本發(fā)明屬于制藥領(lǐng)域，具體涉及一種(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的制備方法。
背景技術(shù)：
：左旋奧拉西坦化學(xué)名稱為：(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺，為白色微晶狀粉末，熔點135～136℃，旋光度-36°(c＝1.00inwater)，左旋奧拉西坦的溶解性明顯優(yōu)于消旋體。化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下式所示：該藥于1987年在意大利上市，上市的劑型為片劑，800mg；膠囊，800mg；注射液，1g/5ml。目前國內(nèi)只有奧拉西坦膠囊和注射液上市，且所用主要活性成分均為外消旋體。葉雷等在公開號為cn103735545a專利中提到左旋奧拉西坦對酒精中毒所致昏迷的促醒作用明顯，而右旋奧拉西坦基本沒有作用，左旋奧拉西坦的上述促醒效果為消旋奧拉西坦的2倍；左旋奧拉西坦對外傷、麻醉所致昏迷的促醒作用均顯著。張峰等在公開號為cn103599101a的專利中披露左旋奧拉西坦對液壓及自由落體所致創(chuàng)傷性腦損傷大鼠學(xué)習記憶認知功能障礙均有明顯的改善作用，其藥效遠高于右旋奧拉西坦。且200mg/kg左旋奧拉西坦與400mg/kg奧拉西坦的作用相當。藥代動力學(xué)研究結(jié)果顯示：左旋奧拉西坦和右旋奧拉西坦在比格犬體內(nèi)無明顯手性轉(zhuǎn)化。比格犬單次靜脈注射給予左旋和2倍劑量的消旋奧拉西坦后血漿中左旋奧拉西坦的主要藥動學(xué)參數(shù)均無明顯差異。安全藥理、急毒、長毒等試驗結(jié)果表明，在同等劑量水平下，左旋奧拉西坦與奧拉西坦對受試動物或細胞的毒性無明顯差異。上述臨床前的研究結(jié)果表明，左旋奧拉西坦是奧拉西坦體內(nèi)發(fā)揮藥效的主要活性成分，單獨使用本品可降低臨床使用劑量，降低潛在的毒副反應(yīng)。但是，現(xiàn)有的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液在灌裝過程中容易出現(xiàn)泡沫，采用安瓿瓶灌裝，藥液將粘連到瓶口，在安瓿瓶熔封過程中造成藥液碳化使產(chǎn)品可見異物不合格，降低產(chǎn)品收率，同時也增加了患者用藥的未知安全性；采用西林瓶灌裝，溶液粘連到瓶口，容易發(fā)生跳塞的情況，同樣降低了產(chǎn)品收率。另外，現(xiàn)有的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液還存在產(chǎn)品澄清度較差，注射過程疼痛明顯，患者順應(yīng)性差等問題。技術(shù)實現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的制備方法，制備的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液澄清度好、穩(wěn)定性好，藥液不起泡，沒有藥液粘連問題，提高產(chǎn)品收率，并且能減輕患者注射疼痛感，患者順應(yīng)性好。為達到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的制備方法，每ml注射液中含有以下原輔料：(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺180～220mg，依地酸二鈉0.01～0.1mg，羥苯甲酯4～5mg，葡甲胺10～16mg，苯甲醇1～3mg；所述注射液的制備方法包括以下步驟：(1)稱取處方量的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺、依地酸二鈉、羥苯甲酯、葡甲胺和苯甲醇加入注射用水中，攪拌溶解，得濃配液；(2)取步驟(1)得到的濃配液，加入0.1～0.5mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至6.5～7.0；(3)向步驟(2)得到的溶液中加入2～6g/l的殼聚糖，攪拌混勻，靜置30～50min后過濾；(4)向步驟(3)得到的溶液中加入1～3g/l的活性炭，吸附脫色后過濾；(5)將步驟(4)得到的溶液用注射用水定容。進一步，每ml注射液中含有以下原輔料：(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺200mg，依地酸二鈉0.05mg，羥苯甲酯4.5mg，葡甲胺13mg，苯甲醇1.5mg。進一步，所述注射液的制備方法還包括以下步驟：(6)將步驟(5)定容后的溶液檢驗合格后上流水線進行灌裝，灌裝時緩沖儲液罐的位置水平高度比與藥液噴嘴的位置水平高度高10cm～15cm；(7)將灌裝好的安剖半成品送入蒸汽滅菌鍋滅菌。進一步，所述步驟(1)的濃配過程需通氮處理，氮氣流量為0.03～0.08l/min；所述步驟(6)的灌裝過程中緩沖儲液罐需充氮處理，灌裝過程需充入純度99.99％的氮氣使得罐內(nèi)注射用水中的含氧量不超過0.01％。本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明利用羥苯甲酯的消泡作用和依地酸二鈉、葡甲胺的助溶穩(wěn)定作用，制備的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液不起泡，沒有藥液粘連問題，產(chǎn)品收率高，并且配合配液過程中特定的ph調(diào)節(jié)劑以及特定的ph，再配合一定量的殼聚糖處理，顯著提高了注射液的澄清度，制備的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液澄清度低于0.5號標準濁度液，產(chǎn)品穩(wěn)定性好，再加入一定量的苯甲醇，能夠減輕患者注射疼痛感，患者順應(yīng)性好。具體實施方式為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果更加清楚，下面將對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行詳細的描述。實施例1實施例1的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的處方如下表所示：實施例1的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的制備方法，包括以下步驟：(1)稱取處方量的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺、依地酸二鈉、羥苯甲酯、葡甲胺和苯甲醇加入注射用水中，攪拌溶解，得濃配液；濃配過程需通氮處理，氮氣流量為0.03～0.08l/min；(2)取步驟(1)得到的濃配液，加入0.1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至6.5；(3)向步驟(2)得到的溶液中加入2g/l的殼聚糖，攪拌混勻，靜置50min后用0.8μm的濾膜過濾；(4)向步驟(3)得到的溶液中加入1g/l的活性炭，吸附脫色后用0.45μm的濾膜過濾；(5)將步驟(4)得到的溶液用注射用水定容；(6)將步驟(5)定容后的溶液檢驗合格后上流水線進行灌裝，灌裝時緩沖儲液罐的位置水平高度比與藥液噴嘴的位置水平高度高10cm～15cm；灌裝過程中緩沖儲液罐需充氮處理，灌裝過程需充入純度99.99％的氮氣使得罐內(nèi)注射用水中的含氧量不超過0.01％；(7)將灌裝好的安剖半成品送入蒸汽滅菌鍋滅菌，121℃滅菌15min，即得(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液。對比例1對比例1的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液沒有添加羥苯甲酯，其余組分及制備方法與實施例1相同。對比例2對比例2的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液沒有苯甲醇，其余組分及制備方法與實施例1相同。實施例2實施例2的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的處方如下表所示：實施例2的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的制備方法，包括以下步驟：(1)稱取處方量的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺、依地酸二鈉、羥苯甲酯、葡甲胺和苯甲醇加入注射用水中，攪拌溶解，得濃配液；濃配過程需通氮處理，氮氣流量為0.03～0.08l/min；(2)取步驟(1)得到的濃配液，加入0.3mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至6.8；(3)向步驟(2)得到的溶液中加入4g/l的殼聚糖，攪拌混勻，靜置40min后用0.8μm的濾膜過濾；(4)向步驟(3)得到的溶液中加入2g/l的活性炭，吸附脫色后用0.45μm的濾膜過濾；(5)將步驟(4)得到的溶液用注射用水定容；(6)將步驟(5)定容后的溶液檢驗合格后上流水線進行灌裝，灌裝時緩沖儲液罐的位置水平高度比與藥液噴嘴的位置水平高度高10cm～15cm；灌裝過程中緩沖儲液罐需充氮處理，灌裝過程需充入純度99.99％的氮氣使得罐內(nèi)注射用水中的含氧量不超過0.01％；(7)將灌裝好的安剖半成品送入蒸汽滅菌鍋滅菌，121℃滅菌15min，即得(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液。對比例3對比例3的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液沒有添加羥苯甲酯，其余組分及制備方法與實施例2相同。對比例4對比例4的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液沒有苯甲醇，其余組分及制備方法與實施例2相同。實施例3實施例3的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的處方如下表所示：實施例3的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液的制備方法，包括以下步驟：(1)稱取處方量的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺、依地酸二鈉、羥苯甲酯、葡甲胺和苯甲醇加入注射用水中，攪拌溶解，得濃配液；濃配過程需通氮處理，氮氣流量為0.03～0.08l/min；(2)取步驟(1)得到的濃配液，加入0.5mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值至7.0；(3)向步驟(2)得到的溶液中加入6g/l的殼聚糖，攪拌混勻，靜置30min后用0.8μm的濾膜過濾；(4)向步驟(3)得到的溶液中加入3g/l的活性炭，吸附脫色后用0.45μm的濾膜過濾；(5)將步驟(4)得到的溶液用注射用水定容；(6)將步驟(5)定容后的溶液檢驗合格后上流水線進行灌裝，灌裝時緩沖儲液罐的位置水平高度比與藥液噴嘴的位置水平高度高10cm～15cm；灌裝過程中緩沖儲液罐需充氮處理，灌裝過程需充入純度99.99％的氮氣使得罐內(nèi)注射用水中的含氧量不超過0.01％；(7)將灌裝好的安剖半成品送入蒸汽滅菌鍋滅菌，121℃滅菌15min，即得(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液。對比例5對比例5的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液沒有添加羥苯甲酯，其余組分及制備方法與實施例3相同。對比例6對比例6的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液沒有苯甲醇，其余組分及制備方法與實施例3相同。對比例7對比例7的步驟(2)以碳酸氫鈉作為ph調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)ph值，其余組分及制備方法與實施例1相同。對比例8對比例8的步驟(2)調(diào)節(jié)ph值至6.0，其余組分及制備方法與實施例1相同。對比例9對比例9的步驟(2)調(diào)節(jié)ph值至7.5，其余組分及制備方法與實施例1相同。對比例10對比例10沒有步驟(3)添加殼聚糖處理，其余組分及制備方法與實施例1相同。一、長期試驗考察：將實施例1-3制得的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液按上市包裝，置長期留樣箱中，一定時間取樣，對考察項目進行檢驗。長期試驗溫度：20±2℃，濕度：rh60％±10％，考察時間：0、12、24月，考察指標：外觀性狀、可見異物、ph、有關(guān)物質(zhì)、含量。長期試驗穩(wěn)定性記錄：由長期試驗考察結(jié)果可知，實施例1-3制得的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液產(chǎn)品穩(wěn)定性好，有效期長，產(chǎn)品雜質(zhì)少，各項指標符合生產(chǎn)要求。二、收率計算：計算實施例1-3和對比例1、3、5的產(chǎn)品收率，結(jié)果如下：實施例1實施例2實施例3對比例1對比例3對比例5理論產(chǎn)量(瓶)200200200200200200實際產(chǎn)量(瓶)168166165128133131收率(％)848382.56466.565.5由收率計算結(jié)果可知，由于對比例在灌裝過程有藥液粘連在安瓿瓶口，導(dǎo)致安瓿瓶高溫熔封時，粘連在瓶口的藥液碳化而使注射液可見異物不合格，降低了產(chǎn)品收率；而實施例由于藥液不起泡，不存在粘連安瓿瓶口的情況，其收率得到了大幅度的提高。三、澄清度對比試驗：按照2010年版藥典附錄ixb澄清度檢查法，檢驗實施例1和對比例7-10的澄清度，結(jié)果如下：檢驗樣品結(jié)果實施例1＜0.5標準濁度液對比例70.5標準濁度液＜澄清度＜1.0標準濁度液對比例80.5標準濁度液＜澄清度＜1.0標準濁度液對比例90.5標準濁度液＜澄清度＜1.0標準濁度液對比例10＞1.0標準濁度液由澄清度對比試驗結(jié)果可知，實施例1配液過程中特定的ph調(diào)節(jié)劑以及特定的ph值，再配合一定量的殼聚糖處理，顯著提高了注射液的澄清度，制備的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液澄清度低于0.5號標準濁度液。四、疼痛感對比試驗：取小白鼠，皮下注射(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺注射液，觀察小白鼠是否會發(fā)生扭體反應(yīng)，根據(jù)小鼠發(fā)生扭體反應(yīng)的幾率來判斷注射過程中疼痛感的強弱，實施例1-3和對比例2、4、6的注射液樣品各重復(fù)30次試驗；結(jié)果如下：實驗樣本(小鼠)發(fā)生扭體反應(yīng)個體數(shù)扭體反應(yīng)發(fā)生率實施例130只5只16.7％對比例230只21只70.0％實施例230只7只23.3％對比例430只20只66.7％實施例330只6只20.0％對比例630只21只70.0％由疼痛感對比試驗結(jié)果可知，實施例1-3的(s)-4-羥基-2-氧代-1-吡咯烷乙酰胺由于加入了一定量的苯甲醇，注射過程中的疼痛感明顯弱于對比例。最后說明的是，以上優(yōu)選實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管通過上述優(yōu)選實施例已經(jīng)對本發(fā)明進行了詳細的描述，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以在形式上和細節(jié)上對其作出各種各樣的改變，而不偏離本發(fā)明權(quán)利要求書所限定的范圍。當前第1頁12