一種越橘的提取方法及越橘葉黃素軟膠囊的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種越橘的提取方法及越橘葉黃素軟膠 囊。
【背景技術(shù)】
[0002] 免疫力是人體自身的防御機(jī)制，是人體識(shí)別和消滅外來侵入的任何異物(病毒、細(xì) 菌等），處理衰老、損傷、死亡、變性的自身細(xì)胞以及識(shí)別和處理體內(nèi)突變細(xì)胞和病毒感染細(xì) 胞的能力?，F(xiàn)代免疫學(xué)認(rèn)為，免疫力是人體識(shí)別和排除"異己"的生理反應(yīng)。人體內(nèi)執(zhí)行這一 功能的是免疫系統(tǒng)。目前越橘保健品成分單一，起不到應(yīng)有的效果。迄今為止，人們正在尋 找一種制作簡單、服用方便的提高免疫力的中藥保健品。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 發(fā)明目的：為了解決上述問題，本發(fā)明的目的在于提供一種越橘的提取方法及越 橘葉黃素軟膠囊。
[0004] 技術(shù)方案:本發(fā)明的目的是通過如下的方案實(shí)現(xiàn)的：
[0005] -種越橘的提取方法，步驟如下:將越橘洗凈、烘干，并粉碎，放入連續(xù)逆流超聲提 取機(jī)中，加入乙醇水溶液后超聲逆流提取，過濾提取液，收集濾液和濾渣，濾渣再重復(fù)超聲 逆流提取2-3次，且每次提取后再過濾，合并濾液，減壓濃縮，回收乙醇，至60°C時(shí)相對(duì)密度 為1.05-1.25的清膏；醇沉24h，用微孔濾膜過濾，濾液減壓回收乙醇，并濃縮成60°C時(shí)相對(duì) 密度為1.20-1.30的清膏，減壓真空干燥即得越橘提取物。
[0006] 所述的連續(xù)逆流超聲提取機(jī)為單級(jí)式6節(jié)管，其中1-2節(jié)為浸泡提取管，3-6節(jié)為超 聲提取管，加入為原藥粉8倍量的50%乙醇水溶液在超聲波功率為40-80KHZ的室溫條件下 每次超聲逆流提取30_45min。
[0007] 所述的超聲逆流提取后的合并濾液是在真空度0.85~0.95Mpa，60°C減壓濃縮成 1.05-1.25 的清膏。
[0008] -種具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊，它所含的活性成分由下列重量份原料 配比制備而成:越橘提取物2份、葉黃素2份、華千金藤25份、破布草28份、水翁花20份、大田 基黃25份、剪紅紗花20份、甘草6份，越橘提取物為上述方法制備而得。
[0009] 所述具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊，制備方法步驟為:取上述除越橘提取 物外其他藥材合并，加水煎煮兩次，合并煎液，濃縮至65 °C時(shí)相對(duì)密度為1.10-1.20,加入乙 醇，攪拌，使含醇量按體積百分比計(jì)算達(dá)65-85%，靜置，過濾，濾液減壓濃縮至65°C時(shí)相對(duì) 密度為1.20-1.30并回收乙醇，將濃縮液噴霧干燥，所得顆粒粉碎成干浸膏粉，加入越橘提 取物、葉黃素和輔料，制成越橘葉黃素軟膠囊。
[0010] 所述具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊，制備方法中煎煮條件為:第一次加水 量為藥材重量的8-12倍量，煎煮1-2h，第二次加水量為藥材重量的6-10倍量，煎煮1-2h。
[0011] 所述具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊，制備方法中噴霧干燥條件為:進(jìn)風(fēng)溫 度為90-110°C，出風(fēng)溫度為60-90°C，物料溫度為60-90°C，霧化壓力為0.2-0.5兆帕，噴霧速 度為 l-10ml/s。
[0012] 所述具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊在制備提高免疫力保健品中的應(yīng)用。
[0013] 上述越橘為杜鵲花科烏飯樹屬植物越橘Vaccinium vitis-idaea L.，以葉、果入 藥。全年采葉，陰干或鮮用；果秋后采，曬干。葉黃素由洛陽貝加爾化工產(chǎn)品有限公司生產(chǎn)， 別名類胡蘿卜素、胡蘿卜醇、植物黃體素、核黃體、萬壽菊花素及植物葉黃素等，英文名為 Lutein，分子式為C40H5602，相對(duì)分子量為568.85。橙黃色粉末，漿狀或液體，不溶于水，溶 于己烷等有機(jī)溶劑。
[0014] 華千金藤為防己科千金藤屬植物華千金藤StephaniasinicaDiels，以塊根入藥。 清熱解毒，散瘀止痛。用于上呼吸道感染，咽喉炎，胃痛，急性腸胃炎，細(xì)菌性痢疾，瘧疾，風(fēng) 濕疼痛，外傷疼痛;外用治跌打損傷，毒蛇咬傷，瘡瘍腫毒。
[0015] 破布草為唇形科植物野甘露的全草或根。夏、秋采集，洗凈曬干。消炎解毒，拔膿。 治瘡癤，骨髓炎，用鮮草搗爛敷患處。本發(fā)明以全草入藥。
[0016] 水翁花為桃金娘科水格屬植物水格Cleistocalyx operculatus(Roxb. )Merr.et Perry的花蕾，其葉、根、樹皮亦供藥用。初夏采集帶花蕾的花序，淋濕堆放數(shù)日，稍曬后再堆 放悶1~2天，然后再曬再悶，直至全干變成黑色。夏、秋采伐干枝，去掉粗皮及木心，留二層 皮曬干。夏季采葉曬干。清暑解表，去濕消滯，消炎止癢。本發(fā)明以花蕾入藥。
[0017] 大田基黃為報(bào)春花科排草屬植物紅根排草Lysimachia fortunei Maxim.，以全草 入藥。夏、秋采收，洗凈，曬干，切段或扎把備用。清熱利濕，活血調(diào)經(jīng)。用于感冒，咳嗽咯血， 腸炎，痢疾，肝炎，疳積，瘧疾，風(fēng)濕關(guān)節(jié)痛，痛經(jīng)，閉經(jīng)，白帶；乳腺炎，結(jié)膜炎，蛇咬傷，跌打 損傷。
[0018] 剪紅紗花，拉丁學(xué)名Lychnis senno Sieb.et Zucc.，為石竹科植物剪秋羅的帶根 全草。治跌打損傷、熱淋、小便不利、感冒、風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。其余為藥典品種。
[0019] 有益效果:免疫力低按中醫(yī)說法就是正氣不足。治療上不僅要補(bǔ)虛扶正，也應(yīng)活血 化瘀、清熱解毒。因此本方中華千金藤、破布草、水翁花清熱解毒，散瘀止痛為君藥，大田基 黃、剪紅紗花活血調(diào)經(jīng)為臣藥，越橘、葉黃素、甘草為佐使藥，諸藥相合，共奏益氣活血，用于 提高免疫力。
【具體實(shí)施方式】
[0020] 以下通過實(shí)施例形式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說明，但不應(yīng)將此 理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均 屬于本發(fā)明的范圍。
[0021 ]實(shí)施例1:取越橘Ikg洗凈、烘干，并粉碎，放入連續(xù)逆流超聲提取機(jī)中，加入乙醇水 溶液后超聲逆流提取，過濾提取液，收集濾液和濾渣，濾渣再重復(fù)超聲逆流提取2次，且每次 提取后再過濾，合并濾液，減壓濃縮，真空度〇. 85Mpa，回收乙醇，至60°C時(shí)相對(duì)密度為1.25 的清膏；醇沉24h，用微孔濾膜過濾，濾液減壓回收乙醇，并濃縮成60°C時(shí)相對(duì)密度為1.20的 清膏，減壓真空干燥即得越橘提取物。連續(xù)逆流超聲提取機(jī)為單級(jí)式6節(jié)管，其中1-2節(jié)為浸 泡提取管，3-6節(jié)為超聲提取管，加入為原藥粉8倍量的50%乙醇水溶液在超聲波功率為 40KHz的室溫條件下每次超聲逆流提取45min。
[0022] 實(shí)施例2:取越橘Ikg洗凈、烘干，并粉碎，放入連續(xù)逆流超聲提取機(jī)中，加入乙醇水 溶液后超聲逆流提取，過濾提取液，收集濾液和濾渣，濾渣再重復(fù)超聲逆流提取3次，且每次 提取后再過濾，合并濾液，減壓濃縮，真空度〇. 95Mpa，回收乙醇，至60°C時(shí)相對(duì)密度為1.05 的清膏；醇沉24h，用微孔濾膜過濾，濾液減壓回收乙醇，并濃縮成60°C時(shí)相對(duì)密度為1.30的 清膏，減壓真空干燥即得越橘提取物。所述的連續(xù)逆流超聲提取機(jī)為單級(jí)式6節(jié)管，其中1-2 節(jié)為浸泡提取管，3-6節(jié)為超聲提取管，加入為原藥粉8倍量的50 %乙醇水溶液在超聲波功 率為80KHz的室溫條件下每次超聲逆流提取30min。
[0023] 實(shí)施例3:取越橘1.3kg洗凈、烘干，并粉碎，放入連續(xù)逆流超聲提取機(jī)中，加入乙醇 水溶液后超聲逆流提取，過濾提取液，收集濾液和濾渣，濾渣再重復(fù)超聲逆流提取2-3次，且 每次提取后再過濾，合并濾液，減壓濃縮，真空度0.9Mpa，回收乙醇，至60°C時(shí)相對(duì)密度為 1.10的清膏；醇沉24h，用微孔濾膜過濾，濾液減壓回收乙醇，并濃縮成60°C時(shí)相對(duì)密度為 1.25的清膏，減壓真空干燥即得越橘提取物。所述的連續(xù)逆流超聲提取機(jī)為單級(jí)式6節(jié)管， 其中1-2節(jié)為浸泡提取管，3-6節(jié)為超聲提取管，加入為原藥粉8倍量的50 %乙醇水溶液在超 聲波功率為60KHz的室溫條件下每次超聲逆流提取40min。
[0024] 實(shí)施例4:取華千金藤25g、破布草28g、水翁花20g、大田基黃25g、剪紅紗花20g、甘 草6g藥材混合，加水煎煮兩次，第一次加水為藥材重量的8倍量，煎煮1.5h，第二次加水為藥 材重量的6倍量，煎煮Ih，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1. 10 (65 °C )，加適量乙醇使 含醇量(體積分?jǐn)?shù))達(dá)65 %，攪拌，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.10 (65°C )的浸膏，經(jīng)噴霧干燥(條件為進(jìn)風(fēng)溫度為100°C，出風(fēng)溫度為80°C，物料溫度為70°C， 霧化壓力為0.2兆帕，噴霧速度為5ml/s。），粉碎成干浸膏粉，再加入上述實(shí)施例1制備的越 橘提取物2g、葉黃素2g，按常規(guī)工藝制備成軟膠囊。
[0025]實(shí)施例5:取華千金藤25g、破布草28g、水翁花20g、大田基黃25g、剪紅紗花20g、甘 草6g藥材混合，加水煎煮兩次，第次加水為藥材重量的10倍量，煎煮2h，第二次加水為藥材 重量的8倍量，煎煮Ih，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.15 (65 °C )，加適量乙醇使含 醇量(體積分?jǐn)?shù))達(dá)75 %，攪拌，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度1.25 (65 °C)的浸膏，經(jīng)噴霧干燥(條件為進(jìn)風(fēng)溫度為120°C，出風(fēng)溫度為90°C，物料溫度為80°C，霧化 壓力為0.3兆帕，噴霧速度為7.5/s。），粉碎成干浸膏粉，再加入上述實(shí)施例1制備的越橘提 取物2g、葉黃素 2g，按常規(guī)工藝制備成軟膠囊。
[0026]實(shí)施例6:取華千金藤25g、破布草28g、水翁花20g、大田基黃25g、剪紅紗花20g、甘 草6g藥材混合，加水煎煮兩次，第一次加水為藥材重量的10倍量，煎煮1.5h，第二次加水為 藥材重量的8倍量，煎煮1.5h，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對(duì)密度1.15(65°C )，加適量乙 醇使含醇量(體積分?jǐn)?shù))達(dá)75 %，攪拌，靜置24小時(shí)，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至相對(duì)密度 1.25(65°C)的浸膏，經(jīng)噴霧干燥(條件為進(jìn)風(fēng)溫度為120°C，出風(fēng)溫度為90°C，物料溫度為90 °C，霧化壓力為0.4兆帕，噴霧速度為7.5/s。），粉碎成干浸膏粉，加入上述實(shí)施例1制備的越 橘提取物2g、葉黃素2g，按常規(guī)工藝制備成軟膠囊。
[0027]實(shí)施例7:本發(fā)明提高免疫力的藥效學(xué)研究
[0028]實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河貌煌瑵舛鹊谋景l(fā)明灌胃小鼠30d，比較本發(fā)明和正常組小鼠受ConA誘 導(dǎo)的脾臟淋巴細(xì)胞增殖的差別，來判斷本發(fā)明是否增強(qiáng)脾臟淋巴細(xì)胞增殖。
[0029]實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:昆明種小鼠，雄性，體重18_22g，上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，生 產(chǎn)許可證:SCXK(滬)2007-0005。
[0030] 實(shí)驗(yàn)藥物:按上述4實(shí)施例的制備方法制備。
[0031] 實(shí)驗(yàn)步驟:小鼠，按體重分層隨機(jī)分組，每組12只。如下表所示，正常組灌胃給水； 鹽酸左旋咪唑組灌胃鹽酸左旋咪唑；復(fù)方低、中、高劑量組分別灌胃1，2，4g · kg+1本發(fā)明樣 品，各組連續(xù)灌胃給藥30d。無菌取脾，按照常規(guī)制成單個(gè)細(xì)胞懸液，調(diào)整細(xì)胞濃度為5 X IO5 個(gè)/mL。將脾細(xì)胞混懸液加在24孔板中，每孔lmL，每只動(dòng)物設(shè)二個(gè)復(fù)孔，一孔正常培養(yǎng)(加 50uL PRMI1640培養(yǎng)液）；一孔加50uL刀豆蛋白A(ConA)液（終濃度為4.76ug/mL)。置于5% 0)2,37°(^0 2孵箱中培養(yǎng)4811。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前411，每孔吸去上清液700此，再加入700此不含胎牛 血清的PRMI1640培養(yǎng)液，同時(shí)每孔加入50uL 5mg/mL的MTT液。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加 ImL酸性 異丙醇，小心吹打均勻至紫色的結(jié)晶全部溶解。檢測前分裝到96孔培養(yǎng)板中，每孔作4個(gè)復(fù) 孔，在570nm波長處測定其光密度值。
[0032]實(shí)驗(yàn)結(jié)果:本發(fā)明組小鼠脾臟淋巴細(xì)胞受ConA誘導(dǎo)后的增殖率轉(zhuǎn)化值顯著高于正 常組小鼠，如下表所示。
[0033] 表1本發(fā)明對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖的影響（T±SD.n = 12)

[0035] 注：與正常組相比"^PSO.OI/PSO.OS。
[0036] 結(jié)論:本發(fā)明能夠增強(qiáng)脾臟淋巴增殖，因此本發(fā)明能提高免疫力，可用于制備提高 免疫力功效保健品。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種越橘的提取方法，其特征是步驟如下:將越橘洗凈、烘干，并粉碎，放入連續(xù)逆流 超聲提取機(jī)中，加入乙醇水溶液后超聲逆流提取，過濾提取液，收集濾液和濾渣，濾渣再重 復(fù)超聲逆流提取2-3次，且每次提取后再過濾，合并濾液，減壓濃縮，回收乙醇，至60°C時(shí)相 對(duì)密度為1.05-1.25的清膏；醇沉24h，用微孔濾膜過濾，濾液減壓回收乙醇，并濃縮成60°C 時(shí)相對(duì)密度為1.20-1.30的清膏，減壓真空干燥即得越橘提取物。2. 如權(quán)利要求1所述越橘的提取方法，其特征是所述的連續(xù)逆流超聲提取機(jī)為單級(jí)式6 節(jié)管，其中1-2節(jié)為浸泡提取管，3-6節(jié)為超聲提取管，加入為原藥粉8倍量的50 %乙醇水溶 液在超聲波功率為40-80KHZ的室溫條件下每次超聲逆流提取30-45min。3. 如權(quán)利要求1所述越橘的提取方法，其特征是所述超聲逆流提取后的合并濾液是在 真空度0 · 85~0 · 95Mpa，60°C減壓濃縮成1 · 05-1 · 25的清膏。4. 一種具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊，其特征在于，它所含的活性成分由下列 重量份原料配比制備而成:越橘提取物2份、葉黃素2份、華千金藤25份、破布草28份、水翁花 20份、大田基黃25份、剪紅紗花20份、甘草6份，越橘提取物為上述權(quán)利要求1的方法制備而 得。5. 如權(quán)利要求4所述具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊，其特征在于，制備方法步驟 為:取上述除越橘提取物、葉黃素外其他藥材合并，加水煎煮兩次，合并煎液，濃縮至65 °C時(shí) 相對(duì)密度為1.10-1.20，加入乙醇，攪拌，使含醇量按體積百分比計(jì)算達(dá)65-85%，靜置，過 濾，濾液減壓濃縮至65 °C時(shí)相對(duì)密度為1.20-1.30并回收乙醇，將濃縮液噴霧干燥，所得顆 粒粉碎成干浸膏粉，加入越橘提取物、葉黃素和輔料，制成軟膠囊。6. 如權(quán)利要求5所述具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊，其特征在于，制備方法中煎 煮條件為:第一次加水量為藥材重量的8-12倍量，煎煮1-2h，第二次加水量為藥材重量的6-1〇倍量，煎煮1_211。7. 如權(quán)利要求5所述具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊，其特征在于，制備方法中噴 霧干燥條件為:進(jìn)風(fēng)溫度為90_110°C，出風(fēng)溫度為60-90°C，物料溫度為60-90°C，霧化壓力 為0.2-0.5兆帕，噴霧速度為l-10ml/s。8. 如權(quán)利要求4所述具有提高免疫力的越橘葉黃素軟膠囊在提高免疫力保健品中的應(yīng) 用。
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥領(lǐng)域，公開了一種越橘的提取方法，將越橘洗凈、烘干，并粉碎，放入連續(xù)逆流超聲提取機(jī)中，加入乙醇水溶液后超聲逆流提取，過濾提取液，收集濾液和濾渣，濾渣再重復(fù)超聲逆流提取2?3次，且每次提取后再過濾，合并濾液，減壓濃縮，回收乙醇，至60℃時(shí)相對(duì)密度為1.05?1.25的清膏；醇沉24h，用微孔濾膜過濾，濾液減壓回收乙醇，并濃縮成60℃時(shí)相對(duì)密度為1.20?1.30的清膏，減壓真空干燥即得越橘提取物，并公開以越橘提取物做成復(fù)方軟膠囊，還公開了其在制備具有提高免疫力功效保健品中的應(yīng)用。
【IPC分類】A61P37/04, A23L33/00, A61K9/48, A61K36/61, A61K31/047, A61K36/45
【公開號(hào)】CN105708884
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201610148025
【發(fā)明人】李正梅
【申請(qǐng)人】李正梅