本發(fā)明涉及諾卡胺素(去鐵胺e)與金屬或金屬組合的新型絡合物以及其，在細胞內(nèi)和細胞外充當抗生素并且螯合不穩(wěn)定性且氧化還原活性的鐵而在調(diào)節(jié)促炎和抗炎細胞因子中的至少一者中的用途。更確切地，本發(fā)明提供了用于治療與炎癥、感染和鐵超負荷相關聯(lián)的病狀的組合物、方法和試劑盒。

背景參考

以下列出了被認為作為背景與現(xiàn)在披露的主題相關的參考文獻：

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在此對以上參考文獻的確認并不應推斷為意指這些參考文獻以任何方式與現(xiàn)在所披露的主題的可專利性相關。

背景技術：

炎癥是身體組織對刺激諸如病原體、受損的細胞或刺激物的復雜生物應答的一部分。炎癥是涉及免疫細胞、血管和分子介體的保護性應答(1)。炎癥的目的是消除細胞損傷的初始原因、清除已由于最初損害和炎性過程而受損的壞死細胞和組織，并且啟動組織修復。急性炎癥的典型生理體征是疼痛、灼熱、發(fā)紅、腫脹以及功能喪失。炎癥是通用應答，并且因此它被認為是先天免疫的機制。炎癥可以分類為急性或慢性。急性炎癥是身體對有害刺激的初始應答，并且通過增加白細胞，尤其是粒細胞從血液到損傷組織中的動員來實現(xiàn)。一系列的生化事件傳播并促進炎癥應答，涉及了局部血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)以及損傷組織內(nèi)的不同細胞。慢性炎癥是長期炎癥，該炎癥導致存在于炎癥位點處的細胞類型的漸進性變化，并且其特征在于炎性過程中所累及的組織的同時破壞和愈合(2)。

許多生物活性化合物具有抗炎性特性，經(jīng)由不同機制起作用。這些機制中的一個可以涉及對環(huán)氧合酶活性的直接阻斷，從而阻礙促炎分子，即前列腺素的產(chǎn)生。其他生物活性分子在炎癥應答過程中抑制促炎細胞因子的活性或干擾嗜中性粒細胞中的l-選擇素功能(3)。

確切地經(jīng)由促炎和抗炎細胞因子和任何其他免疫調(diào)節(jié)劑的調(diào)節(jié)來調(diào)節(jié)免疫應答的化合物因此作為用于調(diào)節(jié)免疫應答和控制相關病癥的工具是有價值的。

諾卡胺素，即鐵載體(cas#26605-16-3)，涉及向細菌、真菌和植物細胞的鐵轉運。鐵是在生物系統(tǒng)中起關鍵作用的必需元素。鐵是人體中的富有金屬。在健康成人中，鐵的總量是3至4克，其大多數(shù)位于血紅蛋白內(nèi)，血紅蛋白是紅細胞中的氧轉運蛋白和主要蛋白組分。機體鐵的一部分作為氧結合蛋白即肌紅蛋白位于肌肉中。約1％的機體鐵結合到各種含鐵酶和大量鐵依賴性氧化還原蛋白，包括呼吸作用和電子轉運中所涉及的蛋白。在另一方面，“不穩(wěn)定性”且氧化還原活性鐵池的部分充當反應性氧衍生物質(zhì)(ros)的形成(包括經(jīng)由芬頓反應(fentonreaction)形成羥基自由基)中的關鍵參與者，從而催化組織誘導的損傷，諸如炎性病狀的發(fā)展(4)。實際上，在不同的器官和組織中過量組織鐵與多種病理學和炎性現(xiàn)象之間存在直接關聯(lián)(5)。因此，鐵螯合對致病微生物可以具有抑菌和殺菌作用(6，7)。

鐵是為細胞增殖，包括微生物生長所需的。在微生物中，鐵獲取由低分子量的三價鐵離子選擇性配體即鐵載體家族所介導，這些鐵載體經(jīng)由受體介導的機制使鐵穿梭到細胞中，相當于細胞結合受體和相關聯(lián)的細胞內(nèi)利用組分。

鐵載體與金屬離子的絡合物的形成可以有助于增加金屬的溶解度，并且有助于增強過渡金屬離子穿過細胞膜并且作為絡合物浸潤到細胞和組織中的能力。此外，這些過渡金屬離子可以增強抗炎活性和/或抗生素活性(8，9)。一些金屬自身展示出抗炎活性，然而，當它們作為與鐵載體的絡合物被給予時，可以展示出協(xié)同效應(10)。

us5,075,469(11)涉及用于治療鐵介導的損傷的藥物組合物。這些組合物含有去鐵胺b或青霉胺的鋅絡合物，用于治療缺血性損傷、地中海貧血(thallasaemia)和血色素沉著癥。

wo2011/021203(12)是發(fā)明人的先前出版物，其涉及包含dfo-b金屬絡合物的藥物組合物，用于預防、治療、改善或抑制不同的免疫相關病癥，包括哮喘、ii型和i型糖尿病以及銀屑病。

wo2004/060490(13)涉及去鐵胺b-金屬絡合物用于局部治療和/或預防暴露于戰(zhàn)劑的組織的損傷，例如芥子氣誘導的皮膚灼傷和損傷的用途。

us5,051,523(14)涉及與錳和放射性同位素ga-67的諾卡胺素(去鐵胺e)絡合物的形成。后者適用于癌癥診斷中和結節(jié)病或結核病的炎性過程的定位中的pet掃描，但是不用于治療中。

已顯示與諾卡胺素的錳絡合物模擬超氧化物歧化酶活性。這樣的絡合物可以作為一系列疾病的療法應用，據(jù)推測該應用由超氧自由基離子介導但是不受增加的氫-過氧化物酶水平的影響，氫-過氧化物酶是歧化反應，例如缺血再灌注損傷和多種其他炎性過程的產(chǎn)物(15)。

ep2129762(16)披露包含金屬-鐵載體絡合物，具體地(spesifically)dfo-e金屬絡合物的洗滌劑和清理劑以及它們作為漂白催化劑的用途。

因此，需要開發(fā)可以適用于多種多樣的疾病的高效抗炎化合物，這些疾病的發(fā)病機理涉及新型金屬-諾卡胺素絡合物作為抗炎化合物、抗生素和鐵螯合物的若干種作用模式。

技術實現(xiàn)要素：

根據(jù)一個方面，本發(fā)明提供了一種包含諾卡胺素(去鐵胺e)與至少一種金屬的至少一種絡合物的組合物。更確切地，諾卡胺素與鋅、鎵、鋁、銀、金、鈷、鉬、釩或其任何離子形式中的至少一種的絡合物。在又一些另外的實施例中，本發(fā)明的組合物可以任選地進一步包含稀釋劑、載體、賦形劑中的至少一種。

在又一方面中，本發(fā)明涉及一種用于調(diào)節(jié)細胞中的細胞因子水平的方法。在一些具體實施例中，本發(fā)明的方法包括將細胞與有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物或其任何衍生物、包含它們的組合物或任何媒介物、基質(zhì)、納米或微米顆粒相接觸的步驟。在一些另外的實施例中，本發(fā)明提供了一種用于通過向受試者給予有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物或其任何衍生物、它們的組合物或包含它們的任何媒介物、基質(zhì)、納米或微米顆粒來調(diào)節(jié)受試者中的細胞因子水平的方法。

本發(fā)明的另一個方面涉及一種治療、預防、抑制、減少、消除、防止或延遲有需要的受試者中的病理學病狀或病癥的發(fā)作的方法。在一些實施例中，該方法包括向受試者給予治療有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物或其任何組合，或包含它們的任何藥物組合物、媒介物、基質(zhì)、納米或微米顆粒。

本發(fā)明進一步提供了一種諾卡胺素與至少一種金屬，確切地鋅、鎵、銀、金、鋁、鈷、鉬或釩的絡合物。

本發(fā)明的另一個方面涉及在治療、預防、抑制、減少、消除、防止或延遲有需要的受試者中的病理學病狀或病癥的發(fā)作的方法中使用的本發(fā)明組合物。

在又一方面中，本發(fā)明涉及一種包括以下各項的試劑盒：(i)呈其鹽、酯和酰胺中的任何形式的選自鑭系元素、錒系元素、后過渡金屬或過渡金屬中的至少一種金屬或其任何組合、或其藥學上可接受的衍生物和藥學上可接受的稀釋劑、載體、賦形劑或稀釋劑，以及(ii)諾卡胺素或其藥學上可接受的衍生物。

本發(fā)明的這些和其他方面將隨著描述的繼續(xù)進行而變得清楚。

附圖說明

為了更好地理解在此所披露的主題并例示其在實踐中的實施方式，現(xiàn)在將僅通過非限制性實例的方式，參考附圖描述實施例，其中：

圖1a-圖1c.諾卡胺素、鋅-諾卡胺素絡合物以及鎵-諾卡胺素絡合物的比較性質(zhì)譜分析

圖1a示出了諾卡胺素的質(zhì)譜。

圖1b示出了鋅-諾卡胺素絡合物的質(zhì)譜。

使用質(zhì)譜法研究如在實驗程序中所概述那樣進行制備并純化至89.8％的鋅-諾卡胺素絡合物。在直接注射之后(離子源：電噴霧電離(正電的)；蒸發(fā)器溫度：200℃；毛細管溫度100℃；流量：0.005ml/min(100％水)；注射體積：5μl)，示出了代表性譜圖。

圖1c示出了鎵-諾卡胺素絡合物的質(zhì)譜。

如在實驗程序中所概述那樣由氯化鎵(>99.999％純)溶液(根據(jù)制造商的詳細信息)和諾卡胺素(>98％純)制備鎵-諾卡胺素絡合物。使用質(zhì)譜法研究該絡合物。在直接注射之后(離子源：電噴霧電離(正電的)；蒸發(fā)器溫度：200℃；毛細管溫度100℃；流量：0.005ml/min(100％水)；注射體積：5μl)，示出了代表性譜圖。

圖2a-圖2b.對小鼠耳朵中的巴豆油誘導的刺激性接觸性皮炎(icd)模型的治療

圖2a.使用兩組小鼠，兩組小鼠均暴露于巴豆油。在暴露3小時之后，一個組使用僅含凡士林(僅媒介物)的軟膏處理，而第二組不進行處理。附圖示出在暴露于刺激物之后耳朵厚度隨時間的增量。示出平均值±sem。

圖2b.使用四組小鼠。與未處理小鼠(第4組)相比，三個小組使用含有諾卡胺素(0.5％)(第1組)、鋅-諾卡胺素(0.5％)(第2組)或戊酸倍他米松(0.1％)(第3組)的軟膏進行處理。示出平均值±sem。

圖3.使用鋅-諾卡胺素軟膏對icd的鼠類模型的治療：劑量-應答

使用12周大的balb/c雌性小鼠。如下將三十二只小鼠分成4組，每組八只小鼠：第1組-未處理的對照組；第2組-使用0.1％鋅-諾卡胺素處理；第3組-使用0.2％鋅-諾卡胺素處理；第4組-使用0.5％鋅-諾卡胺素處理。在暴露于刺激物3小時之后，將對應軟膏的指尖施加在暴露的耳朵上。示出平均值±sem。

圖4.利用icd的鼠類模型使用含鋅-諾卡胺素絡合物的軟膏的治療或通過含鋅-諾卡胺素絡合物的軟膏進行的炎性過程的預防

使用12周大的balb/c雌性小鼠。將四十只小鼠分成5組，每組八只小鼠；第1組-在暴露于刺激物之前1小時使用鋅-諾卡胺素(0.5％軟膏)處理的小鼠；第2組-未處理的對照組；第3組-在暴露于刺激物3小時之后使用鋅-諾卡胺素(0.5％軟膏)處理；第4組-在暴露于刺激物3小時和6小時之后使用鋅-諾卡胺素(0.5％軟膏)處理；第5組-在暴露于刺激物6小時之后使用鋅-諾卡胺素(0.5％軟膏)處理。示出平均值±sem。

圖5.局部施加的鋅-諾卡胺素對icd的鼠模型的全身性作用

使用12周大的balb/c雌性小鼠。如下將二十只小鼠分成4組，每組五只小鼠：第1組-未處理的對照組；第2組-右耳暴露于巴豆油，并且在暴露3小時之后使用0.5％鋅-諾卡胺素進行處理；第3組-兩只耳朵均暴露于巴豆油，并且在暴露3小時之后使用0.5％鋅-諾卡胺素僅對右耳進行處理；第4組-右耳暴露于巴豆油，并且在暴露3小時之后將0.5％鋅-諾卡胺素軟膏的指尖施加在尾巴的中間部分上。示出平均值±sem。

圖6a-圖6d.使用鋅-諾卡胺素對icd的治療對促炎細胞因子水平的影響

圖6a示出了暴露于巴豆油的小鼠耳朵中il-1α的水平。

圖6b示出了暴露于巴豆油的小鼠耳朵中il-6的水平。

圖6c示出了暴露于巴豆油的小鼠耳朵中tnf-α的水平。

圖6d示出了暴露于巴豆油的小鼠耳朵中il-17的水平。

示出平均值±sem。

圖(6a-6d)的每個圖中的左邊柱示出在暴露于刺激物之前(t＝0)的相應細胞因子的水平，左邊第二個條柱示出在暴露于刺激物之后t＝6h時相應細胞因子的水平。右邊第二個條柱示出在暴露于刺激物之后t＝6h時相應細胞因子的水平，但是這些耳朵在暴露于刺激物之后t＝3h時使用軟膏處理一次。右邊條柱示出在暴露于刺激物之后t＝3h時相應細胞因子的水平。

圖7.鋅-諾卡胺素對icd的治療對抗炎細胞因子il-13水平的影響

左邊條柱示出在暴露于刺激物之前(t＝0)il-13的水平，左邊第二個條柱示出在暴露于刺激物之后t＝6h時il-13的水平。右邊第二個條柱示出在暴露于刺激物之后t＝6h時il-13的水平，(而在暴露之后t＝3h時進行使用本發(fā)明的絡合物的處理)。右邊條柱示出在暴露于刺激物之后t＝3h時il-13的水平(沒有處理)。示出平均值±sem。

圖8a-圖8c：鋅-諾卡胺素絡合物對細菌生長的抗菌作用

圖8a示出了鋅-諾卡胺素對致病大腸桿菌的影響。

圖8b示出了鋅-諾卡胺素對銅綠假單胞菌的影響。

圖8c示出了鋅-諾卡胺素對金黃色葡萄球菌的影響。

圖9a-圖9c.鋅-諾卡胺素對大腸桿菌、銅綠假單胞菌以及金黃色葡萄球菌的殺菌活性

評估鋅-諾卡胺素絡合物對以下細菌的殺菌活性：圖9a.大腸桿菌；圖9b.銅綠假單胞菌；以及圖9c.金黃色葡萄球菌，這些細菌在具有適當培養(yǎng)基的皮氏培養(yǎng)皿上生長。

如下設定皮氏培養(yǎng)皿的四個象限(1-4)中的鋅-諾卡胺素的濃度：1-0mg/ml；2-5mg/ml；3-1.7mg/ml；4-0.5mg/ml。

具體實施方式

發(fā)明人在此首次報道鐵載體(諾卡胺素)與鋅離子的絡合物表現(xiàn)出高抗炎活性。他們還揭示了此活性所基于的機制。如實例2-7所示，此抗炎絡合物在刺激性接觸性皮炎(icd)模型中進行測試，在該模型中，局部炎癥應答通過在小鼠耳朵上施加巴豆油來引發(fā)。使用含有相對少量的鋅-諾卡胺素絡合物的軟膏指尖的處理使icd模型中產(chǎn)生的炎癥快速減少。

雖然金屬-去鐵胺b絡合物的抗炎作用先前由發(fā)明人示出(12)，但是如本發(fā)明所示的金屬-諾卡胺素絡合物的抗炎作用是意料之外的。更確切地，發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn)與敦加納等人的教授內(nèi)容相比，諾卡胺素的金屬絡合物可以快速地滲透到細胞中(8)。將去鐵胺b和諾卡胺素的鐵絡合物的晶體結構互相進行比較。在去鐵胺b絡合物中，在其卷曲結構中發(fā)現(xiàn)在分子端部處具有質(zhì)子化的伯氨基團的懸掛戊烷鏈。這樣的鏈不能在鐵-諾卡胺素中被檢測到，這是由于其閉合的環(huán)形結構且缺少伯氨基團。同樣，發(fā)現(xiàn)此鏈遠離酰胺連接環(huán)指向并且面對含有羰基基團的分子的表面。預期諾卡胺素中此特征的缺少會損害膜轉運過程(8)。因此，諾卡胺素有效滲透到細胞的事實是意料之外的。因此，諾卡胺素本不應當被選擇用于制備浸潤到細胞中從而表現(xiàn)出細胞內(nèi)鐵活性、抗生素活性和抗炎活性的迅速螯合作用的特性的藥物。此外，去鐵胺b是具有約50mg/ml的水溶解度的高度親水分子。在另一方面，諾卡胺素是更具親脂性的化合物，在加熱條件下被描述為可溶于水。存在具有與去鐵胺b的那些化學特性更類似的化學特性的其他鐵載體。因此，選擇諾卡胺素有悖于本領域的學者的自然選擇。此外，與去鐵胺b不同，據(jù)報道諾卡胺素將昆蟲家蠶(蠶)卵巢衍生的培養(yǎng)細胞系細胞的形態(tài)改變成紡錘形構形。具有改變構形的這些細胞比正常細胞更強地連接到培養(yǎng)瓶。雖然變化機制仍不清楚，但是卵巢細胞中的此特征已被解釋為瘤形成過程的指示物，進而導致卵巢癌。鑒于諾卡胺素的這些報告的風險，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物的安全使用和抗癌應用是令人意外的。此外，如實例7中所披露，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物清楚地展示出意料之外的抗菌作用。更確切地，在數(shù)個先前的出版物中，本發(fā)明人已經(jīng)示出在金屬離子(例如，三價鐵、鎵和鋅)結合之后，去鐵胺b的空間結構發(fā)生從其細胞凋亡狀態(tài)的線性結構到球狀、卷取結構的明顯結構變化。金屬結合之后的此變化在促進此絡合物的細胞內(nèi)進入并且因此提供其抗微生物作用中起重要作用(17)。雖然(細胞凋亡)鐵載體的線性結構不被目標微生物的鐵載體受體識別，部分地模擬鐵結合形式的鐵載體的更加球形的鋅-鐵載體絡合物結合到受體，被引入到微生物細胞中，但是它并不將(細胞凋亡)鐵載體從其鋅絡合物釋放，因此破壞生物的鐵引入機構，從而產(chǎn)生抑菌和殺菌作用。因此，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物的有效抗微生物特性是意料之外的。另外，本發(fā)明現(xiàn)在意外地顯示出金屬-諾卡胺素絡合物的意料之外的抗炎作用。

因此，在第一方面中，本披露提供了包含至少一種金屬-螯合絡合物并且確切地環(huán)形鐵載體去鐵胺e(也表示為諾卡胺素或dfo-e)與金屬的絡合物的組合物。在一些任選的實施例中，本發(fā)明的組合物可以進一步包含稀釋劑、載體和賦形劑中的至少一種。應當理解，在某些實施例中，本發(fā)明的組合物可以包含若干種不同的金屬-dfoe絡合物或其任何組合。

術語“螯合作用”涉及離子和分子結合金屬離子所通過的特定方式。根據(jù)國際理論與應用化學聯(lián)合會(iupac)，螯合作用涉及多齒(多重鍵)配體與單個中心原子之間的兩個或更多個單獨的配位鍵的形成或存在。通常這些配體是有機化合物，并且被稱為螯合劑(chelants)、螯合物、螯合劑(chelatingagents)或多價螯合劑。螯合作用描述與類似的非螯合(單齒)配體的集合體對于金屬的親和力相比的螯合配體對于相同金屬離子的親和力增強。

諾卡胺素是由若干種微生物合成的鐵載體(cas#26605-16-3)，這些微生物包括通常認為安全的(gras)細菌橄欖色鏈霉菌(streptomycesolivaceus)。諾卡胺素是在單獨的異羥肟酸基團之間具有-(ch2)5-和-(ch2)2-間隔子的環(huán)形三異羥肟酸分子。諾卡胺素與過渡金屬和后過渡金屬非共價地相互作用，從而形成具有1:1的化學計量的絡合物。三價鐵(fe³⁺)絡合物顯示出非常高的穩(wěn)定性常數(shù)，并且其結構上的特征在于扭曲的八面體。

在又一些具體實施例中，本發(fā)明的組合物的諾卡胺素如具有化學式i的結構所呈現(xiàn)：

化學式i

如在此詳細描述的，諾卡胺素是螯合劑。它包含若干個異羥肟酸基團，這些基團去質(zhì)子化形成結合金屬離子以形成絡合物的異羥肟酸鹽。

如在此所使用，術語“絡合物”(也被稱為絡合物離子或配位絡合物)是指由具有多個結合位點的配體(多齒配體)和金屬離子構成的化合物。為螯合劑的配體與至少一種金屬離子締合。

如在此所使用，術語“締合”是指使兩個實體(即，配體和金屬離子)固定在一起的化學力或物理力。這樣的力可以是本領域的技術人員已知的任何類型的化學或物理鍵合相互作用。此類締合相互作用的非限制性實例是離子鍵合、共價鍵合、配位鍵合、絡合作用、氫鍵合、范德瓦爾斯鍵合、疏水-親水相互作用等。

在一些實施例中，該締合作用可以是經(jīng)由共價結合的。在其他具體實施例中，該締合可以是經(jīng)由配位鍵合的。如在此所使用，術語配位鍵合或配位鍵是指兩個共用電子源自同一原子的共價鍵類型(被稱為配價鍵)。在本披露的上下文中，配體與金屬之間的締合包括經(jīng)由配體中的多個原子到金屬上的多個位點的締合。因此，該締合可以被視為包括多于一個鍵，有時兩個共價鍵，有時一個共價鍵和一個配位鍵，有時兩個配位鍵。鍵的數(shù)量被稱為絡合物的配位數(shù)。鍵可以包括單鍵(σ鍵)和/或雙鍵(π鍵)，并且可以是偶極鍵。

本領域的技術人員應當理解，在一些情況下，兩個原子或兩個化學實體之間的締合相互作用可以涉及多于一種類型的化學和/或物理相互作用。

當涉及金屬時，應當理解為包括普遍地已知為過渡金屬、后過渡金屬、鑭系元素、錒系元素以及類金屬的元素中的任何一種或多種。

在一些實施例中，金屬可以通過從供體路易斯堿(即，螯合劑)接受電子對而充當路易斯酸，從而形成絡合物或絡合物離子。應當注意，供給電子可以被視為供給到空金屬軌道中的電子對。在本披露的上下文中，該金屬可以被稱為“中心金屬”。

在一些實施例中，至少一種金屬選自下組，該組由以下各項組成：鋅、鎵、鋁、銀、金、鈷、鉬、釩，包括氧釩根基團，或其任何離子形式。在一些實施例中，金屬可以存在于人體中，即可以是內(nèi)源性的無毒金屬。

根據(jù)本披露，至少一種金屬是金屬離子。在一些實施例中，至少一種金屬離子可以選自下組，該組由以下各項組成：zn²⁺、ga³⁺、al³⁺、ag¹⁺、au³⁺、au¹⁺、co³⁺、v⁴⁺、v⁵⁺、[vo]²⁺、mo⁴⁺、mo⁶⁺。

如在此詳細描述的，在將絡合物給予到組織或生物中之后，因為配體與金屬之間的締合是可逆的，所以金屬離子可以由來自內(nèi)源性來源的不同金屬離子置換，并且進而可以結合另一種細胞組分或者可以配體-游離/非結合形式釋放到循環(huán)中。當涉及配體-游離/非結合形式時，應當注意金屬離子從配體(即，諾卡胺素)游離下來或未結合該配體。

有人提出，金屬離子從絡合物的釋放和伴隨的不同金屬離子的置換源于兩種金屬離子中的每一種與配體(即，諾卡胺素)的解離常數(shù)的差異。換言之，由于‘新’金屬與配體(即，諾卡胺素)的締合常數(shù)高于最初的金屬離子，所以解離常數(shù)的差異使得絡合物的解離和金屬離子的釋放是熱力學上有利的，在此情況下，置換是有利的。在不受到理論的束縛的情況下，有人提出去鐵胺e和zn²⁺的絡合物將具有釋放金屬離子(即zn²⁺)和結合fe³⁺的趨勢。在一些實施例中，游離未結合形式的金屬離子可以具有生理作用，例如抗氧化作用。應當理解，名稱諾卡胺素、去鐵胺e或dfoe涉及同一化合物，并且在整篇文件中互換使用。在一些另外的實施例中，此化合物在上文通過化學式i披露。

在一些其他實施例中，金屬離子是氧化還原惰性金屬。換言之，金屬離子不參與體內(nèi)的氧化-還原反應。

在一些實施例中，至少一種金屬離子是zn²⁺。在又一些另外的實施例中，至少一種金屬離子是ga³⁺。在一些實施例中，至少一種金屬離子是ag¹⁺。在一些實施例中，至少一種金屬離子是al³⁺。在一些其他實施例中，至少一種金屬離子是au³⁺或au¹⁺。在又一些其他實施例中，至少一種金屬離子是co³⁺。在一些另外的實施例中，至少一種金屬離子是v⁴⁺、v⁵⁺或[vo]²⁺。在又一些另外的實施例中，至少一種金屬離子是mo⁴⁺或mo⁶。

此外，本發(fā)明的組合物可以包含諾卡胺素與zn²⁺的至少一種絡合物。在一些具體實施例中，本發(fā)明的組合物的絡合物可以具有如由化學式ii或類似化學式所呈現(xiàn)的結構，其中任何兩個異羥肟酸基團(在諾卡胺素中存在的3個中)結合鋅金屬。

化學式ii：鋅-諾卡胺素絡合物

在又一些其他實施例中，本發(fā)明的組合物可以包含諾卡胺素與ga³⁺的至少一種絡合物。此外，在某些實施例中，卡胺素與ga³⁺的絡合物可以由化學式iii呈現(xiàn)。應當注意，化學式iii示出鎵-諾卡胺素絡合物的結構，該結構類似于相應的鐵絡合物，其中3個異羥肟酸基團結合金屬離子。

化學式iii：鎵-諾卡胺素絡合物

應當理解，本發(fā)明的組合物可以包含金屬-諾卡胺素的至少一種絡合物。在又一些其他實施例中，本發(fā)明的組合物可以包含如由本發(fā)明所述的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、50、50、60、70、80、90、100種或更多種絡合物。此外，必須理解，這些絡合物或其任何組合可以在本發(fā)明的組合物中以任何比率例如1:1至0,0001-100,000或更多呈現(xiàn)。

在又一些另外的實施例中，本發(fā)明的組合物可以包含諾卡胺素與ga³⁺的至少一種絡合物和諾卡胺素與zn²⁺的至少一種絡合物。應當理解，在某些實施例中，此類組合可以在所述組合物中以任何比率，例如范圍在約1:1至0.0001:100,000至100,000:0.0001的比率存在。更確切地，0.1:1、0.2:1、0.3:1、0.4:1、0.5:1、0.6:1、0.7:1、0.8:1、0.9:1、1:1、1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10或更多。

通過一個實施例，金屬離子或諾卡胺素呈具有酸的鹽的形式，并且/或者絡合物除鐵載體和金屬離子之外還包含酸。該酸可以選自非限制性實例，是1-羥基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-酮戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水楊酸、乙酸、具有任何取代的烷烴磺酸、烯烴磺酸、炔烴磺酸、己二酸、抗壞血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟腦酸、樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、檸檬酸、環(huán)己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、甲酸、富馬酸、半乳糖二酸、龍膽酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、馬尿酸、氫溴酸、鹽酸、異丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、馬來酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸或其衍生物、或取代的烴基磺酸，例如羥基-、烷氧基-、酰氧基-、烷氧羰基-、鹵素-、芳基-或氨基-取代的烷基磺酸、煙酸、硝酸、油酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水楊酸、癸二酸、亞硒酸、硒酸、或先前所提及的磺酸化合物的任何亞硒酸或硒酸類似物、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、十一碳烯酸。

金屬-諾卡胺素絡合物可以原態(tài)應用或與糖、淀粉、氨基酸、聚乙二醇或基于聚丙三醇的化合物綴合來應用。

金屬-諾卡胺素絡合物可以原態(tài)應用或與肼、羥胺、胺、鹵化物、脂肪族、芳香族、雜環(huán)化合物或任何其他藥學上可接受的組綴合來應用。

在另一個實施例中，本發(fā)明的組合物可以藥物組合物配制。更確切地，本發(fā)明的組合物包含作為活性成分的如上所述的本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物中的至少一種或其任何組合，以及至少一種藥學上可接受的載體、稀釋劑、賦形劑。

如在此所使用，“藥學上可接受的載體”包括任何以及所有的溶劑、分散介質(zhì)、包衣等等。這些介質(zhì)和藥劑用于藥物活性物質(zhì)的用途在本領域中是熟知的。除了與活性成分不相容的任何常規(guī)的介質(zhì)或藥劑之外，考慮了其在治療組合物中的用途。

在一些實施例中，本發(fā)明的藥物組合物適于全身性給予。本發(fā)明的藥物組合物可以根據(jù)良好的醫(yī)學實踐通過本發(fā)明的方法進行給予和給藥。更確切地，在下文描述的用于本發(fā)明的方法和試劑盒中的組合物可以適于通過全身性、腸胃外、腹膜內(nèi)、經(jīng)皮、口服(包括經(jīng)頰或舌下)、直腸、局部(包括經(jīng)頰或舌下)、陰道、鼻內(nèi)以及任何其他適當?shù)耐緩浇o予。此類配制品可以通過藥學領域中已知的任何方法，例如通過將活性成分與載體或賦形劑進行結合來制備。

如在此所使用的短語“全身性給予”、“全身性地給予”意指以除了直接到中樞血液系統(tǒng)中之外的方式給予化合物、藥物或其他材料，這樣使得上述物質(zhì)進入到患者的系統(tǒng)，并且因此經(jīng)受代謝以及其他類似過程。如在此所使用的短語“腸胃外給予”和“腸胃外地給予”意指除了腸內(nèi)給予和局部給予之外的、通常通過注射的給予模式，并且包括但不限于靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、動脈內(nèi)、鞘內(nèi)、囊內(nèi)、眼眶內(nèi)、心內(nèi)、真皮內(nèi)、腹膜內(nèi)、經(jīng)氣管、皮下、表皮下、關節(jié)內(nèi)(intraarticulare)、囊下、蛛網(wǎng)膜下、脊髓內(nèi)以及胸骨內(nèi)注射和輸注。

全身性給予包括通過靜脈內(nèi)彈丸注射、通過靜脈內(nèi)輸注、通過皮下、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)注射或通過栓劑、通過貼劑、或任何其他臨床上接受的方法進行的腸胃外注射，當在可接受的載體中施加時，該方法包括含有這些絡合物和其組合的片劑、丸劑、錠劑、軟錠劑、膠囊劑、可飲用制劑、軟膏、乳膏、糊劑、膠囊化的凝膠、貼劑、彈丸、或可噴霧的氣溶膠或蒸汽?？商娲?，對于任何肺部遞送，如通過口服吸入諸如通過使用液體霧化器的、基于氣溶膠的定量吸入器(mdi)或干粉分散裝置。

在其他實施例中，藥物組合物適于局部給予?！熬植拷o予”意指藥物組合物和載體可以適于任何模式的局部給予，包括：表皮、口服、支氣管肺泡灌洗、眼部給予、灌腸法、鼻腔給予、給予至耳朵、吸入給予。

不管所選擇的給予途徑，可以合適的水合形式使用的本發(fā)明的化合物和/或本發(fā)明的藥物組合物通過本領域的技術人員已知的常規(guī)方法配制成藥學上可接受的劑型。

根據(jù)本發(fā)明用于治療有需要的受試者的藥物組合物通常包含緩沖劑，即調(diào)整其同滲濃度的藥劑，以及任選地本領域已知的一種或多種藥學上可接受的載體、賦形劑和/或添加劑。補充性活性成分也可以并入到組合物中。載體可以是含有例如水、乙醇以及其合適的混合物的溶劑或分散介質(zhì)。適當流動性可以例如通過使用包衣諸如卵磷脂、通過在分散體的情況下維持所需粒徑以及通過使用表面活性劑來維持。

在一些實施例中，包含去鐵胺e與金屬作為活性成分的藥物組合物可以單獨給予或與其他金屬-諾卡胺素絡合物組合給予。

具體相關的是，本發(fā)明的絡合物的配制品或任何組合物適于用作納米或微米顆粒。使用脂質(zhì)體和納米顆粒的納米級藥物遞送系統(tǒng)是用于合理藥物遞送的新興技術，提供了改進的藥代動力學特性、藥物的控制釋放和持續(xù)釋放以及更重要地，較低的全身性毒性。特別希望的溶液允許膠囊化的化合物的外部觸發(fā)式釋放。如果藥物遞送媒介物諸如脂質(zhì)體或聚電解質(zhì)多層膠囊劑并入納米顆粒(np)致動器，則可以實現(xiàn)外部控制釋放。更確切地，與傳統(tǒng)藥物形式相比，控制型藥物遞送系統(tǒng)(dds)具有多個優(yōu)點。藥物被轉運到作用位點，因此，其對活的組織的影響以及不合需要的副作用可以被最小化。治療性化合物在靶位點的累積增加，并且因此所需要的藥物劑量是較低的。當藥物的劑量或濃度與其治療性結果或毒性作用之間存在差異時，此治療形式是尤其重要的。細胞特異性靶向可以通過將藥物連接到專門設計的載體來實現(xiàn)。不同的納米結構，包括脂質(zhì)體、聚合物、樹枝狀聚合物、硅或碳材料以及磁性納米顆粒已經(jīng)在藥物遞送系統(tǒng)中作為載體被測試。因此應當理解，本發(fā)明的絡合物或其任何組合物可以在此所述的納米或微米顆粒中的任一種配制。

本發(fā)明另一方面涉及用于調(diào)節(jié)細胞中的細胞因子水平的方法。更確切地，本發(fā)明的方法可以包括將所述細胞與有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物或其任何衍生物、包含它們的組合物或任何媒介物、基質(zhì)、納米或微米顆粒相接觸的步驟。因此，在一些實施例中，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物調(diào)節(jié)細胞中的細胞因子水平。如下文所指出的，在此所使用的調(diào)節(jié)可以是增加或降低如下文所述的細胞中或受試者中的細胞因子水平。

此外，在一些實施例中，為了調(diào)節(jié)細胞中的細胞因子水平，本發(fā)明的絡合物可以與細胞接觸。術語“接觸”意指集合在一起、放置在一起、在一起孵育或混合在一起。由此，當?shù)谝晃锲放c第二物品例如通過使其彼此觸摸或?qū)⑵浣M合而集合或放置在一起時，則這兩個物品進行了接觸。在本發(fā)明的上下文中，術語“接觸”包括所有的措施或步驟，這些措施或步驟允許本發(fā)明的絡合物與有待調(diào)節(jié)的細胞或受試者之間的相互作用，如下文所指定的。

在一些實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬可以選自由鑭系元素、錒系元素、后過渡金屬或過渡金屬組成的組。在另一個實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬可以選自鋅、鎵、鋁、銀、金、鈷、鉬、釩或其任何離子形式組成的組。

在另外的實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬離子可以選自由zn²⁺、ga³⁺、al³⁺、ag⁺和au³⁺、co³⁺、釩以及鉬組成的組。

在又一些具體實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬離子可以是zn²⁺。在一些具體實施例中，本發(fā)明的方法可以使用上文所述的諾卡胺素與zn²⁺的至少一種絡合物。

在可替代的具體實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬離子可以是ga³⁺。

在一些另外的實施例中，本發(fā)明的組合物可以使用去鐵胺e與ga³⁺的至少一種絡合物。

如上所指出的，本發(fā)明提供了用于調(diào)節(jié)細胞中的細胞因子水平的方法。如在此所使用的術語調(diào)節(jié)是指降低或可替代地升高所述細胞中的細胞因子水平。

在又更具體的實施例中，與未使用本發(fā)明的絡合物處理的細胞或受試者相比，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物可以導致與本發(fā)明的絡合物接觸的細胞中或給予有本發(fā)明的絡合物的受試者中的至少約1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31％、32％、33％、34％、35％、36％、37％、38％、39％、40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或約100％的細胞因子水平的降低、減少、消除、衰減或抑制?？商娲?，在一些實施例中，與未使用本發(fā)明的絡合物處理的細胞或受試者相比，調(diào)節(jié)可以涉及與本發(fā)明的絡合物接觸或給予有本發(fā)明的絡合物的細胞中或受試者中的至少約1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、11％、12％、13％、14％、15％、16％、17％、18％、19％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、31％、32％、33％、34％、35％、36％、37％、38％、39％、40％、41％、42％、43％、44％、45％、46％、47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、100％、200％、300％、400％、500％、600％、700％、800％、900％或約1000％的細胞因子水平的增加、升高、增強或增大。

確切地，通過本發(fā)明調(diào)節(jié)細胞因子的方法涉及調(diào)節(jié)至少一種促炎細胞因子和至少一種抗炎細胞因子。

“細胞因子”屬于小蛋白質(zhì)(約5至20kda)的類別，由細胞釋放并且對于細胞之間的相互作用、細胞之間的通訊或細胞的行為具有特異性作用。細胞因子還可以涉及自分泌信號傳導。細胞因子包括趨化因子、干擾素、白細胞介素、淋巴因子、腫瘤壞死因子，但是通常不包括激素或生長因子(雖然有一些術語重疊)。細胞因子由廣泛范圍的細胞產(chǎn)生，包括像巨噬細胞、b淋巴細胞、t淋巴細胞和肥大細胞的免疫細胞、以及內(nèi)皮細胞、成纖維細胞和不同的基質(zhì)細胞；給定的細胞因子可以由多于一種類型的細胞產(chǎn)生。應當注意，在一些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于調(diào)節(jié)如上所述的任何細胞因子的水平。

此外，在一些其他實施例中，本發(fā)明的方法可以用于調(diào)節(jié)細胞中的促炎細胞因子的水平?！按傺准毎蜃印笔谴龠M全身炎癥的細胞因子。由于它們的促炎作用，其通過產(chǎn)生發(fā)燒、浮腫、炎癥、組織破壞以及在一些情況下甚至休克和死亡來引發(fā)病理過程或使其加重。促炎細胞因子的非限制性實例包括但不限于il1-α、il1-β、il6和tnf-α、il20家族的成員、il33lif、ifn-γ、osm、cntf、tgf-β、gm-csf、il11、il12、il17、il18、il8以及化學引誘的炎性細胞的各種其他趨化因子。

在若干個實施例中，如在此所使用的促炎細胞因子的調(diào)節(jié)是指以下細胞因子：il-1α、tnf-α、il-6以及il-17。在更具體的實施例中，本發(fā)明的方法可以導致促炎細胞因子水平的降低，確切地，導致il-1α、tnf-α、il-6以及il-17中的至少一種的水平的降低。

在又一些另外的實施例中，本發(fā)明的方法可以用于調(diào)節(jié)細胞中的抗炎細胞因子的水平?？寡准毎蜃邮强刂拼傺准毎蜃討鸩⑶遗c特異性細胞因子抑制劑和可溶解的細胞因子受體共同作用以下調(diào)炎性免疫應答的一系列免疫-調(diào)控分子。主要的抗炎細胞因子包括但不限于白細胞介素il-1受體拮抗劑、il-4、il-10、il-11以及il-13。白血病抑制因子、干擾素-α以及轉化生長因子tgf-β在不同情況下被歸類為抗炎或促炎細胞因子。il-1、tnf-α和il-18的特異性細胞因子受體也用作促炎細胞因子的抑制劑。在一些具體實施例中，本發(fā)明的方法可以導致對il-13、il-10以及il-4中的至少一種的水平的調(diào)節(jié)。

在又一些其他實施例中，本發(fā)明的方法可以導致細胞中至少一種抗炎細胞因子水平的升高，并且更確切地，導致il-13、il-10以及il-4中的至少一種的水平的升高。

通過另外的實施例，本發(fā)明提供了用于調(diào)節(jié)受試者中的細胞因子水平的方法。更確切地，在一些實施例中，本發(fā)明的方法可以包括向所述受試者給予有效量的諾卡胺素與其至少一種金屬的至少一種絡合物和包含它們的任何組合物或任何媒介物、基質(zhì)、納米或微米顆粒的步驟。應當理解，在某些實施例中，此方法可以使用由本發(fā)明所述的任何絡合物、其與其他金屬-諾卡胺素絡合物的任何組合或包含它們的任何組合物、確切地由本發(fā)明所述的那些。

因此，在又一些具體實施例中，本發(fā)明提供了用于調(diào)節(jié)受試者中的促炎細胞因子水平的方法。在另外的具體實施例中，本發(fā)明的方法可以降低受試者中的至少一種促炎細胞因子的水平。在更具體的實施例中，此類促炎細胞因子可以是il-1α、il-6、tnf-α以及il-17中的至少一種。

此外，在一些具體實施例中，本發(fā)明提供了用于調(diào)節(jié)受試者中的抗炎細胞因子水平的方法。在更具體的實施例中，本發(fā)明的方法可以升高受試者中的至少一種抗炎細胞因子的水平。在更具體的實施例中，此類抗炎細胞因子可以是il-13、il-4以及il-10中的至少一種。

降低促炎細胞因子的生物活性，或者可替代地或另外地，升高抗炎細胞因子的水平或活性可以降低由促炎細胞因子介導的疾病攻擊的嚴重性。因此，降低il-1α和tnf-α的生物活性可以通過若干種不同的但是高度特異性的策略實現(xiàn)，這些策略涉及中和抗體、可溶性受體、受體拮抗劑以及將失活前體轉化為活性的成熟分子的蛋白酶的抑制劑。阻斷il-1α或tnf-α在患有銀屑病、類風濕關節(jié)炎、炎癥性腸病或移植物抗宿主疾病的患者中是非常成功的。

因此，在某些實施例中，本發(fā)明的方法可以特別適用于患有與促炎細胞因子水平的升高和抗炎細胞因子水平的降低至少一者相關聯(lián)的病癥或患有任何其他免疫介導或相關病癥的受試者。

更確切地，本發(fā)明對于患有諸如以下病癥的受試者是合適的：炎性的、感染性的、增殖性的、神經(jīng)退行性的、缺血性的、代謝性的、脊髓損傷、創(chuàng)傷、自身免疫病癥以及急性或慢性傷口或損傷。

應當注意，在一些實施例中，這些類的病癥的共同特性可以是它們與促炎細胞因子(即，il-1α、il-6、tnf-α以及il-17)和/或抗炎細胞因子(確切地il-13、il-10或il-4中的任一種)的下述關系，當病癥活躍時，促炎細胞因子升高，抗炎細胞因子降低，并且它們在特效治療之后返回到基線水平。

如實例5所示，本發(fā)明的方法可以導致促炎細胞因子、確切地il-1α、il-6、tnf-α以及il-17中的至少一種的水平的明顯降低。根據(jù)一些實施例，其中指示“減少”或“降低”促炎細胞因子，例如il-1α、il-6、tnf-α以及il-17中的任一種的表達或水平，意味著這樣的降低或減少可以是此類細胞因子表達的約10％至100％之間的減少或抑制。如在此所使用的術語“減少”、“衰減”和“消除”涉及在大小、量、數(shù)量或強度上逐漸變小的行為。具體地，與適合的對照相比，表達降低10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。應當進一步注意，減少或降低還可以是減少約2至100倍。此外，應當理解，所述促炎細胞因子的水平或表達的減少可以是在所述細胞因子的轉錄、翻譯或穩(wěn)定性的方面上。關于以上所述，應當理解，在提供的情況下，百分比值諸如例如10％、50％、120％、500％等可分別與“倍數(shù)變化”值，即0.1、0.5、1.2、5等互換。

在一些實施例中，如在此所使用的白細胞介素-1α(il-1α)，也稱為促紅細胞生成素-1，是人類中由il1a基因編碼的白細胞介素1家族的蛋白質(zhì)?？傮w上，白細胞介素1負責產(chǎn)生炎癥并且促進發(fā)燒和敗血癥。正在開發(fā)il-1α抑制劑以阻斷這些過程并治療疾病。

il-1α主要由活化的巨噬細胞以及嗜中性粒細胞、上皮細胞和內(nèi)皮細胞產(chǎn)生。多種多樣的其他細胞在刺激之后可以產(chǎn)生il-1α的前體形式。在這些其他細胞之中的是成纖維細胞、巨噬細胞、粒細胞、嗜酸性粒細胞、肥大細胞和嗜堿性粒細胞、內(nèi)皮細胞、血小板、單核細胞和髓樣細胞系、血液t淋巴細胞和b淋巴細胞、星形膠質(zhì)細胞、腎小球系膜細胞、朗格漢斯細胞、表皮樹突細胞、自然殺傷細胞、大顆粒淋巴細胞、小膠質(zhì)細胞、嗜中性粒細胞、淋巴結細胞、母體胎盤細胞以及若干種其他細胞類型。il-1α具有代謝、生理、造血活性，并且在免疫應答的調(diào)控中擔任主要角色之一。它結合白細胞介素-1受體，并且因此啟動使腫瘤壞死因子-α活化的途徑。

此外，如在此所使用的白細胞介素-6(il-6)是一種白細胞介素，其充當經(jīng)典的促炎細胞因子。它是急性期應答的重要介體。它可以通過巨噬細胞、嗜中性粒細胞、脂肪細胞以及肌細胞響應于數(shù)種應激介體而分泌，從而刺激嗜中性粒細胞的進一步產(chǎn)生并且啟動若干種細胞應激誘導的機制。il-6刺激多種疾病中的炎性和自身免疫過程，這些疾病諸如銀屑病、兩種類型的糖尿病、類風濕關節(jié)炎、特異性皮炎、刺激性接觸性皮炎以及敗血癥。

腫瘤壞死因子-α(tnf-α)，也稱為惡病質(zhì)(cachexin)或惡病質(zhì)素(cachectin)，是涉及全身性炎癥的細胞因子。tnf-α是刺激急性期反應的細胞因子組的成員。它主要由活化的巨噬細胞產(chǎn)生，但是也可以由嗜中性粒細胞、肥大下細胞、嗜酸性粒細胞、單核細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維細胞以及自然殺傷細胞分泌。此細胞因子的主要功能(但不是唯一功能)是調(diào)控免疫細胞。在通過不同的應激相關刺激活化之后，它可以在數(shù)種細胞類型中使用若干種不同的機制誘導發(fā)燒、炎癥和凋亡性細胞死亡。tnf-α濃度的增加牽涉到大量種類的炎性疾病。已證實，tnf-α濃度的局部增加將誘導典型的炎癥體征：灼熱、腫脹、發(fā)紅、疼痛以及功能喪失。存在關于細胞因子諸如il-1超家族、il-6和tnf-α的串擾和相互活化的多次報道。

如在此所使用的白細胞介素17a(il-17或il-17a)，最初被鑒定為來自嚙齒動物t細胞雜交瘤的轉錄物，它是被稱為il-17家族的細胞因子組的創(chuàng)始成員。在嚙齒動物中被稱為ctla8的il-17顯示出與由t淋巴細胞皰疹病毒猴皰疹病毒(herpesvirussaimiri)的開放閱讀框編碼的病毒il-17具有高度同源性。白細胞介素17是一種細胞因子，其通過在不同組織中增加趨化因子產(chǎn)生以向炎癥位點募集單核細胞和嗜中性粒細胞而在延遲型反應中充當強效介體，這類似于干擾素γ。il-17由t輔助細胞產(chǎn)生并且由il–23誘導，在延遲型反應中引起破壞性組織損傷。白細胞介素17用作對細胞外病原體對免疫系統(tǒng)的入侵作出應答并且誘導病原體細胞基質(zhì)的破壞的促炎細胞因子。白細胞介素17與腫瘤壞死因子和白細胞介素-1協(xié)同作用。為了引發(fā)功能，il-17結合被稱為il-17r的i型細胞表面受體，il-17r具有至少三種變體，即il17ra、il17rb和il17rc。

已經(jīng)報道了細胞因子的il-17家族的數(shù)種免疫調(diào)控功能，據(jù)推測是由于它們誘導許多種免疫信號傳導分子。il-17的最值得注意的作用是其涉及誘導并介導促炎應答。il-17普遍地與過敏性應答相關聯(lián)。il-17誘導從許多細胞類型(成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、上皮細胞、角質(zhì)化細胞、以及巨噬細胞)產(chǎn)生許多其他細胞因子(諸如il-6、g-csf、gm-csf、il-1β、tgf-β、tnf-α)、趨化因子(包括il-8、gro-α以及mcp-1)以及前列腺素(例如，pge2)。細胞因子的釋放導致許多功能，諸如氣道重塑，這是il-17應答的一個特征。趨化因子表達增加引誘了其他細胞，包括嗜中性粒細胞，但是不包括嗜酸性粒細胞。il-17功能對于被稱為t輔助17(th17)細胞的cd4+t細胞亞群也是必要的。由于這些作用，已經(jīng)將il-17家族與許多免疫/自身免疫相關疾病聯(lián)系起來，這些疾病包括類風濕關節(jié)炎、哮喘、狼瘡、同種異體移植排斥、抗腫瘤免疫性以及最近的銀屑病和多發(fā)性硬化癥。值得注意是，在此家族中，il-17f在體外和體內(nèi)均被良好地表征，并且顯示出在哮喘中具有促炎作用，并且其表達水平與疾病嚴重性相關性。因此，il-17f可以在過敏性氣道炎癥中具有關鍵作用，并且在哮喘中具有重要的治療性意義。由于其涉及免疫調(diào)控功能，il-17抑制劑作為用于自身免疫性疾病諸如類風濕關節(jié)炎、銀屑病和炎癥性腸病的可能性治療而正在被研究。

最近，已經(jīng)開發(fā)了用于炎性病癥的新的治療，其中至少一個原理是降低促炎細胞因子的水平。例如，由于已知tnf-α促進炎癥應答，已經(jīng)開發(fā)了單克隆抗體來抑制此細胞因子，以便治療與炎癥相關聯(lián)的疾病，諸如銀屑病、類風濕關節(jié)炎、潰瘍性結腸炎、克羅恩病以及強直性脊柱炎。另一種tnf-α抑制劑即循環(huán)受體融合蛋白已經(jīng)用于治療銀屑病、類風濕關節(jié)炎以及強直性脊柱炎。

降低il-1和tnf的生物活性通過若干種不同的但是高度特異性的策略實現(xiàn)，這些策略涉及中和抗體、可溶性受體、受體拮抗劑以及將失活前體轉化為活性的成熟分子的蛋白酶的抑制劑。阻斷il-1或tnf已經(jīng)證明對患有類風濕關節(jié)炎、炎癥性腸病或移植物抗宿主疾病的患者是非常成功的治療。同樣，使用il-17的抑制劑也是用于治療與炎癥相關聯(lián)的其他病癥的策略?；趤碜詣游锬Ｐ偷男鲁霈F(xiàn)的證據(jù)，提出了il-17作為用于抗炎療法的靶標，以便改善中風后恢復并減少皮膚癌的形成。il-17也牽涉到多發(fā)性硬化癥。il-17a、il-17f和il-17a/f-受體抑制劑：布羅達單抗(brodalumab)、艾克司單抗(ixekizumab)和蘇金單抗(secukinumab)最近接收到用于治療銀屑病的批準。因此，本發(fā)明所披露的金屬-dfoe絡合物、組合物、試劑盒以及方法提供了用于治療和預防與促炎細胞因子水平的升高相關聯(lián)的任何病癥、確切地上文所提及的病癥的新型工具。

此外，如實例6中所示，本發(fā)明的方法可以導致抗炎細胞因子，確切地il-13、il-10以及il-4中的至少一種的水平的增加。根據(jù)一些實施例，其中指示“增加”或“增強”抗炎細胞因子例如il-13、il-10以及il-4中的任一種、特別是il-13水平的表達，意味著這樣的增加或增強可以是此類細胞因子的表達的約10％至100％之間的增加或升高。如在此所使用的術語“增加”、“增大”和“增強”涉及在大小、量、數(shù)量或強度上逐漸變大的行為。具體地，與合適的對照相比，表達增加10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。應當進一步注意，增加或升高還可以是增加約2至100倍。此外，應當理解，所述il-13細胞因子水平或表達的增加可以是在所述細胞因子的轉錄、翻譯或穩(wěn)定性的方面上。關于以上所述，應當理解，在提供的情況下，百分比值諸如例如10％、50％、120％、500％等可分別與“倍數(shù)變化”值，即0.1、0.5、1.2、5等互換。

如在此所使用的白細胞介素-13(il-13)是抗炎細胞因子的實例。il-13由許多細胞類型分泌，但是尤其是由t輔助2型(th2)細胞分泌。若干個出版物將其描述為過敏性“炎癥”和疾病的介體，而在另一方面，它還被描述為起到強效抗炎作用的介體。另外，il-13顯示出誘導腸中的多個變化，這些變化產(chǎn)生對寄生蟲(蠕蟲)不利的環(huán)境，最終導致寄生生物從腸壁的脫離以及其移除。

白細胞介素-10(il-10)是存在于人類免疫應答中的主要抗炎細胞因子。它是th1細胞因子的強效抑制劑，包括il-2和ifn-γ兩者。此活性解釋了其細胞因子合成抑制因子的初始名稱。除了作為th2淋巴細胞細胞因子的活性之外，il-10還是單核細胞/巨噬細胞促炎細胞因子合成的強效減活化劑。在接合其高親和力110-kd細胞受體之后，il-10抑制單核細胞/巨噬細胞衍生的tnf-α、il-1、il-6、il-8、il-12、粒細胞集落刺激因子、mip-1a以及mip-2a。

由本發(fā)明在實例5和實例6(確切地是圖2-圖7)中呈現(xiàn)的結果清楚地證實鋅-諾卡胺素絡合物減少炎癥相關皮炎的鼠類模型中的炎癥體征的治療性潛力。因此，本發(fā)明的藥物組合物可以特別適于治療與炎癥相關聯(lián)的病癥。

基于特異性抗炎治療的可用性不足以及對促炎細胞因子在若干類病癥的發(fā)病機理中作用的認識，期望開發(fā)新的抗炎治療。因此，當前需要本發(fā)明在療法中被采用。

因此，本發(fā)明的另一個方面涉及一種治療、預防、抑制、減少、消除、防止或延遲有需要的受試者中的病理學病狀或病癥的發(fā)作的方法。在一些具體實施例中，該方法包括向所治療的受試者給予治療有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物或其與其他金屬-諾卡胺素絡合物的任何組合，或包含它們的任何藥物組合物、載體、基質(zhì)或媒介物。在一些具體實施例中，這些病癥和/或疾病的特征可以是當不穩(wěn)定性鐵或銅被螯合時，并且更確切地，當與這些病癥相關聯(lián)的促炎細胞因子減少(下調(diào))時和/或當與這些病癥相關聯(lián)的抗炎細胞因子升高(上調(diào))時，具有臨床有益效果。在更具體的實施例中，本發(fā)明提供了一種用于通過向有需要的所述受試者給予治療有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物、包含該至少一種絡合物的載體、基質(zhì)或媒介物來治療、預防、減少、衰減、抑制和消除與升高的促炎細胞因子相關聯(lián)的病癥。

在一些實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬可以選自由鑭系元素、錒系元素、后過渡金屬或過渡金屬組成的組。

在另一個實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬可以選自由鋅、鎵、鋁、銀、金、鈷、鉬、釩或其任何離子形式組成的組。

在另外的實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬離子可以選自由zn²⁺、ga³⁺、al³⁺、ag⁺以及au³⁺、co³⁺、釩和鉬組成的組。

在又一具體實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬離子可以是zn²⁺。在一些實施例中，本發(fā)明的方法可以使用如上文所述的諾卡胺素與zn²⁺的至少一種絡合物。

在可替代的具體實施例中，由本發(fā)明的方法所使用的絡合物的金屬離子可以是ga³⁺。

在一些另外的實施例中，本發(fā)明的方法可以使用諾卡胺素與ga³⁺的至少一種絡合物。

如在此前所披露，根據(jù)具體實施例，本發(fā)明提供治療、預防、抑制、減少、消除、防止或延遲疾病或病理學病狀或病癥的發(fā)作的方法，其中所述病癥與促炎細胞因子水平的升高和抗炎細胞因子水平的降低中的至少一者相關聯(lián)。確切地，促炎細胞因子可以是il-1α、tnf-α、il-6以及il-17中的至少一種。在一些另外的實施例中，抗炎細胞因子可以是il-13、il-10以及il-4中的至少一種。

如上所指出，在一些實施例中，本發(fā)明涉及一種治療、預防、抑制、減少、消除、防止或延遲疾病或病癥的發(fā)作的方法，該疾病或病癥與促炎細胞因子水平的升高和抗炎細胞因子水平的降低中的至少一者相關聯(lián)。在更具體的實施例中，該病癥可以是炎性的、感染性的、增殖性的、神經(jīng)退行性的、缺血性的、代謝性的脊髓損傷、創(chuàng)傷、自身免疫病癥以及急性或慢性傷口或損傷。

在具體實施例中，本發(fā)明提供了用于治療有需要的受試者中的炎性病癥的方法，這些方法包括向所述受試者給予治療有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物、包含該至少一種絡合物的載體、基質(zhì)或媒介物的步驟，其中炎性病癥涉及選自以下各項的任何病癥/疾病、病狀：炎性皮膚病癥、炎癥性腸病(ibd)，確切地潰瘍性結腸炎和克羅恩病、關節(jié)炎以及炎性呼吸道病癥，確切地哮喘。

通用術語“炎性病癥”涉及其中炎癥是對有害刺激，諸如病原體、受損細胞或刺激物的主要應答的病癥。炎癥是涉及免疫細胞、血管和分子介體的保護性應答以及長期氧化應激的最終結果。

“炎性病癥”是構成各種各樣的人類疾病的基礎的一大類病癥。另外，免疫系統(tǒng)可以涉及炎性病癥，其源于生物體針對其自身的物質(zhì)的異常免疫應答，或由于未知原因而引發(fā)的炎性過程，即分別是自身免疫性病癥和自身炎性病癥。在炎性過程中具有病因?qū)W源的非免疫性疾病包括癌癥、動脈硬化、以及缺血性心臟病。

炎癥的目的是消除細胞損傷的初始原因、清除壞死細胞和組織，并且啟動組織修復。急性炎癥的典型生理體征是疼痛、灼熱、發(fā)紅、腫脹以及功能喪失。一系列的生化事件傳播炎癥應答并使炎癥應答成熟，涉及了局部血管系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)以及損傷組織內(nèi)的不同細胞。稱為“慢性炎癥”的長期炎癥導致存在于炎癥位點處的細胞類型的漸進性遷移，并且其特征在于來自炎性過程的組織的同時損壞和愈合。炎癥還誘導高全身性水平的命名為促炎細胞因子的特異性細胞因子，這些細胞因子包括il-1α、il-6、il-8、ifn-γ、tnf-α、il-17以及il-18。炎癥應答必須在不再需要時被有效地終止，以便防止對組織的不必要的“附帶(bystander)”損傷。如果未能這樣做，會引起慢性炎癥和細胞破壞。炎癥消退在不同的組織中通過不同的機制發(fā)生。急性炎癥通常通過在一定程度上還未知的機制消退?，F(xiàn)在新出現(xiàn)的證據(jù)表明在炎癥應答開始之后，在前幾個小時內(nèi)消退的有效協(xié)調(diào)程序啟動。在進入組織之后，粒細胞促進花生四烯酸衍生的前列腺素和白三烯轉換為脂氧素，該脂氧素啟動終止序列。因此嗜中性粒細胞募集停止，并且通過細胞凋亡進行的程序性死亡(程序性細胞死亡)開始。這些事件與由ω-3多不飽和脂肪酸的對消退素(resolvin)和保護素(protectin)生物合成一致，該消退素和該保護素通過啟動細胞凋亡來極度縮短嗜中性粒細胞浸潤期。因此，細胞凋亡的嗜中性粒細胞經(jīng)歷由巨噬細胞進行的吞噬，從而導致嗜中性粒細胞的清除以及抗炎和修復細胞因子諸如轉化生長因子-β1的釋放?？寡壮绦蛞跃奘杉毎ㄟ^淋巴管的離開結束。

如在此所使用的術語“與炎癥相關聯(lián)的病理學病狀”涉及以下中的至少一種但不限于以下各項：關節(jié)炎(強直性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、骨關節(jié)炎、類風濕關節(jié)炎、銀屑病關節(jié)炎)、哮喘、動脈粥樣硬化、炎癥性腸病(克羅恩病、潰瘍性結腸炎)、皮炎(包括銀屑病)。

如實例(確切地圖2-圖6)所示，使用icd模型的本發(fā)明的鋅-諾卡胺素絡合物的應用顯示炎癥的明顯減少。此外，本發(fā)明的鋅-諾卡胺素絡合物的此抗炎作用伴隨促炎細胞因子il-1α、tnf-α、il-6以及il-17的顯著減少(圖6)。因此，本發(fā)明的鋅-諾卡胺素絡合物降低促炎細胞因子水平以及消除炎癥的能力為其抗炎特性提供了實質(zhì)性證據(jù)。與這些結果相符，如圖7所證實，在使用本發(fā)明的鋅-諾卡胺素絡合物處理之后，觀察到抗炎細胞因子il-13增加。綜合而言，可以得出結論，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物可以用作用于其中炎癥是基本機制的病癥的合適治療。

如上所指出的，使用具有炎癥(icd)的鼠類模型，以下實例(確切地圖2-圖6)清楚地證實了本發(fā)明的絡合物以及其組合物、方法和試劑盒對于治療急性和慢性炎性皮膚病癥的適用性。因此，在一些實施例中，如在本發(fā)明中詳細描述的治療方法可以適于治療炎性病癥諸如慢性或急性炎性皮膚病癥。

慢性或急性炎性皮膚病理學病狀包括皮炎、炎性皮膚損傷、炎性相關的皮膚色素沉著紊亂，例如白癜風和濕疹。更確切地，本發(fā)明的某些實施例涉及使用本發(fā)明的絡合物，以及其組合物、方法和試劑盒以用于治療皮炎的用途。術語“皮炎”通常是指皮膚的炎癥。不同的種類通常對于特定的過敏原具有共同的過敏反應。該術語可以用于是指濕疹，其還被稱為皮炎濕疹或濕疹性皮炎。濕疹的診斷經(jīng)常暗示特異性皮炎(兒童濕疹)，但是在沒有適當環(huán)境的情況下，它不過是意指“皮疹(rash)”，即短暫性皮膚炎癥。在一些語言中，“皮炎”和濕疹是同義詞，而在其他語言中，“皮炎”暗示急性病狀并且“濕疹”暗示慢性病狀。兩種病狀經(jīng)常被分類在一起。在一些具體實施例中，本發(fā)明的方法、絡合物和組合物可以適用于任何類型的皮炎，確切地特異性皮炎、接觸性皮炎、脂溢性皮炎(seborrhoeicdermatitis)或皮脂溢性皮炎(seborrheicdermatitis)以及干性濕疹。更確切地，如在此所使用，特異性皮炎是被認為具有遺傳組分并且經(jīng)常發(fā)生在其成員還患有哮喘的家族中的過敏性疾病。發(fā)癢性皮疹在頭部以及頭部和頭皮、脖子、肘內(nèi)部、膝蓋后、以及臀部是特別顯著的。它在發(fā)達國家是非常普遍的，并且正在上升。刺激性接觸性皮炎有時被誤診為特異性皮炎。此外，如在此所使用的接觸性皮炎具有兩種類型：過敏性(產(chǎn)生自對過敏原，諸如毒常春藤、鎳或秘魯香脂的延遲反應)和刺激性(產(chǎn)生自對洗滌劑，諸如例如月桂基硫酸鈉的直接反應)。如在此所使用的干性濕疹(亦稱皮脂缺乏性濕疹(asteatotice.)、裂隙性濕疹(e.craquele或craquelatum)、冬季瘙癢、冬季瘙癢病)是由于太嚴重而變成濕疹的干性皮膚。它在干燥的冬季天氣中惡化，并且最經(jīng)常影響的是四肢以及軀干。瘙癢、一觸就痛的皮膚類似于干燥、龜裂的河床。最后，本發(fā)明的方法可以用于治療脂溢性皮炎或皮脂溢性皮炎(嬰兒中為“乳痂”)，如在此所使用的該脂溢性皮炎或皮脂溢性皮炎是有時被分類為與頭皮屑緊密相關的濕疹形式的病狀。它導致頭皮、眉毛和臉以及有時軀干的干性或油膩性剝皮。該病狀是無害的，除了在嚴重的乳痂情況下。在新生兒中，它導致稱為乳痂的厚的、黃色的、硬性的頭皮皮疹，其似乎與缺乏生物素相關并且經(jīng)常是可治愈的。應當理解，本發(fā)明的方法可以適用于在此所披露的任何形式的皮炎。

應當理解，基于其抗炎性質(zhì)，本發(fā)明的絡合物和組合物可以適用于治療另一種炎性皮膚病癥、確切地銀屑病。

銀屑病也是由促炎和抗炎細胞因子介導的炎性病癥。雖然銀屑病的準確病因和發(fā)病機理是未知的，但是已證實銀屑病中的促炎1型(th1)細胞因子的過表達，并且該過表達被認為具有病理生理重要性。重要的是，證實了與其他炎性皮膚病相比，皮膚il-10mrna表達相對不足。此外，先前的出版物證實在建立的抗銀屑病療法過程中的患者展示出比療法之前的患者更高的外周血單核細胞的il-10mrna表達。這表明il-10可能具有抗銀屑病能力。實際上，在患者中觀察到il-10皮下給予產(chǎn)生的免疫抑制作用(單核細胞hla-dr表達、tnf-α和il-12分泌能力、il-12血漿水平以及回憶抗原的響應性減弱)以及向2型(th2)細胞因子模式的轉變(il-4、il-5和il-10產(chǎn)生t細胞的比例增加、ige血清水平的選擇性增加)。更確切地，銀屑病是特征為伴有鱗屑脫落的皮膚炎癥的斑狀、突起、紅色區(qū)域的普遍皮膚病狀。銀屑病經(jīng)常影響肘尖和膝蓋、頭皮、肚臍以及生殖器或肛門周圍的區(qū)域。銀屑病在免疫系統(tǒng)發(fā)出加速皮膚細胞的生長周期的錯誤信號時發(fā)生。普遍地由銀屑病導致的鱗狀斑塊被稱為銀屑病斑，它們是炎癥和過量皮膚產(chǎn)生的區(qū)域。皮膚在這些位點快速累積，這使其出現(xiàn)銀白色外觀。斑塊時常發(fā)生在肘部和膝蓋的皮膚上，但是可以影響包括頭皮、手心和腳底以及生殖器的任何區(qū)域。與濕疹相比，銀屑病更可能存在于關節(jié)的外側上。該病癥是嚴重性從小局部斑塊變化到完全身體覆蓋的慢性復發(fā)性病狀。指甲和趾甲時常受到影響(銀屑病指甲營養(yǎng)不良)并且可以被看作是獨立的癥狀。銀屑病還可以導致關節(jié)炎癥，其被稱為銀屑病關節(jié)炎。百分之十至百分之十五的具有銀屑病的人患有銀屑病關節(jié)炎，其具有慢性復發(fā)性性質(zhì)。銀屑病的癥狀可以各種形式表現(xiàn)。變型包括斑塊、膿皰、滴狀和屈側銀屑病。銀屑病可以被分類為非膿皰和膿皰類型。

非膿皰型銀屑病包括尋常型銀屑病和銀屑病性紅皮病。尋常型銀屑病(也被稱為慢性穩(wěn)定行銀屑病或斑塊類銀屑病)是銀屑病的最普遍形式。它影響80％至90％的患有銀屑病的人。斑塊狀銀屑病典型地顯現(xiàn)為發(fā)炎皮膚的覆蓋有銀白色鱗狀皮膚的突起區(qū)域。這些區(qū)域被稱為斑塊。

銀屑病性紅皮病(紅皮病型銀屑病)涉及廣布的炎癥和大部分身體表面上的皮膚剝落。它可能伴隨嚴重的瘙癢、腫脹和疼痛。它經(jīng)常是不穩(wěn)定的斑塊狀銀屑病惡化的結果，特別是在突然撤銷全身性治療之后。此形式的銀屑病可能是致命的，因為極端炎癥和剝落擾亂人體調(diào)控溫度的能力并且擾亂皮膚執(zhí)行屏障功能的能力。

在又一具體實施例中，本發(fā)明的方法可以用于治療膿皰型銀屑病。膿皰型銀屑病顯現(xiàn)為填充有非感染性膿(膿皰)的突起塊。在膿皰下方和周圍的皮膚是紅色的且是一觸就痛的。膿皰型銀屑病可以是普遍地局限在手部和腳部(掌跖膿皰病)，或者泛化為具有隨機發(fā)生在身體的任何部分上的廣布的斑塊。膿皰型銀屑病亞型包括泛化膿皰型銀屑病(馮宗布什(vonzumbusch)的膿皰型銀屑病)、掌跖膿皰病(持續(xù)性掌跖膿皰病、巴伯類型的膿包型銀屑病、肢末端的膿包型銀屑病)、環(huán)形膿皰型銀屑病、連續(xù)性肢末端皮炎以及皰疹樣膿皰病。

應當理解，本發(fā)明的方法還可以適用于治療任何其他類型的銀屑病，例如藥物誘導的銀屑病、皮褶性銀屑病或屈側銀屑病。后者顯現(xiàn)為在皮膚褶中，特別是在生殖器(在大腿與腹股溝之間)、腋窩附近、肥胖的腹部下(血管翳)以及在乳房下(乳房下皺襞)的皮膚的光滑發(fā)炎斑塊。它因摩擦和汗液而加重，并且易受到真菌感染。

此外，本發(fā)明的方法可以用于治療滴狀銀屑病。此類型的銀屑病的特征在于大量小的、鱗狀、紅色或粉色、淚滴狀的病灶。銀屑病的這些大量的斑點出現(xiàn)在大的身體區(qū)域上，主要在軀干上，但是也在四肢和頭皮上。滴狀銀屑病經(jīng)常繼鏈球菌感染，典型地在鏈球菌性咽炎之后發(fā)生。

也可以通過本發(fā)明的方法治療的指甲銀屑病產(chǎn)生手指甲和腳趾甲外觀的各種變化。這些變化包括指甲板下的褪色、指甲的點狀凹陷、穿過指甲的線、指甲下的皮膚增厚以及指甲的松動(甲松離)和破裂。

在又一實施例中，本發(fā)明的方法可以用于治療銀屑病關節(jié)炎。銀屑病關節(jié)炎涉及關節(jié)和結締組織炎癥。銀屑病關節(jié)炎可以影響任何關節(jié)，但是最普遍地在手指和腳趾的關節(jié)中。這可以引起手指和腳趾的香腸狀腫脹，被稱為指炎。銀屑病關節(jié)炎還可以影響臀部、膝蓋和脊柱(脊柱炎)。約10％-15％的患有銀屑病的人也患有銀屑病關節(jié)炎。

在一些實施例中，患有銀屑病的受試者的治療可以改善受試者的病理學狀態(tài)，例如使由于疾病而粗糙的皮膚光滑。在優(yōu)選的實施例中，這樣的病理學改善可以通過局部施加本發(fā)明的金屬-絡合物來實現(xiàn)，該絡合物不刺激皮膚并且不促進炎癥。

應當理解，本發(fā)明的絡合物以及其組合物和方法可以適用于治療銀屑病，以及包括銀屑病關節(jié)炎的銀屑病的皮膚學之外的特征。

痤瘡是可以通過本發(fā)明的方法治療的皮膚炎性病癥的另一個非限制性實例。痤瘡是用于皮膚的發(fā)疹性疾病的通用術語。它有時用作尋常型痤瘡的同義詞。然而，存在多種不同類型的痤瘡。這些類型包括尋常型痤瘡、聚合性痤瘡、粟粒性壞死性痤瘡、熱帶痤瘡、幼兒痤瘡/新生兒痤瘡、剝脫性痤瘡、暴發(fā)性痤瘡、藥物誘導型痤瘡/藥物性痤瘡(類固醇痤瘡)、鹵素痤瘡(碘疹、溴疹、氯唑瘡)、油性痤瘡、焦油痤瘡、化妝性痤瘡、職業(yè)性痤瘡、夏季痤瘡、項部瘢痕疙瘩性痤瘡、機械性痤瘡、具有面部浮腫的痤瘡、發(fā)膏性痤瘡、壞死性痤瘡、黑頭粉刺以及面部播散性粟粒性狼瘡。

可以通過本發(fā)明的方法治療的炎癥相關的皮膚病癥還可以包括昆蟲叮咬和螫刺。在螫刺期間，昆蟲注射甲酸和/或毒素。這些可以導致即時皮膚反應，經(jīng)常引起損傷區(qū)域的發(fā)紅和腫脹。來自膜翅目的螫刺通常是疼痛的，并且可能在處于危險中的患者中刺激被稱為過敏癥的威脅生命的全身性過敏反應。全身性過敏螫刺反應經(jīng)常引起單獨的或與可能累及的其他較不普遍的靶標組織的任何組合的形式的皮膚、血管或呼吸道癥狀和體征。心臟過敏癥還可以導致心搏徐緩、心律失常、心絞痛或心肌梗塞。來自蚊子、跳蚤和螨蟲的叮咬更可能導致瘙癢而不是疼痛。對于昆蟲叮咬和螫刺的皮膚反應通常持續(xù)多達幾天。然而，在一些情況下，局部反應可以持續(xù)多達兩年。對于叮咬的反應具有三種類型。正常反應累及叮咬周圍的區(qū)域，伴隨著發(fā)紅、瘙癢和疼痛。較大局部反應在腫脹區(qū)域大于5cm(直徑)時發(fā)生。全身性反應是癥狀發(fā)生在叮咬區(qū)域以外的區(qū)域時的情況。

在又一實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療白癜風。如在此所使用的白癜風是引起皮膚斑塊的色素脫失的慢性病癥。它在黑素細胞死亡或不能發(fā)揮功能時發(fā)生。白癜風的病因是未知的，但是研究表明此病可能由自身免疫、遺傳、氧化應激、神經(jīng)或病毒原因產(chǎn)生。世界范圍內(nèi)的發(fā)病率小于1％，其中最普遍的形式是非節(jié)段型白癜風。癥狀通常在10歲與30歲之間開始，包括頭發(fā)發(fā)白或發(fā)灰、口腔內(nèi)皮膚顏色喪失以及眼睛顏色喪失。白癜風最顯著的癥狀是發(fā)生在肢末端上的皮膚斑塊的色素脫失。在非節(jié)段型白癜風(nsv)中，在色素脫失皮膚斑塊位置中通常存在某種形式的對稱性。新的斑塊也會隨時間出現(xiàn)并且可以泛化到身體的大部分或局限在特定區(qū)域。殘留很少色素沉著皮膚的白癜風被稱為泛發(fā)型白癜風(vitiligouniversalis)。與在青少年中遠遠更流行的節(jié)段型白癜風不同，nsv可以發(fā)生在任何年齡。非節(jié)段型白癜風的分類包括泛化白癜風、泛發(fā)型白癜風、局灶型白癜風、肢端性白癜風以及粘膜型白癜風。節(jié)段型白癜風(sv)在外觀、病因以及發(fā)病率方面與相關聯(lián)疾病不同。它的治療不同于nsv的治療。節(jié)段型白癜風傾向于影響與脊柱背根相關聯(lián)的皮膚區(qū)域。節(jié)段型白癜風比nsv蔓延迅速得多，并且在不經(jīng)治療的情況下，它在病程中穩(wěn)定/靜止得多并且與自身免疫性疾病不相關，是響應于局部治療的可治療病狀。

應當理解，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、由本發(fā)明所述的組合物、絡合物、試劑盒以及方法可以適用于任何形式的炎性皮膚病癥、確切地在此所披露的任何形式的皮炎或銀屑病。

此外，應當理解，在某些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療急性或慢性傷口。在又一些另外的實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療由化學或熱燒傷以及由機械擊打/錘擊導致的急性或慢性損傷。由此，本發(fā)明提供了用于傷口愈合的方法。

如在此所使用的術語傷口是發(fā)生相對較快的一種損傷類型，其中皮膚被撕裂、割傷或刺破(開放性傷口)，或者其中鈍力創(chuàng)傷導致挫傷(閉合性傷口)。在病理學中，它確切地是指使皮膚的真皮受損的銳器損傷。傷口可以進一步分類為貫通的和非貫通的。貫通傷口由穿過皮膚的整個厚度的創(chuàng)傷產(chǎn)生；向下到達下面的組織和器官。非貫通傷口通常是鈍器創(chuàng)傷或與其他表面摩擦的結果，并且這種傷口未穿透皮膚。雜項的傷口可以包括但不限于：熱傷口：熱的或冷的極端溫度，可以引起熱損傷(像燒傷、曬傷和凍瘡)。熱燒傷是由與受熱物體，諸如開水、蒸汽、熱烹飪油、火以及熱物體進行接觸引起的燒傷類型。燙傷是兒童所遭受的熱燒傷的最普遍的類型，而對于成人而言，熱燒傷最普遍地由火導致。燒傷總體上根據(jù)第一程度至第四程度的嚴重性分類，但是美國燒傷協(xié)會(aba)幾乎僅基于燒傷的深度和大小，將熱燒傷歸類為輕度、中度以及重度?；瘜W傷口：這些傷口由與接觸或吸入導致皮膚或肺部損傷的化學材料而產(chǎn)生?；瘜W燒傷在活組織暴露于腐蝕性物質(zhì)諸如強酸或強堿時發(fā)生?；瘜W燒傷遵循標準燒傷分類并且可以導致廣泛的組織損傷。刺激物和/或腐蝕性產(chǎn)品的主要類型是：酸、堿、氧化物/還原劑、溶劑以及烷基化物(alkylant)。另外，化學燒傷可以由一些類型的化學武器導致，例如，起皰劑諸如芥子氣和路易氏劑(lewisite)、或致癢素諸如光氣肟。叮咬和螫刺：叮咬可以來自人類、狗、蝙蝠、嚙齒動物、蛇、蝎、蜘蛛以及蜱。電傷口：這些傷口通常以后繼于高壓電流穿過身體的表面燒傷類或螫刺類傷口呈現(xiàn)，并且可以包括更嚴重的內(nèi)部損傷。

根據(jù)傷口的愈合時間，它可以分類為急性或慢性。分類為急性傷口的那些傷口在預測量的時間內(nèi)平靜地愈合(沒有并發(fā)癥)。分類為慢性傷口的那些傷口花費更長的時間愈合并且可能具有一些并發(fā)癥。促成非愈合的慢性傷口的因素是糖尿病、靜脈或動脈疾病、感染以及老年人的代謝不足。

糖尿病足的非愈合傷口被認為是糖尿病的最顯著并發(fā)癥之一，代表了極大地影響患者生活質(zhì)量的世界范圍內(nèi)主要的醫(yī)學、社會和經(jīng)濟負擔。與循環(huán)不足、靜脈功能不良以及不動性相關聯(lián)，非愈合傷口最時常地發(fā)生在老年人和患有糖尿病的人-隨著國民年齡和慢性疾病增加而急劇上升的群體中。

雖然糖尿病可以許多方式傷害身體，但是在腳部和小腿上的非愈合潰瘍是該疾病的常見外在表現(xiàn)。同樣，糖尿病患者經(jīng)常遭受他們腳部和腿部的神經(jīng)損傷，從而使得小傷口或刺激在不知情的情況下發(fā)展。鑒于微脈管系統(tǒng)的異常以及糖尿病的其他副作用，這些傷口花費長時間愈合并且需要專門的治療途徑以便徹底愈合。

壓力性潰瘍，也被稱為壓瘡、褥瘡和褥瘡性潰瘍，是通常由于壓力或壓力與剪切力和/或摩擦的組合而在骨突出部上發(fā)生的對皮膚和/或下面的組織的局部損傷。最常見的位點是覆蓋骶骨、尾骨、腳后跟或臀部的皮膚，但是其他位點諸如肘部、膝蓋、腳踝或顱的后部可能受到影響。

壓力性潰瘍由于施加到軟組織的壓力而發(fā)生，從而使得向軟組織的血液流動被完全或部分阻塞。剪切力也是一個原因，因為它可以拉緊供給皮膚的血管。壓力性潰瘍最普遍地在不四處走動的個體，諸如臥床不起的或約束于輪椅的個體中出現(xiàn)。廣泛地認為其他因素可以影響皮膚對于壓力和剪切力的耐受性，從而增加壓力性潰瘍發(fā)展的風險。這些因素是蛋白質(zhì)-卡路里不足性營養(yǎng)不良、微氣候(由出汗或失禁導致的皮膚濕潤)、減少向皮膚的血液流動的疾病諸如動脈硬化或降低皮膚的感覺的疾病諸如麻痹或神經(jīng)病變。壓力性潰瘍的愈合可能由于個人的年齡、醫(yī)學病狀(諸如動脈硬化、糖尿病或感染)、吸煙或藥品諸如抗炎藥物而減慢。

如上所指出的，在一些實施例中，本發(fā)明進一步提供了用于傷口愈合的方法。傷口愈合是皮膚或其他身體組織自身修復或在損傷之后被修復的復雜過程。在正常皮膚中，表皮(表面層)和真皮(更深層)形成針對外部環(huán)境的保護性屏障。當屏障被打破時，協(xié)調(diào)的生化事件級聯(lián)快速開始行動來修復損傷。此過程被分成可預測的階段：凝血(止血)、發(fā)炎、新組織生長(增殖)以及組織重塑(成熟)。

不應當忽略的是，本發(fā)明的組合物，特別是當用于治療炎性皮膚病癥時，作為局部施加的組合物可以是可接受的。具體實施例考慮了通過對受影響的皮膚區(qū)域局部給予以下各項進行的皮膚炎性病狀、確切地銀屑病治療：軟膏、乳膏、懸浮液、糊劑、洗劑、粉末、溶液、油、膠囊化的凝膠、含有絡合物的脂質(zhì)體、含有本發(fā)明的絡合物的任何納米顆?；蚝羞@些絡合物的組合的可噴霧氣溶膠或蒸汽。常規(guī)的藥物載體、水性基質(zhì)、粉末基質(zhì)或油性基質(zhì)、增稠劑等可能是需要的或希望的。術語“局部施加的”或“局部給予的”意指軟膏、乳膏、軟化劑、香膏、洗劑、溶液、藥膏、油膏或任何其他藥物形式被施加到患者皮膚的受到或已經(jīng)受到銀屑病或其他皮膚病變的一種或多種癥狀影響或者顯示出或已經(jīng)顯示出該一種或多種癥狀的皮膚的一些或全部部分。

以此類推，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物或其任何藥物組合物以及本發(fā)明的方法可以適用于預防、治療、改善或抑制另一種炎癥/免疫介導病癥，例如炎癥性腸病(ibd)、確切地潰瘍性結腸炎和克羅恩病。

炎癥性腸病(ibd)是普遍的腸胃病癥，它可以被認為是免疫應答的th1-促炎亞型與th-2抗炎亞類型之間的平衡紊亂的結果。ibd是結腸和小腸的炎性病狀組。主要類型的ibd是克羅恩病和潰瘍性結腸炎(uc)。其他形式的ibd所占的情況遠遠更少。這些情況是膠原性結腸炎、淋巴細胞結腸炎、缺血性結腸炎、改道性結腸炎以及未確定型結腸炎，在這些情況下不可能進行將克羅恩病與潰瘍性結腸炎區(qū)分開的確定性診斷。

克羅恩病與uc之間的主要差異是炎性變化的位置和性質(zhì)?？肆_恩病可以影響從口腔到肛門的胃腸道的任何部分(跳躍性病變)，但是大部分情況在回腸末端中開始。相比之下，潰瘍性結腸炎局限于結腸和直腸。在顯微鏡下，潰瘍性結腸炎局限于粘膜(腸的上皮層)，而克羅恩病影響整個腸壁。最后，克羅恩病和潰瘍性結腸炎與不同比例的腸外表現(xiàn)(諸如肝臟問題、關節(jié)炎、皮膚表現(xiàn)以及眼睛問題)一起出現(xiàn)?？肆_恩病和潰瘍性結腸炎具有相同的癥狀，諸如腹瀉、嘔吐、體重減輕、發(fā)燒以及腹痛。

最近的假設斷定ibd的可能起因是：由于缺少傳統(tǒng)靶標諸如寄生蟲和蠕蟲，過度活躍的免疫系統(tǒng)攻擊消化道的不同組織。隨著寄生蟲諸如蛔蟲、鉤蟲和人類鞭蟲感染的數(shù)量下降，被診斷患有ibd的人的數(shù)量已經(jīng)增加，并且該病狀在寄生蟲感染普遍的國家中仍然是少見的。

存在若干種伴隨ibd的腸外表現(xiàn)，例如：自身免疫現(xiàn)象，其中免疫絡合物在靶器官損傷中起作用?；加衖bd的患者具有針對結腸細胞的組分和若干種不同的細菌性抗原的抗體。這些抗原由于上皮損傷而獲得進入免疫系統(tǒng)的機會。t細胞介導的免疫性的異常，諸如減弱的對t細胞刺激的應答性，也在這些患者中有所描述。此外，鑒定出粘膜細胞介導的免疫性的變化，包括粘膜igg細胞濃度的增加和t細胞亞群的變化，表明了抗原刺激。靶抗原在感染、免疫或毒性損傷之后的暴露導致粘膜免疫細胞的活化，從而產(chǎn)生導致粘膜炎癥性應答的細胞因子。促炎細胞因子諸如ifn-γ的分泌有助于增加粘膜通透性，并且已在ibd的動物模型中有所描述。

與許多其他慢性炎性疾病相同，克羅恩病可以導致各種全身性癥狀。在兒童中，生長不足是普遍的?；诓荒鼙３稚L，許多兒童首先被診斷患有克羅恩病(兒科克羅恩病)。除累及全身和腸胃之外，克羅恩病可以影響許多其他器官系統(tǒng)。被稱為葡萄膜炎的眼睛內(nèi)部部分的炎癥可以導致眼痛，尤其是當暴露于光時(畏光)。炎癥還可以累及眼睛的白色部分(鞏膜)，一種被稱為鞏膜外層炎的病狀。如果不進行治療，鞏膜外層炎和葡萄膜炎兩者均可以導致失明。

克羅恩病與被稱為血清陰性脊柱關節(jié)病的風濕性疾病類型相關聯(lián)。此類疾病的特征在于一個或多個關節(jié)炎癥(關節(jié)炎)或肌肉附著點的炎癥(起止點炎)。關節(jié)炎可以影響較大關節(jié)諸如膝蓋或肩膀，或者可以排他地累及手部和腳部的小關節(jié)。關節(jié)炎還可以累及脊柱，從而導致強直性脊柱炎(如果整個脊柱受累下)或者只是骶髂關節(jié)炎(如果僅下部脊柱受累)。關節(jié)炎的癥狀包括關節(jié)疼痛、發(fā)熱、腫脹、強硬以及關節(jié)可動性或功能喪失。

結腸鏡檢查是用于診斷克羅恩病的最好的檢測，因為它允許對結腸和回腸末端的直接可視化，從而鑒定出疾病累及的模式。發(fā)現(xiàn)累及結腸或回腸但不累及直腸的疾病的斑狀分布表明有克羅恩病。

當前沒有針對克羅恩病的療法，并且緩解可能是不可能的或者如果實現(xiàn)也不會長久。針對克羅恩病的治療僅在該疾病是活躍的情況下才需要，并且首先涉及治療急性問題，然后維持緩解。

潰瘍性結腸炎是胃腸道的內(nèi)層的另一種慢性炎癥。潰瘍性結腸炎在美國發(fā)生于35-100人/100,000人中，或小于人口的0.1％中。該疾病在世界的北方國家，以及在個別國家或其他區(qū)域的北方地區(qū)更加流行。潰瘍性結腸炎在北美的發(fā)生率是10-12個新病例/100,000人/年，其中潰瘍性結腸炎的峰值發(fā)生率出現(xiàn)在15與25歲之間。發(fā)病率是1/1000。認為存在發(fā)作年齡的雙峰分布，其中發(fā)作率的第二峰出現(xiàn)在生命的第6個十年中。該疾病影響女性多于男性。潰瘍性結腸炎和克羅恩病的地理分布在世界范圍內(nèi)是類似的，其中最高的發(fā)生率在美國、加拿大、英國以及斯堪的納維亞。在歐洲和美國，與南方位置相比，在北方位置中看到更高的發(fā)生率。

與克羅恩病一樣，潰瘍性結腸炎的發(fā)病率在德系猶太人中更高，并且在猶太血統(tǒng)的其他類群、非猶太白種人、非洲人、西班牙人以及亞洲人中逐漸降低。

潰瘍性結腸炎的臨床表現(xiàn)取決于疾病過程的程度。患者通常表現(xiàn)出逐漸發(fā)作的混有血液和粘液的腹瀉。他們還可能具有體重減輕和直腸檢查上有血液的體征。該疾病通常伴隨不同程度的腹痛，從輕微不適到嚴重疼痛的絞痛。

潰瘍性結腸炎通常限于結腸(大腸)，其中直腸幾乎普遍地被累及。受影響的結腸的內(nèi)層變得發(fā)炎，并且特征在于開放性瘡或潰瘍，其出血并且產(chǎn)生膿液。結腸中的炎癥還導致結腸時常是空的，從而導致混有血液的腹瀉。潰瘍性結腸炎是間歇性疾病，具有癥狀惡化的時期和相對無癥狀的時期。雖然潰瘍性結腸炎的癥狀有時可以自動減弱，但是該疾病通常需要治療以便進入緩解期。

潰瘍性結腸炎與影響身體的許多部分的一般炎性過程相關聯(lián)。有時這些相關聯(lián)的腸外癥狀是該疾病的初始體征，諸如青少年的疼痛的、關節(jié)炎的膝蓋。然而，該疾病的存在直至發(fā)作腸表現(xiàn)才能被確認。

診斷患有潰瘍性結腸炎的人中約一半具有溫和癥狀。其他人遭受頻繁發(fā)燒、帶血腹瀉、惡心以及嚴重的腹部絞痛。潰瘍性結腸炎還可以導致以下問題，諸如關節(jié)炎(血清陰性關節(jié)炎、強直性脊柱炎、骶髂關節(jié)炎)、眼睛炎癥(虹膜炎、葡萄膜炎、鞏膜外層炎)、肝臟疾病以及骨質(zhì)疏松癥。這些并發(fā)癥可能是由免疫系統(tǒng)觸發(fā)的炎癥的結果，因為患有潰瘍性結腸炎的人具有免疫系統(tǒng)的異常。

根據(jù)一些實施例，本發(fā)明的方法可以特別適用于防止、治療、改善或抑制炎性關節(jié)炎。

對于關節(jié)炎，以舉例的方式，相關的病狀可以包括所有類型的原發(fā)性炎性關節(jié)炎，例如類風濕關節(jié)炎、銀屑病關節(jié)炎、強直性脊柱炎(先前被稱為別赫捷列夫氏病(bechterew'sdisease)或別赫捷列夫綜合征)、幼年特發(fā)性關節(jié)炎(jia)以及痛風(代謝性關節(jié)炎)。除所指出的所有原發(fā)性形式的關節(jié)炎之外，由本發(fā)明治療的病狀可以包括所有繼發(fā)性形式的關節(jié)炎，例如紅斑狼瘡、過敏性紫癜(henoch-purpura)、血色素沉著癥、肝炎、韋格納氏肉芽腫病(wegener'sgranulomatosis)(和許多其他血管炎綜合征)、萊姆病(lymedisease)以及家族性地中海熱。

因為炎性過程是免疫介導病癥的主要支持，所以本發(fā)明的組合物的抗炎作用使其適于治療患有免疫介導病癥，例如不同形式的關節(jié)炎的受試者。

應當理解，不同形式的關節(jié)炎總體上可以分成兩個主要類別：炎性關節(jié)炎和退行性關節(jié)炎，每個類別具有不同的病因。因此，根據(jù)一個具體實施例，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物或其任何藥物組合物可以確切地旨在用于治療和/或改善炎性病癥，例如炎性關節(jié)炎。

炎性關節(jié)炎的特征在于滑膜炎、骨侵蝕、骨質(zhì)減少、軟組織腫脹以及均一的關節(jié)間隙變窄。更確切地，關節(jié)炎癥的標志是滑膜炎和骨侵蝕。后者初始地表現(xiàn)為薄的、白色的、軟骨下接骨板的病灶中斷。正常地，此軟骨下接骨板甚至在嚴重骨質(zhì)減少的情況也可以被看到，而其中斷指示了侵蝕。雖然確實關節(jié)周圍的骨質(zhì)減少和病灶軟骨下的骨質(zhì)減少可以在真正的骨侵蝕之前出現(xiàn)，但是指示確定性關節(jié)炎癥的是骨侵蝕的存在。隨著骨侵蝕擴大，骨破壞延伸到髓腔內(nèi)的小梁中。炎性關節(jié)炎的一個重要特征涉及邊緣骨侵蝕的概念。此術語是指位于發(fā)炎的滑膜關節(jié)的邊緣處的骨侵蝕。此特定位置代表關節(jié)的是關節(jié)內(nèi)的但未由透明軟骨所覆蓋的部分。因此，早期關節(jié)炎癥在關節(jié)面下的軟骨下接骨板侵蝕之前產(chǎn)生邊緣性侵蝕。當尋找骨侵蝕時，多個關節(jié)視圖對于描繪不同骨表面是必要的。炎性關節(jié)過程的第二個重要的特征是均一的關節(jié)間隙變窄。此情況出現(xiàn)的原因是關節(jié)軟骨的破壞在整個關節(jié)內(nèi)間隙是均一。炎性關節(jié)疾病的第三個發(fā)現(xiàn)是軟組織腫脹。

應當理解，炎性關節(jié)炎可以進一步分成若干種亞類，并且因此，在此所述的本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物和方法可以適用于治療包括不同亞類的關節(jié)炎的每一種炎性關節(jié)炎。

全身性關節(jié)炎的特征在于累及多個關節(jié)，并且包括兩個主要類別，即類風濕關節(jié)炎和血清陰性脊柱關節(jié)病。

根據(jù)一個實施例，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物以及方法可以用于治療和/或改善類風濕關節(jié)炎。類風濕關節(jié)炎(ra)是最普遍地導致關節(jié)(關節(jié)炎)和腱鞘內(nèi)的炎癥和組織損傷以及貧血的慢性、全身性自身免疫病癥。它還可以產(chǎn)生肺、心包、胸膜以及眼睛鞏膜中的彌漫性炎癥，并且也產(chǎn)生最普遍地在皮下組織中的結節(jié)性病變。它可以是致殘的且疼痛的病狀，該病狀可以導致功能和可動性的實質(zhì)性喪失。血清標記物諸如類風濕因子和針對環(huán)瓜氨酸肽的抗體是類風濕關節(jié)炎的重要指示物。類風濕關節(jié)炎的放射學特征是關節(jié)炎癥的那些放射學特征，并且包括具體的骨質(zhì)減少、均一的關節(jié)間隙損失、骨侵蝕以及軟組織腫脹。由于炎癥的慢性性質(zhì)，另外的發(fā)現(xiàn)諸如關節(jié)半脫位和軟骨下囊腫也可以是明顯的。

血清陰性脊柱關節(jié)病類別包括銀屑病關節(jié)炎、反應性關節(jié)炎和強直性脊柱炎，并且特征在于炎癥體征、多個關節(jié)累及以及具有骨增殖添加特征的手部和腳部的遠端涉及。因此，根據(jù)一個實施例，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物和方法可以用于治療和/或改善血清陰性脊柱關節(jié)病類別的任何病狀。

更確切地，根據(jù)非限制性實施例，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物和方法可以用于預防、治療、改善或抑制任何類型的關節(jié)炎，包括銀屑病關節(jié)炎。銀屑病關節(jié)炎是特征在于皮膚炎癥(銀屑病)和關節(jié)炎癥(關節(jié)炎)的慢性疾病。

男性和女性等可能地患銀屑病。對于銀屑病關節(jié)炎，男性更可能患脊柱炎形式(其中脊柱受到影響)，并且女性更可能患類風濕形式(其中可能累及許多關節(jié))。銀屑病關節(jié)炎通常在年齡為35-55歲的人中發(fā)展。然而，它可以在幾乎任何年齡的人中發(fā)展。銀屑病關節(jié)炎與若干種其他關節(jié)炎病狀，諸如強直性脊柱炎、反應性關節(jié)炎以及與克羅恩病和潰瘍性結腸炎相關聯(lián)的關節(jié)炎共有許多特征。所有這些病狀可以導致脊柱和關節(jié)中、眼睛、皮膚、口腔以及不同器官中的炎癥。

根據(jù)另一個非限制性實施例，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物和方法可以用于預防、治療、改善或抑制強直性脊柱炎。

強直性脊柱炎(as，先前被稱為別赫捷列夫氏病、別赫捷列夫綜合征、強直性脊柱炎(marie-strümpelldisease)以及脊柱關節(jié)炎形式)通常是慢性和漸進式形式的關節(jié)炎，由多個關節(jié)，典型地在脊柱基部處的脊柱小平面關節(jié)和骶髂關節(jié)的炎癥導致。雖然強直性脊柱炎傾向于影響脊柱周圍的這些關節(jié)和軟組織，但是也可以影響其他關節(jié)以及圍繞關節(jié)的組織(起止點，其中肌腱和韌帶連接到骨)。強直性脊柱炎也可以累及身體的除關節(jié)以外的區(qū)域，諸如眼睛、心臟和肺。此病癥時常引起骨性關節(jié)強直(或融合)，因此衍生自希臘詞語ankylos的術語強直性的意指關節(jié)的強硬化。椎骨(spondylos)意指脊椎(或脊柱)并且是指一個或多個脊椎的炎癥。

估計該疾病影響普通人群的大約0.1％-0.2％。強直性脊柱炎主要影響年輕男性。男性患強直性脊柱炎的可能性比女性高四至十倍?；加性摷膊〉拇蠖鄶?shù)人在15-35歲的年齡發(fā)展該疾病，其中發(fā)作的平均年齡是26歲。

雖然確切的病因是未知的，但是據(jù)信強直性脊柱炎是由遺傳影響和觸發(fā)性環(huán)境因素的組合而造成的。與普通人群中有7％相比，患有強直性脊柱炎的患者中有大約90％-95％具有組織抗原人類白細胞抗原b27(hla-b27)?；加袕娭毙约怪椎娜私?jīng)常具有該疾病的家族史。

在又一個實施例中，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物以及方法可以用于預防、治療、改善或抑制反應性關節(jié)炎(rea)。反應性關節(jié)炎即血清陰性脊柱關節(jié)病的另一種類型是響應于身體的另一部分中的感染而發(fā)展的自身免疫病狀。與細菌接觸并且形成感染可以觸發(fā)反應性關節(jié)炎。它具有類似于共同地稱為“關節(jié)炎”的不同其他病狀諸如風濕病的癥狀。它由另一種感染導致并且因此是“反應性的”，即，依賴于其他病狀。在慢性病例中，“觸發(fā)”性感染經(jīng)常被治愈或者緩解，因此使得難以確定初始病因。

反應性關節(jié)炎的癥狀非常經(jīng)常地包括三種似乎沒有聯(lián)系的癥狀的組合，即大關節(jié)的炎性關節(jié)炎、眼睛的炎癥(結膜炎和葡萄膜炎)以及尿道炎。應當指出，rea也被稱為萊特爾氏綜合征(以德國醫(yī)師漢斯萊特爾(hansreiter)命名)也被稱為尿道性關節(jié)炎、性病性關節(jié)炎和腸多動脈炎(polyarteritisenterica)。

應當理解，存在許多其他形式的炎性關節(jié)炎，包括幼年特發(fā)性關節(jié)炎、痛風和假痛風以及與結腸炎或銀屑病相關聯(lián)的關節(jié)炎。因此應當理解，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物以及方法也適用于這些病狀。

因此，本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物以及方法可以用于預防、治療、改善或抑制幼年特發(fā)性關節(jié)炎(jia)。jia是兒童中的持續(xù)性關節(jié)炎的最普遍形式(在本文中幼年是指在16歲之前發(fā)作，特發(fā)性是指無確定病因的病狀，并且關節(jié)炎是關節(jié)滑膜的炎癥)。jia是見于兒童中的關節(jié)炎的亞類，其可以是短暫的且自限的或慢性的。它顯著地不同于普遍地見于成年人中的關節(jié)炎(類風濕關節(jié)炎)和可以存在于兒童中的為慢性病狀的其他類型的關節(jié)炎(例如，銀屑病關節(jié)炎和強直性脊柱炎)。

此外，在針對炎性病狀的一些具體實施例中，任何炎性呼吸道疾病諸如哮喘可以從使用本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物、組合物的治療中受益，在該治療中，向患有該疾病的受試者給予治療有效量的該金屬-諾卡胺素絡合物的組合物。因此，在具體實施例中，本發(fā)明的方法可以用于預防、治療和/或改善呼吸道病癥、確切地哮喘。

哮喘是氣道的常見慢性炎性疾病，其特征在于可變的和復發(fā)性癥狀、可逆氣流阻塞和支氣管痙攣。常見的癥狀包括喘鳴、咳嗽、胸悶以及呼吸短促。

哮喘被認為是由遺傳因素和環(huán)境因素的組合導致的。它的診斷通常是基于癥狀的模式、隨時間對療法的應答以及肺活量測定法。它在臨床上根據(jù)癥狀的頻率被分類為一秒內(nèi)用力呼氣量(fev1)和呼氣流速峰值。哮喘還可以被分類為特異性(外源性)或非特異性(內(nèi)源性)，其中特異反應性是指向1型超敏反應發(fā)展的傾向性。

治療急性哮喘癥狀通常使用吸入型短效β-2激動劑(諸如沙丁胺醇)和口服皮質(zhì)類固醇。在非常嚴重的情況下，可能需要靜脈內(nèi)皮質(zhì)類固醇、硫酸鎂以及住院治療。癥狀可以通過避免觸發(fā)物諸如過敏原和刺激物以及通過使用吸入型皮質(zhì)類固醇來預防。如果哮喘癥狀仍未得到控制，除吸入型皮質(zhì)類固醇之外，可以使用長效β激動劑(laba)或抗白三烯劑。

哮喘是慢性氣道炎癥的結果，其隨后引起周圍平滑肌收縮性增加。此因素以及其他因素導致氣道變窄和典型的喘鳴癥狀的發(fā)作。該變窄在有或沒有治療的情況下典型地是可逆的。氣道自身偶爾變化。典型的氣道變化包括嗜酸性粒細胞增加和網(wǎng)狀板增厚。慢性地，氣道平滑肌的大小可能隨粘液腺數(shù)量的增加而一起增加。所涉及的其他細胞類型包括：t淋巴細胞、巨噬細胞以及嗜中性粒細胞。還可能涉及免疫系統(tǒng)的其他組分，包括：細胞因子、趨化因子、組胺以及白三烯。

雖然沒有用于哮喘的療法，但是癥狀典型地可以被改善。應當創(chuàng)建用于前攝地監(jiān)測和管理癥狀的具體的、定制的計劃。該計劃應當包括減少對過敏原的暴露、進行測試以評價癥狀的嚴重性以及藥品的使用。治療計劃應當被寫下并且根據(jù)癥狀變化提出對治療的調(diào)整。

重要的是，本發(fā)明的金屬-鐵載體、確切地金屬-諾卡胺素絡合物向當前可用的藥品提供附加的治療維度，因為它們不僅充當對抗所描述的呼吸道病癥病理的發(fā)展的預防性措施，而且還減弱接著發(fā)生的組織損傷。

應當注意，用于哮喘和其他呼吸道相關聯(lián)的病癥的藥品典型地被提供作為與哮喘間隔器組合的定量吸入器(mdi)或提供為為干粉吸入器。該間隔器是使藥品與空氣混合的塑料圓柱體，從而使得更易于接受全劑量的藥物。還可以使用霧化器。本發(fā)明的金屬-dfoe絡合物因此可以使用此類mdi來給予，并且還可以與任何其他哮喘藥品、確切地以上所指出的那些藥品組合。

如上所指出的，本發(fā)明考慮了用于治療不同的免疫相關呼吸道疾病的方法。除哮喘之外，此類呼吸道疾病可以包括氣道中的任何其他急性過敏性反應表現(xiàn)、慢性鼻竇炎(crs)、過敏性鼻炎、copd、鼻瘜肉(np)、血管運動性鼻炎、氣道高反應性、囊性纖維化以及肺纖維化或過敏性鼻竇炎。因此，本發(fā)明提供了用于預防、治療、改善或抑制以上所述的任何呼吸道疾病的方法、組合型組合物和試劑盒。

因此，在某些實施例中，本發(fā)明提供了用于治療鼻竇炎的方法、組合物和試劑盒。鼻竇炎是副鼻竇的炎癥，其可以是由感染、過敏性反應或自身免疫問題而造成的。大多數(shù)病例是由于病毒感染而造成的并且在10天的病程中消退。它是普遍的病狀，每年在美國發(fā)生超過兩千四百萬個病例。

就其本身而言，慢性鼻竇炎持續(xù)長于三個月，并且可以由共有竇的慢性炎癥作為共同癥狀的許多不同疾病導致。慢性鼻竇炎病例被細分成具有息肉的病例和沒有息肉的病例。當息肉存在時，該病狀被稱為慢性增生性鼻竇炎；然而，這些病例被了解得很少并且可以包括過敏性反應、環(huán)境因素諸如灰塵或污染、細菌性感染或真菌(過敏性、感染性或反應性)。非過敏性因素諸如血管運動性鼻炎也可以導致慢性竇問題。

可以由本發(fā)明的方法治療的過敏性鼻炎、花粉癥或枯草熱是鼻腔氣道的過敏性炎癥。它在過敏原諸如花粉或灰塵被具有敏化免疫系統(tǒng)的個體吸入時發(fā)生，并且觸發(fā)抗體產(chǎn)生。這些抗體大部分結合到肥大細胞，這些肥大細胞含有組胺。當肥大細胞被花粉和灰塵刺激時，組胺(和其他化學物)被釋放。這導致瘙癢、腫脹和粘液產(chǎn)生。癥狀的嚴重性在個體之間有所不同。非常敏感的個體可能經(jīng)歷蕁麻疹或其他皮疹。

慢性阻塞性肺病(copd)，也被稱為慢性阻塞性肺疾病(cold)、慢性阻塞性氣道疾病(coad)、慢性氣流受限(cal)以及慢性阻塞性呼吸道疾病(cord)，是指慢性支氣管炎和肺氣腫，即氣道變窄的肺部的一對普遍共存的疾病。這導致去往和離開肺部的空氣流動受限，從而導致呼吸短促。相比于哮喘，該氣流受限是可逆性差的并且通常隨時間變得逐漸更差。copd是由最普遍地來自吸煙的有害顆?；驓怏w導致，該顆?；驓怏w觸發(fā)肺部的異常炎癥應答。較大氣道中的炎癥應答被稱為慢性支氣管炎，其在人定期地咳嗽出痰時在臨床上被診斷。在肺泡中，炎癥應答導致肺部組織的破壞，被稱為肺氣腫的一種過程。copd的自然病程的特征在于被稱為急性惡化的癥狀的偶發(fā)性突然加重，其大多數(shù)由感染或空氣污染導致。本發(fā)明的方法、組合型組合物和試劑盒適用于治療coad和copd。

此外，本發(fā)明的方法可以用于治療鼻息肉。鼻息肉是主要產(chǎn)生自鼻和副鼻竇的粘膜的息肉狀腫塊。它們是時常伴隨過敏性鼻炎的粘膜的過度生長。它們是自由地可移動的并且非一觸就痛的。鼻息肉通常分類為上頜后竇鼻孔息肉和篩骨息肉。上頜竇后鼻孔息肉產(chǎn)生自上頜竇并且是遠不太常見的，篩骨息肉產(chǎn)生自篩骨竇。上頜竇后鼻孔息肉通常是單個的且是單側的，而篩骨息肉是多個的且是雙側的。

非過敏性鼻炎是指不是由過敏性反應而造成的鼻漏。非過敏性鼻炎可以被分類為非炎性鼻炎或炎性鼻炎。有時與過敏性反應混淆的非炎性、非過敏性鼻炎的一個非常普遍的類型被稱為血管運動性鼻炎，其中某些非過敏性觸發(fā)物諸如氣味、煙氣、煙霧、灰塵以及溫度變化導致鼻炎。認為這些非過敏性觸發(fā)物導致鼻子內(nèi)層中的血管擴張，其引起腫脹和排流。血管運動性鼻炎可以與過敏性鼻炎共存，并且這被稱為“混合性鼻炎”。血管運動性鼻炎看起來在女性中比在男性中明顯更普遍，從而使一些研究人員認為是激素起作用。總體上，與可以在任何年齡發(fā)展的過敏性鼻炎不同，血管運動性鼻炎的發(fā)作年齡發(fā)生在20歲之后?；加醒苓\動性鼻炎的個體典型地經(jīng)歷全年性癥狀，但是癥狀可能在快速天氣變化更普遍的春天和秋天惡化。估計有1700萬美國公民患有血管運動性鼻炎。抗組胺藥氮卓斯汀已經(jīng)顯示出對于過敏性的、混合性的和血管運動性鼻炎是有效的。

氣道高應答性(或與支氣管或高反應性的其他組合)是特征在于易于觸發(fā)的支氣管痙攣(細支氣管或小氣道的收縮)的一種狀態(tài)。氣道高應答性可以使用支氣管激發(fā)試驗來評價。這最經(jīng)常使用像乙酰甲膽堿或組胺的產(chǎn)品。這些化學物也在正常個體中觸發(fā)支氣管痙攣，但是患有支氣管高應答性的人具有更低的閾值。支氣管高應答性是哮喘的標志，但是也時常發(fā)生在患有慢性阻塞性肺病(copd)的人中。

囊性纖維化(也被稱為cf)是可以由本發(fā)明的方法治療的病狀的另一個實例，它是影響整個身體的常見疾病，其導致漸進性失能并且經(jīng)常導致早期死亡。名稱囊性纖維化是指胰腺內(nèi)的特征性瘢痕(纖維化)和囊腫形成。呼吸困難是最嚴重的癥狀并且由通過抗生素和其他藥品治療但未治愈的肺部感染產(chǎn)生。眾多其他癥狀，包括竇感染、生長緩慢、腹瀉以及不育，由cf對身體其他部分的影響產(chǎn)生。cf由囊性纖維化跨膜傳導調(diào)節(jié)蛋白(cftr)的基因突變導致，并且被認為是常染色體隱性疾病。

肺纖維化是肺中的過量纖維結締組織的形成或發(fā)展(纖維化)。它可以被描述為“肺的瘢痕化”。肺纖維化涉及正常肺實質(zhì)與纖維組織的逐步替換。瘢痕組織的增厚導致氧擴散容量的不可逆降低。此外，順應性降低使得肺纖維化成為限制性肺疾病。該順應性降低是肺實質(zhì)固有的限制性肺疾病的主要病因。

一些實施例涉及根據(jù)本發(fā)明的、具體地用于治療呼吸道疾病的方法。根據(jù)一個實施例，此類組合物可以特別適于通過口服或鼻吸入進行的肺部遞送。更確切地，肺部遞送可能需要使用液體霧化器、基于氣溶膠的定量吸入器(mdi)或干粉分散裝置。

在另外的實施例中，本發(fā)明提供了一種治療或預防哺乳動物受試者中的由任何病原體、確切地細菌性病原體、病毒性病原體或寄生蟲中的至少一種導致的感染性疾病或病狀。更確切地，該方法包括向有需要的受試者給予有效量的本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物或其任何組合物的步驟。

如在此所使用的“感染”是致病因子對生物體組織的入侵、這些致病因子的擴增以及宿主組織對這些生物和它們產(chǎn)生的毒素的反應。感染性疾病，也被稱為傳染性疾病或可傳播疾病，是由感染產(chǎn)生的疾病。應當理解，在此所使用的感染性疾病還涵蓋由病原體導致的任何感染性疾病。病原體包括細菌、病毒、原核微生物、低等真核微生物、復雜真核生物、朊病毒、寄生蟲、酵母、線蟲諸如寄生蛔蟲和蟯蟲、節(jié)肢動物諸如蜱、螨、跳蚤和虱子、真菌諸如癬、以及其他大寄生蟲諸如絳蟲和其他腸蟲。

原核微生物包括如下文詳細描述的細菌，例如革蘭氏陽性細菌、革蘭氏陰性細菌、革蘭氏染色不定細菌、抗酸性生物以及細胞內(nèi)細菌。

低等真核生物包括酵母或真菌，諸如但不限于卡氏肺囊蟲(pneumocystiscarinii)、白色念珠菌(candidaalbicans)、曲霉屬(aspergillus)、莢膜組織胞漿菌(histoplasmacapsulatum)、皮炎芽生菌(blastomycesdermatitidis)、新型隱球菌(cryptococcusneoformans)cryptococcusneoformans)、毛癬菌屬(trichophyton)以及小孢子菌屬(microsporum)。

復雜真核生物包括蠕蟲、昆蟲、蛛形綱動物、線蟲、aemobe、溶組織內(nèi)阿米巴(entamoebahistolytica)、蘭伯氏賈第蟲(giardialamblia)、陰道毛滴蟲(trichomonasvaginalis)、岡比亞布氏錐蟲(trypanosomabruceigambiense)、克氏錐蟲(trypanosomacruzi)、結腸小袋纖毛蟲(balantidiumcoli)、剛地弓形蟲(toxoplasmagondii)、隱孢子蟲(cryptosporidium)或利什曼原蟲(leishmania)。

術語“病毒”以其最廣泛的意義被用于包括以下家族的病毒：腺病毒、乳多空病毒、皰疹病毒(單純性、水痘帶狀、艾巴氏病毒(epstein-barr)、cmv)、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、甲型流感病毒和乙型流感病毒、痘病毒：天花、牛痘、鼻病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、風疹病毒、蟲媒病毒、狂犬病病毒、黃病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、hiv、htlvi和htlvii。

術語“真菌”包括例如導致以下疾病的真菌：諸如癬菌病、組織胞漿菌病、芽生菌病、曲霉菌病、隱球菌病、孢子絲菌病、球孢子菌病、副球孢子菌病以及念珠菌病。

術語“寄生蟲”包括但不限于由以下各項導致的感染：體細胞絳蟲、血吸蟲、組織蛔蟲、阿米巴(ameba)以及瘧原蟲(plasmodium)、錐蟲(trypanosoma)、利什曼原蟲和弓形蟲物種。

應當注意，諾卡胺素與至少一種金屬的絡合物可以螯合不穩(wěn)定性鐵和/或銅，降低用于微生物的合成和增殖目的的不穩(wěn)定性鐵的可用性，從而抑制致病微生物的生長并且減弱感染/炎癥的程度。

因此，在一些實施例中，本發(fā)明提供了用于治療由細菌性病原體導致的感染性疾病的方法。

在一些具體實施例中，細菌性病原體可以是腸致病性大腸桿菌(epec)、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌中的至少一種。

細菌性感染是炎癥相關病癥的實例。本發(fā)明進一步提供了用于使用本發(fā)明的絡合物或其任何組合以及其藥物組合物來預防、治療、改善或抑制細菌性感染的方法。如圖8和圖9所呈現(xiàn)，鋅-諾卡胺素的抗菌作用在以下類型的致病細菌上展示出：大腸桿菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌。更確切地，對大腸桿菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌的生長抑制通過本發(fā)明的絡合物的殺菌活性(對細菌生存力的抑制)來證實。

更確切地，術語“細菌性感染”涉及由細菌導致的感染。術語“細菌(bacteria)”(單數(shù)為“細菌(bacterium)”)在這個背景下是指單細胞微生物的任何類型。此術語在此涵蓋根據(jù)其基本形狀而屬于一般分類的細菌，即球形(球菌)、桿狀(桿菌)、螺旋狀(螺旋菌)、逗點狀(弧菌)或螺旋體狀(螺旋體)；以及作為單個細胞以對、鏈或簇存在的細菌。

在更具體的實施例中，術語“細菌”確切地是指革蘭氏陽性細菌、革蘭氏陰性細菌或抗酸性生物。革蘭氏陽性細菌可以被識別為保留了在細菌鑒別的革蘭氏染色法中使用的結晶紫染色，并且因此在顯微鏡下看起來是紫色的。革蘭氏陰性細菌不保留結晶紫，從而使得陽性鑒定是可能的。換言之，術語‘細菌’在此適用于在細胞膜外側的細胞壁中具有較厚的肽聚糖層的細菌(革蘭氏陽性)，并且適用于其細胞壁中具有夾在內(nèi)部細胞質(zhì)細胞膜與細菌外膜之間的薄肽聚糖層的細菌(革蘭氏陰性)。

本發(fā)明進一步涉及鋅-諾卡胺素絡合物的生物活性：它充當抗炎劑、抑菌和/或殺菌劑以及不穩(wěn)定性和氧化還原活性鐵的強螯合劑。

在一些實施例中，在此所考慮的細菌的實例包括以下屬的種類：密螺旋體屬(treponemasp.)、包柔氏螺旋體屬(borreliasp.)、奈瑟氏菌屬(neisseriasp.)、軍團桿菌屬(legionellasp.)、博代氏菌屬(bordetellasp.)、埃希氏菌屬(escherichiasp.)、沙門氏菌屬(salmonellasp.)、志賀氏菌屬(shigellasp.)、克雷白氏桿菌屬(klebsiellasp.)、耶爾森氏菌屬(yersiniasp.)、弧菌屬(vibriosp.)、嗜血桿菌屬(hemophilussp.)、立克次體屬(rickettsiasp.)、衣原體屬(chlamydiasp.)、支原體屬(mycoplasmasp.)、葡萄球菌屬(staphylococcussp.)、鏈球菌屬(streptococcussp.)、芽孢桿菌屬(bacillussp.)、梭狀芽孢桿菌屬(clostridiumsp.)、棒狀桿菌屬(corynebacteriumsp.)、丙酸桿菌屬(proprionibacteriumsp.)、分枝桿菌屬(mycobacteriumsp.)、脲原體屬(ureaplasmasp.)以及李斯特菌屬(listeriasp.)。在又一些更具體的實施例中，在本發(fā)明的上下文中的細菌性病原體可以包括但不限于腸致病性大腸桿菌(epec)、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、釀膿鏈球菌(streptococcuspyogenes)、艱難梭菌(clostidiumdifficile)、屎腸球菌(enterococcusfaecium)、克雷白氏肺炎桿菌(klebsiellapneumonia)、鮑曼不動桿菌(acinetobacterbaumanni)和腸桿菌種屬(enterobacterspecies)、結核分枝桿菌(mycobacterumtuberculosis)、糞產(chǎn)堿菌(alcaligenesfaecalis)、腦膜炎奈瑟氏菌(neisseriameningitis)、中間普雷沃菌(prevotellaintermedia)、牙齦卟啉單胞菌(porphyromonasgingivalis)、沙門氏菌、志賀氏菌、變形桿菌(proteus)、普羅維登斯菌(enterobacter)以及摩根氏菌(morganella)的種屬。

因此，本發(fā)明的組合物表現(xiàn)出實質(zhì)性的抗菌作用，這使其適用于治療感染介導的病癥。還應當理解，本發(fā)明的金屬-dfoe絡合物或本發(fā)明的任何組合物的有益抗菌作用可以通過其與其他已知的抗菌劑的組合來增強。

在又一些另外的實施例中，本發(fā)明的方法可以特別適用于治療和/或預防由病毒性病原體導致的感染性疾病，該病毒性病原體確切地是以下中的至少一種：皰疹病毒(單純性、水痘帶狀)、甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、甲型流感病毒和乙型流感病毒、腺病毒、乳多空病毒、艾巴氏病毒、cmv、痘病毒：天花、牛痘、乙型肝炎、鼻病毒、脊髓灰質(zhì)炎病毒、風疹病毒、蟲媒病毒、狂犬病病毒、黃病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、hiv、htlvi以及htlvii。

在又一些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療有需要的受試者中的增殖性病癥。在一些具體實施例中，本發(fā)明的方法可以包括向受試者給予治療有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物，或如由本發(fā)明所披露的任何藥物組合物、包含它們的載體、基質(zhì)或媒介物。應當進一步理解，本發(fā)明的方法可以是與增殖性病癥特別相關的，這些增殖性病癥是與促炎細胞因子升高和抗炎細胞因子水平的降低中的至少一者相關聯(lián)的惡性腫瘤。

術語“增殖性病癥”意指并非整個生物的正常細胞更新、代謝、生長或繁殖的部分的細胞分裂和生長。不想要的細胞增殖見于腫瘤和細胞的其他病理增殖中，其不發(fā)揮正常功能，并且對于大部分在不存在外部干預的情況下以超過正常組織細胞的生長速率繼續(xù)無約束生長。由于不想要的細胞增殖而接著發(fā)生的病理狀態(tài)在此是指“過度增殖性疾病”或“過度增殖性病癥”。應當注意，術語“增殖性病癥”、“癌癥”、“腫瘤”以及“惡性腫瘤”均等同地涉及組織或器官的增生。總體上，本發(fā)明的組合物和方法可以用于治療非實體或?qū)嶓w腫瘤。

此外，如在本發(fā)明中所考慮的惡性腫瘤可以是癌、黑色素瘤、淋巴瘤、白血病、骨髓瘤以及肉瘤中的任一種。

如在此所使用的癌是指由轉化的上皮細胞組成的侵入性惡性腫瘤?？商娲兀侵赣晌粗慕M織發(fā)生的轉化細胞組成的惡性腫瘤，但是其具有與上皮細胞相關聯(lián)的特異性分子或組織學特征，諸如產(chǎn)生細胞角蛋白或細胞間橋。

如在此所使用的黑色素瘤是黑素細胞的惡性腫瘤。黑素細胞是產(chǎn)生黑色色素即黑色素的細胞，該黑色素負責皮膚顏色。它們主要發(fā)生在皮膚中，但是也發(fā)現(xiàn)于身體的其他部分中，包括腸和眼睛。黑色素瘤可以發(fā)生在含有黑色素的任何身體部分中。

白血病是指血液形成器官的漸進性、惡性疾病，并且總體上其特征在于白細胞和其前體在血液和骨髓中的失調(diào)增殖和發(fā)展。白血病通常在臨床上基于以下各項進行分類：(1)疾病的持續(xù)時間和特征-急性的或慢性的；(2)所涉及的細胞的類型；脊髓的(骨髓性的)、淋巴的(淋巴性的)或單核細胞的；以及(3)異常細胞在血液中的數(shù)量的增加或非增加-白血病的或非白血性的(亞白血病的)。

肉瘤是產(chǎn)生自轉化的結締組織細胞的癌癥。這些細胞源自中胚層或中層，該中胚層或中層形成骨、軟骨以及脂肪組織。這與癌相反，其起源于上皮中。上皮沿整個身體的結構表面排列，并且是乳房、結腸和胰腺中的癌癥的起源。

如在此所提及的骨髓瘤是漿細胞的癌癥，這些漿細胞是白細胞的一種類型，通常是負責產(chǎn)生抗體的。異常細胞的集合體在骨和在骨髓中累積，在骨中它們導致骨病變，在骨髓中它們干擾正常血細胞的產(chǎn)生。骨髓瘤的大多數(shù)病例的特征還在于產(chǎn)生副蛋白，該副蛋白是可以導致腎問題并且干擾正?？贵w的產(chǎn)生，從而造成免疫缺陷的一種異?？贵w。高血鈣(高鈣水平)是經(jīng)常遇到的。

淋巴瘤是免疫系統(tǒng)的淋巴細胞中的癌癥。典型地，淋巴癌呈現(xiàn)為淋巴細胞的實體腫瘤。這些惡性腫瘤細胞經(jīng)常起源自淋巴結中，呈現(xiàn)為結的腫大(腫瘤)。它還可以影響其他器官，在該種情況下，它被稱為結外淋巴瘤。淋巴瘤的非限制性實例包括何杰金氏病(hodgkin'sdisease)、非何杰金氏淋巴瘤(non-hodgkin'slymphomas)和伯基特淋巴瘤(burkitt'slymphoma)。

可以用于本發(fā)明中的另外的惡性腫瘤包括但不限于惡性血液病(包括如上所述的淋巴瘤、白血病和骨髓增生性病癥)、再生不良性和再生障礙性貧血(由病毒誘導的和特發(fā)性的兩者)、骨髓增生異常綜合癥、所有類型的副腫瘤綜合征(免疫介導的和特發(fā)性的兩者)以及實體腫瘤(包括胃腸道、結腸、肺、肝臟、乳房、前列腺、胰腺以及卡波西氏肉瘤(kaposi'ssarcoma))。本發(fā)明還可以適用于治療或抑制實體腫瘤，諸如唇和口腔、咽、喉、副鼻竇、大唾液腺、甲狀腺、食管、胃、小腸、結腸、結腸直腸、肛管、肝臟、膽囊、肝外膽管、法特氏壺腹(肝胰管)、外分泌胰腺、肺、胸膜間皮瘤、骨中的腫瘤；軟組織肉瘤；皮膚、乳房、外陰、陰道、子宮頸、子宮體、卵巢、輸卵管的癌和惡性黑色素瘤；妊娠性滋養(yǎng)細胞腫瘤；陰莖、前列腺、睪丸、腎、腎盂、輸尿管、膀胱、尿道腫瘤；眼瞼癌；結膜癌；結膜惡性黑色素瘤；葡萄膜惡性黑色素瘤；視網(wǎng)膜母細胞瘤；淚腺癌；眼眶、大腦、脊髓、血管系統(tǒng)的肉瘤；血管肉瘤；以及卡波西氏肉瘤

在一些另外的實施例中，本發(fā)明提供了用于治療有需要的受試者中的神經(jīng)退行性病癥的方法，這些方法包括向所述受試者給予治療有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物或其任何組合，或包含它們的任何藥物組合物、載體、基質(zhì)或媒介物的步驟。在一些實施例中，神經(jīng)退行性病癥是特征在于神經(jīng)退行性過程的“神經(jīng)退行性疾病”組中的至少一種，并且包括以下各項中的至少一種：肌萎縮性側索硬化癥、帕金森病(parkinson's)、阿爾茨海默氏病(alzheimer's)以及亨廷頓氏病(huntington's)。此類疾病是不可治愈的，從而引起神經(jīng)元細胞的漸進性變性和/或死亡。

術語“神經(jīng)變性”是用于神經(jīng)元的結構或功能的漸進性喪失，從而導致其死亡的通用術語。神經(jīng)退行性疾病的最大風險因子是老化。線粒體dna突變以及氧化應激兩者均促成老化。這些疾病中的許多是晚發(fā)性的，意味著對于每種疾病，存在隨著人老化而改變的某一因素。一個恒定因素是在每種疾病中，在疾病隨著年齡進行時，神經(jīng)元逐漸喪失功能。

在又一些另外的實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療脊髓損傷和創(chuàng)傷。

脊髓損傷(sci)是對脊髓的導致其功能變化的傷害。損傷可以發(fā)生在脊髓的任何水平處，并且可以分類為完全損傷和不完全損傷，完全損傷是感覺和肌肉功能的全部喪失，不完全損傷意指一些神經(jīng)信號能夠行進通過脊髓的損傷區(qū)域。根據(jù)沿著脊髓的損傷的位置和嚴重性，癥狀可以廣泛地變化，從輕微諸如疼痛或麻木到嚴重，諸如麻痹和失禁。

脊髓損傷可以是創(chuàng)傷性的或非創(chuàng)傷性的，并且可以基于病因被分類為三種類型：機械力、毒性和缺血性(來自供血不足)。該損傷還可以被分為原發(fā)性和繼發(fā)性損傷：在原發(fā)性損傷中，細胞死亡在最初損傷時立即發(fā)生；在繼發(fā)性損傷中，通過最初損害啟動的生化級聯(lián)可以導致另外的組織損傷，包括缺血級聯(lián)的活化、炎癥、腫脹、細胞自殺以及神經(jīng)遞質(zhì)失調(diào)。它們可以在損傷之后發(fā)生數(shù)分鐘或數(shù)周。

通常該損傷由物理創(chuàng)傷諸如車禍、射擊、跌落或運動損傷產(chǎn)生，但是它也可以由其他原因諸如感染、血液流動不足或來自腫瘤的壓力產(chǎn)生。

非物理創(chuàng)傷性sci是在所有sci的從30％至80％的范圍內(nèi)。sci可以發(fā)生在感染、椎間盤病以及脊髓血管病中。自發(fā)性出血可能發(fā)生在沿脊髓排列的保護膜的內(nèi)部或外部，并且椎間盤可能突出。損傷可以由血管的機能障礙產(chǎn)生，如在動靜脈畸形的情況下，或者當血塊卡在血管中并且切斷對脊髓的供血時。當全身血壓下降時，向脊髓的血液流動可能減少，從而潛在地導致由受影響的脊髓水平供應的區(qū)域中的感覺和隨意運動的喪失。擠壓脊髓的先天性病狀和腫瘤也可以導致sci，如脊椎的椎關節(jié)強硬和缺血可以的那樣。多發(fā)性硬化癥是可以使脊髓受損的疾病，如感染性或炎性病狀諸如結核病、帶狀皰疹或單純性皰疹、腦膜炎、脊髓炎以及梅毒可以的那樣。在發(fā)達國家中，最普遍的非創(chuàng)傷性sci病因是退行性疾病，接著是腫瘤；在許多發(fā)展中國家中，主要病因是感染諸如hiv和結核病。

sci還根據(jù)受損的程度分類。脊髓損傷神經(jīng)學分類國際標準(isncsci)，由美國脊柱損傷協(xié)會(asia)發(fā)表，廣泛用于記錄sci之后的感覺和運動受損。它是基于神經(jīng)應答、在每個生皮節(jié)中測試的觸感和針刺感以及控制身體兩側的關鍵運動的肌肉強度。

預后的范圍廣泛，從完全康復到四肢的永久麻痹，其在頸部水平處的損傷中被稱為四肢癱瘓(tetraplegia)(也被稱為四肢癱瘓(quadriplegia))，并且在下部損傷中被稱為截癱(兩肢麻痹)。在損傷之后可以短期和長期發(fā)生的并發(fā)癥包括肌肉萎縮、壓瘡、感染以及呼吸道問題。

腫脹可以通過減少供血和導致缺血而產(chǎn)生對脊髓的另外的損傷，該缺血可以引起伴有使神經(jīng)元受損的毒素的釋放的缺血級聯(lián)。

應當進一步理解，本發(fā)明的方法可以適用于在此所述的任何脊髓損傷和任何相關的病狀或并發(fā)癥。

在另外的實施例中，本發(fā)明提供了用于治療有需要的受試者中的缺血性病癥的方法，這些方法包括向所述受試者給予治療有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物、其任何組合，或包含它們的任何藥物組合物、載體、基質(zhì)或媒介物的步驟，其中缺血性病癥是以下中的至少一種：心臟、大腦、手臂、腿部、骨盆以及腎中的動脈的動脈粥樣硬化。

術語“缺血”意指“供血減少”。如在此所使用的術語“缺血性病癥”是指缺血性血管病-特征在于在血管內(nèi)積累并且從而限制正常血液流動的被稱斑塊為蠟狀物質(zhì)的一類病癥。當斑塊在動脈中積累時，該病狀被稱為“動脈粥樣硬化”。動脈粥樣硬化可以影響身體中的任何動脈，包括心臟、大腦、手臂、腿部、骨盆以及腎中的動脈。因此，不同疾病可能基于所影響的動脈而發(fā)展。

“缺血性血管病”(ivd)是包括由斑塊的積累而導致的一類疾病的術語。以下是ivd的具體非限制性實例：

此外，在一些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于冠心病(chd)。冠心病是動脈粥樣硬化影響心臟中的冠狀動脈的疾病。如果向心肌的富氧血的流動被減少或阻斷，則可能分別發(fā)生心絞痛(疼痛)或心臟病發(fā)作。

在一些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于心臟病發(fā)作。如果向心肌的一部分的富氧血的流動被阻斷，則發(fā)生心臟病發(fā)作。如果血液流動不快速恢復，則該心肌部分開始死亡。在沒有快速治療的情況下，心臟病發(fā)作可能導致嚴重的問題并且甚至導致死亡。此外，在一些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于頸動脈病(cad)。如果斑塊在頸動脈的任一側的動脈中積累，則發(fā)生頸動脈病。這些動脈向大腦供給富氧血。因此，如果向大腦的血液流動被減少或阻斷，甚至持續(xù)幾分鐘，則缺氧可能導致腦細胞損傷或死亡，這被稱為中風。如果腦細胞由于中風死亡或受損，則癥狀發(fā)生在這些腦細胞所控制的身體部分中。中風癥狀的實例包括突然虛弱無力；面部、手臂或腿部的麻痹或麻木；說話或理解語言困難；以及視覺困難。

在又一些另外的實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于外周動脈病(pad)。pad是斑塊在腿部或手臂的動脈中積累的疾病。阻斷向腿部的血液流動可能導致疼痛和麻木。它還可以升高在受影響的肢體中獲得感染的風險。如果足夠嚴重，阻斷血液流動可能導致壞疽(組織死亡)。

如上所提及，所有類型的缺血性血管病是由動脈粥樣硬化導致的。動脈粥樣硬化可能在某些因素使動脈的內(nèi)層受損時開始。這些因素包括：吸煙、血液中大量的某些脂肪和膽固醇、由于胰島素抵抗性或糖尿病而造成的高血壓和血液中大量糖。

在一些另外的實施例中，本發(fā)明提供了用于治療有需要的受試者中的代謝性病癥的方法，這些方法包括向所述受試者給予治療有效量的諾卡胺素與至少一種金屬的至少一種絡合物、其任何組合，或它們的任何藥物組合物、載體、基質(zhì)或媒介物的步驟。在一些實施例中，本發(fā)明的方法可以是與代謝性病癥、確切地i型糖尿病、ii型糖尿病以及任何糖尿病相關病狀中的至少一種是特別相關的。

代謝是身體使用食物獲得或產(chǎn)生能量的過程。食物由蛋白質(zhì)、碳水化合物以及脂肪組成。消化系統(tǒng)中的化學物將食物部分分解成糖和酸，并且身體可以立即使用這些分解的產(chǎn)物，或者它可以將能量儲存在身體組織，諸如肝臟、肌肉以及身體脂肪中。

“代謝性病癥”在異?；瘜W反應擾亂此過程時發(fā)生。個體可以在一些器官，諸如肝臟或胰腺患病或不正常發(fā)揮功能時患上代謝性病癥。糖尿病是代謝性病癥的非限制性實例。糖尿病糖尿病(diabetesmellitus)(dm)通常被稱為糖尿病(diabetes)，它是在長時間內(nèi)具有高血糖水平的一類代謝性疾病。如果不進行治療，糖尿病可能導致許多并發(fā)癥。急性并發(fā)癥包括糖尿病性酮癥酸中毒和非酮性高滲性昏迷。嚴重的長期并發(fā)癥包括心血管疾病、中風、慢性腎衰竭、腿部潰瘍以及對眼睛的損傷。糖尿病是由于胰腺不產(chǎn)生足夠的胰島素(i型糖尿病)或缺乏身體細胞對所產(chǎn)生的胰島素的適當應答(ii型糖尿病)而造成的。

關于炎癥與2型糖尿病的病理之間的聯(lián)系有越來越多的證據(jù)。表明胰島素抵抗性和2型糖尿病可能具有免疫組分的此進展性概念為2型糖尿病的抗炎療法提供了新的途徑。因此，基于其抗炎作用，本發(fā)明的組合物以及方法可以用于治療和/或改善自身免疫病癥諸如糖尿病。

糖尿病是特征在于失調(diào)代謝和不適當?shù)母哐?高血糖癥)的一種綜合征，其由低水平的激素胰島素或由對胰島素作用的異常抵抗性加上用來補償?shù)囊葝u素分泌水平不足而產(chǎn)生。特征癥狀是產(chǎn)生過量尿液(多尿)、過度口渴和流體攝入增加(多飲)以及視力模糊；如果僅輕微地升高血糖，則這些癥狀可能不存在。

有三種糖尿病的主要形式：1型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病(發(fā)生在懷孕期間)。1型糖尿病的特征在于胰腺中的郎格罕氏島的胰島素產(chǎn)生β細胞的缺失，從而導致胰島素不足。此β細胞喪失的主要原因是t細胞介導的自身免疫攻擊。沒有已知可以針對1型糖尿病采取的預防性措施。大多數(shù)受感染的人在其他方面是健康的并且在發(fā)作發(fā)生時具有健康體重。對胰島素的敏感性和應答性通常是正常的，尤其是在早期階段。1型糖尿病可以影響兒童或成人，并且傳統(tǒng)上被稱為“幼年糖尿病”，因為它代表影響兒童的糖尿病的大部分病例。

在又另一個具體實施例中，本發(fā)明的組合物可以用于預防、治療、改善或抑制2型糖尿病。2型糖尿病或非胰島素依賴型糖尿病(niddm)或成人發(fā)作性糖尿病是特征在于在胰島素抵抗性和相對胰島素不足的情況下的高血糖的一種代謝性病癥。隨著病狀進行，可能需要藥品。來自高血糖的長期并發(fā)癥包括增加的心臟病發(fā)作風險、中風、截肢以及腎衰竭。有許多可能潛在地產(chǎn)生2型糖尿病或使其惡化的因素。這些因素包括肥胖癥、高血壓、高膽固醇(混合型高脂血癥)，以及通常被稱為代謝性綜合征(它還被稱為x綜合征、reavan氏綜合征或chaos)的病狀。其他病因包括肢端肥大癥、庫興綜合征(cushing'ssyndrome)、甲狀腺毒癥、嗜鉻細胞瘤、慢性胰腺炎、癌癥以及藥物。發(fā)現(xiàn)增加2型糖尿病的風險的另外的因素包括老化、高脂肪飲食以及缺乏運動的生活方式。

胰島素抵抗性意指在胰島素存在時，身體細胞未適當?shù)刈鞒鰬?。與1型糖尿病不同，胰島素抵抗性總體上是“受體后”，這意味它是關于對胰島素作出應答的細胞的問題而不是關于胰島素產(chǎn)生的問題。嚴重的并發(fā)癥可以由管理不適當?shù)?型糖尿病產(chǎn)生，包括腎衰竭、勃起機能障礙、失明、傷口(包括外科手術切口)愈合緩慢以及動脈病包括冠狀動脈病。2型的發(fā)作在中年和晚期生命中最普遍，但是由于兒童肥胖癥和不活動性的增加，它更時常地見于少年和青年中。

應當進一步理解，本發(fā)明的方法、試劑盒和絡合物可以適用于治療糖尿病相關病狀。應當理解，可互換使用的術語“相關聯(lián)的”和“相關的”在此涉及病理時意指疾病、病癥、病狀或任何病理，其中至少一種共有因果關系、以比巧合頻率更高的頻率共同存在，或者其中至少一種疾病、病癥、病狀或病理導致第二疾病、病癥、病狀或病理。此類病狀可以包括例如眼睛相關的并發(fā)癥(白內(nèi)障、青光眼、視網(wǎng)膜病變)、神經(jīng)病變、腎病、心肌病、中風、高血壓、外周動脈病以及瘡和任何潰瘍、慢性潰瘍或任何緩慢愈合的潰瘍或與糖尿病病狀相關聯(lián)的皮膚或器官損傷。根據(jù)本發(fā)明，所治療或預防的不希望的副作用優(yōu)選地是與眼睛和/或視力相關的不希望的副作用諸如白內(nèi)障。

還可以為了患有糖尿病相關或相關聯(lián)的疾病或病癥的受試者而利用本發(fā)明的治療方法和用途，這些疾病或病癥包括高胰島素血癥、血脂障礙、高膽固醇血癥、葡萄糖耐量減低、高血壓、心血管疾病、糖尿病心肌病、糖尿病心律失常(diabeticcardiacdysrhytmia)、動脈粥樣硬化、糖尿病腎病、腎小球腎炎、腎小球硬化、腎病綜合征、高血壓性腎硬化、末期腎臟疾病、微量蛋白尿以及蛋白尿。

如在此所使用的血胰島素過多癥(hyperinsulinemia)或高胰島素血癥(hyperinsulinaemia)是血液中具有過量水平的循環(huán)胰島素的一種病狀。也被稱為前期糖尿病、胰島素抵抗性和x綜合征，它常見地與女性中的pcos(多囊卵巢綜合征)相關聯(lián)。血胰島素過多癥經(jīng)常被誤認為是糖尿病或低血糖，而其中的兩者均是單獨的病狀。如果未被監(jiān)測和未被治療，血胰島素過多癥可能發(fā)展成糖尿病，并且可能在糖尿病發(fā)生時仍然存在。如普遍地認為的，血胰島素過多癥不是由糖尿病導致的。血胰島素過多癥可以在一些患者中導致低血糖。

如在此所使用的血脂障礙是對血液中脂質(zhì)的量的擾亂。在發(fā)達國家的社會中，大多數(shù)血脂障礙是高脂血癥；即，經(jīng)常由于飲食和生活方式而造成的血液中脂質(zhì)升高。長期的胰島素水平升高可以導致血脂障礙。已知o-glcnac轉移酶(ogt)水平增加導致血脂障礙。

葡萄糖耐量減低(igt)是與胰島素抵抗性和心血管病理風險增加相關聯(lián)的血糖代謝障礙的一種前期糖尿病狀態(tài)。igt可以早于ii型糖尿病許多年。

如在此所使用的高血壓(htn)或血壓過高是動脈中的血壓升高的一種慢性醫(yī)學病狀。它與低血壓是相對的。它被分類為原發(fā)性(主要的)或繼發(fā)性。約90％-95％的病例被稱為“原發(fā)性高血壓”，其是指不能找到醫(yī)學病因的高血壓。剩余的5％-10％的病例(繼發(fā)性高血壓)是由影響腎、動脈、心臟或內(nèi)分泌系統(tǒng)的其他病狀導致的。持續(xù)性高血壓是中風、心臟病發(fā)作、心力衰竭以及動脈瘤的風險因子之一，并且是慢性腎衰竭的主要病因。

如在此所使用的心肌病是心肌功能的衰退，例如在冠狀動脈粥樣硬化和高血壓不存在的情況下，心室機能障礙在患有糖尿病的患者中出現(xiàn)時所診斷的臨床或亞臨床病狀。它在功能上的特征在于在舒張機能障礙存在的情況下的心室擴張、肌細胞肥大、間質(zhì)纖維化以及降低的或保留的收縮功能。

動脈粥樣硬化(也被稱為動脈硬化性血管病或asvd)是由于脂肪材料諸如膽固醇的積累而導致動脈壁增厚的一種病狀。它是影響動脈血管的綜合征，在動脈壁中的一種慢性炎癥應答，其主要是由于巨噬細胞型白細胞的累積而造成的，并且在沒有通過功能性高密度脂蛋白(hdl)將來自巨噬細胞的脂肪和膽固醇的充分移除的情況下被低密度脂蛋白(帶走膽固醇和甘油三酸酯的血漿蛋白)促進。它通常被稱為動脈的硬化或生垢(furring)。它是由動脈內(nèi)多個斑塊的形成導致的。

糖尿病腎病(腎病糖尿病)，也被稱為金-威綜合征(kimmelstiel-wilsonsyndrome)或結節(jié)性糖尿病腎小球硬化和毛細管間腎小球腎炎，是由腎小球中毛細管的血管病導致的一種漸進性腎臟疾病。它的特征在于腎病綜合征和彌漫性腎小球硬化。它是由于長期存在的糖尿病造成的，并且在許多西方國家中是透析的主要適應癥。

腎小球腎炎，也被稱為腎小球性腎炎(gn)，是特征在于腎臟中的腎小球或小血管的炎癥的一種腎疾病。它可能與單獨的血尿和/或蛋白尿(血液和/或蛋白存在于尿液中)一起呈現(xiàn)；或者以腎病綜合征、腎炎綜合征、急性腎衰竭或慢性腎衰竭形式呈現(xiàn)。它們被歸類為若干種不同的病理模式，這些病理模式被寬泛地分組到非增殖性類型或增殖性類型中。原發(fā)性病因是腎所固有的病因，而繼發(fā)性病因與某些感染(細菌性、病毒性或寄生性病原體)、藥物、全身病癥(sle、血管炎)或糖尿病相關聯(lián)。

腎小球硬化是指腎臟中的腎小球的硬化。它是描述腎小球的瘢痕化的通用術語。蛋白尿(大量蛋白質(zhì)在尿液中)是腎小球硬化的體征之一。糖尿病是腎小球硬化的常見病因。

腎病綜合征是一種非特異性病癥，其中腎受損，使得其將大量蛋白質(zhì)(至少3.5克蛋白尿/天/1.73m²體表面積)從血液泄漏到尿液中。

受腎病綜合征影響的腎臟在足細胞中具有小孔，這些小孔足夠大而允許蛋白尿(并且因此允許低白蛋白血，因為一些蛋白質(zhì)白蛋白從血液進入到尿液)，但是并不足夠大而允許細胞通過(因此沒有血尿)。相比之下，在腎炎綜合征中，rbc穿過孔，從而導致血尿。糖尿病經(jīng)常是腎病綜合征的基礎病因。

高血壓性腎病或高血壓性腎硬化或腎性高血壓病是關于由于慢性血壓過高而產(chǎn)生對腎的損傷的一種醫(yī)學病狀。在腎臟中，由于良性高動脈壓，透明素(粉色的、無定形的均質(zhì)物質(zhì))在小動脈和細動脈的壁中累積，從而產(chǎn)生其壁的增厚和管腔的變窄-透明性小動脈硬化。隨之發(fā)生的缺血產(chǎn)生小管萎縮、間質(zhì)纖維化、腎小球改變(具有不同程度的透明化的更小的腎小球-從輕微到腎小球硬化)以及腎小球周圍纖維化。在晚期階段，腎衰竭發(fā)生。功能性腎單位具有擴張的小管，經(jīng)常在管腔中具有透明管型。經(jīng)常與高血壓性腎病相關聯(lián)的另外的并發(fā)癥包括引起蛋白尿和血尿的腎小球損傷。

末期腎疾病是慢性腎臟疾病(ckd)的晚期階段，也被稱為慢性腎疾病。ckd表現(xiàn)為經(jīng)數(shù)月或數(shù)年的時間段的腎臟功能的漸進性喪失。惡化的腎功能的癥狀不是特定的，并且可能包括總體上感覺不好并且經(jīng)歷食欲降低。最近的專業(yè)準則以五個階段對慢性腎臟疾病的嚴重性進行分類，其中階段1是最輕微的并且通常導致很少癥狀，并且階段5是嚴重的疾病，如果不進行治療則具有較短的期望壽命。階段5ckd也被稱為建立的慢性腎臟疾病，并且與現(xiàn)在更新的術語末期腎疾病(esrd)、慢性腎臟衰竭(ckf)或慢性腎衰(crf)是同義的。

如上所指出的，本發(fā)明的方法可以用于治療任何免疫相關病癥。應當注意，“免疫相關病癥”是一種下述病狀，該病狀通過對免疫系統(tǒng)的活化或抑制而與受試者的免疫系統(tǒng)相關聯(lián)，或可以通過靶向受試者的免疫應答諸如適應性或先天性免疫應答的某一組分來治療、預防或診斷。這樣的病癥可以是炎性疾病或自身免疫性疾病中的任一種。

根據(jù)一個具體實施例，本發(fā)明的方法可以特別適于治療炎性疾病或炎性相關病狀。術語“炎性疾病”或“炎性相關病狀”是指可以從至少一種炎性參數(shù)，例如炎性細胞因子ifn-γ和il-2的誘導的降低獲益的任何疾病或病理學上的病狀。該病狀可以(原發(fā)性地)由炎癥導致，或者炎癥可以是由另一種生理原因?qū)е碌募膊〉谋憩F(xiàn)中的一種。

可以通過本發(fā)明的方法和試劑盒治療的其他免疫相關病癥的實例包括但不限于潰瘍性結腸炎、克羅恩病、腸易激疾病(ibd)、斑禿、紅斑狼瘡、強直性脊柱炎、美尼爾病(meniere'sdisease)、抗磷脂綜合征、混合性結締組織病、自身免疫性阿狄森病(autoimmuneaddison'sdisease)、多發(fā)性硬化癥、自身免疫性溶血性貧血、重癥肌無力、自身免疫性肝炎、尋常性天皰瘡、貝切特氏病(behcet'sdisease)、惡性貧血、大皰性類天皰瘡、結節(jié)性多關節(jié)炎、心肌病、多軟骨炎、皰疹樣皮炎、多腺性綜合征、慢性疲乏綜合癥(cfids)、風濕性多肌痛、慢性炎性脫髓鞘、多發(fā)性肌炎和皮肌炎、慢性炎性多神經(jīng)病變、原發(fā)性無丙種球蛋白血癥、丘-施二氏血管炎(churg-strausssyndrome)、原發(fā)性膽汁性肝硬化、瘢痕性類天皰瘡、銀屑病、crest綜合征、雷諾氏現(xiàn)象、冷凝集素病、萊特爾氏綜合征、風濕熱、盤狀狼瘡、類風濕關節(jié)炎、原發(fā)性混合型冷球蛋白血癥、結節(jié)病、纖維肌痛、硬皮病、格雷夫斯氏病(grave'sdisease)、修格蘭氏綜合征(sjogren'ssyndrome)、格林-巴利綜合征(guillainbarredisease)、僵人綜合征、橋本氏甲狀腺炎(hashimoto'sthyroiditis)、大動脈炎(takayasuarteritis)、特發(fā)性肺纖維化、顳動脈炎/巨細胞動脈炎、特發(fā)性血小板減少性紫癜(itp)、iga腎病、葡萄膜炎、血管炎、扁平苔癬以及白癜風。在此所述的金屬-諾卡胺素絡合物可以被給予至受試者以治療或預防與與以上疾病相關聯(lián)的異常的或不想要的免疫應答相關聯(lián)的病癥。

本發(fā)明進一步涵蓋本發(fā)明的組合物用于治療與以上所述的病癥相關的任何病狀的用途。應當理解，可互換使用的術語“相關聯(lián)的”和“相關的”在此涉及病理時，意指疾病、病癥、病狀或任何病理，其中至少一種共有因果關系、以比巧合頻率更高的頻率共同存在，或者其中至少一種疾病、病癥、病狀或病理導致第二疾病、病癥、病狀或病理。

此外，應當理解，對于本發(fā)明的這些絡合物存在大量潛在的臨床應用，包括但不限于治療肌萎縮性側索硬化癥、與年齡相關的黃斑變性、白內(nèi)障、敗血癥、傷口愈合、由于暴露于化學試劑、熱或冷而產(chǎn)生的損傷、缺血和再灌注損傷、中風、電離輻射損傷、與地中海貧血和血色素沉著癥相關聯(lián)的損傷以及威爾遜病(wilsondisease)。

此外，應當注意，在某些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療與il-1α水平的升高相關聯(lián)的任何病癥。此類病癥的實例包括但不限于以下中的任一種：敗血癥、類風濕關節(jié)炎、克羅恩病、炎癥性腸病、心肌梗塞、冠狀動脈病、動脈粥樣硬化、炎性心肌病、心臟肥大、骨關節(jié)炎、caps、施尼茨勒氏綜合征、強直性脊柱炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、家族性地中海熱、全身發(fā)作幼年特發(fā)性關節(jié)炎、穆-韋綜合征(muckle-wellssyndrome)、痛風、假痛風、2型糖尿病、銀屑病關節(jié)炎、銀屑病、反合成酶綜合征、膝前十字韌帶撕裂、復發(fā)性多軟骨炎、手部血色素沉著癥相關關節(jié)炎、慢性復發(fā)性多病灶性骨髓炎、手部侵蝕性骨關節(jié)炎、心力衰竭、糖尿病誘導的心肌病、郁積型骨髓瘤、巨細胞動脈炎、干眼病、代謝綜合征、化膿性汗腺炎、痤瘡、貝切特氏病(behcett'sdisease)、布勞綜合征(blausyndrome)/肉芽腫性關節(jié)炎、甲羥戊酸激酶缺乏癥、馬吉德綜合征(majeedsyndrome)、過敏性紫癜、特發(fā)性復發(fā)性心包炎、巨噬細胞活化綜合征、斯威特氏綜合征(sweet’ssyndrome)/嗜中性粒細胞皮膚病、嗜中性粒細胞性脂膜炎、埃德海姆-切斯特(erdheim–chester)/組織細胞增多癥、多中心卡斯爾曼氏病(multicentriccastlemandisease)、耶斯納-卡諾夫病(jessner–kanofdisease)、川崎氏病(kawasakidisease)、慢性肉芽腫性疾病中的結腸炎、papa綜合征、sapho綜合征、肝細胞癌、胰腺導管腺癌、纖維肉瘤、1型糖尿病、中風、急性腦損傷、阿爾茨海默氏病、結腸直腸癌、乳腺癌、黑色素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、前列腺癌、宮頸癌、肺癌以及膀胱癌、佩吉特氏病(paget'sdisease)、腫瘤壞死因子相關性周期性綜合征。

在其他實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療與tnf-α水平的升高相關聯(lián)的任何病癥。非限制性實例包括感染性休克、炎癥性腸病、潰瘍性結腸炎、幼年特發(fā)性關節(jié)炎、大動脈炎、病理性角膜血管生成和淋巴管生成、結節(jié)病、淀粉樣變性、術后認知機能障礙、卵巢癌、中風、類風濕關節(jié)炎、強直性脊柱炎、克羅恩病、炎癥性腸病、銀屑病、銀屑病關節(jié)炎、小兒克羅恩病、小兒潰瘍性結腸炎、結腸直腸癌、特發(fā)性肺纖維化、囊性纖維化、色素性視網(wǎng)膜炎、胰腺癌、佩吉特氏病、腫瘤壞死因子相關性周期性綜合征。

此外，應當注意，在某些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療與il-6水平的升高相關聯(lián)的任何病癥。此類病癥包括類風濕關節(jié)炎、克羅恩病、炎癥性腸炎、潰瘍性結腸炎、齒根骨膜炎、肺炎、特發(fā)性肺纖維化、抑郁癥、結腸直腸癌、葡萄膜炎、卡斯爾氏曼氏病、全身性幼年特發(fā)性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性硬化病、多發(fā)性肌炎、血管炎綜合征、脊柱關節(jié)炎、復發(fā)性多軟骨炎、獲得性a型血友病、自身免疫溶血性貧血、成人發(fā)作斯蒂爾氏病(adult-onsetstill'sdisease)、淀粉樣蛋白a淀粉樣變性、風濕性多肌痛、緩解性血清陰性對稱性滑膜炎伴凹陷水腫、貝切特氏病、植物抗宿主疾病、腫瘤壞死因子相關性周期性綜合征、肺動脈高血壓、特異性皮炎、坐骨神經(jīng)痛、復發(fā)性多軟骨炎、2型糖尿病、肥胖癥、格雷夫斯氏眼病(grave'sophthalmopathy)、類風濕關節(jié)炎中的心血管疾病、巨細胞動脈炎、非st升高的心肌梗塞、精神分裂癥、卵巢癌、骨纖維性結構不良、原發(fā)性修格蘭氏綜合征、強直性脊柱炎、埃德海姆切斯特病、anca-相關性脈管炎、視神經(jīng)脊髓炎、慢性腎小球腎炎、大動脈炎、前列腺癌、腎細胞癌、多發(fā)性骨髓瘤、淋巴瘤、細胞因子釋放綜合征、李氏桿菌病、哮喘、copd、銀屑病、多發(fā)性硬化癥、骨關節(jié)炎、敗血癥、間質(zhì)性肺病、眼內(nèi)炎癥、子宮內(nèi)膜異位、阿耳茨海默氏病、腦外傷、乳腺癌、胰腺癌、aids相關病理、皮膚和系統(tǒng)性漿細胞病、胃癌、宮頸癌、黑色素瘤、肝細胞癌、白血病、成神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤、子宮癌(uteralcarcinoma)、囊性纖維化病、口腔癌、佩吉特氏病。

在某些實施例中，本發(fā)明的方法可以適用于治療與il-17水平的升高相關聯(lián)的任何病癥。此類病癥的實例可以包括炎癥性腸病、克羅恩病、潰瘍性結腸炎、銀屑病、類風濕關節(jié)炎、銀屑病關節(jié)炎、強直性脊柱炎、多發(fā)性硬化癥、哮喘、結腸直腸癌、肺癌、肝細胞癌、肝纖維化、食管鱗狀細胞癌、成神經(jīng)膠質(zhì)細胞瘤、卵巢癌、乳腺癌、黑色素瘤、胃癌、頭頸癌、鼻咽癌、copd、sapho綜合征、肺纖維化、心臟纖維化、腎纖維化、佩吉特氏病、骨肉瘤、胃潰瘍、膀胱癌、全身性幼年特發(fā)性關節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、氣道嗜中性白血球增多、囊性纖維化、過敏性鼻炎、斑禿、特異性皮炎、皮膚t淋巴細胞瘤、肥大細胞增生癥。

如在此所使用，術語“方法”是指用于完成給定任務的方式、手段、技術以及程序，包括但不限于化學、藥理學、生物學、生物化學以及醫(yī)學領域的從業(yè)者已知的或容易由已知方式、手段、技術以及程序來開發(fā)的那些方式、手段、技術以及程序。

如在此所使用，“疾病”、“病癥”、“病狀”等在它們涉及受試者的健康時，可互換使用并且具有歸于此類術語中的每一個和所有的意義。

如在此所使用的術語“治療”是指給予治療有效量的本發(fā)明的組合物，該治療有效量有效于地改善與疾病相關聯(lián)的不希望的癥狀、在此類癥狀發(fā)生之前預防其表現(xiàn)、減慢該疾病的進展、減慢癥狀的惡化、增強緩解期的起效、減慢在疾病的漸進性慢性階段中導致的不可逆損傷、延遲所述漸進性階段的開始、減輕嚴重性或治愈疾病、提高存活率或使得更快地恢復、或防止疾病發(fā)生或以上各項中的兩個或更多個的組合。

用于在此所披露的目的的“有效量”通過可以在本領域中已知的此類考慮確定。該量必須有效地實現(xiàn)如上所述的希望的治療性作用，尤其取決于有待治療的疾病的類型和嚴重性以及治療方案。有效量典型地在適當設計的臨床試驗(劑量范圍研究)中確定，并且精通于本領域的個人將知道如何適當?shù)貙嵤┐祟愒囼瀬泶_定有效量。如通常已知的，有效量取決于各種因素包括在身體內(nèi)的分布概況、各種藥理參數(shù)諸如在身體中的半衰期、不希望的副作用(如果有的話)、諸如年齡和性別的因素，等等。

更確切地，可以給予含有本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物的組合物或其任何組合、混合物或雞尾酒式混合物(cocktail)以用于預防性和/或治療性治療。在治療性應用中，以足以治愈或至少部分地抑制病狀及其并發(fā)癥的量向受炎癥或免疫相關病癥、或確切地與促炎細胞因子水平的升高和抗炎細胞因子水平的降低中的至少一者相關聯(lián)的病癥影響的患者給予組合物。足夠?qū)崿F(xiàn)此目的的量被定義為“治療有效劑量”。用于此用途的有效量取決于病狀的嚴重性和患者自身的免疫系統(tǒng)的總體狀態(tài)，但是其通常是在從約0.01至約10,000mg/kg的范圍內(nèi)，確切地是約0.01至約1000、500、250、100、90、80、70、60、50、40、30、20、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1、0.1mg/kg。應當注意，在某些實施例中，有效量可以是1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10mg/kg或更大。在又一些另外的實施例中，有效量可以是2.5mg/kg的本發(fā)明的絡合物或其任何組合?？梢允褂糜芍委熱t(yī)師選擇的劑量水平和模式來實施按每日、每周或每月計劃的單次或多次給予。更具體的實施例涉及每周使用典型地2-3個劑量。

術語“預防”是指防止以下項或降低以下項的風險：生物或醫(yī)學事件的發(fā)生、確切地與促炎細胞因子水平的升高和抗炎細胞因子水平的降低中的至少一者相關聯(lián)的病癥的發(fā)生或復發(fā)，該發(fā)生或復發(fā)是為研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)學醫(yī)生或其他臨床醫(yī)生力求在組織、系統(tǒng)、動物或人類中所要防止的，并且術語“預防有效量”旨在意指實現(xiàn)此目標的藥物組合物的量。因此，在具體實施例中，本發(fā)明的方法在預防，即防止與感染性疾病相關聯(lián)的病狀中是特別有效的。因此，被給予所述組合物的受試者不太可能經(jīng)歷與所述感染性病狀相關聯(lián)的癥狀，這些癥狀也不太可能在過去已經(jīng)經(jīng)歷過其的受試者中復發(fā)。

如在此所提及的術語“改善”涉及通過根據(jù)本發(fā)明的組合物和方法所帶來的癥狀的減少和受試者病狀的改善，其中所述改善可以下述形式表現(xiàn)：對與在此所述的免疫相關病癥相關聯(lián)的病理過程的抑制、這些病理過程強度的顯著減小或患病受試者生理狀態(tài)的改善。

術語“抑制”以及此術語的所有變型旨在涵蓋對病理學癥狀的過程和惡化或病理學過程進展的限制或阻止，所述病理學過程癥狀或過程是相關聯(lián)的。

術語“消除”涉及任選地根據(jù)以下所述的本發(fā)明方法實質(zhì)性地根除或去除病理學癥狀以及可能的病理學病因。

術語“延遲”、“延遲發(fā)作”、“阻滯”以及其所有的變型旨在涵蓋減慢病理學病癥或感染性疾病以及其癥狀的過程和/或惡化、減慢它們的進展、進一步的惡化或發(fā)展，以便比沒有根據(jù)本發(fā)明的治療的情況出現(xiàn)得較晚。

更確切地，治療或預防包括預防或推遲疾病的發(fā)展、預防或推遲癥狀的發(fā)展和/或降低將要或預期發(fā)展的此類癥狀的嚴重性。這些進一步包括改善現(xiàn)有的癥狀、預防另外的癥狀以及改善或預防癥狀的基礎代謝病因。應當理解，如在此所提及的術語“抑制”、“緩和”、“減少”或“衰減”涉及阻滯、約束或減少過程的約1％至99.9％，確切地約1％至約5％、約5％至10％、約10％至15％、約15％至20％、約20％至25％、約25％至30％、約30％至35％、約35％至40％、約40％至45％、約45％至50％、約50％至55％、約55％至60％、約60％至65％、約65％至70％、約75％至80％、約80％至85％、約85％至90％、約90％至95％、約95％至99％、或約99％至99.9％中的任一者。

本發(fā)明涉及治療有需要的受試者或患者?！盎颊摺被颉坝行枰氖茉囌摺币庵缚梢允芤陨咸峒暗牟≡w感染的和需要在此所述的預防性(preventive/prophylactic)試劑盒、系統(tǒng)和方法的任何生物，包括人類、家養(yǎng)的和非家養(yǎng)的哺乳動物諸如犬和貓受試者、牛、猿、馬和鼠受試者、嚙齒動物、家禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖動物、魚以及外來的水族箱魚。應當理解，所治療的受試者還可以是任何爬行動物或動物園動物。更確切地，本發(fā)明的試劑盒和方法旨在用于預防哺乳動物中的病理學病狀。“哺乳動物受試者”意指需要所提出的療法的任何哺乳動物，包括人類、馬、犬和貓受試者，最確切地是人類。應當注意，確切地，在非人類受試者的情況下，本發(fā)明的方法可以使用經(jīng)由注射、飲水、飼料、噴霧、口腔灌洗以及直接到有需要的受試者的消化道中的給予來執(zhí)行。

本發(fā)明的另一個方面涉及諾卡胺素與至少一種金屬的絡合物。

在一些實施例中，諾卡胺素與至少一種金屬的絡合物，其中至少一種金屬選自由鑭系元素、錒系元素、后過渡金屬或過渡金屬組成的組。

在另一個實施例中，本發(fā)明涉及諾卡胺素與至少一種金屬的絡合物，其中該金屬選自由鋅、鎵、鋁、銀、金、鈷、鉬以及釩組成的組。

在另外的實施例中，諾卡胺素與至少一種金屬的絡合物，其中該金屬選自由zn²⁺、ga³⁺、al³⁺、ag⁺以及au³⁺、co³⁺組成的組。

在具體實施例中，該絡合物是諾卡胺素與zn²⁺的。

在又一些其他實施例中，本發(fā)明的絡合物可以是諾卡胺素與ga³⁺。

在一些具體實施例中，本發(fā)明涉及一種在治療、預防、抑制、減少、消除、防止或延遲有需要的受試者中的病理學病狀或病癥的發(fā)作的方法中使用的諾卡胺素與至少一種金屬的組合物。

作為另一方面，本發(fā)明還涉及將單獨的藥物組合物組合成試劑盒形式。該試劑盒包括至少兩種單獨的藥物組合物：(i)呈其鹽、酯和酰胺中的任何形式的鑭系元素、錒系元素、后過渡金屬或過渡金屬中的至少一種或其任何組合，和藥學上可接受的載體或稀釋劑，以及(ii)諾卡胺素或其藥學上可接受的衍生物。

在又一些具體實施例中，包含在本發(fā)明的試劑盒中的金屬可以是鋅、鎵、鋁、銀、金、鉬以及釩中的至少一種。

在一些具體實施例中，本發(fā)明的試劑盒可以包括鋅。在又一些具體實施例中，本發(fā)明的試劑盒可以包括鎵。此外，在一些實施例中，本發(fā)明的試劑盒可以包括鋅和鎵。

更確切地，該試劑盒包括用于包含兩種單獨的組合物的容器裝置，諸如分隔瓶或分隔式箔包。然而，單獨的組合物也可以包含在單個的、未分隔的容器中。典型地，該試劑盒包括用于給予單獨組分的使用說明書。當單獨組分優(yōu)選以不同的劑型(例如，腸胃外的相對于局部的)給予、以不同的劑量間隔給予時，或者當開處方的醫(yī)師希望滴定組合中的各個組分時，該試劑盒形式是特別有利的。

本發(fā)明的試劑盒可以在分開的容器中進一步包括酸。在一些實施例中，該酸可以選自以下列表，該列表由以下各項組成：1-羥基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-酮戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水楊酸、乙酸、具有任何取代的烷烴磺酸、烯烴磺酸、炔烴磺酸、己二酸、抗壞血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟腦酸、樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、檸檬酸、環(huán)己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、甲酸、富馬酸、半乳糖二酸、龍膽酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、馬尿酸、氫溴酸、鹽酸、異丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、馬來酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸或其衍生物、或取代的烴基磺酸，例如羥基-、烷氧基-、酰氧基-、烷氧羰基-、鹵素-、芳基-或氨基-取代的烷基磺酸、煙酸、硝酸、油酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水楊酸、癸二酸、亞硒酸、硒酸、或先前所提及的磺酸化合物的任何亞硒酸或硒酸類似物、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、十一碳烯酸。

在一些實施例中，本發(fā)明的試劑盒能夠使活性成分用于治療、預防、抑制、減少、消除、防止或延遲有需要的受試者中的病理學病狀或病癥的發(fā)作的方法中。

在又一些其他具體的和非限制性實施例中，本發(fā)明進一步提供用于降低患有伴隨升高的il-1α、tnf-α、il-6以及il-17的病癥的受試者中的il-1α、tnf-α、il-6以及il-17的水平的治療性方法，這些治療性方法包括向患有如上概述的病理學病狀或疾病的受試者給予任選地與至少一種治療性化合物組合的治療有效量的本發(fā)明試劑盒的步驟。應當進一步注意，本發(fā)明的試劑盒或其任何組分的應用可以形成用于患有如上概述的病理學病癥或疾病的患者的互補性治療方案。

此外，本發(fā)明的試劑盒和絡合物以及其任何組分可以作為單個日劑量或多個日劑量，優(yōu)選地每1至7天一次施加。確切地考慮的是，這種施加可以每日一次、兩次、三次、四次、五次或六次進行，或者可以每天一次、每2天一次、每3天一次、每4天一次、每5天一次、每6天一次、每周一次、每兩周一次、每三周一次、每四周一次或甚至每月一次執(zhí)行。本發(fā)明的試劑盒或其任何組分的施加可以持續(xù)一天、兩天、三天、四天、五天、六天、一周、兩周、三周、四周、一個月、兩個月、三個月或甚至更久。確切地，施加可以持續(xù)從一天至一個月。更確切地，施加可以持續(xù)從一天至7天。

本發(fā)明進一步涉及一種用于產(chǎn)生諾卡胺素與鈷或鉬、或釩包括氧釩根形式、或鋅、或鋁或銀或金的絡合物的方法。該方法包括：在以下所述的條件下，將諾卡胺素(去鐵胺e)與鈷或鉬、釩、鋅、銀或金混合，所含有的金屬與諾卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之間，典型地是1:1。

關于一個選擇，混合是在例如來自由以下各項組成的列表的酸的存在下進行的：1-羥基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-酮戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水楊酸、乙酸、具有任何取代的烷烴磺酸、烯烴磺酸、炔烴磺酸、己二酸、抗壞血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟腦酸、樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、檸檬酸、環(huán)己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、甲酸、富馬酸、半乳糖二酸、龍膽酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、馬尿酸、氫溴酸、鹽酸、異丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、馬來酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸或其衍生物、或取代的烴基磺酸，例如羥基-、烷氧基-、酰氧基-、烷氧羰基-、鹵素-、芳基-或氨基-取代的烷基磺酸、煙酸、硝酸、油酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水楊酸、癸二酸、亞硒酸、硒酸、或先前所提及的磺酸化合物的任何亞硒酸或硒酸類似物、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、十一碳烯酸，酸與諾卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之間，典型地是1:1。

本發(fā)明的另一個方面涵蓋了一種制備諾卡胺素與金屬離子的絡合物的方法，該方法包括：使諾卡胺素與選自下組的金屬離子接觸，該組由以下各項組成：鈷或鉬、或釩包括氧釩根形式、或鋅、鋁、銀或金，所含有的金屬與諾卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之間。

在一些選擇性實施例中，金屬與諾卡胺素的化學計量比是1:1。

在一些實施例中，用于產(chǎn)生諾卡胺素與金屬離子的絡合物的方法包括以下步驟：在酸存在下將諾卡胺素(去鐵胺e)與選自下組的金屬離子接觸，該組由以下各項組成：鈷、鉬、釩包括氧釩根形式、鋅、鋁、銀或金，其中諾卡胺素和/或金屬離子是呈鹽的形式，所含有的金屬與諾卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之間，其中該酸選自下組，該組由以下各項組成：1-羥基-2-萘甲酸、2,2-二氯乙酸、2-酮戊二酸、4-乙酰氨基苯甲酸、4-氨基水楊酸、乙酸、具有任何取代的烷烴磺酸、烯烴磺酸、炔烴磺酸、己二酸、抗壞血酸、天冬氨酸、苯甲酸、樟腦酸、樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、檸檬酸、環(huán)己烷氨基磺酸、十二烷基硫酸、甲酸、富馬酸、半乳糖二酸、龍膽酸、葡庚糖酸、葡萄糖酸、葡萄糖醛酸、谷氨酸、戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、馬尿酸、氫溴酸、鹽酸、異丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、馬來酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸或其衍生物、或取代的烴基磺酸，例如羥基-、烷氧基-、酰氧基-、烷氧羰基-、鹵素-、芳基-或氨基-取代的烷基磺酸、煙酸、硝酸、油酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、磷酸、丙酸、焦谷氨酸、水楊酸、癸二酸、亞硒酸、硒酸、或先前所提及的磺酸化合物的任何亞硒酸或硒酸類似物、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、硫氰酸、十一碳烯酸，酸與諾卡胺素的分子比率是在1:0.01至1:100之間。

本發(fā)明的其他目的和優(yōu)點將隨著描述的進行而變得清楚。雖然以上描述僅詳細描述了本發(fā)明的幾個具體實施例，但是本領域的技術人員應當理解，本發(fā)明不限于此，并且在不偏離在此所披露的本發(fā)明的范圍和精神或超過權利要求書的范圍的情況下，其他形式的變型和細節(jié)可以是可能的。

如由權利要求書所限定的本發(fā)明、其內(nèi)容應當被解讀為包括在說明書的披露內(nèi)容內(nèi)，并且現(xiàn)在將通過舉例的方式參考附圖進行描述。

除非另外指明，在此所使用的所有科學和技術術語具有本領域所普遍使用的意義。在此所提供的定義是為了有助于理解在此頻繁使用的某些術語，并且不意味著限制本披露的范圍。

如在此所使用，術語“約”是指±10％。術語“包括(comprises)”、“包括(comprising)”、“包含(includes)”、“包含(including)”、“具有(having)”和它們的動詞變化意指“包括但不限于”。術語“主要由……組成”意指組合物、方法或結構可包括另外的成分、步驟和/或部分，但條件是這些另外的成分、步驟和/或部分不實質(zhì)性地改變所要求保護的組合物、方法或結構的基本特征和新穎特征。

如在此所使用的術語“約”指示可以偏離多至1％，更確切地5％，更確切地10％，更確切地15％并且在一些情況下多至20％而高于或低于所提及的值的值，偏差范圍包括整數(shù)值，并且如果適用的話，還包括非整數(shù)值，從而構成連續(xù)的范圍。如在此所使用，術語“約”是指±10％。

貫穿本說明書以及以下的實例和權利要求，除非本文另有要求外，詞語“包括”以及變化形式如“包括(comprises)”和“包括(comprising)”將理解為隱含包括一個陳述的整體或步驟或一組整體或步驟，但不排除任何其他整體或步驟或任何其他組整體或步驟。

應當注意，本發(fā)明的不同實施例可以呈現(xiàn)為一個范圍格式。應當理解，在范圍格式內(nèi)的描述僅為了方便和簡潔，并且不應當解釋為是對本發(fā)明的范圍的硬性限制。因此，一個范圍的描述應當被認為是具有確切披露的所有可能的子范圍以及此范圍內(nèi)的單獨數(shù)值。例如，一個范圍諸如從1至6的描述應當被認為是具有確切披露的子范圍，諸如從1至3、從1至4、從1至5、從2至4、從2至6、從3至6等，以及此范圍內(nèi)的單獨數(shù)字，例如1、2、3、4、5和6。無論范圍的寬度為多少，此均適用。每當在此指示數(shù)值范圍時，意味著包括所指示范圍內(nèi)的任何引用數(shù)字(分數(shù)或整數(shù))。短語第一指示數(shù)字與第二指示數(shù)字“之間的變動范圍/范圍”以及第一指示數(shù)字“至”第二指示數(shù)字的“變動范圍/范圍”在此可互換使用，并且意味著包括該第一指示數(shù)字和第二指示數(shù)字以及在此之間的所有分數(shù)和整數(shù)。

如在此所使用，術語“方法”是指用于完成給定任務的方式、手段、技術以及程序，包括但不限于化學、藥理學、生物學、生物化學以及醫(yī)學領域的從業(yè)者已知的或容易由已知方式、手段、技術以及程序來開發(fā)的那些方式、手段、技術以及程序。

應當理解，出于清楚的目的描述于單獨實施例的背景下的本發(fā)明的某些特征還可以按組合形式提供于單個實施例中。相反地，為簡潔起見，在單個實施例的背景下描述的本發(fā)明的不同特征也可以單獨地或以任何適合的子組合或在適當情況下提供于本發(fā)明的任何其他描述實施例中。在不同實施例的背景下描述的某些特征不應當認為是那些實施例的必需特征，除非實施例在沒有那些要素的情況下是無效的。

如上文描繪的并且如下文權利要求書部分中要求保護的本發(fā)明的不同實施例和方面在以下實例中找到實驗支持。

在此披露和描述了本發(fā)明，應當理解的是本發(fā)明不限于在此披露的具體實例、方法步驟和組合物，因為此類方法步驟和組合物可以稍有變化。還應當理解的是，在此所使用的術語用于僅描述具體實施例的目的，并且不旨在是限制性的，因為本發(fā)明的范圍將僅由所附的權利要求書及其等同物限制。

必須注意的是，如在本說明書和所附權利要求中所使用，單數(shù)形式“一個/一種(a/an)”和“該(the)”包括復數(shù)指代物，除非內(nèi)容另外清楚地指明。

以下實例是由發(fā)明人在實施本發(fā)明的各方面中所采用的代表性技術。應當理解，雖然這些技術對用于實踐本發(fā)明的優(yōu)選實施例是示例性的，但是根據(jù)本披露，本領域的技術人員將認識到在不偏離本發(fā)明的精神和意圖范圍的情況下，可以做出大量修改。

實例

無需進一步詳細闡述，認為本領域的普通技術人員可以使用前述說明在最大程度上利用本發(fā)明。因此，以下優(yōu)選具體實施例應當被解釋為僅是說明性的，并且不以任何方式限制要求保護的發(fā)明。

在此未具體描述的本領域已知的標準分子生物學實驗方案通?；救缢_姆布魯克(sambrook)等人，分子克?。簩嶒炇沂謨?molecularcloning:alaboratorymanual)，冷泉港實驗室，紐約(1989,1992)中和奧蘇貝爾(ausubel)等人，當代分子生物學實驗技術(currentprotocolsinmolecularbiology)，約翰威利父子公司(johnwileyandsons)，巴爾的摩，馬里蘭州(1988)中進行。

在此未具體描述的本領域已知的標準有機合成實驗方案通?；救缬袡C合成(organicsyntheses)：第1-79卷，編者變化，j.威利公司(j.wiley)，紐約，(1941-2003)；耶韋特(gewert)等人，有機合成工作手冊(organicsynthesisworkbook)，威利-vch公司(wiley-vch)，魏恩海姆(weinheim)(2000)；史密斯和馬奇(smith&march)，先進有機化學(advancedorganicchemistry)，威利跨學科公司(wiley-interscience)；第5版(2001)中進行。

在此未具體描述的本領域已知的標準藥物化學方法通?；救缬膳喔衤霭嫔绯霭娴挠刹煌髡吆途幷咚摹熬C合藥物化學(comprehensivemedicinalchemistry)”叢書中進行。

無需進一步詳細闡述，認為本領域的普通技術人員可以使用前述說明在最大程度上利用本發(fā)明。因此，以下優(yōu)選具體實施例應當被解釋為僅是說明性的，并且不以任何方式限制要求保護的發(fā)明。

在此未具體描述的本領域已知的標準分子生物學實驗方案通常基本如范德科肯k(vanderkerkenk)，多發(fā)性骨髓瘤的5t2mm鼠類模型：維護和分析(the5t2mmmurinemodelofmultiplemyeloma:maintenanceandanalysis)[分子醫(yī)學方法(methodsmol.med.)113:191-205(2005)；愛潑斯坦j(epsteinj.)scid-hu骨髓瘤模型分子醫(yī)學方法(methodsmol.med.)113:183-90(2005)]中進行。

動物

^*對于刺激性接觸性皮炎(icd)模型，使用12周大的balb\c雌性小鼠。刺激性接觸性皮炎通過向小鼠右耳表皮施加在丙酮和橄欖油(4:1)中的15μl的1％巴豆油溶液來誘導。

^*對于佐劑誘導的關節(jié)炎模型，對六至八周大的雌性近交路易斯大鼠(lewisrats)(哈蘭實驗室(harlanlaboratories)，以色列)在尾巴根部處注射在cfa(difco)中的1mg結核分枝桿菌(mt)h37ra(difco，底特律(detroit)，密歇根州(mi))

^*對于膠原誘導的關節(jié)炎模型，使用九周大的雄性dba/1小鼠(哈蘭實驗室，以色列)。對小鼠在尾巴根部處皮下注射乳化在cfa(difco)中的200μgii型膠原。三周之后，使用相同濃度的ii膠原來皮下加強小鼠。

^*對于tnbs結腸炎模型，使用在50％乙醇中的2.5％濃度下的160μl半抗原劑tnbs(西格瑪-奧德里奇公司(sigma-aldrich)，圣路易斯(st.louis)，密蘇里州(mo))通過皮膚涂抹敏化balb/c小鼠。

^*斯普拉-道來(sprague-dawley)(sd)雄性大鼠，購自哈蘭-以色列機構、使用鏈脲菌素(70mg/kg)處理以用作i型糖尿病模型。

^*8周大的雌性c57bl/6小鼠，通過將乳化在含有5mg/ml熱滅活的結核分枝桿菌的完全弗氏佐劑(cfa)中的125μg髓鞘質(zhì)少突神經(jīng)膠質(zhì)細胞糖蛋白35-55肽(mog35–55)皮下注射到左邊腰區(qū)中以用作ms模型。

實驗程序

諾卡胺素分離

發(fā)明人對由邁韋斯等人(18)所描述的應用方法進行修改。將橄欖色鏈霉菌(s.olivaceus)接種在每升自來水含有4g葡萄糖、10g麥芽提取物、4g酵母提取物、20g瓊脂的ph7.3下的ha培養(yǎng)基上，并且在27℃下孵育10天。將每升去離子水含有20g大豆餅粉和20g甘露醇的ph7.5下的預培養(yǎng)基接種有橄欖色鏈霉菌的孢子，并且在旋轉的振蕩器(120rpm)上在27℃孵育48小時。這些培養(yǎng)物用于生產(chǎn)培養(yǎng)基的接種?；A生產(chǎn)培養(yǎng)基每升去離子水含有：30g蔗糖、3g(nh4)2so4、0.5gnacl、0.2gmgso4^*7h2o、0.1gcacl2-2h2o、2mgznso4-7h2o、1gkh2po4100mmn-三(羥甲基)甲基-2-氨基乙磺酸(tes)、5g賴氨酸，并且使用3nnaoh將ph調(diào)整至7.5。使用chelex100小珠和伴清蛋白將每一個培養(yǎng)基中的鐵的濃度降低至納摩爾水平。將具有生產(chǎn)培養(yǎng)基的燒瓶在與預培養(yǎng)相同的條件下孵育48h。過濾培養(yǎng)基并且將液相凍干。執(zhí)行用1-丁醇對水相的提取。蒸發(fā)丁醇提取物，并且殘余物使用乙醚研磨，去除乙醚。然后將殘余物溶解在熱甲醇中，并且添加活性碳。在-20℃下孵育48h之后，形成沉淀，對該沉淀進行進一步過濾和干燥。使用甲醇與二氯甲烷的混合物作為流動相，通過在硅膠(0.040-0.063mm)上的柱色譜法對所獲得的干燥沉淀進行純化。使用旋轉蒸發(fā)器干燥洗脫物，并且通過分光光度滴定法(λ＝435nm)測試所得到的諾卡胺素的純度。通過質(zhì)譜法對諾卡胺素進行鑒定，其與購自亞歷克西斯生物化學公司(alexisbiochemicals)(圣地亞哥(sandiego)，加利福尼亞州(ca)，美國)的諾卡胺素相同。

鋅-諾卡胺素絡合物制備-方法i

為了獲得鋅-諾卡胺素絡合物以用于結構/化學研究，制備氯化鋅和諾卡胺素的等摩爾水溶液。為了形成該絡合物，將等體積的溶液混合，然后冷卻至4℃，使用98％甲酸滴定至ph2.96，并且然后最初通過25％nh4oh溶液，并之后使用5％nh4oh溶液使ph變至7.06。在45℃下將混合物孵育30min，并且冷卻至室溫。將溶液凍干，并且使用分光光度法(在λ＝435nm下)測量其純度。假定諾卡胺素到鋅的結合是完全的，通過質(zhì)譜法確認鋅-諾卡胺素絡合物的形成。

鋅-諾卡胺素絡合物制備-方法ii

為了獲得鋅-諾卡胺素絡合物以用于藥學用途，制備氯化鋅和諾卡胺素的等摩爾水溶液。為了形成該絡合物，在室溫下將等體積的溶液混合。為了有助于絡合物形成，使用1nhcl使混合物的ph變至3，并且然后使用naoh溶液使其變至7。在45℃下將混合物孵育30min，并且冷卻至室溫。將溶液凍干并且在與三價鐵反應之后使用分光光度法(在λ＝435nm下)測量其純度，并且假定鋅-諾卡胺素絡合物的形成是完全的。

鋅-諾卡胺素軟膏制備

為了制備含有0.5％鋅-諾卡胺素絡合物的3g基于凡士林的軟膏，使用15mg純諾卡胺素；為此(稱重16.7mg的89.8％純的諾卡胺素)。在玻璃管中將諾卡胺素粉末溶解在465μlddw中。添加17μl的192mg/mlzn²⁺(作為zncl2水溶液)，并且再次對管進行渦旋和超聲處理。使用鹽酸使ph降低至3，并且然后使用naoh溶液使其變至7。然后，添加135μl吐溫80。對管進行渦旋2分鐘并且進行超聲處理。在單獨的玻璃管(管b)中，在預加熱至65℃的水浴上熔化2.4g凡士林，并且將含有鋅-諾卡胺素絡合物水溶液的管a倒入到管b中。在65℃下攪拌管b15秒，并且將其放置在冰上。獲得3g量的油膏。

鎵-諾卡胺素絡合物制備-方法i

為了獲得鎵-諾卡胺素絡合物以用于結構/化學研究，制備氯化鎵(99.999％純)和諾卡胺素(89.8％純)的等摩爾水溶液。將等體積的溶液混合，然后冷卻至10℃，使用98％甲酸滴定至ph3.2，并且然后最初通過25％nh4oh溶液，并之后使用5％nh4oh溶液使ph變至7.1。在45℃下將混合物孵育30min，并且冷卻至室溫。將溶液凍干，并且使用分光光度法(在λ＝435nm下)測量其純度。通過質(zhì)譜法確認鎵-諾卡胺素絡合物的形成。

鎵-諾卡胺素絡合物制備-方法ii

為了獲得鎵-諾卡胺素絡合物以用于藥學用途，制備氯化鎵和諾卡胺素的等摩爾水溶液。在室溫下將等體積的溶液混合。使用1nhcl使混合物的ph變至3.2，并且然后使用naoh溶液使其變至7。在45℃下將混合物孵育30min，并且冷卻至室溫。將溶液凍干，并且在與三價鐵反應之后使用分光光度法(在λ＝435nm下)測量其純度。

銀-諾卡胺素絡合物制備

如下制備銀-諾卡胺素絡合物：將1mmol(203mg)的甲磺酸銀溶解在100ml雙重蒸餾水(ddw)中。將等量的諾卡胺素(1mmol-600mg)溶解在80mlddw中。將溶液混合，并且在50℃下，在連續(xù)攪拌下將合并溶液在暗處中保持10分鐘。然后將ph調(diào)整至6.8-7.4。將混合物冷卻至室溫并且凍干，得到灰白色粉末。

金-諾卡胺素絡合物制備-方法i

如下制備金-諾卡胺素絡合物：將20μmol的氯化金(作為[haucl4.4h2o]mw＝412，金含量48％)(8.2mg)溶解在5mlddw中。將等量的諾卡胺素(20μmole-12mg)溶解在2mlddw中。將兩種溶液混合，使ph變至3，并且在50℃下，在連續(xù)攪拌下將合并溶液在暗處中保持10分鐘。然后將ph調(diào)整至6.8-7.4。將混合物凍干，得到黃色粉末。

金-諾卡胺素絡合物制備-方法ii

如下制備金-諾卡胺素甲磺酸鹽絡合物：將20μmol的aucl3(6.0mg)和20μmol的甲磺酸鈉(2.2mg)溶解在5mlddw中。將等量的諾卡胺素(20μmol-12.0mg)溶解在1.6mlddw中。將溶液混合在一起，將ph調(diào)整至6.8-7.4，在暗處中，在50℃下，在連續(xù)攪拌下保持10分鐘，并且冷卻至室溫。將混合物凍干，得到黃色粉末。

金-諾卡胺素絡合物制備-方法iii

如下制備金-諾卡胺素甲磺酸絡合物：將于3mlddw中的20μmol的aucl3(6.0mg)溶液和于1.6mlddw中的等量的諾卡胺素(20μmol＝12.0mg)溶液混合。將20μmol的甲磺酸鈉(2.2mg)溶解在400μlddw中，并且與氯化金和諾卡胺素已混合溶液合并。將ph調(diào)整至5并且在5下維持20分鐘；然后將ph調(diào)整至6.8并且在50℃下在連續(xù)攪拌下在暗處保持10分鐘。然后將其冷卻至室溫并且凍干，得到黃色粉末。

質(zhì)譜法分析

通過直接注射在賽默科技公司(thermoscientific)tsqms裝置(馬薩諸塞州(ma)，美國)上執(zhí)行質(zhì)譜法分析(電噴霧正電離；蒸發(fā)器溫度200℃；毛細管溫度100℃；流量：0.005ml/min(100％水)；注射體積：5μl)。

抗菌作用

在以下類型的致病細菌上評估鋅-諾卡胺素的抗菌作用：大腸桿菌(革蘭氏陰性)、銅綠假單胞菌(革蘭氏陽性)以及金黃色葡萄球菌(革蘭氏陽性)(在耶路撒冷艾因-凱倫地區(qū)哈達薩醫(yī)院(hadassah-einkaremhospital)中分離)。更確切地，如下執(zhí)行該實驗：將每種細菌菌株在200rpm的通氣下，在37℃下在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中生長過夜，(epec(大腸桿菌))和銅綠假單胞菌在lb肉湯中，金黃色葡萄球菌在bhi肉湯中生長。兩種培養(yǎng)基均購自bd公司(新澤西州(nj)，美國)。在96孔板中執(zhí)行三倍連續(xù)稀釋的系列，并且然后在最終0.01的od600下將細菌添加至孔。使用所有三種菌株一式兩份地執(zhí)行實驗。預先制備鋅-諾卡胺素10mg/ml水溶液；在實驗之前，以1:2的比率將其稀釋在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中，以獲得5mg/ml的原液濃度。將此原液進一步稀釋至1.7、0.5、0.18、0.06、0.02、0.002、0.0007以及0.0002mg/ml，并且添加至適當?shù)目?。然后將該板在板讀出器中孵育24h，并且通過eon板讀出器(伯騰公司(biotek)，佛蒙特(ve)，美國)每20分鐘一次記錄od測量值的動力學。分析每種菌株的細菌生長曲線-所呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)展示出對應于產(chǎn)生以下鋅-諾卡胺素濃度0、5、1.7和0.5(單位為mg/ml)的稀釋液的重復實驗的平均值，其中觀察到對生長的影響。

在具有適當培養(yǎng)基的皮氏培養(yǎng)皿上執(zhí)行細菌生存力實驗。

測量細胞因子水平

對樣品進行均化處理，并且通過布拉德福程序(bradfordprocedure)測量蛋白質(zhì)濃度。根據(jù)制造商實驗方案(瑞博奧生物科技公司(raybiotech)，佐治亞州(ga)，美國)，使用可商購獲得的試劑盒通過elisa方法測定細胞因子的濃度。

刺激性接觸性皮炎(icd)模型

巴豆油誘導的刺激性接觸性皮炎(icd)模型是針對皮膚炎癥的良好建立的且廣泛使用的模型(19)。使用12周大的balb\c雌性小鼠。如果沒有另外提及，icd通過向表皮右耳施加在丙酮和橄欖油(4:1)中的15μl的1％巴豆油溶液來誘導。在施加巴豆油前不久，并且在施加巴豆油后3、6、8和10小時使用工程師的測微計測量耳朵厚度。測量耳朵腫脹并且通過從暴露后厚度值中減去暴露前厚度值來表達。

佐劑誘導的關節(jié)炎的誘導和臨床評價

對六至八周大的雌性近交路易斯大鼠在尾巴根部處注射在cfa(difco)中的1mg結核分枝桿菌(mt)h37ra(difco，底特律，密歇根州)。如下由不知情的觀察者每隔一天評價關節(jié)炎的嚴重性(關節(jié)炎指數(shù))：0，沒有關節(jié)炎；1，關節(jié)發(fā)紅；2，關節(jié)發(fā)紅并腫脹。對每只爪的腳踝和跗骨-跖骨關節(jié)進行評分?？梢垣@得16的最大得分。

佐劑誘導的關節(jié)炎的組織病理學評價

對大鼠進行安樂死，并且將后腿去除并固定在福爾馬林中。使用蘇木精和曙紅(h&e)對關節(jié)進行染色并且由專門的獸醫(yī)病理學家進行評估。

膠原誘導的關節(jié)炎的誘導和臨床評價

對九周大雄性dba/1小鼠在尾巴根部處皮下注射乳化在cfa(difco)中的200μgii型膠原。三周之后，使用相同濃度的ii膠原來皮下加強小鼠。每日通過不知情的觀察者由卡尺測量后爪和前爪的腿直徑來評價關節(jié)炎的嚴重性。作為對照，使用未注射膠原的同樣年齡的4只小鼠。健康小鼠的平均值充當“切分點(cut-off)”測量值。從加強注射之后的第5天開始，將具有健康小鼠(以一個爪或多個爪)的平均值以上的得分值的每只小鼠分配到處理組中的一個。

半抗原介導(tnbs)的結腸炎的誘導和臨床評價

^*使用在50％乙醇中的2.5％濃度下的160μl半抗原劑tnbs通過皮膚涂抹敏化balb/c小鼠。在一周之后，經(jīng)由3.5-法蘭西(french)導管直腸內(nèi)給予在50％乙醇中的120μl的1％tnbs。在直腸內(nèi)tnbs給予之后3天將小鼠處死。在敏化、直腸內(nèi)給予時并且在此之后的每一天對動物進行稱重，直至處死為止。通過評估體重減輕和結腸組織事后剖析的組織病理學來實施臨床評價。

tnbs結腸炎的組織病理學評價

將組織固定在含有4％福爾馬林的磷酸鹽緩沖生理鹽水中并且包埋在石蠟中。使用蘇木精和曙紅對切片(5μm)進行染色。由不知情的病理學家使用以下0-4的得分系統(tǒng)來評價炎癥的程度：0-沒有炎癥體征；1-低水平的白細胞浸潤；2-中等水平的白細胞浸潤；3-高水平的白細胞浸潤、高血管密度、腸壁增厚；4-透壁浸潤、杯狀細胞損失、高血管密度、強腸壁增厚、浮腫。

用于ms的實驗性自身免疫腦脊髓炎(eae)模型

通過以下方式在8周大的雌性c57bl/6小鼠中誘導eae：將乳化在含有5mg/ml熱滅活的結核分枝桿菌的完全弗氏佐劑(cfa)中的125μg髓鞘質(zhì)少突神經(jīng)膠質(zhì)細胞糖蛋白35-55肽(mog35–55)皮下注射到左邊腰區(qū)中。在此之后不久以及再在48h時，對小鼠在腹膜內(nèi)接種0.5ml百日咳毒素(400ng)。7天之后，通過將在cfa中的mog35–55肽的額外注射液注射到右邊腰區(qū)中來進一步激發(fā)小鼠。使用本發(fā)明的諾卡胺素-金屬絡合物或所指出的適當對照物對小鼠進行處理。

如下評估eve臨床得分：

0-沒有臨床疾?。?/p>

1-尾巴虛弱；

2-足以妨害扶正的后肢虛弱；

3-一條肢麻痹(plagic)；

4-伴隨前肢虛弱的截癱；

5-四肢癱瘓；

6-死亡。

實例1

諾卡胺素、鋅-諾卡胺素以及鎵-諾卡胺素絡合物的比較性質(zhì)譜(ms)分析

使用ms研究如在實驗程序中所述制備的鋅-諾卡胺素絡合物。在m/z＝663-667周圍的峰簇反映了諾卡胺素與鋅的天然豐富的同位素的絡合物，從而證實了此絡合物的存在(圖1b)。在m/z＝726.9周圍的峰簇表示在實驗過程中在ms儀器內(nèi)形成的zn2-諾卡胺素(圖1b)。623.21的峰表示在實驗過程中在ms儀器內(nèi)形成的鈉-諾卡胺素物質(zhì)。601.16的峰表示單獨諾卡胺素的單一質(zhì)子化形式(圖1a)。

如在實驗程序中所述制備鎵-諾卡胺素絡合物，并且通過ms進行研究。在m/z＝667周圍的峰反映了諾卡胺素與2種天然豐富的鎵同位素的絡合物，從而證實此絡合物的存在(圖1c)。明顯地，所有的諾卡胺素分子結合、大部分結合鎵。

實例2

使用刺激性接觸性皮炎(icd)模型的鋅-諾卡胺素絡合物對皮膚炎癥的抗炎作用

在鼠類icd模型中測試鋅-諾卡胺素絡合物作為抗炎劑的治療活性。

為了確認軟膏的治療性作用源于鋅-諾卡胺素絡合物而不是源于基于凡士林的媒介物，執(zhí)行適當?shù)某跫墝嶒?。將十六只小鼠分?組，每組八只小鼠。將兩組小鼠暴露于刺激物，即巴豆油。在暴露3小時之后，第一組使用僅含媒介物(凡士林)的軟膏進行處理，而第二組不進行處理。在這些組之間沒有觀察到差異，從而證實媒介物不提供有益的治療性作用(圖2a)。

為了測試治療性作用是否源于鋅-諾卡胺素絡合物，發(fā)明人制備了如實驗程序中所概述的含有鋅-諾卡胺素絡合物(0.5％；w/w)的軟膏。在暴露于巴豆油3小時之后，用指尖將此絡合物施加到小鼠的右耳，并且在以下實驗組之間比較此處理的抗炎作用：第1組-暴露于巴豆油但不進行處理-對照組(n＝8)；第2組-暴露并使用含有諾卡胺素(0.5％:w/w)的軟膏處理；第3組-暴露并使用含有鋅-諾卡胺素(0.5％；w/w)的軟膏處理；以及第4組-暴露并使用商業(yè)戊酸倍他米松軟膏0.1％處理。在t＝0時將動物暴露于刺激物，并且通過在暴露于刺激物之后t＝3h時將對應軟膏的指尖施加在暴露的耳朵上來進行處理；在暴露之后t＝6h時，進行檢驗。

如圖2b所示，如所預期的，在暴露于刺激物3小時之后，兩個組中的暴露的耳朵腫脹至相同程度。暴露的耳朵使用鋅-諾卡胺素軟膏的單一處理展示出與使用商業(yè)倍他米松軟膏所觀察到的類似的針對icd的高功效(圖2b)。使用鋅-諾卡胺素軟膏的處理導致浮腫的快速且明顯減少。此外，此實驗示出鋅-諾卡胺素的治療性功效與單獨的諾卡胺素的治療性功效之間相比的實質(zhì)性差異。雖然使用單獨的諾卡胺素處理的動物比未處理的動物恢復更好，但是其恢復比在接受鋅-諾卡胺素絡合物的小鼠中所觀察到的恢復慢得多(圖2b)。

為了建立鋅-諾卡胺素在基于凡士林的軟膏中的最佳濃度，在暴露于刺激物之后3h時，將增加濃度的鋅-諾卡胺素施加在小鼠的右耳上。此劑量-應答實驗的結果顯示鋅-諾卡胺素絡合物在基于凡士林的軟膏中的最佳濃度是0.5％(圖3)。因此，在接下來的實驗中采用此濃度。

實例3

鋅-諾卡胺素絡合物對炎癥晚期的icd的抗炎作用

發(fā)明人接下來測試對炎性過程晚期(暴露之后6h時)的實驗性icd的處理是否仍然是有益處的(圖4)。此外，通過在暴露于巴豆油前1h時施加含有軟膏的絡合物來研究鋅-諾卡胺素絡合物的預防性作用(圖4)。此實驗的結果揭示在暴露于刺激物之前1h時使用鋅-諾卡胺素軟膏的處理幾乎消除了炎性損傷作用。此外，顯示出了即使在炎性過程的晚期階段(晚期)施加，鋅-諾卡胺素軟膏也是有效的(圖4)。另外，當在暴露于刺激物之后6h施加處理時，觀察到了浮腫快速減少(圖4)。

實例4

對使用icd模型的局部施加的鋅-諾卡胺素絡合物的全身性治療性作用的評價

進行此實驗以便將局部施加的鋅-諾卡胺素軟膏的局部作用與此處理提供的可假定的全身性作用相比較。如圖5所示，甚至當向?qū)榷涫┘愉\-諾卡胺素軟膏時，由icd誘導的耳朵浮腫也顯著地減少。類似地，當向小鼠尾巴施加軟膏時，觀察到耳朵浮腫減少。此實驗的結果顯示鋅-諾卡胺素絡合物表現(xiàn)出針對刺激性接觸性皮炎的明顯的治療性功效，甚至在其不直接施加在受刺激皮膚的位點上的情況下同樣如此(圖5)。這些發(fā)現(xiàn)證實鋅-諾卡胺素軟膏穿過細胞膜并且到達血流，從而實現(xiàn)治療性活性濃度的能力高。

實例5

鋅-諾卡胺素對促炎細胞因子的影響

為了研究鋅-諾卡胺素絡合物的內(nèi)在機制，通過測量在實驗方案過程中耳朵中不同促炎細胞因子確切地il-1α、il-6、il-17以及tnf-α的濃度來測試其假定的抗炎活性。在已暴露于巴豆油(在t＝0時)并且至t＝6h時保持不處理的耳朵組織中測量這些細胞因子的濃度。將該濃度與在t＝0時暴露并且在t＝3h時使用絡合物處理的耳朵中的在t＝6h的濃度進行比較。

icd誘導的炎性過程對耳朵組織內(nèi)的il-1α、il-6、tnf-α以及il-17的濃度的影響在圖6a-圖6d中示出。更確切地，如下將二十二只小鼠分成四組：第1組(n＝6)-對照小鼠，未暴露于刺激物并且未處理；第2組(n＝6)：暴露于巴豆油，未處理，在暴露之后6h時處死，同時預期炎癥達到其峰值；第3組(n＝6)：耳朵暴露于巴豆油(t＝0)并且使用含有鋅-諾卡胺素(0.5％)的軟膏的指尖局部處理(在t＝6h時)；第4組(n＝4)：耳朵暴露于巴豆油，保持未處理，并且在暴露之后t＝3h時處死，從而評價炎性過程的動力學。根據(jù)制造商實驗方案(瑞博奧生物科技公司，佐治亞州，美國)，使用可商購獲得的試劑盒通過elisa方法測定細胞因子的濃度。

在暴露于巴豆油之后3h時il-1α、il-6、tnf-α的濃度顯著地增加，il-1α增加2.8倍，并且il-6增加1.8倍，tnf-α增加1.8倍。然而，在暴露于刺激物之后3h時il-17的濃度變化不是統(tǒng)計學上顯著的(圖6d)。在暴露于刺激物六小時之后觀察到發(fā)炎耳朵組織內(nèi)的每種細胞因子進一步顯著增加。增加的幅度是：il-1α增加7.9倍，il-6增加3.2倍，tnf-α增加3.7倍，并且il-17增加2.1倍。使用鋅-諾卡胺素(0.5％)的處理縮短了炎性作用，并且將細胞因子的濃度降低至幾乎基準水平。

檢驗炎性細胞因子在暴露于刺激物而沒有隨后處理的小鼠耳朵中的變化模式，可以看到浮腫的程度在暴露之后t＝6h時達到其峰值。暴露三小時之后，耳朵腫脹至其峰值一半的程度。

在處理之后細胞因子il-1、il-6、il-17以及tnf-α的蛋白質(zhì)水平的降低為鋅-諾卡胺素絡合物的抗炎作用提供了另外的證據(jù)，并且因此證實了在希望減少促炎細胞因子的病狀中使用本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物的可行性。

實例6

鋅-諾卡胺素絡合物對抗炎細胞因子的影響

通過測量小鼠耳朵組織中不同抗炎細胞因子，確切地il-4、il-10和il-13的濃度來測試鋅-諾卡胺素絡合物的假定抗炎活性。測量這些細胞因子的濃度并且對于每種細胞因子比較這些濃度在實驗過程中的變化模式：在基線t＝0時(沒有暴露)、在暴露于巴豆油之后t＝3h時、在暴露于巴豆油之后t＝6h時、以及在這些耳朵在暴露于巴豆油之后t＝3h時使用鋅-諾卡胺素絡合物處理的情況下的暴露于巴豆油之后t＝6h時。耳朵組織內(nèi)的il-13在實驗方案過程中的水平在圖7中示出。更確切地，如下將二十二只小鼠分成四組：第1組(n＝6)-對照小鼠(未暴露并且未處理的)；第2組(n＝6)-耳朵暴露于巴豆油并且未處理，在暴露之后6h時處死，同時預期炎癥達到其最大值；第3組(n＝6)：耳朵暴露于巴豆油(在t＝0時)，使用鋅-諾卡胺素(0.5％軟膏)的指尖進行局部處理(在t＝3h時)；第4組(n＝4)：耳朵暴露于巴豆油(在t＝0時)，未處理，并且在暴露之后t＝3h時處死。附圖示出炎性過程的動力學。根據(jù)制造商實驗方案(瑞博奧生物科技公司，佐治亞州，美國；戴克隆公司(diaclone)，貝桑松法國)，使用可商購獲得的elisa試劑盒通過elisa方法測定細胞因子的濃度測定細胞因子的濃度。

在暴露于巴豆油之后3h時所測量的il-13濃度與基線水平相比較降低了2.5倍(圖7)。在暴露于刺激物六小時之后，此降低被部分地修復，但是保持低于基線水平1.4倍。在t＝3h時使用鋅-諾卡胺素(0.5％軟膏)的處理增強了抗炎作用，如通過使t＝6h時的il-13水平恢復至其基線水平所指示的。

實例7

鋅-諾卡胺素的抗菌特性

鋅-諾卡胺素的抗菌特性在圖8中示出。在以下類型的致病細菌上評估鋅-諾卡胺素的抗菌作用：大腸桿菌(革蘭氏陰性)、銅綠假單胞菌(革蘭氏陽性)以及金黃色葡萄球菌(革蘭氏陽性)(在耶路撒冷艾因-凱倫地區(qū)哈達薩醫(yī)院(hadassah-einkaremhospital)中分離)。更確切地，如下執(zhí)行該實驗：每種細菌菌株如下那樣生長過夜：epec(大腸桿菌)和銅綠假單胞菌在lb肉湯中生長。金黃色葡萄球菌在bhi肉湯中生長。預先制備鋅-諾卡胺素10mg/ml水溶液并且在實驗之前，以1:2的比率將其稀釋在適當?shù)呐囵B(yǎng)基中，以獲得5mg/ml的原液濃度。在96孔板中執(zhí)行三倍連續(xù)稀釋的系列，并且然后在最終0.01的od600下將細菌添加至孔。使用所有三種菌株一式兩份地執(zhí)行所有實驗。然后將該板在板讀出器中孵育24h，并且每20分鐘一次記錄od測量值的動力學。分析每種菌株的細菌生長曲線-所呈現(xiàn)的數(shù)據(jù)展示出對應于產(chǎn)生0、5、1.7和0.5mg/ml的鋅-諾卡胺素的稀釋液的重復實驗的平均值，其中觀察到生長影響。在具有適當培養(yǎng)基的皮氏培養(yǎng)皿上執(zhí)行細菌生存力實驗。

如圖8所示，在1.7mg/ml的鋅-諾卡胺素絡合物下，關于大腸桿菌、銅綠假單胞菌(輕微抑制)或金黃色葡萄球菌觀察到生長抑制。此外，在0.5mg/ml的絡合物下觀察到金黃色葡萄球菌生長抑制。

殺菌活性(細菌生存力的抑制)實驗在具有適當培養(yǎng)基的皮氏培養(yǎng)皿上執(zhí)行，并且在圖9中示出。在5mg/ml的鋅-諾卡胺素絡合物下，關于大腸桿菌、銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌獲得殺菌活性。

實例8

鋅-諾卡胺素絡合物對哮喘的實驗模型的作用

使用卵清蛋白(ova)-誘導的哮喘的鼠類模型執(zhí)行該實驗。如下將三十二只balb/c雌性8周大小鼠分成4組(n＝8)：(1)對照；(2)患哮喘的，假處理；(3)患哮喘的，使用金屬-諾卡胺素絡合物腹膜內(nèi)(i/p)和鼻內(nèi)(i/n)處理；(4)患哮喘的，使用金屬-諾卡胺素絡合物僅i/n處理。通過在實驗的第0天、第7天和第14天腹膜內(nèi)100μl注射(10μg卵清蛋白和3mgal(oh)3，在0.9％鹽水中)使動物對卵清蛋白敏化。在第17天、第19天、第20天和第23天將小鼠進一步暴露于鼻內(nèi)滴注的ova(50μl)。

第3組的小鼠在第一次敏化之前的第5天和第1天接受2次i/p注射(每次100μl，含有溶解在鹽水緩沖液中的1mg金屬-諾卡胺素絡合物/kg體重)的預防性處理。隨后，在ova敏化之前的第一天和之后的第一天給予僅含1/3劑量(0.3mg/kg)的i/p注射液，同時在敏化的那天給予1mg/kg體重的劑量。從第15天開始，i/n給予絡合物。

基于與第3組類似的給予模式，第4組的小鼠僅通過i/n接受5mg/kg金屬-諾卡胺素絡合物。根據(jù)相同的方案，第1組和第2組中的動物接受鹽水注射和鼻內(nèi)滴注。在實驗結束時，在第24天，通過氯胺酮/賽拉嗪混合物的注射使動物安樂死。

在安樂死之后立即執(zhí)行使用鹽水溶液的支氣管肺泡灌洗(bal)。將bal流體在細胞離心涂片器載玻片(cytospinslide)上固定并染色，并且計數(shù)bal中的嗜酸性粒細胞和嗜中性粒細胞。在灌洗之后，切除肺部并且從肺組織中取樣品以用于均漿化。在均漿中定量鐵蛋白和鐵蛋白結合的鐵。

使來自每個組的5只小鼠的肺填充有4％低聚甲醛溶液，并且縱向切成3部分。將中間的三分之一包埋在石蠟中，隨機地切片，并且使用曙紅-蘇木精染色。評價支氣管周圍的和血管周圍的細胞浸潤的強度和粘液含量。使用過碘酸希夫(pas)染色來評價上皮細胞組織轉化，并且使用梅森氏三色染色(masson'strichromestaining)來評估纖維結締組織的存在。

實例9

鋅-諾卡胺素絡合物對脊髓損傷模型的作用

使用無限地平線脊髓撞擊器研究挫傷脊髓損傷模型。在100ms70kdyn的力設定下，在麻醉并且固定的小鼠(c57bl8周大，雄性)的暴露的t12脊椎上執(zhí)行損傷。使用曠場巴索小鼠量表(bms)在接下來的42天每日如下評價具有或沒有處理的小鼠的創(chuàng)傷后恢復：

0-沒有踝關節(jié)運動；

1-輕微的踝關節(jié)運動；

2-大范圍的踝關節(jié)運動；

3-在具有或沒有重量支撐的情況下的爪的足底放置-或者-

偶然的、頻繁的或連續(xù)的腳背踏步(dorsalstepping)，但是沒有足底踏步(plantarstepping)；

4-偶然的足底踏步；

5-頻繁的或連續(xù)的足底踏步，不協(xié)調(diào)-或者-

頻繁的或連續(xù)的足底踏步，有時協(xié)調(diào)，爪子在初始接觸和離地時旋轉(r/r)；

6-頻繁的或連續(xù)的足底踏步，有時協(xié)調(diào)，爪子在初始接觸時平行(p/r、p/p)-或者-

頻繁的或連續(xù)的足底踏步，大部分協(xié)調(diào)，爪子在初始接觸和離地時旋轉(r/r)；

7-頻繁的或連續(xù)的足底踏步，大部分協(xié)調(diào)，爪子在初始接觸時平行并且在離地時旋轉(p/r)-或者-

頻繁的或連續(xù)的足底踏步，大部分協(xié)調(diào)，爪子在初始接觸和離地時平行(p/p)，以及嚴重的軀干不穩(wěn)定性；

8-頻繁的或連續(xù)的足底踏步，大部分協(xié)調(diào)，爪子在初始接觸和離地時平行(p/p)，以及輕微的軀干不穩(wěn)定性-或者-

頻繁的或連續(xù)的足底踏步，大部分協(xié)調(diào)，爪子在初始接觸和離地時平行(p/p)，以及正常的軀干穩(wěn)定性并且尾巴下垂或或時而離地時而下垂；

9-頻繁的或連續(xù)的足底踏步，大部分協(xié)調(diào)，爪子在初始接觸和離地時平行(p/p)，以及正常的軀干穩(wěn)定性并且尾巴總是上挑；

p-平行的；r-旋轉的。

實例10

鋅-諾卡胺素絡合物對ii型糖尿病的嗜沙肥鼠模型的作用

ii型糖尿病的特征在于胰島素抵抗性和漸進性β細胞衰竭。在胰島素前體分子比例增加的情況下的胰島素分泌不足是ii型糖尿病的普遍特征；這可能由β細胞功能不當和/或β細胞量減少產(chǎn)生。沙鼠，即嗜沙肥鼠(psammomysobesus)是解決與胰島素抵抗性和β細胞衰竭在營養(yǎng)上誘導的糖尿病中的作用相關的問題的良好模型。在其由自然的低卡路里飲食變化到卡路里豐富的實驗室食物之后，嗜沙肥鼠患上與餐后高血糖相關聯(lián)的中度肥胖癥。一旦餐后高血糖發(fā)展起來(非禁食血糖>8.3mmol/l)，糖尿病的進展是非?？焖俚?，從而在啟動卡路里豐富的飲食的4-6周內(nèi)達到該疾病的晚期，其特征在于嚴重的低胰島素血癥、高脂血癥和酮病。嗜沙肥鼠中的高血糖是可逆的，但該疾病的低胰島素血癥晚期除外；血糖量正?？梢酝ㄟ^限制卡路里攝入來再次獲得。連續(xù)的飲食負荷，疊加于其先天胰島素抵抗性之上，引起胰腺胰島素儲備的耗盡，其中胰島素前體分子在胰腺和血液中的比例增加。前胰島素原基因?qū)σ葝u素增加的應答不足是糖尿病進展的重要原因。主要的罪魁禍首是不適當?shù)囊葝u素產(chǎn)生，結果引發(fā)胰島素儲備的耗盡。類似的機制可以在人類ii型糖尿病的演變中起作用。高血糖沙鼠傾向于患上微血管病并發(fā)癥，引起糖尿病腎病和糖尿病誘導的白內(nèi)障。

將體重為160-190g的三十二只雄性沙鼠(嗜沙肥鼠)分成四組(每組n＝8)-第1組-通過低能量飲食喂養(yǎng)的對照動物；第2-4組-以高能量致糖尿病飲食喂養(yǎng)。每3-5天一次監(jiān)測血糖水平和體重，進行63天。第1和第2組的動物使用100μl鹽水的腹膜內(nèi)注射處理。第3組的動物使用鋅-諾卡胺素(2.5mg/kg)處理，并且第4組使用鎵-諾卡胺素(2.5mg/kg)處理。處理在前兩周每周給予三次，并且直至實驗結束每周給予兩次。

實例11

使用糖尿病小鼠模型的金屬-諾卡胺素絡合物對糖尿病的治療

受到使用icd模型所證實的本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物對于炎性病狀的有益作用的鼓舞，發(fā)明人接下來使用小鼠糖尿病模型檢驗金屬-諾卡胺素絡合物對于另一種免疫相關病癥的潛在有益作用。因此，接下來使用nod小鼠作為糖尿病模型檢驗金屬-諾卡胺素絡合物在預防和/或改善糖尿病中的可能用途。

發(fā)明人使用nod小鼠通過在第8周和第12周靜脈內(nèi)給予本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物檢驗金屬-諾卡胺素絡合物的作用。對照小鼠接受pbs。每隔一周檢測小鼠的血糖水平和體重。

實例12

金屬-諾卡胺素絡合物對膠原誘導的關節(jié)炎的作用

使用小鼠中的膠原誘導的關節(jié)炎(cia)模型的實驗模型檢驗金屬-諾卡胺素絡合物的體內(nèi)作用。使用乳化在cfa中的ii型膠原在第0天對雄性dba/1小鼠進行免疫以誘導關節(jié)炎，并且在第21天給予加強劑量。大多數(shù)小鼠在加強注射之后的2.5周內(nèi)患上cia。在出現(xiàn)疾病的臨床體征之后，使用單劑量的本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物或使用鹽水(作為適當?shù)膶φ?對小鼠進行處理。

實例13

金屬-諾卡胺素絡合物對建立的佐劑誘導的關節(jié)炎的作用

接下來檢驗金屬-諾卡胺素絡合物在建立的關節(jié)炎的實驗模型中的體內(nèi)作用。在第0天使用mt/cfa對路易斯大鼠進行免疫以誘導關節(jié)炎；經(jīng)由臨床得分來測量關節(jié)炎嚴重性。在第14天，將大鼠分成實驗組。在第15天，在接近疾病的高峰時，使用金屬-諾卡胺素絡合物或使用鹽水(作為適當?shù)膶φ?對大鼠進行處理。

實例14

本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物對tnbs誘導的實驗結腸炎，即炎癥性腸病(ibd)的動物模型的作用

在自身免疫炎性疾病的另外的實驗模型中檢驗本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物的作用。在此描繪的模型是tnbs結腸炎模型，一種被廣泛接受并廣泛使用的ibd動物模型。

通過tnbs皮膚涂抹(指定為第-7天)，接著在一周之后(指定第0天)進行直腸內(nèi)給予tnbs來對二十只balb/c小鼠進行敏化。金屬-諾卡胺素絡合物在三個時間點(第-6天、第-2天、第+1天)經(jīng)由i.p.注射給予至處理組中的動物，將這些動物與未處理組動物進行比較。在敏化、直腸內(nèi)給予時并且在之后每一天對所有動物進行稱重。在直腸內(nèi)給予之后三天處死動物(指定第+3天)，并且取出結腸組織，并且對其進行組織學分析。

實例15

金屬-諾卡胺素絡合物對于人類患者中的銀屑病的治療

在年齡為17至71歲的20名患者(10名男性和10名女性)的樣本中執(zhí)行人類實驗。呈現(xiàn)出了每種形式的銀屑?。喊邏K狀銀屑病、頭皮銀屑病、滴狀銀屑病、紅皮病型銀屑病以及反向銀屑病。

治療由在第1天、第2天、第4天、第7天、第10天以及第14天對本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物的局部施加組成，利用了絡合物薄層的施加。若需要，治療再繼續(xù)進行一周。

在此研究的過程中未使用銀屑病的常規(guī)治療，其方式使得所獲得的結果僅可能歸因于本發(fā)明的金屬-諾卡胺素絡合物。

如上所指出那樣給予治療，并且監(jiān)測所治療的銀屑病斑塊的光滑化以及正常外觀皮膚的改善。

實例16

金屬-諾卡胺素絡合物對于小鼠中的實驗性自身免疫腦脊髓炎(eae)的治療和預防

為了進一步研究金屬-諾卡胺素絡合物對免疫相關病癥的作用，接下來使用eae作為多發(fā)性硬化癥(ms)的模型。通過在實驗的第一天和第七天注射髓鞘質(zhì)少突神經(jīng)膠質(zhì)細胞糖蛋白35-55肽(mog35–55)在8周大的雌性c57bl/6小鼠中誘導eae。如在實驗程序中所指示，在實驗的第一天和第二天對小鼠進一步接種百日咳毒素。如在實驗程序中詳細描述的，評估四組小鼠(每組10只小鼠)的臨床得分。第一組(a)-檢驗金屬-諾卡胺素絡合物的潛在預防性和保護性作用，每周接受金屬-諾卡胺素絡合物的治療，每周三次。處理在mog注射前三天啟動并且在第37天終止，并且接著從第37天至第52天進行使用媒介物的處理。第二組(b)的小鼠每周進行處理，每周3次，其中金屬-諾卡胺素絡合物在mog注射之后的第七天開始，一直至第52天實驗結束。第三組(c)的小鼠每周接受處理，每周3次，其中金屬-諾卡胺素絡合物在第一天開始，一直至第52天實驗結束。對照組(d)使用鹽水進行處理以作為適當?shù)膶φ?，該處理在?天開始，一直至第52天實驗結束。

根據(jù)實驗程序中所提出的標準對小鼠進行臨床評分。

實例17

金屬-諾卡胺素絡合物對于皰疹(感冒瘡)的治療

對年齡為28-38歲的8名患者(4名男性和4名女性)執(zhí)行該試驗。在所有患者中通過一天兩次在嘴唇上局部施加含有本發(fā)明的鋅-諾卡胺素絡合物(0.5％)的軟膏，連續(xù)進行三天(總共6次給予)來治療單純性皰疹病毒(hsv)表現(xiàn)(唇皰疹)。沒有其他藥物(藥劑)與本發(fā)明的鋅-諾卡胺素絡合物軟膏的施加并行使用。