本發(fā)明屬于微生物學(xué)領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及厚壁菌類益生菌在治療和預(yù)防肥胖及其相關(guān)疾病中的應(yīng)用，也涉及包含厚壁菌類益生菌的組合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：人體內(nèi)存在大量共生微生物，它們大部分寄居在人的腸道中，數(shù)量超過1000萬億(1014數(shù)量級(jí))，是人體細(xì)胞總數(shù)的10倍以上。在漫長(zhǎng)的進(jìn)化過程中，腸道微生物與人類達(dá)成了良好的合作，對(duì)人體的營(yíng)養(yǎng)、代謝和免疫都起著至關(guān)重要的作用，許多研究者更多地是將人體腸道微生物群落看作是人體的一個(gè)“器官”，或者是人體第二基因組，其中蘊(yùn)含的海量遺傳信息與人類健康密切相關(guān)。通過對(duì)糖尿病、冠心病、肥胖、結(jié)腸癌等數(shù)百種疾病近萬種樣品的研究發(fā)現(xiàn)，某些特定的物種與疾病呈現(xiàn)出顯著的關(guān)聯(lián)，這些結(jié)果在疾病的臨床評(píng)定和診斷以及后期的干預(yù)治療提供了一個(gè)全新的方向。肥胖癥是一種慢性疾病，許多因素都會(huì)導(dǎo)致肥胖，其發(fā)病起源至今未研究清楚。肥胖同時(shí)也是一系列疾病的誘導(dǎo)因子，如高血壓、糖尿病、冠心病、膽囊病、骨關(guān)節(jié)炎、睡眠中呼吸窒息、呼吸失調(diào)、子宮瘤、前列腺癌、乳腺癌和結(jié)腸癌等。根據(jù)nih的報(bào)告，目前約有9700萬美國(guó)人超重和過度肥胖，其中與過度肥胖相關(guān)的ii型糖尿病人數(shù)達(dá)到約1510萬人，每年約有20萬人死于與肥胖癥相關(guān)的疾病。肥胖通常是由于生理或生物化學(xué)功能改變而導(dǎo)致的體脂肪過剩。脂肪通常包括中性脂、磷脂和膽固醇。脂肪的增加是由于能量攝入大于能量的消耗。從發(fā)病原理上講，肥胖有兩種類型：(a)單純性肥胖(simpleobesity)和(b)繼發(fā)性肥胖(secondobesity)。單純性肥胖可劃分為先天性肥胖(idiopamicobesity)和后天性肥胖(acquiredobesity)，單純性肥胖患者數(shù)量可占95％以上的總肥胖?jǐn)?shù)目。先天性肥胖是由大量的脂肪細(xì)胞所致，且常見于兒童期肥胖。后天性肥胖是由更大尺寸的脂肪細(xì)胞所致，且常見于成年期肥胖。繼發(fā)性肥胖又被稱為癥狀性肥胖，其通常是由內(nèi)分泌或新陳代謝疾病所致。目前有五種治療肥胖的策略：節(jié)食、鍛煉、行為治療、藥物治療和康復(fù)手術(shù)(therapetlticoperation)。采取哪種策略主要視病人的健康危險(xiǎn)因子和體重減輕的速度和效果而定，可選擇或組合這些策略對(duì)肥胖病人進(jìn)行治療。其體重減輕的速度和效果受諸如年齡、身高、家族史和危險(xiǎn)因子等多個(gè)因素的影響。飲食—鍛煉療法，即吃低熱量、低脂肪食物和進(jìn)行有氧鍛煉，但這種方法一般認(rèn)為對(duì)普通大眾不成功，且需要長(zhǎng)期經(jīng)常性地堅(jiān)持；去除體內(nèi)脂肪手術(shù)能達(dá)到立竿見影的效果，但存在諸多限制，如手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)、除脂效果難以持久和花費(fèi)過于昂貴等。藥物治療是目前主要的臨床治療肥胖及其肥胖相關(guān)疾病(如糖尿病)的方法。藥物治療的機(jī)制包括抑制食欲、增加能量消耗、刺激脂肪移動(dòng)、降低甘油三酯合成和抑制脂肪吸收。目前主要的藥物為：苯丙醇胺(phenylpropanolamine，ppa)、羅氏鮮(orlistat，xenicalⅲ)和諾美婷(sibutramine，reductiltm)。某些糖尿病人的高血糖通過飲食和/或鍛煉療法或使用上述治療化合物仍然不能得到適當(dāng)控制。對(duì)于這些病人，應(yīng)使用外源胰島素。對(duì)病人來說，使用外源胰島素是很昂貴和痛苦的方法，還會(huì)給病人帶來多種并發(fā)癥。例如，由于沒有吃飯或不正常鍛煉，胰島素劑量的計(jì)算錯(cuò)誤會(huì)導(dǎo)致胰島素響應(yīng)(低血糖)。此外，使用藥物還可能發(fā)生對(duì)藥物的局部或全身過敏或免疫抗性。目前本領(lǐng)域還沒有一種有效的、副作用小的治療和預(yù)防肥胖及其相關(guān)疾病的方法和藥物。因此本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)一種的新的，無毒副作用的，用于治療和預(yù)防肥胖及其相關(guān)疾病的藥物。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個(gè)目的是提供厚壁菌類益生菌在治療和預(yù)防肥胖及其相關(guān)疾病方面的用途。本發(fā)明的另一目的是提供一種有效的無毒副作用的，用于治療和預(yù)防肥胖及其相關(guān)疾病的藥品、飲料、食品組合物，或動(dòng)物飼料組合物。本發(fā)明的另一目的是提供一種降低體重和/或血糖的方法及其應(yīng)用。本發(fā)明第一方面提供了一種厚壁菌類益生菌的用途，用于制備組合物或制劑，所述組合物或制劑用于選自下組的一種或多種用途：(a)預(yù)防和/或治療肥胖；(b)降低血脂；(c)預(yù)防或治療心血管疾??；和/或(d)預(yù)防和/或治療糖尿病，其中，所述厚壁菌類益生菌選自下組：伴生糞球菌(coprococcuseutactus)、渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述厚壁菌類益生菌包括伴生糞球菌(coprococcuseutactus)。在另一優(yōu)選例中，所述伴生糞球菌(coprococcuseutactus)選自下組：coprococcuseutactusatcc27759、coprococcuseutactusatcc51897、coprococcuseutactusl2‐50、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述厚壁菌類益生菌包括渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)。在另一優(yōu)選例中，所述渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)選自下組：dialisterinvisusdsm15470、dialisterinvisuse2.20、dialisterinvisuse9.48、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述厚壁菌類益生菌包括選自表3中的一種或多種。在另一優(yōu)選例中，所述厚壁菌類益生菌選自表3，且來自相同或不同的屬。在另一優(yōu)選例中，所述組合物選自下組：食品組合物、保健組合物、藥物組合物、飲料組合物、飼料組合物、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述的組合物為口服制劑。在另一優(yōu)選例中，所述的組合物為液態(tài)制劑、固態(tài)制劑、半固態(tài)制劑。在另一優(yōu)選例中，所述的組合物的劑型選自下組：粉末劑、散劑、片劑、糖衣劑、膠囊劑、顆粒劑、懸浮劑、溶液劑、糖漿劑、滴劑、和舌下含片。在另一優(yōu)選例中，所述的食品組合物包括乳液制品、溶液制品、粉末制品、或懸浮液制品。在另一優(yōu)選例中，所述的食品組合物包括乳品、乳粉、或乳液。在另一優(yōu)選例中，所述的液態(tài)制劑選自下組：溶液制品或懸浮液制品。本發(fā)明第二方面提供了一種厚壁菌類益生菌的用途，用于制備組合物或制劑，所述組合物或制劑用于選自下組的一種或多種用途：(i)降低哺乳動(dòng)物中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)的水平；和/或(ii)改善瘦素抵抗，提高體內(nèi)對(duì)leptin的敏感性，其中，所述厚壁菌類益生菌選自下組：伴生糞球菌(coprococcuseutactus)、渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述組合物或制劑還獨(dú)立地或額外地用于選自下組的一種或多種用途：(iii)抑制哺乳動(dòng)物的體重增長(zhǎng)；(iv)降低哺乳動(dòng)物的體脂比(脂肪重量/體重之比)；(v)降低哺乳動(dòng)物的血脂水平；(vi)提高哺乳動(dòng)物中的高密度脂蛋白(hdlc)的水平；(vii)降低哺乳動(dòng)物中的低密度脂蛋白(ldlc)水平。在另一優(yōu)選例中，所述哺乳動(dòng)物包括人、嚙齒動(dòng)物(如大鼠、小鼠)。在另一優(yōu)選例中，所述降低哺乳動(dòng)物的血脂水平包括降低總膽固醇(tc)水平和/或甘油三酯水平。本發(fā)明第三方面提供了一種用于治療和/或預(yù)防肥胖的組合物，所述組合物包括：(i)安全有效量的厚壁菌類益生菌；和(ii)食品上或藥學(xué)上可接受的載體；其中，所述厚壁菌類益生菌選自下組：伴生糞球菌(coprococcuseutactus)、渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述厚壁菌類益生菌包括伴生糞球菌(coprococcuseutactus)。在另一優(yōu)選例中，所述伴生糞球菌(coprococcuseutactus)選自下組：coprococcuseutactusatcc27759、coprococcuseutactusatcc51897、coprococcuseutactusl2‐50、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述厚壁菌類益生菌包括渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)。在另一優(yōu)選例中，所述渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)選自下組：dialisterinvisusdsm15470、dialisterinvisuse2.20、dialisterinvisuse9.48、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述組合物選自下組：食品組合物、保健組合物、藥物組合物、飲料組合物、飼料組合物、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述組合物含有1×10-1×1020cfu/ml或cfu/g的厚壁菌類益生菌，較佳地1×104-1×1015cfu/ml或cfu/g的厚壁菌類益生菌，按所述組合物的總體積或總重量計(jì)。在另一優(yōu)選例中，所述的組合物中，含有0.0001-99wt％，較佳地0.1-90wt％所述的厚壁菌類益生菌，以所述組合物的總重量計(jì)。在另一優(yōu)選例中，所述的組合物為單元?jiǎng)┬?一片、一粒膠囊或一小瓶)，每個(gè)單元?jiǎng)┬椭兴鼋M合物的質(zhì)量為0.05-5g，較佳地為0.1-1g。另一優(yōu)選例中，所述的組合物還含有其他益生菌和/或益生元。在另一優(yōu)選例中，所述的其他益生菌選自下組：乳酸菌、雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、或其組合。在另一優(yōu)選例中，所述的益生元選自下組：低聚果糖(fos)、低聚半乳糖(gos)、低聚木糖(xos)、低聚乳果糖(lact)、大豆低聚糖(sos)、菊粉(inulin)、或其組合。本發(fā)明第四方面提供了一種本發(fā)明第三方面所述組合物的制法，包括步驟：將(i)厚壁菌類益生菌、與(ii)食品上可接受的載體或藥學(xué)上可接受的載體混合，從而形成本發(fā)明第三方面所述的組合物。在另一優(yōu)選例中，所述的組合物為口服制劑。本發(fā)明第五方面提供了一種降低體重和/或血脂的方法，給所述對(duì)象施用(i)厚壁菌類益生菌或本發(fā)明第三方面所述的組合物。在另一優(yōu)選例中，所述的施用包括口服。在另一優(yōu)選例中，所述的施用劑量為0.01-5g/50kg體重/天，較佳地，0.1-2g/50kg體重/天。在另一優(yōu)選例中，所述的對(duì)象包括哺乳動(dòng)物，如人。應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附圖說明圖1顯示了灌胃伴生糞球菌后各組小鼠與灌胃前相比的體重增長(zhǎng)情況。圖2顯示了灌胃渾濁戴阿利斯特菌后各組小鼠與灌胃前相比的體重增長(zhǎng)情況。圖3顯示了灌胃組合菌后各組小鼠與灌胃前相比的體重增長(zhǎng)情況。圖4顯示了灌胃伴生糞球菌9周后各組小鼠的體脂比。圖5顯示了灌胃渾濁戴阿利斯特菌9周后各組小鼠的體脂比。圖6顯示了灌胃組合菌9周后各組小鼠的體脂比。圖7顯示了灌胃伴生糞球菌對(duì)血脂的影響。圖8顯示了灌胃渾濁戴阿利斯特菌對(duì)血脂的影響。圖9顯示了灌胃組合菌對(duì)血脂的影響。圖10顯示了灌胃伴生糞球菌對(duì)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)的影響。圖11顯示了灌胃渾濁戴阿利斯特菌對(duì)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)的影響。圖12顯示了灌胃組合菌對(duì)單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)的影響。圖13顯示了灌胃伴生糞球菌對(duì)瘦素(leptin，lep)的影響。圖14顯示了灌胃渾濁戴阿利斯特菌對(duì)瘦素(leptin，lep)的影響。圖15顯示了灌胃組合菌對(duì)瘦素(leptin，lep)的影響。具體實(shí)施方式本發(fā)明人經(jīng)過廣泛而深入的研究和實(shí)驗(yàn)，意外地發(fā)現(xiàn)，伴生糞球菌(coprococcuseutactus)和/或渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)具有預(yù)防和治療肥胖及其相關(guān)疾病(如心血管疾病)的作用，將含有上述厚壁菌類益生菌的活性組合物飼喂食實(shí)驗(yàn)對(duì)象，發(fā)現(xiàn)該組合物能夠抑制體重增加，降低體脂比，降低血脂，有效減輕心血管及肥胖等病癥。在此基礎(chǔ)上完成本發(fā)明。如本文所用，術(shù)語“含有”表示各種成分可一起應(yīng)用于本發(fā)明的混合物或組合物中。因此，術(shù)語“主要由...組成”和“由...組成”包含在術(shù)語“含有”中。如本文所用，所述“體脂比”是指脂肪重量/體重的比值。本發(fā)明的厚壁菌類益生菌及其應(yīng)用如本文所用，所述“本發(fā)明的厚壁菌類益生菌”指腸道中共棲的一類厚壁菌門的菌，革蘭氏染色呈陽性，桿狀，如梭菌xiva簇和iv簇(clostridiumclusterxivaandiv)，包括梭菌屬(clostridium)、真桿菌屬(eubacterium),瘤胃球菌屬(ruminococcus)和硫酸鹽還原菌屬(anaerofilum)等的一些種。通過與腸道其他微生物相互作用，此類益生菌在腸道菌群平衡中發(fā)揮重要作用，同時(shí)，也發(fā)揮其他特定的或必需的功能。在本發(fā)明中，所述“本發(fā)明的厚壁菌類益生菌”指伴生糞球菌(coprococcuseutactus)、渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)2種菌屬的一個(gè)或多個(gè)菌屬的混合或每個(gè)菌屬中多個(gè)菌的一個(gè)或多個(gè)混合。其中，伴生糞球菌(coprococcuseutactus)是一種專性厭氧菌，不能運(yùn)動(dòng)，當(dāng)呈現(xiàn)出成對(duì)或鏈狀成對(duì)狀態(tài)時(shí)革蘭氏染色呈陽性，但可很快退色。在含有可發(fā)酵碳水化合物的培養(yǎng)基里，呈現(xiàn)略微細(xì)長(zhǎng)的形狀。但該菌通常為圓形，直徑為0.7-1.3μm。渾濁戴阿利斯特菌(dialisterinvisus)是一種專性厭氧菌、不能運(yùn)動(dòng)的球桿菌(0.3‐0.4×0.3‐0.6μm)，革蘭氏染色呈陰性?？沙尸F(xiàn)單個(gè)分散形態(tài)，也可呈現(xiàn)成對(duì)、短鏈、小簇等形態(tài)。本發(fā)明提供了厚壁菌類益生菌在治療和預(yù)防肥胖及其相關(guān)疾病(如心血管疾病)方面的應(yīng)用。受驗(yàn)者攝入高脂肪的食物，厚壁菌類益生菌具有(i)抑制該受驗(yàn)者體重增加；(ii)降低血脂；和(iii)降低體脂比的能力。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選例，經(jīng)本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)來治療的被喂以可導(dǎo)致肥胖的高脂肪的食物的c57bl/6j雄性小鼠，與未接受治療的對(duì)照組相比，其體重增加幅度減緩且血脂下降，并且各種與肥胖或心血管疾病相關(guān)的指標(biāo)也下降，如瘦素(lep)以及單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)。因此，本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)能夠用以預(yù)防和治療肥胖及由肥胖引起的疾病，如心血管疾病等。組合物及其應(yīng)用本發(fā)明還提供了一種組合物，優(yōu)選地，為藥物組合物。所述組合物包括有效量的本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)，在一個(gè)優(yōu)選例中，所述組合物還包括選自下組的益生菌：乳酸菌、雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、或其組合；和/或選自下組的益生元：低聚果糖(fos)、低聚半乳糖(gos)、低聚木糖(xos)、低聚乳果糖(lact)、大豆低聚糖(sos)、菊粉(inulin)、或其組合。在一優(yōu)選例中，所述的組合物為液態(tài)制劑、固態(tài)制劑、半固態(tài)制劑。在一優(yōu)選例中，所述的液態(tài)制劑選自下組：溶液制品或懸浮液制品。在一優(yōu)選例中，所述的組合物的劑型選自下組：粉末劑、散劑、片劑、糖衣劑、膠囊劑、顆粒劑、懸浮劑、溶液劑、糖漿劑、滴劑、和舌下含片。本發(fā)明藥物組合物可以以藥物片劑，針劑或膠囊的任一種形式給藥，所述藥物制劑包括賦形劑、藥物允許的媒介和載體，這些物質(zhì)可根據(jù)給藥途徑進(jìn)行選擇。本發(fā)明中藥物制劑可進(jìn)一步包含輔助的活性組份。乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖、淀粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鹽、明膠、硅酸鈣、細(xì)結(jié)晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮(pvp)、纖維素、水、糖漿、甲基纖維素、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸鎂或礦物油等都可用作本發(fā)明中藥物組合物的載體、賦形劑或稀釋劑等。此外，本發(fā)明的藥物組合物可進(jìn)一步包括潤(rùn)滑劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑、懸浮液穩(wěn)定劑、防腐劑、甜味劑和香料等。本發(fā)明的藥物組合物可通過多種公知的方法以腸衣制劑生產(chǎn)，以便于藥物組合物的活性成分即微生物能順利通過胃而不被胃酸所破壞。另外，本發(fā)明的微生物可以常規(guī)方法制備的膠囊形式使用。例如，標(biāo)準(zhǔn)賦形劑和本發(fā)明的冷干微生物混合制成小球藥丸，然后將藥丸裝填入明膠膠囊中。此外，本發(fā)明的微生物和藥物允許使用的賦形劑如液體膠、纖維素、硅酸鹽或礦物油等混合制作懸浮液或分散液，這種懸浮液或分散液可裝入軟的明膠膠囊中。本發(fā)明的藥物組合物可制成腸衣片供口服使用。本申請(qǐng)中的術(shù)語—“腸衣”，包括所有常規(guī)藥物允許使用的包衣，這些包衣不被胃酸降解，但在小腸中能充分分解并快速釋放出本發(fā)明的微生物。木發(fā)明的腸衣能在合成胃酸如ph＝1的hcl溶液中在36-38℃維持2小時(shí)以上，并優(yōu)選在合成腸液如ph＝7.0的緩沖液中在1.0小時(shí)內(nèi)分解。本發(fā)明的腸衣為以每片約16-30mg進(jìn)行包衣，較佳地16-25mg，更佳地16-20mg進(jìn)行包衣。本發(fā)明中腸衣厚度為5-100μm，理想的厚度為20-80μm。腸衣成分選自己公開知曉的常規(guī)聚合物。本發(fā)明優(yōu)選的腸衣由纖維素乙酸鄰苯二甲酸酯聚合物或偏苯三酸酯聚合物以及異丁烯酸的共聚物(例如，含有40％以上異丁烯酸和含有甲基纖維素鄰苯二甲酸羥丙酯或其酯類衍生物的異丁烯酸的共聚物)制備。本發(fā)明中腸衣所使用的纖維素乙酸鄰苯二甲酸酯的粘度為約45-90cp，乙酰含量17-26％，鄰苯二甲酸含量30-40％。用于腸衣中的纖維素乙酸偏苯二酸酯粘度為約5-21cp，乙酞含量17-26％。纖維素乙酸偏苯三酸酯由eastman科達(dá)公司生產(chǎn)，可用于本發(fā)明中的腸衣材料。用于本發(fā)明腸衣中的羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酷，分子量一般為20,000-130,000道爾頓，理想分子量為80,000-100,000道爾頓，羥丙基含量為5-10％，甲氧基含量為18-24％，鄰苯二甲?；繛?1-35％。用于本發(fā)明腸衣中的羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酷為hp50，由日本shin-etsuchemidnlco.ltd.生產(chǎn)。hp50含有6-10％羥丙基，20-24％甲氧基，21-27％的丙基，其分子量為84,000道爾頓。另一種腸衣物質(zhì)為hp55，hp55含有5-9％的羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯，18-22％甲氧基，27-35％的鄰苯二甲酸，其分子量為78,000道爾頓。本發(fā)明腸衣如下制備：使用常規(guī)方法將腸衣溶液噴霧到核心上。該腸包衣方法中所有溶劑為醇類(如乙醇)、酮類(如丙酮)、鹵代烴化合物(如二氯甲烷)、或其組合物。將軟化劑如二-正丁基鄰苯二甲酸酯和三乙酸甘油酯加入到腸衣溶液中，其比例為1份包衣物對(duì)約0.05份或約0.3份軟化劑。噴霧方法優(yōu)選連續(xù)執(zhí)行，所噴霧的料量可根據(jù)包衣所采用的條件進(jìn)行控制。噴霧壓力可隨意調(diào)節(jié)，一般而言，能在平均1-1.5帕壓力下獲得理想的結(jié)果。說明書中“藥物有效量”是指可對(duì)人和/或動(dòng)物產(chǎn)生功能或活性的且可被人和/或動(dòng)物所接受的量。比如，在本發(fā)明中，可制備含有1×10-1×1020cfu/ml或cfu/g(特別的，可含有1×104-1×1015cfu/ml或cfu/g；更特別地，可含有1×106-1×1011cfu/ml或cfu/g)的本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)的制劑。當(dāng)用于制備藥物組合物時(shí)，所用的本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)的有效劑量可隨施用的模式和待治療的疾病的嚴(yán)重程度而變化。適用于內(nèi)服的劑量形式，包含與固態(tài)或液態(tài)藥學(xué)上可接受的載體密切混合的約1×10-1×1020cfu/ml或cfu/g(特別的，可含有1×104-1×1015cfu/ml或cfu/g；更特別地，可含有1×106-1×1011cfu/ml或cfu/g)的活性厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)的活性成分?？烧{(diào)節(jié)此劑量方案以提供最佳治療應(yīng)答。例如，由治療狀況的迫切要求，可每天給予若干次分開的劑量，或?qū)┝堪幢壤販p少。所述的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)可通過口服等途徑給予。固態(tài)載體包括：淀粉、乳糖、磷酸二鈣、微晶纖維素、蔗糖和白陶土，而液態(tài)載體包括：培養(yǎng)基、聚乙二醇、非離子型表面活性劑和食用油(如玉米油、花生油和芝麻油)，只要適合厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)特性和所需的特定給藥方式。在制備藥物組合物中通常使用的佐劑也可有利地被包括，例如調(diào)味劑、色素、防腐劑和抗氧化劑如維生素e、維生素c、bht和bha。從易于制備和給藥的立場(chǎng)看，優(yōu)選的藥物組合物是固態(tài)組合物，尤其是片劑和固體填充或液體填充的膠囊?？诜o藥是優(yōu)選的。將本發(fā)明組合物施用給所述個(gè)體，每天給藥1次或多次。給藥劑量單位表示其形式上能分開且適用于人類或其他所有哺乳動(dòng)物個(gè)體的劑量。每一單位含有藥物允許的載體和有效治療量的本發(fā)明微生物。給藥量隨病人的體重和肥胖嚴(yán)重程度、所包括的補(bǔ)充活性組份和所使用的微生物而變化。此外如可能，可分開給藥，并且如需要可連續(xù)給藥。因此，所述給藥量不會(huì)對(duì)本發(fā)明造成限制。此外，本發(fā)明中的“組合物”不僅意味著藥品而且表示可作為功能性食品和健康補(bǔ)充食品。在一個(gè)優(yōu)選例中，所述組合物包括：飲料、食品、藥品、動(dòng)物飼料等。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選例中，還提供了一種食品組合物，它含有有效量的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)，以及余量的食品上可接受的載體，所述的食物組合物的劑型選自固體、乳品、溶液制品、粉末制品、或懸浮液制品。在一優(yōu)選例中，所述組合物的配方如下：1×10-1×1020cfu/ml的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)；以及食品上或藥學(xué)上可接受的載體，和/或賦形劑。在另一優(yōu)選例中，所述組合物的配方如下：1×106-1×1011cfu/ml的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)；以及食品上或藥學(xué)上可接受的載體，和/或賦形劑。降低體重和/或血脂的方法在另一優(yōu)選例中，所述方法包括：攝取本發(fā)明的藥物組合物、食品組合物、飲料組合物、或其組合。所述實(shí)驗(yàn)對(duì)象為人。在另一優(yōu)選例中，所述方法包括：攝取本發(fā)明的藥物組合物、食品組合物、或動(dòng)物飼料，或其組合。所述實(shí)驗(yàn)對(duì)象為動(dòng)物，較佳地為鼠類，兔類。本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)包括：(a)本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)能夠顯著降低體重、降低血脂、降低體脂比。(b)本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)能夠顯著降低與肥胖及其相關(guān)疾病(如心血管疾病)相關(guān)的指標(biāo)(如膽固醇和甘油三酯)。(c)本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)能夠顯著降低總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白的水平。(d)本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)能夠顯著提高高密度脂蛋白的水平。(e)本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)能夠改善胰島素抵抗，還可降低動(dòng)脈粥樣硬化和心血管疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。(f)本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)能夠顯著降低單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)水平。(g)本發(fā)明的厚壁菌類益生菌(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)能夠有效地改善肥胖癥伴隨的瘦素抵抗，提高體內(nèi)對(duì)leptin的敏感性。下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件如sambrook等人，分子克?。簩?shí)驗(yàn)室手冊(cè)(newyork：coldspringharborlaboratorypress，1989)中所述的條件，或按照《微生物：實(shí)驗(yàn)手冊(cè)》(jamescappuccino和nataliesherman編，pearsoneducation出版社)中所述的條件，或按照制造廠商所建議的條件。實(shí)施例1含菌組分(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)的食品組合物原料配比如表1。表1食品組合物配方原料質(zhì)量百分比(％)菌組分0.5牛奶90.0白糖9.5配方1-6中的菌組分為單細(xì)菌組分，分別含有coprococcuseutactusatcc27759、coprococcuseutactusatcc51897、coprococcuseutactusl2-50、dialisterinvisusdsm15470、dialisterinvisuse2.20、dialisterinvisuse9.48。配方7中的菌組分為上述6種菌的任意兩種或兩種以上(優(yōu)選2種或3種)的混合物(重量比為1:1或1:1:1)。按照上述配方比例混合牛奶、白糖，攪拌至完全混合，預(yù)熱，20mpa壓力均質(zhì)，90℃左右殺菌5-10分鐘，冷卻至40-43℃，接種1-100×106cfu/g的菌組分，即制成含菌組分(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)的食品組合物。實(shí)施例2含菌組分(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)的藥物組合物原料配比見表2。表2藥物組合物配方原料質(zhì)量百分比(％)菌組分1.0％乳糖2.0％酵母粉2.0％蛋白胨1.0％純凈水94.0％配方1-6中的菌組分為單細(xì)菌組分，分別含有coprococcuseutactusatcc27759、coprococcuseutactusatcc51897、coprococcuseutactusl2-50、dialisterinvisusdsm15470、dialisterinvisuse2.20、dialisterinvisuse9.48。配方7中的菌組分為上述6種菌的任意兩種或兩種以上(優(yōu)選2種或3種)的混合物(重量比為1:1或1:1:1)。按照比例將乳糖、酵母粉、蛋白胨以純凈水混合均勻，預(yù)熱到60-65℃，20mpa壓力均質(zhì)，90℃左右殺菌20-30分鐘，冷卻至36-38℃，接入菌組分(1-50×106cfu/ml)，36-38℃發(fā)酵至ph值為6.0，離心，冷凍干燥至水份含量小于3％，即制備成含菌組分的冷凍干燥物。稱取0.5克含菌組分的冷凍干燥物與麥芽糊精等量混合后裝入膠囊中，即制成含菌組分(如伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合)的藥物組合物。實(shí)施例3對(duì)于肥胖模型小鼠的治療作用實(shí)驗(yàn)材料:小鼠：購(gòu)買c57bl/6j雄性小鼠(購(gòu)自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，為正常飼養(yǎng)小鼠，6周齡。小鼠生長(zhǎng)過程處于同一環(huán)境，且喂養(yǎng)同樣的食物。從保藏機(jī)構(gòu)獲得6株厚壁菌類益生菌，并保存于深圳華大基因研究院。同時(shí)，選取植物乳桿菌(lactobacillusplantarum)，來自中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(cgmcc)，保藏編號(hào)cgmccno.8198，作為對(duì)照組(lp組)，于mrs培養(yǎng)液中，37℃培養(yǎng)24-48h。其中，上述6株厚壁菌類益生菌的來源信息如表3所示。所有菌株經(jīng)16srdna測(cè)序鑒定無誤后開始實(shí)驗(yàn)。菌株信息見表3。表3菌株信息其中，coprococcuseutactusl2-50(菌3)來源于英國(guó)羅威特研究所(rowettresearchinstitute)(barcenillaa,prydese,martinjcetal.phylogeneticrelationshipsofbutyrate-producingbacteriafromthehumangut.appliedandenvironmentalmicrobiology2000；66:1654-1661.)。dialisterinvisuse2.20(菌5)和dialisterinvisuse9.48(菌6)均來源于英國(guó)倫敦國(guó)王學(xué)院蓋氏醫(yī)院牙科研究所微生物科(departmentofmicrobiology,dentalinstitute,guy'stower,guy'shospital,king'scollegelondon,uk；j.downes,m.munsonandw.g.wade，dialisterinvisussp.nov.,isolatedfromthehumanoralcavity,internationaljournalofsystematicandevolutionarymicrobiology(2003),53,1937–1940)。高脂飼料(hf)：含78.8％基礎(chǔ)飼料、1％膽固醇、10％蛋黃粉、10％豬油和0.2％膽鹽，購(gòu)自南通特洛菲飼料科技有限公司。普通維持飼料：購(gòu)自廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。實(shí)驗(yàn)方法：選取正常喂養(yǎng)的c57bl/6j成年雄性小鼠，隨機(jī)分組，分別為對(duì)照組(ck)，菌劑組(菌1組，菌2組，菌3組，菌4組，菌5組，菌6組，菌1+菌5組，菌2+菌6組，菌3+菌4組)，對(duì)照菌劑組(lp，lactobacillusplantarumcgmccno.8198)和肥胖模型組(hf)，每組10只，在spf(無特定病原體(specificpathogenfree))環(huán)境下自由進(jìn)食和飲水。lp組、hf組和菌劑組喂食高脂飼料，ck組喂食普通維持飼料。喂養(yǎng)4周后，菌劑組和lp組開始灌胃相應(yīng)菌株菌液；hf組和ck組灌胃等量培養(yǎng)基，灌胃9周。灌喂菌量定為0.15ml/10g體重，菌濃為1×107cfu/ml，濃縮后濃度為1×108cfu/ml，頻率為隔天一次。菌液需提前培養(yǎng)，每周活化保證新鮮，分別測(cè)定濃度，并調(diào)整至1×108cfu/ml。對(duì)于單一菌劑組，取相應(yīng)菌液按上述劑量灌胃；對(duì)于混合菌劑組，將各單菌菌液等比例混合后按上述劑量灌胃。實(shí)驗(yàn)期中，每周記錄小鼠體重、狀態(tài)、進(jìn)食量等數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)最后一周各組小鼠進(jìn)行葡萄糖耐量(ogtt)試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死小鼠，記錄脂肪重量，并取血清，用elisa試劑盒檢測(cè)血脂和蛋白因子含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果：(1)伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌對(duì)鼠體重的影響。表4灌胃伴生糞球菌后各組小鼠與灌胃前相比的體重增長(zhǎng)情況(圖1)注：表中數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，對(duì)于每一列的任意兩組數(shù)據(jù)，數(shù)字后面沒有相同字母表示差異顯著(p<0.05)，表5-15與此相同。表5灌胃渾濁戴阿利斯特菌后各組小鼠與灌胃前相比的體重增長(zhǎng)情況(圖2)表6灌胃組合菌后各組小鼠與灌胃前相比的體重增長(zhǎng)情況(圖3)結(jié)果如表4-6和圖1-3所示。結(jié)果表明，伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌、或其組合可有效減緩肥胖模型小鼠的體重的增長(zhǎng)(p<0.05)。(2)伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌對(duì)體脂比的影響。表7灌胃伴生糞球菌9周后各組小鼠的體脂比(圖4)分組脂肪重量/體重×100％ck2.83±0.13e菌14.11±0.10c菌24.00±0.26cd菌33.85±0.19dlp5.39±0.34bhf7.48±0.46a表8灌胃渾濁戴阿利斯特菌9周后各組小鼠的體脂比(圖5)分組脂肪重量/體重×100％ck2.91±0.14e菌43.97±0.22cd菌54.16±0.23c菌63.76±0.20dlp5.21±0.24bhf746±064a表9灌胃組合菌9周后各組小鼠的體脂比(圖6)分組脂肪重量/體重×100％ck2.90±0.13d菌1+53.73±0.19c菌2+63.87±0.23c菌3+43.93±0.22clp5.42±0.17bhf756±055a結(jié)果如表7-9和圖4-6所示。結(jié)果表明，伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌能顯著降低肥胖模型小鼠的體脂比(p<0.05)。(3)伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌對(duì)血脂的影響。表10灌胃伴生糞球菌9周后各組小鼠血脂含量(圖7)分組tc(mmol/l)tg(mmol/l)ldlc(mmol/l)hdlc(mmol/l)ck3.811±0.144d0.914±0.048d1.260±0.057e3.354±0.166a菌14.819±0.198c1.041±0.080c1.516±0.084c3.529±0.123a菌24.790±0.226c1.052±0.059c1.479±0.083cd3.510±0.160a菌34.823±0.251c1.073±0.057c1.457±0.102d3.479±0.158alp5.385±0.253b1.234±0.094b1.872±0.124b2.743±0.139bhf6299±0257a1303±0076a2381±0157a2193±0104c表11灌胃渾濁戴阿利斯特菌9周后各組小鼠血脂含量(圖8)分組tc(mmol/l)tg(mmol/l)ldlc(mmol/l)hdlc(mmol/l)ck3.892±0.154d0.983±0.047c1.250±0.036d3.376±0.202a菌44.896±0.230c1.012±0.072c1.395±0.082c3.497±0.093a菌54.906±0.247c1.014±0.054c1.353±0.076c3.439±0.160a菌64.917±0.201c1.069±0.070c1.364±0.071c3.421±0.195alp5.258±0.302b1.216±0.088b1.831±0.131b2.741±0.100bhf6.390±0.290a1.295±0.064a2.357±0.126a2.153±0.105c表12灌胃組合菌9周后各組小鼠血脂含量(圖9)分組tc(mmol/l)tg(mmol/l)ldlc(mmol/l)hdlc(mmol/l)ck3.902±0.111d0.964±0.046d1.213±0.060d3.287±0.239a菌1+54.822±0.139c1.019±0.067c1.369±0.077c3.324±0.177a菌2+64.904±0.182c1.017±0.061c1.367±0.077c3.249±0.215a菌3+44.834±0.192c1.009±0.060c1.381±0.082c3.252±0.140alp5.498±0.280b1.213±0.061b1.742±0.105b2.621±0.106bhf6.511±0.252a1.304±0.094a2.357±0.166a2.196±0.096c結(jié)果如圖7-9和表10-12所示。血脂中的主要成份是膽固醇和甘油三酯，血漿中膽固醇和甘油三脂水平的升高與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生有關(guān)。結(jié)果表明，伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌可降低血脂，降低動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)疾病(如心血管疾病)的相關(guān)指標(biāo)。并且，伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌降低總膽固醇(tc)、總甘油三酯(tg)和低密度脂蛋白(ldlc)，以及增加高密度脂蛋白(hdlc)的作用尤為明顯(p<0.05)。(4)伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌對(duì)瘦素(leptin，lep)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)的影響。表13灌胃伴生糞球菌9周后各組小鼠瘦素(leptin，lep)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)含量(圖10、圖13)表14灌胃渾濁戴阿利斯特菌9周后各組小鼠瘦素(leptin，lep)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)含量(圖11、圖14)分組mcp-1(pg/ml)lep(pg/ml)ck343.07±44.17c1162.93±96.41c菌4339.99±39.03c1158.48±130.63c菌5338.79±31.89c1166.22±136.26c菌6336.81±38.48c1158.43±111.51clp365.95±48.92b1264.09±158.29bhf383.04±45.92a1401.25±147.52a表15灌胃組合菌9周后各組小鼠瘦素(leptin，lep)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)含量(圖12、圖15)分組mcp-1(pg/ml)lep(pg/ml)ck336.55±38.88c1164.35±106.96c菌1+5335.85±31.27c1173.25±114.83c菌2+6333.48±31.21c1169.25±132.61c菌3+4330.36±35.21c1176.85±109.40clp366.47±24.75b1259.06±144.03bhf384.12±44.29a1401.18±179.66a結(jié)果如圖10-15及表13-15所示。結(jié)果顯示，伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌能明顯降低肥胖模型小鼠血清中的瘦素(lep)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mcp-1)的含量(p<0.05)。結(jié)果表明，伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌能夠改善瘦素抵抗，提高體內(nèi)對(duì)瘦素(lep)的敏感性；并且，經(jīng)過伴生糞球菌、渾濁戴阿利斯特菌或其組合菌治療后血清mcp-1水平降低，有利于改善胰島素抵抗，可降低動(dòng)脈粥樣硬化和心血管疾病發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。當(dāng)前第1頁12