相關(guān)申請資料本申請依據(jù)PCT第I章條款8和35U.S.C.§119(e)，在此要求獲得于2007年6月4日提交的美國臨時(shí)專利順序號(hào)60/933,202和于2008年2月7日提交的美國臨時(shí)專利順序號(hào)61/026,835的優(yōu)先權(quán)，二者都在此引作參考。發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及用于治療包括椎體在內(nèi)的脊柱結(jié)構(gòu)的組合物和方法發(fā)明背景肌骨骼問題遍布所有年齡組及兩性人群。根據(jù)美國矯形外科醫(yī)師協(xié)會(huì)(AmericanAcademyofOrthopedicSurgeons,AAOS)2003年年會(huì)提出的大量公開的文章，一半美國人在其一生的某個(gè)時(shí)間需要骨折服務(wù)。根據(jù)該報(bào)告，美國每年超過一百億美元花費(fèi)在與骨折治療有關(guān)的住院護(hù)理上。椎骨壓縮性骨折(Vertebralcompressionfracture,VCF)是最常見的骨質(zhì)疏松性骨折，在約20％的絕經(jīng)后婦女中發(fā)生(Eastell等,JBoneMinerRes1991；6:207-215)。估計(jì)每年發(fā)生700,000例VCF，而這些病例中僅250,000受到診斷和治療。由于這些骨折未得到治療，因而骨質(zhì)疏松癥可能也未得到治療并迅速發(fā)展。絕經(jīng)后婦女在未來一年內(nèi)繼續(xù)發(fā)生另一次椎骨骨折的風(fēng)險(xiǎn)增加5倍，包括髖骨折在內(nèi)的其它脆弱性骨折的風(fēng)險(xiǎn)增加2倍(Klotzbuecher等,JBoneMinerRes,2000；15:721-739)。當(dāng)椎體終板之一或兩者破裂時(shí)則發(fā)生VCF，終板破裂通常由創(chuàng)傷引起，導(dǎo)致前柱故障并使椎骨對(duì)在日常生活活動(dòng)中的身體的支撐變?nèi)酢Ｓ晒琴|(zhì)疏松癥引起的椎骨壓縮性骨折可導(dǎo)致虛弱性背痛、脊柱畸形和身高縮減。表現(xiàn)癥狀的椎骨骨折和無癥狀的椎骨骨折二者都與高發(fā)病率和死亡率有關(guān)。隨著預(yù)期骨質(zhì)疏松癥風(fēng)險(xiǎn)的老年人人數(shù)在未來十年急劇增加，需要準(zhǔn)確鑒定VCF和治療介入以降低該疾病對(duì)患者和健康護(hù)理系統(tǒng)的巨大的潛在影響。傳統(tǒng)上一直用臥床休息、麻醉性鎮(zhèn)痛藥、支具(brace)和物理療法來治療由骨質(zhì)疏松癥引起的VCF。然而，臥床休息導(dǎo)致骨丟失加速和身體去適應(yīng)作用(physicaldeconditioning)，使患者進(jìn)一步惡化以及促進(jìn)骨質(zhì)疏松癥問題。此外，麻醉藥的使用可使在老年人中可能本已普遍存在的情緒和心理問題更惡化。另外，支具的穿戴不能為老年人所耐受。盡管目前骨質(zhì)疏松癥的治療(例如激素替代、二膦酸鹽、降鈣素和甲狀旁腺激素(PTH)類似物)能解決長期的問題，但除降鈣素外，一旦發(fā)生骨折在鎮(zhèn)痛方面它們都不能提供立即的益處(Kapuscinski等，MasterMed.Pol.1996；28：83-86)。目前業(yè)已開發(fā)了用于椎骨壓縮性骨折的微創(chuàng)療法：椎體成形術(shù)(vertebroplasty)和椎體后凸成形術(shù)(kyphoplasty)，以解決疼痛和骨折穩(wěn)定化問題。椎體成形術(shù)是為了穩(wěn)定骨骼的目的填充骨折的椎體，防止進(jìn)一步塌陷并消除急性骨折疼痛。然而，椎體成形術(shù)并不企圖恢復(fù)椎骨高度和/或矢狀位排列(sagittalalignment)。另外，因?yàn)樵诠趋乐袥]有空隙，用粘性較小的粘固劑進(jìn)行椎骨填充較難操控，因此填充物往往會(huì)滲漏。椎體后凸成形術(shù)是具有安全目的的微創(chuàng)手術(shù)方法，其改善脊椎高度并穩(wěn)定VCF。在X射線圖像引導(dǎo)下，在骨折的椎體中使可擴(kuò)張的骨球囊(bonetamp)膨脹。這使內(nèi)部的松質(zhì)骨緊密，因?yàn)槠鋵⑵屏训钠油苹仄湔Ｎ恢?。然后可通過用控制體積下的生物材料與更具粘性的粘固劑填充空隙來進(jìn)行固定。盡管椎體后凸成形術(shù)被認(rèn)為是椎骨壓縮性骨折的安全有效的治療，但生物力學(xué)研究證明粘固劑的增加對(duì)相鄰節(jié)段(level)產(chǎn)生了額外壓力。事實(shí)上，這種硬度增加可使鄰近椎骨失效(failure)的極限負(fù)荷降低8-30％，并引起隨后的骨折(Berlemann等.，JBoneJointSurgeryBR，2002；84：748-52)。本文將椎體成形術(shù)或椎體后凸成形術(shù)后的一處或多處椎體壓縮性骨折稱為“二次椎骨壓縮性骨折”。在最近的臨床研究中，與未治療的骨折的歷史數(shù)據(jù)相比，在椎體后凸成形術(shù)后觀察到二次椎骨壓縮性骨折較高的發(fā)生率。這些病例中的大部分在所述方法后2個(gè)月內(nèi)發(fā)生在相鄰節(jié)段。在這兩個(gè)月時(shí)間之后，僅有偶然的二次椎骨壓縮性骨折發(fā)生在遠(yuǎn)處節(jié)段。該研究確證了顯示的粘固劑增加對(duì)相鄰節(jié)段產(chǎn)生了額外壓力的生物力學(xué)研究(Fribourg等.，Incidenceofsubsequentvertebralfractureafterkyphoplasty(椎體后凸成形術(shù)后并發(fā)的椎骨骨折的發(fā)生率)，Spine，2004；20；2270-76)。既然用于治療椎骨壓縮性骨折的微創(chuàng)手術(shù)技術(shù)的使用增加了發(fā)病率，并且相鄰椎骨易于經(jīng)受二次壓縮性骨折，那么對(duì)于預(yù)防性治療和防止二次VCF存在未滿足的臨床需要。發(fā)明簡述本發(fā)明提供用于治療包括椎體在內(nèi)的脊柱結(jié)構(gòu)的組合物和方法。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，提供用于促進(jìn)在椎體中的骨形成的組合物。在其它實(shí)施方案中，提供用于預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折的可能性的組合物和方法。在另一實(shí)施方案中，提供用于預(yù)防或降低與椎體成形術(shù)和/或椎體后凸成形術(shù)相聯(lián)的二次椎骨壓縮性骨折的可能性的方法和組合物。本發(fā)明組合物和方法可用于治療易患病患者(compromisedpatient)(例如患有骨質(zhì)疏松癥、糖尿病或其它疾病或病癥的患者)的椎體。在一個(gè)方面，用于促進(jìn)椎體中的骨形成的組合物包含含血小板源生長因子(PDGF)的溶液和生物相容性基質(zhì)，其中所述溶液被配置或被摻入到所述生物相容性基質(zhì)中。在一些實(shí)施方案中，PDGF被生物相容性基質(zhì)吸附。在其它實(shí)施方案中，PDGF被吸附到生物相容性基質(zhì)的一個(gè)或多個(gè)表面。本發(fā)明再一實(shí)施方案中，PDGF被生物相容性基質(zhì)吸附，并被吸附到生物相容性基質(zhì)的一個(gè)或多個(gè)表面。在一些實(shí)施方案中，PDGF以介于以下的濃度范圍存在于溶液中：約0.01mg/ml-約10mg/ml、約0.05mg/ml-約5mg/ml、約0.1mg/ml-約1.0mg/ml或約0.2mg/ml-約0.4mg/ml。溶液內(nèi)的PDGF濃度可在上述任何濃度范圍內(nèi)。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，PDGF包含PDGF同二聚體和雜二聚體，包括PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC、PDGF-DD及其混合物和衍生物。在一個(gè)實(shí)施方案中，PDGF包含PDGF-BB。在另一實(shí)施方案中，PDGF包含重組人(rh)PDGF，例如重組人PDGF-BB(rhPDGF-BB)。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，PDGF包含PDGF片段。在一個(gè)實(shí)施方案中，rhPDGF-B包含以下片段：完整B鏈的1-31、1-32、33-108、33-109和/或1-108位的氨基酸序列。在美國專利第5,516,896號(hào)的圖15中提供了PDGFB鏈的全部氨基酸序列(1-109)。應(yīng)該理解，本發(fā)明rhPDGF組合物可包含完整rhPDGF-B(1-109)及其片段的組合?？刹捎肞DGF的其它片段，例如在美國專利第5,516,896號(hào)中公開的片段。在一些實(shí)施方案中，rhPDGF-BB包含完整rhPDGF-B(1-109)的至少65％。按照本發(fā)明某些實(shí)施方案，生物相容性基質(zhì)包含骨代替劑(bonesubstitutingagent)(本文中也稱為支架材料(scaffoldingmaterial))和任選生物相容性粘合劑。在一些實(shí)施方案中，骨代替劑包括磷酸鈣，其包括非結(jié)晶性磷酸鈣、一水磷酸一鈣(MCPM)、無水磷酸一鈣(MCPA)、二水磷酸二鈣(DCPD)、無水磷酸二鈣(DCPA)、磷酸八鈣(OCP)、α-磷酸三鈣、β-TCP、羥基磷灰石(OHAp)、結(jié)晶性低的羥基磷灰石、磷酸四鈣(TTCP)、十磷酸七鈣(heptacalciumdecaphosphate)、偏磷酸鈣、二水焦磷酸鈣、焦磷酸鈣、碳磷酸鈣、羥基磷灰石或它們的衍生物或混合物。在一些實(shí)施方案中，骨代替劑包括硫酸鈣或脫礦骨(deminerializedbone)，例如干密質(zhì)骨或松質(zhì)骨。在另一方面，本發(fā)明提供用于促進(jìn)椎體中的骨形成的組合物，所述組合物包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液，其中生物相容性基質(zhì)包含骨支架材料和生物相容性粘合劑。PDGF溶液可具有如上所述的PDGF濃度。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料包括磷酸鈣。在一個(gè)實(shí)施方案中，磷酸鈣包括β-TCP。在一個(gè)方面，生物相容性基質(zhì)可包括磷酸鈣微粒(含或不含生物相容性粘合劑)或骨同種異體移植物(boneallograft)，例如冷凍干燥脫礦骨同種異體物(demineralizedfreezedriedboneallograft，DFDBA)、冷凍干燥礦化骨同種異體物(mineralizedfreezedriedboneallograft，F(xiàn)DBA)或脫礦骨基質(zhì)顆粒(particulartedemineralizedbonematrix，DBM)。在另一方面，生物相容性基質(zhì)可包括骨同種異體移植物(例如DFDBA、DBM)或其它骨同種異體移植物材料，包括各種形狀(例如塊狀、楔形、圓柱體或顆粒)的密質(zhì)骨或各種形狀和大小的松質(zhì)骨顆粒。此外，根據(jù)本發(fā)明某些實(shí)施方案，生物相容性粘合劑包括蛋白質(zhì)、多糖、核酸、碳水化合物、合成聚合物或其混合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑包括膠原蛋白。在另一實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑包括透明質(zhì)酸。本發(fā)明另一方面提供用于預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折可能性的組合物，所述椎骨壓縮性骨折包括二次椎骨壓縮性骨折。在一些實(shí)施方案中，用于預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折可能性的組合物包含含PDGF的溶液和生物相容性基質(zhì)，其中將所述溶液配置在所述生物相容性基質(zhì)中。在其它實(shí)施方案中，用于預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折可能性的組合物包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液，其中生物相容性基質(zhì)包含骨支架材料和生物相容性粘合劑。在用于預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折可能性的組合物實(shí)施方案中，PDGF溶液可具有如上所述的PDGF濃度。此外，在一些實(shí)施方案中，骨支架材料包括磷酸鈣。在實(shí)施方案中，磷酸鈣包括β-磷酸三鈣。根據(jù)本發(fā)明某些實(shí)施方案，生物相容性粘合劑包含蛋白質(zhì)、多糖、核酸、碳水化合物、合成聚合物或其混合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑包含膠原蛋白。在另一實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑包含膠原蛋白，例如牛膠原蛋白。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，用于促進(jìn)椎體中的骨形成的組合物和用于預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折可能性的組合物進(jìn)一步包含至少一種造影劑。按照本發(fā)明實(shí)施方案，造影劑為可操作以在成像時(shí)至少部分地提供兩個(gè)或更多個(gè)身體組織差異的物質(zhì)。按照某些實(shí)施方案，造影劑包括陽離子造影劑、陰離子造影劑、非離子造影劑或它們的混合物。在一些實(shí)施方案中，造影劑包括不透射線造影劑(radiopaquecontrastagent)。在一些實(shí)施方案中，不透射線造影劑包括含碘化合物，其包括(S)-N，N′-雙[2-羥基-1-(羥甲基)-乙基]-2，4，6-三碘-5-乳酰胺基間苯二甲酰胺(lactamidoisophthalamide)(碘帕醇(Iopamidol))及其衍生物。在另一方面，本發(fā)明提供藥劑盒，所述藥劑盒包含在第一包裝中的生物相容性基質(zhì)和在第二包裝中的含PDGF溶液。在一些實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)包含支架材料、支架材料和生物相容性粘合劑、和/或骨同種異體移植物如DFDBA或微粒DBM。在一個(gè)實(shí)施方案中，支架材料包括磷酸鈣如β-TCP。此外，在一些實(shí)施方案中，所述溶液包含預(yù)定濃度的PDGF。可根據(jù)待實(shí)施的外科手術(shù)預(yù)定PDGF濃度，例如根據(jù)促進(jìn)或加速椎體骨生長或預(yù)防或降低二次椎骨壓縮性骨折的可能性來預(yù)定。此外，在一些實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)可以以預(yù)定量存在于藥劑盒中。由藥劑盒提供的生物相容性基質(zhì)的量可視待實(shí)施的外科手術(shù)而定。在一些實(shí)施方案中，含有PDGF溶液的第二包裝包含注射器。注射器可有助于PDGF溶液在生物相容性基質(zhì)中的配置。在一些實(shí)施方案中，可將PDGF溶液配置到生物相容性基質(zhì)中后，馬上將得到的組合物置于第二注射器和/或套管中并遞送到椎體。本發(fā)明還提供制備用于促進(jìn)椎體中的骨形成和預(yù)防或降低椎體壓縮性骨折(包括二次椎骨壓縮性骨折)的可能性的組合物的方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于制備所述組合物的方法包括：提供包含PDGF的溶液，提供生物相容性基質(zhì)并將所述溶液配置到所述生物相容性基質(zhì)中。在一些實(shí)施方案中，制備用于促進(jìn)椎體中的骨形成和預(yù)防或降低椎體壓縮性骨折可能性的組合物的方法進(jìn)一步包括提供造影劑和將造影劑配置在生物相容性基質(zhì)中。在另一方面，本發(fā)明提供用于促進(jìn)或加速椎體中的骨形成的方法，所述方法包括：提供包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物和將有效量的組合物施用到至少一個(gè)椎體。在一些實(shí)施方案中，將所述組合物施用到至少一個(gè)椎體包括將組合物注射到至少一個(gè)椎體中。在另一方面，本發(fā)明提供包括預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折(包括二次椎骨壓縮性骨折)的可能性的方法。按照本發(fā)明實(shí)施方案，預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折可能性包括：提供包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物和將有效量的組合物施用到至少一個(gè)椎體中。在一些實(shí)施方案中，將所述組合物施用到至少一個(gè)椎體包括將組合物注射到至少一個(gè)椎體中。在一個(gè)實(shí)施方案中，在對(duì)第一個(gè)椎體進(jìn)行椎體成形術(shù)或椎體后凸成形術(shù)后，將組合物施用到第二個(gè)椎體，在某些情況下所述第二個(gè)椎體為相鄰椎體。在一些實(shí)施方案中，將包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物施用到至少一個(gè)高危椎體。本文所用“高危椎體”(highriskvertebralbody，HVB)指椎骨T5到T12以及L1到L4的椎體，它們處于經(jīng)受二次椎骨壓縮性骨折的最高風(fēng)險(xiǎn)中。在本發(fā)明方法的某些實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)包含骨支架材料。在一些實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)包含骨支架材料和生物相容性粘合劑。在一些實(shí)施方案中，用于促進(jìn)椎體中的骨形成和預(yù)防或降低椎體壓縮性骨折的可能性的方法，進(jìn)一步包括：除包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物外，還提供至少一種藥物組合物，以及經(jīng)局部和/或全身給予所述至少一種藥物組合物。在一些實(shí)施方案中，所述至少一種藥物組合物包含維生素、鈣補(bǔ)充劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何破骨細(xì)胞抑制劑，包括二膦酸鹽。在一些實(shí)施方案中，所述至少一種藥物組合物經(jīng)口給予。在這樣的實(shí)施方案中，可將所述至少一種藥物組合物摻入到生物相容性基質(zhì)中，或另外配置到椎體內(nèi)及其周圍。在其它實(shí)施方案中，將所述至少一種藥物組合物全身給予患者。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，將所述至少一種藥物組合物經(jīng)口給予患者。在另一實(shí)施方案中，將所述至少一種藥物組合物靜脈內(nèi)給予患者。因此，本發(fā)明目標(biāo)是提供用于促進(jìn)椎體中的骨形成的含PDGF組合物。本發(fā)明另一目標(biāo)是提供用于加固椎體的含PDGF組合物。本發(fā)明另一目標(biāo)是提供用于加固骨質(zhì)疏松癥患者椎體的含PDGF組合物。本發(fā)明另一目標(biāo)是提供用于預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折(包括二次椎骨壓縮性骨折)可能性的含PDGF組合物。本發(fā)明另一目標(biāo)是提供用于用含PDGF組合物促進(jìn)椎體中的骨形成的方法。本發(fā)明再一目標(biāo)是提供用含PDGF組合物預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折(包括二次椎骨壓縮性骨折)可能性的方法。本發(fā)明這些和其它實(shí)施方案更詳細(xì)地闡述于以下的發(fā)明詳述中。在縱覽以下發(fā)明詳述所公開的實(shí)施方案和權(quán)利要求后，本發(fā)明的這些目標(biāo)、特征和優(yōu)點(diǎn)將顯而易見。附圖簡述圖1闡明注射器及相關(guān)器械，其根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案刺入覆蓋椎體的組織以將本發(fā)明組合物遞送到椎體。圖2為闡明根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案將組合物注入椎體的X光照片。圖3闡明根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案接受本發(fā)明組合物的椎骨。圖4闡明根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案，接受包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的1.0mg/ml的rhPDGF-BB的組合物的椎體，與接受包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的20mM乙酸鈉緩沖液的組合物的椎體比較，其體積骨無機(jī)質(zhì)密度百分比的變化。圖5闡明根據(jù)本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案，接受包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的1.0mg/ml的rhPDGF-BB的組合物的椎體，與接受包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的20mM乙酸鈉緩沖液的組合物的椎體比較，其體積骨無機(jī)質(zhì)密度百分比的變化。發(fā)明詳述本發(fā)明提供用于治療包括椎體在內(nèi)的脊柱結(jié)構(gòu)的組合物和方法。根據(jù)本文所述實(shí)施方案，本發(fā)明提供用于促進(jìn)椎體中的骨形成的組合物和用于預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折(包括二次椎骨壓縮性骨折)可能性的組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，所述組合物包含含PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)，其中將所述溶液配置在所述生物相容性基質(zhì)中。在另一實(shí)施方案中，所述組合物包含配置在生物相容性基質(zhì)中的含PDGF溶液，其中所述生物相容性基質(zhì)包含骨支架材料和生物相容性粘合劑。在一個(gè)方面，生物相容性基質(zhì)包括磷酸鈣顆粒(含或不含生物相容性粘合劑)或骨同種異體移植物例如DFDBA或顆粒DBM。在另一方面，生物相容性基質(zhì)可包括DFDBA或DBM?，F(xiàn)在轉(zhuǎn)向可包括在本發(fā)明各種實(shí)施方案中的組分，本發(fā)明組合物包含含PDGF溶液。PDGF溶液PDGF在調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和遷移中起重要作用。PDGF如其它生長因子一樣與受體酪氨酸激酶的胞外結(jié)構(gòu)域結(jié)合。PDGF與這些跨膜蛋白的結(jié)合激活其位于膜的細(xì)胞質(zhì)側(cè)的催化結(jié)構(gòu)域的激酶活性。所述激酶通過使靶標(biāo)蛋白的酪氨酸殘基磷酸化，誘導(dǎo)多種細(xì)胞過程，包括細(xì)胞生長和胞外基質(zhì)形成。在一個(gè)方面，本發(fā)明提供的組合物包含含PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)，其中將所述溶液配置在或摻入到所述生物相容性基質(zhì)中。在一些實(shí)施方案中，PDGF以介于約0.01mg/ml-約10mg/ml、約0.05mg/ml-約5mg/ml或約0.1mg/ml-約1.0mg/ml的濃度存在于溶液中。PDGF可以以所述這些范圍內(nèi)的任何濃度存在于溶液中，包括每一范圍的上限和下限。在其它實(shí)施方案中，PDGF以以下任何一個(gè)濃度存在于溶液中：約0.05mg/ml；約0.1mg/ml；約0.15mg/ml；約0.2mg/ml；約0.25mg/ml；約0.3mg/ml；約0.35mg/ml；約0.4mg/ml；約0.45mg/ml；約0.5mg/ml；約0.55mg/ml；約0.6mg/ml；約0.65mg/ml；約0.7mg/ml；約0.75mg/ml；約0.8mg/ml；約0.85mg/ml；約0.9mg/ml；約0.95mg/ml；或約1.0mg/ml。在一些實(shí)施方案中，PDGF以介于以下的濃度范圍存在于溶液中：約0.2mg/ml-約2mg/ml；約0.3mg/ml-約3mg/ml；約0.4mg/ml-約4mg/ml或約0.5mg/ml-約5mg/ml。應(yīng)該理解，這些濃度僅為具體實(shí)施方案的實(shí)例，PDGF濃度可在上述任何濃度范圍內(nèi)，包括每一范圍的上限和下限。各種PDGF量可用于本發(fā)明組合物中?？墒褂玫腜DGF量包括以下范圍的量：約1ug-約50mg、約10ug-約25mg、約100ug-約10mg和約250ug-約5mg?？赏ㄟ^用如美國專利第6,221,625號(hào)、第5,747,273號(hào)和第5,290,708號(hào)所述的酶聯(lián)免疫測定法或本領(lǐng)域已知的用于測定PDGF濃度的任何其它測定法，來測定本發(fā)明實(shí)施方案的PDGF或其它生長因子的濃度。當(dāng)在本文中提供時(shí)，PDGF的摩爾濃度基于PDGF二聚體的分子量(MW)(例如PDGF-BB；MW為約25kDa)來測定。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，PDGF包括PDGF同二聚體和雜二聚體，包括PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC、PDGF-DD及其混合物和衍生物。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，PDGF包括PDGF-BB。在另一實(shí)施方案中，PDGF包括重組人PDGF，例如rhPDGF-BB。在一些實(shí)施方案中，PDGF包括各種同二聚體和/或雜二聚體的混合物。本發(fā)明實(shí)施方案涵蓋PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC和/或PDGF-DD的任何組合。在一些實(shí)施方案中，可從天然來源獲得PDGF。在其它實(shí)施方案中，可通過重組DNA技術(shù)制備PDGF。在其它實(shí)施方案中，可用本領(lǐng)域一般技術(shù)人員已知的肽合成技術(shù)(例如固相肽合成)來制備PDGF或其片段。當(dāng)PDGF從天然來源獲得時(shí)，其可來源于生物液。根據(jù)某些實(shí)施方案，生物液可包括與活生物體有關(guān)的任何經(jīng)處理或未處理的液體，包括血液。在另一實(shí)施方案中，生物液還可包括血液組分，所述血液組分包括血小板濃縮液(PC)、機(jī)采血小板(apheresedplatelet)、富血小板血漿(PRP)、血漿、血清、新鮮冷凍血漿(FFP)和暗黃覆蓋層(BC)。在另一實(shí)施方案中，生物液可包括自血漿分離并重新懸浮于生理流液中的血小板。在一些實(shí)施方案中，當(dāng)由重組DNA技術(shù)制備PDGF時(shí)，可將編碼單個(gè)單體(例如PDGFB-鏈或A-鏈)的DNA序列插入用于表達(dá)的培養(yǎng)的原核細(xì)胞或真核細(xì)胞中，以隨后產(chǎn)生同二聚體(例如PDGF-BB或PDGF-AA)。在其它實(shí)施方案中，可通過以下方法來制備PDGF雜二聚體：將編碼雜二聚體的兩個(gè)單體單元的DNA序列都插入到培養(yǎng)的原核細(xì)胞或真核細(xì)胞中，并使細(xì)胞加工已翻譯的單體單元以產(chǎn)生雜二聚體(例如PDGF-AB)。市售GMP重組PDGF-BB可從NovartisCorporation(Emeryville，CA)購得。研究級(jí)的rhPDGF-BB可自多個(gè)來源獲得，包括R&DSystems，Inc.(Minneapolis，MN)、BDBiosciences(SanJose，CA)和Chemicon，International(Temecula，CA)。在一些實(shí)施方案中，可以以變性形式在原核細(xì)胞中制備單體單元，其中隨后讓變性形式重新折疊成活性分子。在本發(fā)明實(shí)施方案中，PDGF包括PDGF片段。在一個(gè)實(shí)施方案中，rhPDGF-B包括以下片段：完整B鏈的1-31、1-32、33-108、33-109和/或1-108位的氨基酸序列。美國專利第5,516,896號(hào)的圖15中提供了PDGFB鏈的全部氨基酸序列(1-109)。應(yīng)該理解，本發(fā)明rhPDGF組合物可包含完整rhPDGF-B(1-109)及其片段的組合?？刹捎肞DGF的其它片段，例如美國專利第5,516,896號(hào)中所述的片段。根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案，rhPDGF-BB包含完整rhPDGF-B(1-109)的至少60％。在另一實(shí)施方案中，rhPDGF-BB包含完整rhPDGF-B(1-109)的至少65％、75％、80％、85％、90％、95％或99％。在本發(fā)明某些實(shí)施方案中，可純化PDGF。本文所用純化的PDGF包括在加入到本發(fā)明溶液中之前具有大于約95％重量的PDGF的組合物。所述溶液可為任何藥用溶液。在其它實(shí)施方案中，可基本上純化PDGF。本文所用基本上純化的PDGF包括在加入到本發(fā)明溶液中之前具有約5％-約95％重量的PDGF的組合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，基本上純化的PDGF包括在加入到本發(fā)明溶液中之前具有約65％-約95％重量的PDGF的組合物。在其它實(shí)施方案中，基本上純化的PDGF包括在加入到本發(fā)明溶液中之前具有以下含量的PDGF的組合物：約70％-約95％、約75％-約95％、約80％-約95％、約85％-約95％或約90％-約95％重量。可將純化的PDGF和基本上純化的PDGF摻入到支架和粘合劑中。在另一實(shí)施方案中，可部分純化PDGF。本文所用部分純化的PDGF包括在以下情況下的具有PDGF的組合物：富血小板血漿(PRP)、新鮮冷凍血漿(FFP)或需要采集并分離以制備PDGF的任何其它血液制品。本發(fā)明實(shí)施方案涵蓋本文提供的任何PDGF同種型，包括同二聚體和雜二聚體，它們可被純化或部分地純化。含有PDGF混合物的本發(fā)明組合物可含有呈部分純化比例的PDGF同種型或PDGF片段。在一些實(shí)施方案中，可如美國臨時(shí)專利順序號(hào)11/159,533(公布號(hào)：20060084602)所述制備部分純化和純化的PDGF。在一些實(shí)施方案中，通過讓PDGF溶于一種或多種緩沖液中來形成含PDGF溶液。適用于本發(fā)明PDGF溶液的緩沖液可包括但不限于：碳酸鹽、磷酸鹽(例如磷酸鹽緩沖鹽水)、組氨酸、乙酸鹽(例如乙酸鈉)、酸性緩沖液(例如乙酸和HCl)和有機(jī)緩沖液(例如賴氨酸、Tris緩沖液(例如三(羥甲基)氨基乙烷)、N-2-羥基乙基哌嗪-N′-2-乙磺酸(FIEPES)和3-(N-嗎啉代)丙磺酸(MOPS))?？苫谂cPDGF的生物相容性和緩沖液阻止不合乎需要的蛋白修飾的緩沖能力來選擇緩沖液?？苫谂c宿主組織的相容性另外選擇緩沖液。在一個(gè)實(shí)施方案中，可使用乙酸鈉緩沖液。可采用不同的摩爾濃度的緩沖液，例如約0.1mM-約100mM、約1mM-約50mM、約5mM-約40mM、約10mM-約30mM或約15mM-約25mM或這些范圍內(nèi)的任何摩爾濃度。在一些實(shí)施方案中，采用約20mM摩爾濃度的乙酸鹽緩沖液。在另一實(shí)施方案中，通過將冷凍的PDGF溶解在水中來形成含PDGF溶液，其中在溶解之前讓PDGF從適當(dāng)?shù)木彌_液中凍干。按照本發(fā)明實(shí)施方案，含PDGF溶液可具有介于約3.0-約8.0之間的pH。在一個(gè)實(shí)施方案中，含PDGF溶液具有以下范圍的pH：約5.0-約8.0、約5.5-約7.0或約5.5-約6.5之間或這些范圍內(nèi)的任何值。在一些實(shí)施方案中，含PDGF溶液的pH可與PDGF或任何其它所期需的生物學(xué)活性劑的長期穩(wěn)定性及功效相容。PDGF在酸性環(huán)境中更穩(wěn)定。因此，本發(fā)明一個(gè)實(shí)施方案包括PDGF溶液的酸性儲(chǔ)存制劑。根據(jù)該實(shí)施方案，PDGF溶液優(yōu)選具有約3.0-約7.0或約4.0-約6.5的pH。然而，在具有中性pH范圍的溶液中PDGF的生物學(xué)活性最佳。因此，在又一實(shí)施方案中，本發(fā)明包括PDGF溶液的中性pH制劑。根據(jù)該實(shí)施方案，PDGF溶液優(yōu)選具有約5.0-約8.0、約5.5-約7.0或約5.5-約6.5的pH。根據(jù)本發(fā)明方法，將酸性PDGF溶液重新調(diào)配為中性pH組合物，其中隨后將所述組合物用于治療骨骼并促進(jìn)骨生長和/或愈合。根據(jù)本發(fā)明某些實(shí)施方案，在所述溶液中使用的PDGF為rh-PDGF-BB。在本發(fā)明又一實(shí)施方案中，可改變含PDGF溶液的pH以使PDGF與基質(zhì)底物或連接物的結(jié)合動(dòng)力學(xué)最優(yōu)化。若需要，使所述物質(zhì)的pH與相鄰物質(zhì)平衡，否則已結(jié)合的PDGF可能易發(fā)生變化。在一些實(shí)施方案中，含PDGF溶液的pH可由本文所述緩沖液來控制。不同的蛋白質(zhì)具有不同的保持穩(wěn)定的pH范圍。蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性主要由等電點(diǎn)和蛋白質(zhì)上的電荷來反映。pH范圍可影響蛋白質(zhì)的構(gòu)象結(jié)構(gòu)和蛋白質(zhì)對(duì)蛋白酶解、水解、氧化及導(dǎo)致蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和/或生物學(xué)活性改變的其它過程的敏感性。在一些實(shí)施方案中，含PDGF溶液可進(jìn)一步包含另外組分，例如其它生物活性劑。在其它實(shí)施方案中，含PDGF溶液可進(jìn)一步包含細(xì)胞培養(yǎng)基、諸如白蛋白等其它助穩(wěn)定蛋白、抗菌劑、蛋白酶抑制劑[例如乙二胺四乙酸(EDTA)、乙二醇雙(β-氨基乙基醚)-N，N，N′，N′-四乙酸(EGTA)、抑蛋白酶肽、ε-氨基己酸(EACA)等]和/或其它生長因子，例如成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、表皮生長因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)、角質(zhì)形成細(xì)胞生長因子(KGF)、胰島素樣生長因子(IGF)、肝細(xì)胞生長因子(HGF)、骨形成蛋白(BMP)或其它PDGF，包括PDGF-AA、PDGF-BB、PDGF-AB、PDGF-CC和/或PDGF-DD的組合物。除含PDGF溶液外，本發(fā)明組合物還包含在其中配置PDGF溶液的生物相容性基質(zhì)，并也可在加入或不加入生物相容性基質(zhì)下包含生物相容性粘合劑。生物相容性基質(zhì)骨支架材料按照本發(fā)明實(shí)施方案，生物相容性基質(zhì)包含骨支架材料。應(yīng)該理解的是，術(shù)語骨支架材料和骨代替劑在本申請中可互換使用。骨支架材料為新骨及組織的生長提供框架或支架。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料具有多方向且互聯(lián)的各種直徑的孔。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料除互相連接的孔外還包含多個(gè)凹孔以及非互聯(lián)的孔。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料可永久性或暫時(shí)性取代骨。骨支架材料經(jīng)植入后可保留在身體中，或其可被身體吸收并被骨取代。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料包括至少一種磷酸鈣。在其它實(shí)施方案中，骨支架材料可包括多種磷酸鈣。在本發(fā)明實(shí)施方案中，適于用作骨支架材料的磷酸鈣具有介于0.5-2.0之間的鈣磷原子比。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料包含同種異體移植物，例如DFDBA、FDBA或微粒DBM。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料包括礦化骨同種異體移植物、礦化骨、礦化去蛋白異種移植物或脫礦骨。適于用作骨支架材料的磷酸鈣的非限制性實(shí)例包括：無定形磷酸鈣、一水磷酸一鈣(MCPM)、無水磷酸一鈣(MCPA)、二水磷酸二鈣(DCPD)、無水磷酸二鈣(DCPA)、磷酸八鈣(OCP)、α-磷酸三鈣、β-TCP、羥基磷灰石(OHAp)、結(jié)晶性低的羥基磷灰石、磷酸四鈣(TTCP)、十磷酸七鈣、偏磷酸鈣、二水焦磷酸鈣、焦磷酸鈣、碳磷酸鈣、羥基磷灰石或它們的衍生物或混合物。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料包含聚合材料。在一些實(shí)施方案中，聚合支架包括：膠原蛋白、聚乳酸、聚(L-丙交酯)、聚(D，L-丙交酯)、聚乙醇酸、聚(L-丙交酯-共-乙交酯)、聚(L-丙交酯-共-D，L-丙交酯)、聚丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸酯、聚甲基丙烯酸甲酯、殼聚糖或它們的組合或衍生物。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料包含多孔結(jié)構(gòu)。多孔性是所期需的特性，因?yàn)槠浯龠M(jìn)細(xì)胞遷移并滲透到支架材料中，以便該滲入的細(xì)胞可分泌胞外骨基質(zhì)。多孔性還為血管化作用提供通道。多孔性還提供用于增強(qiáng)再吸收和活性物質(zhì)釋放以及增加細(xì)胞與基質(zhì)間相互作用的高表面積。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料可在使用前形成一定大小和形狀。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料可以以適于植入的形狀來提供。根據(jù)某些實(shí)施方案，多孔性骨支架材料可包含具有介于約1μm-約1mm的直徑的孔。在一個(gè)實(shí)施方案中，骨支架材料包含具有介于約1μm-約1mm或更大直徑的大孔。在又一實(shí)施方案中，骨支架材料包含具有介于約10μm-約100μm的直徑的中孔。在再一實(shí)施方案中，骨支架材料包含具有小于約10μm的直徑的微孔。本發(fā)明實(shí)施方案涵蓋包含大孔、中孔和微孔或其任何組合的骨支架材料。在一個(gè)實(shí)施方案中，多孔性骨支架材料具有高于約25％或高于約40％的孔隙率(porosity)。在另一實(shí)施方案中，多孔性骨支架材料具有高于約50％、高于約60％、高于約65％、高于約70％、高于約80％或高于約85％的孔隙率。在又一實(shí)施方案中，多孔性骨支架材料具有高于約90％的孔隙率。在一些實(shí)施方案中，多孔性骨支架材料包含促進(jìn)細(xì)胞遷移入支架材料的孔隙率。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料包含多種顆粒。例如，骨支架材料可包含多種磷酸鈣顆粒。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料顆粒可單獨(dú)地顯示本文提供用于骨支架材料的任何孔徑和孔隙率。在其它實(shí)施方案中，骨支架材料顆?？尚纬申P(guān)聯(lián)(association)以產(chǎn)生具有本文提供用于骨支架材料的任何孔徑或孔隙率的基質(zhì)。骨支架顆?？蔀閙m、μm或亞微米(nm)尺寸。在一個(gè)實(shí)施方案中，骨支架顆粒具有介于約1μm-約5mm的平均直徑。在其它實(shí)施方案中，顆粒具有介于約1mm-約2mm、約1mm-約3mm或約250μm-約750μm的平均直徑。在另一實(shí)施方案中，骨支架顆粒具有介于約100μm-約300μm的平均直徑。在又一實(shí)施方案中，骨支架顆粒具有介于約75μm-約300μm的平均直徑。在另外的實(shí)施方案中，骨支架顆粒具有小于約25μm、小于約1μm或小于約1mm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，支架顆粒具有介于約100μm-約5mm或約100μm-約3mm的平均直徑。在其它實(shí)施方案中，骨支架顆粒具有介于約250μm-約2mm、約250μm-約1mm或約200μm-約3mm的平均直徑。顆粒還可為約1nm-約1μm、小于約500nm或小于約250nm的范圍。根據(jù)某些實(shí)施方案，可以以適于植入的形狀(例如球體、圓柱體或塊狀)來提供骨支架材料。在其它實(shí)施方案中，骨支架材料為可模壓、可擠出和/或可注射?？赡?、可擠出和可注射的骨支架材料可促進(jìn)將本發(fā)明組合物有效安置于椎體內(nèi)及其周圍。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料易流動(dòng)。在一些實(shí)施方案中，可通過注射器和針或套管將易流動(dòng)的骨支架材料施用給椎體。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料在體內(nèi)變硬。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料可生物再吸收。在一個(gè)實(shí)施方案中，骨支架材料可在體內(nèi)植入后一年內(nèi)被再吸收至少30％、40％、50％、60％、70％、75％或90％。在另一實(shí)施方案中，骨支架材料可在體內(nèi)植入1、3、6、9、12或18個(gè)月內(nèi)被再吸收至少5％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、75％或90％。在一些實(shí)施方案中，骨支架材料在體內(nèi)植入1、3、6、9、12或18個(gè)月內(nèi)被再吸收超過90％?？缮镌傥招砸曇韵乱蛩囟ǎ?1)基質(zhì)材料的特性(即其化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和尺寸)；(2)基質(zhì)所安置的身體內(nèi)的位置；(3)所使用的基質(zhì)材料的量；(4)患者的代謝狀態(tài)(糖尿病/非糖尿病、骨質(zhì)疏松、吸煙、老齡、使用類固醇等等)；(5)所治療的損傷程度和/或類型；和(6)除基質(zhì)外的其它物質(zhì)的使用，例如其它骨合成代謝因子、分解代謝因子和抗分解代謝因子。包含β-磷酸三鈣(β-TCP)的骨支架用作生物相容性基質(zhì)的骨支架材料可包含β-TCP。根據(jù)某些實(shí)施方案，β-TCP可包含具有多方向且互聯(lián)的不同直徑的孔的多孔結(jié)構(gòu)。在一些實(shí)施方案中，β-TCP除互聯(lián)的孔外還包含多個(gè)不同直徑的凹孔和非互聯(lián)的孔。在一個(gè)實(shí)施方案中，β-TCP的多孔結(jié)構(gòu)包含具有介于約100μm-約1mm或更大直徑的大孔、具有介于約10μm-約100μm直徑的中孔和具有小于約10μm直徑的微孔。β-TCP的大孔和微孔可促進(jìn)骨誘導(dǎo)(osteoinduction)和骨傳導(dǎo)(osteoconduction)，而大孔、中孔和微孔使得流液可連通和營養(yǎng)可運(yùn)輸，以在β-TCP生物相容性基質(zhì)各處支持骨再生長。在一些實(shí)施方案中，在包含多孔結(jié)構(gòu)下，β-TCP可具有高于25％或高于約40％的孔隙率。在其它實(shí)施方案中，β-TCP可具有高于50％、高于約60％、高于約65％、高于約70％、高于約75％、高于約80％或高于約85％的孔隙率。在又一實(shí)施方案中，β-TCP可具有高于90％的孔隙率。在一些實(shí)施方案中，β-TCP可具有促進(jìn)細(xì)胞遷移入β-TCP的孔隙率。在一些實(shí)施方案中，β-TCP骨支架材料包含β-TCP顆粒。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆?？蓡为?dú)地顯示本文提供用于支架材料的任何孔徑、孔結(jié)構(gòu)和多孔性。在一個(gè)實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于約1μm-約5mm的平均直徑。在其它實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于以下的平均直徑：約1mm-約2mm、約1mm-約3mm、約100μm-約5mm、約100μm-約3mm、約250μm-約2mm、約250μm-約750μm、約250μm-約1mm、約250μm-約2mm或約200μm-約3mm。在另一實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于約100μm-約300μm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于約75μm-約300μm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有小于約25μm、小于約1μm或小于約1mm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于約1nm-約1μm的平均直徑。在又一實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有小于約500nm或小于約250nm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，可以以適于植入的形狀(例如球體、圓柱體或塊狀)來提供骨包含β-TCP骨支架材料的生物相容性基質(zhì)。在其它實(shí)施方案中，β-TCP骨支架材料可為可模壓、可擠出和/或可流動(dòng)，由此有助于將基質(zhì)施用給椎體?？赏ㄟ^注射器、管(tube)、套管或刮鏟(spatula)施用易流動(dòng)的基質(zhì)。根據(jù)某些實(shí)施方案中，β-TCP骨支架材料可生物再吸收。在一個(gè)實(shí)施方案中，β-TCP骨支架材料可在體內(nèi)植入后一年內(nèi)被再吸收至少30％、40％、50％、60％、65％、70％、75％、80％或85％。在另一實(shí)施方案中，β-TCP骨支架材料可在體內(nèi)植入后一年內(nèi)被再吸收超過90％。骨支架材料和生物相容性粘合劑在另一實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)包括骨支架材料和生物相容性粘合劑。在生物相容性基質(zhì)實(shí)施方案中的骨支架材料進(jìn)一步包含符合上文提供的生物相容性粘合劑。根據(jù)某些實(shí)施方案，生物相容性粘合劑可包括可操作以有助于組合的物質(zhì)之間粘附的材料。例如，生物相容性粘合劑在形成生物相容性基質(zhì)過程中可促進(jìn)骨支架材料顆粒之間的粘合。在一些實(shí)施方案中，相同材料可用作支架材料。例如，在一些實(shí)施方案中，本文所述聚合材料(例如膠原蛋白和殼聚糖)可同時(shí)用作支架材料和粘合劑兩者。在一些實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑可包含：膠原蛋白、多糖、核酸、碳水化合物、蛋白質(zhì)、多肽、聚(α-羥基酸)、聚(內(nèi)酯)、聚(氨基酸)、聚(酸酐)、聚氨酯、聚(原酸酯)、聚(酸酐-共-亞胺)、聚(原碳酸酯)、聚(α-羥基烷酸酯)、聚(二氧雜環(huán)己酮)、聚(磷酸酯)、聚乳酸、聚(L-丙交酯)(PLLA)、聚(D，L-丙交酯)(PDLLA)、聚乙交酯(PGA)、聚(丙交酯-共-乙交酯(PLGA)、聚(L-丙交酯-共-D，L-丙交酯)、聚(D，L-丙交酯-共-碳酸1，3-亞丙酯)、聚乙醇酸、聚羥基丁酸酯(PHB)、聚(ε-己內(nèi)酯)、聚(δ-戊內(nèi)酯)、聚(γ-丁內(nèi)酯)、聚(己內(nèi)酯)、聚丙烯酸、聚羧酸、聚(烯丙胺鹽酸鹽)、聚(二烯丙基二甲基銨氯化物)、聚(乙烯亞胺)、聚富馬酸丙二酯、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、碳素纖維、聚(乙二醇)、聚(環(huán)氧乙烷)、聚(乙烯醇)、聚(乙烯吡咯烷酮)、聚(乙基唑啉)、聚(環(huán)氧乙烷)-共-聚(環(huán)氧丙烷)嵌段共聚物、聚(對(duì)萃二甲酸乙二酯)聚酰胺和它們的共聚物及混合物。在其它實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑可包括藻酸、阿拉伯樹膠、瓜爾膠、黃原膠、明膠、甲殼素、殼聚糖、殼聚糖乙酸鹽(chitosanacetate)、殼聚糖乳酸鹽(chitosanlactate)、硫酸軟骨素、N，O-羧甲基殼聚糖、葡聚糖(例如α-環(huán)糊精、β-環(huán)糊精、γ-環(huán)糊精或硫酸葡聚糖鈉)、纖維蛋白膠、卵磷脂、卵磷酰膽堿衍生物、甘油、透明質(zhì)酸、透明質(zhì)酸鈉、纖維素(例如甲基纖維素、羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羥基乙基纖維素)、葡糖胺、蛋白聚糖、淀粉(例如羥乙基淀粉或可溶性淀粉)、乳酸、pluronic酸、甘油磷酸鈉、肝糖、角蛋白、絲蛋白(silk)和它們的衍生物及混合物。在一些實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑為水溶性的。水溶性粘合劑可在其被植入后不久從生物相容性基質(zhì)中溶解，從而在生物相容性基質(zhì)中引入大孔性(macroporosity)。本文所述大孔性可通過增加通道來增加植入材料的骨傳導(dǎo)性，從而改變了植入位點(diǎn)的破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞的活性。在一些實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑可以以介于基質(zhì)的約5％重量-約50％重量的量存在于生物相容性基質(zhì)中。在其它實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑可以以介于生物相容性基質(zhì)的約10％重量-約40％重量的量存在。在另一實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑可以以介于生物相容性基質(zhì)的約15％重量-約35％重量的量存在。在在又一實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑可以以生物相容性基質(zhì)的約20％重量的量存在。在另一實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑可以以大于基質(zhì)的約50％重量或60％重量的量存在于生物相容性基質(zhì)中。在一個(gè)實(shí)施方案中，生物相容性粘合劑可以以至多占基質(zhì)的約99％重量的量存在于生物相容性基質(zhì)中。根據(jù)某些實(shí)施方案，包含骨支架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)可為可流動(dòng)、可模壓和/或可擠出。在所述實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)可以呈糊狀或泥狀形式。在一個(gè)實(shí)施方案中，呈糊狀或泥狀形式的生物相容性基質(zhì)可包含由生物相容性粘合劑使之相互粘合的骨支架材料顆粒。可將呈糊狀或泥狀形式的生物相容性基質(zhì)壓模成所需的植入形狀，或可將其壓模成植入位點(diǎn)的輪廓。在一個(gè)實(shí)施方案中，可用注射器或套管將呈糊狀或泥狀形式的生物相容性基質(zhì)注射到植入位點(diǎn)中。在一些實(shí)施方案中，呈糊狀或泥狀形式的生物相容性基質(zhì)不變硬，在植入后仍易流動(dòng)并可模壓。在其它實(shí)施方案中，糊或泥植入后可變硬，從而降低基質(zhì)的流動(dòng)性和可模壓性。在一些實(shí)施方案中，還可以以預(yù)定形狀提供包含骨支架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)，所述預(yù)定形狀包括塊狀、球體或圓柱體或任何所期需的形狀，例如由?；蚴┯梦稽c(diǎn)來限定的形狀。在一些實(shí)施方案中，包含骨支架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)是可生物再吸收的。在所述實(shí)施方案中，在體內(nèi)植入一年內(nèi)，生物相容性基質(zhì)被可再吸收。在另一實(shí)施方案中，在體內(nèi)植入1、3、6或9個(gè)月內(nèi)，包含骨支架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)可被再吸收。在一些實(shí)施方案中，在體內(nèi)植入1、3或6年內(nèi)，包含骨支架材料和生物相容性粘合劑的生物相容性基質(zhì)可被再吸收。可生物再吸收性視以下因素而定：(1)基質(zhì)材料的特性(即其化學(xué)組成、物理結(jié)構(gòu)和尺寸)；(2)基質(zhì)所安置的身體內(nèi)的位置；(3)所使用的基質(zhì)材料的量；(4)患者的代謝狀態(tài)(糖尿病/非糖尿病、骨質(zhì)疏松、吸煙、老齡、使用類固醇等等)；(5)所治療的損傷程度和/或類型；和(6)除基質(zhì)外的其它物質(zhì)的使用，例如其它骨合成代謝因子、分解代謝因子和抗分解代謝因子。包含β-TCP和膠原蛋白的生物相容性基質(zhì)在一些實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)可包含β-TCP骨支架材料和生物相容性膠原蛋白粘合劑。適用于與膠原蛋白粘合劑組合的β-TCP骨支架材料符合上文所提供的那些。在一些實(shí)施方案中，膠原蛋白粘合劑可包括任何類型的膠原蛋白，包括I型、II型和III型膠原蛋白。在一個(gè)實(shí)施方案中，膠原蛋白粘合劑包括膠原蛋白混合物，例如I型、II型和III型膠原蛋白的混合物。在其它實(shí)施方案中，膠原蛋白粘合劑在生理?xiàng)l件下可溶?？刹捎么嬖谟诠墙M織或肌骨骼組織中的其它類型的膠原蛋白。本發(fā)明可使用重組的、合成的和天然存在的膠原蛋白形式。根據(jù)某些實(shí)施方案，生物相容性基質(zhì)可包含用膠原蛋白粘合劑使之相互粘合的多個(gè)β-TCP顆粒。在一些實(shí)施方案中，與膠原蛋白粘合劑組合的β-TCP顆粒具有介于約1μm-約5mm的平均直徑。在其它實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于以下的平均直徑：約1mm-約2mm、約1mm-約3mm、約100μm-約5mm、約100μm-約3mm、約250μm-約2mm、約250μm-約750μm、約250μm-約1mm、約250μm-約2mm或約200μm-約3mm。在另一實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于約100μm-約300μm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于約75μm-約300μm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有小于約25μm、小于約1μm或小于約1mm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有介于約1nm-約1μm的平均直徑。在又一實(shí)施方案中，β-TCP顆粒具有小于約500nm或小于約250nm的平均直徑。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆?？捎赡z原蛋白粘合劑使之彼此粘合，以便產(chǎn)生具有多孔結(jié)構(gòu)的生物相容性基質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)的多孔結(jié)構(gòu)顯示多方向并互聯(lián)的不同直徑的孔。在一些實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)除互聯(lián)的孔外還包含多個(gè)不同直徑的凹孔和非互聯(lián)的孔。在一些實(shí)施方案中，包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)可包含具有介于約1μm-約1mm直徑的孔。包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)可包含具有介于約100μm-約1mm或更大直徑的大孔、具有介于約10μm-100μm直徑的中孔和具有小于約10μm直徑的微孔。包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)可具有高于約25％或高于約40％的孔隙率。在另一實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)可具有高于約50％、高于約65％，高于約70％、高于約75％、高于約80％或高于約85％的孔隙率。在又一實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)可具有高于約90％的孔隙率。在一些實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)可具有促進(jìn)細(xì)胞遷移入基質(zhì)中的孔隙率。在一些實(shí)施方案中，β-TCP顆粒可單獨(dú)地顯示本文提供的包含β-TCP和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)的任何孔徑、孔結(jié)構(gòu)和孔隙率。在一些實(shí)施方案中，包含β-TCP顆粒的生物相容性基質(zhì)可以以介于基質(zhì)的約5％重量-約50％重量的量包含膠原蛋白粘合劑。在其它實(shí)施方案中，膠原蛋白粘合劑可以以介于生物相容性基質(zhì)的約10％重量-約40％重量的量存在。在另一實(shí)施方案中，膠原蛋白粘合劑可以以介于生物相容性基質(zhì)的約15％重量-約35％重量的量存在。在又一實(shí)施方案中，膠原蛋白粘合劑可以以占生物相容性基質(zhì)的約20％重量的量存在。根據(jù)某些實(shí)施方案，包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)可為可流動(dòng)、可模壓和/或可擠出。在所述實(shí)施方案中，生物相容性基質(zhì)可以呈糊狀或泥狀形式?？蓪⒑蚰鄩耗３伤璧闹踩胄螤睿蚩蓪⑵鋲耗橹踩胛稽c(diǎn)的輪廓。在一個(gè)實(shí)施方案中，可用注射器或套管將呈糊狀或泥狀形式的包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)注射到植入位點(diǎn)中。在一些實(shí)施方案中，呈糊狀或泥狀形式的包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)可在植入時(shí)保留易流動(dòng)并可模壓形式。在其它實(shí)施方案中，糊或泥可在植入后變硬，從而降低基質(zhì)的流動(dòng)性和可模壓性。在一些實(shí)施方案中，可以以預(yù)定形狀(例如決狀、球體或圓柱體)提供包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)。包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)可被再吸收。在一個(gè)實(shí)施方案中，在體內(nèi)植入后一年，包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)可被再吸收至少75％。在另一實(shí)施方案中，在體內(nèi)植入一年后，包含β-TCP顆粒和膠原蛋白粘合劑的生物相容性基質(zhì)可被再吸收超過90％。根據(jù)本文所述實(shí)施方案，含PDGF溶液可被配置在生物相容性基質(zhì)中以產(chǎn)生用于治療脊柱結(jié)構(gòu)的組合物。在一些實(shí)施方案中，如本文所述用于促進(jìn)椎體中的骨形成和預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折可能性的包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物，進(jìn)一步包含至少一種造影劑。按照某些實(shí)施方案，造影劑包含陽離子造影劑、陰離子造影劑、非離子造影劑或其混合物。在一些實(shí)施方案中，造影劑包含不透射線造影劑。在一些實(shí)施方案中，不透射線造影劑包括含碘化合物，其包括(S)-N，N′-雙[2-羥基-1-(羥甲基)-乙基]-2，4，6-三碘-5-乳酰胺基間苯二甲酰胺(碘帕醇)及其衍生物。PDGF溶液在生物相容性基質(zhì)中的配置本發(fā)明提供用于促進(jìn)椎體中的骨形成和預(yù)防或降低椎體壓縮性骨折(包括二次椎骨骨折)可能性的組合物的制備方法。在一個(gè)實(shí)施方案中，用于制備所述組合物的方法包括：提供含PDGF溶液，提供生物相容性基質(zhì)和將所述溶液配置在所述生物相容性基質(zhì)中。適用于組合的PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)符合上文所述的那些PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，可通過讓生物相容性基質(zhì)浸濕在PDGF溶液中來將PDGF溶液配置在生物相容性基質(zhì)中。在另一個(gè)實(shí)施方案中，可通過用PDGF溶液注射入生物相容性基質(zhì)中來將PDGF溶液配置在生物相容性基質(zhì)中。在一些實(shí)施方案中，注射PDGF溶液可包括將PDGF溶液配置在注射器中并將PDGF溶液注射到生物相容性基質(zhì)中以浸透生物相容性基質(zhì)。在一些實(shí)施方案中，PDGF被吸附到生物相容性基質(zhì)的孔中。在一些實(shí)施方案中，PDGF被吸附到生物相容性基質(zhì)的一個(gè)或多個(gè)表面上，包括生物相容性基質(zhì)的孔內(nèi)的表面。根據(jù)某些實(shí)施方案，在接受PDGF溶液之前，生物相容性基質(zhì)可呈預(yù)定形狀，例如塊狀或圓柱形。在接受PDGF溶液后，生物相容性基質(zhì)可為易流動(dòng)、可擠出和/或可注射的糊狀或泥狀形式。在其它實(shí)施方案中，在接受含PDGF溶液之前，生物相容性基質(zhì)可已經(jīng)顯示易流動(dòng)的糊狀或泥狀形式。包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物的易流動(dòng)、可擠出和/或可注射的糊狀或泥狀形式，在本發(fā)明應(yīng)用的方法中使用是有利的，因?yàn)榭捎米⑸淦骱?或套管將其施用到椎體。在一些實(shí)施方案中，制備用于促進(jìn)椎體中的骨形成和預(yù)防或降低椎體壓縮性骨折可能性的組合物的方法進(jìn)一步包括提供：至少一種造影劑，并將所述至少一種造影劑配置在生物相容性基質(zhì)中。在一些實(shí)施方案中，將至少一種造影劑配置在生物相容性基質(zhì)中包括：讓所述至少一種造影劑與PDGF溶液結(jié)合并且用PDGF/造影劑溶液注射入所述生物相容性基質(zhì)。在另一實(shí)施方案中，將至少一種造影劑配置在生物相容性基質(zhì)中包括：讓所述至少一種造影劑與PDGF溶液結(jié)合，并將生物相容性基質(zhì)浸濕在PDGF/造影劑溶液中?；蛘撸谝恍?shí)施方案中，造影劑獨(dú)立于PDGF溶液被配置在生物相容性基質(zhì)中。根據(jù)本發(fā)明某些實(shí)施方案，造影劑有助于將本發(fā)明組合物安置或施用在椎體中及其周圍。按照某些實(shí)施方案，造影劑包括：陽離子造影劑、陰離子造影劑、非離子造影劑或其混合物。在一些實(shí)施方案中，造影劑包括不透射線造影劑。在一些實(shí)施方案中，不透射線造影劑包括含碘化合物，其包括(S)-N，N′-雙[2-羥基-1-(羥甲基)-乙基]-2，4，6-三碘-5-乳酰胺基間苯二甲酰胺(碘帕醇)及其衍生物。進(jìn)一步包含生物活性劑的組合物根據(jù)某些實(shí)施方案，本發(fā)明組合物除PDGF外還可進(jìn)一步包含一種或多種生物活性劑?？杀粨饺氲奖景l(fā)明組合物中的生物活性劑除PDGF外還可包括：有機(jī)分子、無機(jī)材料、蛋白質(zhì)、肽、核酸(例如基因、基因片段、小分子干擾核糖核酸[si-RNA]、基因調(diào)控序列、核轉(zhuǎn)錄因子和反義分子)、核蛋白、多糖(例如肝素)、糖蛋白和脂蛋白?？杀粨饺氲奖景l(fā)明組合物中的生物活性化合物的非限制性實(shí)例包括例如：抗癌藥、抗生素、止痛劑、抗炎藥、免疫抑制劑、酶抑制劑、抗組胺劑、激素、肌肉松弛藥、前列腺素、營養(yǎng)因子、骨誘導(dǎo)蛋白、生長因子和疫苗，它們公開于美國臨時(shí)專利申請順序號(hào)11/159,533(公布號(hào)：20060084602)中。在一些實(shí)施方案中，可被摻入到本發(fā)明組合物中的生物學(xué)活性化合物包括：骨刺激因子(例如胰島素樣生長因子)、成纖維細(xì)胞生長因子或其它PDGF。根據(jù)其它實(shí)施方案，可被摻入到本發(fā)明組合物中的生物學(xué)活性化合物優(yōu)選包括：骨誘導(dǎo)因子和骨刺激因子(例如骨形成蛋白(BMP)、BMP模擬物、降鈣素或降鈣素模擬物)、抑制素、抑制素衍生物、成纖維細(xì)胞生長因子、胰島素樣生長因子、生長分化因子、小分子或Wnt阻斷劑的抗體拮抗劑(例如硬骨素(sclerostin)、DKK、可溶性Wnt受體)和/或甲狀旁腺激素。在一些實(shí)施方案中，因子還包括蛋白酶抑制劑以及降低骨再吸收的骨質(zhì)疏松治療，包括二膦酸鹽、特立帕肽(teriparadide)和NF-kB配體(RANK)配體激活劑受體的抗體。遞送另外的生物活性劑的標(biāo)準(zhǔn)方案和計(jì)劃為本領(lǐng)域所知?？梢砸栽试S遞送適當(dāng)劑量的藥劑到植入位點(diǎn)的量將另外的生物活性劑引入到本發(fā)明組合物中。在大部分情況下，用專業(yè)人員已知并適用于具體討論的藥劑的指導(dǎo)方針來確定劑量。包括在本發(fā)明組合物中的另外的生物活性劑的量可取決于以下變量：病癥的類型和程度、特定患者的總體健康狀態(tài)、生物活性劑的劑型、釋放動(dòng)力學(xué)和生物相容性基質(zhì)的可生物再吸收性。對(duì)于任何特定的另外的生物活性劑，可用標(biāo)準(zhǔn)臨床試驗(yàn)來優(yōu)化劑量和給藥頻率。根據(jù)某些實(shí)施方案，本發(fā)明組合物可進(jìn)一步包含與PDGF一起加入的另外的骨移植材料，包括自體骨髓、自體血小板提取物、同種異體移植物、合成的骨基質(zhì)材料、異種移植物及它們的衍生物。治療椎體的方法在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明提供用于促進(jìn)椎體中的骨形成的方法，該方法包括：提供包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物，和將所述組合物施用給至少一個(gè)椎體。在一些實(shí)施方案中，可將所述組合物施用給多個(gè)椎體。在一些實(shí)施方案中，施用所述組合物包括用所述組合物注射入至少一個(gè)椎體。在一些實(shí)施方案中，將本發(fā)明組合物注射入椎體的松質(zhì)骨中。在一些實(shí)施方案中，椎體包括胸椎體、腰椎體或其組合。在一些實(shí)施方案中，椎體包括頸椎體、尾骨椎體、骶骨或其組合。在另一方面，本發(fā)明提供用于預(yù)防或降低由加固椎骨引起的椎骨壓縮性骨折(包括二次椎骨壓縮性骨折)的可能性的方法。按照本發(fā)明實(shí)施方案，預(yù)防或降低椎骨壓縮性骨折可能性包括：提供配置在生物相容性基質(zhì)中的包含PDGF溶液的組合物，并將該組合物施用給至少一個(gè)椎體。在一些實(shí)施方案中，將所述組合物施用給至少一個(gè)椎體包括將所述組合物注射到至少一個(gè)椎體中。在一些實(shí)施方案中，在對(duì)第一椎體實(shí)施椎體成形術(shù)或椎體后凸成形術(shù)后，將本發(fā)明組合物施用給第二椎體。在一些實(shí)施方案中，所述第二椎體與所述第一椎體相鄰。在其它實(shí)施方案中，所述第二椎體不與所述第一椎體相鄰。在又一實(shí)施方案中，在對(duì)第一椎體實(shí)施椎體成形術(shù)或椎體后凸成形術(shù)后，將本發(fā)明組合物施用給第三椎體。在一些實(shí)施方案中，所述第三椎體與所述第一椎體相鄰。在其它實(shí)施方案中，所述第三椎體不與所述第一椎體相鄰。本發(fā)明實(shí)施方案另外涵蓋在對(duì)第一椎體實(shí)施椎體成形術(shù)或椎體后凸成形術(shù)后，將本文所提供的組合物施用給多個(gè)椎體，包括高危椎體。應(yīng)該理解的是，本文所用第一、第二和第三椎體不是指脊柱的任何特定位置，因?yàn)橛糜谝种谱倒菈嚎s性骨折(包括二次壓縮性骨折)的方法可施用到所有類型的椎體，包括胸椎體、腰椎體、頸椎體、尾骨椎體和骶骨。在一些實(shí)施方案中，用于促進(jìn)椎體中的骨形成和預(yù)防或降低椎體壓縮性骨折的可能性的方法進(jìn)一步包括：提供除了包含配置在生物相容性基質(zhì)中的PDGF溶液的組合物外的另外的至少一種藥物組合物，以及局部和/或全身給予所述至少一種藥物組合物。在一些實(shí)施方案中，所述至少一種藥物組合物包括：維生素(例如維生素D3)、鈣補(bǔ)充劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何破骨細(xì)胞抑制劑(包括二膦酸鹽)。在一些實(shí)施方案中，局部給予所述至少一種藥物組合物。在所述實(shí)施方案中，可將所述至少一種藥物組合物摻入到生物相容性基質(zhì)中，或另外配置在椎體內(nèi)及其周圍。在其它實(shí)施方案中，將所述至少一種藥物組合物全身給予患者。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，將所述至少一種藥物組合物經(jīng)口給予患者。在另一實(shí)施方案中，將所述至少一種藥物組合物靜脈內(nèi)給予患者。以下實(shí)施例用于進(jìn)一步闡明本發(fā)明，然而，其同時(shí)并不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的任何限制。與此相反，應(yīng)該清楚地理解，在閱讀了本文說明之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可自己提出不偏離本發(fā)明精神的不同實(shí)施方案、修改及它們的等同內(nèi)容。實(shí)施例1包含PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)的組合物的制備按照以下方法制備包含PDGF溶液和生物相容性基質(zhì)的組合物。獲得一批預(yù)稱重的包含β-TCP和膠原蛋白的生物相容性基質(zhì)。所述β-TCP包含具有介于約100μm-約300μm平均直徑的β-TCP顆粒。用約20％重量百分比的可溶性牛I型膠原蛋白粘合劑調(diào)配所述β-TCP顆粒。所述β-TCP/膠原蛋白生物相容性基質(zhì)可購自KenseyNash(Exton，Pennsylvania)。獲得包含rhPDGF-BB的溶液。濃度為10mg/ml的乙酸鈉緩沖液中的rhPDGF-BB儲(chǔ)液(即批號(hào)QA2217)購自NovartisCorporation。所述rhPDGF-BB由ChironCorporation在酵母表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn)，與用于產(chǎn)品REGRANEX(Johnson&Johnson)和GEM21S(BioMimeticTherapeutics)中的rhPDGF-BB來源于同一個(gè)生產(chǎn)廠，REGRANEX和GEM21S都已經(jīng)被美國食品藥品管理局核準(zhǔn)用于人。該rhPDGF-BB也被歐盟和加拿大核準(zhǔn)用于人。將所述rhPDGF-BB溶液在乙酸鹽緩沖液中稀釋到0.3mg/ml。按照本發(fā)明實(shí)施方案，rhPDGF-BB溶液可被稀釋到任何需要的濃度，包括1.0mg/ml。使用約3ml的rhPDGF-BB溶液和約1g干重的β-TCP/膠原蛋白生物相容性基質(zhì)比例來制備組合物。在制備組合物過程中，用注射器將rhPDGF-BB溶液注射生物相容性基質(zhì)上，讓得到的組合物混合為糊狀，置于注射器中用于隨后注射到椎體中。實(shí)施例2抑制二次椎骨壓縮性骨折的方法實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和概述該預(yù)期的隨機(jī)、對(duì)照、單中心臨床試驗(yàn)是用來評(píng)估包含配置在磷酸三鈣基質(zhì)中PDGF溶液的組合物用于抑制在椎骨壓縮性骨折椎體后凸成形術(shù)時(shí)的高危椎體(FFVB)中的二次壓縮性骨折的功效。在用β-磷酸三鈣+rhPDGF-BB組合物治療的椎體和未治療的椎體之間進(jìn)行比較。本研究為初步臨床試驗(yàn)(pilotclinicaltrial)，以支持β-TCP+rh-PDGF-BB通過提高HVB骨形成來防止或降低二次椎骨壓縮性骨折可能性的證據(jù)或原理。本研究在總共達(dá)10名在椎體后凸成形術(shù)時(shí)需要預(yù)防性治療HVB的患者中進(jìn)行。篩選潛在患者以確定他們是否滿足入組標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)。如果達(dá)到了所有的入組標(biāo)準(zhǔn)，則邀請?jiān)摑撛诨颊邊⑴c臨床試驗(yàn)。在篩查記錄表上記錄所有被考慮編入本研究的患者，并記錄排除的原因。所有患者都接受過椎體后凸成形術(shù)，并且沒有與在本研究中被治療的兩個(gè)椎體相鄰的VCF癥狀。若外科醫(yī)生在手術(shù)時(shí)確定骨折未滿足骨折入組標(biāo)準(zhǔn)或存在不在該治療方案中治療的其它骨折，則受治療對(duì)象將不會(huì)被編入本研究。在本研究中共登記并治療10名患者。用按本文實(shí)施例1制備的3.0mlβ-TCP+0.3mg/mlrhPDGF-BB組合物注射與各患者椎體后凸成形術(shù)椎體相鄰的第一椎體。不治療與椎體后凸成形術(shù)椎體相鄰的第二椎體并作為對(duì)照。被治療的椎體可位于椎體后凸成形術(shù)椎體的頭部或尾部，其隨機(jī)確定。按標(biāo)準(zhǔn)方案治療患者，并隨訪其椎體后凸成形術(shù)/椎體成形術(shù)情況。由外科醫(yī)生在7-14天和在6、12、24和52周對(duì)各患者進(jìn)行臨床、X射線成像和定量計(jì)算體層攝影術(shù)(QCT)檢查。記錄所有非處方藥和處方藥的使用。由不知道患者治療分組安排的獨(dú)立的放療師進(jìn)行QCT分析以評(píng)定骨密度。記錄并分析這些測量結(jié)果。所有術(shù)后并發(fā)癥和與器械有關(guān)的不良事件(device-relatedadverseevent)都記錄在合適的病例報(bào)告表格中。若受治療者在研究期間隨后罹患VCF，或因嚴(yán)重不良事件而接受另外的手術(shù)，或去除研究器械(investigationaldevice)，則監(jiān)測該受治療者的安全直到研究結(jié)束。對(duì)重新接受手術(shù)和/或去除骨折固定器械(fracturefixationhardware)的受治療者要求同意為組織學(xué)目的檢查外植體。在12個(gè)月的試驗(yàn)期間，監(jiān)測所有患者，對(duì)任何要求退出研究或被研究者要求退出研究的受治療者要求提供中止研究的理由。表1提供本研究的時(shí)間表概要。表1-研究時(shí)間表調(diào)查第一終點(diǎn)是在手術(shù)后12周由QCT掃描測量的骨密度。第二終點(diǎn)包括受治療者疼痛和生活質(zhì)量評(píng)估。手術(shù)方案在滿足入組和排除標(biāo)準(zhǔn)的患者被編入研究后，對(duì)其進(jìn)行以下手術(shù)方案。以標(biāo)準(zhǔn)方式將患者送入手術(shù)室(OR)，使用標(biāo)準(zhǔn)方法用丙烯酸甲酯粘固劑實(shí)施椎體后凸成形術(shù)來增強(qiáng)骨折的椎體。對(duì)用椎體后凸成形術(shù)和用預(yù)防性骨增強(qiáng)治療來治療的椎體拍攝標(biāo)準(zhǔn)X光照片。在椎體后凸成形術(shù)治療后，研究人員界定并確定預(yù)防性骨增強(qiáng)治療的兩個(gè)節(jié)段。如果根據(jù)在手術(shù)時(shí)確定的兩個(gè)(2)椎體被界定為不適合用于治療，則該患者被認(rèn)作篩查失敗并且不編入該研究中。一旦鑒定了兩個(gè)HVB，研究人員就請求打開隨機(jī)選擇代碼(randomizationcode)確定給予的研究治療。隨機(jī)選擇代碼指定相對(duì)于用椎體后凸成形術(shù)治療的節(jié)段近端或遠(yuǎn)端的用β-TCP+rhPDGF組合物的治療。其它HVB仍不治療。按照實(shí)施例1提供的方法混合β-TCP+rhPDGF組合物。混合后馬上將糊狀物裝入注射器用于無菌技術(shù)注射。在β-TCP+rhPDGF組合物混合后，臨床醫(yī)生等待約10分鐘后開始植入。每次混合使用新的無菌混合器械(刮鏟)。研究人員指揮實(shí)施混合的助手記錄植入的組合物的累積的量以及未植入的組合物的殘留量。用定性相對(duì)測量值(1/3、2/3、全部)計(jì)算組合物的量并記錄。將自CardinalHealthofDublin，Ohio獲得的8-16規(guī)針通過椎弓根外入路(extrapedicularapproach)插入到需要預(yù)防性治療的椎體。金屬絲穿過針，而針穿過金屬絲上的管心針(stylet)。將合適的混合制劑注射到受治療者的椎體中。應(yīng)該小心操作以使?jié)B漏到椎體外的糊狀物最少。按照本發(fā)明實(shí)施方案，造影劑可有助于鑒定滲漏到椎體外的糊狀物。圖1闡明注射器和相關(guān)器械，它們刺入到覆蓋在椎體外面的組織以遞送本發(fā)明組合物到椎體。圖2為闡明根據(jù)一個(gè)實(shí)施方案將本發(fā)明組合物注射到L3椎骨的椎體的X光照片。移走器械。使用徹底沖洗和標(biāo)準(zhǔn)傷口縫合技術(shù)。隨訪評(píng)價(jià)在手術(shù)后7-14天和第6(±3天)、12(±7天)、24(±7天)和52(±14天)周觀察患者進(jìn)行術(shù)后評(píng)價(jià)。在隨訪期內(nèi)實(shí)施常規(guī)評(píng)價(jià)和程序，如下表2中的研究流程圖所示。表2-研究流程圖和隨訪評(píng)估1.在任何研究特定程序之前必須進(jìn)行2.按照標(biāo)準(zhǔn)方案實(shí)施定量計(jì)算機(jī)體層攝影術(shù)(QCT)以獲得BMD數(shù)據(jù)，由指定的肌骨骼放療師進(jìn)行測定。功效評(píng)估從本研究收集關(guān)于來源于X光照片、QCT和直接功能檢查的研究結(jié)果的結(jié)果數(shù)據(jù)。這些測量結(jié)果的時(shí)間表在表3中提供。表3-X光照片和功能評(píng)估頻率與未治療的椎體相比，用β-TCP+rhPDGF組合物注射的椎體預(yù)期顯示骨無機(jī)質(zhì)密度(BMD)增加。椎體中骨無機(jī)質(zhì)密度的增加可使得椎體對(duì)由椎體后凸成形術(shù)/椎體成形術(shù)手術(shù)后誘導(dǎo)的骨折(包括二次骨折)較不易感。實(shí)施例3抑制骨質(zhì)疏松個(gè)體中的椎骨壓縮性骨折的方法抑制骨質(zhì)疏松個(gè)體中的椎骨壓縮性骨折的方法包括：通過用包含配置在生物相容性基質(zhì)(例如β-磷酸三鈣)中的PDGF溶液的組合物治療來促進(jìn)椎體中的骨形成按照實(shí)施例1提供的方法混合本發(fā)明組合物。在PDGF溶液中的PDGF濃度介于0.3mg/ml-1.0mg/ml之間?；旌虾罅⒓磳⒔M合物裝入到注射器中用于無菌技術(shù)注射。外科醫(yī)生等待約10分鐘后進(jìn)行植入。每次混合使用新的無菌混合器械(刮鏟)。將針通過椎弓根外入路插入到需要預(yù)防性治療的椎體。在一些實(shí)施方案中，需要預(yù)防性治療的椎體包括含椎體T5到T12和L1到L4在內(nèi)的高危椎體。金屬絲穿過針，而針穿過金屬絲上的管心針。將混合好的組合物注射到受治療者的椎體中。小心操作以使?jié)B漏到椎體外的糊狀物最少。按照本實(shí)施例來治療多個(gè)椎體。接受該治療的骨質(zhì)疏松患者比未治療的骨質(zhì)疏松患者具有更低的椎骨壓縮性骨折發(fā)生率。實(shí)施例4rh-PDGF-BB聯(lián)合膠原蛋白/β-磷酸三鈣基質(zhì)在兔脊柱旁植入模型中的長期安全性評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和概述本研究評(píng)價(jià)在與兔脊骨相鄰的脊柱旁肌內(nèi)位點(diǎn)植入可注射rhPDGF-BB/膠原蛋白/β-TCP材料的安全性。觀察動(dòng)物的神經(jīng)毒性病征情況，對(duì)植入位點(diǎn)連同相鄰的椎體和脊髓進(jìn)行組織學(xué)檢查，以記錄組織對(duì)所述材料所起的特異性反應(yīng)。研究方案和動(dòng)物飼養(yǎng)經(jīng)過當(dāng)?shù)豂ACUC批準(zhǔn)，并且按照AAALAC指南進(jìn)行。將重量≥2.5kg的十二只(12)首次用于試驗(yàn)的雌性白化變種新西蘭兔分為4組：0.3mg/mlPDGF；1.0mg/mlPDGF；橡膠；或乙酸鹽緩沖液。PDGF治療的兔接受0.2cc適當(dāng)濃縮的基質(zhì)中的rhPDGF-BB植入物，該植入物被注射到與L4-L5椎體相鄰的1cm的右脊柱旁肌肉袋(pocket)中，同時(shí)在同一動(dòng)物的靠近L2-L3的左脊柱旁肌肉內(nèi)以類似的切口植入高密度聚乙烯(HDPE)。乙酸鈉緩沖液組中的兔接受代替PDGF+基質(zhì)植入物的乙酸鈉緩沖液，而橡膠組的兔僅在右脊柱旁肌肉接受橡膠。在手術(shù)后29、90和180天處死每一組中的一只兔。在研究期間于手術(shù)前和手術(shù)后每2周一次測量體重。在手術(shù)前、手術(shù)后立即和臨處死前拍攝X光照片。在手術(shù)期間和研究結(jié)束時(shí)對(duì)手術(shù)位點(diǎn)進(jìn)行數(shù)碼照相。每周一次記錄植入位點(diǎn)的臨床觀察結(jié)果，觀察內(nèi)容為紅斑、水腫和發(fā)炎病征及神經(jīng)毒性病征，例如行走變化。在尸體剖檢時(shí)，一起收獲各植入位點(diǎn)連同相鄰的椎體和脊髓，用福爾馬林固定，并制備用于脫鈣石蠟包埋組織學(xué)分析。材料在本研究中試驗(yàn)的rhPDGF-BB劑量包括在20mM乙酸鈉緩沖液(pH6.0+/-0.5)中的0.3mg/ml和1.0mg/mlrhPDGF-BB?；|(zhì)材料由20％冷凍的牛I型膠原蛋白和80％含100-300μm粒徑的β-TCP(KenseyNashCorporation)組成。陰性對(duì)照材料由高密度聚乙烯(HDPE)組成，陽性對(duì)照材料由黑橡膠組成。在臨手術(shù)前以3∶1的液體/團(tuán)決比讓rhPDGF-BB和對(duì)照溶液與基質(zhì)材料混合。簡言之，讓PDGF溶液浸透所述材料約2分鐘，然后手工混合約3分鐘以產(chǎn)糊狀稠度。通過從質(zhì)量相近的樣品洗脫P(yáng)DGF然后由ELISA(R&DSystems)定量測定PDGF，來證實(shí)用該混合技術(shù)使rhPDGF-BB在整個(gè)混合材料中均勻分布情況。結(jié)果在手動(dòng)混合0.3mg/mlrhPDGF-BB與膠原蛋白/β-TCP基質(zhì)后，證實(shí)在各樣品之間rhPDGF-BB在整個(gè)混合材料中的均勻性的誤差在+/-4％內(nèi)。所有動(dòng)物都從手術(shù)中恢復(fù)，在記錄過程中所有臨床觀察結(jié)果都報(bào)告為正常，在手術(shù)位點(diǎn)無神經(jīng)毒性或異常傷口愈合病征。用乙酸鈉緩沖液和基質(zhì)對(duì)照治療的兩種動(dòng)物在完全愈合的手術(shù)傷口處結(jié)了小痂。一只接受0.3mg/mlrhPDGF-BB的動(dòng)物在手術(shù)后3-4天在手術(shù)位點(diǎn)處顯示輕微紅斑，隨后恢復(fù)正常外貌。手術(shù)后29天在試驗(yàn)物植入位點(diǎn)處的組織學(xué)分析表明適量的組織生長到植入的試驗(yàn)材料中并有輕微的炎癥反應(yīng)。在與植入位點(diǎn)相鄰的椎體處未觀察到異位骨或異常骨的形成。這些發(fā)現(xiàn)概述在表4中，并與陰性對(duì)照HDPE植入位點(diǎn)的評(píng)級(jí)進(jìn)行了比較。表4-手術(shù)后29天植入位點(diǎn)處組織學(xué)檢查結(jié)果概述NC＝陰性對(duì)照；MGC＝多核巨噬細(xì)胞；生物反應(yīng)性等級(jí)：0＝無，1＝微量/輕微，2＝適度，3＝中等，4＝顯著/嚴(yán)重從本研究中得到的基于臨床觀察結(jié)果的初步證據(jù)提示，膠原蛋白/β-磷酸三鈣與1.0mg/ml、0.3mg/mlrhPDGF-BB或乙酸鈉緩沖液聯(lián)合不引起任何急性或慢性神經(jīng)毒性作用。手術(shù)后29天對(duì)植入位點(diǎn)的組織學(xué)評(píng)估表明，有正常且預(yù)期適量的組織生長到植入的材料中，并有輕微的炎癥反應(yīng)。在任何植入位點(diǎn)未觀察到異位骨形成、外生骨疣或異常骨再吸收?；趯?duì)在本研究中治療的動(dòng)物的觀察結(jié)果，膠原蛋白/β-磷酸三鈣聯(lián)合1.0mg/ml、0.3mg/mlrhPDGF-BB在接近脊柱處注射時(shí)是使用安全的。實(shí)施例5PDGF-BB聯(lián)合牛I型膠原蛋白/β-TCP基質(zhì)對(duì)椎骨治療的安全性評(píng)價(jià)本研究評(píng)價(jià)用于骨增強(qiáng)的包含與生物相容性基質(zhì)(包含β-磷酸三鈣和I型膠原蛋白)聯(lián)合的rhPDGF-BB的組合物在注射到狒狒椎體后的安全性。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)研究了總共6只18-21歲的雌性狒狒(獵神狒狒(Papioanubis))，將每只狒狒分配到表5提供的2個(gè)治療組中。研究期間用X光照相術(shù)、定量計(jì)算機(jī)體層攝影術(shù)(QCT)、磁共振成像(MRI)技術(shù)、末端組織學(xué)(terminalhistology)和非GLP微計(jì)算體層攝影術(shù)(顯微CT)給動(dòng)物成像并分析。在每只動(dòng)物中研究了四個(gè)椎骨節(jié)段(T12、L2、L4和L6)。I組的每只動(dòng)物接受注射約0.5cc的1.0mg/mlrhPDGF-BB+膠原蛋白/β-TCP(基質(zhì))組合物到T12、L2和L4椎體的每一個(gè)中。1.0mg/mlrhPDGF-BB+膠原蛋白/β-TCP(基質(zhì))組合物如上文實(shí)施例1中所示來制備。II組的每只動(dòng)物接受注射約0.5cc的乙酸鈉緩沖液+膠原蛋白/β-TCP(基質(zhì))組合物到T12、L2和L4椎體的每一個(gè)中。I組和II組動(dòng)物各另外接受注射約0.5cc的乙酸鈉緩沖液到L6椎體中。因此，每只動(dòng)物共有四(4)個(gè)椎體接受了注射。圖3概述本研究的注射策略。每只動(dòng)物的治療情況記錄在研究表格中。用經(jīng)皮熒光鏡透視檢查指導(dǎo)的方法進(jìn)行手術(shù)。除了注射可注射的1.0mg/mlrhPDGF-BB+膠原蛋白/β-TCP基質(zhì)或適當(dāng)?shù)膶?duì)照治療外，該程序與椎體成形術(shù)相似地進(jìn)行。將約0.5cc的rhPDGF-BB+膠原蛋白/β-TCP材料、對(duì)照材料或緩沖液如上所述注射到每個(gè)椎體。手術(shù)期間為每只動(dòng)物提供麻醉。表5-在狒狒椎體中注射rhPDGF-BB+膠原蛋白/β-TCP基質(zhì)的治療概述A.分配給藥組通過經(jīng)設(shè)計(jì)的手冊計(jì)劃將三只動(dòng)物分配到治療組以達(dá)到相近的組平均體重。B.分配手術(shù)日期將動(dòng)物分配到兩個(gè)手術(shù)日期之一(第I日期或第II日期)。對(duì)每一只動(dòng)物通過擲硬幣決定分配在第I日期組還是第II日期組。繼續(xù)該分組直到各日期排滿了3只動(dòng)物。記錄動(dòng)物數(shù)量、其給藥分組和手術(shù)日期。研究監(jiān)控者和研究指導(dǎo)者知道動(dòng)物治療組。放療師和組織病理學(xué)家不知道治療組。C.體內(nèi)觀察和測量臨床觀察在整個(gè)研究期間每天觀察處于其籠內(nèi)的動(dòng)物。在確定預(yù)選標(biāo)準(zhǔn)后開始記錄籠邊觀察結(jié)果，一直到研究結(jié)束。觀察每只動(dòng)物的總體外觀和行為變化，包括行走變化。在整個(gè)研究期間觀察每只動(dòng)物的月經(jīng)周期跡象。進(jìn)行非GLP的周期評(píng)估(cyclingreading)并記錄在美國西南生物醫(yī)藥研究基金會(huì)(SouthwestFoundationforBiomedicalResearch，SFBR)動(dòng)物數(shù)據(jù)庫中。按照SFBR標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)處理動(dòng)物，該操作規(guī)程符合美國農(nóng)業(yè)部動(dòng)物福利法(9CFR，第1、2和3部分)中概述的規(guī)章和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)和使用指南(ILARpublication，1996，NationalAcademyPress)中指定的條件。觀察研究動(dòng)物并對(duì)疾病或困擾病征(包括行走變化)每天記錄至少一次，將任何這樣的觀察結(jié)果報(bào)告給可信賴的獸醫(yī)和研究指導(dǎo)者。體重在開始的健康檢查、手術(shù)前和進(jìn)行隨訪X光照相術(shù)前測量體重。在其鎮(zhèn)靜之前停止喂食，隨后測量體重。食物消耗除了在研究過程中禁食外，每天評(píng)定每只動(dòng)物食物消耗的質(zhì)量(作為籠邊觀察結(jié)果的一部分)，在手術(shù)前至少7天開始。每天一次(在非鎮(zhèn)靜日期中)為每只動(dòng)物提供豐富的食物供給，按SFBRSOP來記錄消耗量。在鎮(zhèn)靜日期中，當(dāng)動(dòng)物從麻醉中恢復(fù)時(shí)每天飼喂一次。D.熒光鏡透視檢查、照相術(shù)、X光照相術(shù)、MRI和QCT成像在手術(shù)前、手術(shù)后立即和手術(shù)后的1、3、6和9個(gè)月對(duì)注射位點(diǎn)拍攝非GLP數(shù)碼照片。在治療前和手術(shù)后以及手術(shù)后的約1、3、6和9個(gè)月拍攝前后位及側(cè)面X光照片。對(duì)于前后位X光照片，讓動(dòng)物背朝上，支撐其四肢。對(duì)于側(cè)面X光照片，讓動(dòng)物左側(cè)面臥下，支撐其四肢。記錄對(duì)各位置和動(dòng)物的能量(kV)和明暗度(mA)設(shè)置。在將試驗(yàn)品和對(duì)照品注射到動(dòng)物椎骨之前、期間和之后的手術(shù)期間拍攝非GLP熒光X線照片。熒光X線照片不能作為本研究的結(jié)果來評(píng)估，但能使外科醫(yī)生在手術(shù)期間準(zhǔn)確將引導(dǎo)針插入到椎體。進(jìn)行磁共振成像(MRI)以在手術(shù)前和手術(shù)后4-10天內(nèi)給每只動(dòng)物的脊骨成像?？闪硗庠谑中g(shù)后約1、3、6和9個(gè)月時(shí)進(jìn)行MRI給每只動(dòng)物的脊骨成像。MRI段(session)由T1和T2加權(quán)掃描組成?？蛇M(jìn)行定量計(jì)算機(jī)體層攝影術(shù)(QCT)以在手術(shù)前和手術(shù)后4-10天內(nèi)給每只動(dòng)物的脊骨成像。可另外在手術(shù)后約1、3、6和9個(gè)月時(shí)進(jìn)行QCT給每只動(dòng)物的脊骨成像。掃描由從第11節(jié)胸椎骨的尾部終板到骶骨的顱終板的軀干的一系列鄰近的橫截面薄片組成。還在手術(shù)前1周(手術(shù)前)及手術(shù)后1、4和12周時(shí)，用QCT獲得每只狒狒的被注射的椎體和中間的未治療椎體的3mm厚橫截面圖像。對(duì)每一椎體完全成像需要總共5-8個(gè)薄片。改變由QCT產(chǎn)生的DICOM(醫(yī)學(xué)數(shù)字成像和通信標(biāo)準(zhǔn))格式圖像，用由ScancoAG(Bassersdorf，Switzerland)開發(fā)的軟件轉(zhuǎn)換為三維體積分析的文件格式。通過在每一薄片中手動(dòng)選擇將皮質(zhì)骨殼(corticalshell)排除在外的目標(biāo)區(qū)域(ROI)，來測定每一椎體的前室(anteriorcompartment)的體積骨無機(jī)質(zhì)密度(vBMD)。評(píng)估軟件創(chuàng)建各個(gè)切片和ROI的z-stack，隨后求體積ROI的根并計(jì)算來自圖像中灰度的任意單位的體積密度，并且計(jì)算相對(duì)于基線掃描的百分比變化。使用用Tukey事后檢驗(yàn)(Tukey′spost-hoctest)的單向重復(fù)測量ANOVA，來測定I組和II組動(dòng)物從手術(shù)前或手術(shù)后1周到研究結(jié)束時(shí)的vBMD的任何統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性變化的存在情況。由合資格的臨床放療師和一名勝任的合作人評(píng)估X光照片、MRI和QCT圖像，以提供關(guān)于由所述椎骨治療產(chǎn)生的神經(jīng)病理學(xué)、骨病理學(xué)和周圍軟組織病理學(xué)結(jié)果的一致性評(píng)估。該評(píng)價(jià)由對(duì)關(guān)于骨異常、神經(jīng)組織異常和相鄰周圍軟組織異常的每一圖像的定性檢查組成。放療師遵循放療學(xué)評(píng)估方案以評(píng)估放射學(xué)數(shù)據(jù)。E.臨床病理學(xué)評(píng)價(jià)血清化學(xué)在手術(shù)前和手術(shù)后將約3ml全血收集到無抗凝血?jiǎng)┑娜萜髦?。此外，在手術(shù)后約1、3、6和9個(gè)月將約3ml全血收集到無抗凝血?jiǎng)┑娜萜髦?。在采集用于血清化學(xué)的血液之前讓動(dòng)物過夜禁食。根據(jù)表6中所示的參數(shù)對(duì)血清進(jìn)行分析。表6-血清分析血液學(xué)在手術(shù)前和手術(shù)后將約3ml血液收集到含有EDTA的試管中。此外，在手術(shù)后約1、3、6和9個(gè)月將約3ml血液收集到含有EDTA的試管中。根據(jù)表7中所示的參數(shù)對(duì)全血樣品進(jìn)行分析。表7-血液分析紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù)血細(xì)胞平均血紅蛋白量(MCH)白細(xì)胞(WBC)(總的和分化的*)血細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)血紅蛋白濃度平均血細(xì)胞體積(MCV)血細(xì)胞比容血小板計(jì)數(shù)(Plt)RDW異常血細(xì)胞形態(tài)*包括多區(qū)段嗜中性粒細(xì)胞(polysegmentedneutrophil)、桿狀核嗜中性細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞。由主持者或SFBR采集用于分析的血清在手術(shù)前和手術(shù)后從所有動(dòng)物各采集一次約14ml血液到無添加劑(即“凝血”)的試管中。此外，在手術(shù)后約1、3、6和9個(gè)月從所有動(dòng)物采集約14ml血液到無添加劑(即“凝血”)的試管中。將血液離心得到血清并分為兩等份。將血清儲(chǔ)存在-70℃或更低溫度。解剖病理學(xué)在研究結(jié)束時(shí)將所有動(dòng)物人道處死。對(duì)瀕死狀態(tài)或患病狀態(tài)下處死的每只動(dòng)物進(jìn)行粗略的尸體剖檢，以確定瀕死或患病狀態(tài)的起因和/或特性。尸體剖檢研究期間在研究病理學(xué)家的監(jiān)督下對(duì)瀕死狀態(tài)或患病狀態(tài)下處死的動(dòng)物進(jìn)行全面的尸體剖檢，以確定瀕死或患病狀態(tài)的起因和/或特性。標(biāo)準(zhǔn)尸體剖檢包括：檢查外表面和口、四肢、體腔和內(nèi)部器官/組織。收集所有經(jīng)治療的椎骨，并檢查異常情況。在單獨(dú)的尸體剖檢表格中記錄所有肉眼可見異常的形態(tài)學(xué)簡述。組織采集和保存獲得處死動(dòng)物的以下組織和器官，保存在10％的中性緩沖福爾馬林中(除眼睛外，為了最佳固定將眼睛保存在Bouin液中)。然后為了保存目的將各組織或器官樣品包埋在石蠟中，存檔在主持者同意的地點(diǎn)，或用于幫助確定死亡原因。對(duì)于所有狒狒，單獨(dú)地收獲所有經(jīng)治療的和相鄰未治療的椎骨(T12到L6)，包括脊髓和脊椎管，并根據(jù)所接受的治療進(jìn)行適當(dāng)?shù)蔫b定。通過留下2cm最少量的與骨連接的肋骨來鑒別T12椎體。將所有骨樣品置于福爾馬林固定制劑中用于塑膠包埋。為了保存目的將每個(gè)軟組織或器官樣品包埋在石蠟中并存檔。表8中提供了對(duì)收集的組織樣品的概述。表8-在尸體剖檢時(shí)收集的組織樣品的概述*在常規(guī)組織切片中偶爾沒有甲狀旁腺將無需重新切片。用包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的rhPDGF-BB溶液的組合物注射的椎體，顯示形成正常骨而不存在有害的神經(jīng)毒作用。此外，相鄰于接受包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的rhPDGF-BB溶液組合物的椎體的軟組織并沒有因給予rh-PDGF/基質(zhì)組合物而顯示異常。此外，用包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的rhPDGF-BB溶液的組合物注射的椎體，還顯示增加的體積骨無機(jī)質(zhì)密度。圖4闡明I組和II組動(dòng)物椎體的體積骨無機(jī)質(zhì)密度(vBMD)的百分比變化。圖4中的每個(gè)數(shù)值點(diǎn)代表各組內(nèi)所有被治療的椎體的平均值。例如，圖4中I組的第一數(shù)值點(diǎn)為在將rhPDGF-BB基質(zhì)組合物注射到椎體后測量的9個(gè)椎體(I組中每三只動(dòng)物的T12、L2和L4)的平均值。同樣地，圖4中2組的第一數(shù)值點(diǎn)為在將膠原蛋白/B-TCP基質(zhì)注射到椎體后測量的9個(gè)椎體(II組中每三只動(dòng)物的T12、L2和L4)的平均值。如圖4所示，用包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的rhPDGF-BB溶液的組合物治療的椎體(I組)，顯示在研究過程中穩(wěn)定的vBMD增加，vBMD的增加在手術(shù)后第三個(gè)月的水平相對(duì)于手術(shù)后1周時(shí)間的水平為統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的[2.64％+/-1.16(第1周)對(duì)比5.93％+/-1.33(第12周)；p＝0.023]。vBMD繼續(xù)增加直到研究的第6個(gè)月，隨后在第9個(gè)月達(dá)到穩(wěn)定水平。然而，用包含配置在β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)中的20mM乙酸鈉緩沖液的組合物治療的椎體(組II)，在研究期間并沒有顯示vBMD顯著增加。另外，圖5闡明I組和II組動(dòng)物椎體的vBMD百分比變化，其中從體積骨無機(jī)質(zhì)密度分析中減除注射的β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)。圖5如圖4一樣每個(gè)數(shù)值點(diǎn)代表各組內(nèi)所有被治療的椎體的平均值。如圖5所示，用rhPDGF-BB基質(zhì)組合物(I組)治療的椎體顯示vBMD增加。從體積骨無機(jī)質(zhì)密度分析減除β-TCP/膠原蛋白基質(zhì)清楚地表明，與rhPDGF-BB基質(zhì)組合物注射位點(diǎn)的局部區(qū)域相比，I組椎體的所有區(qū)域的vBMD均增加。以上引用的所有專利、出版物和文摘都在此以其整體引作參考。應(yīng)該理解，前述僅涉及本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案，其中在不偏離以上附加權(quán)利要求所限定的本發(fā)明精神和范圍下可進(jìn)行眾多修改或改變。當(dāng)前第1頁1 2 3