生物的進(jìn)展和/或完全或部分地防止微生物感染延伸到周?chē)M織和其他組織；

‐抑制、減弱或預(yù)防感染的有害后果，如由在感染的或相鄰的組織上的一些微生物產(chǎn)生的毒素引起的細(xì)胞損傷或生理?yè)p傷。

術(shù)語(yǔ)“共同施用”是指將抗微生物劑(或抗微生物劑混合物)和根據(jù)本發(fā)明的化合物(或根據(jù)本發(fā)明的化合物混合物)以組合的或并列的形式施用至受試者(人或動(dòng)物)。組合包括任何藥物組合、任何藥物組合物、任何藥物試劑盒和任何藥物，其包含(i)至少一種抗微生物劑，和(ii)至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物?；衔?i)和(ii)可以以混合物的形式，或以不同的制劑或組合物的形式存在于所述組合中。組合還可以包含幾種抗微生物劑，例如2種、3種、4種或更多種抗微生物劑，和/或幾種根據(jù)本發(fā)明的化合物，特別是2種、3種或更多種根據(jù)本發(fā)明的化合物。由于常見(jiàn)的指征(其為抗微生物治療的實(shí)施)，這些組分形成功能單元。這種組合治療更具體地旨在預(yù)防和/或治療微生物來(lái)源的感染和疾病，特別是醫(yī)院感染。

共同施用可以為同時(shí)的或隨時(shí)間延續(xù)。

術(shù)語(yǔ)“同時(shí)的”是指將抗微生物劑(或抗微生物劑混合物)和根據(jù)本發(fā)明的化合物(或根據(jù)本發(fā)明的化合物混合物)同時(shí)一齊施用至受試者(人或動(dòng)物)。可以以混合物的形式施用這些化合物，或者同時(shí)但分別以不同組合物的形式施用這些化合物。

短語(yǔ)“順序施用”是指將抗微生物劑(或抗微生物劑混合物)和根據(jù)本發(fā)明的化合物(或根據(jù)本發(fā)明的化合物混合物)不是同時(shí)地施用，而是一個(gè)接一個(gè)地分別施用。

術(shù)語(yǔ)使抗微生物劑“增效”是指根據(jù)本發(fā)明的化合物的使用能夠?qū)崿F(xiàn)比單獨(dú)使用所述抗微生物劑所達(dá)到的預(yù)防或治療作用更高的預(yù)防或治療作用。這可以以不同的替代方案或累積方式表達(dá)：抗微生物作用的增加、在抗微生物作用不變下抗微生物劑劑量的下降、cmi的降低。進(jìn)一步地，增效能夠減少或甚至抵消耐受的出現(xiàn)。

術(shù)語(yǔ)“增強(qiáng)抗微生物作用”是指：在抗微生物劑劑量不變下，抗微生物劑活性的微生物譜的擴(kuò)大、抗微生物作用速率的增加、治愈率的改善或抗微生物治愈率的時(shí)間的改善。

短語(yǔ)“降低所使用的抗微生物劑的量”是指根據(jù)本發(fā)明的化合物的使用使得能夠使用更低的抗微生物劑的量，所述更低的抗微生物劑的量低于當(dāng)單獨(dú)施用抗微生物劑時(shí)，實(shí)現(xiàn)指定的治療或預(yù)防作用所通常必需的抗微生物劑的量。所使用的抗微生物劑的量的降低可以或多或少地高；相對(duì)于實(shí)現(xiàn)指定的治療或預(yù)防作用所通常必需的量，優(yōu)選降低至少10％，并且更優(yōu)選降低至少20％，進(jìn)一步優(yōu)選降低至少40％，甚至降低50％或更多。

“cmi”是指“最低抑制濃度”，其為物質(zhì)的最低濃度，在此濃度，在有利于微生物生長(zhǎng)的條件下，在18至24h的接觸后不再觀察到微生物的生長(zhǎng)。

根據(jù)有效的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)(clsim7-a9jan12標(biāo)準(zhǔn))，在固體瓊脂介質(zhì)中進(jìn)行抑制最小濃度測(cè)量測(cè)試：將待測(cè)試化合物分散在馬-欣二氏(muellerhinton)瓊脂糖中。然而，與化合物和組合物的疏水性有關(guān)的適應(yīng)性對(duì)將它們分散在介質(zhì)中是必需的：將化合物在溶劑中稀釋?？梢灶A(yù)先在一種或多種溶劑(用水稀釋的80、用丙烯稀釋的80、用水稀釋的dmso)中，將摻入瓊脂介質(zhì)中的化合物和組合物稀釋。用轉(zhuǎn)向裝置將菌株沉積在瓊脂表面上。在實(shí)施例中，平行地測(cè)試產(chǎn)品的不同溶解方法，以避免分子(抗微生物劑和增效劑)的水/溶劑分配系數(shù)的問(wèn)題，而細(xì)菌只在水相中生長(zhǎng)。技術(shù)要求將不會(huì)干擾體內(nèi)測(cè)試?？梢栽谝后w介質(zhì)(微孔板和管)中實(shí)施相同的稀釋方法。對(duì)真菌實(shí)施相同的方法學(xué)。

cmi50和cmi90分別表示抑制50％和90％相同屬的菌株數(shù)量的濃度。

為了本發(fā)明的目的，“烷基”是指直鏈或支鏈不飽和脂族烴基，其包含1個(gè)至6個(gè)碳原子(c1-c6)或1個(gè)至4個(gè)碳原子(c1-c4)。作為包含1個(gè)至4個(gè)碳原子的烷基的示例，可以提及甲基、乙基、丙基、丁基、異丙基、1-甲基-乙基、1-甲基-丙基、2-甲基-丙基。作為包含1個(gè)至6個(gè)碳原子的烷基的示例，可以進(jìn)一步提及戊基、己基、1-甲基-丁基、1-甲基-戊基、2-甲基-戊基、3-甲基-戊基、3-甲基-丁基、3-甲基-戊基、4-甲基-戊基或1-乙基-丙基、1-乙基-丁基、2-乙基-丁基。

為了本發(fā)明的目的，“烯基”是指飽和的、直鏈或支鏈脂族烴鏈，其包含至少一個(gè)雙鍵c＝c，例如乙烯基、烯丙基等，其包含2個(gè)至6個(gè)碳原子或2個(gè)至4個(gè)碳原子。

為了本發(fā)明的目的，“烷氧基”是指o-烷基(其中烷基如前面所定義)，例如甲氧基或乙氧基。

“烷基”、“烯基”、“烷氧基”可以進(jìn)一步被取代。

由同一個(gè)骨架攜帶的兩個(gè)“烷基”和/或“烯基”和/或“烷氧基”可以一起形成環(huán)或雜環(huán)(特別是內(nèi)酯)。術(shù)語(yǔ)“亞烷基”是指當(dāng)兩個(gè)“烷基”和/或“烯基”彼此連接時(shí)形成的烴鏈。

為了本發(fā)明的目的，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”是指任何3-7元飽和的或不飽和但非芳香的烴環(huán)，特別是具有5個(gè)或6個(gè)成員，如環(huán)戊基或環(huán)己基。

為了本發(fā)明的目的，術(shù)語(yǔ)“環(huán)雜烷基”是指任何5-7元飽和的或不飽和但非芳香的烴環(huán)，其含有一個(gè)或多個(gè)雜原子，例如硫原子或氧原子。

為了本發(fā)明的目的，“氧基(oxy)”是指酮官能團(tuán)，并且“cho”是指醛官能團(tuán)。

p的log，“l(fā)ogp”為非離子化合物在不混溶的溶劑(水和正辛醇)的兩個(gè)相中的平衡濃度比。

發(fā)明的描述

本發(fā)明的目的為一種用于治療微生物感染的用途的增效的抗微生物劑，其特征在于式(i)的化合物與抗微生物劑組合使用：

其中

虛線(xiàn)代表可以不存在或存在的鍵，條件是兩個(gè)雙鍵不相鄰，

n為0或1，

r1為h或c1-c6烷基或c2-c6烯基，

r2為h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、c1-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，有利地r2為h，

r3為h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、o-(c2-c4烯基)，有利地r3為h，

r2和r3可以一起形成相應(yīng)的內(nèi)酯，

·當(dāng)n為0時(shí)，

οz為co-r5基團(tuán)，其中r5為oh、o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，有利地為o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，

·當(dāng)n為1時(shí)，

οz為co-r5或ch2-o-co-(c1-c6烷基)或chmr7或c4-c10烷基或c4-c10烯基基團(tuán)，所述c4-c10烷基或c4-c10烯基可以為直鏈或支鏈的，任選被oh取代；有利地這些基團(tuán)不被取代，

ο其中r5為oh、o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-(c2-c4烯基)-苯基、o-c2-c6烯基，有利地為o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，

ο或者其中r5為h，條件是r4為c2-c6烷基，或條件是r2為c2-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，

ο其中m為1或2；如果c1和c2之間的鍵為雙鍵，則m為2，

ο其中r7為h或c1-c6烷基，

ο其中r4為h或c1-c6烷基，

式(i)的化合物：抗微生物劑的質(zhì)量比為8:1至1:10，并且其中抗微生物劑不為萜類(lèi)或苯丙素。

抗微生物劑有利地為西方常規(guī)藥物的活性成分，將如下面所描述。特別地，抗微生物劑不是萜類(lèi)或苯丙素，例如精油提取物或精油組分。

式(i)的化合物：抗微生物劑的質(zhì)量比更特別地為4:1至1:10，更有利地為1:1至1:10，進(jìn)一步有利地為1:1至1:5。

這意味著式(i)的化合物的施用劑量與抗微生物劑的施用劑量處于相同數(shù)量級(jí)。

質(zhì)量比對(duì)應(yīng)于施用至人或動(dòng)物的化合物和抗微生物劑的劑量比(以mg/kg計(jì))。

令人驚訝地，已注意到當(dāng)根據(jù)本發(fā)明的化合物(或根據(jù)本發(fā)明的化合物混合物)的劑量增加時(shí)，增效作用降低。這種增效作用可以在單獨(dú)的化合物的cmi處重新出現(xiàn)，但是這不是本發(fā)明的目的。

在本發(fā)明的范圍內(nèi)，在體外，觀察到增效作用的非活性化合物的濃度與觀察到抗微生物性質(zhì)時(shí)的抗微生物性質(zhì)的閾值(cmi)相距甚遠(yuǎn)。相距甚遠(yuǎn)是指體外濃度比cmi低至少10倍，有利地至少20倍，更有利地至少50倍，或進(jìn)一步有利地至少100倍。

對(duì)于引起特別考慮的微生物感染的病原菌株a，化合物(i)的濃度滿(mǎn)足以下方程式：

[c]<[cmi]/x

其中[c]為在菌株a中使用的根據(jù)本發(fā)明的化合物(i)的濃度，

[cmi]為在該菌株a中測(cè)定的單獨(dú)的化合物(i)的cmi，

x高于或等于100，有利地高于或等于1000，更有利地x為2000至10000，或甚至高于50000。

在體外，化合物(i)的劑量低于100mg/l，有利地低于64mg/l，更有利地為0.01至25mg/l，更有利地為1至16mg/l。

在施用的組合物中，式(i)的化合物的每單位劑量每千克的濃度有利地低于100mg，更有利地低于64mg。

可以以低濃度(體外濃度為約1μg/ml)使用化合物(i)，使抗微生物劑增效，其與在人或動(dòng)物中的未來(lái)應(yīng)用非常相容(特別是如果旨在全身施用)。

這使得能夠考慮在人或動(dòng)物中的劑量為低于64mg/kg，有利地為0.01至64mg/kg，更有利地為0.5至40mg/kg，進(jìn)一步有利地為5至30mg/kg。

有利地以一定的濃度施用根據(jù)本發(fā)明的增效劑化合物，在此濃度在施用后其最大血清濃度低于250mg/l，有利地低于150mg/l，更有利地為10至150mg/l。

當(dāng)然，可以將化合物以這些濃度施用至人和動(dòng)物，包括全身施用，并且沒(méi)有較大的副作用，特別是致癌性或遺傳毒性。

根據(jù)本發(fā)明的化合物(或根據(jù)本發(fā)明的化合物混合物)：抗微生物劑的質(zhì)量比每次都依賴(lài)于所使用的抗微生物劑，并且將使其適應(yīng)于每種情況。

例如，對(duì)于通常以每次施用1000mg劑量施用的情況下的阿莫西林，式(i)的化合物的劑量可以為每次施用300至850mg，或更小。然而，對(duì)于通常通過(guò)肺部途徑以1mui劑量施用的粘菌素，式(i)的化合物的劑量可以為0.1至0.8mui，或甚至更小。

用別的方法說(shuō)，本發(fā)明的一個(gè)目的為一種與耐受機(jī)制無(wú)關(guān)的用于使抗微生物劑的抗微生物活性增效的方法，其包括以下步驟：

a)選擇式(i)的化合物，其在考慮的劑量單獨(dú)無(wú)治療活性(用于抗感染目的)，

b)制備組合物，其包含步驟a)中選擇的化合物和抗微生物劑。

本發(fā)明的另一個(gè)目的還為一種用于在受試者中治療和/或預(yù)防微生物感染的方法，其包括將抗微生物劑和式(i)的化合物共同施用至具有所述微生物感染的受試者。

使化合物和抗微生物劑適用于向人或動(dòng)物同時(shí)、分別或隨時(shí)間延續(xù)施用。

抗微生物劑優(yōu)選為抗生素。其也可以為抗真菌劑。

令人驚訝地，已經(jīng)注意到，以這種低濃度使用的式(i)的化合物能夠使抗微生物劑的活性增效。因此，這些增效劑的使用有利地使得所述抗微生物劑能夠以較低濃度使用和/或以通常的濃度使用，同時(shí)比在相同劑量單獨(dú)的抗微生物劑具有更高的活性(增加作用強(qiáng)度或作用動(dòng)力學(xué))。

具體地，本發(fā)明特別地能夠：

a/劑量降低而作用不變：降低用于抑制/破壞通常敏感的微生物的抗微生物劑的必需量，

b/作用增強(qiáng)而劑量不變：增強(qiáng)抗微生物劑抑制/破壞敏感細(xì)菌的能力(改善作用動(dòng)力學(xué)、作用強(qiáng)度，并將抗微生物劑的活性譜擴(kuò)大到對(duì)抗微生物劑不穩(wěn)定敏感或耐受的細(xì)菌)。

降低抗微生物劑的施用劑量(a/)不僅從人或動(dòng)物中的微生物感染的治療角度看(特別是減少副作用)是有意義的，而且從環(huán)境的角度看(降低抗微生物劑耐受的發(fā)生)也是不可忽視的。以較低的劑量使用已知的抗微生物劑可以有助于對(duì)抗新的耐受機(jī)制的發(fā)生。特別地，可以以降低的劑量使用抗微生物劑，在此抗微生物劑的施用劑量對(duì)應(yīng)于抗微生物劑的必需劑量的1/50至3/4，所述必需劑量為沒(méi)有共同施用根據(jù)本發(fā)明的化合物時(shí)用于施用至受試者(人，動(dòng)物)以治療微生物感染所需的劑量?？刮⑸飫┑膭┝拷档投饔貌蛔兪沟盟隹刮⑸飫┑亩拘允艿较拗?。在商品動(dòng)物的應(yīng)用中，這能夠降低屠宰之前的延遲時(shí)間。

劑量的降低也使得能夠考慮重新使用一些抗微生物劑，所述抗微生物劑因?yàn)樵谄溆行┝烤哂兄匾母弊饔枚癫荒茉俦皇┯?，并且所述抗微生物劑可以再次被有效地施用至人或?dòng)物而具有小的副作用。

增強(qiáng)抗微生物劑的作用而劑量不變(b/)具有一定的臨床意義，無(wú)論是從定量的角度改善抗微生物作用的動(dòng)力學(xué)，還是從定性的角度使得能夠用抗微生物劑治療具有微生物感染的患者(人或動(dòng)物)，在沒(méi)有增效時(shí)菌株對(duì)所述抗微生物劑是敏感的或不穩(wěn)定敏感的?？刮⑸镄实奶岣吣軌驕p少患者或動(dòng)物在“感染”狀態(tài)下所花費(fèi)的時(shí)間，從而減少疾病流行病學(xué)以及耐受的出現(xiàn)和擴(kuò)散。

由于根據(jù)本發(fā)明的化合物的存在，能夠在不變的抗微生物劑的劑量下提高抗微生物劑的殺菌率。因此，增效的抗微生物劑的作用速率可以提高。對(duì)于濃度依賴(lài)性抗微生物劑尤其如此。

由于根據(jù)本發(fā)明的化合物的存在，抗微生物劑的譜可以被擴(kuò)大，特別是在不變的抗微生物劑的劑量下。因此，可以在菌株中使用被根據(jù)本發(fā)明的化合物增效的抗微生物劑，在沒(méi)有增效時(shí)所述菌株對(duì)所述抗微生物劑不再敏感(特別是因?yàn)槟褪艿陌l(fā)生)。

在一個(gè)實(shí)施方案中，式(i)的化合物足以使抗微生物劑增效，結(jié)果是單個(gè)的式(i)的化合物的使用足以使抗微生物劑增效。然而，在一些情況下，可以考慮無(wú)活性化合物的組合使用。當(dāng)想要廣譜活性時(shí)尤其如此。特別地，為了使抗生素對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌增效，共同施用特別地為革蘭氏陽(yáng)性菌增效劑的根據(jù)本發(fā)明的化合物和特別地為革蘭氏陰性菌增效劑的根據(jù)本發(fā)明的化合物會(huì)是有用的。

苯丙烷類(lèi)包含被至少一個(gè)脂族取代的c6芳基骨架：

在c1和c2之間或在c2和c3之間的雙鍵c＝cc6芳基骨架可以包含一個(gè)或多個(gè)取代基。

根據(jù)本發(fā)明的化合物有利地具有10個(gè)至18個(gè)，更有利地10個(gè)至15個(gè)的碳原子。

根據(jù)本發(fā)明的化合物有利地具有低于350g/mol，有利地低于300g/mol，更有利地120g/mol至280g/mol的分子量。

最有利的化合物為純烴(僅碳原子和氫原子)，或者當(dāng)它們包含氧原子時(shí)，所述氧優(yōu)選為酯或醚的形式。

化合物有利地具有高于2，更有利地2至5的logp值。

化合物有利地具有低的水溶性。特別地，水溶性有利地低于500mg/l，更有利地為0.001mg/l至50mg/l，進(jìn)一步有利地為0.001至20mg/l。

根據(jù)本發(fā)明的化合物可以有利地形成0個(gè)至1個(gè)氫鍵，更有利地形成0個(gè)氫鍵。

在第一替代方案中，化合物具有下式(ia)：

其中

n為0或1，

r1為h或c1-c6烷基或c2-c6烯基，

r2為h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、c1-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，有利地r2為h，

r3為h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)，有利地r3為h，

r2和r3可以一起形成相應(yīng)的內(nèi)酯，

·當(dāng)n為0時(shí)，

οr5為oh、o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，有利地為o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，

·當(dāng)n為1時(shí)，

οr4為h或c1-c6烷基，

οr5為o-c2-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-(c2-c4烯基)-苯基、c1-c6烷基，

οr5為h，條件是r4為c2-c6烷基，或條件是r2為c2-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，

οr5為oh，條件是r2為c1-c6烷基，

有利地，r5為o-c2-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、c1-c6烷基。

更有利地，

n為0或1，

r1為h或c1-c6烷基或c2-c6烯基，

r2為h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、c1-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，有利地r2為h，

r3為h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)，有利地r3為h，

r2和r3可以一起形成相應(yīng)的內(nèi)酯，

·當(dāng)n為0時(shí)，

οr5為oh、o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，有利地為o-c1-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基、o-c2-c6烯基，

·當(dāng)n為1時(shí)，

οr4為h或c3-c6烷基，

οr5為o-c2-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基，

οr5為h，條件是r4為c3-c6烷基，或條件是r2為c2-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，

οr5為oh，條件是r2為c3-c6烷基，

有利地，r5為c2-c6烷基、o-(c1-c4烷基)-苯基。

在一個(gè)替代方案中，n為0。在該替代方案中，r5有利地為oh、o-c1-c3烷基、o-(c1-c2烷基)-苯基。r1有利地為h或c1-c4烷基或c2-c4烯基。r2有利地為h或oh、o-(c1-c4烷基)。r3有利地為h。

在該替代方案中，根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選的化合物為苯甲酸、水楊酸甲酯、苯甲酸芐酯。

在第二替代方案中，化合物具有下式(ib)：

其中

r1為h或c1-c6烷基或c2-c6烯基，

r2為h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、c1-c6烷基、n-(c1-c6烷基)2，有利地r2為h，

r3為h或oh、o-co-(c1-c4烷基)、o-(c1-c4烷基)、o-(c2-c4烯基)，有利地r3為h，

r2和r3可以一起形成相應(yīng)的內(nèi)酯，

z為ch2-o-co-(c1-c6烷基)。

在該替代方案中，r1有利地為h。r2有利地為h。r3有利地為h。z有利地為ch2-o-co-(c1-c4烷基)。

在該替代方案中，根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選的化合物為乙酸肉桂酯和丙酸反式肉桂酯。

在本發(fā)明的范圍內(nèi)，微生物感染有利地為由選自以下潛在病原屬的病原體誘導(dǎo)的感染：醋菌屬(acetobacter)、醋酸桿菌屬(acetobacterium)、不動(dòng)桿菌屬(acinetobacter)、檸檬酸桿菌屬(citrobacter)、腸桿菌屬(enterobacter)、腸球菌屬(enterococcus)、埃希氏桿菌屬(escherichia)、幽門(mén)螺桿菌屬(helicobacter)、克雷伯氏菌屬(klebsiella)、變形桿菌屬(proteus)、普羅維登斯菌屬(providencia)、假單胞菌屬(pseudomonas)、沙門(mén)氏菌屬(salmonella)、沙雷氏菌屬(serratia)、葡萄球菌屬(staphylococcus)、鏈球菌屬(streptococcus)、放線(xiàn)桿菌屬(actinobacillus)、奈瑟氏菌屬(neisseria)、曼?，斒蠈?mannheima)、巴氏桿菌屬(pasteurella)、念珠菌屬(candida)、曲霉屬(aspergillus)、隱球菌屬(cryptococcus)、毛孢子菌屬(trichosporon)、馬拉色氏霉菌屬(malassezia)和分支桿菌屬(mycobacterium)。

細(xì)菌菌株或物種有利地選自：醋菌屬、醋酸桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬、放線(xiàn)桿菌屬、檸檬酸桿菌屬、腸桿菌屬、腸球菌屬、埃希氏桿菌屬、幽門(mén)螺桿菌屬、克雷伯氏菌屬、曼?，斒蠈佟褪蠗U菌屬、變形桿菌屬、普羅維登斯菌屬、假單胞菌屬、沙門(mén)氏菌屬、沙雷氏菌屬、葡萄球菌屬和鏈球菌屬。更特別地，細(xì)菌菌株或物種有利地選自檸檬酸桿菌(citrobacterfreundii)、產(chǎn)氣腸桿菌(enterobacteraerogenes)、陰溝腸桿菌(enterobactercloacae)、大腸桿菌(escherichiacoli)、產(chǎn)酸克雷伯氏菌(klebsiellaoxytoca)、肺炎克雷伯氏菌(klebsiellapneumoniae)、奇異變形桿菌(proteusmirabilis)、斯氏普羅威登斯菌(providenciastuartii)、沙門(mén)氏菌屬物種(salmonellasp)、粘質(zhì)沙雷氏菌(serratiamarcescens)、鮑曼不動(dòng)桿菌(acinetobacterbaumannii)、洋蔥伯克霍爾德氏菌(burkholderiacepacia)、銅綠假單胞菌(pseudomonasaeruginosa)、葡萄球菌科(staphylococcaceae)、金黃色葡萄球菌(staphylococcusaureus)、屎腸球菌(enterococcusfaecium)和腸球菌屬物種(enterococcussp.)。因此，細(xì)菌可以無(wú)差異地為革蘭氏陰性菌或革蘭氏陽(yáng)性菌。

細(xì)菌更有利地選自銅綠假單胞菌、大腸桿菌、糞腸球菌(enterococcusfaecalis)、肺炎克雷伯氏菌和金黃色葡萄球菌。

真菌有利地選自：念珠菌屬、曲霉屬、隱球菌屬、毛孢子菌屬。真菌更有利地為白色念珠菌(candidaalbicans)。

分枝桿菌有利地為結(jié)核分枝桿菌(mycobacteriumtuberculosis)。

抗微生物劑可以為抗生素和/或抗真菌劑。在一個(gè)優(yōu)選的替代方案中，式(i)的化合物和抗微生物劑不屬于相同的化合物家族。因此，由于式(i)的化合物為萜類(lèi)衍生物，因此抗微生物劑不為萜類(lèi)，或甚至不為精油提取物或苯丙素。

可以在本發(fā)明中使用的抗生素有利地選自：

1.作用于細(xì)胞膜的抗生素，特別是β-丙氨酸類(lèi)、青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、糖肽類(lèi)、磷霉素類(lèi)、多粘菌素類(lèi)、桿菌肽、環(huán)絲氨酸；

2.蛋白質(zhì)合成抑制抗生素，特別是氨基糖苷類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、梭鏈孢酸、氯霉素及其衍生物、大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、林可酰胺類(lèi)、鏈陽(yáng)霉素類(lèi)、協(xié)同菌素類(lèi)和噁唑烷酮類(lèi)；

3.核酸合成抑制抗生素，特別是喹諾酮類(lèi)、硝基呋喃類(lèi)、安沙霉素類(lèi)和夫西地酸；

4.葉酸合成抑制抗生素，特別是磺酰胺類(lèi)和磺酰胺組合；

5.霉菌酸合成抑制抗生素，特別是異煙肼、丙硫異煙胺、乙硫異煙酰胺、吡嗪酰胺；

6.任何其藥學(xué)上可接受的鹽，和

7.任何其組合。

優(yōu)選地，抗生素選自：肽聚糖合成抑制抗生素、核酸合成抑制抗生素、葉酸合成抑制抗生素、霉菌酸合成抑制抗生素、任何其藥學(xué)上可接受的鹽、和任何其組合。特別有利的抗生素種類(lèi)為肽聚糖合成抑制抗生素的種類(lèi)。

特別地，抗生素選自：阿莫西林、阿莫西林/克拉維酸、亞胺培南、萬(wàn)古霉素、紅霉素、阿奇霉素、慶大霉素、阿米卡星、粘菌素、克林霉素、環(huán)丙沙星、替加環(huán)素。

在本發(fā)明的一個(gè)替代方案中，微生物感染為由球菌或革蘭氏陽(yáng)性桿菌型的細(xì)菌菌株誘導(dǎo)的細(xì)菌感染，并且抗微生物劑為阿莫西林。

在本發(fā)明的一個(gè)替代方案中，阿莫西林的劑量為1000mg/施用，桉樹(shù)腦的劑量為1000mg/施用，有利地500mg/施用，更優(yōu)選地250mg/施用。

在本發(fā)明的另一個(gè)替代方案中，微生物感染為由耐甲氧西林的大腸桿菌(e.coli)或金黃色葡萄球菌(s.aureus)型菌株誘導(dǎo)的細(xì)菌感染，并且抗微生物劑為阿莫西林/克拉維酸混合物。

在本發(fā)明的另一個(gè)替代方案中，阿莫西林/克拉維酸混合物：桉樹(shù)腦比例為10:1、1:1或甚至1:5。

在本發(fā)明的另一個(gè)替代方案中，微生物感染為由腸桿菌型菌株假單胞菌屬或金黃色葡萄球菌誘導(dǎo)的細(xì)菌感染，并且抗微生物劑為環(huán)丙沙星。

可以在本發(fā)明中使用的抗真菌劑有利地選自：

1.作用于細(xì)胞膜的抗真菌劑，特別是多烯類(lèi)、唑類(lèi)、烯丙胺類(lèi)和硫代氨基甲酸酯類(lèi)、棘白菌素類(lèi)；

2.作用于核酸合成的抗真菌劑，特別是灰黃霉素、氟胞嘧啶；

3.作用于微管的抗真菌劑，特別是灰黃霉素。

抗真菌劑有利地選自多烯類(lèi)、唑類(lèi)類(lèi)、烯丙胺類(lèi)、硫代氨基甲酸酯類(lèi)、棘白菌素類(lèi)、灰黃霉素和氟胞嘧啶。

在本發(fā)明的另一個(gè)替代方案中，微生物感染為陰道霉菌病，并且抗生素為塞曲唑。

根據(jù)本發(fā)明的化合物有利地被全身施用。

可以在任何配制的藥物組合物中使用根據(jù)本發(fā)明的化合物，從而有助于其施用。藥物組合物可以包含通常使用的所有藥學(xué)上可接受的賦形劑，如載體或稀釋劑。

可以通過(guò)口服、腸內(nèi)、腸外(靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下、腹膜內(nèi))、經(jīng)皮(transcutanée)(或透皮(tansdermique)或由皮(percutanée))、皮膚、粘膜(特別是經(jīng)口腔、鼻、眼、耳、陰道、直腸粘膜)途徑，或甚至胃內(nèi)、心內(nèi)、腹膜內(nèi)、肺內(nèi)或氣管內(nèi)途徑施用藥物組合物。

藥物組合物可以為干燥形式(所述干燥形式在使用時(shí)被重新配制(粉末、凍干物等))，固體形式(特別是扁囊劑、粉末、膠囊、丸劑、顆粒、栓劑、片劑，更準(zhǔn)確地說(shuō)是加速釋放片劑、腸溶包衣片劑或持續(xù)釋放片劑)，糊狀形式(特別是凝膠、軟膏、霜?jiǎng)┗蚺咧?，液體形式(特別是糖漿，可注射的、不熔的或可飲用的(酏劑)溶液或洗眼劑)，氣霧劑形式(噴霧、蒸汽或氣體)，貼劑形式，可注射形式(為水性、非水性或等滲溶液)。

另一方面，藥物組合物可以被包裝，用于以單次劑量(單劑量)或多次劑量(多劑量)的形式的施用。

可以在同一個(gè)藥物組合物中或不同的藥物組合物中，同時(shí)、依次或隨時(shí)間延續(xù)施用抗微生物劑和根據(jù)本發(fā)明的化合物。在分別施用的情況下，藥物組合物的形式可以是相似的或不同的；施用途徑可以是相同的或不同的。

將由臨床醫(yī)生根據(jù)情況調(diào)整施用計(jì)劃。施用途徑和劑量隨各種的參數(shù)而變化，例如隨患者狀況、感染類(lèi)型和待治療的感染的嚴(yán)重程度，或所使用的抗微生物劑而變化。

動(dòng)物優(yōu)選為哺乳動(dòng)物，特別是人、寵物或商業(yè)動(dòng)物。

具體實(shí)施方式

下面的實(shí)施例闡明了本發(fā)明。

cmi測(cè)量：根據(jù)前面定義的方案，根據(jù)有效的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)(clsi標(biāo)準(zhǔn))，在瓊脂固體介質(zhì)中進(jìn)行最小抑制濃度測(cè)量測(cè)試?？梢灶A(yù)先在一種或多種溶劑(用水稀釋的80-3.4ml吐溫和9.6ml水，用丙烯10稀釋的80-3.4ml吐溫和9.6ml丙烯，用水稀釋的dmso)中，將摻入瓊脂介質(zhì)中的化合物和組合物稀釋。

與單獨(dú)的抗生素的cmi相比較的增強(qiáng)劑(booster)的貢獻(xiàn)以(cmiatb)/(cmiatb+增強(qiáng)劑)比例表示。從而，將增益(gain)定義為：

cmi50增益＝(單獨(dú)的抗生素的cmi50)/(cmi50(抗生素+增強(qiáng)劑))

cmi90增益＝(單獨(dú)的抗生素的cmi90)/(cmi90(抗生素+增強(qiáng)劑))

增強(qiáng)劑為上位術(shù)語(yǔ)，以指代式(i)的本發(fā)明的增效劑化合物。

除非另有說(shuō)明，在表中所示的比例為質(zhì)量比。

測(cè)試方案/測(cè)試菌株的描述。

-細(xì)菌菌株

測(cè)試的菌株從各種人樣本(血液、尿液、肺部抽出物等)中分離。在以下實(shí)施例中研究的菌株選自下表的菌株：

表2

測(cè)試的酵母菌株(n＝33)屬于白色念珠菌、熱帶念珠菌(candidatropicalis)、克氏念珠菌(candidakrusei)、近平滑念珠菌(candidaparapsilosis)、光滑念珠菌(candidaglabrata)物種。

在下面的實(shí)施例中，使用了以下縮寫(xiě)：

ac乙酸肉桂酯

bb苯甲酸芐酯

amox阿莫西林

amc

staph葡萄球菌

coli大腸桿菌

pyo銅綠假單胞菌

cip環(huán)丙沙星

實(shí)施例1：最小抑制濃度測(cè)量

所使用的質(zhì)量比

-64/500對(duì)應(yīng)于約1至8(記為1至8)

-64/100對(duì)應(yīng)于約1至1.5(記為1至1.5)

-64/50對(duì)應(yīng)于約1至0.75(記為1至0.75)

-64/10對(duì)應(yīng)于約1至0.15(記為1至0.15)

已經(jīng)測(cè)試了苯甲酸芐酯和乙酸肉桂酯對(duì)抗生素的增效作用。在表中所示的比例為質(zhì)量比。

1-1/單獨(dú)的增效劑產(chǎn)品的cmi(任何溶劑)

表2

以1％至0.00375％的連續(xù)稀釋測(cè)試產(chǎn)品。>1％的值表示在所測(cè)試的濃度沒(méi)有觀察到細(xì)菌抑制。

等于1.00％的值對(duì)應(yīng)于10000mg/l(即10g/l)。

測(cè)試顯示，產(chǎn)品在大多數(shù)測(cè)試的溶劑中無(wú)活性(cmi>10000mg/l)。

1-2/稀釋測(cè)試：阿莫西林

表3

測(cè)試顯示，在葡萄球菌中，增效劑在低劑量使阿莫西林增效(單獨(dú)的amox的cmi為0.25至32mg/l)。

1-3/稀釋測(cè)試：阿莫西林，有氧對(duì)比于無(wú)氧(溶劑t/e)

表4

該測(cè)試顯示，菌株所使用的代謝途徑對(duì)阿莫西林的增效有影響。

1-4/稀釋測(cè)試：奧格門(mén)汀，無(wú)氧(溶劑：t/e)

表5

該測(cè)試顯示，菌株所使用的代謝途徑對(duì)奧格門(mén)汀的增效有影響。

1-5/稀釋?zhuān)涵h(huán)丙沙星和比例影響(溶劑＝dmso)

表6

該測(cè)試顯示，所使用的比例對(duì)增效有影響。其還證明了增效劑降低環(huán)丙沙星的cmi的能力。

1-6/稀釋?zhuān)涵h(huán)丙沙星，無(wú)氧(溶劑＝dmso)

表7

該測(cè)試顯示，菌株所使用的代謝途徑對(duì)環(huán)丙沙星的增效有影響。

1-7/稀釋?zhuān)簯c大霉素(溶劑＝水)

表8

測(cè)試顯示，增效劑在低劑量使環(huán)丙沙星增效(單獨(dú)的慶大霉素的cmi為0.125至8mg/l)。

1_8/稀釋?zhuān)喊⒛髁?克拉維酸(溶劑＝水)

表9

該測(cè)試顯示，所使用的比例對(duì)奧格門(mén)汀的增效有影響。

1-9/稀釋?zhuān)核沫h(huán)素(溶劑＝dmso)

表10

測(cè)試顯示，增效劑使四環(huán)素增效。

1-10/稀釋?zhuān)荷崴颠?溶劑＝dmso)

表11

測(cè)試顯示，增效劑使舍他康唑增效，而在念珠菌屬中增效劑的cmi50和cmi90等于1％。在低劑量下，這種增效干擾(單獨(dú)的舍他康唑的cmi為0.06至16mg/l)。該測(cè)試還令人驚訝地顯示，在高的增效劑劑量的舍他康唑不被增效，而在低的增效劑劑量其被增效。

實(shí)施例2：e測(cè)試(etest)

基于通常的cmi測(cè)試進(jìn)行相應(yīng)的測(cè)試：將(biomérieux)條帶沉積在接種的瓊脂介質(zhì)的表面上，在其中已摻入增強(qiáng)劑。該測(cè)試使得溶劑效應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)最小化，所述風(fēng)險(xiǎn)為與在體外使用的溶劑的可能的相互作用。

在不同溶劑(80或dmso)中，在三種不同濃度(1mg/l、4mg/l、16mg/l)，測(cè)量單獨(dú)的抗生素的cmi，或與乙酸肉桂酯或苯甲酸芐酯聯(lián)合的抗生素的cmi。

對(duì)照對(duì)應(yīng)于無(wú)桉樹(shù)腦時(shí)進(jìn)行的測(cè)試。在所測(cè)試的每種溶劑中進(jìn)行對(duì)照：蒸餾水、吐溫/水和dmso。

ed對(duì)照＝在蒸餾水中的單獨(dú)的抗生素

dmso對(duì)照＝在dmso中的單獨(dú)的抗生素

指示“>64”是指cmi不能測(cè)量，因?yàn)槠涓哂?4mg/l，指示“<”是指在e-測(cè)試中沒(méi)有可見(jiàn)的培養(yǎng)物。

表12-假單胞菌屬

表13-大腸桿菌

表14-葡萄球菌屬

所有這些e-測(cè)試的結(jié)果清楚地顯示，增效劑能夠在許多種菌株中使許多種抗生素增效。

實(shí)施例3：耐受

將待研究的菌株的100μlhintonmueller肉湯培養(yǎng)物(重接種體>10¹⁰ufc/ml)鋪展在muellerhinton培養(yǎng)皿上，所述培養(yǎng)皿含有等于4倍待測(cè)試產(chǎn)品的cmi的油濃度。孵育48h后，觀察到可能是耐受突變的菌落的存在或不存在。

已經(jīng)注意到，苯甲酸芐酯或乙酸肉桂酯的使用還使得耐受細(xì)菌的發(fā)生降低。當(dāng)單獨(dú)使用時(shí)，在這些菌株中，苯甲酸芐酯或乙酸肉桂酯具有高于10000mg/l的cmi。

結(jié)果報(bào)告在下表中，其中：

ed對(duì)照或dmso＝僅加入蒸餾水或dmso

環(huán)丙沙星dmso：在dmso中加入環(huán)丙沙星

表15-菌株09003

在甲氧西林耐受的金黃色葡萄球菌(mrsa)中的單獨(dú)的環(huán)丙沙星引起許多突變的發(fā)生，而將乙酸肉桂酯或苯甲酸芐酯加入至環(huán)丙沙星不再引起突變的發(fā)生。

表16-菌株10168

在甲氧西林耐受的金黃色葡萄球菌(mrsa)中的單獨(dú)的環(huán)丙沙星引起許多突變的發(fā)生，而將乙酸肉桂酯或苯甲酸芐酯加入至環(huán)丙沙星不再引起突變的發(fā)生。

實(shí)施例4：生長(zhǎng)測(cè)試

1在菌株10168sarm中的生長(zhǎng)測(cè)試

在液體介質(zhì)中進(jìn)行生長(zhǎng)測(cè)試，在此之前將在合適的溶劑中的抗生素的增強(qiáng)劑分散于所述液體介質(zhì)中。

在乙酸肉桂酯(ca)/苯甲酸芐酯(bb)或被乙酸肉桂酯/苯甲酸芐酯增強(qiáng)的的存在下，測(cè)量細(xì)菌的生長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)。當(dāng)單獨(dú)使用時(shí)，在這些菌株中，苯甲酸芐酯或乙酸肉桂酯具有高于10000mg/l的cmi。

99/1表示64/100質(zhì)量比。

4xcmi是指抗生素的濃度是其cmi的4倍高，當(dāng)在被考慮的菌株中單獨(dú)使用所述抗生素時(shí)測(cè)量所述cmi。

奧格門(mén)汀64/100ac4xcmi是指的濃度為其cmi(單獨(dú)的)的4倍，并且/測(cè)試的化合物質(zhì)量比為64/100。

對(duì)照＝單獨(dú)的細(xì)菌

結(jié)果報(bào)告在下表中。

表17

應(yīng)注意，以非常低的劑量存在的乙酸肉桂酯或苯甲酸芐酯，使得的殺菌率提高。

實(shí)施例5：血漿抗菌功效

向balb/c小鼠注射(sc.)抗微生物產(chǎn)品或抗微生物劑+增強(qiáng)劑混合物。施用的劑量如下：

組1：30mg/kg(amc)

組2：30mg/kg+30mg/kg苯甲酸芐酯。

在不同的注射后時(shí)間，將小鼠安樂(lè)死，并將血液采樣，肝素化并離心，以提取其血漿。

進(jìn)行血漿的一系列連續(xù)稀釋(1/3)，并將這些不同血漿濃度的液滴沉積到接種的bairdparker介質(zhì)上(mrsa10168用于組amc)。在孵育24h后測(cè)量抗菌作用。連續(xù)稀釋使得抗微生物作用被確定，并與cmi作比較。因此，確定有效濃度/cmi比例。

結(jié)果報(bào)告在下表中：

表18

時(shí)間>cmi：超過(guò)cmi所花費(fèi)的時(shí)間

auc：曲線(xiàn)下面積

通過(guò)血漿的連續(xù)稀釋獲得血漿濃度與cmi的比例。雖然這種方法是半定量的，但是其能夠顯示當(dāng)存在苯甲酸芐酯時(shí)作用更強(qiáng)烈(更高的auc)。此外，明確地，苯甲酸芐酯的加入使得超過(guò)cmi所花費(fèi)的時(shí)間延長(zhǎng)。