相關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)要求2014年11月7號(hào)提交的美國(guó)專利申請(qǐng)序列號(hào)62/077,127的優(yōu)先權(quán)，其內(nèi)容通過引用由此全文并入。公開領(lǐng)域本公開涉及包含阿匹莫德(apilimod)的組合物及使用其治療腎癌的方法。公開背景阿匹莫德，也稱為sta-5326，以下稱為“阿匹莫德”，被認(rèn)為是一種強(qiáng)效的il-12與il-23的轉(zhuǎn)錄抑制劑。參見例如wada等人blood109(2007):1156-1164。il-12和il-23是通常由免疫細(xì)胞如b細(xì)胞和巨噬細(xì)胞響應(yīng)抗原刺激而產(chǎn)生的炎性細(xì)胞因子。自身免疫性疾病和以慢性炎癥為特征的其它疾病的部分特征在于不適當(dāng)?shù)禺a(chǎn)生這些細(xì)胞因子。在免疫細(xì)胞中，通過阿匹莫德選擇性抑制il-12/il-23轉(zhuǎn)錄近來顯示通過阿匹莫德與磷脂酰肌醇-3-磷酸5-激酶(pikfyve)的直接結(jié)合來介導(dǎo)。參見例如cai等人chemistryandbiol.20(2013):912-921。pikfyve在toll樣受體信號(hào)傳導(dǎo)中起作用，這在先天免疫中是重要的。基于其作為免疫調(diào)節(jié)劑和il-12/il-23的特異性抑制劑的活性，已經(jīng)提出阿匹莫德可用于治療自身免疫性和炎性的疾病與失調(diào)。參見例如us6,858,606和6,660,733(描述了一類嘧啶化合物，包括阿匹莫德，據(jù)稱可用于治療以il-12或il-23過度產(chǎn)生為特征的疾病和失調(diào)，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、膿毒癥、克羅恩病、多發(fā)性硬化癥、銀屑病或胰島素依賴型糖尿病)。類似地，基于其抑制c-rel或il-12/23的活性，阿匹莫德被建議可用于治療某些癌癥，特別是在其中這些細(xì)胞因子據(jù)信在促進(jìn)異常的細(xì)胞增殖作用方面起作用的癌癥中。參見例如wo2006/128129和baird等人,frontiersinoncology3:1(分別為2013)。三種阿匹莫德臨床試驗(yàn)各自專注于其在自身免疫性和炎性疾病中的潛在功效。在患有銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和克羅恩病的患者中進(jìn)行該試驗(yàn)。在患有銀屑病的患者中的開放標(biāo)簽臨床研究的結(jié)論是，口服阿匹莫德顯示了支持抑制il-12/il-23合成的免疫調(diào)節(jié)活性，用于治療th1-和th17-介導(dǎo)的炎性疾病。wada等人,plosone7:e35069(2012年4月)。但是在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和克羅恩病中的對(duì)照試驗(yàn)的結(jié)果不支持阿匹莫德對(duì)il-12/il-23的抑制轉(zhuǎn)化為這些適應(yīng)證任一的臨床改善的觀念。在患有類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者中的隨機(jī)雙盲安慰劑對(duì)照的阿匹莫德ii期臨床試驗(yàn)中，阿匹莫德未能改變滑膜的il-12與il-23表達(dá)。krauz等人,arthritis&rheumatism64:1750-1755(2012)。作者得出結(jié)論“結(jié)果不支持阿匹莫德對(duì)il-12/il-23的抑制能夠在ra中誘導(dǎo)穩(wěn)健的臨床改善的觀念”。類似地，阿匹莫德用于治療活動(dòng)性克羅恩病的隨機(jī)雙盲安慰劑對(duì)照試驗(yàn)得出以下結(jié)論：盡管耐受性良好，阿匹莫德未表現(xiàn)出超越安慰劑的功效。sands等人inflammboweldis.2010jul；16(7):1209-18。雷帕霉素哺乳動(dòng)物靶蛋白(mtor)通路是重要的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路，其參與多種生理功能，包括細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞增殖、代謝、蛋白質(zhì)合成和自體吞噬(laplante等人cell2012,(149(2),第274-293頁)。mtor是整合發(fā)送氨基酸、應(yīng)激、氧、能量和生長(zhǎng)因子的水平信號(hào)的胞內(nèi)與胞外信號(hào)并調(diào)節(jié)對(duì)這些環(huán)境信號(hào)的細(xì)胞響應(yīng)的激酶。mtor調(diào)控異常(deregulation)已經(jīng)牽涉了多種失調(diào)和疾病，包括癌癥、肥胖、糖尿病和神經(jīng)變性。已經(jīng)探索了mtor通路的某些組分作為用于治療一些此類疾病的藥物靶標(biāo)。但是，療效是有限的，例如在一些癌癥的治療中，并且一些mtor抑制劑已經(jīng)顯示對(duì)代謝具有不利影響。結(jié)節(jié)性硬化癥復(fù)合腫瘤抑制基因tsc1與tsc2是mtor的負(fù)調(diào)節(jié)物。公開內(nèi)容本公開部分基于令人驚訝的發(fā)現(xiàn)：阿匹莫德在tsc裸細(xì)胞中是高度細(xì)胞毒性劑。在這些細(xì)胞中，mtor通路是組成性活性的。該mtor通路在多種癌癥中被激活，并且在進(jìn)一步篩選超過100種癌細(xì)胞系時(shí)，阿匹莫德在來自不同癌癥(包括腎細(xì)胞癌)的細(xì)胞系中顯示出抗增殖活性。另外，阿匹莫德在癌細(xì)胞系中的細(xì)胞毒活性是由于胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)囊种坪图?xì)胞凋亡和/或自體吞噬方面的相應(yīng)提高，而不是如將基于阿匹莫德的免疫調(diào)節(jié)活性所預(yù)測(cè)，經(jīng)由阿匹莫德對(duì)于il-12/23產(chǎn)生的抑制。此外，篩選超過450種激酶將pikfyve鑒定為唯一的阿匹莫德高親和力結(jié)合靶(kd＝75pm)。本公開提供了阿匹莫德在治療癌癥腎細(xì)胞癌中的治療用途的新方法。在一方面，本公開提供在患有腎癌的受試者中治療腎癌的組合物，所述組合物包含治療有效量的阿匹莫德，或其藥學(xué)上可接受的鹽。在實(shí)施方案中，所述阿匹莫德是二甲磺酸阿匹莫德。在實(shí)施方案中，所述組合物呈適合于口服或靜脈內(nèi)施用的形式。在實(shí)施方案中，所述組合物進(jìn)一步包含至少一種另外的活性劑，其可選自治療劑或非治療劑，或治療劑和非治療劑的組合。在實(shí)施方案中，所述至少一種另外的活性劑是選自蛋白激酶抑制劑、鉑基抗腫瘤劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、核苷代謝抑制劑、烷化劑、插入劑、微管蛋白結(jié)合劑、及其組合的治療劑。在實(shí)施方案中，所述治療劑是蛋白激酶抑制劑。在實(shí)施方案中，所述蛋白激酶抑制劑是帕唑帕尼或索拉非尼、或其組合。所述組合物可進(jìn)一步包含經(jīng)選擇以改善阿匹莫德的一種或更多種副作用的非治療劑。在實(shí)施方案中，所述非治療劑選自昂丹司瓊、格拉司瓊、多拉司瓊和帕洛諾司瓊。在實(shí)施方案中，所述非治療劑選自吲哚洛爾和利培酮。在實(shí)施方案中，所述組合物包含有效抑制所述受試者的癌細(xì)胞中的pikfyve激酶活性的量的二甲磺酸阿匹莫德。在一些實(shí)施方案中，所述腎癌對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)治療是難以治療的或所述腎癌是轉(zhuǎn)移性的。在實(shí)施方案中，所述腎癌選自腎透明細(xì)胞癌、移形細(xì)胞癌、維爾姆斯瘤(wilmstumor)(腎母細(xì)胞瘤)、腎肉瘤和良性(非癌性)腎臟腫瘤、腎腺瘤、瘤細(xì)胞瘤和血管肌脂瘤。在一方面，本公開提供了在有其需要的受試者中治療腎癌的方法，該方法包括向該受試者施用治療有效量的阿匹莫德，或包含阿匹莫德的組合物，其中所述阿匹莫德是阿匹莫德本身(即，阿匹莫德游離堿)，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、包合物、水合物、多晶型物、前藥、類似物或衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述阿匹莫德是阿匹莫德游離堿或二甲磺酸阿匹莫德。在實(shí)施方案中，所述方法進(jìn)一步包括向所述受試者施用至少一種另外的活性劑。所述至少一種另外的活性劑可為治療劑或非治療劑。所述至少一種另外的活性劑可以與阿匹莫德在單一劑型施用，或以與阿匹莫德分開的劑型施用。在實(shí)施方案中，所述至少一種另外的活性劑是選自蛋白激酶抑制劑、鉑基抗腫瘤劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、核苷代謝抑制劑、烷化劑、插入劑、微管蛋白結(jié)合劑、pd-1/pdl-1通路抑制劑、及其組合的治療劑。在實(shí)施方案中，所述治療劑是蛋白激酶抑制劑。在實(shí)施方案中，所述蛋白激酶抑制劑是帕唑帕尼或索拉非尼、或其組合。在實(shí)施方案中，所述至少一種另外的活性劑是選自索拉非尼舒尼替尼坦羅莫斯依維莫司貝伐珠單抗帕唑帕尼axitinib及其組合的治療劑。在實(shí)施方案中，所述治療劑是pd-1/pdl-1通路抑制劑。在實(shí)施方案中，所述pd-1/pdl-1通路抑制劑選自帕姆單抗(keytruda)、阿維魯單抗(avelumab)、阿特朱單抗(mpdl3280a)、納武單抗(bms-936558)、pidilizumab(mk-3475)、msb0010718c和medi4736。在實(shí)施方案中，所述至少一種活性劑是經(jīng)選擇以減輕阿匹莫德的一種或更多種副作用的非治療劑。在實(shí)施方案中，所述非治療劑選自昂丹司瓊、格拉司瓊、多拉司瓊和帕洛諾司瓊。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非治療劑選自吲哚洛爾和利培酮。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述阿匹莫德組合物的劑型是口服劑型。在另一實(shí)施方案中，所述阿匹莫德組合物的劑型適合于靜脈內(nèi)施用，通過單次注射或通過滴灌袋施用。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述受試者是人類癌癥患者。在一個(gè)實(shí)施方案中，需要用阿匹莫德治療的人類癌癥患者是其癌癥對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)化療方案難以治療的患者。在一個(gè)實(shí)施方案中，需要用阿匹莫德治療的人類癌癥患者是其癌癥在用標(biāo)準(zhǔn)化療方案治療之后復(fù)發(fā)的患者。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述癌癥是腎癌。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述腎癌是移形細(xì)胞癌、維爾姆斯瘤(腎母細(xì)胞瘤)、腎肉瘤和良性(非癌性)腎臟腫瘤、腎腺瘤、瘤細(xì)胞瘤和血管肌脂瘤。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述腎癌是透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述標(biāo)準(zhǔn)化療方案包含選自依魯替尼、利妥昔單抗、多柔比星、潑尼松龍、長(zhǎng)春新堿、萬珂、環(huán)磷酰胺、地塞米松和依維莫司的一種或更多種治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述方法是使用包含阿匹莫德和用于治療腎癌的化療方案的聯(lián)合療法來治療腎癌的方法。在實(shí)施方案中，所述化療方案包含pd-1/pdl-1通路抑制劑。在實(shí)施方案中，所述pd-1/pdl-1通路抑制劑選自帕姆單抗(keytruda)、阿維魯單抗、阿特朱單抗(mpdl3280a)、納武單抗(bms-936558)、pidilizumab(mk-3475)、msb0010718c和medi4736。在另一實(shí)施方案中，所述方法是使用包含阿匹莫德和用于治療腎癌的免疫治療方案的聯(lián)合療法來治療腎癌的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述免疫治療方案是白介素-2(il-2)方案或α-干擾素方案。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述免疫治療方案包含pd-1/pdl-1通路抑制劑。在實(shí)施方案中，所述pd-1/pdl-1通路抑制劑選自帕姆單抗(keytruda)、阿維魯單抗、阿特朱單抗(mpdl3280a)、納武單抗(bms-936558)、pidilizumab(mk-3475)、msb0010718c和medi4736。在一些實(shí)施方案中，所述方法是使用包含阿匹莫德和用于治療腎癌的蛋白激酶抑制劑方案的聯(lián)合療法來治療腎癌的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述蛋白激酶抑制劑方案是索拉非尼、舒尼替尼、貝伐珠單抗、樂伐替尼、依維莫司。附圖簡(jiǎn)述圖1：tsc2缺陷細(xì)胞對(duì)阿匹莫德高度敏感(ic50＝20nm)。圖2a：具有小于500nm的ic50的細(xì)胞系的百分比。圖2b：正常的肺成纖維細(xì)胞在高達(dá)10微摩爾的阿匹莫德濃度下對(duì)阿匹莫德誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性不敏感。圖3：阿匹莫德以劑量依賴性方式誘導(dǎo)自體吞噬。圖4：在優(yōu)化的捕獲條件下應(yīng)用在0.1μm濃度下的ct-689的顯著捕獲命中(capturedhits)的火山圖。圖5：阿匹莫德以高親和力結(jié)合pikfyve(kd＝75pm)。圖6：lam-002在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系769-p中的抗增殖活性，平均ic50＝44nm(n＝2)。圖7：lam-002在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系rcc-mf中的抗增殖活性，平均ic50＝8nm(n＝2)。圖8：lam-002在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系rcc-er中的抗增殖活性，平均ic50＝9nm(n＝2)。圖9：lam-002在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系rcc-fg2中的抗增殖活性，平均ic50＝32nm(n＝2)。圖10：lam-002在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系rcc-jf中的抗增殖活性，平均ic50＝60nm(n＝2)。圖11：lam-002在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系786-o中的抗增殖活性，平均ic50＝71nm(n＝2)。圖12：lam-002在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系a704中的抗增殖活性，平均ic50＝11nm(n＝2)。圖13：lam-002在腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系rcc-jw中的抗增殖活性，平均ic50＝27nm(n＝2)。圖14：在rcc-er細(xì)胞中的lam-002+索拉非尼組合(5天測(cè)定)。a，顯示細(xì)胞活力(％)的條形圖；b，測(cè)定ed50、ed75和ed90下的組合指數(shù)(ci)值。圖15：在rcc-fg2細(xì)胞中的lam-002+索拉非尼組合(5天測(cè)定)。a，顯示細(xì)胞活力(％)的條形圖；b，測(cè)定ed50、ed75和ed90下的組合指數(shù)(ci)值。圖16：在rcc-mf細(xì)胞中的lam-002+索拉非尼組合(5天測(cè)定)。a，顯示細(xì)胞活力(％)的條形圖；b，測(cè)定ed50、ed75和ed90下的組合指數(shù)(ci)值。圖17：在769-p細(xì)胞中的lam-002+索拉非尼組合(5天測(cè)定)。a，顯示細(xì)胞活力(％)的條形圖；b，測(cè)定ed50、ed75和ed90下的組合指數(shù)(ci)值。圖18：在rcc-er細(xì)胞中的lam-002+帕唑帕尼組合(5天測(cè)定)。a，顯示細(xì)胞活力(％)的條形圖；b，測(cè)定ed50、ed75和ed90下的組合指數(shù)(ci)值。圖19：在rcc-fg2細(xì)胞中的lam-002+帕唑帕尼組合(5天測(cè)定)。a，顯示細(xì)胞活力(％)的條形圖；b，測(cè)定ed50、ed75和ed90下的組合指數(shù)(ci)值。圖20：在rcc-mf細(xì)胞中的lam-002+帕唑帕尼組合(5天測(cè)定)。a，顯示細(xì)胞活力(％)的條形圖；b，測(cè)定ed50、ed75和ed90下的組合指數(shù)(ci)值。圖21：在769-p細(xì)胞中的lam-002+帕唑帕尼組合(5天測(cè)定)。a，顯示細(xì)胞活力(％)的條形圖；b，測(cè)定ed50、ed75和ed90下的組合指數(shù)(ci)值。公開詳述本公開提供涉及在需要此類治療的受試者，優(yōu)選人類受試者中使用阿匹莫德治療腎癌的組合物和方法。本公開通常涉及阿匹莫德的新用途，其基于令人驚訝的發(fā)現(xiàn)：阿匹莫德對(duì)抗淋巴和非淋巴來源的一系列癌細(xì)胞的細(xì)胞毒活性，其并非明確涉及阿匹莫德的已知免疫調(diào)節(jié)和il-12/23抑制活性，或可由阿匹莫德的已知免疫調(diào)節(jié)和il-12/23抑制活性預(yù)測(cè)的活性。此外，基于使用阿匹莫德和至少一種另外的治療劑的聯(lián)合療法，本公開對(duì)癌癥治療提供了新的治療方法。本文中描述的聯(lián)合療法利用了阿匹莫德的獨(dú)特的細(xì)胞毒活性，在與其它抗癌劑結(jié)合時(shí)其顯示提供協(xié)同效應(yīng)。本文中所用的術(shù)語“阿匹莫德”可以指阿匹莫德本身(例如，阿匹莫德游離堿)，或可以如下所述涵蓋阿匹莫德的藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、包合物、水合物、多晶型物、代謝物、前藥、類似物或衍生物。阿匹莫德的結(jié)構(gòu)顯示在式i中：阿匹莫德的化學(xué)名稱是2-[2-吡啶-2-基)-乙氧基]-4-n'-(3-甲基-亞芐基)-肼基]-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶(iupac名稱：(e)-4-(6-(2-(3-甲基亞芐基)肼基)-2-(2-(吡啶-2-基)乙氧基)嘧啶-4-基)嗎啉)，并且cas編號(hào)為541550-19-0。阿匹莫德可以例如根據(jù)美國(guó)專利號(hào)7,923,557和7,863,270以及wo2006/128129中描述的方法來制備。本文中所用的術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”是由例如酸和阿匹莫德的堿性基團(tuán)形成的鹽。說明性的鹽包括但不限于硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異煙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、鞣酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、苯磺酸鹽(besylate)、龍膽酸鹽(gentisinate)、富馬酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽(glucaronate)、糖酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對(duì)甲苯磺酸鹽和雙羥萘酸鹽(例如1,1’-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽))。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”也指由具有酸性官能團(tuán)，如羧酸官能團(tuán)的阿匹莫德組合物與藥學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)堿制備的鹽。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”也指由具有堿性官能團(tuán)，如氨基官能團(tuán)的阿匹莫德與藥學(xué)上可接受的無機(jī)或有機(jī)酸制備的鹽。本文中所述的化合物的鹽可以由母體化合物通過常規(guī)化學(xué)方法來合成，如pharmaceuticalsalts:properties,selection,anduse,p.hemrichstalil(編者),camilleg.wermuth(編者),isbn:3-90639-026-8,2002年8月中描述的方法。通常，此類鹽可以通過使母體化合物(例如，2-[2-吡啶-2-基)-乙氧基]-4-n'-(3-甲基-亞芐基)-肼基]-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶)與適當(dāng)?shù)乃嵩谒谢蛟谟袡C(jī)溶劑中或在二者的混合物中反應(yīng)來制備。本文中所述的化合物的一種鹽形式可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法轉(zhuǎn)化成游離堿和任選轉(zhuǎn)化成另一種鹽形式。例如，可以通過使鹽溶液經(jīng)過含有胺固定相的柱(例如strata-nh2柱)來形成該游離堿。或者，該鹽的水溶液可以用碳酸氫鈉處理以分解該鹽并沉淀出該游離堿。該游離堿可以隨后使用常規(guī)方法與另一種酸結(jié)合。本文中所用的術(shù)語“多晶型物”指的是本公開的化合物(例如，2-[2-吡啶-2-基)-乙氧基]-4-n'-(3-甲基-亞芐基)-肼基]-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶)或其絡(luò)合物的固體結(jié)晶形式。相同化合物的不同多晶型物可以展現(xiàn)出不同的物理、化學(xué)和/或光譜性質(zhì)。不同的物理性質(zhì)包括，但不限于穩(wěn)定性(例如，對(duì)熱或光)、可壓縮性和密度(在制劑和產(chǎn)品制造中是重要的)，以及溶解速率(這可以影響生物利用度)。穩(wěn)定性方面的差異可能來自于化學(xué)反應(yīng)性(例如不同的氧化，使得劑型在由一種多晶型物組成時(shí)比由另一種多晶型物組成時(shí)更快速地變色)或機(jī)械特性(例如，由于動(dòng)力學(xué)有利的多晶型物轉(zhuǎn)化成熱力學(xué)更穩(wěn)定的多晶型物，片劑在儲(chǔ)存時(shí)破裂)或二者(例如，一種多晶型物的片劑更容易在高濕度下破碎)的變化。多晶型物的不同物理性質(zhì)可影響它們的加工。例如，一種多晶型物比另一種多晶型物可能更有可能形成溶劑化物或可能更難以過濾或洗滌至不含雜質(zhì)，這歸因于例如其粒子的形狀或粒度分布。本文中所用的術(shù)語“水合物”指的是本公開的化合物(例如，2-[2-吡啶-2-基)-乙氧基]-4-n'-(3-甲基-亞芐基)-肼基]-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶)或其鹽，其進(jìn)一步包括通過非共價(jià)分子間力結(jié)合的化學(xué)計(jì)算量或非化學(xué)計(jì)算量的水。本文中所用的術(shù)語“包合物”指的是晶格形式的本公開的化合物(例如，2-[2-吡啶-2-基)-乙氧基]-4-n'-(3-甲基-亞芐基)-肼基]-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶)或其鹽，所述晶格包含具有在其中捕獲的客體分子(例如溶劑或水)的空間(例如，通道)。本文中所用的術(shù)語“前藥”指的是本文中所述的化合物(例如，2-[2-吡啶-2-基)-乙氧基]-4-n'-(3-甲基-亞芐基)-肼基]-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶)的衍生物，其可以在生物條件(體外或體內(nèi))下水解、氧化或以其它方式反應(yīng)以提供本公開的化合物。前藥可以僅在生物條件下在此類反應(yīng)時(shí)變?yōu)榛钚?，或它們可以以其未反?yīng)形式具有活性。在本公開中設(shè)想的前藥的實(shí)例包括，但不限于本文中所述的化合物(例如，2-[2-吡啶-2-基)-乙氧基]-4-n'-(3-甲基-亞芐基)-肼基]-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶)的類似物或衍生物，其包含可生物水解部分，如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯類似物。前藥的其它實(shí)例包括包含-no、-no2、-ono或-ono2部分的本文中公開的任一化學(xué)式的化合物的衍生物。通?？梢允褂檬熘椒?，如由burger’smedicinalchemistryanddrugdiscovery(1995),172-178,949-982(manfrede.wolff編著，第5版)描述的那些方法制備前藥。本文中所用的術(shù)語“溶劑化物”或“藥學(xué)上可接受的溶劑化物”是一個(gè)或更多個(gè)溶劑分子與本文中公開的化合物之一(例如，2-[2-吡啶-2-基)-乙氧基]-4-n'-(3-甲基-亞芐基)-肼基]-6-(嗎啉-4-基)-嘧啶)締合所形成的溶劑化物。術(shù)語溶劑化物包括水合物(例如，半水合物、一水合物、二水合物、三水合物、四水合物等等)。本文中所用的術(shù)語“類似物”指的是結(jié)構(gòu)上類似于另一種但是在組成上略微不同的化合物(如一個(gè)原子被不同元素的原子替代，或存在特定官能團(tuán)，或一個(gè)官能團(tuán)被另一個(gè)官能團(tuán)替代)。因此，類似物是在功能和外觀方面而非在結(jié)構(gòu)或來源方面類似于參照化合物或與之相當(dāng)?shù)幕衔?。本文中所用的術(shù)語“衍生物”指的是具有共同的核心結(jié)構(gòu)并被本文中所述的各種基團(tuán)取代的化合物。治療方法本公開提供用于治療有其需要的受試者的腎癌的方法，通過向所述受試者施用治療有效量的阿匹莫德，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、包合物、水合物、多晶型物、前藥、類似物或衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述腎癌是腎細(xì)胞癌(rcc)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述腎細(xì)胞癌選自透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌、嫌色性腎細(xì)胞癌、其它罕見類型的腎細(xì)胞癌(例如，集合管rcc、多房性囊性rcc、髓樣癌、黏液性管狀和梭形細(xì)胞癌、成神經(jīng)細(xì)胞瘤相關(guān)性rcc、未分類腎細(xì)胞癌)、和轉(zhuǎn)移性rcc。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述腎癌選自移形細(xì)胞癌、維爾姆斯瘤(腎母細(xì)胞瘤)、腎肉瘤和良性(非癌性)腎臟腫瘤、腎腺瘤、瘤細(xì)胞瘤和血管肌脂瘤。本公開還提供了包含用于治療癌癥的聯(lián)合療法的方法。如本文所使用的，“聯(lián)合療法”或“共同療法”包括施用治療有效量的阿匹莫德作為具體治療方案的一部分，所述治療方案意欲提供來自阿匹莫德和另外的活性劑的共同作用的有益效果。所述至少一種另外的藥劑可為治療劑或非治療劑。該組合的有益效果包括，但不限于由治療性化合物的組合所產(chǎn)生的藥代動(dòng)力學(xué)或藥效動(dòng)力學(xué)共同作用。該組合的有益效果還可涉及與該組合中另一藥劑相關(guān)的毒性、副作用或不良事件的緩解。“聯(lián)合療法”不意欲包涵施用這些治療性化合物中的兩種或更多種作為偶然和任意導(dǎo)致未預(yù)期或預(yù)測(cè)的有益效果的單獨(dú)的單一治療方案的一部分。所述至少一種另外的活性劑可為治療劑，例如，抗癌劑或癌癥化療劑，或非治療劑，及其組合。相對(duì)于治療劑，該組合的有益效果包括，但不限于由治療性活性化合物的組合所產(chǎn)生的藥代動(dòng)力學(xué)或藥效動(dòng)力學(xué)共同作用。相對(duì)于非治療劑，該組合的有益效果可涉及與該組合中的治療活性劑相關(guān)的毒性、副作用或不良事件的緩解。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑是緩解阿匹莫德組合物的一種或更多種副作用的非治療劑，所述一種或更多種副作用選自惡心、嘔吐、頭痛、頭暈(dizziness)、眩暈(lightheadedness)、嗜睡和應(yīng)激中的任意一種。在該實(shí)施方案的一個(gè)方面，該非治療劑是血清素受體(也稱為5-羥色胺受體或5-ht受體)的拮抗劑。在一方面，所述非治療劑是5-ht3或5-ht1a受體的拮抗劑。在一方面，所述非治療劑選自昂丹司瓊、格拉司瓊、多拉司瓊和帕洛諾司瓊。在另一方面，所述非治療劑選自吲哚洛爾和利培酮。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑是治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述治療劑是如下文在“聯(lián)合療法”部分下更詳細(xì)描述的抗癌劑。在聯(lián)合療法的情況下，阿匹莫德、或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、包合物、水合物、多晶型物、代謝物、前藥、類似物或衍生物的施用可以與一種或更多種另外的活性劑的施用同時(shí)或相繼進(jìn)行。在另一實(shí)施方案中，聯(lián)合療法的不同組分的施用可以以不同的頻率進(jìn)行。所述一種或更多種另外的藥劑可以在施用本公開的化合物之前(例如，5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周之前)、同時(shí)或之后(例如，5分鐘、15分鐘、30分鐘、45分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)、48小時(shí)、72小時(shí)、96小時(shí)、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周之后)施用。所述一種或更多種另外的活性劑可以配制用于與阿匹莫德一起在單一劑型中共同施用，如本文中更詳細(xì)地描述的那樣。所述一種或更多種另外的活性劑可以與包含阿匹莫德的劑型分開施用。當(dāng)該另外的活性劑與阿匹莫德分開施用時(shí)，其可以通過與阿匹莫德相同或不同的途徑施用。優(yōu)選地，與一種或更多種另外的活性劑組合施用包含阿匹莫德的組合物在受治療的受試者中提供協(xié)同響應(yīng)。在這方面，術(shù)語“協(xié)同”指的是該組合的功效比任一單獨(dú)的單一療法的累加效應(yīng)更有效。與該組合中至少一種藥劑在該組合之外的劑量和/或頻率相比，根據(jù)本公開的聯(lián)合療法的協(xié)同效應(yīng)可以允許使用更低的劑量和/或更低頻率地施用所述藥劑。該組合的另外的有益效果可能表現(xiàn)為避免或減少與單獨(dú)使用該組合中的任一療法(也稱為單一療法)相關(guān)的不良或不想要的副作用。“聯(lián)合療法”還包括與非藥物療法(例如手術(shù)或放射治療)進(jìn)一步組合施用本公開的化合物。當(dāng)該聯(lián)合療法進(jìn)一步包括非藥物治療時(shí)，所述非藥物治療可以在任何合適的時(shí)間進(jìn)行，只要實(shí)現(xiàn)來自該治療性化合物與非藥物治療的組合的共同作用的有益效果。例如，在適當(dāng)?shù)那闆r下，當(dāng)從施用治療性化合物中暫時(shí)(可能數(shù)天或甚至數(shù)周)移除非藥物治療時(shí)，仍實(shí)現(xiàn)該有益效果。該非藥物治療可以選自化療、放射療法、激素療法、抗雌激素療法、基因療法、外科手術(shù)(例如，根治性腎切除術(shù)、部分腎切除術(shù)、腹腔鏡手術(shù)和機(jī)器人手術(shù))、射頻消融術(shù)和冷凍消融術(shù)。例如，非藥物療法是除去卵巢(例如，為了降低身體中雌激素的水平)、胸腔穿刺術(shù)(例如，從胸部移除流體)、穿刺術(shù)(例如，從腹腔移除流體)、手術(shù)切除或收縮血管肌脂瘤、肺移植(并任選采用抗生素以防止移植造成的感染)、或氧療法(例如，通過包含兩個(gè)放置在雙側(cè)鼻孔中的小塑料管或叉管的鼻插管，通過貼合在鼻子與嘴上的面罩，或通過經(jīng)頸部前部插入氣管的小管，也稱為經(jīng)氣管氧療法)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑是緩解阿匹莫德的一種或更多種副作用的藥劑，所述一種或更多種副作用選自惡心、嘔吐、頭痛、頭暈、眩暈、嗜睡和應(yīng)激中的任意一種。在該實(shí)施方案的一個(gè)方面，所述另外的藥劑是血清素受體(也稱為5-羥色胺受體或5-ht受體)的拮抗劑。在一方面，所述另外的藥劑是5-ht3或5-ht1a受體的拮抗劑。在一方面，所述藥劑選自昂丹司瓊、格拉司瓊、多拉司瓊和帕洛諾司瓊。在另一方面，所述藥劑選自吲哚洛爾和利培酮。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑是抗癌劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述抗癌劑選自紫杉酚、長(zhǎng)春新堿、多柔比星、坦羅莫司、卡鉑、奧法木單抗、利妥昔單抗及其組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑選自苯丁酸氮芥、異環(huán)磷酰胺、多柔比星、美沙拉秦、沙利度胺、來那度胺、坦羅莫司、依維莫司、氟達(dá)拉濱、fostamatinib、紫杉醇、多西他賽、奧法木單抗、利妥昔單抗、地塞米松、潑尼松、cal-101、替伊莫單抗、托西莫單抗、硼替佐米、噴司他丁、內(nèi)皮抑素或其組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑選自afinitor(依維莫司)、阿地白介素、avastin(貝伐珠單抗)、阿西替尼、貝伐珠單抗、依維莫司、il-2(阿地白介素)、inlyta(阿西替尼)、白介素-2(阿地白介素)、nexavar(甲苯磺酸索拉非尼)、鹽酸帕唑帕尼、proleukin(阿地白介素)、甲苯磺酸索拉非尼、蘋果酸舒尼替尼、sutent(蘋果酸舒尼替尼)、坦羅莫斯、torisel(坦羅莫斯)、votrient(鹽酸帕唑帕尼)、或其組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑涉及靶向療法，其中所述治療靶向癌癥的特異性基因、蛋白質(zhì)、或有助于癌癥生長(zhǎng)和存活的組織環(huán)境。該類型的治療阻斷癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和擴(kuò)散，同時(shí)限制健康細(xì)胞的損傷。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑涉及抗血管生成療法，其中所述治療集中于使血管生成停止，血管生成是產(chǎn)生新的血管的過程。因?yàn)槟[瘤需要由血管遞送的營(yíng)養(yǎng)素來生長(zhǎng)和擴(kuò)散，所以抗血管生成療法的目標(biāo)是“餓死”腫瘤。一種抗血管生成藥物，貝伐珠單抗(avastin)已顯示減慢患有轉(zhuǎn)移性腎癌的人的腫瘤生長(zhǎng)。貝伐珠單抗與干擾素組合減慢腫瘤生長(zhǎng)和擴(kuò)散。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑涉及免疫療法，也稱為生物療法，其設(shè)計(jì)為增強(qiáng)身體對(duì)抗癌癥的自然防御。其使用由身體制造或在實(shí)驗(yàn)室中制造的材料以改善、靶向或修復(fù)免疫系統(tǒng)功能。例如，白介素-2(il-2)以及am0010，和白介素-15是已用于治療腎癌的藥物。它們是稱為細(xì)胞因子的細(xì)胞激素，由白細(xì)胞產(chǎn)生并在免疫系統(tǒng)功能(包括摧毀腫瘤細(xì)胞)中是重要的。α-干擾素是用于治療已擴(kuò)散的腎癌的另一類型的免疫療法。干擾素顯示改變癌細(xì)胞表面上的蛋白質(zhì)并減慢其生長(zhǎng)。il-2和α-干擾素與化療組合的許多聯(lián)合療法對(duì)于患有晚期腎癌的患者比單獨(dú)的il-2或干擾素更加有效。在實(shí)施方案中，所述至少一種另外的藥劑是pd-1/pdl-1通路抑制劑。在實(shí)施方案中，所述pd-1/pdl-1通路抑制劑選自帕姆單抗(keytruda)、阿維魯單抗、阿特朱單抗(mpdl3280a)、納武單抗(bms-936558)、pidilizumab(mk-3475)、msb0010718c和medi4736。另一實(shí)例是稱為關(guān)卡抑制劑的化合物。使用這些化合物的治療通過靶向用作對(duì)免疫響應(yīng)檢查和平衡的分子來起作用。通過阻斷這些抑制性分子，或替代地，激活刺激性分子，這些治療設(shè)計(jì)為釋放，或增強(qiáng)預(yù)先存在的抗癌免疫響應(yīng)。各種抗體包括pd-1、抗-cd27、b7-h3、kir、lag-3、4-1bb/cd137和gitr。示例性藥劑包括帕姆單抗(keytruda,mk-3475,一種pd-1抗體)、mpdl3280a(一種pd-l1抗體)、varlilumab(cdx-1127，一種抗-cd27抗體)、mga217(一種靶向b7-h3的抗體)、lirilumab(一種kir抗體)、bms-986016(一種lag-3抗體)、urelumab(一種4-1bb/cd137抗體)、trx518(一種gitr抗體)和mk-4166(一種gitr抗體)。另一實(shí)例是癌癥疫苗，設(shè)計(jì)為引起對(duì)抗腫瘤特異性或腫瘤相關(guān)性抗原的免疫響應(yīng)，刺激免疫系統(tǒng)攻擊帶有這些抗原的癌細(xì)胞。示例性藥劑是ags-003、dcvax和ny-eso-1。另一實(shí)例是從患者體內(nèi)移除的免疫細(xì)胞，其用化學(xué)品進(jìn)行基因修飾或處理以增強(qiáng)其活性，并隨后重新引入患者體內(nèi)，目標(biāo)是改善免疫系統(tǒng)的抗癌響應(yīng)。在本文中所述的方法的情況下，施用于受試者的阿匹莫德的量是治療有效量。術(shù)語“治療有效量”指的是足以治療所治疾病或失調(diào)、改善其癥狀、減輕其嚴(yán)重程度或減少其持續(xù)時(shí)間，或增強(qiáng)或改善另一療法的治療效果，或足以在受試者中表現(xiàn)出可檢測(cè)的治療效果的量。在一個(gè)實(shí)施方案中，阿匹莫德組合物的治療有效量是有效抑制pikfyve激酶活性的量。阿匹莫德的有效量可以為大約0.001毫克/千克至大約1000毫克/千克、大約0.01毫克/千克至大約100毫克/千克、大約10毫克/千克至大約250毫克/千克、大約0.1毫克/千克至大約15毫克/千克的范圍；或其中該范圍的下限為0.001毫克/千克至900毫克/千克之間的任意量且該范圍的上限為0.1毫克/千克至1000毫克/千克之間的任意量的任何范圍(例如，0.005毫克/千克至200毫克/千克、0.5毫克/千克至20毫克/千克)。如本領(lǐng)域技術(shù)人員公認(rèn)的那樣，有效劑量還將根據(jù)治療的疾病、施用途徑、賦形劑使用、以及與其它治療性治療(如使用其它藥劑)共同使用的可能性而變化。參見例如美國(guó)專利號(hào)7,863,270，其通過引用并入本文。在更具體的方面，以30-1000毫克/天(例如30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、125、150、175、200、225、250、275或300毫克/天)的劑量方案施用阿匹莫德至少1周(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、36、48或更多周)。優(yōu)選地，阿匹莫德以100-1000毫克/天的劑量方案施用4或16周。替代地或隨后地，阿匹莫德以每天兩次100-300毫克的劑量方案施用8周，或任選52周。替代地或隨后地，阿匹莫德組合物以每天兩次50毫克-1000毫克的劑量方案施用8周，或任選52周。有效量的阿匹莫德組合物可以每天施用一次、每天兩次至五次、每天最多兩次或最多三次，或每天最多八次。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述阿匹莫德組合物每天施用三次、每天兩次、每天一次，在3周周期中施用十四天(每天四次、每天三次或每天兩次、或每天一次)和停藥7天，在3周周期中最多施用五天或七天(每天四次、每天三次或每天兩次、或每天一次)和停藥14-16天，或每?jī)商煲淮?，或一周一次，或每?jī)芍芤淮?，或每三周一次。按照本文中所述的方法，“有其需要的受試者”是患有腎癌的受試者，或相對(duì)于大多數(shù)人具有提高的發(fā)展腎癌的風(fēng)險(xiǎn)的受試者。有其需要的受試者可以是對(duì)癌癥的現(xiàn)有可利用的療法“無響應(yīng)”或“難以治療”的受試者。在這方面，術(shù)語“無響應(yīng)”和“難以治療”指的是受試者對(duì)治療的響應(yīng)在臨床上不足以緩解與該疾病或失調(diào)相關(guān)的一種或更多種癥狀。在此處描述的方法的一個(gè)方面，有其需要的受試者是患有癌癥的受試者，其癌癥對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)療法是難以治療的，或者其癌癥在標(biāo)準(zhǔn)治療后復(fù)發(fā)?！笆茉囌摺卑ú溉閯?dòng)物。哺乳動(dòng)物可以是例如任何哺乳動(dòng)物，例如人、靈長(zhǎng)類動(dòng)物、脊椎動(dòng)物、鳥、小鼠、大鼠、家禽、狗、貓、牛、馬、山羊、駱駝、綿羊或豬。優(yōu)選地，該哺乳動(dòng)物是人。術(shù)語“患者”指的是人類受試者。本公開還提供了本文中所述的用于治療腎癌的單一療法。本文中所用的“單一療法”指的是向有其需要的受試者施用單一的活性或治療性化合物。本文中所用的“治療”(“treatment”,“treating”或“treat”)描述了為了抗擊疾病、病癥或失調(diào)的目的對(duì)患者進(jìn)行的管理和護(hù)理，并包括施用阿匹莫德以緩解疾病、病癥或失調(diào)的癥狀或并發(fā)癥，或消除該疾病、病癥或失調(diào)。本文中所用的“預(yù)防/防止”(“prevention”,“preventing”或“prevent”)描述了減少或消除疾病、病癥或失調(diào)的癥狀或并發(fā)癥的發(fā)作，并包括施用阿匹莫德以減少疾病、病癥或失調(diào)的癥狀的發(fā)作、發(fā)展或復(fù)發(fā)。在一個(gè)實(shí)施方案中，施用阿匹莫德導(dǎo)致消除了所治療的癌癥的癥狀或并發(fā)癥，但是，癌癥的消除并不是必須的。在一個(gè)實(shí)施方案中，降低了所述癥狀的嚴(yán)重程度。在癌癥的情況下，此類癥狀可以包括嚴(yán)重程度或進(jìn)展的臨床指標(biāo)，包括腫瘤分泌生長(zhǎng)因子、降解細(xì)胞外基質(zhì)、變得血管化、喪失對(duì)并置組織(juxtaposedtissue)的粘附、或轉(zhuǎn)移的程度，以及轉(zhuǎn)移灶的數(shù)量。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致腫瘤尺寸的減小。腫瘤尺寸的減小也被稱為“腫瘤消退”。優(yōu)選地，在治療后，腫瘤尺寸相對(duì)于其治療前的尺寸減小5％或更多；更優(yōu)選地，腫瘤尺寸減小10％或更多；更優(yōu)選地，減小20％或更多；更優(yōu)選地，減小30％或更多；更優(yōu)選地，減小40％或更多；甚至更優(yōu)選地，減小50％或更多；且最優(yōu)選地，減小超過75％或更多。腫瘤的尺寸可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量?？梢砸阅[瘤直徑的形式來測(cè)量腫瘤的尺寸。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致腫瘤體積的減小。優(yōu)選地，在治療后，腫瘤體積相對(duì)于其治療前的尺寸減小5％或更多；更優(yōu)選地，腫瘤體積減小10％或更多；更優(yōu)選地，減小20％或更多；更優(yōu)選地，減小30％或更多；更優(yōu)選地，減小40％或更多；甚至更優(yōu)選地，減小50％或更多；且最優(yōu)選地，減小超過75％或更多。腫瘤體積可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致腫瘤數(shù)量的減少。優(yōu)選地，在治療后，腫瘤數(shù)量相對(duì)于治療前的數(shù)量減少5％或更多；更優(yōu)選地，腫瘤數(shù)量減少10％或更多；更優(yōu)選地，減少20％或更多；更優(yōu)選地，減少30％或更多；更優(yōu)選地，減少40％或更多；甚至更優(yōu)選地，減少50％或更多；且最優(yōu)選地，減少超過75％。腫瘤數(shù)量可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量。腫瘤的數(shù)量可以通過對(duì)肉眼可見或在規(guī)定放大倍數(shù)下可見的腫瘤計(jì)數(shù)來測(cè)量。所述規(guī)定放大倍數(shù)優(yōu)選為2×、3×、4×、5×、10×或50×。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致在遠(yuǎn)離腫瘤原發(fā)部位的其它組織或器官中轉(zhuǎn)移病灶數(shù)量的減少。優(yōu)選地，在治療后，轉(zhuǎn)移病灶的數(shù)量相對(duì)于治療前的數(shù)量減少5％或更多；更優(yōu)選地，轉(zhuǎn)移病灶的數(shù)量減少10％或更多；更優(yōu)選地，減少20％或更多；更優(yōu)選地，減少30％或更多；更優(yōu)選地，減少40％或更多；甚至更優(yōu)選地，減少50％或更多；且最優(yōu)選地，減少超過75％。轉(zhuǎn)移病灶的數(shù)量可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量。轉(zhuǎn)移病灶的數(shù)量可以通過對(duì)肉眼可見或在規(guī)定放大倍數(shù)下可見的轉(zhuǎn)移病灶計(jì)數(shù)來測(cè)量。所述規(guī)定放大倍數(shù)優(yōu)選為2×、3×、4×、5×、10×或50×。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致受治療的受試者群體與僅接受載體的群體相比平均存活時(shí)間的增加。優(yōu)選地，平均存活時(shí)間增加超過30天；更優(yōu)選地，增加超過60天；更優(yōu)選地，增加超過90天；且最優(yōu)選地，增加超過120天。群體的平均存活時(shí)間的增加可以通過任何可再現(xiàn)手段測(cè)量。例如可以通過對(duì)一群體計(jì)算在開始用活性化合物治療后的平均存活時(shí)長(zhǎng)來測(cè)量群體的平均存活時(shí)間的增加。例如還可以通過對(duì)一群體計(jì)算在完成用活性化合物的第一輪治療后的平均存活時(shí)長(zhǎng)來測(cè)量群體的平均存活時(shí)間的增加。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致受治療的受試者群體與未受治療的受試者群體相比平均存活時(shí)間的增加。優(yōu)選地，平均存活時(shí)間增加超過30天；更優(yōu)選地，增加超過60天；更優(yōu)選地，增加超過90天；且最優(yōu)選地，增加超過120天。群體的平均存活時(shí)間的增加可以通過任何可再現(xiàn)手段測(cè)量。例如可以通過對(duì)一群體計(jì)算在開始用活性化合物治療后的平均存活時(shí)長(zhǎng)來測(cè)量群體的平均存活時(shí)間的增加。例如還可以通過對(duì)一群體計(jì)算在完成用活性化合物的第一輪治療后的平均存活時(shí)長(zhǎng)來測(cè)量群體的平均存活時(shí)間的增加。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致受治療的受試者群體與接受采用并非阿匹莫德的藥物的單一療法的群體相比平均存活時(shí)間的增加。優(yōu)選地，平均存活時(shí)間增加超過30天；更優(yōu)選地，增加超過60天；更優(yōu)選地，增加超過90天；且最優(yōu)選地，增加超過120天。群體的平均存活時(shí)間的增加可以通過任何可再現(xiàn)手段測(cè)量。例如可以通過對(duì)一群體計(jì)算在開始用活性化合物治療后的平均存活時(shí)長(zhǎng)來測(cè)量群體的平均存活時(shí)間的增加。例如還可以通過對(duì)一群體計(jì)算在完成用活性化合物的第一輪治療后的平均存活時(shí)長(zhǎng)來測(cè)量群體的平均存活時(shí)間的增加。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致受治療的受試者群體與僅接受載體的群體相比死亡率的降低。根據(jù)本文中所述的方法治療失調(diào)、疾病或病癥可以導(dǎo)致受治療的受試者群體與未受治療的群體相比死亡率的降低。根據(jù)本文中所述的方法治療失調(diào)、疾病或病癥可以導(dǎo)致受治療的受試者群體與接受采用并非阿匹莫德的藥物的單一療法的群體相比死亡率的降低。優(yōu)選地，死亡率降低超過2％；更優(yōu)選地，降低超過5％；更優(yōu)選地，降低超過10％；且最優(yōu)選地，降低超過25％。受治療的受試者群體的死亡率的降低可以通過任何可再現(xiàn)手段測(cè)量。例如可以通過對(duì)一群體計(jì)算在開始用活性化合物治療后每單位時(shí)間疾病相關(guān)死亡的平均數(shù)量來測(cè)量群體的死亡率的降低。例如還可以通過對(duì)一群體計(jì)算在完成用活性化合物的第一輪治療后每單位時(shí)間疾病相關(guān)死亡的平均數(shù)量來測(cè)量群體的死亡率的降低。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致腫瘤生長(zhǎng)速率降低。優(yōu)選地，在治療后，腫瘤生長(zhǎng)速率相對(duì)于治療前的數(shù)目降低至少5％；更優(yōu)選地，腫瘤生長(zhǎng)速率降低至少10％；更優(yōu)選地，降低至少20％；更優(yōu)選地，降低至少30％；更優(yōu)選地，降低至少40％；更優(yōu)選地，降低至少50％；甚至更優(yōu)選地，降低至少50％；且最優(yōu)選地，降低至少75％。腫瘤生長(zhǎng)速率可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量。腫瘤生長(zhǎng)速率可以根據(jù)每單位時(shí)間腫瘤直徑的變化來測(cè)量。在一個(gè)實(shí)施方案中，在治療后，腫瘤生長(zhǎng)速率可以為大約0，并被確定為保持相同尺寸，例如腫瘤已經(jīng)停止生長(zhǎng)。根據(jù)本文中所述的方法治療癌癥可以導(dǎo)致腫瘤再生長(zhǎng)的減少。優(yōu)選地，在治療后，腫瘤再生長(zhǎng)少于5％；更優(yōu)選地，腫瘤再生長(zhǎng)少于10％；更優(yōu)選地，少于20％；更優(yōu)選地，少于30％；更優(yōu)選地，少于40％；更優(yōu)選地，少于50％；甚至更優(yōu)選地，少于50％；且最優(yōu)選地，少于75％。腫瘤再生長(zhǎng)可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量。例如通過測(cè)量在治療后的現(xiàn)有腫瘤收縮之后腫瘤直徑的增加來測(cè)量腫瘤再生長(zhǎng)。腫瘤再生長(zhǎng)的減少顯示為治療停止后腫瘤未能復(fù)發(fā)。根據(jù)本文中所述的方法治療或預(yù)防細(xì)胞增殖性失調(diào)可以導(dǎo)致細(xì)胞增殖速率的降低。優(yōu)選地，在治療后，細(xì)胞增殖速率降低至少5％；更優(yōu)選地，降低至少10％；更優(yōu)選地，降低至少20％；更優(yōu)選地，降低至少30％；更優(yōu)選地，降低至少40％；更優(yōu)選地，降低至少50％；甚至更優(yōu)選地，降低至少50％；且最優(yōu)選地，降低至少75％。細(xì)胞增殖速率可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量。例如通過測(cè)量每單位時(shí)間在組織樣品中的分裂細(xì)胞的數(shù)量來測(cè)量細(xì)胞增殖速率。根據(jù)本文中所述的方法治療或預(yù)防細(xì)胞增殖性失調(diào)可以導(dǎo)致增殖細(xì)胞的比例降低。優(yōu)選地，在治療后，增殖細(xì)胞比例降低至少5％；更優(yōu)選地，降低至少10％；更優(yōu)選地，降低至少20％；更優(yōu)選地，降低至少30％；更優(yōu)選地，降低至少40％；更優(yōu)選地，降低至少50％；甚至更優(yōu)選地，降低至少50％；且最優(yōu)選地，降低至少75％。增殖細(xì)胞的比例可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量。優(yōu)選地，例如通過相對(duì)于組織樣品中的非分裂細(xì)胞數(shù)量定量分裂細(xì)胞數(shù)量來測(cè)量增殖細(xì)胞的比例。增殖細(xì)胞的比例可以等效于有絲分裂指數(shù)。根據(jù)本文中所述的方法治療或預(yù)防細(xì)胞增殖性失調(diào)可以導(dǎo)致細(xì)胞增殖的面積或區(qū)域的大小降低。優(yōu)選地，在治療后，細(xì)胞增殖的面積或區(qū)域的大小相對(duì)于其在治療前的大小降低至少5％；更優(yōu)選地，降低至少10％；更優(yōu)選地，降低至少20％；更優(yōu)選地，降低至少30％；更優(yōu)選地，降低至少40％；更優(yōu)選地，降低至少50％；甚至更優(yōu)選地，降低至少50％；且最優(yōu)選地，降低至少75％。細(xì)胞增殖的面積或區(qū)域的大小可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量。細(xì)胞增殖的面積或區(qū)域的大小可以以細(xì)胞增殖的面積或區(qū)域的直徑或?qū)挾葋頊y(cè)量。根據(jù)本文中所述的方法治療或預(yù)防細(xì)胞增殖性失調(diào)可以導(dǎo)致具有異常的外觀或形態(tài)的細(xì)胞的數(shù)量或比例降低。優(yōu)選地，在治療后，具有異常形態(tài)的細(xì)胞的數(shù)量相對(duì)于其在治療前的規(guī)模降低至少5％；更優(yōu)選地，降低至少10％；更優(yōu)選地，降低至少20％；更優(yōu)選地，降低至少30％；更優(yōu)選地，降低至少40％；更優(yōu)選地，降低至少50％；甚至更優(yōu)選地，降低至少50％；且最優(yōu)選地，降低至少75％。異常的細(xì)胞外觀或形態(tài)可以通過任何可再現(xiàn)的測(cè)量手段來測(cè)量?？梢酝ㄟ^顯微術(shù)，例如使用倒置組織培養(yǎng)顯微鏡來測(cè)量異常的細(xì)胞形態(tài)。異常的細(xì)胞形態(tài)可以采取核多型性的形式。本文中所用的術(shù)語“選擇性”指的是傾向于在一個(gè)群體中比在另一群體中以更高頻率發(fā)生。對(duì)比群體可以是細(xì)胞群體。優(yōu)選地，阿匹莫德與正常細(xì)胞相比選擇性作用于過度增殖細(xì)胞或異常增殖細(xì)胞。本文中所用的“正常細(xì)胞”是不能被歸類為“細(xì)胞增殖性失調(diào)”的部分的細(xì)胞。正常細(xì)胞缺乏不受控制或異常的生長(zhǎng)或兩者，所述不受控制或異常生長(zhǎng)可導(dǎo)致不希望的病癥或疾病的發(fā)展。優(yōu)選地，正常細(xì)胞通常具有功能細(xì)胞周期關(guān)卡控制機(jī)制。優(yōu)選地，阿匹莫德選擇性作用以調(diào)節(jié)一種分子靶(例如，靶激酶)，但是不顯著調(diào)節(jié)另一分子靶(例如，非靶激酶)。本公開還提供了選擇性抑制酶(如激酶)的活性的方法。優(yōu)選地，如果一事件在群體a中與群體b相比以大于兩倍的更高頻率發(fā)生，該事件相對(duì)于群體b在群體a中選擇性發(fā)生。如果一事件在群體a中以大于五倍的更高頻率發(fā)生，則該事件選擇性發(fā)生。如果與群體b相比，一事件在群體a中以大于十倍的更高頻率發(fā)生；更優(yōu)選地，大于五十倍；甚至更優(yōu)選地，大于100倍；且最優(yōu)選地，大于1000倍的更高頻率在群體a中發(fā)生，該事件選擇性發(fā)生。例如，如果細(xì)胞死亡在病變或過度增殖細(xì)胞中與正常細(xì)胞相比以大于兩倍的頻率發(fā)生的話，細(xì)胞死亡將被稱作在病變或過度增殖細(xì)胞中選擇性發(fā)生。藥物組合物和制劑本公開提供藥物組合物，其包含一定量的阿匹莫德，或其藥學(xué)上可接受的鹽、溶劑化物、包合物、水合物、多晶型物、代謝物、前藥、類似物或衍生物，組合至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑或載體，其中所述量有效用于治療腎癌和/或有效抑制患有癌癥的受試者的癌細(xì)胞中的pikfyve。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述阿匹莫德是阿匹莫德游離堿。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述阿匹莫德是二甲磺酸阿匹莫德。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述阿匹莫德與至少一種另外的活性劑在單一劑型中組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物進(jìn)一步包含抗氧化劑。在實(shí)施方案中，所述至少一種另外的活性劑選自烷化劑、插入劑、微管蛋白結(jié)合劑、皮質(zhì)類固醇及其組合。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的活性劑是選自依魯替尼、利妥昔單抗、多柔比星、潑尼松龍、長(zhǎng)春新堿、萬珂和依維莫司及其組合的治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述至少一種另外的活性劑是選自環(huán)磷酰胺、羥基柔紅霉素(也稱為多柔比星或adriamycintm)、長(zhǎng)春新堿(也稱為oncovintm)、潑尼松、潑尼松龍及其組合的治療劑。在實(shí)施方案中，所述至少一種另外的活性劑是經(jīng)選擇以改善所述阿匹莫德組合物的一種或更多種副作用的非治療劑。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非治療劑選自昂丹司瓊、格拉司瓊、多拉司瓊和帕洛諾司瓊。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述非治療劑選自吲哚洛爾和利培酮。在實(shí)施方案中，至少一種另外的劑為pd-1/pdl-1通路抑制劑。在實(shí)施方案中，所述pd-1/pdl-1通路抑制劑選自帕姆單抗(keytruda)、阿維魯單抗、阿特朱單抗(mpdl3280a)、納武單抗(bms-936558)、pidilizumab(mk-3475)、msb0010718c和medi4736。在實(shí)施方案中，所述至少一種另外的活性劑選自mtor通路的抑制劑、tki抑制劑、pi3k抑制劑、雙重pi3k/mtor抑制劑、src抑制劑、vegf抑制劑、janus激酶(jak)抑制劑、raf抑制劑、erk抑制劑、法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑、組蛋白脫乙酰酶抑制劑、抗有絲分裂劑、多重耐藥外排抑制劑、抗生素和細(xì)胞因子。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二治療劑是治療性細(xì)胞因子。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述第二治療劑是白介素-2。在另一實(shí)施方案中，所述第二治療劑選自酪氨酸激酶抑制劑(例如依維莫司、貝伐珠單抗)。在實(shí)施方案中，所述mtor抑制劑選自雷帕霉素(也稱為西羅莫司)、依維莫司、坦羅莫司、地磷莫司(ridaforolimus)、umirolimus、唑羅莫司、azd8055、ink128、wye-132、torin-1、吡唑并嘧啶類似物pp242、pp30、pp487、pp121、ku0063794、ku-bmcl-200908069-1、wyeth-bmcl-200910075-9b、ink-128、xl388、azd8055、p2281和p529。參見例如liu等人drugdisc.todayther.strateg.,6(2):47-55(2009)。在實(shí)施方案中，所述mtor抑制劑是反式-4-[4-氨基-5-(7-甲氧基-1h-吲哚-2-基)咪唑并[5,1-f][1,2,4]三嗪-7-基]環(huán)己烷羧酸(也稱為osi-027)，及其任何鹽、溶劑化物、水合物和其它物理形式、結(jié)晶或非晶的。參見us2007/0112005。osi-027可以根據(jù)us2007/0112005來制備，其通過引用并入本文。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述mtor抑制劑是oxa-01。參見例如wo2013152342a1。在實(shí)施方案中，所述pi3k抑制劑選自gs-1101(艾代拉里斯)、gdc0941(pictilisib)、ly294002、bkm120(buparlisib)、pi-103、tgx-221、ic-87114、xl147、zstk474、byl719、as-605240、pik-75、3-甲基腺嘌呤、a66、pik-93、pik-90、azd6482、ipi-145(duvelisib)、tg100-115、as-252424、pik294、as-604850、gsk2636771、bay80-6946(copanlisib)、ch5132799、cay10505、pik-293、tg100713、czc24832和hs-173。在實(shí)施方案中，所述雙重pi3k/mtor抑制劑選自gdc-094、way-001、wye-354、way-600、wye-687、wyeth-bmcl-200910075-16b、wyeth-bmcl-200910096-27、ku0063794和kubmcl-200908069-5、nvp-bez235、xl-765、pf-04691502、gdc-0980(apitolisib)、gsk1059615、pf-05212384、bgt226、pki-402、vs-558和gsk2126458。參見例如liu等人drugdisc.todayther.strateg.,6(2):47-55(2009)，其通過引用并入本文。在實(shí)施方案中，所述mtor通路抑制劑是與mtor通路中的蛋白(或編碼該蛋白的核酸)結(jié)合并抑制其表達(dá)水平或活性的多肽(例如抗體或其片段)或核酸(例如雙鏈小干擾rna、短發(fā)夾rna、微小rna、反義寡核苷酸、鎖定核酸或適配體)。例如，該多肽或核酸抑制mtor復(fù)合物1(mtorc1)、mtor的調(diào)控相關(guān)蛋白(raptor)、哺乳動(dòng)物致死sec13蛋白8(mlst8)、40kda的富含脯氨酸的akt底物(pras40)、含有dep結(jié)構(gòu)域的mtor相互作用蛋白(deptor)、mtor復(fù)合物2(mtorc2)、mtor的雷帕霉素不敏感性伴隨物(rictor)、g蛋白β亞基樣蛋白(gβl)、哺乳動(dòng)物應(yīng)激激活的蛋白激酶相互作用蛋白1(msin1)、樁蛋白、rhoa、ras-相關(guān)c3肉毒桿菌毒素底物1(rac1)、細(xì)胞分裂控制蛋白42同系物(cdc42)、蛋白激酶cα(pkcα)、絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶akt、磷酸肌醇3-激酶(pi3k)、p70s6k、ras和/或真核細(xì)胞翻譯起始因子4e(eif4e)結(jié)合蛋白(4ebp)，或編碼這些蛋白之一的核酸。在實(shí)施方案中，所述src抑制劑選自博舒替尼、塞卡替尼、達(dá)沙替尼、帕納替尼、kx2-391、xl-228、tg100435/tg100855和dcc2036。參見例如puls等人oncologist.2011年5月；16(5):566–578。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述src抑制劑是與所述src蛋白或編碼該src蛋白的核酸結(jié)合并抑制其表達(dá)水平或活性的多肽(例如抗體或其片段)或核酸(例如雙鏈小干擾rna、短發(fā)夾rna、微小rna、反義寡核苷酸、鎖定核酸或適配體)。在實(shí)施方案中，所述vegf抑制劑選自貝伐珠單抗、舒尼替尼、帕唑帕尼、阿西替尼、索拉非尼、瑞格菲尼、樂伐替尼和莫特塞尼。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述vegf抑制劑是與vegf蛋白、vegf受體蛋白或編碼這些蛋白之一的核酸結(jié)合并抑制其表達(dá)水平或活性的多肽(例如抗體或其片段)或核酸(例如雙鏈小干擾rna、短發(fā)夾rna、微小rna、反義寡核苷酸、嗎啉代(morpholino)、鎖定核酸或適配體)。例如，該vegf抑制劑是可溶性vegf受體(例如可溶性vegf-c/d受體(svegfr-3))。在實(shí)施方案中，所述jak抑制劑選自facitinib、魯索替尼、巴瑞克替尼、cyt387(cas編號(hào)1056634-68-4)、來他替尼、帕克替尼和tg101348(cas編號(hào)936091-26-8)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述jak抑制劑是與jak(例如jak1、jak2、jak3或tyk2)或編碼該jak蛋白的核酸結(jié)合并抑制其表達(dá)水平或活性的多肽(例如抗體或其片段)或核酸(例如雙鏈小干擾rna、短發(fā)夾rna、微小rna、反義寡核苷酸、嗎啉代、鎖定核酸或適配體)。在實(shí)施方案中，所述raf抑制劑選自plx4032(威羅菲尼)、索拉非尼、plx-4720、gsk2118436(達(dá)拉菲尼)、gdc-0879、raf265、az628、nvp-bhg712、sb90885、zm336372、gw5074、tak-632、cep-32496和lgx818(encorafenib)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述raf抑制劑是與raf(例如a-raf、b-raf、c-raf)或編碼該raf蛋白的核酸結(jié)合并抑制其表達(dá)水平或活性的多肽(例如抗體或其片段)或核酸(例如雙鏈小干擾rna、短發(fā)夾rna、微小rna、反義寡核苷酸、嗎啉代、鎖定核酸或適配體)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述mek抑制劑選自azd6244(司美替尼)、pd0325901、gsk1120212(曲美替尼)、u0126-etoh、pd184352、rdea119(rafametinib)、pd98059、bix02189、mek162(比尼替尼,binimetinib)、as-703026(pimasertib)、sl-327、bix02188、azd8330、tak-733和pd318088。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述mek抑制劑是與mek(例如mek-1、mek-2)或編碼該mek蛋白的核酸結(jié)合并抑制其表達(dá)水平或活性的多肽(例如抗體或其片段)或核酸(例如雙鏈小干擾rna、短發(fā)夾rna、微小rna、反義寡核苷酸、嗎啉代、鎖定核酸或適配體)。在實(shí)施方案中，所述akt抑制劑選自mk-2206、krx-0401(哌立福辛)、gsk690693、gdc-0068(ipatasertib)、azd5363、cct128930、a-674563、pht-427。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述akt抑制劑是與akt(例如akt-1、akt-2、akt-3)或編碼該akt蛋白的核酸結(jié)合并抑制其表達(dá)水平或活性的多肽(例如抗體或其片段)或核酸(例如雙鏈小干擾rna、短發(fā)夾rna、微小rna、反義寡核苷酸、嗎啉代、鎖定核酸或適配體)。在實(shí)施方案中，所述法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑選自lb42708或替吡法尼。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述法尼基轉(zhuǎn)移酶抑制劑是與法尼基轉(zhuǎn)移酶或編碼該法尼基轉(zhuǎn)移酶蛋白的核酸結(jié)合并抑制其表達(dá)水平或活性的多肽(例如抗體或其片段)或核酸(例如雙鏈小干擾rna、短發(fā)夾rna、微小rna、反義寡核苷酸、嗎啉代、鎖定核酸或適配體)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組蛋白調(diào)節(jié)抑制劑選自漆樹酸、c646、mg149(組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶)、gskj4hcl(組蛋白脫甲基酶)、gsk343(抗ezh2的活性物)、bix01294(組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶)、mk0683(伏立諾他)、ms275(恩替諾特)、lbh589(帕比司他)、曲古抑菌素a、mgcd0103(mocetinostat)、他喹莫德、tmp269、nexturastata、rg2833、pdx101(貝利司他)。在實(shí)施方案中，所述抗有絲分裂劑選自灰黃霉素、酒石酸長(zhǎng)春瑞濱、紫杉醇、多西他賽、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、埃博霉素a、埃博霉素b、abt-751、cyt997(lexibulin)、酒石酸長(zhǎng)春氟寧、fosbretabulin、gsk461364、on-01910(rigosertib)、ro3280、bi2536、nms-p937、bi6727(volasertib)、hmn-214和mln0905。在實(shí)施方案中，所述酪氨酸激酶抑制劑選自帕唑帕尼(votrient)、阿西替尼、硼替佐米、博舒替尼、卡非佐米、克唑替尼、達(dá)拉菲尼、達(dá)沙替尼、埃羅替尼、吉非替尼、依魯替尼、伊馬替尼、拉帕替尼、尼羅替尼、哌加他尼、帕納替尼、瑞格菲尼、魯索替尼、索拉非尼、舒尼替尼、曲美替尼、凡德他尼、威羅菲尼和維莫德吉(vismodegib)。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述聚醚抗生素選自莫能菌素、尼日利亞菌素、纈氨霉素、鹽霉素的鈉鹽。“藥物組合物”是適于施用于受試者的呈藥學(xué)上可接受形式的含有本文中所述的化合物的制劑。本文中所用的短語“藥學(xué)上可接受的”指的是在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)適于與人類和動(dòng)物的組織接觸使用而不具有過度的毒性、刺激、過敏反應(yīng)或其它問題或并發(fā)癥，與合理的益處/風(fēng)險(xiǎn)比相稱的那些化合物、材料、組合物、載體和/或劑型。“藥學(xué)上可接受的賦形劑”指的是可用于制備藥物組合物的賦形劑，其通常是安全、無毒且既非生物學(xué)上也非在其它方面不合意的，并包括獸醫(yī)用途以及人類藥學(xué)用途可接受的賦形劑。藥學(xué)上可接受的賦形劑的實(shí)例包括但不限于無菌液體、水、緩沖鹽水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液體聚乙二醇等等)、油、洗滌劑、懸浮劑、碳水化合物(例如葡萄糖、乳糖、蔗糖或葡聚糖)、抗氧化劑(例如抗壞血酸或谷胱甘肽)、螯合劑、低分子量蛋白或其合適的混合物。藥物組合物可以以散裝或以劑量單位形式提供。為了便于施用和劑量的均勻性，尤其有利的是以劑量單位形式配制藥物組合物。本文中所用的術(shù)語“劑量單位形式”指的是適于作為用于待治療的受試者的整體劑量的物理上離散的單位；各單位含有經(jīng)計(jì)算以與所需藥物載體結(jié)合產(chǎn)生所需治療效果的預(yù)定量的活性化合物。本公開的劑量單位形式的規(guī)格由活性化合物的獨(dú)特特性和要實(shí)現(xiàn)的特定治療效果決定并直接取決于此。劑量單位形式可以是安瓿、小瓶、栓劑、糖衣丸、片劑、膠囊、iv袋、或在氣溶膠吸入器上的單泵。在治療應(yīng)用中，在影響所選劑量的其它因素中，該劑量取決于藥劑、接受的患者的年齡、體重和臨床癥狀、以及施用該療法的臨床醫(yī)生或從業(yè)者的經(jīng)驗(yàn)與判斷而變化。通常，該劑量應(yīng)當(dāng)為治療有效量。劑量可以以毫克/千克/天的測(cè)量單位來提供(該劑量可以針對(duì)患者的體重(以千克計(jì))、體表面積(以平方米計(jì))和年齡(以歲計(jì))來進(jìn)行調(diào)節(jié))。藥物組合物的有效量是提供由臨床醫(yī)生或其他合格的觀察者所注意到的客觀上可鑒定的改善的量。例如，緩解失調(diào)、疾病或病癥的癥狀。本文中所用的術(shù)語“劑量有效方式”指的是在受試者或細(xì)胞中產(chǎn)生所需生物效應(yīng)的藥物組合物的量。例如，該劑量單位形式可以包含1納克至2毫克、或0.1毫克至2克；或10毫克至1克，或50毫克至500毫克，或1微克至20毫克；或1微克至10毫克；或0.1毫克至2毫克。該藥物組合物可以采取任何合適的形式(例如液體、氣溶膠、溶液、吸入劑、霧、噴霧；或固體、粉末、軟膏劑、糊劑、霜?jiǎng)?、洗劑、凝膠、貼劑等等)用于通過任何所需途徑施用(例如經(jīng)肺、吸入、鼻內(nèi)、經(jīng)口、口腔、舌下、胃腸外、皮下、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、胸膜內(nèi)、鞘內(nèi)、透皮、透粘膜、直腸等等)。例如，本公開的藥物組合物可以是用于通過吸入或吹入(經(jīng)口或鼻)的氣溶膠施用的水溶液或粉末形式、用于口服施用的片劑或膠囊形式、適于通過直接注射或通過添加到用于靜脈內(nèi)輸注的無菌輸注液中來施用的無菌水溶液或分散液形式；或用于透皮或透粘膜施用的洗劑、霜?jiǎng)?、泡沫、貼劑、懸浮液、溶液或栓劑的形式。藥物組合物可以是口服可接受的劑型的形式，包括但不限于膠囊、片劑、含服形式、錠劑(troche)、含片(lozenge)，和乳液、含水懸浮液、分散液或溶液形式的口服液。膠囊可以含有本公開的化合物與惰性填料和/或稀釋劑如藥學(xué)上可接受的淀粉(例如，玉米、馬鈴薯或木薯淀粉)、糖、人造甜味劑、粉末狀纖維素如結(jié)晶纖維素和微晶纖維素、面粉、明膠、樹膠等等的混合物。在用于口服使用的片劑的情況下，通常使用的載體包括乳糖和玉米淀粉。也可以加入潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂。對(duì)于以膠囊形式口服施用，可用的稀釋劑包括乳糖和干燥的玉米淀粉。當(dāng)口服施用含水懸浮液和/或乳液時(shí)，本公開的化合物可以懸浮或溶解在油相中，所述油相與乳化劑和/或懸浮劑結(jié)合。如果需要的話，可以加入某些甜味劑和/或調(diào)味劑和/或著色劑。藥物組合物可以為片劑形式。該片劑可以包含單位劑量的本公開的化合物以及惰性稀釋劑或載體如糖或糖醇，例如乳糖、蔗糖、山梨糖醇或甘露糖醇。該片劑可以進(jìn)一步包含非糖衍生的稀釋劑如碳酸鈉、磷酸鈣、碳酸鈣、或纖維素或其衍生物如甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、以及淀粉如玉米淀粉。該片劑可以進(jìn)一步包含粘合劑和造粒劑(如聚乙烯基吡咯烷酮)、崩解劑(例如可溶脹的交聯(lián)聚合物，如交聯(lián)的羧甲基纖維素)、潤(rùn)滑劑(例如硬脂酸鹽)、防腐劑(例如對(duì)羥苯甲酸酯)、抗氧化劑(例如bht)、緩沖劑(例如磷酸鹽或檸檬酸鹽緩沖劑)和泡騰劑如檸檬酸鹽/碳酸氫鹽混合物。該片劑可以是包衣片劑。該包衣可以是保護(hù)膜包衣(例如蠟或清漆)或設(shè)計(jì)為控制活性劑釋放的包衣，例如緩釋(在攝取后預(yù)定滯后時(shí)間后釋放活性物)或在消化道中的特定位置處釋放。后者可以例如使用腸溶膜包衣(如以商品名出售的那些)來實(shí)現(xiàn)。片劑制劑可以通過常規(guī)壓縮、濕法造?；蚋煞ㄔ炝７椒▉碇圃?，并使用藥學(xué)上可接受的稀釋劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、表面改性劑(包括表面活性劑)、懸浮劑或穩(wěn)定劑，所述試劑包括但不限于硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、月桂基硫酸鈉、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈣、聚乙烯基吡咯烷酮、明膠、藻酸、阿拉伯樹膠、黃原膠、檸檬酸鈉、復(fù)合硅酸鹽、碳酸鈣、甘氨酸、糊精、蔗糖、山梨糖醇、磷酸二鈣、硫酸鈣、乳糖、高嶺土、甘露糖醇、氯化鈉、滑石、干淀粉和糖粉。優(yōu)選的表面改性劑包括非離子和陰離子表面改性劑。表面改性劑的代表性實(shí)例包括但不限于泊洛沙姆188、苯扎氯銨、硬脂酸鈣、鯨蠟硬脂醇、聚西托醇乳化蠟、脫水山梨糖醇酯、膠體二氧化硅、磷酸鹽、十二烷基硫酸鈉、硅酸鎂鋁和三乙醇胺。藥物組合物可以為硬或軟明膠膠囊形式。按照該制劑，本公開的化合物可以為固體、半固體或液體形式。藥物組合物可以為適于胃腸外施用的無菌水溶液或分散液形式。本文中所用的術(shù)語胃腸外包括皮下、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、病灶內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。藥物組合物可以為適于通過直接注射或通過添加到用于靜脈內(nèi)輸注的無菌輸注液來施用的無菌水溶液或分散液的形式，并包含溶劑或分散介質(zhì)，所述溶劑或分散介質(zhì)包含水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、其合適的混合物、或一種或更多種植物油。作為游離堿或藥理學(xué)上可接受的鹽的本公開的化合物的溶液或懸浮液可以在適當(dāng)?shù)鼗煊斜砻婊钚詣┑乃兄苽?。下面給出合適的表面活性劑的實(shí)例。還可以例如在甘油、液體聚乙二醇及其在油中的混合物中制備分散液。除了存在于該制劑中的任何載體或稀釋劑(如乳糖或甘露糖醇)之外，用于本公開的方法的藥物組合物可以進(jìn)一步包含一種或更多種添加劑。所述一種或更多種添加劑可以包含一種或更多種表面活性劑或由一種或更多種表面活性劑組成。表面活性劑通常具有一個(gè)或更多個(gè)長(zhǎng)脂族鏈如脂肪酸，這使其能夠直接插入細(xì)胞的脂質(zhì)結(jié)構(gòu)以增強(qiáng)藥物滲透和吸收。通常用于表征表面活性劑的相對(duì)親水性和疏水性的經(jīng)驗(yàn)參數(shù)是親水親油平衡(“hlb”值)。具有較低hlb值的表面活性劑更疏水，且在油中具有更大的溶解度，而具有較高h(yuǎn)lb值的表面活性劑更親水，且在水溶液中具有更大的溶解度。因此，親水性表面活性劑通常被認(rèn)為是具有大于大約10的hlb值的那些化合物，且疏水性表面活性劑通常是具有小于大約10的hlb值的那些。但是，這些hlb值僅僅是指導(dǎo)，因?yàn)閷?duì)于許多表面活性劑來說，取決于選擇用于測(cè)定hlb值的經(jīng)驗(yàn)方法，該hlb值可以相差多達(dá)大約8個(gè)hlb單位。用于本公開的組合物的表面活性劑尤其是聚乙二醇(peg)-脂肪酸和peg-脂肪酸單酯和二酯、peg甘油酯、醇-油酯交換產(chǎn)物、聚甘油脂肪酸、丙二醇脂肪酸酯、固醇和固醇衍生物、聚乙二醇脫水山梨糖醇脂肪酸酯、聚乙二醇烷基醚、糖及其衍生物、聚乙二醇烷基酚、聚氧乙烯-聚氧丙烯(poe-pop)嵌段共聚物、脫水山梨糖醇脂肪酸酯、離子表面活性劑、脂溶性維生素及其鹽、水溶性維生素及其兩親性衍生物、氨基酸及其鹽、以及有機(jī)酸和它們的酯和酸酐。本公開還提供包含用于本公開方法的藥物組合物的包裝和試劑盒。該試劑盒可以包含一個(gè)或更多個(gè)選自瓶子、小瓶、安瓿、泡罩包裝和注射器的容器。該試劑盒可以進(jìn)一步包括用于治療和/或預(yù)防本公開的疾病、病癥或失調(diào)的一個(gè)或更多個(gè)使用說明、一個(gè)或更多個(gè)注射器、一個(gè)或更多個(gè)涂敷器、或適于重構(gòu)本公開的藥物組合物的無菌溶液。除非另行說明，本文中使用的所有百分比和比率均按重量計(jì)。本公開的其它特征和優(yōu)點(diǎn)由不同實(shí)施例顯而易見。提供的實(shí)施例說明了可用于實(shí)踐本公開的不同組分和方法。所述實(shí)施例不限制要求保護(hù)的公開?；诒竟_，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以鑒定和采用可用于實(shí)踐本公開的其它組分和方法。實(shí)施例實(shí)施例1：阿匹莫德是tsc2裸細(xì)胞增殖的高度選擇性抑制劑使用tsc2-/-小鼠胚胎成纖維(mef-ev)細(xì)胞在高通量細(xì)胞活力篩選中鑒定阿匹莫德。tsc2裸細(xì)胞具有組成性活性的mtor。簡(jiǎn)而言之，用編碼潮霉素抗生素抗性基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(mef-ev)或也編碼tsc2的相同逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(mef-tsc2)感染衍生自tsc2-/-基因敲除小鼠胚胎的mef細(xì)胞(onda等人,j.clin.invest.104(6):687-95,1999)。隨后通過潮霉素選擇來建立所述mef-ev與mef-tsc2系。細(xì)胞在含有10％fbs(omegascientific)和2mml-谷氨酰胺的dmem中擴(kuò)增。制備細(xì)胞的冷凍儲(chǔ)備物以供直接用于hts測(cè)定。將細(xì)胞收獲、離心沉淀并隨后以1×107細(xì)胞/毫升的濃度重新懸浮在95％fbs&5％dmso中，將一毫升等分試樣以1℃/分鐘的速率根據(jù)速率(rate)冷凍至-80℃。隨后將這些儲(chǔ)備物轉(zhuǎn)移至氣相液氮以供長(zhǎng)期儲(chǔ)存。為了篩選，將小瓶在連續(xù)攪拌的情況下在37℃下解凍直至剛好解凍，隨后重新懸浮在室溫測(cè)定介質(zhì)中并以1000rpm離心5分鐘。將所得小粒重新懸浮在合適的體積中，并使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)并相應(yīng)地稀釋至40000細(xì)胞/毫升的最終計(jì)數(shù)。使用biomekfx移液器將試驗(yàn)化合物(5微升儲(chǔ)備溶液，6×所需最終孔濃度)分配到384孔測(cè)定板(corning3712)中。使用具有標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)徑彈夾頭的thermowellmate非接觸式分配系統(tǒng)將mef-ev細(xì)胞(1000個(gè)細(xì)胞/孔，在25微升培養(yǎng)基中)添加到這些預(yù)格式化板中。將該板在加濕的孵育箱中在5％的co2氣氛下在37℃下孵育72小時(shí)。按照制造商說明用celltiter-發(fā)光測(cè)定(promega)確定細(xì)胞活力?；盍Ρ硎緸槲刺幚淼膶?duì)照細(xì)胞的百分比。作為實(shí)例，對(duì)于阿匹莫德，mef-ev細(xì)胞活力(平均值+/-標(biāo)準(zhǔn)偏差，n＝3)在0.5μm下為2.16+/-0.36％，以及在5μm下為1.94+/-0.07％。通過對(duì)上述mef-ev和mef-tsc2系以及另外的三對(duì)等基因系進(jìn)行10點(diǎn)劑量響應(yīng)進(jìn)一步證明阿匹莫德對(duì)于tsc2缺陷細(xì)胞的活性：(1)按照標(biāo)準(zhǔn)方法由(tsc2-/-,p53-/-)或(tsc2+/-,p53-/-)胚胎建立(tsc2-/-,p53-/-)和(tsc2+/-,p53-/-)mef系。參見例如zhang等人,j.clin.invest.112,1223-33,2003。(2)由elt3大鼠腫瘤細(xì)胞系建立elt3-ev和elt3-tsc2系。該elt3系是用于lam/tsc的已建立的大鼠腫瘤模型。參見例如howe等人,am.j.path.146,1568-79,1995。這些細(xì)胞在tsc2中包含失活性突變，其導(dǎo)致了mtor通路的組成性激活。為了開發(fā)細(xì)胞的同基因?qū)?，用編碼潮霉素抗生素抗性基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(elt3-ev)或也編碼tsc2的相同逆轉(zhuǎn)錄病毒載體(elt3-tsc2)感染elt3細(xì)胞。隨后通過潮霉素選擇建立所述elt3-ev和elt3-tsc2系。(3)由elizabethhenske博士(foxchasecancercenter,philadelphia,pa)提供的tsc2缺失型原代人aml樣品(tsc2nullprimaryhumanamlsample)建立tri-aml102和aml103系。該細(xì)胞用編碼hpv16e6與e7開放閱讀框和新霉素抗性基因盒的兼嗜性逆轉(zhuǎn)錄病毒lxsn16e6e7感染。將細(xì)胞擴(kuò)增并進(jìn)行新霉素選擇。將個(gè)體克隆分離并冷凍。使用fugene6轉(zhuǎn)染試劑(rocheappliedscience,indianapolis,in)將具有潮霉素抗性基因盒(plxsnhtert-hyg質(zhì)粒)的人端粒酶基因(htert)的編碼序列穩(wěn)定地表達(dá)到tsc2-/-證實(shí)的e6e7aml克隆中。通過穩(wěn)定結(jié)合對(duì)照zeomycin選擇質(zhì)粒(pcdna3.1-zeo)生成tri-aml102，而tri-aml103表達(dá)人tsc2cdnapcdna3.1-zeo質(zhì)粒。作為這些工程方法的結(jié)果，tri102和tri103均是新霉素、潮霉素和zeomycin抗性系。對(duì)于10點(diǎn)劑量響應(yīng)，將每個(gè)孔以在100微升生長(zhǎng)培養(yǎng)基(dmem(cellgro10-017-cv)fbs10％(sigmaaldrichf2442-500ml,lot12d370)青霉素/鏈霉素(100x)(cellgroref30-002))中的750mef、2000elt3或2000aml細(xì)胞在96孔板中鋪板。將細(xì)胞鋪板24小時(shí)后，除去培養(yǎng)基并加入在100微升生長(zhǎng)培養(yǎng)基中的阿匹莫德稀釋液(1-500nm，2倍稀釋)(0.1％最終dmso濃度)。加入化合物72小時(shí)后，通過celltiter-發(fā)光測(cè)定(promega)確定相對(duì)細(xì)胞活力并表示為相對(duì)于載體(dmso)處理的對(duì)照細(xì)胞的百分比。隨后使用xlfit(idbs)由劑量響應(yīng)曲線計(jì)算ic50值。該tsc2缺陷細(xì)胞對(duì)于阿匹莫德高度敏感(ic50＝20nm，圖1)。如通過高于1的選擇性比率(2.45)所表示，tsc2-/-p53-/-mef顯示了與tsc2+/-p53-/-mef相比提高的對(duì)于阿匹莫德的敏感性。表1：在各種細(xì)胞類型中阿匹莫德的ic50(活力)對(duì)tsc2-/-缺乏系和救援系由10點(diǎn)劑量響應(yīng)計(jì)算ic50(nm)。ic50由兩次實(shí)驗(yàn)的平均值計(jì)算。選擇性比率通過tsc2救援系的ic50除以tsc2-/-系的ic50來計(jì)算。此外，與tsc2救援mef-tsc2細(xì)胞相比，更高濃度的阿匹莫德對(duì)于tsc2-/-mef-ev細(xì)胞具有更高的效力。該數(shù)據(jù)，與阿匹莫德對(duì)外周血單核細(xì)胞不具有細(xì)胞毒性(wada等人,blood109,1156-64,2007)、對(duì)包括u937、hela、jurkat和thp-1的多種其它癌(細(xì)胞)系均不具有細(xì)胞毒性(pct公開號(hào)wo2006/128129)的事實(shí)結(jié)合，表明用阿匹莫德治療tsc2-/-癌細(xì)胞將存在高治療指數(shù)(圖2a-2b)。實(shí)施例2：阿匹莫德在癌細(xì)胞中是高度選擇性的細(xì)胞毒性劑使用標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞活力測(cè)定如celltiterglotm按照制造商的說明來評(píng)估阿匹莫德的細(xì)胞毒活性。評(píng)價(jià)了122種人類癌細(xì)胞系對(duì)于阿匹莫德的敏感性。如果ic50小于500nm的話，則細(xì)胞系被稱為阿匹莫德敏感的。35種細(xì)胞系被鑒定為對(duì)于阿匹莫德誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性敏感。與正常細(xì)胞(其具有比癌細(xì)胞高20-200倍范圍的ic50)相比，阿匹莫德對(duì)于癌細(xì)胞也是高度選擇性的(圖2a-2b)。通過在h4神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系(ic50250-300nm)中處理72小時(shí)后對(duì)自噬泡進(jìn)行測(cè)定來進(jìn)一步研究阿匹莫德的細(xì)胞毒活性的機(jī)理。使用cyto-id自體吞噬檢測(cè)試劑盒(enzo)按照制造商的指引對(duì)自體吞噬進(jìn)行定量。圖3顯示阿匹莫德以劑量依賴性方式誘導(dǎo)的自體吞噬。實(shí)施例3:阿匹莫德是pikfyve激酶的高度選擇性的結(jié)合物為了鑒定阿匹莫德在癌細(xì)胞中的細(xì)胞靶，采用化學(xué)捕獲質(zhì)譜法(ccms)由人類神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞制備的全細(xì)胞裂解液用于鑒定其結(jié)合伴侶(bindingpartner)。這項(xiàng)工作在caprotecbioanalyticsgmbh,德國(guó)柏林進(jìn)行。參見michaelis等人,j.med.chem.,553934-44(2012)和其中引用的參考文獻(xiàn)。簡(jiǎn)而言之，合成兩種使用阿匹莫德作為以單方向連接的選擇性功能的捕獲化合物變體并通過lc-ms和1h-nmr進(jìn)行分析以確保同一性和純度。在來自h4(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤)癌細(xì)胞的全細(xì)胞裂解液中優(yōu)化捕獲條件，例如最小化蛋白與捕獲化合物的非特異性相互作用，要獲得蛋白與捕獲化合物的最大結(jié)合的試劑和蛋白的濃度等等。選擇一種捕獲化合物以便在ccms實(shí)驗(yàn)中使用阿匹莫德作為競(jìng)爭(zhēng)配體鑒定特異性蛋白結(jié)合物。在捕獲測(cè)定中通過lc-s檢測(cè)到的并在競(jìng)爭(zhēng)對(duì)照實(shí)驗(yàn)中顯著減少的蛋白被認(rèn)為是特異性結(jié)合物。使這些特異性結(jié)合物進(jìn)一步經(jīng)受嚴(yán)格的數(shù)據(jù)分析標(biāo)準(zhǔn)以便在無偏移數(shù)據(jù)評(píng)估后確定特異性。特異性蛋白結(jié)合物根據(jù)其在捕獲實(shí)驗(yàn)中的倍數(shù)變化(fc)值進(jìn)行排列。僅有兩種蛋白被鑒定為阿匹莫德的高概率候選目標(biāo)蛋白：pikfyve和vac14?；鹕綀D顯示于圖4中。在四種不同捕獲化合物濃度實(shí)驗(yàn)中這些蛋白的fc和p-值顯示在表2中。表2.在單獨(dú)的研究中，進(jìn)行阿匹莫德的蛋白激酶概況分析以鑒定激酶靶(discoverx,fremont,ca)。使用阿匹莫德以漸增的濃度(0.05-3000nm)下針對(duì)pikfyve(一種已知的阿匹莫德的靶)進(jìn)行解離常數(shù)(kd)研究。該實(shí)驗(yàn)一式兩份進(jìn)行，且kd測(cè)定為0.075nm(范圍0.069-0.081nm)(圖5)。接下來，針對(duì)一組廣泛的激酶(不包括pikfyve)篩選阿匹莫德。總計(jì)測(cè)定了456種激酶(包括疾病相關(guān)的激酶)與阿匹莫德結(jié)合的能力。阿匹莫德的篩選濃度為1μm，該濃度比阿匹莫德對(duì)pikfyve的kd高>10000倍。來自該篩選的結(jié)果表明，阿匹莫德未結(jié)合到受試的456種激酶的任一種上?？傊@些結(jié)果表明，阿匹莫德在癌細(xì)胞中以高選擇性與單一的細(xì)胞激酶，pikfyve結(jié)合。pikfyve是結(jié)合到pi(3)p上并催化脂質(zhì)第二信使pi(3,5)p2與pi(5)p的形成的酶，并且其他人已經(jīng)顯示阿匹莫德在正常細(xì)胞中也是這種激酶pikfyve的有效和特異性的抑制劑。caix等人,chembiol.2013jul25；20(7):912-21。如下面更詳細(xì)地討論的那樣，為了理解阿匹莫德針對(duì)癌細(xì)胞的選擇性細(xì)胞毒性的機(jī)理，我們進(jìn)行了一系列旨在闡明其在癌細(xì)胞中的生物活性的實(shí)驗(yàn)。實(shí)施例4：阿匹莫德的抗癌活性的機(jī)理已知阿匹莫德是炎性細(xì)胞因子il-12和il-23的有效抑制劑。到阿匹莫德被指示用于治療疾病或失調(diào)的程度上，基于這種活性進(jìn)行預(yù)測(cè)。盡管阿匹莫德的臨床試驗(yàn)集中于其在自身免疫性和炎性疾病如銀屑病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和克羅恩病方面的潛在功效，存在一些公開的建議：阿匹莫德可能可用于對(duì)抗癌癥，且特別是對(duì)抗其中c-rel或il-12/23充當(dāng)促增殖因子的癌癥。分別參見例如wo2006/128129和baird等人,frontiersinoncology3:1(2013)。令人驚訝地，并與基于阿匹莫德的il-12/23抑制活性所預(yù)測(cè)的這些預(yù)期相反，我們并未在測(cè)試細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)c-rel表達(dá)(c-rel是il-12/23基因的轉(zhuǎn)錄因子)、il-12或il-23表達(dá)的任一種和對(duì)阿匹莫德的敏感性之間的相關(guān)性。在一組不同的75種癌細(xì)胞系中分析il-12a、il-12rb1、il-12rb2、il-12b、il-23a和il-23r的表達(dá)(參見表3)。表3.各種癌細(xì)胞系簡(jiǎn)而言之，對(duì)75種癌細(xì)胞系分析了來自ccle的基因表達(dá)數(shù)據(jù)，對(duì)此獲得了針對(duì)阿匹莫德的劑量響應(yīng)曲線。通過非配對(duì)t-檢驗(yàn)在敏感(ic50小于500nm)系和不敏感(ic50大于500nm)的系中比較各白介素基因的表達(dá)。沒有發(fā)現(xiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的關(guān)系，唯一的例外是il-23a(p＝0.022)。此前已經(jīng)注意到il-23a在阿匹莫德敏感的非小細(xì)胞肺癌系中升高，并注意到重組il-23a提高了非小細(xì)胞肺癌系的增殖(參見baird等人2013，見上)。重要的是，il-23a在敏感癌系中表達(dá)的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性似乎完全僅由兩種結(jié)腸癌系驅(qū)動(dòng)。此外，il-23a表達(dá)在非霍奇金b細(xì)胞淋巴瘤中不是敏感性的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的預(yù)測(cè)指標(biāo)。實(shí)施例5：阿匹莫德抑制腎癌細(xì)胞增殖腎癌細(xì)胞系rcc-mf、rcc-er、rcc-jf和rcc-jw在mccoy’s5a培養(yǎng)基(corning)中生長(zhǎng)，而786-0、769-p和rcc-fg2在rpmi-1640(corning)中生長(zhǎng)，并且a-704在補(bǔ)充有10％fbs(sigmaaldrichf2442-500ml,lot12d370)和青霉素/鏈霉素(100x)(cellgroref30-002)的mem(corning)中生長(zhǎng)，并分別以每孔1000、1200、1000、4000、200、2000、1200和5000個(gè)細(xì)胞接種到96孔板中，最終體積為50μl。對(duì)于單一治療研究，在接種24h后，用甲磺酸阿匹莫德(在該實(shí)施例中簡(jiǎn)單稱作‘阿匹莫德’或lam-002)、索拉非尼、帕唑帕尼或舒尼替尼處理細(xì)胞，最終濃度為0.5-10000nm(3倍稀釋，總共是10個(gè)稀釋物)。所有藥物稀釋物的組成為2x儲(chǔ)備液和以50μl添加至適當(dāng)孔中。將細(xì)胞處理120h，之后使用(promega)評(píng)估活力，其中未處理細(xì)胞的相對(duì)發(fā)光設(shè)定為100％存活，且各藥物濃度表示為未處理細(xì)胞的百分比。ec50值使用graphpadprism(graphpadsoftware,inc)來確定。簡(jiǎn)言之，將原始數(shù)據(jù)進(jìn)行l(wèi)og轉(zhuǎn)化并隨后使用其中數(shù)據(jù)被約束(底部＝0，頂部＝100)的非線性回歸(曲線擬合)進(jìn)行分析。這些單一治療研究的結(jié)果顯示于圖6-13中并總結(jié)于下表。表4：在腎癌細(xì)胞系中的單一治療研究的結(jié)果細(xì)胞系ic50(nm)769-p44rcc-mf8rcc-er9rcc-fg232rcc-jf60786-071a-70411rcc-jw27對(duì)于阿匹莫德和帕唑帕尼或索拉非尼之間的協(xié)同作用的計(jì)算，將rcc-er、rcc-fg2、rcc-mf和769-p細(xì)胞進(jìn)行如上所述的接種。24h之后，用單獨(dú)的阿匹莫德(最終濃度為2-250nm；2倍稀釋，總共是8個(gè)稀釋物)、單獨(dú)的帕唑帕尼(最終濃度為78.1–10000nm；2倍稀釋，總共是8個(gè)稀釋物)或索拉非尼(最終濃度為78.1–10000nm；2倍稀釋，總共是8個(gè)稀釋物)或各濃度的阿匹莫德與各濃度的帕唑帕尼或各濃度的索拉非尼的組合(8x8矩陣)處理細(xì)胞。將細(xì)胞處理120h，之后使用(promega)評(píng)估活力，其中未處理細(xì)胞的相對(duì)發(fā)光設(shè)定為100％活力，且各藥物濃度表示為未處理細(xì)胞的百分比。圖14-21顯示協(xié)同作用研究的結(jié)果。各圖(a)中的條形圖顯示單一濃度的阿匹莫德、單一濃度的帕唑帕尼對(duì)細(xì)胞活力的效果，以及阿匹莫德和帕唑帕尼(在單一藥劑濃度下)的組合對(duì)細(xì)胞活力的效果。若兩種藥物的組合效果是累加性的，“期望值”通過使用阿匹莫德的活力分?jǐn)?shù)(fraction)乘以帕唑帕尼的活力分?jǐn)?shù)來計(jì)算，并顯示為黑色條。在各圖中的civs分?jǐn)?shù)效應(yīng)(fractionaleffect)圖(b)顯示如由chou等人所定義的組合指數(shù)(ci)(choutc,talalayp.quantitativeanalysisofdose-effectrelationships:thecombinedeffectsofmultipledrugsorenzymeinhibitors.advenzymeregul.1984；22:27–55)，其用作協(xié)同作用的度量，并且使用calcusyn(2.11版,biosoft)來計(jì)算。約束該分析以評(píng)估ci值，其在臨床可實(shí)現(xiàn)的濃度范圍內(nèi)，并且其中分?jǐn)?shù)效應(yīng)(fa)大于0.75(即，在使用藥物組合的情況下，細(xì)胞活力降低大于75％)。在civs分?jǐn)?shù)效應(yīng)圖中，數(shù)據(jù)點(diǎn)表示為‘x’，并且線顯示95％的置信區(qū)間，并且產(chǎn)生ci值>1的藥物組合是拮抗性的，ci＝1的是累加性的，而ci<1的是協(xié)同性的。另外，對(duì)于阿匹莫德和帕唑帕尼或索拉非尼的組合顯示ed50、ed75和ed90下的ci值。對(duì)于阿匹莫德與索拉非尼的組合應(yīng)用相同的方法。下表6總結(jié)了協(xié)同作用研究的結(jié)果。此處呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)證實(shí)阿匹莫德能夠與帕唑帕尼和與索拉非尼在測(cè)試的腎細(xì)胞系組中協(xié)同作用。表5：阿匹莫德和帕唑帕尼的組合在各種細(xì)胞系中的ed50、ed75和ed90下的ci值。細(xì)胞系阿匹莫德+ed50下的cied75下的cied90下的circc-er索拉非尼0.770.450.31rcc-fg2索拉非尼0.790.640.51rcc-mf索拉非尼0.730.590.48769-p索拉非尼1.220.870.62rcc-er帕唑帕尼0.560.350.22rcc-fg2帕唑帕尼0.320.380.46rcc-mf帕唑帕尼0.580.500.43769-p帕唑帕尼0.570.871.31表6：協(xié)同作用研究總結(jié)。當(dāng)前第1頁12