本發(fā)明涉及一種黨參提取物的制備方法和新用途，特別涉及黨參提取物在制備用于治療肺動(dòng)脈高壓的藥物中的作用，屬于中醫(yī)藥領(lǐng)域范疇。
背景技術(shù)：
：肺動(dòng)脈高壓(pulmonaryarterialhypertension，pah)是以肺血管阻力和肺動(dòng)脈壓力進(jìn)行性升高為特點(diǎn)的一種病理生理狀態(tài)，其主要特征是由肺小動(dòng)脈收縮、血管增生與重構(gòu)而引起肺血管阻力進(jìn)行性升高，進(jìn)而引起右室負(fù)荷過重，導(dǎo)致右心室肥厚，最終可致患者死于右心衰竭。其血流動(dòng)力學(xué)診斷標(biāo)準(zhǔn)為：海平面靜息狀態(tài)下，右心導(dǎo)管檢測肺動(dòng)脈平均壓≥25mmhg。pah危害大、病死率高。pah產(chǎn)生機(jī)制尚未完全清楚，目前認(rèn)為其發(fā)生機(jī)制同改變一氧化氮信號(hào)通路信號(hào)分子、肺血管炎癥損傷以及氧化-抗氧化系統(tǒng)平衡失衡等作用有關(guān)。目前pah的靶向治療藥物主要有3類，包括前列環(huán)素類似物、內(nèi)皮素受體拮抗劑(endothelinreceptorantagonists，era)和磷酸二酯酶5（phosphodiesterase，pde-5）抑制劑，其應(yīng)用可明顯改善患者的生存時(shí)間和生存狀況。三類靶向藥物在pah的治療地位毋庸質(zhì)疑，但總體來說，pah的藥物治療效果未能讓人滿意，仍然有很多pah患者因右心衰竭而死亡；或者接受正規(guī)治療后仍有嚴(yán)重的癥狀，難以提高生活質(zhì)量，且pah靶向治療藥物多為進(jìn)口藥物，價(jià)格昂貴，未列入基本醫(yī)療保險(xiǎn)藥品目錄，且肝臟毒性作用明顯，而長期聯(lián)合服藥又是pah患者必須面對(duì)的問題。因此，發(fā)揮中醫(yī)藥優(yōu)勢，尋找安全、經(jīng)濟(jì)的治療pah的中藥，對(duì)改善pah患者的預(yù)后和提高其生活質(zhì)量具有重要意義。黨參是我國傳統(tǒng)名貴中藥材，《中華人民共和國藥典》2005版收載的黨參為桔梗科(campanulaceae)植物黨參codonopisispilosula(franch.)nannf.、素花黨參codonopsispilosulanannf.var.modesta(nannf.)l.t.shen或川黨參codonopisistangshenoliv.的干燥根。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，黨參具有補(bǔ)中益氣、生津止渴、活血化瘀、調(diào)理脾胃、健脾益肺等作用?，F(xiàn)代藥理研究表明，黨參具有調(diào)節(jié)血糖，促進(jìn)造血機(jī)能，降壓，抗缺氧，耐疲勞，增強(qiáng)機(jī)體免疫力，抗腫瘤，增強(qiáng)記憶和提高學(xué)習(xí)能力，調(diào)節(jié)胃收縮及抗?jié)兊榷喾N作用，應(yīng)用前景非常廣泛。發(fā)明人通過研究，發(fā)現(xiàn)黨參提取物可以降低pah大鼠的肺動(dòng)脈壓力作用和右心室肥大指數(shù)，可用于防治肺動(dòng)脈高壓及肺動(dòng)脈高壓引起的相關(guān)心血管疾病。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供可用于防治肺動(dòng)脈高壓的黨參提取物的制備方法。本發(fā)明所述的黨參提取物，可通過以下方法制備：黨參藥材，洗凈，切碎，用水煎煮3次，每次時(shí)間一般為0.5～1h，每次用水量為藥材重量的5～15倍，合并煎煮液，濃縮，加到已處理好的大孔吸附樹脂上，先后以水、25～95%（v/v）的乙醇溶液洗脫，收集乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得。所用的乙醇洗脫液濃度優(yōu)選30～70%（v/v）。大孔吸附樹脂優(yōu)選hpd100型或d101型。本發(fā)明所述的黨參提取物在用于防治肺動(dòng)脈高壓藥物中的應(yīng)用，其特征為口服，每日人服用劑量為100~900mg?？诜o藥的固體藥物制劑可以是片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、滴丸、顆粒劑、散劑、丸劑等?？梢园凑账鼈兊某Ｒ?guī)制備方法制備而成，在制備的過程中使用可以藥用的輔料。例如，在片劑或膠囊劑的制備過程中可以使用填充劑（例如淀粉、糊精、蔗糖、乳糖、硫酸鈣、碳酸鈣、微精纖維素等）、黏合劑（如甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基淀粉鈉、明膠、玉米淀粉等）、崩解劑（如干燥淀粉、交聯(lián)羧甲基淀粉鈉、羧甲基淀粉鈉、低取代羥丙基纖維素等）、潤滑劑（如硬脂酸鎂、硬脂酸、微粉硅膠、聚乙二醇、滑石粉等）。片劑還可以按照目前已知的方法包衣。顆粒劑還需要選用相應(yīng)的矯味劑（如蔗糖、枸櫞糖漿等）。口服液體制劑可以是合劑（口服液）、糖漿劑、乳劑、混懸劑、酏劑或懸浮液，還可以是在其使用前用水或者其他合適的載體沖調(diào)服用的干燥產(chǎn)品。這些液體制劑可以按照本身已知的方法制備，在制備的過程中可以使用藥用添加劑，如懸浮劑（如纖維素衍生物、葡萄糖/蔗糖糖漿、山梨醇糖漿等）、乳化劑（如阿拉伯膠、大豆磷脂、卵磷脂、明膠、吐溫類等）、助懸劑（如甘油、單糖漿、單硬脂酸鋁植物油、膠體硫酸鎂鋁等）、防腐劑（如苯甲酸、羥基苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、山梨酸等）。根據(jù)需要還可以加入矯味物質(zhì)、芬香成分、甜味劑等。本發(fā)明所治療的肺動(dòng)脈高壓為特發(fā)性肺動(dòng)脈高壓、遺傳性肺動(dòng)脈高壓、藥物和毒物相關(guān)性肺動(dòng)脈高壓、危險(xiǎn)因素或疾病相關(guān)性肺動(dòng)脈高壓、肺靜脈閉塞病和(或)肺毛細(xì)血管瘤樣病所致的肺動(dòng)脈高壓、新生兒持續(xù)性肺動(dòng)脈高壓中的任意一種或幾種病癥。本發(fā)明所治療的遺傳性肺動(dòng)脈高壓為bmpr2、alkl、eng、smad9、cav1、kcnk3中一個(gè)或過個(gè)基因突變導(dǎo)致的肺動(dòng)脈高壓。本發(fā)明所治療的危險(xiǎn)因素或疾病相關(guān)性肺動(dòng)脈高壓為結(jié)締組織病、hiv感染、門靜脈高壓、遺傳性心臟病、血吸蟲病、慢性溶血性貧血等一種或多種因素導(dǎo)致的肺動(dòng)脈高壓。具體實(shí)施方式下面通過具體實(shí)施例對(duì)該發(fā)明作進(jìn)一步的描述。實(shí)施例1：防治肺動(dòng)脈高壓的黨參提取物制備方法：取黨參藥材500g，洗凈、切碎，用水煎煮3次，每次0.5h，每次用水4l，合并煎煮液，減壓濃縮，加到已處理好的1kghpd100型大孔吸附樹脂柱上，先用水洗至收集液無色，再用60%乙醇洗脫至無色或很淺，收集60%乙醇洗脫液，濃縮干燥，即得黨參提取物。實(shí)施例2：黨參提取物對(duì)肺葉切除聯(lián)合野百合堿引起sd大鼠肺動(dòng)脈壓高壓的影響2.1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：sd大鼠，3月齡，雄性，200±20g，48只2.2實(shí)驗(yàn)藥物及器材：黨參提取物、野百合堿（購自sigma公司）、水合氯醛、烏拉坦、壓力換能器和powerlab生理信息采集與處理系統(tǒng)2.3采用肺葉切除聯(lián)合野百合堿（mct）注射建立重度pah模型：大鼠稱體重，12%烏拉坦經(jīng)腹腔注射（8ml/kg）麻醉后，16g動(dòng)靜脈留置針行氣管插管，連接harvard呼吸機(jī)(潮氣量2ml；頻率，80次/分；peep1.0cmh20。左側(cè)第四肋間進(jìn)胸，結(jié)扎并切除左側(cè)肺葉，大鼠肺葉為左側(cè)1葉，右側(cè)4葉，關(guān)胸。手術(shù)結(jié)束后脫離呼吸機(jī)，保暖、持續(xù)吸氧4小時(shí)。繼續(xù)飼養(yǎng)1周后，按60mg/kg單次腹腔注射mct，mct注射1周后開始給藥，給藥4周?？瞻讓?duì)照組：假手術(shù)+生理鹽水（等體積i.p.）1次+給予生理鹽水（i.g）模型組：肺葉切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+給予等體積生理鹽水（i.g）黨參提取物低劑量組：肺葉切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+給予受試藥（25mg/kg/d，i.g）黨參提取物中劑量組：肺葉切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+受試藥（50mg/kg/d，i.g）黨參提取物高劑量組：肺葉切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+給予受試藥（100mg/kg/d，i.g）陽性藥組：肺葉切除（1周后）+mct（60mg/kg，i.p.）1次+給予西地那非（7.5mg/kg/d）2.4血流動(dòng)力學(xué)測量和右心室肥厚檢測：mct注射后第4周，測量大鼠平均肺動(dòng)脈壓。大鼠以10%水合氯醛(3ml/kg)腹腔內(nèi)注射麻醉后，從右頸外靜脈插管至肺動(dòng)脈干，接壓力換能器和powerlab生理信息采集與處理系統(tǒng)(adinstruments)，當(dāng)置入導(dǎo)管進(jìn)入右心室穩(wěn)定后記錄其右室收縮壓（rvsp），監(jiān)護(hù)儀出現(xiàn)肺動(dòng)脈波形時(shí)，待其穩(wěn)定后記錄平均肺動(dòng)脈壓(mpap)。測完rvsp后，完整切下大鼠心臟，沿房室交界處剪去左右心房及大血管，分離右心室(rv)和左心室+室間隔(lv+s)，用濾紙吸干水分后稱質(zhì)量，計(jì)算rv/(lv+s)值即右心室肥厚指數(shù)(rvhi)。2.5統(tǒng)計(jì)分析：應(yīng)用spss17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)均以mean±s.e表示，組間比較采用單因素方差分析。p<0.05為差異有顯著性意義。2.6實(shí)驗(yàn)結(jié)果2.6.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物死亡情況：本實(shí)驗(yàn)共用sd大鼠48只，死亡2只，mct組死亡2只，大鼠死亡前表現(xiàn)為呼吸困難、口鼻發(fā)紺。2.6.2黨參提取物對(duì)pah大鼠rvsp的結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組比較，模型組與各給藥組均有顯著性差異(p<0.001)；與模型組比較，黨參提取物低劑量(p<0.05)、黨參提取物中劑量(p<0.01)和高劑量(p<0.01)、西地那非組(p<0.01)能顯著降低rvsp；與陽性藥比較，黨參提取物高劑量組對(duì)pah大鼠rvsp的降低效果更顯著。2.6.3黨參提取物對(duì)pah大鼠mpap的結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組比較，模型組與各給藥組均有顯著性差異(p<0.001)；與模型組比較，黨參提取物中劑量(p<0.05)和高劑量(p<0.01)、西地那非(p<0.01)組能顯著降低mpap；與陽性藥比較，黨參提取物各組對(duì)pah大鼠mpap的降低效果沒有顯著性差異。2.6.4黨參提取物對(duì)pah大鼠rvhi的結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組比較，模型組與各給藥組均有顯著性差異(p<0.001)；與模型組比較，黨參提取物中劑量(p<0.05)和高劑量(p<0.05)能顯著降低rvhi；與陽性藥比較，黨參提取物高劑量組對(duì)pah大鼠rvhi的降低效果更好（見表1）。表1.黨參提取物對(duì)pah大鼠rvsp、mpap、rvhi的影響組別nrvsp(mmhg)mpap(mmhg)rvhi(%)空白對(duì)照組820.73±0.3213.07±0.2722.33±0.42模型組643.23±0.79###34.62±0.92###52.17±1.19###黨參提取物低劑量組838.01±0.73*###32.33±0.94###47.86±1.02###黨參提取物中劑量組836.25±1.46**###28.94±1.28*###46.62±1.75*###黨參提取物高劑量組833.74±1.12**##27.58±0.89**###39.81±1.69*###西地那非組836.54±1.09**###26.23±1.07**###48.33±1.85###注：與正常組比較##p﹤0.01，###p﹤0.001；與模型組比較*p﹤0.05，**p﹤0.01以上結(jié)果說明，黨參提取物對(duì)肺葉切除聯(lián)合野百合堿引起sd大鼠肺動(dòng)脈壓高壓的平均肺動(dòng)脈壓(mpap)、右室收縮壓（rvsp），右心室肥厚指數(shù)(rvhi)有明顯減輕作用。黨參提取物具有防治pah的作用。當(dāng)前第1頁12