發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。本發(fā)明的特定方面涉及用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥的化合物、藥物組合物及其用途。

發(fā)明背景

骨骼為一種高度動(dòng)態(tài)性組織，其通過被稱為骨重塑的過程得以不斷地更換和置換。骨重塑能力確保老骨或已損傷組織得以更新且骨骼架構(gòu)可最有效地適應(yīng)力學(xué)需求。骨重塑起始于在持續(xù)數(shù)周的再吸收階段中由破骨細(xì)胞移除老骨。骨母細(xì)胞隨后移行至侵蝕腔且在三或四個(gè)月內(nèi)沉積新骨。在正常骨骼中，骨重塑偶合破骨細(xì)胞與骨母細(xì)胞的活性，使得所鋪設(shè)的新骨的量等于所移除的骨，從而維持健康骨質(zhì)量。然而，如果骨再吸收超過骨形成，則存在凈骨損失。所造成的病狀骨質(zhì)疏松癥的特征在于過度骨再吸收和隨后的低骨質(zhì)量與增加的易骨折性。

骨質(zhì)疏松癥為用于以每單位體積的骨質(zhì)量減至充分力學(xué)支撐所需水平以下的水平為特征的具有多樣化病因的骨病的通用術(shù)語(yǔ)(krane,s.m.等人,“metabolicbonedisease”,harrison’sprinciplesofinternalmedicine,第1889頁(yè),第11版(1987))。骨質(zhì)疏松癥的一種形式為老年性骨質(zhì)疏松癥，其造成醫(yī)療保健經(jīng)費(fèi)中有一大部分花費(fèi)在老年群體上(resnick,n.m.等人,“senileosteoporosisreconsidered”,jama261,1025-1029(1989))。骨質(zhì)疏松癥的另兩種最常見形式為絕經(jīng)前或絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥和皮質(zhì)類固醇誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥?；加新阅I病(ckd)的患者可產(chǎn)生骨病，骨病可包括由于礦質(zhì)代謝變化和隨后的骨結(jié)構(gòu)變化所致的骨質(zhì)疏松癥。這些變化最通常隨腎功能的漸進(jìn)性喪失而惡化。實(shí)際上，且如以下段落中所概括，可發(fā)生許多病理學(xué)病狀，由此增加產(chǎn)生骨質(zhì)疏松癥的概率。骨軟化樣骨質(zhì)疏松癥具有骨質(zhì)疏松癥的許多癥狀，諸如鈣損失。骨量減少是指低于正常骨密度但未低達(dá)骨質(zhì)疏松癥中所觀測(cè)的骨密度。其被視為骨質(zhì)疏松癥的前兆。成骨不全癥為以傾向于骨折的骨脆弱為特征的先天性骨病癥。骨硬化病為罕見遺傳性疾病，由此骨骼硬化但比正常骨骼更脆弱。骨壞死為由于對(duì)骨骼的血液供應(yīng)損失而造成骨死亡和萎陷的疾病。佩吉特氏骨病(paget’sdiseaseofbone)是由骨骼過度降解和形成隨后擾亂骨重塑而造成。

眾所周知，多種疾病和病狀可能造成骨質(zhì)疏松癥：自身免疫疾病，其包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、狼瘡和多發(fā)性硬化；腸胃病癥，其包括乳糜瀉、發(fā)炎性腸病、胃切除術(shù)和胃腸道旁通術(shù)；內(nèi)分泌/激素病癥，其包括糖尿病、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、甲狀腺毒癥和庫(kù)欣氏綜合征(cushing’ssyndrome)；血液學(xué)病癥，其包括白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、鐮狀細(xì)胞病貧血(骨髓病癥)和地中海貧血；癌癥，其包括乳腺癌和前列腺癌；神經(jīng)系統(tǒng)病癥，其包括抑郁、帕金森氏病(parkinson’sdisease)和脊髓損傷；器官病，其包括肺病(copd、肺氣腫)、肝病和慢性腎??；強(qiáng)直性脊柱炎；aids/hiv；骨折；不良飲食，其包括進(jìn)食障礙和營(yíng)養(yǎng)不良；和絕經(jīng)(絕經(jīng)前和絕經(jīng)后)。

以往，骨母細(xì)胞被視為控制破骨細(xì)胞發(fā)育且因此控制骨再吸收的母細(xì)胞?，F(xiàn)今，免疫系統(tǒng)的細(xì)胞與骨細(xì)胞之間的相互作用已重新定義關(guān)于骨再吸收調(diào)節(jié)的考慮因素。對(duì)破骨細(xì)胞及其在骨破壞方面的作用的鑒定允許靶向療法來(lái)降低其再吸收能力。此類療法包括使用可干擾nfκb受體活化因子配體(rankl)的藥劑，該因子為促進(jìn)破骨細(xì)胞分化的關(guān)鍵細(xì)胞因子之一。此可通過使用amgen正在開發(fā)的重組fc骨保護(hù)素(fc-opg)或人源化抗rankl抗體(地諾單抗(denosumab))來(lái)實(shí)現(xiàn)。兩種產(chǎn)品均在骨損失的臨床前模型中顯示出效力，其中地諾單抗正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)；fc-opg由于免疫副作用而退出臨床試驗(yàn)。破骨細(xì)胞活性的其它抑制劑包括雙膦酸鹽、c-src抑制劑、組織蛋白酶k抑制劑和氯離子通道clc7抑制劑(gillespie,m.t.(2007)arthritisresearch&therapy,第9卷,第2期,第103-105頁(yè))。值得注意的是，雙膦酸鹽已成功用于限制關(guān)節(jié)炎嚙齒動(dòng)物模型中的骨損失，但應(yīng)注意，含氮雙膦酸鹽(其包括阿倫膦酸鹽(aldronate)、伊班膦酸鹽(ibandronate)、帕米膦酸鹽(pamidronate)和唑來(lái)膦酸鹽(zoledronate))增強(qiáng)γ/δt淋巴細(xì)胞的增殖，而非含氮雙膦酸鹽(例如氯屈膦酸鹽(clondronate))則不然(gillespie,m.t.(2007)arthritisresearch&therapy,第9卷,第2期,第103-105頁(yè))。

大部分當(dāng)前治療策略試圖減少骨骼鈣損失以延遲骨質(zhì)疏松癥發(fā)作(dawson-hughes,b.等人,“acontrolledtrialoftheeffectofcalciumsupplementationonbonedensityinpostmenopausalwomen”nejm323,878-883(1990))。因而，最常用于治療骨質(zhì)疏松癥的化合物屬于雙膦酸鹽藥物類別。其竭力與骨結(jié)合且由破骨細(xì)胞內(nèi)化從而抑制骨再吸收。雙膦酸鹽可通過口服或靜脈內(nèi)途徑施用。阿倫膦酸鹽(alendronate)(fosmax^tm，口服)為最常用于治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的處方藥。其它usfda批準(zhǔn)的雙膦酸鹽為利塞膦酸鹽(risedronate)(actonel^tm，口服)、依替膦酸鹽(etidronate)(didronel^tm，口服)、唑來(lái)膦酸鹽(aclasta^tm，輸注)和帕米膦酸鹽(aredial^tm,輸注)。口服雙膦酸鹽與胃腸副作用相關(guān)。與雙膦酸鹽相關(guān)的副作用一般包括股骨(大腿骨)中而非該骨的頭部(最常見骨折部位)的罕見骨折。然而，當(dāng)與跟骨質(zhì)疏松癥相關(guān)的常見髖部骨折的頻率相比時(shí)，與長(zhǎng)期使用雙膦酸鹽相關(guān)的這些骨折為罕見的。盡管如此，仍存在長(zhǎng)期雙膦酸鹽使用可能導(dǎo)致過度抑制骨更換與隨后骨中的微裂縫難以痊愈、這些裂縫蔓延和最終造成非典型骨折的問題。另外，食道癌風(fēng)險(xiǎn)增加與長(zhǎng)期使用口服雙膦酸鹽相關(guān)。此外已報(bào)導(dǎo)雙膦酸鹽使用(特定而言，唑來(lái)膦酸鹽和阿倫膦酸鹽)為心房顫動(dòng)的風(fēng)險(xiǎn)因素。最后，靜脈內(nèi)施用雙膦酸鹽用于治療癌癥與頜部骨壞死相關(guān)。

甲狀旁腺激素(1-84pth)在鈣體內(nèi)平衡方面起重要作用且在間歇性施用后對(duì)骨重塑具有合成代謝作用。經(jīng)usfda批準(zhǔn)的特立帕肽(teriparatide)(forteo)為pth的一部分(氨基酸1-34)的重組形式，其用于治療處在高骨折風(fēng)險(xiǎn)下的男性和絕經(jīng)后女性的骨質(zhì)疏松癥。一定程度上其可在標(biāo)示外用于加速骨折痊愈。特立帕肽增強(qiáng)骨母細(xì)胞形成且防止骨母細(xì)胞凋亡。然而，盡管特立帕肽對(duì)骨骼具有合成代謝作用，用于治療骨質(zhì)疏松癥的用途已由于在動(dòng)物模型中的相關(guān)高骨肉瘤發(fā)病率而有所保留。因此，不推薦特立帕肽用于具有增加的骨腫瘤風(fēng)險(xiǎn)的患者。

由于長(zhǎng)期激素替代療法具有潛在不利作用(心血管病癥、子宮和癌等)，不再推薦其用于預(yù)防骨質(zhì)疏松癥。因而，通過引入選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑(serm)類別的藥物(例如他莫西芬(tamoxifen)和雷洛昔芬(raloxifene))在一定程度上替代此藥物。usfda批準(zhǔn)雷洛昔芬鹽酸鹽(evista)用于在絕經(jīng)后女性中預(yù)防骨質(zhì)疏松癥。事實(shí)上，與每日口服阿倫膦酸鹽(雙膦酸鹽)的直接比較顯示每日口服雷洛昔芬在降低骨折風(fēng)險(xiǎn)方面同樣有效。然而，雷洛昔芬的副作用包括致命性中風(fēng)和靜脈血栓栓塞的風(fēng)險(xiǎn)增加。其它不利作用包括腿腫脹、呼吸困難和視力變化。

地諾單抗為用于治療骨質(zhì)疏松癥、治療誘導(dǎo)的骨損失、骨轉(zhuǎn)移、多發(fā)性骨髓瘤和骨巨細(xì)胞瘤的完全人類單株抗體。usfda已批準(zhǔn)地諾單抗(prolia)用于在絕經(jīng)后女性中預(yù)防骨質(zhì)疏松癥和(xgeva)用于在實(shí)體腫瘤骨轉(zhuǎn)移患者中預(yù)防骨骼相關(guān)事件。此抗體結(jié)合并抑制rankl(rank配體)，其為在許多骨損失病狀中充當(dāng)骨移除的主要信號(hào)的蛋白質(zhì)。破骨細(xì)胞前驅(qū)物體(前驅(qū)物破骨細(xì)胞)表達(dá)rank受體。隨后的rankl結(jié)合誘導(dǎo)所述受體活化和前驅(qū)物破骨細(xì)胞成熟為破骨細(xì)胞。然而，地諾單抗的副作用包括尿道和呼吸道感染、白內(nèi)障、便秘、皮疹和關(guān)節(jié)疼痛。

如從上文可見，多種選擇可用于預(yù)防及/或治療骨質(zhì)疏松癥，但此選擇隱含不存在可用于預(yù)防及/或治療骨質(zhì)疏松癥之通用藥物的事實(shí)。如從上文還顯而易見，所提及的治療選擇各自伴有多種副作用。實(shí)際上，科學(xué)文獻(xiàn)中充分記錄以上批準(zhǔn)供人使用的藥物和副作用。舉例來(lái)說，關(guān)于骨質(zhì)疏松癥受試者和當(dāng)前療法及其副作用的相對(duì)近期綜述性論文為“osteoporosis-acurrentviewofpharmacologicalpreventionandtreatment”das,s.crockett,j.c.drugdesign,developmentandtherapy7,435-448(2013)。因而，需要用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥的更通用、更安全(尤其是考慮到增加壽命且因此增加藥物施用的持續(xù)時(shí)間)的藥物。因此，需要新的治療方法。

頒予astrazenecaab的美國(guó)專利第6,372,728號(hào)(2002)描述一種改良的雙膦酸鹽口服制劑，例如阿倫膦酸鹽。根據(jù)此專利，許多雙膦酸鹽的口服生物利用度在膳食之間為1％至10％。該改進(jìn)的制劑采用中鏈甘油酯吸收增強(qiáng)劑。頒予賓夕法尼亞大學(xué)的美國(guó)專利第5,070,108號(hào)(1991)要求用諸如依曲替酯(etretinate)的類視色素治療骨質(zhì)疏松癥。盡管最初由fda批準(zhǔn)用于治療銀屑病，但依曲替酯已由于高出生缺陷風(fēng)險(xiǎn)而撤出北美市場(chǎng)。奧當(dāng)卡替(odanacatib)為一種正在臨床開發(fā)中用于治療骨質(zhì)疏松癥和骨轉(zhuǎn)移的新穎藥物，其為酶組織蛋白酶k的抑制劑。

本發(fā)明旨在解決受或易受骨質(zhì)疏松癥困擾的患者對(duì)新治療方法、化合物和藥物組合物的需要。

根據(jù)對(duì)本文中的論述、圖和發(fā)明說明的回顧，本發(fā)明的其它特征將顯而易見。

發(fā)明概要

本發(fā)明的一般方面涉及如本文中所定義的根據(jù)式i的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的藥學(xué)用途。

本發(fā)明的特定方面涉及化合物和組合物用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥的用途。某些方面涉及如本文中所定義的根據(jù)式i的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽，其是作為針對(duì)受試者中各種形式的骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防有效和/或治療有效的藥劑。根據(jù)特定實(shí)施方案，所述受試者受或易受骨損失、骨折和類似病狀困擾。

根據(jù)特定實(shí)施方案，本發(fā)明的化合物和組合物適用于刺激骨形成和/或刺激骨重塑和/或刺激骨母細(xì)胞分化和礦化和/或抑制骨再吸收。

本發(fā)明的一個(gè)特定方面涉及一種用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥的方法，其包括向有需要的受試者施用如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的步驟。在一些實(shí)施方案中，骨質(zhì)疏松癥選自由絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(原發(fā)性1型)、原發(fā)性2型骨質(zhì)疏松癥、繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥、異常高破骨細(xì)胞生成、骨軟化樣骨質(zhì)疏松癥、骨量減少、成骨不全癥、骨硬化病、骨壞死、佩吉特氏骨病、低磷酸鹽血癥及其組合組成的組。在特定實(shí)施方案中，骨質(zhì)疏松癥為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(原發(fā)性1型)、原發(fā)性2型骨質(zhì)疏松癥或繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥。在更特定實(shí)施方案中，骨質(zhì)疏松癥為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(原發(fā)性1型)。

本發(fā)明還涉及治療方法，其中本發(fā)明化合物在受試者中展現(xiàn)以下生物活性中的一種或多種：抑制破骨細(xì)胞生成；由受刺激的破骨細(xì)胞前驅(qū)物細(xì)胞刺激介白素-12(il-12)產(chǎn)生；降低骨細(xì)胞中的酸性磷酸酶活性(顯示破骨細(xì)胞生成減少)；降低骨中的nf-κb受體活化因子配體(rankl)/骨保護(hù)素(opg)比率(rankl/pg比率)，其指示破骨細(xì)胞生成減少；和增加骨中的膠原蛋白含量。

根據(jù)另一方面，本發(fā)明的方面涉及一種用于預(yù)防和/或減少骨損失的方法，其包括向有需要的受試者施用如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的步驟。在一個(gè)實(shí)施方案中，施用所述化合物減少鈣損失。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述受試者受或易受骨質(zhì)疏松癥困擾。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述受試者為經(jīng)絕后女性。

根據(jù)另一方面，本發(fā)明涉及一種用于抑制破骨細(xì)胞生成的方法，其包括使破骨細(xì)胞前驅(qū)物細(xì)胞與如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸，其中所述化合物抑制所述前驅(qū)物細(xì)胞分化成破骨細(xì)胞。

根據(jù)另一方面，本發(fā)明涉及一種通過受刺激的破骨細(xì)胞前驅(qū)物細(xì)胞刺激介白素-12(il-12)產(chǎn)生的方法，其包括使所述受刺激的破骨細(xì)胞前驅(qū)物細(xì)胞與如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸，其中在所述化合物存在下可測(cè)量到增加的il-12產(chǎn)生。

根據(jù)另一方面，本發(fā)明涉及一種用于降低骨細(xì)胞中的酸性磷酸酶活性的方法，其包括使所述骨細(xì)胞與如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸，其中在所述化合物存在下可測(cè)量到降低的磷酸酶活性。

根據(jù)另一方面，本發(fā)明涉及一種用于降低骨細(xì)胞中的nf-κb受體活化因子配體/骨保護(hù)素表達(dá)和/或活性比率(rankl/opg比率)的方法，其包括使所述骨細(xì)胞與如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸。

根據(jù)另一方面，本發(fā)明涉及一種用于增加骨中的膠原蛋白含量的方法，其包括使所述骨與如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸。

根據(jù)另一方面，本發(fā)明涉及一種用于刺激骨形成和/或用于刺激骨重塑和/或用于刺激骨母細(xì)胞分化和礦化和/或用于抑制骨再吸收的方法，其包括使所述骨中的骨母細(xì)胞與如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸。

本發(fā)明的其它方面涉及上文所提及的方法，其還包括伴隨施用選自由以下各項(xiàng)組成的組的藥物的步驟：雙膦酸鹽、奧當(dāng)卡替、阿倫膦酸鹽、利塞膦酸鹽、依替膦酸鹽、唑來(lái)膦酸鹽、帕米膦酸鹽、特立帕肽、他莫西芬、雷洛昔芬和地諾單抗。

本發(fā)明的另一相關(guān)方面涉及包含式i化合物的藥物組合物，其用于制造藥物，例如用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥的藥物。一個(gè)特定實(shí)例為用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其包含如本文中所定義的由式i表示的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。另一特定實(shí)例為用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥的藥物組合物，其包含如表1中所定義的化合物，且更具體而言，包含化合物i的藥物組合物。相關(guān)方面涉及用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥的方法，其包括向患者施用治療有效量的如本文中所定義的藥物組合物。

根據(jù)另一方面，本發(fā)明涉及一種如本文中所定義的由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或包含其的組合物，其用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥。

根據(jù)以下說明、權(quán)利要求書和本文中的概括，本發(fā)明的其它方面對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員將顯而易見。

附圖簡(jiǎn)述

圖1為根據(jù)實(shí)施例3說明化合物i對(duì)卵巢切除(ovx)的大鼠的體重的效應(yīng)的線形圖。

圖2為根據(jù)實(shí)施例4說明化合物i對(duì)卵巢切除(ovx)的大鼠的尿液中鈣的效應(yīng)的一組條形圖。

圖3為根據(jù)實(shí)施例4說明化合物i對(duì)卵巢切除(ovx)的大鼠的血清中酸性磷酸酶活性的效應(yīng)的一組條形圖。

圖4為根據(jù)實(shí)施例4說明化合物i對(duì)卵巢切除(ovx)的大鼠的脛骨中破骨細(xì)胞標(biāo)記的rankl/opgmrna表達(dá)的效應(yīng)的條形圖。

圖5為根據(jù)實(shí)施例4說明化合物i對(duì)大鼠股骨干骺端中的膠原蛋白含量的效應(yīng)的條形圖。

圖6為根據(jù)實(shí)施例4說明化合物i對(duì)大鼠股骨干骺端中的膠原蛋白含量的效應(yīng)的一組圖片。

圖7為對(duì)應(yīng)于圖6的各圖的一組放大圖。

發(fā)明詳述

本發(fā)明公開了式i化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽、包含其的組合物及其用途。本發(fā)明的各種實(shí)施方案包括：

a)本發(fā)明化合物

根據(jù)一個(gè)方面，本發(fā)明關(guān)于由式i表示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的藥學(xué)用途：

其中：

r1和r2獨(dú)立地等于h、f或oh；

當(dāng)b為h時(shí)，a為(ch2)mcooh、w(ch2)mcooh或或當(dāng)a為h時(shí)，b為(ch2)mcooh、w(ch2)mcooh或或

a與b共價(jià)鍵結(jié)以形成經(jīng)cooh取代的五(5)、六(6)或七(7)元環(huán)烷基；

其中：

y為o、s、nh或ch2；

w為o、s或nh；

m為0至2；且

p為3至7；

d為co(ch2)nch3或choh(ch2)nch3或o(ch2)nch3，其中n為2至6；且

e為h或f。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，當(dāng)b為h時(shí)，a為(ch2)mcooh、w(ch2)mcooh或或當(dāng)a為h時(shí)，b為(ch2)mcooh、w(ch2)mcooh或且a與b不共價(jià)鍵結(jié)在一起以形成經(jīng)cooh取代的環(huán)烷基。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，當(dāng)b為h時(shí)，a為或當(dāng)a為h時(shí)，b為或a與b共價(jià)鍵結(jié)在一起以形成經(jīng)cooh取代的五(5)、六(6)或七(7)元環(huán)烷基。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，n為3至6，或n為4至6，或n為6。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，r1為h且r2為h。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，a為h且b為其中y為o，且p為5至7，且p優(yōu)選為7。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，m為1至2；且m優(yōu)選為1或m優(yōu)選為2。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，e為h；且d為co(ch2)nch3或choh(ch2)nch3或o(ch2)nch3，其中n為2至6，或n為4至6。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，d為co(ch2)nch3，其中n為2至6，或n為4至6。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，e為h；且d為co(ch2)nch3，其中n為2至6，或n為4至6。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，所述化合物具有式i，其中r1和r2為h；a為h；b為其中y為o，且p為5至7；e為h；d為co(ch2)nch3或choh(ch2)nch3或o(ch2)nch3；且n為2至6，或n為4至6。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，所述化合物具有式i，其中r1和r2為h；a為h；b為其中y為o，且p為5至7；e為h；d為co(ch2)nch3；且n為2至6，或n為4至6。

根據(jù)一個(gè)特定實(shí)施方案，所述化合物具有式i，其中n為4至6；r1和r2為h；b為h；a為y為o；且p為5至7；e為h；d為co(ch2)nch3或choh(ch2)nch3或o(ch2)nch3；且n為2至6，或n為4至6。

如本文中所使用，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”欲意謂其中具有規(guī)定數(shù)目的碳原子的單環(huán)飽和脂族烴基，舉例來(lái)說，如在c5-c7環(huán)烷基中，定義為包括具有呈單環(huán)排列的5、6或7個(gè)碳的基團(tuán)。c5-c7環(huán)烷基的實(shí)例包括但不限于環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基。

式i化合物的實(shí)例包括但不限于下文于表1中所列出的化合物i至化合物vii。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述化合物由化合物i至化合物vii中的任一者的酸形式或藥學(xué)上可接受的鹽表示。

申請(qǐng)人已在別處描述結(jié)構(gòu)與一些本發(fā)明化合物的結(jié)構(gòu)相關(guān)的化合物。參考例如國(guó)際pct申請(qǐng)案wo2012/055014中所公開的化合物，該申請(qǐng)案以引用的方式整體并入本文中。因此，在特定實(shí)施方案中，此pct所公開的化合物中的任一種或全部均不包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。

鹽

如本文中所使用，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”欲意謂堿加成鹽。藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)例還描述于例如berge等人,“pharmaceuticalsalts”,j.pharm.sci.66,1-19(1977)中。藥學(xué)上可接受的鹽可通過傳統(tǒng)化學(xué)方法由含有酸性部分的母體藥劑合成。一般來(lái)說，此類鹽是通過使這些藥劑的游離酸形式與化學(xué)計(jì)算量的適當(dāng)堿在水中或在有機(jī)溶劑中或在兩者的混合物中反應(yīng)來(lái)制備。鹽可在原地、在最終分離或純化藥劑期間或通過分別使經(jīng)純化的本發(fā)明化合物以其游離酸形式與所要相應(yīng)堿反應(yīng)并分離由此形成的鹽來(lái)制備。

式i化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可選自由鈉、鉀、鈣、鎂和鋰、銨、錳、鋅、鐵或銅的堿加成鹽組成的組。在優(yōu)選實(shí)施方案中，根據(jù)本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可為鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽或鋰鹽。更優(yōu)選地，藥學(xué)上可接受的鹽為鈉鹽。

所描述的化合物的所有酸、鹽和其它離子和非離子形式均作為本發(fā)明化合物包括在內(nèi)。舉例來(lái)說，如果化合物顯示為本文中的酸，則還包括所述化合物的鹽形式。同樣，如果化合物顯示為鹽，則還包括酸形式。

前藥

在某些實(shí)施方案中，如由通式i表示的本發(fā)明化合物(其中所述化合物以游離羧酸形式存在)還可包括所有藥學(xué)上可接受的鹽、等排等效物(諸如四唑)及其前藥形式。后者的實(shí)例包括在醇或胺(包括氨基酸)與式i所定義的游離酸的反應(yīng)后所獲得的藥學(xué)上可接受的酯或酰胺。

手性

本發(fā)明化合物或、其藥學(xué)上可接受的鹽或前藥可含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱中心、手性軸和手性面，且因而可能產(chǎn)生對(duì)映異構(gòu)體、非對(duì)映異構(gòu)體和其它立體異構(gòu)體形式，且可依據(jù)絕對(duì)立體化學(xué)加以定義，諸如(r)-或(s)-。本發(fā)明意欲包括所有此類可能的異構(gòu)體以及其外消旋和光學(xué)純形式。光學(xué)活性(+)和(-)、(r)-和(s)-異構(gòu)體可使用手性合成子或手性試劑來(lái)制備，或使用諸如反相hplc的傳統(tǒng)技術(shù)來(lái)拆分?？芍苽渫庀旌衔锴掖撕蠓蛛x成個(gè)別光學(xué)異構(gòu)體，或可通過手性合成來(lái)制備這些光學(xué)異構(gòu)體。對(duì)映異構(gòu)體可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法加以拆分，例如通過形成可通過結(jié)晶、氣-液或液相色譜法、一種對(duì)映異構(gòu)體與對(duì)映異構(gòu)體專用試劑的選擇性反應(yīng)加以分離的非對(duì)映異構(gòu)鹽。本領(lǐng)域技術(shù)人員還應(yīng)了解，在通過分離技術(shù)將所要對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成另一化學(xué)實(shí)體的情況下，隨后需要額外步驟來(lái)形成所要對(duì)映異構(gòu)形式。或者，可通過使用光學(xué)活性試劑、基質(zhì)、催化劑或溶劑的不對(duì)稱合成，或通過以不對(duì)稱轉(zhuǎn)化將一種對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成另一種對(duì)映異構(gòu)體來(lái)合成特定對(duì)映異構(gòu)體。

本發(fā)明的某些化合物可以兩性離子形式存在，且本發(fā)明包括這些化合物的兩性離子形式及其混合物。

水合物

另外，本發(fā)明化合物還可以水合形式和無(wú)水形式存在。本文中所描述的各式中的任一者的水合物均作為本發(fā)明化合物包括在內(nèi)，其可作為單水合物或呈多水合物形式存在。

b)制備方法

一般來(lái)說，所有本發(fā)明化合物均可通過任何傳統(tǒng)方法，使用容易獲得和/或可按慣例制備的起始物質(zhì)、試劑和傳統(tǒng)合成程序來(lái)制備。尤其受關(guān)注者是hundertmark,t.；littke,a.f.；buchwald,s.l.；fu,g.c.org.lett.12,1729-1731(2000)的研究。

下文的例示部分提供用于合成化合物i至化合物vii的一般流程和特定但非限制性實(shí)施例。

c)藥學(xué)應(yīng)用

如本文中所指示和例示，本發(fā)明化合物具有有益藥學(xué)性質(zhì)，且這些化合物可在受試者中具有適用藥學(xué)應(yīng)用。發(fā)明者所涵蓋的醫(yī)學(xué)和藥學(xué)應(yīng)用包括但不限于預(yù)防和/或治療各種形式的骨質(zhì)疏松癥。如本文中所使用，術(shù)語(yǔ)“骨質(zhì)疏松癥”是指以骨質(zhì)量和密度下降為特征的漸進(jìn)性骨病，其可能導(dǎo)致骨折風(fēng)險(xiǎn)增加。術(shù)語(yǔ)“骨質(zhì)疏松癥”涵蓋原發(fā)性1型骨質(zhì)疏松癥或絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥(最常見于絕經(jīng)之后的女性中)、原發(fā)性2型骨質(zhì)疏松癥(發(fā)生于女性和男性中，一般在75歲之后)和繼發(fā)性骨質(zhì)疏松癥(其可出現(xiàn)在任何年齡，此形式是由慢性素因性醫(yī)學(xué)問題或疾病或者長(zhǎng)期使用諸如糖皮質(zhì)激素的藥物治療引起(該疾病則可稱為類固醇或糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥))。如本文中所使用，“骨質(zhì)疏松癥”還包括涉及骨質(zhì)量和/或密度損失的骨病癥，諸如異常高破骨細(xì)胞生成、骨軟化樣骨質(zhì)疏松癥、骨量減少、成骨不全癥、骨硬化病、骨壞死、佩吉特氏骨病、低磷酸鹽血癥及其組合。

目前已知，多種疾病和病狀可能造成骨質(zhì)疏松癥，且本發(fā)明可適用于預(yù)防和/或治療與這些病因中的一種或多種直接或間接相關(guān)的骨質(zhì)疏松癥：

·自身免疫疾病，其包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、狼瘡和多發(fā)性硬化；

·腸胃病癥，其包括乳糜瀉、發(fā)炎性腸病、胃切除術(shù)和胃腸道旁通術(shù)；

·內(nèi)分泌/激素病癥，其包括糖尿病、甲狀旁腺功能亢進(jìn)、甲狀腺毒癥和庫(kù)欣氏綜合征；

·血液學(xué)病癥，其包括白血病、淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、鐮狀細(xì)胞病貧血(骨髓病癥)和地中海貧血；

·癌癥，其包括乳腺癌和前列腺癌；

·神經(jīng)系統(tǒng)病癥，其包括抑郁、帕金森氏病和脊髓損傷；

·器官病，其包括肺病(copd、肺氣腫)、肝病和慢性腎病(ckd)；

·強(qiáng)直性脊椎炎；

·aids/hiv；

·不良飲食，其包括進(jìn)食障礙和營(yíng)養(yǎng)不良；和

·絕經(jīng)前和絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥和皮質(zhì)類固醇誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥。

在一個(gè)實(shí)施方案中，骨質(zhì)疏松癥為原發(fā)性1型骨質(zhì)疏松癥或絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥。在另一實(shí)施方案中，骨質(zhì)疏松癥為原發(fā)性2型骨質(zhì)疏松癥。

術(shù)語(yǔ)“受試者”包括可能發(fā)生骨質(zhì)疏松癥或易感染此類疾病的活生物體。術(shù)語(yǔ)“受試者”包括動(dòng)物，諸如哺乳動(dòng)物或鳥類。受試者優(yōu)選為哺乳動(dòng)物。受試者更優(yōu)選為人。受試者更優(yōu)選為需要治療的人類患者。在優(yōu)選實(shí)施方案中，受試者為具有以下狀況中的任一種或受其困擾的人士：原發(fā)性1型骨質(zhì)疏松癥、絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥、絕經(jīng)期(絕經(jīng)前和絕經(jīng)后)、原發(fā)性2型骨質(zhì)疏松癥、75歲以上、骨折、骨質(zhì)疏松癥、慢性素因性醫(yī)學(xué)問題或疾病、長(zhǎng)期使用諸如糖皮質(zhì)激素的藥物治療、異常高破骨細(xì)胞生成、骨軟化樣骨質(zhì)疏松癥、骨量減少、成骨不全癥、骨硬化病、骨壞死、佩吉特氏骨病、低磷酸鹽血癥及其組合。在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，受試者為絕經(jīng)后女性。

如本文中所使用，“預(yù)防(preventing/prevention)”意欲指至少降低罹患疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)(或易感性)的可能性(即，使得可能暴露于或傾向于所述疾病但尚未經(jīng)歷或顯示所述疾病的癥狀的患者中不產(chǎn)生所述疾病的至少一種臨床癥狀)。用于鑒別此類患者的生物學(xué)和生理學(xué)參數(shù)提供于本文中且同樣為主治醫(yī)師所熟知的。在優(yōu)選實(shí)施方案中，“預(yù)防(preventing/prevention)”是指預(yù)防骨質(zhì)量和/或骨密度降低，和/或降低骨折風(fēng)險(xiǎn)。

術(shù)語(yǔ)“治療(treatment/treating)”受試者包括在延遲、穩(wěn)定、治愈、痊愈、緩解、減輕、改變、醫(yī)治、減少惡化、改善、改良或影響疾病或病狀、疾病或病狀的癥狀或疾病或病狀的風(fēng)險(xiǎn)(或易感性)的目的下向受試者應(yīng)用或施用本發(fā)明化合物(或向得自受試者的細(xì)胞或組織應(yīng)用或施用本發(fā)明化合物)。術(shù)語(yǔ)“治療”是指對(duì)損傷、病理或病狀的成功治療或改善的任何指示，包括任何客觀或主觀參數(shù)，諸如減輕；緩解；減輕惡化速率；減輕疾病嚴(yán)重程度；穩(wěn)定、削弱癥狀或使損傷、病理或病狀對(duì)受試者更可耐受；減緩?fù)嘶蛩ト跛俾?；使退化終點(diǎn)不太虛弱；或改良受試者的身體或精神健康。在一些實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“治療”可包括增加需要額外治療之前的受試者壽命預(yù)期和/或延遲。在優(yōu)選實(shí)施方案中，“治療(treatment/treating)”是指增加骨質(zhì)量和/或骨密度，和/或加快骨折痊愈。

此外，在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物用于單一療法以便預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥。在其它實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物與已批準(zhǔn)的藥物組合使用，包括但不限于用于治療骨質(zhì)疏松癥的藥物?？膳c本發(fā)明化合物組合使用的已知骨質(zhì)疏松癥相關(guān)藥劑的實(shí)例包括但不限于雙膦酸鹽、奧當(dāng)卡替、阿倫膦酸鹽、利塞膦酸鹽、依替膦酸鹽、唑來(lái)膦酸鹽、帕米膦酸鹽、特立帕肽、他莫西芬、雷洛昔芬和地諾單抗。

因此，根據(jù)本發(fā)明的治療方法還可包括共同施用至少一種根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，連同施用另一治療有效藥劑。因此，本發(fā)明的另一方面涉及伴隨治療性治療受試者的方法，其包括向有需要的受試者施用有效量的第一藥劑和第二藥劑，其中所述第一藥劑如式i中所定義，且所述第二藥劑是用于預(yù)防或治療如上文所定義的病癥或疾病中的任一種。如本文中所使用，如詞組“伴隨治療性治療”或“伴隨一起”中的術(shù)語(yǔ)“伴隨(concomitant/concomitantly)”包括在第二藥劑存在下施用第一藥劑。伴隨治療性治療方法包括共同施用第一藥劑、第二藥劑、第三藥劑或額外藥劑的方法。伴隨治療性治療方法還包括在第二藥劑或額外藥劑存在下施用第一藥劑或額外藥劑的方法，其中所述第二藥劑或額外藥劑例如可能在先前施用。伴隨治療性治療方法可由不同的行動(dòng)者逐步執(zhí)行。舉例來(lái)說，一名行動(dòng)者可向受試者施用第一藥劑，且同樣第二名行動(dòng)者可向所述受試者施用第二藥劑且所述施用步驟可同時(shí)或幾乎同時(shí)或相隔一定時(shí)間執(zhí)行，只要所述第一藥劑(和/或額外藥劑)在施用所述第二藥劑(和/或額外藥劑)之后施用即可。行動(dòng)者和受試者可為同一實(shí)體(例如，人)。

因此，本發(fā)明還涉及一種用于預(yù)防、減少或消除上述疾病或病狀中任一種的癥狀或并發(fā)癥的方法。所述方法包括向有需要的受試者施用包含至少一種本發(fā)明化合物的第一藥物組合物和包含一種或多種額外活性成分的第二藥物組合物，其中所有活性成分均以足以抑制、減少或消除欲治療的疾病或病狀的一種或多種癥狀或并發(fā)癥的量施用。在一個(gè)方面中，所述第一藥物組合物和所述第二藥物組合物的施用短暫間隔至少約兩分鐘。所述第一藥劑優(yōu)選為如本文中所定義的式i化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，例如鈉鹽。所述第二藥劑可選自上文所提供的化合物清單(例如，用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥的藥劑或藥物)。

抑制破骨細(xì)胞生成

破骨細(xì)胞為一種可再吸收骨組織的骨細(xì)胞類型。破骨細(xì)胞通過分泌酸和膠原蛋白酶在分子層級(jí)上分解骨骼。此過程稱為骨再吸收。破骨細(xì)胞生成是指破骨細(xì)胞前驅(qū)物體分化成破骨細(xì)胞。在預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥時(shí)，需要減少破骨細(xì)胞生成。

骨母細(xì)胞為一種可合成骨骼的細(xì)胞類型。骨母細(xì)胞由間質(zhì)干細(xì)胞產(chǎn)生。在預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥時(shí)，需要刺激骨母細(xì)胞分化。

如下文于實(shí)施例中所示，本發(fā)明化合物能夠抑制和/或減少破骨細(xì)胞生成。此是由例如以下各項(xiàng)證明：受lps刺激的raw264.7細(xì)胞中的il-12產(chǎn)生的強(qiáng)誘導(dǎo)(實(shí)施例3，表1)；體內(nèi)鈣損失減少(實(shí)施例4；圖2)；體內(nèi)酸性磷酸酶活性降低(實(shí)施例4；圖3)；體內(nèi)rankl/opg的mrna表達(dá)減少(實(shí)施例4；圖4)；和體內(nèi)膠原蛋白含量增加(實(shí)施例4；圖5、圖6和圖7)。

這些結(jié)果表明本發(fā)明化合物能夠經(jīng)由抑制和/或降低破骨細(xì)胞活性而預(yù)防/治療骨質(zhì)疏松癥。

結(jié)果還顯示本發(fā)明化合物能夠預(yù)防和/或減少骨損失，包括但不限于鈣損失。因此，這些結(jié)果進(jìn)一步表明本發(fā)明化合物能夠經(jīng)由刺激骨母細(xì)胞分化而預(yù)防/治療骨質(zhì)疏松癥。

刺激介白素-12(il-12)產(chǎn)生

如下文于實(shí)施例中所示，本發(fā)明化合物在lps存在下誘導(dǎo)il-12產(chǎn)生。這些結(jié)果表明，這些化合物由于誘導(dǎo)il-12而能夠預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥。此結(jié)果受到科學(xué)文獻(xiàn)支持，所述科學(xué)文獻(xiàn)教示il-12對(duì)破骨細(xì)胞生成具有直接抑制效應(yīng)。

因此，在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物適用于刺激介白素-12(il-12)產(chǎn)生，包括但不限于由受刺激的破骨細(xì)胞前驅(qū)物細(xì)胞產(chǎn)生。

降低酸性磷酸酶活性

如下文于實(shí)施例中所示，本發(fā)明化合物降低酶酸性磷酸酶活性，如在卵巢切除大鼠的血清中所測(cè)量。這些結(jié)果表明，這些化合物由于降低酶酸性磷酸酶活性而能夠預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥。

因此，在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物適用于降低骨細(xì)胞中的酸性磷酸酶活性。

減少nf-κb受體活化因子配體(rankl)的表達(dá)

如下文于實(shí)施例中所示，本發(fā)明化合物減少rankl的mrna表達(dá)，如在卵巢切除大鼠的脛骨中所測(cè)量。這些結(jié)果表明，這些化合物由于降低rankl表達(dá)和/或生物活性而能夠預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥。

因此，在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物適用于降低骨細(xì)胞中的rankl表達(dá)和/或活性。

增加膠原蛋白含量

如下文于實(shí)施例中所示，本發(fā)明化合物增加骨中的膠原蛋白含量，如在卵巢切除大鼠的股骨干骺端中所測(cè)量。這些結(jié)果表明，這些化合物能夠預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥，如骨中的膠原蛋白含量增加所證明。

因此，在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物適用于增加活骨中的膠原蛋白含量。

刺激骨形成

在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物和組合物適用于刺激骨形成和/或刺激骨重塑和/或刺激骨母細(xì)胞分化和礦化和/或抑制骨再吸收。

d)藥物組合物和制劑

本發(fā)明的一個(gè)相關(guān)方面涉及包含治療有效量的本文中所描述的一種或多種本發(fā)明化合物(例如式i化合物)的藥物組合物。如上文所指示，本發(fā)明的藥物組合物可適用于：預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥；抑制破骨細(xì)胞生成；刺激受刺激的破骨細(xì)胞前驅(qū)物細(xì)胞的介白素-12(il-12)產(chǎn)生；降低骨細(xì)胞中的酸性磷酸酶活性；降低骨細(xì)胞中的nf-κb受體活化因子配體(rankl)的表達(dá)；增加活骨中的膠原蛋白含量；刺激骨形成；刺激骨重塑；刺激骨礦化；和/或抑制骨再吸收。

如本文中所使用，術(shù)語(yǔ)“治療有效量”意謂當(dāng)施用受試者以治療或預(yù)防特定病癥、疾病或病狀時(shí)足以對(duì)所述病癥、疾病或病狀實(shí)現(xiàn)此種治療或預(yù)防的化合物用量。劑量和治療有效量可例如視多種因素而變化，包括所采用的特定藥劑的活性、受試者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食、施用時(shí)間、施用途徑、排泄率和任何藥物組合，適當(dāng)時(shí)，醫(yī)學(xué)從業(yè)者需要化合物對(duì)受試者具有的效應(yīng)(例如，如所多種因素，包括骨質(zhì)量和/或骨密度增加(其減少或降低)、骨折風(fēng)險(xiǎn)降低等所證明的總體或部分反應(yīng))、化合物的性質(zhì)(例如生物利用度、穩(wěn)定性、效力、毒性等)以及受試者所患有的特定病癥。另外，治療有效量可視受試者的血液參數(shù)(例如鈣水平、脂質(zhì)分布、胰島素水平、血糖)、疾病狀態(tài)的嚴(yán)重程度、器官功能或者潛在疾病或并發(fā)癥而定。此類適當(dāng)劑量可使用任何可用測(cè)定來(lái)確定，包括本文中所描述的測(cè)定。當(dāng)對(duì)人施用一種或多種本發(fā)明化合物時(shí)，主治醫(yī)師可例如首先開具相對(duì)較低劑量的處方，隨后增加劑量直至獲得適當(dāng)反應(yīng)。欲施用的劑量最終將由腫瘤學(xué)家裁量。然而，一般來(lái)說，預(yù)見本發(fā)明化合物的劑量在人中可在每天約1至約50mg/kg的范圍內(nèi)。在所選實(shí)施方案中，所述范圍在人中可在每天1至30mg/kg之間。在所選實(shí)施方案中，所述范圍在人中可在每天1至20mg/kg之間。在所選實(shí)施方案中，所述范圍在人中可在每天5至18mg/kg之間。在所選實(shí)施方案中，所述范圍在人中可在每天1至18mg/kg之間。

如本文中所使用，術(shù)語(yǔ)“藥物組合物”是指存在至少一種如本文中所定義的根據(jù)式i的本發(fā)明化合物和至少一種藥學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、媒介物或賦形劑。如本文中所使用，術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的載體”、“藥學(xué)上可接受的稀釋劑”或“藥學(xué)上可接受的賦形劑”欲意謂而不限于可接受用于受試者(優(yōu)選為人)的任何佐劑、載體、賦形劑、助流劑、甜味劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、風(fēng)味增強(qiáng)劑、界面活性劑、潤(rùn)濕劑、分散劑、懸浮劑、穩(wěn)定劑、等滲劑、溶劑、乳化劑或囊封劑，諸如脂質(zhì)體、環(huán)糊精、囊封聚合物遞送系統(tǒng)或聚乙二醇基質(zhì)。其優(yōu)選是指由或可由聯(lián)邦政府或州政府的管理機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)或者美國(guó)藥典或其它一般認(rèn)可的藥典中列出的供用于動(dòng)物且更具體而言用于人的化合物或組合物。藥學(xué)上可接受的媒介物可為含有例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、其適合混合物和植物油的溶劑或分散介質(zhì)。藥學(xué)上可接受的媒介物的其它實(shí)例包括但不限于：注射用水usp；水性媒介物，諸如但不限于氯化鈉注射液、林格氏注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化鈉注射液以和乳酸鹽化林格氏注射液；水可混溶性媒介物，諸如但不限于乙醇、聚乙二醇和聚丙二醇；和非水性媒介物，諸如但不限于玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯和苯甲酸苯甲酯。預(yù)防微生物活動(dòng)可通過添加抗細(xì)菌和抗真菌劑(例如對(duì)羥基苯甲酸、氯丁醇、苯酚、抗壞血酸、硫柳汞和類似物)來(lái)實(shí)現(xiàn)。在許多情況下，組合物中包含等滲劑，例如糖、氯化鈉或多元醇，諸如甘露醇和山梨醇?？赏ㄟ^在組合物中包含延遲吸收的試劑(例如單硬脂酸鋁或明膠)來(lái)延長(zhǎng)可注射組合物的吸收。

本發(fā)明組合物可包含一種或多種如本文中所定義的式i化合物或其藥學(xué)上可接受的衍生物、鹽、前藥、類似物和異構(gòu)體或?qū)τ钞悩?gòu)體?？芍苽浠钚曰衔锏闹苿┮蕴峁┏蔬m合于經(jīng)腸、粘膜(包括舌下、肺和直腸)、非經(jīng)腸(包括肌肉內(nèi)、皮內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi))或局部(包括軟膏、乳膏或洗液)施用的形式的藥物組合物。制劑在適當(dāng)時(shí)宜以離散劑量單位形式存在且可通過藥物制劑領(lǐng)域中熟知的任何方法來(lái)制備。所有方法均包括使活性藥物成分與液體載體或細(xì)粉狀固體載體或兩者(視需要而定)放在一起的步驟。適當(dāng)時(shí)，可改適上述制劑以便提供活性藥物成分的持續(xù)釋放。此項(xiàng)技術(shù)中所熟知的持續(xù)釋放制劑包括使用推注、連續(xù)輸注、生物相容性聚合物或脂質(zhì)體。

e)試劑盒

本發(fā)明化合物可包裝為試劑盒的一部分，任選包括容器(例如包裝、盒、小瓶等)。所述試劑盒可根據(jù)本文中所描述的方法在商業(yè)上使用，且可包括用于本發(fā)明方法的說明書。其它試劑盒組分可包括酸、堿、緩沖劑、無(wú)機(jī)鹽、溶劑、抗氧化劑、防腐劑或金屬螯合劑。其它試劑盒組分是作為純組合物或作為摻入一種或多種其它試劑盒組分的水溶液或有機(jī)溶液存在。任何或所有試劑盒組分任選還包含緩沖液。

本發(fā)明化合物可能或可能不同時(shí)或通過相同施用途徑施用至患者。因此，本發(fā)明的方法涵蓋當(dāng)由醫(yī)學(xué)從業(yè)者使用時(shí)可使向患者施用適量的兩種或更多種活性成分得以簡(jiǎn)化的試劑盒。

本發(fā)明的典型試劑盒包含至少一種如由本文中所定義的式i所定義的根據(jù)本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽的單位劑型和至少一種額外活性成分的單位劑型。可與本發(fā)明化合物聯(lián)合使用的其它活性成分的實(shí)例包括但不限于上文所指示的可與本發(fā)明化合物組合使用的藥物(例如，用于治療骨質(zhì)疏松癥的藥物)中的任一種。

本發(fā)明的試劑盒可還包含可用于施用一種或多種活性成分的藥學(xué)上可接受的媒介物。舉例來(lái)說，如果活性成分以必須經(jīng)復(fù)原以用于非經(jīng)腸施用的固體形式提供，則試劑盒可包含活性成分可溶解于其中以形成適合于非經(jīng)腸施用的無(wú)顆粒無(wú)菌溶液的適合媒介物的密封容器。上文提供了藥學(xué)上可接受的媒介物的實(shí)例。

實(shí)施例

以下實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實(shí)施，但不欲對(duì)其具有限制性。

實(shí)施例1：用于制備某些代表性化合物的實(shí)驗(yàn)程序

所有hplc色譜圖和質(zhì)譜均在hp1100lc-msagilent^tm儀器上使用分析型c18柱(250×4.6mm，5微米)經(jīng)5min15％至99％ch3cn-h2o+0.01％tfa(作為洗脫劑)的梯度和2ml/min的流速下記錄。

化合物i：(rs)-2-[4-辛?；窖趸鵠癸酸鈉

將1-[4-羥基苯基]辛-1-酮(10.0g，45.4mmol)、k2co3(9.4g，68.1mmol)和碘(1.5g，9.1mmol)于丙酮(100ml)中的混合物用2-溴癸酸乙酯(13.9g，49.9mmol)處理，且在室溫下在氮?dú)庀聰嚢璺磻?yīng)物隔夜。在真空中蒸發(fā)溶劑，且使殘余物分配在乙酸乙酯與水之間。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾且在真空中蒸發(fā)。在硅膠墊上純化粗物質(zhì)，用5％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到呈無(wú)色油狀的(rs)-2-[4-辛?；窖趸鵠癸酸乙酯(11.9g，62％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.92(d,j＝9.0hz,2h),6.89(d,j＝9.0hz,2h),4.66(dd,j＝7.5,5.2hz,1h),4.21(q,j＝7.0hz,2h),2.89(t,j＝7.4hz,2h),1.90-2.03(m,2h),1.66-1.74(m,2h),1.43-1.56(m,2h),1.24-1.37(m,18h),1.24(t,j＝7.2hz,2h),0.85-0.89(m,6h)。將乙酯(11.9g，28.3mmol)于四氫呋喃(360ml)、甲醇(90ml)和水(90ml)的混合物中的溶液用單水合氫氧化鋰(5.9g，141.5mmol)處理，且在室溫下將混合物攪拌20h。添加第二份單水合氫氧化鋰(2.3g，54.8mmol)且在室溫下將反應(yīng)物再攪拌3h。在真空中濃縮反應(yīng)混合物，且使殘余物分配在乙酸乙酯與水之間。用飽和氯化鈉水溶液洗滌有機(jī)相，經(jīng)硫酸鎂干燥，過濾且在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。在硅膠墊上純化，用40％乙酸乙酯/己烷洗脫；且從己烷中再結(jié)晶，得到呈白色固體狀的(rs)-2-[4-辛酰基苯氧基]癸酸(9.46g，86％)。熔點(diǎn)45℃至47℃；¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.93(d,j＝9.0hz,2h),6.91(d,j＝9.0hz,2h),4.72(dd,j＝6.8,5.7hz,1h),2.90(t,j＝7.4hz,2h),1.98-2.04(m,2h),1.67-1.74(m,2h),1.46-1.59(m,2h),1.24-1.37(m,18h),0.87(t,j＝6.9hz,3h),0.88(t,j＝6.9hz,3h)。將該酸(9.4g，24.1mmol)于乙醇(200ml)中的溶液用碳酸氫鈉(2.0g，24.1mmol)于水(50ml)中的溶液處理，且在室溫下將反應(yīng)物攪拌5h。在真空中濃縮溶劑，且用水(950ml)稀釋該溶液，過濾(0.2μm)并凍干，得到呈白色固體狀的(rs)-2-[4-辛?；窖趸鵠癸酸鈉(8.8g，88％)。熔點(diǎn)275℃至280℃；¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.96(d,j＝9.0hz,2h),6.97(d,j＝9.0hz,2h),4.72(dd,j＝6.2,5.9hz,1h),2.95(t,j＝7.4hz,2h),1.94-1.99(m,2h),1.64-1.72(m,2h),1.49-1.57(m,2h),1.28-1.40(m,18h),0.90(t,j＝6.9hz,3h),0.89(t,j＝6.9hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ200.72,177.83,163.37,130.20,129.61,114.70,79.55,37.94,33.19,31.87,31.76,29.45,29.38,29.24,29.22,29.16,25.74,24.85,22.57,22.52,13.29,13.28；lrms(esi):m/z391(m-na⁺+2h⁺)；hplc:6min。

通過手性酯助劑拆分化合物i：

相同的程序重復(fù)用于(s)異構(gòu)體

(r)-2-[4-辛?；窖趸鵠癸酸鈉鹽和(s)-2-[4-辛?；窖趸鵠癸酸鈉鹽

1.形成和分離(s)-乳酰胺酯：

將(rs)-2-[4-辛?；窖趸鵠癸酸(0.95g，2.4mmol)于二氯甲烷(20ml)中的溶液用草酰氯(0.26ml，3.1mmol)逐滴處理，且在室溫下將反應(yīng)物攪拌1小時(shí)。添加三乙胺(0.51ml，3.7mmol)，隨后添加(s)-乳酰胺(0.54g，6.1mmol)，且在室溫下將反應(yīng)物攪拌20小時(shí)。隨后用乙酸乙酯(100ml)稀釋溶液，且用1mhcl水溶液(100ml)、水(100ml)和飽和氯化鈉水溶液(50ml)洗滌，隨后經(jīng)硫酸鈉干燥且在真空中蒸發(fā)。在biotage^tm40l柱(二氧化硅)上分離這兩種非對(duì)映異構(gòu)體，用乙醚/己烷1:4至1:1、隨后用乙酸乙酯/己烷1:4至1:1洗脫。由此得到單獨(dú)的純非對(duì)映異構(gòu)體。

第一種非對(duì)映異構(gòu)體(0.51g，45％)呈白色蠟狀固體狀：¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.93(d,j＝9.0hz,2h),6.91(d,j＝8.8hz,2h),5.68(brs,1h),5.54(brs,1h),5.22(q,j＝6.8hz,1h),4.77(dd,j＝7.3,5.2hz,1h),2.88(t,j＝7.5hz,2h),1.92-2.08(m,2h),1.69,(tt,j＝7.3,7.3hz,2h),1.46-1.56(m,2h),1.47,(d,j＝6.8hz,3h),1.23-1.38(m,18h),0.86(t,j＝6.6hz,6h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ199.15,172.34,170.09,161.35,131.47,130.82,114.56,76.70,71.16,38.59,32.90,32.00,31.93,29.57,29.52,29.35(3c),25.26,24.68,22.84(2c),17.85,14.29(2c)。

第二種非對(duì)映異構(gòu)體(0.47g，42％)呈粘性無(wú)色油狀：¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.90(d,j＝9.0hz,2h),6.91(d,j＝9.0hz,2h),6.25(brs,1h),6.15(brs,1h),5.20(q,j＝6.9hz,1h),4.79(dd,j＝6.6,5.9hz,1h),2.88(t,j＝7.5hz,2h),1.95-2.01(m,2h),1.68,(tt,j＝7.3,7.3hz,2h),1.47-1.55(m,2h),1.39,(d,j＝6.8hz,3h),1.22-1.37(m,18h),0.86(t,j＝6.8hz,6h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ199.43,172.71,170.29,161.52,131.31,130.60,114.84,76.48,71.13,38.59,32.80,32.00,31.93,29.58,29.53,29.36(3c),25.36,24.76,22.84,17.69,14.29(2c)。

2.將非對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化成相應(yīng)鈉鹽：

通用程序：

將非對(duì)映異構(gòu)酯(1.73g，3.7mmol)于乙腈(72ml)中的溶液用氫氧化鋰(0.45g，18.7mmol)于水(18ml)中的溶液處理，且在室溫下將反應(yīng)物攪拌17小時(shí)。通過添加1mhcl水溶液(150ml)淬滅反應(yīng)物，且隨后用乙酸乙酯(2×100ml)萃取。用水(150ml)和飽和氯化鈉水溶液(150ml)洗滌所合并的萃取物；隨后經(jīng)硫酸鈉干燥、過濾且在真空中蒸發(fā)，得到粗制酸。

第一種對(duì)映異構(gòu)體(較高rf，硅膠)：在biotage^tm40l柱(二氧化硅)上純化，用乙酸乙酯/己烷1:9至7:3洗脫，得到呈白色固體狀的經(jīng)純化酸對(duì)映異構(gòu)體(1.28g，87％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.50(s,1h),7.92(d,j＝8.8hz,2h),6.90(d,j＝9.0hz,2h),4.71(dd,j＝6.4,5.9hz,1h),2.89(t,j＝7.4hz,2h),1.97-2.03(m,2h),1.69,(tt,j＝7.1,7.1hz,2h),1.45-1.59(m,2h),1.21-1.38(m,18h),0.862(t,j＝7.0hz,3h),0.859(t,j＝6.8hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ200.20,176.59,161.76,131.00,130.77,114.83,76.15,38.59,32.80,32.03,31.93,29.59,29.53,29.39,29.37(2c),25.38,24.91,22.89(2c),14.30(2c)。

將該酸(1.28g，3.2mmol)于乙醇(20ml)中的溶液用碳酸氫鈉(0.27g，3.2mmol)于水(5ml)中的溶液處理，且在室溫下將反應(yīng)物攪拌3天。在真空中蒸發(fā)溶劑，得到呈白色蠟狀固體狀的粗制鹽。將此物質(zhì)溶解于水(130ml)中，過濾(0.2微米；尼龍)并凍干，得到呈白色固體狀的純對(duì)映異構(gòu)體(1.1g，97％)。¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.91(d,j＝8.6hz,2h),6.96(d,j＝8.8hz,2h),4.46(t,j＝6.2hz,1h),2.92(t,j＝7.3hz,2h),1.90-1.95(m,2h),1.66,(tt,j＝7.2,7.2hz,2h),1.44-1.61(m,2h),1.24-1.39(m,18h),0.890(t,j＝6.7hz,3h),0.882(t,j＝6.7hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ200.66,177.83,163.37,130.24,129.64,114.73,79.59,37.96,33.20,31.87,31.76,29.46,29.40,29.26,29.22,29.16,25.75,24.86,22.57,22.53,13.32,13.29；其它數(shù)據(jù)有待收集。

第二種對(duì)映異構(gòu)體(較低rf，硅膠)：在biotage^tm40l柱(二氧化硅)上純化，用乙酸乙酯/己烷1:9至7:3洗脫，得到呈白色固體狀的經(jīng)純化酸對(duì)映異構(gòu)體(1.10g，87％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.51(s,1h),7.91(d,j＝9.0hz,2h),6.90(d,j＝9.0hz,2h),4.71(dd,j＝6.6,5.9hz,1h),2.89(t,j＝7.5hz,2h),1.97-2.03(m,2h),1.69,(tt,j＝7.1,7.1hz,2h),1.45-1.58(m,2h),1.21-1.37(m,18h),0.862(t,j＝7.0hz,3h),0.858(t,j＝7.0hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ200.16,176.47,161.77,131.03,130.76,114.84,76.18,38.58,32.79,32.02,31.93,29.58,29.52,29.37,29.36(2c),25.36,24.91,22.84(2c),14.35,14.28。

將該酸(1.1g，2.7mmol)于乙醇(16ml)中的溶液用碳酸氫鈉(0.23g，2.7mmol)于水(4ml)中的溶液處理，且在環(huán)境溫度下將反應(yīng)物攪拌18h。在真空中蒸發(fā)溶劑，得到呈澄清無(wú)色糖漿狀的粗制鹽。將此物質(zhì)溶解于水(100ml)中，過濾(0.2微米；尼龍)并凍干，得到呈白色固體狀的純對(duì)映異構(gòu)體(1.12g，99％)。¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.91(d,j＝9.0hz,2h),6.96(d,j＝9.0hz,2h),4.46(t,j＝6.2hz,1h),2.92(t,j＝7.4hz,2h),1.90-1.95(m,2h),1.66,(tt,j＝7.1,7.1hz,2h),1.45-1.61(m,2h),1.24-1.39(m,18h),0.890(t,j＝6.8hz,3h),0.881(t,j＝6.9hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ200.65,177.82,163.37,130.20,129.65,114.74,79.58,37.96,33.19,31.87,31.76,29.46,29.40,29.26,29.22,29.16,25.75,24.86,22.57,22.53,13.32,13.29。

化合物ii：(rs)-2-[3-氟-4-辛?；窖趸鵠癸酸鈉

使用與化合物i相同的程序，以3-氟-4-辛?；椒?由3-氟苯酚的弗瑞德-克萊福特酰化反應(yīng)來(lái)制備)為起始物來(lái)制備標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)220℃至226℃；¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.78(dd,jhh＝8.8hz,jhf＝8.8hz,1h),6.79(dd,jhh＝8.8hz,2.3hz,1h),6.67(dd,jhf＝13.7hz,jhh＝2.3hz,1h),4.44(t,j＝6.3hz,1h),2.89(td,jhh＝7.3hz,jhf＝2.7hz,2h),1.89-1.94(m,2h),1.61-1.66(m,2h),1.44-1.60(m,2h),1.24-1.38(m,18h),0.89(t,j＝6.9hz,3h),0.88(t,j＝6.9hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ198.20(d,jcf＝4.6hz),177.23,164.63(d,jcf＝12.3hz),163.62(d,jcf＝253.7hz),131.60(d,jcf＝4.6hz),117.92(d,jcf＝13.1hz),111.72,102.50(d,jcf＝27.7hz),80.03,42.82,42.75,33.04,31.86,31.73,29.44,29.35,29.21,29.13,25.65,24.26,22.56,22.52,13.29&13.27；¹⁹fnmr(377mhz,cd3od):δ-108.77(dd,jhf＝13.3hz,9.3hz,1f)；lrms(esi):m/z409.6(100％,m-na⁺+2h⁺)；hplc:3.7min。

化合物iii：(rs)-4-辛?；嵬?2-甲酸鈉

(rs)-4-辛?；?2-甲酸甲酯(71mg，4％)是在制備其異構(gòu)體(rs)-5-辛酰基-2-甲酸甲酯時(shí)分離為副產(chǎn)物。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.66(d,j＝7.6hz,1h),7.35(d,j＝7.4hz,1h),7.24(dd,j＝7.6,7.6hz,1h),3.69(s,3h),3.64(abx的a,j＝18.0,9.4hz,1h),3.48(abx的b,j＝18.1,7.3hz,1h),3.13-3.34(m,3h),2.90(t,j＝7.5hz,2h),1.68(tt,j＝7.2,7.2hz,2h),1.24-1.38(m,8h),0.86(t,j＝6.9hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ203.01,176.79,144.82,143.67,134.73,129.30,128.35,127.83,52.91,44.06,40.82,38.71,36.44,32.73,30.34,30.19,25.36,23.64,15.10。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案將(rs)-4-辛?；?2-甲酸甲酯(71mg，0.24mmol)皂化，得到呈灰白色固體狀的(rs)-4-辛酰基-2-甲酸(66mg，96％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.69(d,j＝7.6hz,1h),7.39(d,j＝7.4hz,1h),7.26(dd,j＝7.6,7.6hz,1h),3.67(abx的a,j＝18.0,9.0hz,1h),3.56(abx的b,j＝18.0,6.9hz,1h),3.19-3.39(m,3h),2.93(t,j＝7.4hz,2h),1.70(tt,j＝7.3,7.3hz,2h),1.24-1.38(m,8h),0.88(t,j＝6.9hz,3h)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)方案將(rs)-4-辛酰基-2-甲酸(66mg，0.23mmol)轉(zhuǎn)化成鈉鹽，得到呈灰白色固體狀的(rs)-4-辛酰基-2-甲酸鈉(70mg，99％)。熔點(diǎn)106℃至110℃，¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.69(d,j＝7.8hz,1h),7.38(d,j＝7.4hz,1h),7.24(dd,j＝7.6,7.6hz,1h),3.37-3.56(m,2h),3.10-3.21(m,3h),2.95(t,j＝7.3hz,2h),1.66(tt,j＝7.3,7.3hz,2h),1.26-1.39(m,8h),0.89(t,j＝6.8hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ203.56,182.93,145.34,143.96,133.93,128.26,126.97,126.42,47.62,39.89,38.69,36.70,31.76,29.21,29.17,24.55,22.52,13.28；lrms(esi):m/z577.6(強(qiáng),2m-2na⁺+3h⁺),289.2(100％,m-na⁺+2h⁺)；hplc:3.43min。

化合物iv：(rs)-2-[4-辛?；窖趸鵠辛酸鈉

根據(jù)用于制備化合物i的程序，使1-[4-羥基苯基]-1-辛酮(440mg，2.0mmol)與(rs)-2-溴辛酸乙酯(552mg，2.2mmol)反應(yīng)，得到(rs)-2-[4-辛?；窖趸鵠辛酸乙酯(605mg，78％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.91(d,j＝9.0hz,2h),6.88(d,j＝9.0hz,2h),4.66(dd,j＝5.1,7.4hz,1h),4.20(q,j＝7.0hz,2h),2.88(t,j＝7.5hz,2h),1.88-2.02(m,2h),1.70(tt,j＝7.2,7.2hz,2h),1.41-1.56(m,2h),1.25-1.37(m,14h),1.23(t,j＝7.1hz,3h),0.87(t,j＝7.2hz,3h),0.86(t,j＝7.2hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ199.41,171.48,161.81,131.01,130.54(2c),114.77(2c),76.75,61.62,38.56,32.90,31.94,31.78,29.60,29.38,29.07,25.33,24.80,22.85,22.75,14.39,14.31,14.26。根據(jù)用于制備化合物i的程序，用氫氧化鋰(186mg，7.8mmol)將所得酯(605mg，1.6mmol)皂化，得到(rs)-2-[4-辛?；窖趸鵠辛酸(487mg，87％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ9.70(brs,1h),7.89(d,j＝9.0hz,2h),6.89(d,j＝9.0hz,2h),4.69(dd,j＝5.9,6.6hz,1h),2.87(t,j＝7.5hz,2h),1.95-2.01(m,2h),1.67(tt,j＝7.2,7.2hz,2h),1.43-1.58(m,2h),1.24-1.37(m,14h),0.851(t,j＝6.8hz,3h),0.849(t,j＝7.4hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ200.38,176.08,161.84,130.85,130.78(2c),114.83(2c),76.20,38.56,32.79,31.93,31.76,29.57,29.35,29.05,25.34,24.92,22.84,22.74,14.29,14.23。隨后根據(jù)用于制備化合物i的程序?qū)⒃撍?500mg，1.4mmol)轉(zhuǎn)化成鈉鹽，得到呈白色固體狀的(rs)-2-[4-辛酰基苯氧基]辛酸鈉(404mg，76％)。熔點(diǎn)165℃至170℃；¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.91(d,j＝8.8hz,2h),6.95(d,j＝8.8hz,2h),4.58(dd,j＝6.1,6.3hz,1h),2.91(t,j＝7.3hz,2h),1.91-1.96(m,2h),1.62-1.69(m,2h),1.44-1.58(m,2h),1.25-1.39(m,14h),0.87-0.90(m,6h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ200.50,176.40,162.96,130.28(2c),129.94,114.71(2c),78.38,38.00,32.98,31.79,31.74,29.27,29.20,29.05,25.50,24.79,22.56,22.51,13.36,13.34；lrms(esi):m/z769(m2h⁺),748(2m-na⁺+2h⁺),363(m-na⁺+2h⁺)；hplc:3min。

化合物v：(rs)-2-[4-丁酰基苯氧基]癸酸鈉

根據(jù)用于制備化合物iv的程序，使1-[4-羥基苯基]-1-丁酮(328mg，2.0mmol)與(rs)-2-溴癸酸乙酯(614mg，2.2mmol)反應(yīng)，得到呈澄清無(wú)色油狀的(rs)-2-[4-丁?；窖趸鵠癸酸(616mg，85％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.88(d,j＝9.0hz,2h),6.86(d,j＝9.0hz,2h),4.64(dd,j＝5.7,6.8hz,1h),4.17(q,j＝7.2hz,2h),2.83(t,j＝7.3hz,2h),1.85-1.99(m,2h),1.65-1.75(m,2h),1.39-1.44(m,2h),1.22-1.34(m,10h),1.20(t,j＝7.2hz,3h),0.94(t,j＝7.4hz,3h),0.83(t,j＝7.0hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ199.04,171.39,161.80,130.98,130.48(2c),114.74(2c),76.68,61.55,40.37,32.85,32.01,29.53,29.37(2c),25.33,22.84,18.11,14.34,14.29,14.10。根據(jù)用于制備化合物iv的程序，用氫氧化鋰(203mg，8.5mmol)將所得酯(616mg，1.70mmol)皂化，得到(rs)-2-[4-丁?；窖趸鵠癸酸(166mg，29％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ10.06(brs,1h),7.91(d,j＝9.0hz,2h),6.90(d,j＝9.0hz,2h),4.70(dd,j＝5.9,6.4hz,1h),2.87(t,j＝7.3hz,2h),1.96-2.02(m,2h),1.68-1.77(m,2h),1.44-1.59(m,2h),1.24-1.37(m,10h),0.97(t,j＝7.4hz,3h),0.86(t,j＝7.0hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ199.95,176.56,161.74,131.03,130.73(2c),114.82(2c),76.16,40.47,32.79,32.03,29.53,29.39,29.37,25.38,22.86,18.26,14.31,14.12。隨后根據(jù)用于制備化合物iv的程序?qū)⒃撍?166mg，0.5mmol)轉(zhuǎn)化成鈉鹽，得到呈白色固體狀的(rs)-2-[4-丁?；窖趸鵠癸酸鈉(149mg，85％)。熔點(diǎn)262℃至278℃；¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.91(d,j＝9.0hz,2h),6.96(d,j＝9.0hz,2h),4.70(dd,j＝6.1,6.5hz,1h),2.90(t,j＝7.3hz,2h),1.88-1.93(m,2h),1.67(tq,j＝7.4,7.4hz,2h),1.41-1.57(m,2h),1.20-1.35(m,10h),0.95(t,j＝7.4hz,3h),0.83(t,j＝6.9hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ201.82,178.07,163.36,130.53(2c),129.54,114.83(2c),79.46,39.99,33.11,31.80,29.40,29.27,29.15,25.72,22.54,18.30,14.46,14.15；lrms(esi):m/z713(m2h⁺),669(2m-2na⁺+3h⁺),335(m-na⁺+2h⁺)；hplc:3min。

化合物vi：(rs)-2-[4-己?；窖趸鵠癸酸鈉

根據(jù)用于制備化合物iv的程序，使1-[4-羥基苯基]-1-己酮(384mg，2.0mmol)與(rs)-2-溴癸酸乙酯(614mg，2.2mmol)反應(yīng)，得到(rs)-2-[4-己?；窖趸鵠癸酸乙酯(628mg，80％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.86(d,j＝9.0hz,2h),6.84(d,j＝9.0hz,2h),4.60-4.65(m,1h),4.15(q,j＝7.0hz,2h),2.83(t,j＝7.3hz,2h),1.86-1.97(m,2h),1.61-1.70(m,2h),1.38-1.52(m,2h),1.20-1.34(m,14h),1.18(t,j＝7.2hz,3h),0.78-0.87(m,6h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ199.17,171.36,161.78,130.95,130.46(2c),114.72(2c),76.66,61.51,38.41,32.84,32.00,31.76,29.52,29.35(2c),25.31,24.41,22.83,22.74,14.33,14.26,14.14。根據(jù)用于制備化合物iv的程序，用氫氧化鋰(193mg，8.0mmol)將所得酯(628mg，1.6mmol)皂化，得到(rs)-2-[4-己?；窖趸鵠癸酸(468mg，80％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.93(d,j＝9.0hz,2h),6.91(d,j＝9.0hz,2h),5.77(brs,1h),4.70(dd,j＝5.8,6.6hz,1h),2.89(t,j＝7.4hz,2h),1.97-2.03(m,2h),1.67-1.74(m,2h),1.44-1.60(m,2h),1.23-1.37(m,14h),0.90(t,j＝6.8hz,3h),0.87(t,j＝7.0hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ199.76,176.29,161.56,131.20,130.70(2c),114.81(2c),76.12,38.56,32.78,32.03,31.80,29.53,29.40,29.36,25.36,24.51,22.87,22.76,14.33,14.20。隨后根據(jù)用于制備化合物iv的程序?qū)⒃撍?468mg，1.3mmol)轉(zhuǎn)化成鈉鹽，得到呈白色固體狀的(rs)-2-[4-己?；窖趸鵠癸酸鈉(459mg，93％)。熔點(diǎn)275℃至280℃；¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.91(d,j＝8.8hz,2h),6.96(d,j＝8.8hz,2h),4.44-4.48(m,1h),2.89-2.96(m,2h),1.88-1.96(m,2h),1.63-1.71(m,2h),1.44-1.61(m,2h),1.24-1.38(m,14h),0.84-0.93(m,6h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ200.89,177.86,163.36,130.27(2c),129.60,114.75(2c),79.54,37.94,33.18,31.86,31.49,29.44,29.38,29.21,25.73,24.55,22.58,22.45,13.36,13.23；lrms(esi):m/z769.8(m2h⁺),747.8(2m-na⁺+2h⁺),363.2(m-na⁺+2h⁺)；hplc:3.min。

化合物vii：(rs)-2-[4-辛?；郊谆鵠癸酸鈉

步驟1

在氮?dú)庀聦⒍惐?1.5ml，10.5mmol)于無(wú)水四氫呋喃(20ml)中的溶液冷卻至0℃，且用正丁基鋰于己烷中的溶液(2.3m；4.4ml，10.0mmol)處理。5min之后添加3-苯基丙酸(1.5g，10.0mmol)于無(wú)水四氫呋喃(10ml)中的溶液，得到白色懸浮液。在0℃下20min之后，將反應(yīng)物冷卻至-10℃且添加第二份正丁基鋰于己烷中的溶液(2.3m；4.80ml，11.0mmol)。在-10℃下攪拌10min，隨后在室溫下攪拌40min，得到澄清淺棕色溶液。將該溶液冷卻至0℃且用1-溴辛烷(1.8ml，10.5mmol)處理。在0℃下將反應(yīng)物攪拌20min，且隨后在室溫下攪拌3h。添加飽和氯化銨水溶液(100ml)；用鹽酸水溶液(6m)將ph值調(diào)節(jié)至1；且用乙酸乙酯(100ml)萃取混合物。用水(100ml)且用飽和氯化鈉水溶液(75ml)洗滌有機(jī)萃取物；隨后經(jīng)硫酸鈉干燥；過濾且在真空中蒸發(fā)，得到粗產(chǎn)物。在biotage^tm40l濾筒(二氧化硅)上純化，用0至20％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到呈草色油狀的(rs)-2-苯甲基癸酸(1.9g，73％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ11.51(brs,1h),7.14-7.35(m,5h),3.00(dd,j＝13.7,7.9hz,1h),2.77(dd,j＝13.7,6.8hz,1h),2.65-2.72(m,1h),1.62-1.71(m,1h),1.49-1.57(m,1h),1.20-1.42(m,12h),0.90(t,j＝6.8hz,3h)。

步驟2

將該羧酸化合物(1.9g，7.3mmol)于甲醇(13ml)中的溶液用硫酸(0.35ml，6.6mmol)處理且在室溫下將反應(yīng)物攪拌隔夜。隨后用乙酸乙酯(175ml)稀釋反應(yīng)物，且用氫氧化鈉(0.5m)水溶液(175ml)、用水(175ml)和用飽和氯化鈉溶液(135ml)洗滌該溶液；隨后經(jīng)硫酸鈉干燥；過濾且在真空中蒸發(fā)，得到呈金黃色油狀的(rs)-2-苯甲基癸酸甲酯(2.0g，99％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.14-7.29(m,5h),3.60(s,3h),2.93(dd,j＝13.4,8.4hz,1h),2.74(dd,j＝13.6,6.5hz,1h),2.62-2.69(m,1h),1.60-1.67(m,1h),1.45-1.55(m,1h),1.22-1.37(m,12h),0.88(t,j＝6.8hz,3h)。

步驟3

在氮?dú)庀聦⒃摷柞セ衔?1.5g，5.5mmol)和辛酰氯(1.4ml，8.3mmol)于無(wú)水二氯甲烷(25ml)中的溶液冷卻至0℃，且經(jīng)160min用氯化鋁顆粒(2.2g，16.6mmol)分小份進(jìn)行處理。在0℃下將反應(yīng)物攪拌150min且隨后通過傾入冰(150ml)與水(150ml)的混合物中進(jìn)行淬滅。將該混合物攪拌10min且隨后用乙酸乙酯(150ml)萃取。用氫氧化鈉水溶液(0.5m，200ml)且用飽和氯化鈉溶液(100ml)洗滌有機(jī)萃取物；且隨后經(jīng)硫酸鈉干燥；過濾且在真空中蒸發(fā)，得到粗化合物。在biotage^tm40l濾筒(二氧化硅)上純化，用0至3％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到呈黃色油狀的(rs)-2-[4-辛?；郊谆鵠癸酸甲酯(157mg，7％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.83(d,j＝8.2hz,2h),7.19(d,j＝8.2hz,2h),3.54(s,3h),2.93(dd,j＝13.6,8.8hz,1h),2.88(t,j＝7.4hz,2h),2.75(dd,j＝13.6,6.2hz,1h),2.60-2.68(m,1h),1.58-1.71(m,3h),1.42-1.50(m,1h),1.18-1.35(m,20h),0.84(t,j＝6.8hz,3h),0.83(t,j＝6.8hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cdcl3):δ200.21,175.88,145.12,135.58,129.19,128.43,51.57,47.51,38.69,38.59,32.47,32.02,31.92,29.63,29.57,29.55,29.40,29.37,27.46,24.58,22.84,22.83,14.28&14.26。

步驟4

將該甲酯化合物(156mg，0.3mmol)于乙腈(4ml)中的溶液用氫氧化鋰(46mg，1.9mmol)于水(1ml)中的溶液處理且在室溫下將反應(yīng)物攪拌3天、在60℃下攪拌20h且隨后在室溫下再攪拌4天。使反應(yīng)混合物分配在乙酸乙酯(20ml)與鹽酸水溶液(1m，20ml)之間。用水(20ml)且用飽和氯化鈉水溶液(20ml)洗滌有機(jī)相；隨后經(jīng)硫酸鈉干燥；過濾且在真空中蒸發(fā)，得到甲酯與羧酸的部分水解混合物。在biotage^tm12m濾筒(二氧化硅)上純化，用0至30％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到呈無(wú)色油狀的(rs)-2-[4-辛?；郊谆鵠癸酸(46mg，31％)。¹hnmr(400mhz,cdcl3):δ7.88(d,j＝8.2hz,2h),7.26(d,j＝8.2hz,2h),3.01(dd,j＝13.8,8.1hz,1h),2.93(t,j＝7.4hz,2h),2.81(dd,j＝13.8,6.5hz,1h),2.65-2.72(m,1h),1.61-1.75(m,3h),1.46-1.55(m,1h),1.23-1.40(m,20h),0.88(t,j＝6.9hz,3h),0.87(t,j＝6.7hz,3h)。

步驟5

將碳酸氫鈉(10mg，0.12mmol)于水(0.25ml)中的溶液用該羧酸(46mg，0.12mmol)于乙醇(1.0ml)中的溶液處理，且在室溫下將反應(yīng)物攪拌隔夜。在真空中蒸發(fā)溶劑，且將殘余物溶解于水(4ml)中，過濾(0.2微米，pes)并凍干，得到膠狀物。從丙酮溶液中蒸發(fā)，得到呈灰白色固體狀的(rs)-2-[4-辛?；郊谆鵠癸酸鈉(45mg，93％)。¹hnmr(400mhz,cd3od):δ7.86(d,j＝8.4hz,2h),7.35(d,j＝8.4hz,2h),2.94-3.00(m,3h),2.69(dd,j＝13.3,6.6hz,1h),2.46-2.53(m,1h),1.54-1.70(m,3h),1.23-1.40(m,21h),0.89(t,j＝6.8hz,3h),0.87(t,j＝7.2hz,3h)；¹³cnmr(101mhz,cd3od):δ201.60,182.80,147.71,134.81,129.26,128.04,51.14,39.54,38.24,33.04,31.92,31.77,29.76,29.52,29.27,29.23,29.18,27.78,24.62,22.57,22.54,13.33&13.31；lrms(esi):m/z389.7(100％,[m–na⁺+2h⁺])；hplc:3.2min。

實(shí)施例2：化合物對(duì)受lps刺激的raw264.7細(xì)胞(破骨細(xì)胞祖先)的效應(yīng)。

細(xì)菌來(lái)源的細(xì)胞壁產(chǎn)物lps已長(zhǎng)期被認(rèn)為骨損失產(chǎn)生中的關(guān)鍵因素。lps在骨再吸收中起重要作用，該過程包括募集炎性細(xì)胞、合成細(xì)胞因子(諸如介白素-6(il-6)、il-12和腫瘤壞死因子-a(tnf-a))以及活化破骨細(xì)胞形成和分化。

raw264細(xì)胞為破骨細(xì)胞前驅(qū)物體且可由若干因子分化，包括nf-κb受體活化因子配體(rankl)或脂多糖(lps)。破骨細(xì)胞的特征在于高表達(dá)或酒石酸鹽抗性酸性磷酸酶(tracp)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(mmp-9)，其可用作破骨細(xì)胞標(biāo)記物。已顯示在癸酸存在下培育的raw264.7細(xì)胞中il-12產(chǎn)生增加且磷酸酶(trap)陽(yáng)性細(xì)胞減少(trap表達(dá)，一種破骨細(xì)胞分化標(biāo)記)(wang等人,j.biol.chem.(2006),第281卷,第45期,第34457-64頁(yè))。此外，lps強(qiáng)烈上調(diào)可誘導(dǎo)一氧化氮合成酶(inos)mrna水平和一氧化氮(no)產(chǎn)生，而癸酸則對(duì)其進(jìn)行抑制。另外，癸酸還抑制單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)mrna表達(dá)。

式i化合物對(duì)trap(破骨細(xì)胞標(biāo)記物)和il-12的效應(yīng)可在鼠類破骨細(xì)胞前驅(qū)物細(xì)胞系raw264.7細(xì)胞中進(jìn)行。通過在存在或不存在癸酸(正對(duì)照)或測(cè)試化合物的情況下與lps(1μg/ml)一起培育使raw264.7細(xì)胞分化。在第3天至第5天，使用酒石酸鹽抗性酸性磷酸酶(trap)染色來(lái)評(píng)估破骨細(xì)胞形成。

lps在raw264.7細(xì)胞中的破骨細(xì)胞生成效應(yīng)由高trap表達(dá)(深色染色)所顯示。如果當(dāng)與測(cè)試化合物接觸時(shí)可觀測(cè)到無(wú)或較少trap細(xì)胞，則此指示所述細(xì)胞在破骨細(xì)胞中未分化，表明測(cè)試化合物抑制破骨細(xì)胞生成。

另外已報(bào)導(dǎo)癸酸在受lps刺激的raw264.7中增加il-12的產(chǎn)生(wang等人,j.biol.chem.(2006),第281卷,第45號(hào),第34457-64頁(yè))。由于癸酸也是已知的破骨細(xì)胞生成抑制劑，故可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)以確定化合物i是否能夠促進(jìn)il-12產(chǎn)生增加。相應(yīng)地，在存在或不存在所述化合物的情況下，在37℃下在具有95％空氣-5％二氧化碳的濕潤(rùn)氛圍中將raw264.7細(xì)胞與100ng/mllps一起培養(yǎng)21h。使用il-12elisa，根據(jù)制造商(bdbiosciences)推薦方案來(lái)測(cè)量培養(yǎng)基中的il-12濃度。在存在不同濃度的測(cè)試化合物的情況下在受lps刺激的raw264.7細(xì)胞中對(duì)il-12產(chǎn)生的強(qiáng)誘導(dǎo)將證實(shí)所述化合物能夠促進(jìn)il-12產(chǎn)生增加。

實(shí)施例3：式i化合物在受lps刺激的raw264.7細(xì)胞(破骨細(xì)胞祖先)中對(duì)il-12產(chǎn)生的效應(yīng)。

還報(bào)導(dǎo)了il-12抑制破骨細(xì)胞形成(horwood等人,2001,j.ofimmunology,第166卷,第8號(hào),第4915-4921頁(yè))。如實(shí)施例1中所提及，在化合物i存在下加以培育的受lps刺激的raw264.7可增加il-12且減少破骨細(xì)胞生成(trap)。相應(yīng)地，使用體外il-12產(chǎn)生測(cè)定來(lái)篩選潛在破骨細(xì)胞生成抑制劑。表1表示代表性式i化合物對(duì)il-12產(chǎn)生的效應(yīng)。所有測(cè)試化合物均誘導(dǎo)il-12產(chǎn)生顯著增加。

表1：代表性式i化合物對(duì)il-12產(chǎn)生的效應(yīng)

這些結(jié)果顯示測(cè)試化合物在lps存在下誘導(dǎo)il-12產(chǎn)生。能夠刺激il-12產(chǎn)生意謂本發(fā)明由于誘導(dǎo)il-12而可能適用于預(yù)防和/或治療骨質(zhì)疏松癥。此受到實(shí)施例2中所提及的參考文獻(xiàn)支持，這些參考文獻(xiàn)教示il-12對(duì)破骨細(xì)胞生成具有直接抑制效應(yīng)。

實(shí)施例4：化合物i在卵巢切除大鼠模型中對(duì)骨質(zhì)疏松癥減輕的效應(yīng)

盡管與人相比，大鼠的骨骼質(zhì)量在其壽命跨度期間仍穩(wěn)定較長(zhǎng)時(shí)期，但可對(duì)大鼠進(jìn)行卵巢切除以使其性激素缺乏，且刺激絕經(jīng)后女性中發(fā)生的加速骨損失。卵巢切除術(shù)在大鼠中誘導(dǎo)骨損失且絕經(jīng)后骨損失具有許多類似的特征。這些特征包括：骨更換率增加伴隨再吸收超過形成；初始快速骨損失階段隨后為慢得多的階段；海綿骨損失大于皮質(zhì)骨；鈣腸吸收減少；一定程度上防止由于肥胖所致的骨損失；和對(duì)利用雌激素、他莫西芬、雙膦酸鹽、甲狀旁腺激素、降血鈣素和鍛煉的療法的類似骨骼反應(yīng)。這些廣泛類似性為卵巢切除大鼠骨損失模型適用于研究與絕經(jīng)后骨損失相關(guān)的問題的強(qiáng)有力證據(jù)。

在第0天對(duì)sd大鼠(250g)進(jìn)行卵巢切除(ovx)。從第14天至第68天，通過口服管飼法用化合物i(10mg/kg)治療大鼠。在第68天對(duì)不同的參數(shù)(體重、鈣損失、破骨細(xì)胞標(biāo)記(rankl和trapmrna表達(dá))、膠原蛋白含量和組織學(xué))進(jìn)行評(píng)估。

圖1說明卵巢切除大鼠的體重增加的增加(類似于“絕經(jīng)后肥胖”)?；衔飅減輕卵巢切除誘導(dǎo)的肥胖。

圖2表示化合物i對(duì)卵巢切除大鼠中的鈣損失的效應(yīng)。從第28天至第56天在得自卵巢切除大鼠的尿液中檢測(cè)到鈣損失?；衔飅顯著減輕卵巢切除大鼠中的鈣損失。

此外，已知血清中的酸性磷酸酶活性為破骨細(xì)胞生成的指示(park等人,(2011)plosone第6卷,第11期,第1-8頁(yè))。測(cè)量血清酸性磷酸酶活性且此活性在卵巢切除大鼠中從第28天至第56天顯著增加(圖3)。然而，化合物i降低卵巢切除大鼠的血清中的酸性磷酸酶活性(圖3)；降低指示成功減少破骨細(xì)胞生成。

圖4表示化合物i在第68天在大鼠脛骨中對(duì)rankl/opgmrna表達(dá)比率的效應(yīng)。如所示，rankl/opgmrna表達(dá)在產(chǎn)生骨質(zhì)疏松癥的大鼠中有所增加，而其在用化合物i治療的情況下降低，降低指示成功減少破骨細(xì)胞生成。

作為骨損失的結(jié)果，膠原蛋白含量降低。在卵巢切除大鼠中觀測(cè)到此結(jié)果?；衔飅增加卵巢切除大鼠股骨干骺端中的膠原蛋白含量，表明骨損失減少(圖5)。

圖6和圖7顯示股骨干骺端的組織骨切片的代表性圖片。化合物i減少股骨干骺端部分中的骨損失。

***

本文中包括標(biāo)題以供參考和輔助定位某些部分。這些標(biāo)題不欲限制其中所描述的原理的范圍，且這些原理可在整個(gè)說明書中的其它部分中具有適用性。因而，本發(fā)明不欲受限于本文中所示的實(shí)施方案，而是應(yīng)符合與本文中所公開的原理和新穎特征一致的最寬范圍。

除非上下文另外明確規(guī)定，否則單數(shù)形式“一個(gè)/種(a/an)”和“所述”包括相應(yīng)復(fù)數(shù)參考物。

除非另外指示，否則本說明書和權(quán)利要求書中用于表述成分用量、反應(yīng)條件、濃度、性質(zhì)等的所有數(shù)字均應(yīng)理解為在所有情況下由術(shù)語(yǔ)“約”修飾。至少，各數(shù)值參數(shù)至少應(yīng)按照所報(bào)導(dǎo)的有效數(shù)字的數(shù)值且通過應(yīng)用一般舍入技術(shù)來(lái)理解。因此，除非有相反指示，否則本說明書和所附權(quán)利要求書中所闡述的數(shù)值參數(shù)為可視設(shè)法獲得的性質(zhì)而變化的近似值。盡管闡述所述實(shí)施方案的廣泛范圍的數(shù)值范圍和參數(shù)為近似值，但盡可能精確地報(bào)導(dǎo)特定實(shí)施例中所闡述的數(shù)值。然而，任何數(shù)值均固有地含有由實(shí)驗(yàn)、試驗(yàn)測(cè)量、統(tǒng)計(jì)分析等方面的變化而產(chǎn)生的某些誤差。

應(yīng)理解，本文中所描述的實(shí)施例和實(shí)施方案僅出于說明目的且根據(jù)其進(jìn)行的各種修改或變化將建議給本領(lǐng)域技術(shù)人員并且包括在本發(fā)明和所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。