本發(fā)明涉及包含脂類的配制品前體(預(yù)配制品)，其在暴露于水或水性介質(zhì)(如體液)時自發(fā)經(jīng)歷至少一個相變，由此形成任選地是生物粘合劑的控釋基質(zhì)。

背景技術(shù)：

包括藥物、營養(yǎng)素、維生素等的許多生物活性劑具有“功能性窗口”。也就是說，存在可以觀察到這些試劑提供一些生物效應(yīng)的濃度范圍。在身體適當(dāng)部位中的濃度(例如局部或如通過血清濃度所證明的)下降到低于某一水平的情況下，沒有有益的效果可以歸因于該試劑。類似地，通常存在上限濃度水平，高于這個上限濃度水平通過增加濃度也不會產(chǎn)生進(jìn)一步的益處。在一些情況下，將濃度增加到特定水平以上會導(dǎo)致不希望的或甚至危險的效果。

一些生物活性劑具有長生物半衰期和/或?qū)捁δ苄源翱?，并且因此可以被偶爾給藥，在相當(dāng)長的時間段內(nèi)(例如6小時至若干天)保持功能性生物濃度。在其他情況下，清除率高和/或功能性窗口窄，并且因此為了在該窗口內(nèi)維持生物濃度需要少量的常規(guī)(或甚至連續(xù)的)劑量。在非口服給藥途徑(例如腸胃外給藥)是希望的或必需的情況下，這會是特別困難的，因為自我給藥可能是困難的，并且因此引起不便和/或差的依從性。在這樣的情況下，對于在需要活性的整個期間內(nèi)提供治療水平的活性劑的單次給藥將是有利的。

在使用肽(包括蛋白質(zhì))用于治療不同疾病狀態(tài)方面，連同在預(yù)防和改善受試者的一般健康狀況和幸福感方面，具有巨大的潛力。然而，由于生物利用度差，所以給藥的肽劑的性能通常是有限的，其進(jìn)而是由生物流體中肽和蛋白質(zhì)的快速降解引起的。這增加了必須給藥的劑量，并且在許多情況下限制了有效的給藥途徑。通過肽和蛋白質(zhì)跨越生物膜的經(jīng)常受限的滲透性進(jìn)一步擴(kuò)大了這些影響。

給藥至哺乳動物體(例如口服、肌肉內(nèi)等)的肽和蛋白質(zhì)通過存在于整個身體中的不同蛋白水解酶和系統(tǒng)來進(jìn)行降解。肽酶活性的熟知的位點包括胃(例如胃蛋白酶)和腸道(例如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶以及其他酶)，但是在整個身體中發(fā)現(xiàn)其他肽酶(例如氨肽酶、羧肽酶等)?？诜o藥后，胃和腸降解減少了通過腸表面覆蓋層可能潛在地吸收的肽或蛋白質(zhì)的量，并由此降低了其生物利用度。類似地，哺乳動物血流中的游離肽和蛋白質(zhì)也經(jīng)歷酶降解(例如通過血漿蛋白酶等)。這些因素使肽成為若干類生物活性劑之一，對于它們來說，受控的遞送潛在地是主要優(yōu)點。

一些經(jīng)受治療的患者將需要在相當(dāng)長的時間段內(nèi)維持治療劑量和/或持續(xù)治療很多月或很多年。因此，允許在更長時間段內(nèi)加載和控釋更大劑量的貯庫系統(tǒng)將比常規(guī)遞送系統(tǒng)提供相當(dāng)大的優(yōu)點。

大多數(shù)確立的受控遞送系統(tǒng)依賴于聚合物，尤其是在體內(nèi)降解的聚合物。這些包括alkermes遞送系統(tǒng)，它由可生物降解的聚合物微球組成。這樣的聚合物微球配制品通常必須通過相當(dāng)大的針(通常為20號或更寬)的方式來給藥。由于所使用的聚合物給藥系統(tǒng)(典型地是聚合物懸浮液)的性質(zhì)，因此這是必需的。

典型地用于降解緩釋配制品的聚乳酸鹽、聚乙醇酸鹽和聚乳酸鹽共-乙醇酸鹽聚合物也是至少一些患者中一些刺激的原因。特別地，這些聚合物典型地包含一定比例的乙酸雜質(zhì)，該乙酸雜質(zhì)將在給藥時刺激注射部位。當(dāng)聚合物接下來分解時，乳酸和乙醇酸是降解產(chǎn)物，使得引起進(jìn)一步的刺激。由于寬針給藥和刺激性內(nèi)容物的組合效應(yīng)，所以給藥部位處的不適和結(jié)締瘢痕組織的形成是大于期望的。

從藥物遞送的觀點來看，聚合物貯庫組合物通常具有僅接受相對低的載藥量并具有“爆發(fā)/延遲”釋放特征的缺點。聚合物基質(zhì)的性質(zhì)，尤其當(dāng)作為溶液或預(yù)聚物應(yīng)用時，會在首次給藥組合物時引起藥物釋放的初始爆發(fā)。之后是低釋放時期，而基質(zhì)的降解開始，接下來最后是釋放速率提高到期望的持續(xù)曲線。此爆發(fā)/延遲釋放特征可以導(dǎo)致在給藥后活性劑的體內(nèi)濃度立即爆發(fā)到功能性窗口以上，并且然后在達(dá)到持續(xù)功能濃度達(dá)一段時間之前的滯后期間通過功能性窗口的底部返回。

在wo2005/117830中描述了基于脂質(zhì)的緩釋組合物。這是兩種關(guān)鍵脂質(zhì)組分和一種有機(jī)溶劑的高效配制品。該披露的這些配制品提供了優(yōu)于基于聚合物的系統(tǒng)的許多優(yōu)點，包括改進(jìn)的釋放特征，易于使用，易于制造和/或生物相容性。

鑒于wo2005/117830中披露的基于二酰基脂質(zhì)/磷脂的系統(tǒng)的優(yōu)點，已經(jīng)嘗試通過引入另外的“晶體硬化劑”組分來修飾該系統(tǒng)。在wo2013/032207中披露了一種這樣的經(jīng)修飾的系統(tǒng)。本文件的系統(tǒng)包括最少三種組分加一種溶劑，因為除了脫水山梨糖醇酯和磷脂之外還需要“晶體硬化劑”。這不僅使該系統(tǒng)配制并且驗證藥物制造更加復(fù)雜，而且許多提出的晶體硬化劑都有其自己的生物活性。這些包括棕櫚酸視黃酯(其被牽連作為可能的致癌物)和(在所有實例中)生育酚乙酸酯(維生素e乙酸酯)(其將顯然是具有生物活性的)。

盡管wo2013/032207中的系統(tǒng)目前不符合wo2005/117830系統(tǒng)的性能、簡單性或可注射性，但是如果該系統(tǒng)可以被簡化，并且特別是如果在不存在生物活性劑或其他“晶體硬化劑”的情況下可以有效，則它將是一個優(yōu)點。

現(xiàn)在本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)確定，通過提供包括仔細(xì)控制比例的糖或糖衍生物的至少一種脂肪酸酯、至少一種磷脂(如磷脂酰膽堿或磷脂酰乙醇胺)、至少一種生物相容的、含氧的、低粘度有機(jī)溶劑的預(yù)配制品，可以產(chǎn)生一種預(yù)配制品，其基于二?；视秃土字慕M合而不需要另外的晶體固化劑組分提供了已知的貯庫配制品的一種互補(bǔ)系統(tǒng)。通過使用仔細(xì)選擇的比率的特定組分，可以產(chǎn)生一種貯庫配制品，該貯庫配制品具有匹配或超過已知的基于脫水山梨糖醇的脂質(zhì)控釋組合物的性能的特性的組合。

特別地，該預(yù)配制品示出可接受的釋放特征，易于制造，可以無菌過濾，具有足夠低的粘度(允許通過典型的針而給藥)，允許摻入高水平的生物活性劑(因此潛在地允許使用更少量的組合物和/或活性劑)，需要淺注射和/或在體內(nèi)形成具有“非爆發(fā)”釋放特征的期望的非層狀貯庫組合物。這些組合物可以通過肌內(nèi)或皮下給藥并且適于自我給藥。

本發(fā)明的這些組合物相比于聚合物配制品(如plga球體)的優(yōu)點包括制造(包括滅菌)、處理和與活性劑的低初始釋放(“非爆發(fā)曲線特征”)組合的使用特性的簡便。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

從第一方面來看，本發(fā)明因此提供了一種預(yù)配制品，該預(yù)配制品包括低粘度、非液晶混合物，該混合物具有以下項：

i)糖或糖衍生物的至少一種酯；

ii)至少一種磷脂；

iii)至少一種生物相容的、含氧的、低粘度有機(jī)溶劑；

并且其中該預(yù)配制品在與水性流體接觸時形成或能夠形成至少一種非層狀液晶相結(jié)構(gòu)；

其條件是該預(yù)配制品不進(jìn)一步包括液晶硬化劑。

通常，水性流體將是體液，如來自粘膜表面的液體、眼淚、汗液、唾液、胃腸液、血管外液、細(xì)胞外液、間質(zhì)液或血漿，并且該預(yù)配制品當(dāng)與水性體液接觸的體表、區(qū)域或空腔(例如，體內(nèi))接觸時將形成一種液晶相結(jié)構(gòu)。本發(fā)明的預(yù)配制品可以在給藥之前任選地包含某一量的水，但這不足以導(dǎo)致在給藥之前形成必需的液晶相。

從第二方面來看，本發(fā)明提供了包括第一實施例的預(yù)配制品的藥物配制品，該藥物配制品可另外包括至少一種藥學(xué)上可耐受的載體、防腐劑、賦形劑或其他藥學(xué)上可耐受的組分。

從第三方面來看，本發(fā)明提供了通過在給藥后將第一方面的預(yù)配制品或第二方面的藥物配制品暴露于體內(nèi)水性流體而形成的貯庫組合物。

從第四方面來看，本發(fā)明提供了一種將生物活性劑遞送到人或非人動物(優(yōu)選哺乳動物)體的方法，該方法包括給藥一種預(yù)配制品，該預(yù)配制品包括非液晶、低粘度混合物，該混合物具有以下項：

i)糖或糖衍生物的至少一種酯；

ii)至少一種磷脂；

iii)至少一種生物相容的、含氧的、低粘度有機(jī)溶劑；

并且其中至少一種生物活性劑溶解或分散在低粘度混合物中，并且其中該預(yù)配制品不進(jìn)一步包括液晶硬化劑，由此在給藥后與體內(nèi)水性流體接觸時形成至少一種非層狀液晶相結(jié)構(gòu)。

從第五方面來看，本發(fā)明提供了一種用于形成根據(jù)本發(fā)明的第一方面所述的預(yù)配制品的工藝，該預(yù)配制品適于向(優(yōu)選哺乳動物)受試者給藥生物活性劑，所述工藝包括形成非液晶、低粘度混合物，該混合物具有以下項：

i)糖或糖衍生物的至少一種酯；

ii)至少一種磷脂；

iii)至少一種生物相容的、含氧的、低粘度有機(jī)溶劑；

并且在形成低粘度混合物之前將至少一種生物活性劑溶解或分散在低粘度混合物中，或在組分i)、ii)或iii)中的至少一種中，其中該預(yù)配制品不進(jìn)一步包括液晶硬化劑。

從第六方面來看，本發(fā)明提供了非液晶、低粘度混合物在制造用于在持續(xù)遞送所述活性劑中使用的預(yù)配制品中的用途，該混合物具有以下項：

i)糖或糖衍生物的至少一種酯；

ii)至少一種磷脂；

iii)至少一種生物相容的、含氧的、低粘度有機(jī)溶劑；

其中至少一種生物活性劑溶解或分散在低粘度混合物中，其中所述預(yù)配制品在與水性流體接觸時能夠形成至少一種非層狀液晶相結(jié)構(gòu)，并且其中該預(yù)配制品不進(jìn)一步包括液晶硬化劑。

從第七方面來看，本發(fā)明提供了一種治療或預(yù)防人或非人(優(yōu)選哺乳動物)動物受試者的方法，該方法包括給藥根據(jù)本發(fā)明的第一方面所述的預(yù)配制品。

從第八方面來看，本發(fā)明提供了一種預(yù)填充給藥裝置，該預(yù)填充給藥裝置包含根據(jù)本發(fā)明的第一方面所述的預(yù)配制品。

從第九方面來看，本發(fā)明提供了一種試劑盒，該試劑盒包含如上文所定義的給藥裝置。

從第十方面來看，本發(fā)明提供了一種將預(yù)配制品遞送到對其有需要的受試者的方法，該方法涉及使用第八方面的給藥來給藥根據(jù)本發(fā)明的第一方面所述的預(yù)配制品。

發(fā)明的詳細(xì)說明

本發(fā)明的配制品在給藥后產(chǎn)生非層狀液晶相。本發(fā)明的配制品與基于甘油二油酸酯和磷脂酰膽堿(gdo/pc)的已知脂質(zhì)系統(tǒng)不同之處在于為甘油衍生的二?；|(zhì)被替代，大部分被糖或糖衍生物的酯替代或至少補(bǔ)充。

wo2013/032207a1披露了包括脂肪酸脫水山梨糖醇酯、磷脂、液晶硬化劑和乙醇的預(yù)配制品。其中所述的組合物被披露適于活性劑的緩釋。針對亮丙瑞林(leuprolide)的緩釋的另外的數(shù)據(jù)由相同的作者們在j.controlledrelease[控釋雜志]185(2014)，62-70中給出。在wo2013/032207中，液晶硬化劑的作用被認(rèn)為是增加非層狀相的曲率所必需的。在該公開文件中披露了液晶硬化劑為不含可離子化基團(tuán)的化合物，其具有15至40個碳原子的疏水部分并具有三?；鶊F(tuán)或碳環(huán)結(jié)構(gòu)。具體實例包括甘油三酯、棕櫚酸視黃酯、生育酚乙酸酯、膽固醇、苯甲酸芐酯及其混合物。在wo2014/104784a1、wo2014/104788a1和wo2014/104791a1的配制品中采用相同的液晶硬化劑。在這些公開文件中泛醌被另外建議作為液晶硬化劑。

在以上提及的基于脫水山梨糖醇酯和磷脂的控釋系統(tǒng)中需要存在液晶硬化劑。wo2013/032207、wo2014/104784、wo2014/104788和wo2014/104791的清楚的披露內(nèi)容是，脫水山梨糖醇酯和磷脂不能以這樣的方式一起配制，以便產(chǎn)生有效的緩釋脂質(zhì)配制品，而不需要另外存在這種液晶硬化劑。

現(xiàn)在本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)確定，在不存在另外的液晶硬化劑的情況下，可以通過至少一種脫水山梨糖醇酯與至少一種磷脂的組合來提供有用的緩釋組合物。特別地，已經(jīng)確定的是，如果仔細(xì)控制脫水山梨糖醇酯和磷脂的比率，則不需要液晶硬化劑的存在?？紤]到通過以前的相應(yīng)系統(tǒng)的公開內(nèi)容所教授的該組分的關(guān)鍵性，這是完全出人意料的。

因此，本發(fā)明提供了基于脫水山梨糖醇酯/磷脂系統(tǒng)的已知緩釋配制品的替代物，其具有不需要一種或多種液晶硬化劑的益處。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的配制品旨在用于藥物用途，并且因此組合物的每種組分連同組合物作為整體必須滿足嚴(yán)格的健康和安全性標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明的必需組分包括脫水山梨糖醇酯、磷脂和生物相容的、含氧的、低粘度有機(jī)溶劑。后兩種組分廣泛用于藥物制劑。脫水山梨糖醇酯從不同供應(yīng)商可商購獲得，如禾大公司(croda)(例如，80)。所有這些組分都在藥物產(chǎn)品中有現(xiàn)有的用涂，因此本發(fā)明的組合物可能符合當(dāng)?shù)厮幬飿?biāo)準(zhǔn)并且即使在基于定期給藥時也是無害的。

現(xiàn)有技術(shù)中已知的脫水山梨糖醇酯/磷脂系統(tǒng)以液晶硬化劑的另外存在為特征。雖然現(xiàn)有技術(shù)建議的一些硬化劑可以是藥學(xué)上可接受的，但是其他幾種顯然是不期望的，尤其是在患者需要基于定期服用這些組合物并且可能暴露于相對大量的該組分的情況下。

液晶硬化劑的目的是幫助在與水性流體接觸時產(chǎn)生非層狀相。可能在許多情況下，建議和例示的液體固化劑可能表現(xiàn)出生理作用。也似乎不太可能的是，對于在以前的披露中建議的若干種硬化劑，法規(guī)性審批會被允許。獲得法規(guī)性審批會是一項艱巨的任務(wù)。該液晶硬化劑還可能是昂貴的，并且不利于任何存在的肽的穩(wěn)定性，特別是在該液晶硬化劑是生育酚的情況下。這些問題由其中不需要液晶硬化劑的本發(fā)明來解決。

本發(fā)明提供了一種基于二?；视?dag)和/或生育酚與磷脂酰膽堿(pc)或磷脂酰乙醇胺(pe)的組合的已知緩釋脂質(zhì)系統(tǒng)的互補(bǔ)系統(tǒng)。雖然已知dag/pc或dag/pe系統(tǒng)的釋放特性可以被調(diào)整以適應(yīng)感興趣的應(yīng)用，即以產(chǎn)生一周長或一個月長的緩釋產(chǎn)品，但提供可被調(diào)整為具有不同釋放特征(例如不能用dag/pc系統(tǒng)達(dá)到的那些釋放特征)的互補(bǔ)系統(tǒng)顯然會是有利的。糖-脂質(zhì)組分(即，脫水山梨糖醇酯代替dag和/或生育酚)的使用也可以允許活性劑的不同負(fù)載，這些活性劑例如可以在已知的dag/pc系統(tǒng)中具有更低的溶解度。

因此，本發(fā)明通過仔細(xì)選擇糖酯:磷脂的比率以使另外的液晶硬化劑組分的存在是多余的，提供了基于脫水山梨糖醇酯與磷脂的組合的已知脂質(zhì)系統(tǒng)的互補(bǔ)系統(tǒng)。

本發(fā)明的預(yù)配制品優(yōu)選排除液晶硬化劑。更優(yōu)選地，從本發(fā)明的預(yù)配制品中排除wo2013/032207a1中披露的液晶硬化劑。

應(yīng)當(dāng)理解，完全排除組分如某些液晶硬化劑會是困難的或甚至是不可能的。在適用于本發(fā)明的所有方面的一個實施例中，這些能以組分i)和/或ii)中的痕量存在。在此背景下，術(shù)語“排除”涉及組分如晶體硬化劑的水平，該水平相對于組合物整體按重量計低于1,000ppm。優(yōu)選地，排除的晶體硬化劑的水平低于500ppm，更優(yōu)選低于300ppm，仍更優(yōu)選低于100ppm。在一個替代的實施例中，可以將“排除”帶至排除到非常高的水平，如排除到小于1ppm，小于0.1ppm，或甚至到低于檢測極限。

在一個方面，在本發(fā)明的預(yù)配制品中排除非肽活性藥物成分的存在。在另一方面，本發(fā)明的預(yù)配制品完全排除任何肽或非肽活性藥物成分的存在。

令人驚訝的結(jié)果是，當(dāng)用肽活性劑配制時，所選擇的組分的比例可以產(chǎn)生預(yù)配制品，其比基于脫水山梨糖醇酯/磷脂/液晶硬化劑的一些已知的脂質(zhì)系統(tǒng)表現(xiàn)出更低或類似的爆發(fā)-釋放連同類似的總體釋放特征。本發(fā)明的配制品具有與基于二酰基甘油(例如甘油二油酸酯(gdo))和磷脂酰膽堿(pc)的一些已知配制品可比較的低爆發(fā)-釋放特性。

組分i)–糖和/或糖衍生物的酯

本發(fā)明的組分i)是糖或糖衍生物的至少一種酯。這樣的酯包括一個極性“頭”基團(tuán)和至少一個非極性“尾”基團(tuán)，優(yōu)選長鏈尾基團(tuán)，如脂肪酸尾基團(tuán)。本發(fā)明的組分i)可以是單酯、二酯、三酯、四酯或其混合物。典型地，組分i)將包括糖或糖衍生物的至少一些二酯。

極性“頭”基團(tuán)的實例包括糖和糖衍生物。糖的實例包括單糖和二糖。衍生物的實例包括糖醇(如己糖醇)和脫水糖醇(如己糖醇酐)。脫水糖醇是頭基團(tuán)的最優(yōu)選的組，尤其是己糖醇酐。

應(yīng)當(dāng)理解，糖醇在脫水后可以環(huán)化。在此使用的術(shù)語“糖衍生物”和“脫水糖醇”尤其是指脫水并環(huán)化的c-5或c-6糖醇。c-6糖醇的實例包括己糖醇，如蒜糖醇、阿卓糖醇、山梨糖醇、gulitol、艾杜糖醇、半乳糖醇和塔羅糖醇，最優(yōu)選山梨糖醇。脫水糖醇的實例包括相應(yīng)的己糖醇酐，尤其是源自蒜糖醇、阿卓糖醇、山梨糖醇、gulitol、艾杜糖醇、半乳糖醇和塔羅糖醇及其環(huán)化形式的那些，特別是脫水并環(huán)化的山梨糖醇，即脫水山梨糖醇。應(yīng)當(dāng)理解，可以存在頭基團(tuán)的不同立體異構(gòu)體。本發(fā)明不限于極性頭基團(tuán)的任何具體的立體異構(gòu)體。然而，在一個優(yōu)選的實施例中，極性頭基團(tuán)優(yōu)選是脫水并環(huán)化的糖醇，最優(yōu)選脫水山梨糖醇。顯然，作為組分i)存在的任何糖和糖衍生物的酯必須是生物可耐受的。

非極性“尾”基團(tuán)的實例包括c6-c32烷基和烯基基團(tuán)，它們典型地作為長鏈羧酸的酯存在。通常通過參考碳鏈中的碳原子數(shù)和不飽和數(shù)來描述這些。因此，cx:z表示具有x個碳原子和z個不飽和的烴鏈。c12至c24脂肪?；鶊F(tuán)是高度適合的，特別是在烴鏈中具有零個、一個、兩個或三個不飽和的情況下。c16至c20是高度優(yōu)選的，特別是具有0至3個不飽和的情況下。實例特別包括月桂?；?c12:0)、肉豆蔻?；?c14:0)、棕櫚酰基(c16:0)、植烷酰基(c16:0)、棕櫚油?；?c16:1)、硬脂?；?c18:0)、異硬脂?；?c18:0)、油?；?c18:1)、反油?；?elaidoyl)(c18:1)、亞油?；?c18:2)、亞麻酰基(linolenoyl)(c18:3)、花生四烯?；?c20:4)、山崳?；?c22:0)和木蠟?；?lignoceroyl)(c24:9)基團(tuán)。因此，典型的非極性鏈基于天然酯脂質(zhì)的脂肪酸，包括己酸、辛酸、癸酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、植烷酸、棕櫚油酸、硬脂酸、異硬脂酸、油酸、反油酸、亞油酸、亞麻酸、花生四烯酸、山萮酸或木蠟酸，或相應(yīng)的醇。優(yōu)選的非極性鏈?zhǔn)亲貦八?、硬脂酸、異硬脂酸、油酸和亞油酸，特別是油酸。

在一個最優(yōu)選的方面，組分i)包括脫水山梨糖醇的至少一種脂肪酸酯。該脫水山梨糖醇酯包含脫水山梨糖醇頭基團(tuán)和至少一個非極性尾基團(tuán)，優(yōu)選基于脂質(zhì)的尾基團(tuán)。這樣的酯可以是單酯、二酯或三酯，并且組分i)可以包括兩種或更多種這樣的酯的混合物。在一個實施例中，組分i)將包括糖或糖衍生物，尤其是脫水山梨糖醇的單-、二-和三-脂肪酸酯的混合物。在所有這些酯中，“脂肪酸”或“脂肪?；被鶊F(tuán)將優(yōu)選是本文提到的優(yōu)選基團(tuán)，如棕櫚酸、硬脂酸、異硬脂酸、油酸和/或亞油酸。

在一個優(yōu)選的實施例中，組分i)將包括脫水山梨糖醇的脂肪酸二酯。組分i)可以包括相對于i)的總量的按重量計至少20％的這樣的脫水山梨糖醇二酯，優(yōu)選至少25％，并且更優(yōu)選至少30％。在一個實施例中，組分i)可以包括脫水山梨糖醇的脂肪酸二酯作為最大組分，特別是脫水山梨糖醇的單脂肪酸酯、二脂肪酸酯和三脂肪酸酯的混合物的最大組分。在所有這些酯中，“脂肪酸”或“脂肪?；被鶊F(tuán)將優(yōu)選是本文提到的優(yōu)選基團(tuán)，如棕櫚酸、硬脂酸、異硬脂酸、油酸和/或亞油酸。

存在的情況下，二酯、三酯和四酯將優(yōu)選包括具有附接到糖頭基團(tuán)的伯(即c-6)羥基基團(tuán)的酯基團(tuán)的脫水山梨糖醇頭基團(tuán)和附接到頭基團(tuán)中的至少一個其他羥基基團(tuán)(優(yōu)選附接到c-5羥基)的至少一個酯基團(tuán)。

應(yīng)當(dāng)理解，甚至基本上純的脫水山梨糖醇酯可以包括一部分其他酯，使得大多數(shù)商業(yè)制劑將是單酯、二酯和三酯的混合物。

本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經(jīng)確定，來自不同供應(yīng)商的可商購的80可以包括大部分二油酸酯、三油酸酯和四油酸酯，盡管它作為單油酸酯被提到并且被銷售。這通過若干個來源證實，如表1所示。

表1.根據(jù)不同來源的80的化學(xué)組成

其中組分i)包括不同酯的混合物，優(yōu)選的是單酯和二酯的總量為組分i)的至少40wt.％，優(yōu)選組分i)的至少50wt.％，如組分i)的至少60wt.％。

優(yōu)選的是，組分i)包括相對于i)的總量的糖的至少10wt.％的單酯，優(yōu)選20wt.％或更多。在一個優(yōu)選的實施例中，組分i)是span80，例如s1至s6(表1)中的至少一種或其混合物。

應(yīng)當(dāng)理解，在與水性流體接觸時自發(fā)形成反相脂質(zhì)相，并且因此配制品中按重量計組分i)和ii)的總含量不是關(guān)鍵的。更重要的是混合物的相對比例和行為。典型地，預(yù)配制品中組分i)的下wt.％極限為20wt.％，優(yōu)選大于30wt.％，最優(yōu)選大于40wt.％。預(yù)配制品中組分i)的上wt.％極限通常為80wt.％，優(yōu)選小于70wt.％，更優(yōu)選低于60wt.％。因此組分i)的優(yōu)選范圍為20-80wt.％，優(yōu)選30-70wt.％，更優(yōu)選40-60wt.％，如45-55wt.％。

組分ii)-磷脂組分

本發(fā)明的脂質(zhì)基質(zhì)中的組分“ii)”是至少一種磷脂。在一個優(yōu)選的方面，該磷脂包括至少一種磷脂酰膽堿(pc)或至少一種磷脂酰乙醇胺(pe)或其混合物，并且可以基本上由這些組分組成或由這些組分組成。與組分i)一樣，該組分包括一個極性頭基團(tuán)和至少一個非極性尾基團(tuán)。組分i)和ii)之間的差異主要在極性基團(tuán)中。因此，非極性部分可適當(dāng)?shù)卦醋砸陨厢槍M分i)所考慮的脂肪酸或相應(yīng)的醇。pc或pe中的主要組分將包含兩個非極性基團(tuán)。再次，以上針對組分i)所示的所有優(yōu)選基團(tuán)相應(yīng)地適用于組分ii)。特別地，c12至c24脂肪酰基基團(tuán)是高度適合的，特別是在烴鏈中具有零個、一個、兩個或三個不飽和的情況下。c16至c20是高度優(yōu)選的，特別是具有0至3個不飽和的情況下。c18基團(tuán)(再次飽和或具有1-3個不飽和)是最優(yōu)選的，并且可以與任何其他適合的非極性基團(tuán)，特別是c16基團(tuán)組合。

任何磷脂，如磷脂酰膽堿或磷脂酰乙醇胺部分可以源自天然來源。磷脂的適合來源包括卵、心臟(如牛)、腦、肝臟(如牛)和植物來源(包括大豆)。這樣的來源可以提供可以包括磷脂的任何混合物的組分ii)的一種或多種成分?？梢允褂脕碜赃@些或其他來源的任何單個pc或pc的混合物，但是包括大豆pc或卵pc的混合物是高度適合的。pc組分優(yōu)選包含至少50％的大豆pc或卵pc，更優(yōu)選包含至少75％的大豆pc或卵pc，并且最優(yōu)選包含基本上純的大豆pc或卵pc。

在適用于本發(fā)明的所有方面的一個實施例中，組分ii)包括pc。優(yōu)選地，pc源自大豆。優(yōu)選地，pc包括18:2脂肪酸作為主要脂肪酸組分，其中16:0和/或18:1作為次要脂肪酸組分。這些優(yōu)選以1.5:1和6:1之間的比率存在于pc中。具有大約60-65％18:2、10-20％16:0、5-15％18:1，其余主要是其他16個碳和18個碳脂肪酸的pc是優(yōu)選的，并且它是大豆pc的典型。

在一個替代的但同樣優(yōu)選的實施例中，pc組分可以包括合成的二油?；鵳c(dopc)。這被認(rèn)為提供增加的穩(wěn)定性，并且因此對于需要適合長期儲存穩(wěn)定的和/或在體內(nèi)具有長釋放期的組合物而言將是特別優(yōu)選的。在該實施例中，pc組分優(yōu)選包含至少50％的合成的二油酰基pc，更優(yōu)選包含至少75％的合成的二油酰基pc，并且最優(yōu)選包含基本上純合成的二油酰基pc。任何剩余的pc優(yōu)選是如以上的大豆pc或卵pc。

合成的或高度純化的pc，如二油?；字Ｄ憠A(dopc)是高度適合作為組分ii)的全部或部分的。合成的pc最優(yōu)選是1,2-二油?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿(dopc)，并且其他合成的pc組分包括：ddpc(1,2-二癸?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；depc(1,2-二瓢兒菜基(dierucoyl)-sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；dlopc(1,2-二亞油?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；dlpc(1,2-二月桂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；dmpc(1,2-二肉豆蔻?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；)；dppc(1,2-二棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；dspc(1,2-二硬脂酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；mppc(1-肉豆蔻酰基-2-棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；mspc(1-肉豆蔻酰基-2-硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；pmpc(1-棕櫚?；?2-肉豆蔻?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；popc(1-棕櫚?；?2-油?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；pspc(1-棕櫚酰基-2-硬脂?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；smpc(1-硬脂酰基-2-肉豆蔻酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；sopc(1-硬脂酰基-2-油酰基-sn-甘油基-3-磷酸膽堿)；以及sppc(1-硬脂?；?2-棕櫚?；?sn-甘油基-3-磷酸膽堿)或其任何組合。

在一些情況下，例如在不存在穩(wěn)定劑如edta的情況下，合成的或高度純化的pc(例如dopc)的使用可以為配制品中的活性劑提供更大的穩(wěn)定性。因此，在一個實施例中，組分ii)可以包括(例如可以包括至少75％)合成的或高度純化(例如純度>90％)的pc(例如dopc)。這可以特別是在不存在螯合劑如edta的情況下。在一個替代的實施例中，組分ii)可以包括(例如包括至少75％)天然來源的pc，如大豆pc或卵pc。這將特別地是，其中前體配制品中包括至少一種穩(wěn)定組分(如抗氧化劑、螯合劑等)。

組分i)和ii)的特別有利的組合是脫水山梨糖醇的單脂肪酸酯、二脂肪酸酯和三脂肪酸酯與pc的混合物，尤其是與大豆pc和/或dopc的這種混合物。適合于該組合的適當(dāng)量的每種組分是任何組合中針對個體組分的本文所示的那些量。這也適用于本文所示的組分的任何組合，在上下文允許的情況下。

在一個實施例中，磷脂組分ii)包括二油酰基磷脂酰乙醇胺(dope)、大豆pe和/或卵pe，或dope/大豆pe/卵pe中的至少一種的混合物。在另一個實施例中，組分ii)包括二油?；字Ｒ掖及?dope)、大豆pe和/或卵pe中的至少一種，任選地作為與二油?；字Ｄ憠A(dopc)、大豆pc(spc)和/或卵pc(epc)中的至少一種的混合物。

該磷脂部分可以來源于天然來源。磷脂的適合來源包括卵、心臟(如牛)、腦、肝臟(如牛)、奶和植物來源(包括大豆)。特別優(yōu)選的是大豆磷脂和卵磷脂，尤其是大豆pe和/或卵pe。這樣的來源可以提供可以包括磷脂的任何混合物的組分ii)的一種或多種成分。優(yōu)選地，組分ii)包括大豆pe和/或卵pe。

在一個實施例中，磷脂組分ii)(作為一個整體)在過量水相(例如過量水)的存在下在37℃下形成反相六邊形液晶相。

通過仔細(xì)控制組分i):ii)的比率，在本發(fā)明的貯庫前體配制品(預(yù)配制品)中省去對液晶硬化劑的需要是可能的。在適用于本發(fā)明的所有方面的一個實施例中，組分i):ii)的wt.％比率在30:70至80:20的范圍內(nèi)，優(yōu)選35:65至75:35，更優(yōu)選45:55至75:25，如約60:40。

在另一個實施例中，組分i)包括脫水山梨糖醇的單脂肪酸酯、二脂肪酸酯和三脂肪酸酯的混合物或由其組成，并且組分ii)包括大豆pc或由其組成。在該實施例中，i):ii)的優(yōu)選比率是45:55至75:25，優(yōu)選50:50至75:25，更優(yōu)選55:45至70:30，如60:40至65:35。

在一個替代的實施例中，組分i)包括脫水山梨糖醇的單脂肪酸酯、二脂肪酸酯和三脂肪酸酯的混合物或由其組成，并且組分ii)包括dope或由其組成。在該實施例中，i):ii)的優(yōu)選比率是25:75至75:25，優(yōu)選30:70至75:25，更優(yōu)選40:60至70:30，如50:50至60:40。

如在此使用的，術(shù)語“約(around)”、“約(about)”、“大約(approximately)”等具有其自然含義，因為指定的值是最優(yōu)選的披露內(nèi)容，但接近于此的值也是適合的。特別地，指定值的±10％的值可以被這樣的術(shù)語涵蓋，優(yōu)選±5％，并且最優(yōu)選±2％。在組合物被認(rèn)為“包括”具體組分的情況下，那么這表明其他組分也可以存在。在組合物被認(rèn)為“基本上由”具體組分或一組組分組成的情況下，那么這表明指定的組分控制該組合物的本質(zhì)，并且因此將成為主要組分。這可以表明該組合物高達(dá)至少90wt％的指定組分，優(yōu)選至少95％，并且最優(yōu)選至少98wt％。

預(yù)配制品中組分ii)的下wt.％極限通常為約20wt.％，優(yōu)選大于30wt.％，優(yōu)選大于35wt.％，更優(yōu)選大于40wt.％。預(yù)配制品中組分ii)的上wt.％極限為約80wt.％，優(yōu)選小于70wt.％，更優(yōu)選低于60wt.％。典型地，在預(yù)配配制品中作為整體的組分ii)的量，或在磷脂混合物的情況下組分ii)的總量將是20-70wt.％，優(yōu)選25-60wt.％，更優(yōu)選30-60wt.％。

組分iii)-溶劑

本發(fā)明的預(yù)配制品的組分iii)包括含氧有機(jī)溶劑，基本上由其組成或由其組成。由于該預(yù)配制品是在給藥(例如，體內(nèi))后與水性流體接觸時產(chǎn)生貯庫組合物，所以期望的是，該溶劑對受試者是可耐受的，并且能夠與水性流體混合和/或從預(yù)配制品中擴(kuò)散或溶解到水性流體中。因此優(yōu)選的是具有至少中等水溶性的溶劑。

在一個優(yōu)選的實施例中，該溶劑使得相對較小的添加到包括a和b的組合物中，即低于20％(wt％)，或更優(yōu)選低于10％，給出了一個數(shù)量級或更多的大的粘度降低。如在此所述，10％溶劑的添加可以給出粘度比無溶劑組合物降低至兩個、三個或甚至四個數(shù)量級，即使該組合物是溶液或不含溶劑的l2相、或不適合的溶劑如水(服從下面考慮的特殊情況)或甘油。

適合用作組分iii)的典型溶劑包括選自醇、酮、酯(包括內(nèi)酯)、醚、酰胺(包括內(nèi)酰胺)和亞砜的至少一種溶劑。適合的醇的實例包括乙醇和異丙醇。一元醇優(yōu)于二醇和多元醇。在使用二醇或多元醇的情況下，優(yōu)選與至少等量的一元醇或其他優(yōu)選溶劑組合。酮的實例包括丙酮和碳酸丙烯酯。適合的醚包括二乙醚、糖元質(zhì)(glycofurol)、二甘醇一乙醚(diethyleneglycolmonoethylether)、dimethylisobarbide和聚乙二醇。適合的酯包括乙酸乙酯和乙酸異丙酯，并且二甲基硫化物作為適合的硫化物溶劑。適合的酰胺和亞砜分別包括n-甲基吡咯烷酮(nmp)、2-吡咯烷酮、二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基乙酰胺(dma)以及二甲基亞砜(dmso)。更不優(yōu)選的溶劑包括二甲基異山梨醇、四氫糠醇、二甘醇二甲醚和乳酸乙酯。

由于該預(yù)配制品要給藥到活的受試者，所以溶劑組分iii)必須是足夠生物相容的。該生物相容性的程度將取決于施用方法，并且由于組分iii)可以是溶劑的任何混合物，所以一定量的將是按大量時不可接受的溶劑顯然可以是存在的。然而，總的來說，形成組分iii)的溶劑或混合物必須在給藥時不引起受試者不可接受的反應(yīng)。通常，這樣的溶劑會是烴或優(yōu)選含氧的烴，這兩者都任選地具有其他取代基，如含氮的基團(tuán)。優(yōu)選的是，很少或沒有組分iii)包含鹵素取代的烴，因為它們傾向于具有跟低的生物相容性。在一部分鹵化溶劑如二氯甲烷或氯仿是必須的情況下，該比例通常將被最小化。在要非腸胃外形成貯庫組合物的情況下，可以比在該貯庫是腸胃外的情況下明顯地使用更大范圍的溶劑。

如在此使用的組分iii)可以是單一溶劑或適合溶劑的混合物，但通常將都會具有低粘度。這是重要的，因為本發(fā)明的關(guān)鍵方面之一是提供了具有低粘度的預(yù)配制品，并且適合溶劑的主要作用是降低該粘度。該降低將是溶劑的更低粘度作用以及溶劑和脂質(zhì)組合物之間的分子相互作用的組合。本發(fā)明的諸位發(fā)明人的一個觀察是，本文所述的具有低粘度的含氧溶劑與組合物的脂質(zhì)部分具有高度有利的和意想不到的分子相互作用，由此隨著添加小體積溶劑提供了粘度的非線性降低。

在20℃下，“低粘度”溶劑組分iii)(單一溶劑或混合物)的粘度應(yīng)該典型地不超過18mpas。在20℃下，這優(yōu)選不超過15mpas，更優(yōu)選不超過10mpas，并且最優(yōu)選不超過7mpas。

當(dāng)作為整體時，該預(yù)配制品在20℃下具有低于5000mpas的粘度，優(yōu)選低于2000mpas，優(yōu)選低于1000mpas，更優(yōu)選低于600mpas。適合粘度的典型范圍在20℃下例如將為0.1至5000mpas，優(yōu)選1至1000mpas，更優(yōu)選10至750mpas，并且最優(yōu)選25至500mpas。

該溶劑組分iii)當(dāng)在體內(nèi)形成貯庫組合物時將通常會是至少部分損失的，或通過從周圍空氣和/或組織吸收水被稀釋的。因此，優(yōu)選的是，組分iii)至少在某種程度上是水可混溶和/或可分散的，并且至少不應(yīng)該排斥水到防止吸水的程度。還在這方面，優(yōu)選具有相對少量碳原子(例如高達(dá)10個碳，優(yōu)選高達(dá)8個碳)的含氧溶劑。顯然，在存在更多氧的情況下，具有更大碳原子數(shù)的溶劑將傾向于保持可溶于水中。因此，碳與雜原子(例如n、o，優(yōu)選氧)比率將通常為約1:1至6:1，優(yōu)選2:1至4:1。在使用具有在這些優(yōu)選范圍之一之外比率的溶劑的情況下，那么這將優(yōu)選是，在與優(yōu)選的溶劑(如乙醇)組合中不超過75％，優(yōu)選不超過50％。這可以用于例如降低溶劑從預(yù)配制品中的蒸發(fā)速率，以便控制液晶貯庫形成的速率。

優(yōu)選地，組分iii)選自醇、酮、酯、醚、酰胺、亞砜及其混合物。更優(yōu)選地，組分iii)選自一元醇、二醇、三醇、醚、酮和酰胺。用于組分iii)的最優(yōu)選的溶劑選自下組，該組由以下各項組成：低分子量peg(200-500道爾頓)、乙醇、nmp、dmso或其混合物。尤其優(yōu)選的是乙醇、dmso和nmp連同其混合物。

本發(fā)明的預(yù)配制品在與過量水接觸時自發(fā)形成液晶相，并且因此應(yīng)當(dāng)理解，組分在有機(jī)溶劑中的加載不是尤其關(guān)鍵的。然而，顯然希望降低有機(jī)溶劑的水平以減少劑量體積，特別是對于需要腸胃外給藥(如注射)的應(yīng)用。優(yōu)選的是，溶劑的wt.％低于50wt.％，優(yōu)選低于40wt.％，更優(yōu)選低于25wt.％，優(yōu)選低于20wt.％。優(yōu)選的水平為15wt.％或更低。

生物活性劑/活性藥物成分

本發(fā)明的預(yù)配制品的組分的性質(zhì)是這些組分典型地是高度生物相容的。這些前體配制品典型地用于形成用于至少一種生物活性劑的控釋的“貯庫”。因此，在一個實施例中，任選的生物活性劑可以從本文所述的任何配制品中缺失，在上下文允許的情況下。

本發(fā)明的預(yù)配制品優(yōu)選包含一種或多種生物活性劑(本文中等效地描述為“活性劑”)?；钚詣┛梢允蔷哂兴Ｍ纳飳W(xué)或生理學(xué)作用的任何化合物，如肽、蛋白質(zhì)、藥物(drug)、抗原、營養(yǎng)素、化妝品、芳香劑、調(diào)味劑、診斷劑、藥物(pharmaceutical)、維生素或膳食劑，并且將被配制成一個水平，該水平足以提供處于功能性水平的體內(nèi)濃度(包括對于局部組合物的局部濃度)。在一些情況下，組分i)、ii)和/或iii)中的一個或多個也可以是活性劑，盡管優(yōu)選的是該活性劑不應(yīng)當(dāng)是這些組分之一。最優(yōu)選的活性劑是藥學(xué)試劑，包括藥物、疫苗和診斷劑。

可以通過本發(fā)明遞送的藥物試劑包括作用于以下各項的藥物：細(xì)胞和受體、外周神經(jīng)、腎上腺素能受體、膽堿能受體、骨骼肌、心血管系統(tǒng)、平滑肌、血液循環(huán)系統(tǒng)(thebloodcirculationsystem)、內(nèi)分泌和激素系統(tǒng)、血液循環(huán)系統(tǒng)(bloodcirculatorysystem)、突觸部位(synopticsites)、神經(jīng)效感器結(jié)點、免疫系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)、自體有效系統(tǒng)、消化和排泄系統(tǒng)、組胺系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)。

可以通過本發(fā)明的組合物遞送的藥物的實例包括但不限于，抗細(xì)菌劑、免疫調(diào)節(jié)劑(包括免疫興奮劑和免疫抑制劑)、抗癌劑和/或抗病毒藥物(如核苷類似物、紫杉醇及其衍生物)、抗炎藥物/試劑(如非甾體抗炎藥和皮質(zhì)類固醇)、心血管藥(包括降膽固醇和降血壓藥劑)、鎮(zhèn)痛藥、止吐藥(包括組胺h1、nk1和5-ht3受體拮抗劑)、皮質(zhì)類固醇和大麻素、抗精神病藥和抗抑郁藥(包括血清素攝取抑制劑、前列腺素和衍生物)、疫苗和骨骼調(diào)節(jié)劑。診斷劑包括放射性核素標(biāo)記的化合物和造影劑(包括x射線、超聲和mri造影增強(qiáng)劑)。營養(yǎng)素包括維生素、輔酶、膳食補(bǔ)充劑等。

特別適合的活性劑包括由于快速分解或排泄而將正常在體內(nèi)具有短停留時間的那些，以及具有差的口服生物利用度的那些。這些包括處于其天然或修飾形式的基于肽、蛋白質(zhì)和核酸的活性劑，激素，和其他天然存在的試劑。通過給藥處于由本發(fā)明的預(yù)配制品形成的貯庫組合物形式的這種試劑，這些試劑以持續(xù)水平提供一段時間，該段時間可以延長至數(shù)天、數(shù)周甚至數(shù)月，盡管具有快速清除率。經(jīng)由持續(xù)同一時期每天多次給藥，就穩(wěn)定性和患者依從性而言，這給出了明顯優(yōu)點。在一個優(yōu)選的實施例中，活性劑因此具有小于1天的生物半衰期(在進(jìn)入血流時)，優(yōu)選小于12小時，并且更優(yōu)選小于6小時。在一些情況下，這可能低至1-3小時或更短。適合的試劑也是具有相對于通過注射實現(xiàn)的差的口服生物利用度的那些，其中該活性劑還具有或者可替代地具有口服配制品中低于20％的生物利用度，或優(yōu)選低于2％，尤其低于0.2％，并且最優(yōu)選低于0.1％。

基于肽和蛋白質(zhì)的活性劑包括選自下組的人藥和獸藥，該組由以下各項組成：促腎上腺皮質(zhì)激素(acth)及其片段，血管緊張素及其相關(guān)肽、抗體及其片段、抗原及其片段、心房利鈉肽、生物粘附肽、緩激肽及其相關(guān)肽、降鈣素肽(包括降鈣素和胰淀素及其相關(guān)肽)、血管活性腸肽(vip)(包括生長激素釋放激素(ghrh)、胰高血糖素和促胰液素)、阿片樣肽(包括阿黑皮素原(pomc)肽、腦啡肽五肽、前強(qiáng)啡肽及相關(guān)肽)、胰多肽相關(guān)肽(如神經(jīng)肽(npy)、肽yy(pyy)、胰多肽(ppy))、細(xì)胞表面受體蛋白片段、趨化肽、環(huán)孢菌素、細(xì)胞因子、強(qiáng)啡肽及其相關(guān)肽、內(nèi)啡肽和p-lidotropin片段、腦啡肽及其相關(guān)蛋白、酶抑制劑、免疫刺激肽和聚氨基酸、纖連蛋白片段及其相關(guān)肽、胃腸肽、促性腺激素釋放激素(gnrh)激動劑和拮抗劑、胰高血糖素樣肽1和2、生長激素釋放肽、免疫刺激肽、胰島素和胰島素樣生長因子、白細(xì)胞介素、促黃體激素釋放激素(lhrh)及其相關(guān)肽(等同于如下面所述的gnrh激動劑)、黑皮質(zhì)素受體激動劑和拮抗劑、黑素細(xì)胞刺激激素及其相關(guān)肽、核定位信號相關(guān)肽、神經(jīng)降壓素及其相關(guān)肽、神經(jīng)遞質(zhì)肽、阿片肽、催產(chǎn)素、加壓素及其相關(guān)肽、甲狀旁腺激素及其片段、蛋白激酶及其相關(guān)肽、生長抑素及其相關(guān)肽、p物質(zhì)及其相關(guān)肽、轉(zhuǎn)化生長因子(tgf)及其相關(guān)肽、腫瘤壞死因子片段、毒素和類毒素、以及功能性肽(如抗癌肽，包括血管抑素，抗高血壓肽，抗凝血肽和抗微生物肽)；這些功能性肽選自下組，該組由以下各項蛋白質(zhì)組成：如免疫球蛋白、血管生成素、骨形態(tài)發(fā)生蛋白、趨化因子、集落刺激因子(csf)、細(xì)胞因子、生長因子、干擾素(i型和ii型)、白細(xì)胞介素、瘦素、白血病抑制因子、干細(xì)胞因子、轉(zhuǎn)化生長因子和腫瘤壞死因子。適用于本發(fā)明的一類有趣的生物活性劑是肽激素，包括以下那些：糖蛋白激素家族(促性腺激素(lh、fsh、hcg)、促甲狀腺激素(tsh))；阿黑皮素原(pomc)家族，促腎上腺皮質(zhì)激素(acth)；垂體后葉激素(包括加壓素和催產(chǎn)素)，生長激素家族(包括生長激素(gh)、人絨毛膜生長催乳激素(hcs)、催乳素(prl))，胰多肽家族(包括pp、pyy和npy)；黑素濃集激素(mch)；食欲素；胃腸激素和肽(包括glp-1和gip)；饑餓素和肥胖抑素；脂肪組織激素和細(xì)胞因子(包括瘦素、脂聯(lián)素和抵抗素)；利鈉激素；甲狀旁腺激素(pth)；

降鈣素家族，降鈣素和胰淀素；胰激素(包括胰島素、胰高血糖素和生長抑素)。設(shè)計為與以上提到的肽具有類似的受體親和譜的所有合成肽也非常適合于本發(fā)明。

本發(fā)明的貯庫組合物的另一個相當(dāng)大的優(yōu)點是活性劑在長時期內(nèi)逐漸釋放，而不需要重復(fù)給藥。因此，這些組合物高度適合于患者依從性是困難的、不可靠的或水平劑量是高度重要的情況，例如改變心境的活性物質(zhì)，具有狹窄治療窗口的那些活性物質(zhì)，以及向兒童或向其生活方式與可靠給藥方案不相容的人給藥的那些活性物質(zhì)，以及針對“生活方式”的活性物質(zhì)，其中重復(fù)給藥的不便可能超過活性物質(zhì)的益處。這方面提供具體優(yōu)點的具體類別的活性物質(zhì)包括：避孕藥，包括避孕激素的激素，并且特別是在兒童中使用的激素(如生長激素、抗上癮劑)，以及用于治療不良依從性群體(如患有精神分裂癥、阿爾茨海默病或帕金森病的患者)的藥物，抗抑郁藥以及抗驚厥藥。

陽離子肽特別適用于以下情況：一部分預(yù)配制品包括陰離子兩親物如脂肪酸或陰離子脂質(zhì)，包括磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰絲氨酸。在該實施例中，優(yōu)選的肽包括奧曲肽，蘭瑞肽，降鈣素，催產(chǎn)素，干擾素-β和-γ，白細(xì)胞介素4、5、7和8，以及具有高于ph7，尤其是高于ph8的等電點的其他肽。

在本發(fā)明的一個優(yōu)選方面，本發(fā)明的組合物使得在暴露于水性流體時形成反向膠束立方(i2)相或包括i2相的混合相，并且該組合物中包括極性活性劑。特別適合的極性活性劑包括肽和蛋白質(zhì)活性物質(zhì)、寡核苷酸以及小的水可溶活性物質(zhì)，包括以上列出的那些。在這方面特別感興趣肽的是奧曲肽和其他生長抑素相關(guān)肽、干擾素α和β、胰高血糖素樣肽1和胰高血糖素樣肽2受體激動劑、亮丙瑞林和其他gnrh激動劑、阿巴瑞克和其他gnrh拮抗劑、卓勒二磷酸鹽(zolendronate)和伊班膦酸鹽以及其他二磷酸鹽。

由于所有選擇用于治療中度至重度慢性疼痛的μ-阿片受體激動劑(嗎啡、氫嗎啡酮、芬太尼、美沙酮、羥考酮和丁丙諾啡)具有相同的作用機(jī)制，因此它們的生理化學(xué)和藥代動力學(xué)特征在確定適當(dāng)?shù)慕o藥途徑和待使用的產(chǎn)品配制品方面是更關(guān)鍵的。例如，阿片樣物質(zhì)(如嗎啡、氫嗎啡酮和羥考酮)的短消除半衰期需要頻繁給藥這些試劑以實現(xiàn)晝夜不停止痛，這使它們成為長效釋放配制品的優(yōu)秀候選物。芬太尼和丁丙諾啡在口服給藥后經(jīng)歷顯著的首過代謝并且缺乏足夠的生物利用度。與它們的高效力一起，芬太尼和丁丙諾啡是本發(fā)明的長效注射液貯庫配制品的優(yōu)秀候選物。舒芬太尼、瑞芬太尼、羥嗎啡酮、二嗎啡酮(dimorphone)、二氫埃托啡、二乙酰嗎啡是適用于本發(fā)明的其他有效的阿片受體激動劑。

丁丙諾啡也用于維持治療阿片樣物質(zhì)成癮連同潛在地還維持治療可卡因和苯丙胺以及甲基安非他明成癮，其中目前的舌下丁丙諾啡配制品遭受低生物利用度、高變異性和有限的作用持續(xù)時間困擾，這導(dǎo)致不可預(yù)測的劑量反應(yīng)和脫癮癥狀的問題，特別是在早晨。這些問題通過使用本發(fā)明的注射液貯庫配制品有效地解決了，因為是濫用和錯誤指導(dǎo)的問題，其中通過注射開發(fā)了對高度舌下劑量的需求，其中相同劑量的效果顯著更高，因此促進(jìn)濫用藥物。類似地，使用如本發(fā)明提供的方便的注射液貯庫系統(tǒng)，阿片拮抗劑可用于治療成癮。用于與本發(fā)明一起使用的適合的阿片拮抗劑是納洛酮、納美芬和納曲酮。

考慮到改善治療患者依從性的潛力連同通過提供隨時間穩(wěn)定的血漿水平，抗精神病藥，包括利哌酮、伊潘立酮、帕利哌酮、奧氮平、齊拉西酮(ziprazidone)和阿立哌唑也高度適合本發(fā)明。類似地，本發(fā)明有用于治療不利地影響認(rèn)知的癡呆、阿爾茨海默病和帕金森病。適合的活性成分包括多奈哌齊、利凡斯的明、加蘭他敏和美金剛(memantine)、以及普拉克索。

當(dāng)與蛋白質(zhì)/肽活性劑組合使用時，本發(fā)明的具體優(yōu)點是抑制了活性劑的聚集。因此，在一個優(yōu)選的實施例中，本發(fā)明提供了一種貯庫前體，并且特別是如本文所述的包括至少一種肽或蛋白質(zhì)活性劑的貯庫組合物，其中不超過5％的活性劑處于聚集形式。優(yōu)選不超過3％是聚集的，并且最優(yōu)選不超過2％(尤其是小于2％)處于聚集形式。從高效率、低副作用和可預(yù)測的吸收曲線的觀點來看，非聚集蛋白質(zhì)的這種穩(wěn)定是高度有利的。此外，越來越預(yù)期，為了獲得法規(guī)性審批，蛋白質(zhì)/肽治療劑將具有低水平的蛋白質(zhì)聚集。

促性腺激素釋放激素激動劑(gnrh激動劑)是合成的肽，其在下丘腦神經(jīng)激素gnrh之后建模，該下丘腦神經(jīng)激素gnrh與促性腺激素釋放激素受體相互作用以引發(fā)其生物反應(yīng)，即垂體激素、促卵泡激素(fsh)和促黃體激素(lh)的釋放。gnrh激動劑有用于治療激素敏感的并且其中性腺功能減退狀態(tài)會降低復(fù)發(fā)的機(jī)會的癌癥。因此，它們通常用于醫(yī)療管理前列腺癌并已用于患有乳腺癌的患者。其他適應(yīng)癥領(lǐng)域包括治療具有性早熟的個體中的青春期延遲，依賴于雌激素生產(chǎn)的女性障礙的管理。此外，患有月經(jīng)過多、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮腺肌病、或子宮肌瘤的女性可以接受gnrh激動劑以抑制卵巢活性并誘導(dǎo)低雌激素狀態(tài)。

促性腺激素釋放激素受體激動劑(gnrh-ra)，如亮丙瑞林(leuprolide或leuprorelin)、戈舍瑞林、組氨瑞林、曲普瑞林、布舍瑞林、地洛瑞林、那法瑞林(naferelin)和相關(guān)肽，用于或指示用于治療多種病癥，其中它們典型地經(jīng)延長時間段給藥。gnrh-ra形成用于在本發(fā)明中使用的優(yōu)選的一組活性劑。

gnrh本身是結(jié)構(gòu)pyro-glu-his-trp-ser-tyr-gly-leu-arg-pro-gly-nh2(gnrh-i)的翻譯后修飾十肽。兩種天然的變體，具有5-his、7-trp、8-tyr取代的gnrh-ii和具有7-trp、8-leu的gnrh_iii也是已知的。具有激動特性的若干種肽類似物是已知的，其中大多數(shù)具有被n-et-nh2代替的10-gly-nh2。夫替瑞林僅具有10-gly至n-et-nh2取代，而在gnrh-i上具有另外取代的類似物包括亮丙瑞林(leuprorelin或leuprolide)(6-d-leu)、布舍瑞林(6-ser(bu^t))、組氨瑞林(6-d-his(imbzl))、地洛瑞林(6-d-trp)。另一種常見的非肽激動劑是戈舍瑞林，其被6-ser(bu^t)取代并具有被azagly-nh2替代的10-gly-nh2。narafelin(6-d-nal)和曲普瑞林(6-d-trp)都保留了10-gly-nh2基團(tuán)。兩種最常見的gnrh激動劑(亮丙瑞林和戈舍瑞林)的結(jié)構(gòu)如下面乙酸鹽所示。

亮丙瑞林：pyro-glu-his-trp-ser-tyr-d-leu-leu-arg-pro-n-et-nh2(乙酸鹽)

戈舍瑞林：pyro-glu-his-trp-ser-tyr-d-ser(bu^t)-leu-arg-pro-azgly-nh2(乙酸鹽)

少數(shù)的gnrh拮抗劑也是已知的，再次基于gnrh-i結(jié)構(gòu)。這些包括阿巴瑞克(d-ala-d-phe-d-ala-ser-tyr-d-asp-leu-lys(ⁱpr)-pro-d-ala)，安雷利克斯(d-nal-d-phe-d-pal-ser-phe-d-hcit-leu-lys(ⁱpr)-pro-d-ala)；西曲瑞克(d-nal-d-phe-d-pal-ser-tyr-d-cit-leu-arg-pro-d-ala)，加尼瑞克(d-nal-d-phe-d-pal-ser-tyr-d-harg-leu-harg-pro-d-ala)，itrelix(d-nal-d-phe-d-pal-ser-niclys-d-niclys-leu-lys(ⁱpr)-pro-d-ala)和nal-glu(d-nal-d-phe-d-pal-ser-d-glu-d-glu-leu-arg-pro-d-ala)。

給藥單劑量的gnrh激動劑(如亮丙瑞林)刺激了促性腺激素(即lh和fsh)的垂體釋放，這導(dǎo)致血清lh和fsh濃度升高并且刺激卵巢和睪丸類固醇生成。在用單次每日劑量的藥物的初始治療期間，觀察到男性中血清睪酮和二氫睪酮(dht)以及絕經(jīng)前女性中血清雌酮和雌二醇濃度的瞬時增加。

盡管有效的gnrh激動劑在短期和/或間歇治療期間的作用是刺激類固醇生成，但是在長期給藥期間藥物在動物和人類中的主要作用是抑制促性腺激素分泌并抑制卵巢和睪丸類固醇生成。一種或多種確切的作用機(jī)制還沒有完全闡明，但gnrh激動劑的持續(xù)治療顯然在垂體gnrh和/或睪丸lh受體的數(shù)量上產(chǎn)生了降低，這分別導(dǎo)致垂體和/或睪丸脫敏。該藥物似乎不影響對促性腺激素的受體親和力。亮丙瑞林的作用機(jī)制還可以涉及抑制和/或誘導(dǎo)控制類固醇生成的酶。其他作用機(jī)制可以包括具有改變的生物活性的lh分子的分泌或lh和fsh分泌的正常脈沖模式的損傷。

許多嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥與性腺類固醇激素的濃度有關(guān)和/或受其影響。這些包括：某些腫瘤性疾病，包括癌癥，尤其是乳腺癌和前列腺癌、以及良性前列腺肥大；青少年早熟或青春期延遲；多毛癥；阿爾茨海默病；以及與生殖系統(tǒng)有關(guān)的某些病癥，如性腺機(jī)能減退、排卵障礙、閉經(jīng)、少精子癥、子宮內(nèi)膜異位、平滑肌瘤(子宮肌瘤)、經(jīng)前綜合征和多囊卵巢病。在體外受精方法中這個系統(tǒng)的控制也很重要。

雖然可以預(yù)期用gnrh激動劑的治療會加重受性腺類固醇激素濃度影響的病癥，但如果繼續(xù)治療約2周或更長時間，以上討論的下調(diào)效應(yīng)導(dǎo)致這些激素降低至無力水平。因此，可以通過長期gnrh激動劑治療來改善或緩解接受激素的腫瘤，如某些前列腺癌和乳腺癌，連同該性早熟和許多以上提到的其他病癥。

本發(fā)明的預(yù)配制品包含一種或多種gnrh類似物或其他活性物質(zhì)(參見以上)(其旨在通過對本文的“活性劑”的任何引用)。由于gnrh是肽激素，所以典型的gnrh類似物將是肽，尤其是具有12個或更少氨基酸的肽。優(yōu)選地，這樣的肽將在結(jié)構(gòu)上與gnrhi、ii和/或iii、和/或一種或多種已知類似物(包括這里列出的那些)相關(guān)。肽可以僅包含選自遺傳密碼中示出的那些20種α-氨基酸，或者更優(yōu)選可以包含其異構(gòu)體以及其他天然和非天然氨基酸(通常為α、β或γ氨基酸)及其類似物和衍生物。優(yōu)選的氨基酸包括以上列出的作為已知gnrh類似物的組分的那些。

氨基酸衍生物在肽的末端尤其有用，其中末端氨基或羧酸基團(tuán)可以被任何其他官能團(tuán)取代，如羥基，烷氧基，羧基，酯，酰胺，硫代，酰胺基，氨基，烷基氨基，二烷基氨基或三烷基氨基，烷基(貫穿本文，這是指c1-c12烷基，優(yōu)選c1-c6烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基等)，芳基(例如苯基、芐基、萘基等)或其他官能團(tuán)，優(yōu)選具有至少一個雜原子并且優(yōu)選具有總共不超過10個原子，更優(yōu)選不超過6個原子。

特別優(yōu)選的gnrh類似物是具有6至12個α-氨基酸的約束肽，其具體實例包括以上所示的那些，并且特別是具有以上所示的序列的亮丙瑞林和戈舍瑞林。

如本文使用的“gnrh類似物”表示任何gnrh激動劑或拮抗劑，優(yōu)選肽、肽衍生物或肽類似物。肽衍生的gnrh激動劑是最優(yōu)選的，如以上所示的那些，并且尤其是亮丙瑞林或戈舍瑞林。

gnrh類似物通常會配制成按重量計總配制品的0.02％至12％。典型值將是0.1％至10％，優(yōu)選0.2％至8％，并且更優(yōu)選0.5％至6％。約1％-5％的gnrh類似物含量是最優(yōu)選的。

適合包含在配制品中的gnrh類似物的劑量，以及因此使用的配制品的體積將取決于釋放速率(如例如通過溶劑類型和用量所控制)和釋放持續(xù)時間連同期望的治療水平、特定試劑的活性以及選擇的具體活性物質(zhì)的清除率。典型地，0.1至500mg/劑量的量將適合提供7至180天之間的治療水平。這將優(yōu)選是1mg至200mg。對于亮丙瑞林或戈舍瑞林，該水平將典型地在約1mg至120mg(例如，對于30至180天的持續(xù)時間)。優(yōu)選地，在針對經(jīng)30天至1年，優(yōu)選3至6個月釋放而設(shè)計的貯庫的注射之間，亮丙瑞林的量為約0.02至1mg/天。明顯地，活性物質(zhì)的穩(wěn)定性和釋放速率的線性將意味著負(fù)載與持續(xù)時間可以不是線性關(guān)系。每30天給藥的貯庫可能具有例如2mg至30mg的活性物質(zhì)(如本文所示的gnrh類似物之一)，或90天的貯庫具有6mg至90mg的活性物質(zhì)。

在活性劑包括5ht3拮抗劑或第二代5ht3拮抗劑的情況下，該活性劑優(yōu)選選自昂丹司瓊(odansetron)、托烷司瓊、格拉司瓊、多拉司瓊、帕洛諾司瓊、阿洛司瓊、西蘭司瓊和/或雷莫司瓊或其混合物。適合包含在配制品中的5ht3拮抗劑的劑量，以及因此使用的配制品的體積將取決于釋放速率(如例如通過溶劑類型和用量所控制)和釋放持續(xù)時間連同期望的治療水平、特定試劑的活性以及選擇的具體活性物質(zhì)的清除率。典型地，1至500mg/劑量的量將適合提供5至90天之間的治療水平。這將優(yōu)選是1mg至300mg。對于格拉司瓊，該水平將典型地在約10mg至180mg(例如，對于3至60天的持續(xù)時間)。優(yōu)選地，在針對經(jīng)30天至1年，優(yōu)選3至6個月釋放而設(shè)計的貯庫的注射之間，格拉司瓊的量為約0.2至3mg/天。明顯地，活性物質(zhì)的穩(wěn)定性和釋放速率的線性將意味著負(fù)載與持續(xù)時間可以不是線性關(guān)系。每30天給藥的貯庫可能具有例如2mg至30mg的活性物質(zhì)，或90天的貯庫具有6mg至90mg的活性物質(zhì)。

生長抑素(生長激素釋放抑制因子，sst)是廣泛分布于動物中的天然肽激素，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中充當(dāng)神經(jīng)遞質(zhì)，并且對若干種組織具有不同的旁分泌/自分泌調(diào)節(jié)作用。在高等物種中已知的是兩種生物活性產(chǎn)物，sst-14和sst-28(sst-14在-n末端延伸的同類物)。

sst-14是具有序列ala-gly-cys-lys-asn-phe-phe-trp-lys-thr-phe-thr-ser-cys的14殘基環(huán)肽激素，其中這兩個半胱氨酸殘基通過二硫橋連接以在關(guān)鍵結(jié)合序列phe-trp-lys-thr處產(chǎn)生ii型β-轉(zhuǎn)角。天然sst-14的生物半衰期非常短(1-3分鐘)，并且因此其本身不是當(dāng)前配制品中可行的治療劑，但越來越多的在體內(nèi)具有更高活性和/或更長清除時間的生長抑素受體激動劑正在變得可獲得。

生長抑素受體激動劑(sra)，如sst-14、sst-28、奧曲肽、蘭瑞肽、伐普肽、帕瑞肽(som230)和相關(guān)肽，用于或指示用于治療多種病癥，其中它們典型地經(jīng)延長時間段給藥。sra形成用于在本發(fā)明中使用的優(yōu)選的一組活性劑。

例如，奧曲肽是具有序列d-phe-cys-phe-d-trp-lys-thr-cys-thr-醇(2-7二硫橋)的合成八肽，并且典型地以乙酸鹽的形式給藥。該sst-14衍生物保留對于體內(nèi)sst-樣活性所需的關(guān)鍵phe-(d)trp-lys-thrβ-轉(zhuǎn)角，但與天然激素相反，其具有約1.7小時的終末半衰期。在治療包括類癌腫瘤和肢端肥大癥的病癥中使用奧曲肽，并且它典型地在持續(xù)數(shù)周或更常見的數(shù)月或數(shù)年的時間段內(nèi)給藥。生長抑素受體激動劑對于治療許多不同類型的癌癥是特別有興趣的，因為發(fā)現(xiàn)多種腫瘤表達(dá)生長抑素受體(sstr)。存在五種已知類型的sstr(sstr1-sstr5)，示出對sst-14的同樣高的親和力。大多數(shù)調(diào)查的生長抑素受體激動劑，包括奧曲肽，示出對sstr2和sstr5的高選擇性；因此，奧曲肽對于治療表達(dá)這些類型的受體的腫瘤是特別感興趣的。

奧曲肽的最常見的“簡單”配制品是來自諾華公司(novartis)的“sandostatin”(rtm)。這是用于皮下(s.c)注射的水性溶液，并且100μg劑量在注射后0.4小時達(dá)到5.2ng/ml的峰濃度。作用持續(xù)時間可高達(dá)12小時，但通常每8小時進(jìn)行一次皮下給藥。明顯地，每日皮下注射3次持續(xù)數(shù)月或數(shù)年的時間段，不是理想的給藥方案。

帕瑞肽是一種對生長抑素受體亞型sstr1、2、3和sstr5具有高度親和力的多受體靶向生長抑素類似物，其已被開發(fā)用于治療神經(jīng)內(nèi)分泌疾病。目前已經(jīng)開發(fā)了兩種帕瑞肽的配制品：用于皮下(sc)注射的速釋配制品、和長效釋放(lar)配制品。

帕瑞肽最初由諾華制藥公司(novartispharma)開發(fā)，用作庫興氏病/綜合征和肢端肥大癥的治療方法，但它在治療其中生長抑素類似物(如奧曲肽)被指示的若干種病癥(包括類癌腫瘤)中具有潛在適用性。

在單次皮下劑量的帕瑞肽之后，人血漿水平典型地在給藥后約15分鐘至1小時快速達(dá)到峰值，在該峰值之后，起始半衰期為2-3小時。雖然對于后來的衰退期，清除半衰期更大，但很明顯，針對這種遞送的cmax/cave將會相當(dāng)高。

帕瑞肽lar是帕瑞肽的一種長效配制品，其解決了以上一些問題。然而，這是一種基于聚合物微粒的系統(tǒng)，其具有如本領(lǐng)域已知的并且如上文所述的這類系統(tǒng)的固有限制。

類癌腫瘤是由具有旁分泌功能的特殊細(xì)胞(apud細(xì)胞)引起的腸腫瘤。原發(fā)性腫瘤通常在闌尾中，在那里其在臨床上是良性的。繼發(fā)性、轉(zhuǎn)移性、腸類癌腫瘤分泌過量的血管活性物質(zhì)，包括血清素、緩激肽、組胺、前列腺素和多肽激素。臨床結(jié)果是類癌綜合征(在患有瓣膜性心臟病患者中的偶發(fā)性皮膚潮紅、紫紺、腹部絞痛和腹瀉的綜合征，而更少發(fā)生哮喘和關(guān)節(jié)病)。這些腫瘤可以在胃腸道(和肺內(nèi))的任何地方生長，其中在闌尾中大約90％。剩余的發(fā)生在回腸、胃、結(jié)腸或直腸。目前，類癌綜合征的治療開始于靜脈快速注射，隨后是靜脈輸注。當(dāng)已經(jīng)建立了對癥狀的充分作用時，開始用在聚乳酸-共-乙醇酸(plga)微球中配制的奧曲肽的貯庫配制品進(jìn)行治療。然而，在注射該貯庫后前兩周或更長的時期內(nèi)，建議每日皮下注射奧曲肽以補(bǔ)償從plga球的緩釋。

本發(fā)明的某些預(yù)配制品包含一種或多種生長抑素受體激動劑的鹽(其是肽活性物質(zhì)的優(yōu)選實例，其又旨在通過對本文的“活性劑”的任何引用)。由于sst-14是肽激素，所以典型的生長抑素受體激動劑將是肽，尤其是具有14個或更少氨基酸的肽。優(yōu)選地，這樣的肽將在結(jié)構(gòu)上被約束，如通過成為環(huán)狀和/或具有至少一個分子內(nèi)交聯(lián)。酰胺、酯或特別是二硫鍵交聯(lián)是高度適合的。優(yōu)選的約束肽將表現(xiàn)2型β轉(zhuǎn)角。這種轉(zhuǎn)角存在于生長抑素的關(guān)鍵區(qū)域。肽可以僅包含選自遺傳密碼中示出的那些20種α-氨基酸，或者更優(yōu)選可以包含其異構(gòu)體以及其他天然和非天然氨基酸(通常為α、β或γ、l-或d-氨基酸)及其類似物和衍生物。如本文使用的術(shù)語“生長抑素受體激動劑”還可以任選地涵蓋sst-14和/或sst-28，因為當(dāng)在本文所述的非常高性能緩釋配制品中配制為鹽時，它們是有活力的肽活性物質(zhì)。

正常不用于蛋白質(zhì)合成的氨基酸衍生物和氨基酸在肽的末端尤其有用，其中末端氨基或羧酸基團(tuán)可以被任何其他官能團(tuán)取代，如羥基，烷氧基，酯，酰胺，硫代，氨基，烷基氨基，二烷基氨基或三烷基氨基，烷基(貫穿本文，這是指c1-c18烷基，優(yōu)選c1-c8烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基或叔丁基等)，芳基(例如苯基、芐基、萘基等)或其他官能團(tuán)，優(yōu)選具有至少一個雜原子并且優(yōu)選具有總共不超過10個原子，更優(yōu)選不超過6個原子。

特別優(yōu)選的生長抑素受體激動劑是具有6至10個α-氨基酸的約束肽，其具體實例包括奧曲肽、蘭瑞肽及其具有cys-cys分子內(nèi)二硫鍵交聯(lián)的序列的環(huán)狀衍生物、帕瑞肽和伐普肽。最優(yōu)選的是奧曲肽和帕瑞肽。

生長抑素受體激動劑(如果存在的話)通常將被配制成按重量計總配制品的0.1％至10％。典型值將是0.5％至9％，優(yōu)選1％至8％，并且更優(yōu)選1％至7％。2％-5％的生長抑素受體激動劑含量是最優(yōu)選的。

適合包含在配制品中的生長抑素受體激動劑的劑量，以及因此使用的配制品的體積將取決于釋放速率(如例如通過溶劑類型和用量所控制)和釋放持續(xù)時間連同期望的治療水平、活性以及選擇的具體活性物質(zhì)的清除率。典型地，1至500mg/劑量的量將適合提供7至90天之間的治療水平。這將優(yōu)選是5mg至300mg。對于奧曲肽，該水平將典型地在約10mg至180mg(例如，對于30至90天的持續(xù)時間)。優(yōu)選地，注射之間，奧曲肽的量將是約0.2mg至3mg/天。因此，每30天給藥的貯庫可能具有6mg至90mg的奧曲肽，或90天的貯庫具有18mg至270mg的奧曲肽。

對于帕瑞肽，對于1至24周(優(yōu)選2至16(例如3、4、8、10或12)周)的持續(xù)時間，劑量典型地將會是約0.05至40mg/周貯庫持續(xù)時間的量，優(yōu)選0.1至20mg/周持續(xù)時間(例如1至5mg/周)。在一個替代的實施例中，預(yù)配制品可以被配制用于每周給藥(例如每7±1天)。0.05至250mg的帕瑞肽/劑量的總劑量將適合提供7至168天之間的治療水平。這將優(yōu)選是0.1至200mg，例如0.2至150mg、0.1至100mg、20至160mg等。明顯地，活性物質(zhì)的穩(wěn)定性和對釋放速率的作用將意味著負(fù)載與持續(xù)時間可以不是線性關(guān)系。每30天給藥的貯庫可能具有例如0.2mg至20mg的帕瑞肽，或90天的貯庫可能具有30mg至60mg的帕瑞肽。

在本發(fā)明的配制品中使用肽活性劑(如sra)的鹽的情況下，這將是生物學(xué)可耐受的鹽。適合的鹽包括乙酸鹽、雙羥萘酸鹽或氯化物鹽。氯化物鹽是最優(yōu)選的。

待與本發(fā)明的預(yù)配制品一起配制的生物活性劑的量將取決于功能劑量以及在給予時形成的貯庫組合物將提供持續(xù)釋放的時間段。典型地，為具體試劑配制的劑量將約等于正常日劑量乘以配制品將提供釋放的天數(shù)。明顯地，這個量將需要調(diào)整以考慮治療開始時大劑量的任何不利影響，并且因此這將通常是使用的最大劑量。適合于任何情況的精確量將容易地通過適合的實驗來確定。

優(yōu)選地，當(dāng)存在時，本發(fā)明的預(yù)配制品將包括按重量計組分i)+ii)+iii)的0.1-10wt.％的所述活性劑。

優(yōu)選地，在存在的情況下，該活性劑選自：

干擾素；gnrh激動劑布舍瑞林、地洛瑞林、戈舍瑞林、亮丙瑞林(leuprorelin/leuprolide)、那法瑞林和曲普瑞林；gnrh拮抗劑，例如西曲瑞克、加尼瑞克、阿巴瑞克、地加瑞克；胰高血糖素樣肽-1(glp-1)及其類似物，例如glp-1(7-37)、glp-1(7-36)酰胺、利拉魯肽、艾塞那肽和利西拉肽(ave0010)；胰高血糖素樣肽2激動劑(glp-2)及其類似物，例如glp-2和elsiglutide(zp1846)；dppiv抑制劑；生長抑素sst-14和sst-28以及生長抑素受體(sstr)激動劑，例如奧曲肽、蘭瑞肽、伐普肽、帕瑞肽。

適用于本發(fā)明的其他肽包括：血管肽素，血管緊張素i、ii、iii，antileukinate，抗炎肽2，抑肽酶，緩激肽，鈴蟾肽，降鈣素，骨化三醇，縮膽囊素(cck)，集落刺激因子，促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子，c肽，ddavp，皮啡肽衍生的四肽(taps)，強(qiáng)啡肽，內(nèi)啡肽，內(nèi)皮抑素，內(nèi)皮素，內(nèi)皮素-1，腦啡肽，表皮生長因子，促紅細(xì)胞生成素，成纖維細(xì)胞生長因子，促卵泡激素，卵泡抑素，促卵泡素，甘丙肽，甘丙肽樣肽，半乳凝素-1，胃泌素，胃泌素釋放肽，g-csf，饑餓素，神經(jīng)膠質(zhì)衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子，gm-csf，粒細(xì)胞集落刺激因子，生長激素，生長激素釋放因子，肝細(xì)胞生長因子，胰島素，胰島素樣生長因子i和ⅱ，干擾素，白細(xì)胞介素，瘦素，白血病抑制因子，黑皮質(zhì)素1、2、3、4，促黑素細(xì)胞激素metastin，單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)，嗎啡感受素(morphiceptin)，nep1-40，神經(jīng)肽y，神經(jīng)肽w，食欲素a和食欲素b，催產(chǎn)素p21-cip1/waf-1，tat融合蛋白，甲狀旁腺激素，色素上皮衍生生長因子(pedf)，肽，腎素原手柄區(qū)，肽yy(3-36)，血小板活化因子，血小板衍生生長因子，腎素原十肽，protegrin-1，pr39，催乳素，松弛素，促胰液素，物質(zhì)p，腫瘤壞死因子，尿皮質(zhì)激素，血管內(nèi)皮生長因子，腸血管活性多肽，加壓素。

最優(yōu)選地，該活性劑是選自丁丙諾啡、奧曲肽、帕瑞肽、亮丙瑞林和戈舍瑞林中的至少一種。例如，選自丁丙諾啡、亮丙瑞林和戈舍瑞林中的至少一種。

在適用于本發(fā)明的所有方面的一個實施例中，活性劑不包括生長抑素受體激動劑，換言之，活性劑不包括任何生長抑素受體激動劑。

在另一個實施例中，活性劑當(dāng)存在時可以排除某些特定的生長抑素受體激動劑，即帕瑞肽、奧曲肽和/或其鹽及混合物。在該實施例中，活性劑可以包括除了帕瑞肽、奧曲肽和/或其鹽及混合物的生長抑素受體激動劑。

如果存在生物活性劑，則優(yōu)選的是該組分不用作液晶硬化劑，即該生物活性劑對脂質(zhì)膜的曲度沒有貢獻(xiàn)。

在本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明的預(yù)配制品可以排除非肽活性劑，因為非肽活性劑更可能與脂質(zhì)強(qiáng)烈地相互作用，從而有助于膜的曲度。

在一個最優(yōu)選的方面，本發(fā)明的預(yù)配制品可以包括肽活性劑。在另一個實施例中，肽和非肽活性劑都從本發(fā)明的預(yù)配制品中排除。

如本文所使用的術(shù)語“液晶硬化劑”涵蓋wo2013/032207a1中描述的該術(shù)語的所有實施例。具體地，術(shù)語“液晶硬化劑”是指不含可離子化基團(tuán)的任何組分，其具有15至40個碳原子的疏水部分并具有三?；鶊F(tuán)或碳環(huán)結(jié)構(gòu)。然而，優(yōu)選的是，脫水山梨糖醇的三酰基脂肪酸酯從“液晶硬化劑”的定義中排除。這樣的三?；サ湫偷匾灾辽偕倭康谋壤嬖谟诮M分i)中，并且因此不是添加的液晶硬化劑?？呻x子化基團(tuán)包括羧基基團(tuán)或胺基團(tuán)。出于本發(fā)明的目的，羥基基團(tuán)不被認(rèn)為是可離子化基團(tuán)。

應(yīng)當(dāng)理解，定義“液晶硬化劑”可以涵蓋也落在組分i)或ii)的范圍內(nèi)的化合物，即糖衍生物的酯(如脫水山梨糖醇酯)或磷脂。出于本發(fā)明的目的，要求液晶硬化劑也必須不同于糖或糖衍生物的酯或磷脂的類別。因此，任何糖或糖衍生物的酯或磷脂都不被認(rèn)為是液晶硬化劑。

在一個優(yōu)選的實施例中，棕櫚酸視黃酯、苯甲酸芐酯、泛醌、生育酚和膽固醇或其衍生物被認(rèn)為是液晶硬化劑，并且因此從本發(fā)明的預(yù)配制品中排除。術(shù)語“排除”具有先前解釋的含義，并且適用于上下文允許的所有情況，特別是關(guān)于“晶體硬化劑”。在適用于本發(fā)明的所有方面的一個實施例中，預(yù)配制品中棕櫚酸視黃酯、苯甲酸芐酯、泛醌、生育酚、膽固醇或其衍生物的水平相對于整個組合物按重量計低于1,000ppm。優(yōu)選地，這些組分呈現(xiàn)為低于500ppm，更優(yōu)選低于300ppm，仍更優(yōu)選低于100ppm。在一個實施例中，這類組分可以完全被排除，例如排除至低于檢測極限。

甘油三酯也可以從本發(fā)明的預(yù)配制品中排除。然而，這不會延伸到包括如先前所解釋的脫水并環(huán)化的糖頭基團(tuán)的甘油三酯，因為它們可以固有地存在于組分i)中。因此，這些前體配制品可以排除具有極性頭基團(tuán)的甘油三酯，這些極性頭基團(tuán)不是一種或多種糖或糖衍生物。這樣的配制品可以例如排除不是脫水山梨糖醇的甘油三酯的甘油三酯。如上文所定義的，在此上下文中使用“排除”。在另一個實施例中，可以從本發(fā)明的配制品中排除非肽生物活性劑，尤其是具有液晶硬化活性的非肽生物活性劑。

在一個替代方面，本發(fā)明的預(yù)配制品可另外包括肽生物活性劑。然而，應(yīng)當(dāng)理解，肽生物活性劑不是如本文所使用的“液晶硬化劑”。

在一個最優(yōu)選的實施例中，該組合物基本上由至少一種脫水山梨糖醇酯(或其混合物)、至少一種磷脂、醇溶劑、任選的極性溶劑和任選的肽生物活性劑組成或由它們組成。這些能以本文所示的比率和優(yōu)選比率存在。應(yīng)當(dāng)理解，還可以存在如抗氧化劑、防腐劑等的組分。

給藥

如以上提到的，可以給藥本發(fā)明的預(yù)配制品，并且使用適合于待治療病癥的途徑和所用的生物活性劑來施用本發(fā)明的方法。給出了如本文所使用的術(shù)語“腸胃外”的既定含義，即“通過皮膚”而不是所有“非口服‘途徑。因此，腸胃外主要表示通過注射、輸注和類似技術(shù)(如無針注射)給藥。因此，術(shù)語“非腸胃外”涵蓋除了通過皮膚之外的應(yīng)用途徑。因此，通過腸胃外(例如可注射的，如通過皮下或肌內(nèi)注射)給藥將形成腸胃外貯庫。

在一個實施例中，通常會胃腸外給藥本發(fā)明的預(yù)配制品。這種給藥通常不是血管內(nèi)的方法，但將優(yōu)選是皮下、腔內(nèi)或肌內(nèi)。典型地，將通過注射來給藥，注射這個術(shù)語在本文中用于表示其中配制品穿過皮膚的任何方法，例如通過針、導(dǎo)管或無針注射器。

在腸胃外(尤其是皮下(s.c.))貯庫前體中，優(yōu)選的活性劑是適用于全身給藥的那些，包括抗細(xì)菌劑(包括阿米卡星(amicacin)、米諾環(huán)素和強(qiáng)力霉素)，局部和全身鎮(zhèn)痛藥(包括曲馬多、芬太尼、嗎啡、氫嗎啡酮、丁丙諾啡、美沙酮、羥考酮、可待因、阿司匹林、對乙酰氨基酚)，免疫抑制劑(如沙利度胺、來那度胺、西羅莫司、deforolimus、依維莫司、坦羅莫司、咗他莫司(umirolimus)、唑羅莫司)，nsaid(如布洛芬、萘普生、酮洛芬、雙氯芬酸、吲哚美辛、舒林酸、托美汀、水楊酸(如水楊酰胺)、二氟尼柳)，cox1或cox2抑制劑(如塞來昔布、羅非昔布、伐地考昔)，腫瘤學(xué)和內(nèi)分泌藥劑(包括奧曲肽、蘭瑞肽、布舍瑞林、亮丙瑞林、戈舍瑞林、曲普瑞林、阿伏瑞林(avorelin)、地洛瑞林、阿巴瑞克、地加瑞克、氟維司群、干擾素α、干擾素β、達(dá)貝泊汀α、依泊汀α、依泊汀β、依泊汀δ、阿糖胞苷、多西他賽和紫杉醇)，止吐藥(如格拉司瓊、昂丹司瓊、帕洛諾司瓊、阿瑞吡坦、福沙吡坦、奈妥吡坦、地塞米松，特別是5ht3拮抗劑或第二代5ht3拮抗劑，優(yōu)選選自昂丹司瓊、托烷司瓊、格拉司瓊、多拉司瓊、帕洛諾司瓊、阿洛司瓊、西蘭司瓊和/或雷莫司瓊或其混合物)，抗精神病藥(如溴哌利多、利培酮、奧氮平、伊潘立酮、帕潘立酮、哌泊噻嗪和珠氯噻醇)，抗病毒藥，抗驚厥藥(例如，噻加賓、托吡酯或加巴噴丁)或尼古丁，激素(如睪酮、環(huán)戊丙酸睪酮和十一酸睪酮、甲羥孕酮、雌二醇)，生長激素(如人生長激素)和生長因子(如粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子)，抗糖尿病藥劑(如glp_1(7-36)酰胺、glp-1(7-37)、利拉魯肽、艾塞那肽、利西拉肽和胰高血糖素)，乙酰膽堿酯酶受體抑制劑(如新斯的明、毒扁豆堿和利斯的明)以及普拉克索。

相結(jié)構(gòu)

本發(fā)明的預(yù)配制品在暴露于尤其在體內(nèi)并與體表接觸的水性流體時提供非層狀液晶貯庫組合物。在一個優(yōu)選的實施例中，在原位形成本發(fā)明的液晶相。

如本文所使用，術(shù)語“非層狀”用于表示正常或反向的液晶相(如立方相或六方相)或l3相或其任何組合。術(shù)語液晶表示所有六方液晶相、所有立方液晶相和/或其所有混合物。如本文所使用的六方表示“正常”或“反向”六方(優(yōu)選反向)，并且“立方”表示任何立方液晶相，優(yōu)選反向。

優(yōu)選地，在本發(fā)明的預(yù)配制品中，在與水性流體接觸時形成的液晶相結(jié)構(gòu)是反向六方相結(jié)構(gòu)(h2)和/或反向立方相結(jié)構(gòu)(i2)或其混合物或中間體。對于中間體，我們指的是具有在h2相和i2相的平均曲率之間的平均曲率的相，并且分別地，相圖中的哪個位置是在這兩個相之間，如果這兩個相都存在的話。優(yōu)選地，該液晶相結(jié)構(gòu)選自h2、i2或其混合物。

重要的是要理解，本發(fā)明的前體配制品(預(yù)配制品)是具有低粘度的。因此，這些預(yù)配制品必須不處于任何本體液晶相中，因為所有液晶相具有顯著高于可通過注射器或類似裝置給藥的粘度。因此，本發(fā)明的預(yù)配制品將處于非液晶狀態(tài)，如分子溶液、l2相或l3相，特別是溶液或l2。如本文通篇所使用的l2相優(yōu)選是“膨脹”l2相，其包含大于或約10wt％的具有降低粘度效果的溶劑組分iii)。這與“濃縮”或“不膨脹”l2相相反，該濃縮或不膨脹l2相不含溶劑，或含更少量的溶劑，或包含不提供與本文指定的含氧低粘度溶劑相關(guān)的粘度的降低的溶劑(或混合物)。

給藥后，本發(fā)明的預(yù)配制品經(jīng)歷從低粘度混合物到高粘度(通常是組織粘著)貯庫組合物的相結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變。一般來說，這將是一個從分子混合物/溶液、膨脹l2相和/或l3相至一個或多個(高粘度)液晶相(如正?；蚍聪虻牧交蛄⒎揭壕嗷蚱浠旌衔?的轉(zhuǎn)變。如上所示，給藥后，還可以發(fā)生進(jìn)一步的相變。顯然，完全相變對于本發(fā)明的發(fā)揮功能是不必要的，但至少所給藥的混合物的表層將形成液晶結(jié)構(gòu)。通常，至少對于所給藥的配制品的表面區(qū)域(該部分與空氣、體表和/或體液直接接觸)，這一轉(zhuǎn)變將是快速的。這將最優(yōu)選是經(jīng)幾秒鐘或幾分鐘(例如，高達(dá)30分鐘，優(yōu)選高達(dá)10分鐘，更優(yōu)選5分鐘或更短)。該組合物的其余部分可以通過擴(kuò)散和/或當(dāng)表面區(qū)域分散時更慢地將相改變?yōu)橐壕唷?/p>

在一個優(yōu)選的實施例中，本發(fā)明因此提供了如本文所述的預(yù)配制品，其至少一部分在與水性流體接觸時形成六方液晶相。如此形成的六方相可以逐漸分散，釋放活性劑，或隨后可以轉(zhuǎn)化為立方液晶相，然后反過來該立方液晶相逐漸分散。據(jù)信，該六方相將提供比立方相結(jié)構(gòu)(尤其是i2相和l2相)活性劑(特別是親水性活性劑)的更快速的釋放。因此，在立方相之前形成了六方相的情況下，這將導(dǎo)致活性劑的初始釋放以使?jié)舛妊杆龠_(dá)到有效水平，隨后隨著立方相降解逐漸釋放“維持劑量”。以這種方式，可以控制釋放曲線。

不受理論約束，據(jù)信在暴露(例如暴露于體液)時，本發(fā)明的預(yù)配制品丟失了其中包括的一些或全部有機(jī)溶劑(例如通過擴(kuò)散和/或蒸發(fā))并從身體環(huán)境(例如，靠近身體的潮濕空氣或體內(nèi)環(huán)境)吸收了水性流體，使得至少一部分配制品產(chǎn)生非層狀結(jié)構(gòu)，特別是液晶相結(jié)構(gòu)。在大多數(shù)情況下，這些非層狀結(jié)構(gòu)是高度粘性的并且不容易溶解或分散于體內(nèi)環(huán)境中，并且具有生物粘附性，因此不容易漂洗或沖洗掉。此外，由于該非層狀結(jié)構(gòu)具有大的極性、非極性和邊界區(qū)域，所以它在溶解和穩(wěn)定許多類型的活性劑并且保護(hù)這些免于降解機(jī)制方面是高度有效的。由于預(yù)配制品形成的貯庫組合物在數(shù)天、數(shù)周或數(shù)月的時間段內(nèi)逐漸降解，所以活性劑從組合物中逐漸釋放和/或擴(kuò)散出來。由于貯庫組合物內(nèi)的環(huán)境是相對受保護(hù)的，所以本發(fā)明的預(yù)配制品高度適用于具有相對低的生物半衰期(參見上文)的活性劑。

附圖：

圖1說明了針對相對于總脂質(zhì)含量的磷脂比例的配制品粘度。

圖2示出了闡明80混合物的液晶結(jié)構(gòu)的同步加速器小角度x射線衍射(saxd)測量。

圖3示出了闡明80混合物的液晶結(jié)構(gòu)的同步加速器小角度x射線衍射(saxd)測量。

圖4示出了闡明80混合物的液晶結(jié)構(gòu)的同步加速器小角度x射線衍射(saxd)測量。

圖5示出了完全水合的80/viteac混合物的x射線衍射圖。

圖6示出了來自包含2.1wt％的leu的80和比較性80/viteac以及spc/gdo配制品的乙酸亮丙瑞林的體外釋放。

圖7示出了來自包含2.3wt％的oct的80和比較性80/viteac以及spc/gdo配制品的奧曲肽的體外釋放。

實例

材料

來自德國類脂公司(lipoid,germany)的大豆磷脂酰膽堿(spc)-類脂s100

來自日本nof公司(nof,japan)的二油?；字Ｄ憠A(dopc)

來自德國類脂公司(lipoid,germany)的二油酰磷脂酰乙醇胺(dope)-類脂pe18:1/18:1

來自瑞典西格瑪-奧德里奇公司(sigma-aldrich,sweden)的脫水山梨糖醇單油酸酯(80)

來自瑞典西格瑪-奧德里奇公司(sigma-aldrich,sweden)的維生素e乙酸酯(viteac)

來自英國禾大公司(croda,uk)的甘油二油酸酯(gdo)-cithrolgdo

來自瑞典solveco公司(solveco,sweden)的乙醇(etoh)99.5％ph.eur.

來自美國多肽實驗室(polypeptidelabs.,usa)的乙酸亮丙瑞林(leu)

來自美國多肽實驗室(polypeptidelabs.,usa)的奧曲肽鹽酸化物(oct)

來自瑞典西格瑪-奧德里奇公司(sigma-aldrich,sweden)的磷酸鹽緩沖鹽水(pbs)片劑

來自德國布勞恩公司(b.braun,germany)的注射用水(wfi)

所有其他化學(xué)品都具有分析級純度。

實例1.

包括大豆磷脂酰膽堿和80的液體配制品

制備包含不同比例的大豆磷脂酰膽堿(spc)、脫水山梨糖醇單油酸酯(80)和作為溶劑的乙醇(etoh)的前體配制品。稱取適量的spc、80和etoh(總共3g)于6r注射玻璃小瓶中。然后在室溫下將密封的小瓶放置在輥式混合器上，直到完全混合成澄清均質(zhì)的液體溶液(<24小時)。表2中給出了樣品組成。

表2.spc/80/etoh配制品的組成。

實例2.

包括二油?；字Ｄ憠A和80的液體配制品

制備包含不同比例的二油?；字Ｄ憠A(dopc)、脫水山梨糖醇單油酸酯(80)和作為溶劑的乙醇(etoh)的前體配制品。稱取適量的dopc、80和etoh(總共3g)于6r注射玻璃小瓶中。然后在室溫下將密封的小瓶放置在輥式混合器上，直到完全混合成澄清均質(zhì)的液體溶液(<24小時)。表3中給出了樣品組成。

表3.dopc/80/etoh配制品的組成。

實例3.

包括二油?；字Ｒ掖及泛?imgfile="bda0001330113730000333.gif"wi="158"he="78"img-content="drawing"img-format="gif"orientation="portrait"inline="no"/>80的液體配制品

制備包含不同比例的二油?；字Ｒ掖及?dope)、脫水山梨糖醇單油酸酯(80)和作為溶劑的乙醇(etoh)的前體配制品。稱取適量的dope、80和etoh(總共3g)于6r注射玻璃小瓶中。然后在室溫下將密封的小瓶放置在輥式混合器上，直到完全混合成澄清均質(zhì)的液體溶液(<24小時)。表4中給出了樣品組成。

表4.dope/80/etoh配制品的組成。

實例4.包括大豆磷脂酰膽堿、維生素e乙酸酯和80的液體配制品

為了比較，制備包含不同比例的大豆磷脂酰膽堿(spc)、脫水山梨糖醇單油酸酯(80)、作為溶劑的乙醇(etoh)和作為液晶“硬化劑”的維生素e乙酸酯(viteac)的配制品。稱取適量的spc、80、etoh和viteac(總共3g)于6r注射玻璃小瓶中。然后在室溫下將密封的小瓶放置在輥式混合器上，直到完全混合成澄清均質(zhì)的液體溶液(<24小時)。表5中給出了樣品組成。

表5.spc/80/viteac/etoh配制品的組成。

實例5.

包括大豆磷脂酰膽堿和甘油二油酸酯的液體配制品

為了比較，制備包含不同比例的大豆磷脂酰膽堿(spc)、甘油二油酸酯(gdo)和作為溶劑的乙醇(etoh)的配制品。稱取適量的spc、gdo和etoh(總共3g)于6r注射玻璃小瓶中。然后在室溫下將密封的小瓶放置在輥式混合器上，直到完全混合成澄清均質(zhì)的液體溶液(<24小時)。表6中給出了樣品組成。

表6.spc/gdo/etoh配制品的組成。

實例6.

包括磷脂和80的液體配制品的粘度

對實例1-5中制備的配制品進(jìn)行粘度測量。在25℃下，以4000s^-1(轉(zhuǎn)速300rpm)的剪切速率，使用配備有cap01錐形軸的cap2000+高扭矩粘度計(博勒菲公司(brookfield)，美國馬薩諸塞州)進(jìn)行測量。將75μl的配制品放置在保持板和錐形軸之間，平衡10秒并測量15秒。

圖1說明了針對相對于總脂質(zhì)含量的磷脂比例的配制品粘度?？傮w趨勢是相對于總脂質(zhì)的更低pc含量導(dǎo)致了更低粘度配制品。圖1中所闡明的本發(fā)明的配制品包括spc/80/etoh、dopc/80/etoh和dope/80/etoh。盡管在pc/80系統(tǒng)中需要顯著更低的pc含量以達(dá)到與pc/gdo系統(tǒng)中相同的粘度，但是這些配制品的粘度可以與比較性spc/gdo/etoh系統(tǒng)一樣低。磷脂/span/etoh系統(tǒng)的粘度實際上不受另外存在的viteac的影響。

實例7.

在水相存在下，來自磷脂/80混合物的液晶相結(jié)構(gòu)

使用一次性1mlluer-lock注射器和21g針將200mg的來自實例1-5的每種配制品注射到注射10r玻璃小瓶中的5mlpbs溶液中。在進(jìn)一步分析前，將制備的樣品置于平衡保持1周。

使用在max實驗室(隆德大學(xué)(lunduniversity)，瑞典)的i911-4光束線上進(jìn)行的同步加速器小角度x射線衍射(saxd)測量，使用包含總共981x1043像素的1mpilatus2d檢測器，來研究平衡的液晶相的納米結(jié)構(gòu)。將樣品安裝在鋼樣品支架中的聚酰亞胺(kapton)窗口之間的樣品到檢測器距離為1917mm處。記錄衍射圖，其中樣品的波長為并且光束尺寸為0.25×0.25mm(半極大處的全寬度)。使用山崳酸銀校準(zhǔn)的樣品到檢測器的距離和檢測器位置。使用計算機(jī)控制的julabo加熱循環(huán)器f12-mc(優(yōu)博萊實驗技術(shù)公司(julabolabortechnikgmbh)，賽爾巴赫(seelbach)，德國)實現(xiàn)0.1℃以內(nèi)的溫度控制。在25℃、37℃和42℃下相繼進(jìn)行實驗，在每個溫度下60秒的曝光時間和在溫度步驟之間10分鐘的等待。使用fit2d軟件對所得的ccd圖像進(jìn)行整合和分析。

針對不同脂質(zhì)混合物獲得的結(jié)果總結(jié)在圖2-5中。圖2中的相對衍射峰位置表明，spc/80混合物的液晶結(jié)構(gòu)從反向雙連續(xù)立方(v2)(低80含量)改變?yōu)榉聪蛄?h2)，并且然后當(dāng)80含量增加時改變?yōu)榉聪蚰z束相(l2)。圖3示出了dopc/80的液晶結(jié)構(gòu)從反向雙連續(xù)立方(v2)和反向六方(h2)相的混合物(dopc/80重量比為60/40和50/50)改變?yōu)榧僪2相(dopc/80重量比為40/60)。圖4中的相對衍射峰位置表明，dope/80的液晶結(jié)構(gòu)從反膠束立方(i2，空間群fd3m)和反向六方(h2)相的混合物(dope/80重量比為60/40)改變?yōu)榧兎聪蚰z束立方(i2，空間群fd3m)(dope/80重量比為50/50和40/60)。

為了比較，圖5示出了在如該圖所示的70/20/10和30/60/10的重量比之間，完全水合的spc/80/viteac混合物的x射線衍射圖。相對衍射峰位置表明，該液晶結(jié)構(gòu)從雙連續(xù)立方(v2)和中間相的反向混合物(低80含量)改變?yōu)榉聪蛄?h2)，并且然后當(dāng)80含量增加時改變?yōu)榉聪蚰z束相(l2)。

總體而言，圖2-4中呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)示出了包含磷脂和80的脂質(zhì)混合物中非層狀相形成的一般趨勢：在高磷脂含量下，形成雙連續(xù)結(jié)構(gòu)，隨著混合物中80比例增加，其首先轉(zhuǎn)變成反向六方(或反向膠束立方相，在dope的情況下)，并且然后轉(zhuǎn)變成反向膠束相。當(dāng)與圖5比較時，數(shù)據(jù)還示出，(總脂質(zhì)含量的)10wt％的液晶“固化劑”(viteac)的存在不影響非層狀液晶結(jié)構(gòu)的類型或在無viteac下觀察到的觀察的相變順序。

實例8.

在水相存在下，來自磷脂/80混合物的乙酸亮丙瑞林的體外釋放

向0.95g的配制品#4、#6、#21、#22、#27和#29中的每個中添加29mgdmso和21mg乙酸亮丙瑞林(leu)，以得到總共2.1wt％(或2.0wt％，當(dāng)校正肽含量和純度時)的leu。制備的樣品(l1-l6)的分配在表7中給出。

表7.用于體外釋放實驗的包含leu的配制品的組成。

將5mlpbs溶液添加到注射小瓶(6r)中，隨后緩慢添加(借助于配備有18g針的1ml單次使用的luerlock注射器)大約100mg/小瓶的包含leu的每種樣品(l1-l6)(3份重復(fù)/配制品)。將小瓶密封并放置在37℃下的搖床(150rpm)上。在孵育24小時、48小時和14天后，從每個小瓶取樣(200μl/樣品)，并將等分試樣轉(zhuǎn)移到聚丙烯hplc微型小瓶中。

通過hplc-uv，針對pbs中的leu的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物，對來自體外釋放實驗的樣品中的leu進(jìn)行測定，這些校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物以濃度范圍0.2-100μg/ml(覆蓋了大約釋放范圍為0.05-25％的待釋放的肽的最大理論量)制備。hplc-uv條件為：分析柱：aceexcel2c18，20x2.1mm；柱溫：50℃；流動相a(mpa)：在水中的0.1％三氟乙酸(tfa)；流動相b(mpb)：在乙腈:甲醇:水(90:5:5v/v)中的0.1％tfa；流速：0.6ml/min；梯度：t0.0：10％mpb；t0.2：10％mpb；t4.2：100％mpb；t4.7：100％mpb；t5.0：10％mpb；t6.5：10％mpb；注射體積：10μl；檢測波長：220nm。

圖6說明了來自包含2.1wt％的leu的spc80和比較性spc/80/viteac以及spc/gdo配制品的leu的體外釋放。數(shù)據(jù)清楚地示出，當(dāng)改變spc/80重量比從50/50(l1)至40/60(l2)的比率后1天和2天內(nèi)看到的爆發(fā)釋放急劇減少，這可能與在后一種情況中的不同的非層狀納米結(jié)構(gòu)(h2相)相關(guān)。14天后，仍然觀察到配制品之間的leu釋放量的明顯差異。重要的是，添加液晶“硬化劑”viteac(樣品l3和l4)并沒有減緩leu的釋放。14天后，來自樣品l3和l4的leu的釋放量實際上與以脂質(zhì)重量比為40/60(l2)制備的spc/80配制品的情況相同。比較性spc/gdo配制品(l5、l6)示出最慢的體外leu釋放，均為最初和高達(dá)14天。

實例9.

在水相存在下，來自磷脂/80混合物的奧曲肽鹽酸化物的體外釋放

向0.977g的配制品#4、#6、#21、#22、#27和#29中的每個中添加23mg的奧曲肽鹽酸化物(oct)，以得到總共2.3wt％(或2.0wt％，當(dāng)校正肽含量和純度時)的oct。制備的樣品(o1-o6)的分配在表8中給出。

表8.用于體外釋放實驗的包含oct的配制品的組成。

如實例8進(jìn)一步進(jìn)行體外釋放實驗(相同的hplc測定，但使用pbs中的oct校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物)。

圖7說明了來自包含2.3wt％的oct的spc/80和比較性spc/80/viteac以及spc/gdo配制品的oct的體外釋放?？偟膩碚f，獲得的數(shù)據(jù)非常類似于實例8中給出的數(shù)據(jù)。在此也觀察到的是，當(dāng)改變spc/80比率從50/50(o1)至40/60(o2)的比率后1天和2天內(nèi)看到的爆發(fā)釋放急劇減少，這可能與在后一種情況中的不同的非層狀納米結(jié)構(gòu)(h2相)相關(guān)。14天后，仍然觀察到配制品之間的oct釋放量的明顯差異。重要的是，添加液晶“硬化劑”viteac(樣品o3和o4)并沒有明顯改變oct的釋放特征。14天后，與以脂質(zhì)重量比為40/60(o2)制備的spc/80配制品相比，來自樣品o3和o4的oct的釋放量實際上相同或更高。比較性spc/gdo配制品(o5、o6)示出最慢的體外oct釋放，均為最初和高達(dá)14天。